cuantificables y confiables de una gran hicieron su aparición alrededor de 1830; variedad de especímenes biológicos. Al pero la aberración esférica, también margen de estos avances, las bases del producía una imagen desenfocada. En 1886, funcionamiento de los distintos tipos de Ernot Abbe y Caol Zeiss en Alemania microscopios ópticos siguen siendo los fabricaron unas lentes apocromáticas que mismos que se presentan en esta práctica y corrigieron ambas aberraciones. A finales del con los cuales el estudiante deberá siglo XIX, los microscopios comenzaron a familiarizarse. adquirir la forma que tienen actualmente, con los aportes de Khöler. Desde el año 1900, los microscopios se han modificado BREVE HISTORIA DEL MICROSCOPIO poco en sus principios fundamentales, pero Tres eminentes holandeses, Antón Van mucho en sus detalles. Estos Leeuwenhoek, Hans y Zaccharias Janssen, perfeccionamientos incluyen, la fabricantes de lentes, contribuyeron al incorporación de varios objetivos, cada uno desarrollo de la microscopía. El museo de de aumento diferente y roscado a un tambor Middleburg, en Holanda, conserva uno de los giratorio o revolver. En 1935, Frizt Zenique primeros microscopios conocidos, invento la técnica de contraste de fase que probablemente fabricado por uno de los hace posible la observación de especímenes hermanos Janssen. Estos aparatos, eran antes invisibles. El microscopio electrónico, extremadamente simples, por lo que solo desarrollado en vísperas de la segunda permitían el examen de cuerpos opacos. A guerra mundial, ha sido de gran utilidad para fines del siglo XVII el italiano Camping el estudio de moléculas química, virus y construyó un microscopio que hizo posible la organelas celulares. Existe un tipo de observación de preparaciones transparentes. microscopio electrónico, llamado de barrido, Las imágenes obtenidas por estos que ha adquirido una extraordinaria utilidad, microscopios eran muy deficientes. En ya que ofrece representaciones Inglaterra el científico Robert Hooke, trató tridimensionales muy reales de las células y de construir lentes más eficaces, pero sus las estructuras celulares. resultados no fueron satisfactorios; sin 1.1 OBJETIVOS: embargo, sus observaciones contribuyeron al 1.1.1 OBJETIVO GENERAL: establecimiento de la microscopía como • Valorar la importancia del microscopio ciencia. Mientras, en el siglo XVII Jonh como instrumento básico para el estudio e Marshall y otros fabricantes de microscopios, investigación en las Ciencias Biológicas. perfeccionaron mucho el diseño mecánico, pero no la calidad de los lentes. Pero fue, 1.1.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS: durante el siglo XIX, que se realizaron • Identificar las diferentes partes que grandes progresos en los sistemas ópticos y constituyen el microscopio y reconocer las en la microscopía en general; aun así, fue funciones de cada una de ellas imposible evitar la dispersión de la luz en sus • Adquirir habilidad en el uso y manejo colores componentes en la fabricación de correcto del microscopio, siguiendo las microscopios. Este fenómeno conocido como indicaciones de las guías de laboratorio. aberración cromática, producía una imagen borrosa y coloreada. Las primeras lentes 1.2 MATERIALES Microscopios Porta-objetos y cubre-objetos Papel limpia lentes (papel de arroz) Goteros o Pipetas Pasteur Hilos de lana y algodón Flores con polen Agua de charca Partes de insecto Pinzas de disección
Figura No.1.1 Microscopio Óptico
1.3 CLASES DE MICROSCOPIOS:
