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• Sistema de 21 pruebas bioquímicas para la identificación rápida

de bacterias de la familia Enterobacteriaceae y otros bacilos


Gram negativos poco exigentes.

• Consta de 20 microtubos que contienen los sustratos


deshidratados de las pruebas bioquímicas tradicionales.

• Se inoculan con una suspensión bacteriana que rehidrata los


medios y, después de la incubación (18 a 24 h), debido al
metabolismo bacteriano se observan cambios de color
espontáneos o por la adición de reactivos.

• La lectura de las reacciones se hace de acuerdo con una tabla


de lectura, se obtiene un perfil numérico y la identificación se
realiza buscando el perfil numérico en una base de datos
(catálogo o software).
o Etiquetar en la lengüeta de la cámara
o Preparar suspensión bacteriana al tubo 0,5 de McFarland
y homogeneizar.

o Inocular la galería API20E.


Llenar con la suspensión bacteriana
todos los tubos, no la cúpula de
todos los pocillos (cuidando no
introducir burbujas).
o Llenar la cúpula de los pocillos CIT, VP, GEL

o Llenar con aceite mineral las cúpulas de los pocillos


ADH, LDC, ODC, URE y H2S.
o Colocar la tira en su propia cámara húmeda de incubación.

Para lo cual previamente poner agua destilada o SSI en los


alvéolos de la cámara para proporcionar una atmósfera
húmeda durante la incubación.

o Incubar a 37 ° C durante 24 h.
o Leer resultados (a las 24 h) comparando los colores de
cada pocillo con los de la tabla de lecturas.

o Nota: Un tono verdoso en glucosa (GLU) se considera


positivo ya que es el carbohidrato que utilizan por
excelencia y da muy rápido. Se pone verde porque se
agota la glucosa, empieza a utilizar peptonas y se
alcaliniza el medio.
o Un ejemplo:

o Notar el tono verdoso en las pruebas positivas de


carbohidratos, el tono muy tenue del color rojo en la
prueba VP (Vogues-Proskauer) y el amarillo, también
muy tenue de la prueba ONPG.
Pruebas incluidas en la Galería API 20 E
Tabla de lectura
o Registrar los resultados de los pocillos que no
requieren ser revelados.

o Revelar los pocillos que se describen a continuación:

 TDA : Añadir una gota de FeCl3 y comparar el color


obtenido con el indicado en la tabla de lectura
(marrón-rojo +).

 VP: Adicionar un gota del reactivo 1: (KOH 40%) y


una gota del reactivo 2: α-naftol (C2H5OH). Dejar
reposar 10 minutos y comparar el color obtenido
con el indicado en la tabla de lectura (rosa-rojo +).

 IND: Añadir una gota de reactivo de Kovacs o


Ehrlich (rosa o anillo rojo-rosa +).
o Del conjunto de reacciones y resultados se obtiene un
perfil numérico de 7 cifras (bionúmero)

o Los pocillos están separados en grupos de tres, en total


se tienen 7 grupos de 3 tubos (tripletes).

o A cada pocillo se le asignará un valor 0,1,2 ó 4 de


acuerdo a los siguientes criterios:

 Si la reacción es negativa se pone 0.


 Si la reacción es positiva: Se pone 1 si es el primer
pocillo de un triplete, 2 si es el segundo y 4 si es el
tercero.

o Se suman los valores de cada triplete. Los 7 números


resultantes, nos dan un perfil numérico de 7 cifras.
o Identificar al microorganismo en base al perfil numérico
obtenido y la base de datos.
o Taxón
Excelente
o Calidad de identificación Muy buena
Buena
No identifica
o % de identidad

o Pruebas complementarias
 Recomienda hacer otras pruebas para mejorar y
lograr la correcta identificación del microorganismo
o Rapidez en la manipulación.

o 20 pruebas al mismo tiempo

o Disponibilidad de bases de datos para la identificación.

o Se usa muy poco inóculo

o Poco tiempo de incubación (resultados rápidos)

o Muy poco sustrato (medio de cultivo)


Prueba Resultado Prueba Resultado Prueba Resultado
ONPG + TDA -- SOR +
ADH + (v) INO + RHA +
LDC + VP -- SAC --(v)
ODC + GEL -- MEL +
CIT -- GLU + AMY --
H2S -- MAN + ARA +
URE -- INO -- OX --

BIONÚMERO: 7144552