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UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS


PROGRAMA DE QUÍMICA
2019

Práctica de laboratorio: La célula

Angie Paola Acosta Mora, María Paula Benavides Naranjo, Daniel Pizo Cañaveral

Universidad del Quindío


Facultad de ciencias básicas y tecnologías
Programa de química
Biología

Resumen:
En la presente practica se realizó la identificación y diferenciación de celular animales y
vegetales, mediante muestras extraídas de la boca y de una cebolla, con la ayuda del
microscopio. En las células vegetales se probaron 12 diferentes tipos de colorantes para
ver su función dentro del análisis a través del microscopio ya que algunos de estos teñían
diferentes partes de la célula como lo son: el núcleo, la pared celular y el citoplasma.
Introducción
Las células son la base de todos los organismos, ya que todos los seres vivos estan
constituidos por células, pero la célula y su estructura no se pudieron conocer hasta que
no se crearon las herramientas necesarias para verla. Estas herramientas son los
microscopios.
En 1665 el científico Robert Hooke describió una lámina de corcho que observó al
microscopio. Hooke vio una gran cantidad de celdillas a las que llamó células.
Posteriormente muchos científicos se han asomado al microscopio y han descrito las
distintas estructuras de la célula. Todas las observaciones realizadas han llevado a la
creación de la teoría celular. Esta contiene cuatro conceptos principales:
 Todos los seres vivos están constituidos por una o más células.
 Toda célula es la unidad anatómica y fisiológica de los seres vivos. Es la unidad
de vida más pequeña.
 Toda célula proviene de la división de una célula anterior.
 Toda célula contiene material hereditario donde se encuentran las características
del ser vivo y que serán transmitidas desde una célula madre a sus hijas.
Aplicando la teoría celular, se sabe que todos los organismos están compuestos por
células, pero las células pueden ser de distintos tipos. Además, los seres vivos pueden
estar formados de una o más células.
Las células se clasifican atendiendo al grado de complejidad que presentan en su
estructura. De este modo se distinguen:
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 Célula procariota: Son todas aquellas cuyo material genético no se encuentra


protegido por una membrana y el citoplasma no está compartimentado. Es el tipo
celular más sencillo.
 Célula eucariota: Son todas aquellas cuyo material genético se encuentra en el
interior de una estructura, el núcleo, protegido por una membrana. El citoplasma
está compartimentado. Es el tipo celular más complejo.
Las células con la cuales se realizó la practica son células eucariotas, más
específicamente son las células animales y vegetales. La célula eucariota tiene el
material genético protegido por una membrana formando el núcleo, además en
citoplasma aparecen unas estructuras denominadas orgánulos celulares que realizan
distintas funciones.
Algunas de las partes presentes en estas células son:

 Pared celular: es una estructura dura y en algunos casos muy gruesa, formada
por glúcidos de tipo Polisacárido, como la celulosa. Es un esqueleto externo
que proporciona una forma definida y estable a la célula. También impide que
la célula se rompa cuando absorbe mucha agua. En las paredes aparecen
pequeños poros para la entrada de agua, nutrientes y gases. Solo aparece en
células vegetales.
 Membrana plasmática: formada por lípidos, proteínas y una pequeña
proporción de glúcidos. Los lípidos se organizan en dos capas e impiden el
paso de cualquier sustancia polar. Las proteínas suelen situarse atravesando
las dos capas de lípidos creando unos canales por donde se regula el paso de
sustancias. Los glúcidos sólo se encuentran en el exterior de la membrana
formando una capa que puede captar información del exterior. Es el límite
celular, controla el paso de moléculas y recibe los estímulos producidos en el
medio.
 Citoplasma: se encuentra entre la membrana plasmática y el núcleo. En él se
encuentran los orgánulos y el citoesqueleto, incluidos en el hialoplasma.
 El núcleo es la estructura característica de la célula eucariota. Se distinguen
las siguientes partes: Membrana nuclear, formada por dos membranas que
provienen del retículo endoplásmico. Toda la superficie está salpicada de
poros por los que entra y sale información. Nucleoplasma, sustancia similar al
hialoplasma. Nucléolo, es una zona muy densa formada por ADN, ARN y
proteínas. Es el lugar donde se forman los ribosomas ADN o material
genético, se encuentra condensado en forma de cromatina. El ADN contiene
la información genética y controla la actividad celular. (UNIVERSIDAD
NACIONAL DEL LITORAL, 2015)
La célula vegetal tiene casi los mismos organelos que la célula animal, más sin embargo,
la célula vegetal tiene dos diferencias importantes frente a la célula animal, teniendo en
cuenta que la célula vegetal presenta una pared celular que es una capa externa que
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protege la célula y también tiene cloroplastos que son los organelos que llevan a cabo la
fotosíntesis, estos a diferencia de los organelos de la célula animal se deja ver gracias a
que los organelos vegetales tiene clorofila. (AGUDELO)
Debemos de tener en cuenta que gracias al avance de la microscopia se ha podido estudiar
más a fondo la estructura celular ya sea animal o vegetal, gracias a los avances, las
herramientas tecnologías y químicas como lo son los colorantes se puede observar más
nítidamente la estructura de la célula que sea incolora, esto ha permitido tener un mejor
análisis de la celula, gracias a esto se ha podido clasificar la celula por el funcionamiento
y los organelos que estas presentan. (ALDANA, 2016)
Es importante aclarar que los colorantes actúan por las siguientes razones.
- Afinidad química elemental: colorante acido se une a estructura básica y viceversa
- Difusión simple de colorante: se coloca el colorante en una zona donde no se
difunda, de manera que cuando se enfrente con un medio donde se necesite de el
este pase a cierta sustancia.
- Metacromancia de colorante: se trata de que cuando el colorante esta en
suspensión tiene cierto color, pero, cuando las moléculas se ordenan cambia de
color
- Reacción de grupos químicos específicos (acción, 2016)

Materiales y metodología
Para la practica se necesitaron los siguientes materiales y reactivos.
 Microscopios compuestos  Giemsa
 Porta y cubre objetos  Hisopos
 Cebolla de huevo  Cristal violeta
 Ramas de elodea  Rojo Neutro
 Lugol  Tonina
 Aceite de inmersión  Verde de malaquita
 Mechero  Safranina
 Agua destilada  Azul de metileno
 Alcohol  Verde de metileno acético
 Acetona  Glicerina

Primera parte
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Observación de células de la epidermis del Catafilo de cebolla (pared celular,


núcleo y citoplasma)

En primer lugar, se separó varias membranas delgadas de la cebolla de huevo colocando


cada uno de estas en el portaobjetos y adicionando encima de esta una gota de los
reactivos mencionados anteriormente (una gota de un solo reactivo por una muestra del
catafilo) se cubre con la laminilla o cubreobjetos y se observa en el microscopio con los
objetivos 40X Y 100X como se observa en las siguientes imágenes.

Figura 1. Corte de catafilos de cebolla.

Figura 2. Placa de catafilo de cebolla con agua


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Figura 3. Placa de catafilo de cebolla con reactivo Giemsa

Figura 4. Catafilo de cebolla con cristal violeta

Figura 5. catafilo de cebolla con azul de metileno


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Figura 6. Catafilo de cebolla con glicerina

Figura 7. Catafilo de cebolla con rojo neutro

Figura 8. Catafilo de cebolla con Tionina

Figura 9: Catafilo de cebolla con Acetona


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Figura 10. Catafilo de cebolla con verde de metileno

Figura 11. Catafilo de cebolla con verde de malaquita

Figura 12. Catafilo de cebolla con Safranina


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Figura 13. Catafilo de cebolla con Lugol

SEGUNDA PARTE
Celulas de parenquima de hoja de elodea
Se tomo una hoja de elodea y con un bisturi se corto un fragmento de aproximadamente
1 cm, posteriormente se lo ubico en el portaobjetos se adiciona una gota de agua y se lo
cubre con la laminilla para despues observar las estructuras.