Para observar imágenes de las diferentes Existen dos tipos de microscopios: simples y partes del microscopio haz click aquí compuestos Microscopios simples: c. Tubo del Ocular: Está colocado en la Consta de un solo sistema de lente parte superior del microscopio, donde están Microscopios compuestos acoplados los oculares, que pueden tener Constan de dos (2) sistemas de lentes: el movimiento vertical, con ayuda de una objetivo y el ocular. El microscopio cremallera sobre la columna. En algunos compuesto es un instrumento que aumenta microscopios el tubo ocular es inclinado y se considerablemente la imagen de los mantiene fijo, en este caso se mueve la objetivos que en él se observan. Entre las platina. variedades de éste microscopio d. Revólver o Disco Giratorio: Está encontramos el electrónico y el fotónico u debajo del tubo ocular donde están óptico. Este último tipo de microscopio está acoplados los objetivos, presenta formado por una parte mecánica y una parte movimiento giratorio para facilitar el cambio óptica. (Figura No.1.1) de un objetivo a otro. Parte Mecánica: e. Platina: Es una placa que puede ser cuadrada, circular o rectangular, con un a. Pie o Base: Generalmente en forma de orificio central que permite el paso de la luz herradura o rectangular, es el apoyo de las a través de ella. Su función es sostener las demás piezas del microscopio. El pie debe placas con los preparados biológicos que se ser sólido y pesado para asegurar su van a observar. estabilidad. b. Columna o Brazo: Este elemento f. Carro: Es un dispositivo ubicado sobre la relaciona el tubo del microscopio con el pie; platina, cuya función es sujetar y mover la sostiene la platina y el condensador y de ella placa que se va a estudiar. Posee dos se agarrará el microscopio cuando se tornillos que permiten movimientos traslada durante los trabajos. En algunos horizontales y verticales (hacia adelante, microscopios la columna es móvil. hacia atrás, hacia la izquierda y hacia la derecha) del portaobjetos. Cuando la platina carece del anterior dispositivo, lleva dos soportes para fijar las placas llamadas corrige adicionando al preparado unas ganchos o uñas. gotas de aceite de cedro (aceite de g. Mecanismos de Movimiento: Está inmersión) cuyo índice de refracción integrado por el tornillo Macrométrico y el 1.515, es próximo al cristal. Este aceite Micrométrico. también reduce o suprime por Tornillo Macrométrico: Acerca o aleja completo la refracción de los rayos de rápidamente el objetivo del preparado a luz provenientes de la fuente luminosa. observar; su función es lograr un enfoque más o menos claro o aproximado del objeto. Tornillo Micrométrico: Acerca o aleja el objetivo del preparado, pero lentamente, casi imperceptiblemente, permite desplazamientos muy finos de la platina o del tubo del ocular. Durante la observación y enfoque este tornillo debe estarse moviendo permanentemente; su función es darle nitidez al enfoque. Figura No. 1.2 Especificaciones de los objetivos. Parte óptica: Esta integrada por los objetivos, oculares y b. Ocular: Están colocados en la parte el aparato de iluminación (espejo, superior del tubo ocular. Está formado por diafragma, condensador y filtros). Estos dos sistemas de lentes dispuestos en un elementos son los que permiten la cilindro. Su finalidad es aumentar la imagen iluminación, ampliación y la visión dada por el objetivo y eventualmente aumentada del objetivo. corregir algunos defectos de la misma. a. Objetivo: Es la pieza más importante Reciben dicho nombre porque son las lentes del microscopio. Ellos se acoplan que se encuentran más cerca del ojo. Hay mediante roscas estándar al revólver y oculares de 3.5x; 5x; 6.3x; 10x; 12.5x; 15x; pueden ser cambiados de posición con 20x y 25x. El aumento de la imagen de un sólo rotarlos. Reciben el nombre de objeto observado a través de un objetivos porque son los lentes que microscopio, se calcula multiplicando el están más cerca del objeto. La mayoría número de aumento del objetivo con el cual de los microscopios tienen tres o cuatro se está trabajando por el número de objetivos. Las lentes de los objetivos aumento del ocular que se está utilizando. son de aumentos diversos, los más c. Aparato de iluminación: Está