López Arteaga Alfonso. Grupo: 1552.

Nefelometría y Turbidimetría.
Cuando un haz de luz choca con una partícula en suspensión, parte de la luz se dispersa,
parte de la luz se refleja y parte de la luz se absorbe. La dispersión de la luz depende de:

 La longitud de onda de la luz.

 Tamaño de la partícula y del índice de refracción de la partícula en relación con el
medio que la rodea.
La dispersión de la luz se puede medir por turbidimetría o por nefelometría.
La turbidimetría mide la disminución de la luz transmitida a través de una suspensión de
partículas utilizando para ello un espectrofotómetro (detector en la misma dirección del
haz de luz, se mide A o T). Se suele utilizar para soluciones concentradas (para que haya
una buena disminución de la luz transmitida), ejemplo:

 Determinación de proteínas totales en suero, LCR u orina (haciendo que las

proteínas precipiten con TCA o ácido sulfosalicílico).
La nefelometría mide la luz dispersada en dirección distinta a la luz emitida (generalmente
con ángulos que oscilan entre 15 y 90°). Utiliza como instrumento el nefelómetro en el que
el detector se ubica con un ángulo que oscila entre 15 y 90°, ejemplo:

 A 90°). Se suele utilizar para concentraciones más diluidas.

Diferencia entre Nefelometría y Turbidimetría.

Cuando la luz atraviesa un medio transparente en el que existe una suspensión de
partículas sólidas, se dispersa en todas direcciones y como consecuencia se observa
turbia. La turbidez es la propiedad óptica de una muestra que hace que la radiación sea
dispersada y absorbida más que transmitida en línea recta a través de la muestra. La
turbidez es ocasionada por la presencia de materia suspendida en un líquido.
Hay dos métodos para medir la turbidez de una muestra, la turbidimetría y la nefelometría.
Son dos técnicas complementarias que se utilizan para el análisis cuantitativo de
disoluciones coloidales, emulsiones, humos o nieblas.
La dispersión no supone la pérdida neta de potencia radiante, solo es afectada la
dirección de la propagación, porque la intensidad de la radiación es la misma en cualquier
ángulo. En la turbidimetría se compara la intensidad del rayo de luz que emerge con la
del que llega a la disolución.
En cambio, en la nefelometría, la medida de la intensidad de luz se hace con un ángulo
de 90º con respecto a la radiación incidente. El instrumento usado en la nefelometría, es
el nefelómetro, éste se asemeja al fluorómetro. En cambio, en turbidimetría se utiliza el
turbidímetro que es un fotómetro de filtro.
Fundamento de la técnica.
Turbidimetría.
Es un método en el que se mide la disminución de la potencia de la radiación transmitida
debido a la dispersión. Cuando un haz de luz monocromática, de longitud de onda no
absorbible choca contra las partículas de una sustancia que está en suspensión, cambia
la dirección de propagación del haz de luz (en realidad sólo cambian de dirección algunos
fotones del haz).
Este efecto es usado para determinar la presencia de un analito en suspensión ya que
ese cambio de dirección del haz y de su intensidad depende de muchos factores que una
vez relacionados y cuantificados permiten obtener los valores buscados. Se mide en un
espectrofotómetro UV-Vis. Para determinar la concentración del analito mediante este
método aplicamos:
It
T=
I0

En donde T es la transmitancia medida, It es la intensidad de la fuente de radiación

transmitida, I0 es la intensidad de la radiación de la fuente transmitida por un blanco. La
relación entre y la concentración de las partículas dispersas es similar a la proporcionada
por la ley de Beer:
−logT =K∗b∗C
Siendo C la concentración de las partículas dispersantes expresada como masa por
unidad de volumen; b es la longitud del camino óptico y K es una constante que depende
de varios factores: tamaño, forma de las partículas dispersantes y la longitud de onda.
Nefelometría.
La nefelometría es un procedimiento analítico que se basa en la dispersión de la radiación
que atraviesan las partículas de materia. Cuando la luz atraviesa un medio transparente
en el que existe una suspensión de partículas sólidas, se dispersa en todas direcciones y
como consecuencia se observa turbia. Se mide en un espectrofluorímetro. Para
determinar la concentración de analito en este método aplicamos:
I =K S∗I 0∗C
Donde KS es una constante empírica del sistema, I0 es la intensidad de la fuente de
radiación incidente. El valor de KS depende de una curva de calibración preparada,
usando una serie de patrones de concentración conocida.

