EXTRACCIÓN DE ADN

Practica nº 7
Autores:
Sergio Javier Cárdenas Martínez Código: 20172185047
Correo: serginocxd@gmail.com
Edwin Rafael Guzman Linares Código: 20172180024
Correo: edwin00guzman@gmail.com
Junior Alejandro Chacon Salazar Código: 20172180050
Correo: juniorAlejandro908@gmail.com
Camilo Moreno Arenales Código: 20172180068
Correo: bento.jcm@gmail.com
Lugar dónde se realizó la prueba: Laboratorio de Biología de la Universidad Distrital Francisco
José de Caldas.
Dirección: Carrera 5 este nº 15-82.

Resumen
El ADN es una macromolécula química, ésta pertenece al grupo de los ácidos nucleicos.
Forma los cromosomas del núcleo presentes en las células y es portador de la información
genética de cada individuo. El código genético (formado por el ADN) es un lenguaje basado
en combinaciones que se pueden formar a partir de la guanina, timina, citosina y adenina,
uracilo en el de timina en el ADN. (cualquier característica biológica está determinada por su
orden y forman un triplete) cada triplete es una palabra cifrada o señal que conduce a un
aminoácido. Este constituye el material genético de los organismos y es el componente
químico principal presente en las células tanto animales como vegetales controlando todos
los procesos vitales que en ella acontecen. Por otra parte, la separación de éste es un proceso
de métodos que intervienen en procesos naturales provocando lisis o separación del mismo
de la estructura celular y de moléculas presentes en el sistema, liberando, por último dicha
estructura. Estas disgregaciones se inducen a partir de diferentes sustancias a las cuales
nombraremos.

Palabras clave: Separación, ADN, macromolécula, estructura

Abstract
DNA is a chemical macromolecule, belongs to the group of nucleic acids. Form of the
chromosomes of the nucleus present in the cells and in the carrier of the genetic information
of each individual. The genetic code is a language based on the combinations that can be
formed from guanine, thymine, cytosine and adenine, uracil in the thymine in DNA. Each
feature is an encrypted word or signal that leads to an amino acid. This is the genetic material
of organisms and the main chemical component present in both animal and plant cells
controlling all vital processes that occur. On the other hand, the separation of this is a process
of communication media of the media causing the separation of the same from the cellular
structure and the elements present in the system, finally releasing said structure.

Key words:
Separation, DNA, macromolecule, structure

Introducción
Todo organismo vivo está formado por la ampliamente estudiada y conocida
molécula de DNA. Sabemos que los organismos vivos provienen de una única célula
ancestral llamada LUCA. Este hecho nos indica que entre organismos vivos compartimos
mucho más de lo que a veces nos podríamos llegar a imaginar. Por ejemplo, los humanos
compartimos el 50% del DNA con el plátano. Sin embargo, el porcentaje de DNA que
compartimos depende de cómo se mida. Si medimos secuencias idénticas de pares de
bases, entonces es bastante bajo, pero si nos fijamos en los genes con funciones idénticas o
similares entonces es de hecho el 50 %. Algunas de las cosas para las que estos genes
codifican son de bioquímica básica: la replicación del DNA, la transcripción, la traducción, el
metabolismo del DNA (recombinación , reparación), el metabolismo de la célula (catabolismo
y anabolismo) y la regulación del ciclo celular (mitosis). Este tipo de genes son nombrados
por los biólogos como “secuencias conservadas” (Laura M. 2015)
Para poder estudiar esta molécula con detalle se precisa generalmente su aislamiento de la
célula, y para ello es necesario un conjunto de material e instrumentos de laboratorio
complejos. Lo que este experimento pretende es un acercamiento simple y sencillo a la
técnica de extracción de DNA mediante una practica simple y sencilla de realizar.

Materiales y Procedimientos.

Materiales.

50 gramos de hígado de res, varilla de vidrio, mortero, vaso precipitado, pipeta, probeta,
isopropanol, cloruro de sodio 2M, champú transparente, arena, tela para filtrar, papel
periódico, cebolla cabezona, papayuela, 50 ml de solución NaCl, colador, papel absorbente,
2 frascos de compota, isopropanol o alcohol etílico al 96°, vaso desechable, gotero, gradilla,
agua destilada.

Procedimientos.

Extracción de ADN de las células de cebolla.

macerar la papayuela con ayuda del mortero y agregue 5 ml de agua destilada, con ayuda de
la gasa filtre las pepas y los excesos de pulpa, agregar en el vaso precipitado 2 ml de extracto
de papayuela, en el otro mortero macerar a cebolla cabezona en 50 ml de NaCl , con ayuda
de la gasa filtrar, en el vaso precipitado agregar 50 ml de extracto de cebolla, dejar en baño
de maría 10 minutos a una temperatura de 80°. Retire del baño de maría y agregue 50 ml de
isopropanol por las paredes del vaso precipitado. observe y analice.