conformado usados son: Objetivos de pequeños por la fuente de luz, el diafragma, el aumentos 3.5x; 4x, 5x, 6x, 8x y 10x; condensador y los filtros. objetivos de grandes aumentos 40x, d. Fuente de Luz: Puede ser natural o 45x, 50x y objetivos de inmersión 90x, artificial, cuando es natural (solar) o procede 95x y 100x. Las lentes de inmersión se de un foco luminoso situado fuera del emplean con aceite de cedro para microscopio, un espejo recoge la luz del conectar la lente frontal (lente inferior medio y la refleja a través del objeto y del del objetivo) al porta-objeto. Entre el sistema de lentes. La luz artificial la objetivo y el objeto se produce una constituye un bombillo en el microscopio y pérdida de luz por reflexión que se conectado a un circuito eléctrico de bajo la onda y su color depende de la longitud de voltaje. ésta. La luz blanca está constituida por una gama de colores del espectro visible, estos e. Diafragma: Está ubicado entre la fuente colores son: rojo, anaranjado, amarillo, de luz y el condensador, inmediatamente verde, azul y violeta. Cada color corresponde debajo de la platina, su función es regular la a una longitud de onda determinada, por intensidad de luz que atraviesa el objeto. El consiguiente, la luz blanca se compone de diafragma tiene una palanquita que al muchos rayos de luz, todos vibrando con moverla hacia adelante o hacia atrás diferentes longitudes de onda. (Figuras 1.3 y agranda o achica el orificio central, dejando 1.4) pasar mayor o menor cantidad de luz respectivamente. f. Condensador: Es un elemento cónico que posee un sistema de dos lentes convergentes que recogen o concretan los rayos luminosos para enviarlos al objetivo por el agujero de la platina. Existe un tornillo manual que permite graduar la altura del condensador. Esta graduación es importante cuando se trabaja con objetivos de gran aumento (40x y 100x), debido a que en la medida que se trabaja con estos objetivos el Fig. No. 1.3 Naturaleza ondulatoria de la luz condensador debe subirse. Lo contrario La luz de una sola longitud de onda se llama sucede cuando se trabaja con objetivos de monocromática. Si bien se utilizan casi solo menor aumento (4x y 10x). microscopios de luz blanca, la mayoría de las g. Filtros: Entre la fuente de luz y el lentes modernas están diseñadas para el uso condensador de algunos microscopios existe de luz monocromática verde. un portafiltros en el cual se pueden colocar filtros a voluntad del observador. Los filtros son elementos de cuarzo o de vidrio, pueden ser de color azul, amarillo o verde. Ellos interceptan el haz de rayos luminosos antes de entrar al condensador, esto se hace con el objeto de seleccionar un tipo de luz determinada para una experiencia dada. Para observar imágenes de filtros haz click aquí
1.4 LA LUZ: La luz es una forma de energía
transportada continuamente por el espacio Fig. No. 1.4 Espectro de luz visible. a velocidades muy elevadas (330.000 Km/s en el vacío). La luz está formada por 1.5 LENTES: pequeños corpúsculos que salen de un foco Las lentes son el componente más luminoso en forma de ondas. El brillo de la importante del microscopio; se fabrican de luz es proporcional a la altura o amplitud de vidrio u otros materiales transparentes. Pueden ser convexas o cóncavas en ambas sobrante usando papel absorbente o papel superficies, planas en una cara o tener toalla. La preparación queda así lista para la cualquier combinación de éstas dos formas observación. Estas preparaciones son de en su superficie. Las lentes son de dos tipos: corta duración porque se secan positivas y negativas. rápidamente; para hacerlas más duraderas Lentes Positivas: Hacen converger los rayos debe cerrarse herméticamente los bordes de luz, es decir, los concentra para formar del cubre objeto; la duración de ésta una imagen real. preparación no es indefinida. Los bordes se pueden cerrar