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Informe de Laboratorio

Determinación de la Concentración de proteínas por Espectrofotometria.

Laboratorio de Bioquímica.

Nombre autores, grupo:


Doris Peña.
Ana Prieto.
John Ross.
Francisca Valenzuela.

Grupo 003

Docente:
Silvina Guzmán Acuña.

Fecha: 23 de abril del 2019.


Introducción:

Las proteínas son un grupo de biopolímeros constituidos de aminoácidos que exhiben una
amplia gama de estructuras y funciones. Las proteínas como un grupo de biomoléculas
desempeñan una gran variedad de funciones, algunas participan en la contracción muscular
y sirven para dar soporte estructural, otras trasportan y almacenan moléculas pequeñas.

Existen diversos métodos que permiten cuantificar la concentración de proteínas presente en


muestras biológicas, basados específicamente en las propiedades que muestran las
proteínas en solución. Los métodos más usuales son: Compuestos que tienen dos o más
uniones peptídicas (péptidos y proteínas) al reaccionar con el reactivo de Biuret (sulfato de
cobre alcalino) se forma un complejo de color púrpura. La intensidad del color y la cantidad
de producto depende de la concentración de proteínas. El producto coloreado de la reacción
es leído por un espectrofotómetro.

Objetivos:
● Aplicar los fundamentos teóricos de la espectrofotometría.
● Determinar la concentración proteica de las soluciones.

Procedimiento experimental:

Preparación y estudio de la solución: se comenzó colocando 3 tubos de ensayo


rotulados con su número correspondiente en una gradilla. adicionando con una micropipeta
p1000 en el tubo número 1, una solución de 3 ml de suero fisiológico. En el tubo 2 se adiciono
3 ml de Glicina y en el tubo 3 se agregaron 3 ml de seroalbúmina de bovino (SAB). Se agitó
suavemente cada uno de los tubos y se dejó reposar durante 20 min. Posteriormente se
procedió a medir en el espectrofotómetro, ajustándose el mando de selección de la longitud
de onda a 540 nm. Logrando medir y calcular sus concentraciones experimentales y su
absorbancia.

Resultados:

Discusión:

Conclusión:
Referencias:

1. Maria Fernanda Vera; Determinación de la Concentración de proteínas por


Espectrofotometria. Noviembre de 2014
https://www.academia.edu/10441909/DETERMINACI%C3%93N_DE_PROTE%C3%
8DNAS_INTRODUCCION
2. Carlos González; Proteínas Enero de 2010.
http://www.botanica.cnba.uba.ar/Pakete/3er/LosCompuestosOrganicos/1111/Protein
as.htm

Anexos:

Tabla l

Muestra Absorbancia Concentración Concentración


Teórica (mg/mL) Experimental
(mg/mL)
Suero Fisiológico 0 900 mg/mL

Glicina 1,14 0,025 mg/mL 3, 69 mg/mL

SAB 1,36 5 mg/mL 0,14 mg/mL

Concentración Experimental

Glicina SAB

A540 = E540 * C * I A540 = E540 * C * I

1990 = 540*1*X 43.824= 540*1*X


1990 = 540*X 43.814/540= X
1990/540 = X
81,16= X
3,69= X

Comparación de concentraciones

Concentración Concentración
Teórica (mg/mL) Experimental
(mg/mL)
900 mg/mL

0,025 mg/mL 3, 69 mg/mL

5 mg/mL 0,14 mg/mL