Extracción de ADN en las células de hígado.

macerar el hígado con ayuda del motero ir agregando agua destilada y arena para romper las
membranas y queden los núcleos sueltos, macerar hasta que quede una papilla. con ayuda
de la gasa filtrar varias veces para retirar las membranas y la arena, con ayuda de la probeta
medir el volumen del filtrado agregar añadir la misma cantidad de volumen de cloruro de sodio
2M añadir una gota del champú transparente, trasvasar en el vaso precipitado la mezcla y
agregar por las paredes del mismo 50 ml de alcohol, para que se formen dos capas, en la
interfase se va a precipitar el ADN.Introduzca la varilla de vidrio y revolver en una dirección
para que se adhieran las fibras de blancas resultado de la agrupación de muchas cadenas
de ADN.
Extracción de ADN propio.

Se introdujo agua a la boca de uno de los integrantes del grupo de laboratorio he hizo circular
el agua de un lado a otro por un minuto. Posteriormente se depositó el agua en un vaso de
precipitado para luego pasar una parte al tubo de ensayo anteriormente rotulado, acto seguido
se agregan 2 ml de shampoo (previamente diluido en agua) al tubo de ensayo y se tapa
herméticamente con el dedo, se voltea y regresa 10 veces a su posición original muy
lentamente. Se deja reposar por 10 minutos en la gradilla.Transcurrido el tiempo, se vierte
poco a poco en el tubo de ensayo 3 ml de alcohol para precipitar el ADN, se deja reposar 3
minutos. Por último se trata de recuperar las hebras de ADN con el agitador para observar.

Resultados

Extracción de ADN de las células de cebolla. (Gráfico 1)

Extracción de ADN en las células de hígado. (Gráfico 2)
Extracción de ADN propio. (Gráfico 3)

Análisis de resultados

Extracción de ADN de las células de Bos primigenius taurus

La extracción de ADN se realiza aprovechando las propiedades fisicoquímicas de la molécula.

La trituración del tejido bien sea de origen animal o vegetal se hace debido a que expone en
mayor manera las células y los componentes de los tejidos, posteriormente se macera para
romper las membranas dejando expuestos los núcleos, ya que este está compuesto por una
membrana lipídica apolar se mezcla con champú para que al reaccionar se rompa esta
membrana liberando de manera definitiva el ADN de las células. Aprovechando la extrema
polaridad del grupo fosfato se añade cloruro de sodio, para en cierta manera estabilizar la
molécula, el etanol aplicado es para poder precipitar el ADN “En presencia del etanol, se
rompe la capa hidratante que bordea la molécula gracias al carácter hidrofílico de los grupos
fosfato, permitiendo que el catión Na+ reduzca las fuerzas repulsivas entre las cadenas de
nucleótidos contribuyendo a su precipitación” (Velázquez, Martínez, Romero s.f) Esta
reducción de las fuerzas repulsivas del ADN permite que este se pliegue sobre sí mismo para
posterior precipitación.

Extracción de ADN de las células de Allium cepa (cebolla) y ADN de Homo Sapiens

La papayuela se caracteriza por contener de manera abundante una enzima proteica

denominada papaína (Látex de la papaya verde), con el uso de esta para la extracción de
ADN se garantiza una reducción en los costos. Para exponer esta enzima se trituró la pulpa
de la fruta permitiendo la degradación de lípidos (principales componentes de la membrana
celular y nuclear) al añadir los tejidos de la cebolla junto con el Cloruro de Sodio se produjo
una lisis de las distintas membranas permitiendo que los grupos fosfato del ADN hicieran
contacto con el NaCl, el aumento de temperatura se debe a que la actividad enzimática de la
papaína es relativamente alto (65ºc) de esta manera y con la introducción del isopropanol se
logró evidenciar las cadenas de ADN presentes en las células de la cebolla, a modo de
suspensión en el tubo de ensayo.
En el procedimiento de la extracción de ADN propio se evidencia la misma estructura fibrilar
anteriormente descrita en el procedimiento de la cebolla, partiendo del mismo principio de
quebramiento de la membrana con el champú, y precipitación del mismo con el alcohol.

Conclusiones
- La coloración más común de las fibras visibles de ADN es blanca.

- La extracción de ADN en tejido animal requiere de un factor externo (granos de arena)

para lograr el rompimiento adecuado de las membranas, caso opuesto al del tejido
vegetal.

Bibliografía

- Velázquez, L. P., Martínez, M. d., & Romero, A. C. (s.f). Extracción y purificación de

ADN. México .
- Laura Martinez. Extraccion de ADN (Abril 2015) recuperado de:
http://genetica.uab.cat/base/documents/genetica_gen/Laura%20Mart%C3%ADnez%
20Mart%C3%ADn2015_4_19P21_19.pdf
- Isabel Cristina Cadavid Sánchez , Doris Amanda Rosero García. Comparacion de
metodos de extraccion de ADN. (noviembre 20 del 2013). Recuperado de:
http://www.scielo.org.co/pdf/biote/v15n2/v15n2a21.pdf