con vaselina o esmalte. Un Lentes Negativas: Hacen divergir los rayos cierre más hermético se consigue cerrando de luz, sin formar ninguna imagen real. con bálsamo de Canadá (Euparal). Las 1.6 PREPARACIONES preparaciones en seco como lo índica su MICROSCÓPICAS: nombre, se hacen para observar objetos Debemos tener en cuenta que a través del secos, tales como alas de insectos. Aquí se microscopio solamente se pueden observar utiliza goma arábiga, la cual se extiende objetos que dejan pasar rayos de luz, por sobre el porta, luego se deposita el objeto esta razón el preparado debe ser lo más sobre la superficie y se deja endurecer la delgado y transparente posible, pues un goma. Una vez endurecida la goma se pone preparado grueso solo nos permite observar un poco de bálsamo de Canadá sobre el una mancha negra. Los detalles solo se objeto y se coloca el cubre-objeto. observan si la preparación es lo suficientemente delgada para que sea transparente con la luz que recibe. Para realizar preparaciones microscópicas la porta y la cubre-objetos deben limpiarse antes de usarse. Un buen método es guardarlos en alcohol y antes de utilizarlos secarlos con un Fig. No. 1.5 Preparaciones Acuosas paño limpio y libre de grasa. Los cubre- objetos deben limpiarse con mucho cuidado 1.7 COLORANTES: porque son frágiles. Las preparaciones Los colorantes son sales compuestas por un microscópicas pueden ser acuosas o en seco. ácido y una base. Se clasifican en ácidos, Las preparaciones acuosas son las más básicos y neutros, según la parte de los simples y fáciles usadas para examinar mismos que imparta el color. En los cualquier objeto fluido, como agua de colorantes ácidos el grupo cromóforo, el que estanque o sangre. Se deposita una gotita del imparte el color, es el componente ácido, el líquido que se desea observar en el centro componente básico es incoloro. Lo contrario del porta-objeto, se coloca el cubre-objeto sucede con los colorantes básicos. Los sobre el porta, forme con las dos láminas un colorantes neutros tienen coloreado el ángulo de 45 grados y luego deje caer componente ácido y el básico. La mayoría de suavemente la laminilla (cubre-objeto) sobre los colorantes son sintéticos, aunque se el preparado, evitando la formación de emplean todavía algunos naturales. La burbujas. El líquido no debe rebosar los hematoxilina y el carmín son los colorantes bordes del cubre-objeto, en caso de que naturales más importantes para la tinción de suceda seque cuidadosamente el líquido tejidos. El carmín es producido por la conchinilla (Coccus cacti). La hematoxilina se 4. Mire a través del ocular o gire el espejo extrae de la madera de un árbol de México, hacia la fuente de luz hasta obtener un el palo Campeche. Otro colorante es la máximo de iluminación. Si el campo visual no orceína que se extrae de líquenes. Existen queda uniformemente iluminado, baje tres técnicas de tinción de uso general: la lentamente el condensador hasta obtener coloración seca o de tejidos muertos, la una iluminación uniforme. Si su microscopio coloración vital o de tejidos vivos y la es eléctrico siga los pasos 1, 2 y 3. Enchufe el histoquímica, en la cual se utilizan las cable del transformador a la fuente de reacciones de los colores para hacer visible energía. Conecte el cable del microscopio al los elementos estructurales de las células y transformador y luego accione el botón de de los tejidos. Una reacción histoquímica este para que encienda la bombilla. Mire por muy conocida es la de Feulgen, en la que se el ocular. emplea el reactivo incoloro de Schiff para 5. Una vez lograda una correcta iluminación teñir el DNA en tonos rojizos purpúreos. coloque el preparado sobre la platina. Mirando de lado, asegúrese que el objeto a observar esté centrado justo debajo del objetivo de menor aumento. 