EJERCICIOS CINÉTICA ENZIMÁTICA

1. Esquematiza la siguiente información:

La ureasa cataliza la hidrólisis de la urea a amoniaco y CO2. A 295 K, la reacción sin catalizar tiene
una energía de activación de aproximadamente 125 kJ/mol, mientras que en presencia de ureasa
la energía de activación se reduce a 46 kJ/mol.

2. Esquematice la relación que existe entre Km, [S] y Vmáx

3. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para una reacción catalizada por
una enzima hipotética con:

[S] V
(moles/L) (moles Producto/min*mg proteína)
5x10-2 0.25
5x10-3 0.25
5x10-4 0.25
5x10-5 0.20
5x10-6 0.071
5x10-7 0.0096

a) Obtener los valores de los parámetros cinéticos KM y Vmáx, por el método gráfico de Michaelis-
Menten y el de dobles inversos.
b) Calcular el número de recambio o constante catalítica (kcat). Es la relación: mol de Producto
formado/mol de enzima por unidad de tiempo. Las unidades son seg-1.

Cambio y eliminación de unidades:

𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑃𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜 1000𝑚𝑔 𝑔 1𝑚𝑜𝑙 1 𝑚𝑖𝑛

𝑉𝑚á𝑥 [ ]∗ ∗ 𝑃𝑀𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 𝑒𝑛 [ ]∗ ∗
𝑚𝑖𝑛 ∗ 𝑚𝑔𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 1000𝑚𝑚𝑜𝑙 60 𝑠𝑒𝑔

c) Calcular la eficiencia catalítica kcat/KM [seg-1M-1]

d) Por qué la Vo permanece constante a una [S] > 5x10-4 M
e) Calcula Vo para las [S] de 5x10-6 M y 5x10-1 M

4. La penicilasa es una enzima presente en algunas bacterias resistentes a la penicilina, la cual

hidrolizada a dicho compuesto inactivándola. El peso molecular de este enzima en Staphylococcus
aureus es de 29.6 kDa (29.6 g/mol). Se midió la cantidad de penicilina hidrolizada por minuto en
una solución que contiene 10-9 g de penicilasa purificada y los datos obtenidos se muestran a
continuación:

[Penicilina] moles Penicilina hidrolizada/min*mg proteína

M
0.1 x 10-5 0.1x10-9
0.3 x 10-5 0.25 x10-9
0.5 x 10-5 0.34 x10-9
1 x 10-5 0.45 x10-9
 3 x 10-5 0.58 x10-9
5 x 10-5 0.61 x10-9

a) Obtener los valores de los parámetros cinéticos KM y Vmáx, emplenado los modelos
matemáticos de Michaelis-Menten y de dobles inversos.
b) Calcular el número de recambio (kcat)
c) Calcular la eficiencia catalítica (kcat/KM)

5. El silicato inhibe la acción catalítica de la glutamato deshidrogenasa. Determinar el tipo de

inhibición mediante el análisis gráfico de los siguientes datos, utilizando el grafico de Michaelis-
Menten y el de dobles inversos.

[S] mM mg Producto/min mg Producto/min

(sin silicato) (con silicato)
1.5 0.21 0.08
2.0 0.25 0.10
3.0 0.28 0.12
4.0 0.33 0.13
8.0 0.44 0.16
16.0 0.40 0.18

6. A partir de los siguientes datos de una reacción enzimática, determinar el tipo de inhibición, la
Km y la Ki, así como la Vmáx correspondiente.

[S] mM mg Producto/h mg Producto/min

(sin inhibidor) (con 6 mM de
inhibidor)
2.0 139 88
3.0 179 121
4.0 213 149
10.0 313 257
15.0 370 313

7. A partir de los siguientes datos de una reacción enzimática, determinar el tipo de inhibición.
Determinar la Km y Ki, así como la Vmáx correspondiente.

[S] M Vo (mol/min) Vo (mol/min)

1x10-5 sin inhibidor con inhibidor
0.3 10.4 2.1
0.5 14.5 2.9
1.0 22.5 4.5
3.0 33.8 6.8
9.0 40.5 8.1