Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
PRACTICA N° 8
Sin embargo, el empleo alternativo de cualquiera de estas técnicas requiere en primer lugar
establecer el protocolo de trabajo considerando las características de la proteína materia del
análisis.
OBJETIVOS
MATERIALES
I. Método de Lowry
Reactivos (ml) B 1 2 3
Agua destilada 0,5 0,4 0,3 0,2
Ovoalbúmina 0,2 mg/ml --- 0,1 0,2 0,3
Solución alcalina 2 2 2 2
Temperatura Ambiente 15 minutos
Reactivos (ml) B 1 2 3
Ovoalbúmina 0,2 mg/ml --- 0,1 0,2 0,3
Reactivo Bradford 1 1 1 1
Temperatura Ambiente 45 minutos
Reactivos (ml) B 1 2 3
Agua destilada 1 0,6 0,2 ---
Ovoalbúmina 2 mg/ml --- 0,4 0,8 1
Reactivo Biuret 2 2 2 2
Temperatura Ambiente 20 minutos
Reactivos (ml) B 1 2 3
Agua destilada 3 2,8 2,6 2,2
Ovoalbúmina 1 mg/ml --- 0,2 0,4 0,8
Lectura de Absorbancia a 280 nm
1. De un extracto proteico se toma 0,4 ml para realizar una cuantificación por el método de
Biuret, obteniéndose una absorbancia a 550 nm de 0,285. Sabiendo que el Factor de
calibración es de 0,079. Calcule la concentración de proteína de dicho extracto.
2. Se toman 350 μl de una solución de proteína a fin de cuantificarla por el método de Lowry
cuyo Factor de calibración es de 5 y se obtiene una transmitancia a 660 nm de 48%.
Sabiendo que el extracto inicial contiene 12 ml. Determine la cantidad total de proteína.
FLM