6. Mirando a través del ocular mueva suavemente el tornillo Macrométrico, si el objeto esta bien centrado aparecerá su imagen en el campo visual. Dele nitidez al enfoque accionando el tornillo micrométrico. Mueva el carro en diferentes direcciones para seleccionar el mejor campo posible. Fig. No. 1.6 Colorantes. Puede controlar la intensidad de la luz, mediante el diafragma o el regulador de la 1.8 MANEJO DEL MICROSCOPIO: intensidad de la luz de la bombilla. Para Antes de iniciar una observación hacer un mayor enfoque con mayor aumento microscópica se debe iluminar debe seguir las indicaciones anteriores. Una completamente el campo visual, para lo cual vez obtenido el enfoque correcto con menor se procede de la siguiente manera: aumento, mueva el revolver y coloque en 1. Gire el revólver hasta que el objetivo de posición de trabajo el objetivo de mayor menor aumento quede en posición de aumento. Si su microscopio esta bien trabajo, o sea que quede alineado con los calibrado debe aparecer enfocada la imagen oculares. Usted sentirá un golpecito (como del objeto. Este enfoque se refina un clic) cuando el objetivo llegue a su accionando el tornillo micrométrico. Cuando posición de uso. el microscopio es monocular debe 2. Lleve el condensador a su posición más acostumbrarse a mantener también abierto alta. el ojo que no utilice en la observación 3. Accione el tornillo macrométrico hasta microscópica, esto le evita cansancio. que el objetivo de menor aumento descienda lo máximo posible o hasta que la mesa 1.9 RECOMENDACIONES QUE DEBEN ascienda lo máximo posible, según sea el TENERSE EN CUENTA PARA EL BUEN modelo del microscopio. Esta operación se USO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO: hace llegar hasta un punto de parada (tope). 1. El microscopio es un instrumento costoso Con las siguientes prácticas se ejercitará y de precisión, con muchas partes delicadas, inicialmente al estudiante en el uso y manejo por lo tanto, debemos darle le mejor cuidado del microscopio. Con las siguientes prácticas posible. se ejercitará inicialmente al estudiante en el 2. Si su microscopio presenta algún defecto, uso y manejo del microscopio. consulte con su Profesor o Técnico de Laboratorio. No trate de arreglarlo Usted. 1. Fibra de lana o algodón: Coloca varias 3. Las lentes del microscopio cuestan casi fibras de lana o algodón de diferentes tanto como todas las demás partes juntas. colores sobre un portaobjetos, coloque el Mantenga las lentes limpias. No toque las cubre-objetos, enfoque con menor y lentes con los dedos, debido a que el sudor mayor aumento. Esquematice sus las daña. Nunca limpie las lentes con otra observaciones cosa que no sea papel especial para lentes. 4. No permita que líquidos, especialmente ácidos o alcoholes, se pongan en contacto 2. Granos de polen: con su microscopio. Coloque los granos de polen del estigma de 5. Use siempre cobre-objetos cuando una flor en un porta-objetos, luego con observe en agua u otros líquidos. ayuda de un gotero ponga una gota de agua, 6. Localice siempre el objeto con el objetivo ubique el cubre-objetos y observe con menor de menor aumento. y mayor aumento. Haga un esquema de lo 7. Los sedimentos de grasa, el aceite de observado. inmersión y los residuos de estos productos deben eliminarse inmediatamente con un 3. Agua de charca: poco de disolvente como éter o xilol. Nunca Con ayuda de una pipeta Pasteur, tomar una debe emplearse alcohol, debido a que o dos gotas del agua de charca y colocarla en disuelve el cemento utilizado en la la porta-objeto, luego ubique el cubre-objeto fabricación de los lentes. La limpieza final es y observe con menor y mayor aumento. más efectiva usando un poco de agua Esquematice lo observado destilada. 