Características instrumentales.
Turbidimetro.
Casi todas las medidas turbidimétricas se realizan con colorímetros o espectrofotómetros
ordinarios. También pueden usarse instrumentos visuales sencillos, tales como el
trubidímetro Parr o el colorímetro Duboscq.
Se representa el esquema de un turbidímetro, el Du Pont Modelo 430. Este turbidímetro,
que es mucho más sensible que los Turbidímetros ordinarios para concentraciones bajas
de materia en suspensión.
El haz incidente se convierte en luz polarizada en un plano mediante el polarizador
primario. Después de atravesar la muestra, el haz se divide en dos mediante un espejo
semi-plateado, y se detecta con dos fototubos separados. Cuando la disolución de la
muestra no tiene partículas en suspensión, la fotocélula 1 da una respuesta máxima y la
fotocélula 2 da una respuesta mínima nula. La relación entre la señal 2 y la señal 1 es una
media de la concentración de las partículas en suspensión. Al aumentar la concentración
de las partículas en suspensión en la muestra, aumenta la señal de la fotocélula 2 y
disminuye la de la fotocélula 1, y por esto, las dos señales permiten una medida sensible
de la turbidez. Este sistema tiene el inconveniente de que no puede usarse cuando la
disolución contiene sustancias ópticamente activas.
Cuando la concentración de partículas está en suspensión, se mide por turbidimetría, la
suspensión se pone en una cubeta similar a un tubo de ensayo, que permite realizar las
medidas de las energía incidentes y transmitidas. La fuente de radiación más
frecuentemente usadas es la lámpara de wolframio, pero pueden utilizarse otras fuentes
de radiación visible. Si ponemos en la cubeta suspensiones coloreadas se debe usar un
filtro para evitar que influya sobre los resultados dando valores excesivamente altos. Los
Turbidímetros pueden incorporar cualquier detector que sea sensible a la longitud de onda
transmitida.
Nefelómetro.
Un nefelómetro es un instrumento para medir partículas suspendidas en un líquido. Esto
lo hace empleando una fotocelda colocada en un ángulo de 90° con respecto a una fuente
luminosa. La densidad de partículas es entonces una función de la luz reflejada por las
partículas a la fotocelda.
Cuanta más luz se refleje en una determinada densidad de partículas depende de las
propiedades de las partículas como su forma, color y reflectividad.

El instrumento permite la medida de la intensidad de la dispersión S, la cual está

relacionada con la concentración.
Las fuentes de radiación que se utilizan son de láser helio-neón, lámparas de halógenos y
lámparas de xenón, siendo el más frecuente el primero. Éste consiste en un tubo largo y
estrecho en el cual se introduce una mezcla de gas formada por 7 partes de helio y 1
parte de neón al que se le aplica un voltaje para producir una descarga eléctrica.
A los nefelómetros usados en las pruebas de calidad del agua, comúnmente se les llaman
turbidímetros. Sin embargo, puede haber diferencias entre los modelos de turbidímetros,
dependiendo del arreglo geométrico de la fuente luminosa con respecto a la fotocelda. Un
turbímetro nefelométrico siempre monitorea la luz reflejada por las partículas y no la
atenuación debida a la turbidez.
Nefelómetro C-102
Este nefelómetro realiza un análisis de agua casi completo: cloro libre y total, bromo, pH,
hierro, yodo y ácido cianúrico. En el modo de medición de turbiedad puede elegir entre los
valores de calibración dados o los valores definidos por el usuario. Por medio del reloj de
tiempo real integrado puede recuperar presionando la tecla los últimos datos de
calibración. En el rango de medición de turbiedad se puede poner un punto de calibración
libre entre 0,0 y 50,0 NTU (NTU Nephelometric Turbidity Unit = FTU Formazin Turbidity
Unit / Ratio 1:1). La turbiedad se mide con el método USEPA.

Factores que afectan la determinación.

 Concentración: Entre mayor sea el número de partículas, mayor es la dispersión.
 Tamaño de la partícula: Lo afectan factores como el pH, la velocidad y orden de la
mezcla, concentración de los reactivos, duración del estado de reposo y la fuerza
iónica.
 Longitud de onda: Generalmente las muestras se iluminan con luz blanca, pero si
están coloreadas, se debe escoger una porción del espectro electromagnético en
la que la absorción del medio se reduzca al mínimo.