PRACTICA No.

15
ACTIVIDAD ENZIMATICA

OBJETIVOS
Al finalizar la práctica el alumno será capaz de:
1. Observar la actividad de la enzima catalasa.
2. Comparar la actividad de la catalasa de tejidos de organismos vivos, con un
catalizador no proteico.
3. Examinar los factores que afectan la actividad enzimática.

INTRODUCCION

MATERIAL REQUERIDO
8 tubos de ensaye de 13 x 100 mm
1 agitador de vidrio
2 pipetas graduadas de 5 mL
1 vaso de precipitados de 150 mL
1 gradilla metálica
1 parrilla de calentamiento con agitación

REACTIVOS
Peróxido de hidrógeno al 3 %
Acido clorhídrico 0.1 M
Hidróxido de sodio 0.1 M
Cianuro de potasio 0.1 M

DESARROLLO EXPERIMENTAL
En los siguientes experimentos mide la velocidad de reacción de acuerdo a la siguiente
escala: 0 = no hay reacción; 1 = lenta; 2 = moderada; 3 = rápida; 4 = muy rápida.

PARTE A. Comparación de la actividad de la catalasa y el dióxido de manganeso

1. Coloca en 4 tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %.
2. Agrega a cada tubo las siguientes sustancias:

Tubo Agregar
1 Un poco de arena fina
2 Un poco de MnO2
3 Una porción de papa cruda

3. Registra la velocidad de reacción en cada tubo y compara los resultados obtenidos.

PARTE B. Efecto del pH sobre la actividad enzimática

1. Coloca una pequeña cantidad de papa fresca en 3 tubos de ensaye. Usa el agitador
y un poco de arena fina para triturar la papa.
2. Agrega 1 mL de agua destilada al primer tubo, 1 mL de HCl 0.1 M al segundo y 1 mL
de NaOH 0.1 M al tercer tubo. Registra el pH de cada tubo.
3. Adiciona a cada tubo 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % y registra los resultados
al cabo de 5 minutos.

PARTE C. Efecto de la temperatura

1. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena,
Pon el tubo en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos.
2. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Observa y registra los resultados.
3. Repite lo anterior pero a temperatura ambiente.
4. Coloca en dos tubos de ensaye 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 %. Coloca uno de
los tubos en un baño de agua a 37°C y el otro tubo en un baño de agua helada,
durante 5 minutos. Agregar una pequeña cantidad de papa triturada a cada tubo.
Compara las velocidades de reacción.

PARTE D. Efecto de un inhibidor

1. Coloca una pequeña cantidad de papa en un tubo de ensaye y tritura con arena,
agrega 3 gotas de KCN 0.1 M. Mezcla bien el contenido del tubo.
2. Añade 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3 % al tubo y registra los resultados.

Anotación de los resultados del experimento y discusión

1. Elabora una tabla con los resultados obtenidos.
2. Basado en tus anotaciones sobre la velocidad de las reacciones de los experimentos
anteriores, elabora un gráfico de barras.
3. ¿Puede el peróxido de hidrógeno ser descompuesto por otros catalizadores
diferentes de los que se encuentran en los tejidos vivos?. Explica.
4. Describe el efecto del tamaño de partícula, de la temperatura, el pH y del inhibidor
sobre la velocidad de reacción de la enzima.

REFERENCIAS
Survey of Chemistry, Laboratory Experiments, 7th Edition, A Manual for Chemistry
104, 5, 6. Department of chemistry, Soyuthern Oregon University, Ashland,
Oregon, USA, 1998, págs. 69-72.

CIENCIAS BIOLOGICAS de las moléculas al hombre, Adaptación de la versión azul del

BIOLOGICAL SCIENCES CURRICULUM STUDY, Educational Programs Improvement
Corporation, Venezuela. México, 1972, págs. 201 – 204.