8. Cuando no se esté usando el microscopio, 4. Insecto: debe mantenerse siempre cubierto con una Tome la parte del insecto que desee funda. observar (pata, cabeza, torso, etc.) con ayuda 9. Al finalizar sus actividades de laboratorio, de la pinza de disección, colóquela en la tenga en cuenta lo siguiente: porta-objeto y se le adiciona una o dos gotas 9.1 Antes de apagar la fuente de luz, llevar el de Bálsamo de Canadá, ubique encima el dispositivo que regula la intensidad luminosa cubre-objeto y observe con menor y mayor a cero. aumento. Realice esquemas de lo observado. 9.2 Dejar el microscopio con el objetivo de menor aumento en la posición de enfoque y la platina en su máxima posición superior. 3.0 CUESTIONARIO: 9.3 Desenchufar el microscopio y colocarle la 1. Coloque los nombres a las diferentes funda protectora. partes del microscopio numeradas en la figura No. 1.6 e investigue las funciones de 2.0 EJERCICIO DE APLICACIÓN: cada una de ellas. 2. ¿Qué otros tipos de microscopios se Es una plataforma horizontal con un utilizan en la investigación biológica? orificio central, sobre el que se coloca la 3. ¿Qué son objetivos secos? preparación, que permite el paso de los 4. ¿Qué son objetivos de inmersión? rayos procedentes de la fuente de 5. ¿Para qué se utiliza el aceite de cedro iluminación situada por debajo. cuando usamos el objetivo de inmersión? 1.1.7 CONDENSADOR: Cuando se utiliza un microscopio de espejo: Lente que concentra los rayos luminosos 6. ¿Qué importancia tiene utilizar la parte sobre la preparación. cóncava del espejo? 1.1.8 FUENTE DE ILUMINACIO: 7. ¿Qué importancia tiene utilizar la parte Se trata de una lámpara halógena de plana del espejo? intensidad graduable. Está situada en el pie 8. Investigue sobre en funcionamiento de los del microscopio, se enciende y se apaga con diferentes microscopios electrónicos y un interruptor y en su superficie externa establezca diferencias entre ellos. puede tener una especia de anillo para 9. Describa las principales técnicas de colocar filtros que facilitan la visualización. preparación de muestras empleadas en 1.1.9 TORNILLOS MACRO Y microscopía óptica. MICROMETRICOS: 10. ¿Qué son los colores complementarios y Son tornillos de enfoque, mueven la que utilidad tendrían en microscopía óptica? platina o el tubo hacia arriba y hacia abajo. El macrometro permite desplazamientos amplios para un 4.0 RESPUESTAS: enfoque inicial y el micrómetro, PARTES DEL MICROSCOPIO. desplazamientos muy cortos, para el 1.1 PIE O BASE: enfoque más preciso. Sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para darle TIPOS DE MICROSCOPIOS estabilidad al aparato. 1.1.2 COLUMNA O BRAZO: MICROSCOPIOS SEGÚN SU Es una columna perpendicular al pie. ILUMINACION. 2.1 MICROSCOPIO OPTICO: Puede ser arqueado o vertical une al En el microscopio óptico la muestra es pie con el tubo. iluminada mediante luz visible. Esto 1.1.3 TUBO: significa que existe un foco de luz Tiene como función soportar los apuntando hacia la muestra. Esa misma oculares. luz es conducida a través del objetivo y 1.1.4 OCULAR: del ocular hasta llegar a formar la Lente situada cerca del ojo del imagen en el ojo del observador. Este es observador. Capta y amplía la imagen el tipo de microscopio más habitual pero formada en los objetivos. su resolución está limitada por la 1.1.5 OBJETIVO: difracción de la luz. El aumento Lente situada en el revólver. Amplía la máximo que se puede obtener con este imagen, es un elemento vital que tipo de microscopio alcanza alrededor permite ver a través de los oculares. de 1500x. 1.1.6 PLATINA: 2.1.1 MICROSCOPIO ELECTRONICO: La ventaja principal de este tipo de de la muestra. Este microscopio permite microscopio es que puede obtenerse un observar sustancias que emiten luz nivel de aumento muy superior al del propia cuando son iluminadas con resto de microscopios. Sin embargo, es una longitud de onda determinada. Para necesario preparar la muestra y ello la muestra es habitualmente colocarla en una cámara de vacío de iluminada con una lámpara xenón o con modo que no es posible observar