I.

INTRODUCCIÓN
Las bacterias son y por mucho, los organismos más abundantes en nuestro planeta y es de
gran importancia poderlas reconocerlas y para eso necesitamos observarlas, pero las
bacterias son demasiadas pequeñas para ser observadas a simple vista, por lo cual debe
utilizarse un microscopio óptico.

La importancia de observar bacterias, es poder determinar el tipos de bacteria y darle uso

práctico en nuestras carreras, identificar los microorganismos patógenos para prevenir y
determinar su presencia para diagnosticar un tratamiento adecuado para su eliminación,
para nuestros beneficios clínicos, en procesos industriales, etc.

Pero como casi todas las bacterias son incoloras, es preciso prepararlos para la
observación y una de la manera de hacerlo consiste en someterlos a tinción (coloración)
seguido de la fijación. Saber realizar la fijación de muestras es el primer paso, de suma
importancia en laboratorio pues si lo realizamos de forma correcta, nos garantiza que
tengamos una mejor visualización de la muestra a estudiar.

II. OBJETIVOS
-
- Aprender a preparar una muestra fija de bacterias usando la técnica de fijación por
calor que permita conservar la forma y posición normal de la célula.

- Dominar la técnica de tinción simple con colorantes básicos como el azul de

metileno, cristal violeta y saflatoxina para que nos permita diferenciar los
microorganismos de su entorno.

III. MATERIALES Y MÉTODOS

Preparación de una muestra fija de bacterias para tinción

Materiales:
- Muestra conteniendo bacterias.
- Asa de Kolle.
- Lamina porta objeto.
- Mechero de alcohol.
- Piseta con agua
Procedimiento:
1. Se colocó una gota de agua sobre una lámina porta objeto completamente limpia.
Con ayuda del asa de kolle se colocó sobre la gota una pequeña porción de la
muestra a fijar.
2. Se distribuyó la gota cargada con la muestra en la lámina hasta formar una película
delgada.
3. Se aplicó la técnica de fijación por calor, se sitúo la lámina a una razonable distancia
sobre la llama del mechero. (imagen 3).

Tinción simple con colorantes básicos

Materiales:
 - Láminas fijadas a microorganismos
- Colorantes básicos: Azul de metileno, cristal violeta, saflatoxina.
- Papel toalla
- Piseta de agua
- Soporte para tinción.
Procedimiento:
1.- Se colocaron tres láminas fijadas de microorganismos sobre el soporte para tinción.
(imagen 1)
2.- Se agregaron 5 o 6 gotas de cada colorante dejando que actúen por un tiempo de: 30
segundos para el azul de metileno; 10 segundos para el cristal violeta; y 5 segundos para la
saflatoxina .
3.- Una vez cumplido el tiempo para los colorantes, se lavó cada lámina con la piseta de
agua (imagen 2).
4.- Se secó las láminas con ayuda del papel toalla.
5.- Se examinaron las preparaciones teñidas bajo el objetivo de inmersión (100-150x) de un
microscopio compuesto.

ANEXO

Imagen 1: Porta objeto en el soporte para

tincion
 Imagen 2: Lavado del porta objeto con ayuda de la
piseta

imagen 3: Aplicación de la tecnica de

fijación por calor-
BIBLIOGRAFÍA
- Tortora, G. Funke, B. y Case, C. (2007). Introducción a la Microbiología. Buenos
Aires, Argentina: Médica Panamericana, 2007.