una lámpara de vapor de mercurio. muestras biológicas vivas. Los dos tipos Estos microscopios incorporan además de microscopio electrónicos principales filtros de luz para aislar la luz son el microscopio electrónico de correspondiente a la muestra. barrido y el microscopio electrónico de transmisión. MICROSCOPIOS SEGÚN SUS LENTES 2.1.2 MICROSCOPIO DE ULTRAVIOLETA: 2.1.5 MICROSCOPIO SIMPLE: Los microscopios de luz Este tipo de microscopio dispone de una ultravioleta iluminan la muestra, como única lente y es más habitualmente el nombre indica, con luz ultravioleta. conocido como lupa. Aun así, con un Este tipo de luz tiene una longitud de microscopio simple pueden conseguirse onda más corta que la luz visible grandes aumentos. Hay que destacar utilizada en los microscopios ópticos. La que durante el siglo XVII, Antonie van ventaja principal de utilizar esta técnica Leeuwenhoek utilizó este tipo de es que puede alcanzarse una resolución microscopios para conseguir el mayor mejor que con luz visible. Además, el aumento alcanzado hasta el momento. contraste obtenido en la muestra es A día de hoy, uno de los conceptos distinto que en los microscopios ópticos. basados en la misma idea es De este modo, con el microscopio de luz el Foldscope. ultravioleta pueden observar muestras 2.1.6 MICROSCOPIO COMPUESTO: que aparecen transparentes si son Este tipo de microscopio es aquel que observadas con luz visible. dispone de por lo menos dos lentes. Este 2.1.3 MICROSCOPIO DE LUZ es el caso más habitual en todos los POLARIZADA: microscopios modernos. Normalmente También conocido como microscopio los microscopios disponen de distintas petrográfico. Este microscopio es en lentes tanto en el objetivo como en el realidad un tipo de microscopio óptico al ocular para corregir las aberraciones que se la han añadido dos polarizadores. ópticas y alcanzar una imagen con buena Esto significa que la onda de luz utilizada calidad. La invención del microscopio para observar la muestra tiene una esa asociada con la invención del dirección de oscilación concreta. Este microscopio compuesto. Este apareció tipo de microscopio es muy útil para en los países bajos a finales de siglo XVI. observar estructuras cristalinas de rocas y minerales. 2.1.4 MICROSCOPIO DE FLUORESENCIA: MICROSCOPIO SEGÚN SU Los microscopios de fluorescencia son TRANSMICION DE LUZ: aquellos que utilizan las propiedades de fluorescencia para generar una imagen 2.1.7 MICROSCOPIO DE LUZ incómodo si tiene que utilizarse durante TRANSMITIDA: largos periodos de tiempo. Por este En este tipo de microscopio la luz motivo los microscopios monoculares no atraviesa la muestra. Para esta clase de son en general utilizados en ámbitos microscopios es necesario preparar la profesionales. muestra cortándola en láminas muy 2.2.1 MICROSCOPIO BINOCULAR: finas. La muestra se ilumina desde Los microscopios binoculares disponen, debajo la platina. La preparación de la como indica su nombre, de dos oculares. muestra hace que esta Esto permite observar la muestra sea semitransparente y parte de la luz simultáneamente con los dos ojos pueda atravesarla y llegar al objetivo resultando en una mayor comodidad para ser observada posteriormente a para el usuario. Este es el tipo de través del ocular. En general este es el microscopio más utilizado en los sistema de iluminación más utilizado laboratorios de investigación. La entre los microscopios ópticos. distancia entre los dos oculares puede 2.1.8 MICROSCOPIO DE LUZ REFLEJADA: regularse para adaptarse a las En este caso la luz ilumina la muestra y necesidades del usuario. No hay que parte de esta es reflejada y dirigida al confundir el microscopio binocular con objetivo. De este modo es necesario el microscopio estereoscópico. El iluminar la muestra desde la parte microscopio estereoscópico siempre es superior de la platina. Este tipo de binocular. Sin embargo, no todo microscopía es utilizada para microscopio binocular es examinar materiales opacos como estereoscópico. pueden ser estructuras metálicas, 2.2.2 MICROSCOPIO TRINOCULAR: materiales cerámicos, etc. Existen El microscopio trinocular está equipado microscopios ópticos que permiten los con dos oculares para observar la dos tipos de iluminación de modo que es muestra además de un tercer ocular posible observar tanto muestras para conectar una cámara. En el caso de semitransparentes como opacas. conectar una cámara digital esta puede Los microscopios conectarse a un ordenador para ver la estereoscópicos (permiten observar la imagen de la muestra en tiempo real. muestra en tres dimensiones) son Con este microscopio es posible siempre de luz reflejada. observar la muestra y al mismo tiempo tomar fotografías o videos con la MICROSCOPIOS SEGÚN SU EL NUMERO cámara. DE OCULARES. 2.1.9 MICROSCOPIO MONOCULAR: QUE SON OBJETIVOS SECOS Este tipo de microscopio dispone de un Los objetivos secos reciben este solo ocular a través del cual se puede nombre porque, a diferencia de los observar la muestra. Es el tipo más objetivos de inmersión, no necesitan sencillo y es ideal para aficionados a la colocar ningún líquido entre el microscopía o para alguien que se objetivo y la preparación a observar. introduce en este campo. Su desventaja El poder de aumento de los objetivos principal es que puede resultar un poco secos más comunes es de 4X, 10X, 40X y 60X. En un mismo microscopio pasar el aire se separan de la puede haber varios objetivos secos normal. Algunos rayos incluso unidos al revolver y se usara uno u sufren reflexión total en la otro dependiendo de la finalidad que interface vidrio-aire. persegamos. Por ejemplo se suele Solo llega al microscopio una hacer un primer enfoque con el pequeña parte de la luz que objetivo de menor poder de parte de la muestra, con el aumento y se van pasando a problema que conlleva para la objetivos de mayor aumento para visión. hacer un enfoque más fino. Al intercalar, entre el objetivo de cedro, de índice de refracción casi igual al vidrio, los rayos QUE SON LOS OBJETIVOS DE emergentes ya no se apartan de INMERSION la normal, sino que continúan su Los objetivos de inmersión consiguen camino sin desviación, más aumento que los objetivos consiguiendo así que una mayor secos, por lo general, de 100X a cantidad de luz llegue al objetivo, 200X. El sistema de lentes es más mejorando notablemente la complejo que el de los objetivos visión. secos. Entre la primera lente del El aceite de inmersión se utiliza objetivo y la preparación a observar colocando una gota en el objetivo se coloca una gota de aceite de para facilitar la visión del cedro. El aceite y la lente frontal del microscopio al entrar en contacto objetivo han de permanecer en con el cube-objetos. Su falta o contacto durante la observación. secado puede producir una mala visión en el microscopio. Para usos PARA QUE SE UTILIZA EL ACEITE de laboratorio, análisis, investigación DE CEDRO CUANDO USAMOS EL y química fina. OBJETIVO DE INMERSION En general el aceite de inmersión CUANDO SE UTILIZA UN sirve para aumentar la resolución de MICROSCOPIO DE ESPEJO un microscopio mediante la El espejo dirige la luz hacia la inmersión de la lente objetivo y el muestra en caso de que la fuente de espécimen en un aceite transparente iluminación no está incorporada de alto índice de refracción. como parte del microscopio suele tener dos caras, una cóncava que se Los objetivos de mayor aumento, utiliza preferentemente con luz tienen una distancia focal muy artificial, y una cara plana que se pequeña y además la primera suele utilizar con luz natural. lente del objetivo es de pequeño diámetro. Los rayos que desde la muestra QUE IMPORTANCIA TIENE se dirigen al objetivo atraviesan UTILIZAR LA PARTE CONCAVA el vidrio del cubre-objeto y al DEL ESPEJO