Figura 14. fragmento de hoja de Elodea

TERCERA PARTE
Celulas Procariotas.
se tomo una muestra con un isopo esteril la mucosa bucal de los lados y debajo de la
lengua, posteriormente se hizo un frotis en un portaobjetos limpio, se dejo secar y se fijo
la muestra usando varias gotas de metanol durante un minuto se colorea la muestra
usando el metodo de Gram y se observa en el microscopio a 100X
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Figura 15. Procedimiento tincion de GRAM

Resultados y discusion
Primera parte:

1) Agua

Como es sabido el agua es un reactivo neutro es decir que posee una parte acida
y una parte basica para poder diferenciar todas lar partes de los tejidos, sin
embargo este es un elemento incoloro que no va a teñir ninguna estructura en la
celula pero si tiene la capacidad de identificarla como se puede observar en la
Figura 16; esta presenta formas pentagonales y hexagonales, tambien se puede
observar el nucleo, este al ser una estructura bastante grande en la célula.

Figura 16. Observación 40X las celulas y nucleos que conforman el Catáfilo
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2) Giemsa

Este colorante es una solucion en metanol de un colorante ácido (eosina) y dos


colorantes básicos ( azur y azul de mtileno ) es decir que tiñe las estucturas
celulares a partir de su carácter acido o básico, en la practica como se muestra en
la Figura 17, se puede observar de forma definida la pared celular teñida de un
color violeta, y tambien se tiñe de forma mas leve el citoplasma ya que al ser una
estructura basica, la eosina se adhiere a este.

Figura 17. Observacion a 40X de pared celular y citoplasma

3) Cristal violeta

Es un colorante organico, sintetico y alcalino de triamino-trimetilfetano, Este


colorante es de tipo cationico, es decir que tienen carga positiva que penetra en el
interior de la celúla y la tiñen de esta forma se puede diferenciar en la Figura 18
el citoplasma, el nucleo y la pared celular.

.
Figura 18. observacion 40X: nucleo, citoplasma y pared celular.

4) Azul de metileno.
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Este colorante entra en la categoria de los colorantes básicos, por lo tanto tiñe de
forma mas facil el nucleo al poseer este el ADN como se puede observar en la
Figura 19, tambien se puede identificar en la practica el citoplasma y la pared
celular dividiendo cada célula.

Figura 19. observación 40X: nucleo, citoplasma y pared celular.

5) Glicerina

Con este reactivo se pudo hacer mas visible la dividsion celular, probablemete esto
se pueda deber que la glicerina al ser un aceite tiene mayor densidad que el agua
por ejemplo y permite obervar la celula como si fuera un tipo de lente, tambien
según la teoria este reactivo perteneceria al grupo de los indiferentes ya que no hay
una afinidad quimica si no que este se disuelve en los tejidos, tampoco posee
ningun color y no es posible observar el nucleo.

Figura 20. observacion 40X celulas que conforman el catáfilo

6) Rojo neutro
como su nombre lo indica pertenece al grupo de los indicadores neutros es decir
que tiene una parte basica y otra ácida por lo tanto como se observa en la Figura
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21 este tiñe las partes acidas y las partes basicas de la celula, se puede observar la
pared celular de forma definida, el citoplasma y el nucleo, según la literatura este
colorante es muy usado para identificar las vacuolas en celulas vegetales sin
embargo por la estructura que se está observando no fue posible identificarla en
la practica.

Figura 21. observación a 40X pared celular, citopasma y núcleo

7) Tionina

Es un indicar perteneciente al grupo de los indicadores básicos, es decir que se


van a adherir de forma quimica a estructuras que presentan acidos en su
conformacion por ejemplo el nucleo, en la Figura 22 se puede observar como se
resalta el nucleo y el pared celular.

Figura 22. Obsevación de la parden celula y nucleo

8) Acetona

Con este reactivo fue posible observar como se marca de forma definida la pared
celular pero no se pudo diferenciar ninguna otra estructura como se muestra en la
Figura 23
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Figura 23. Células que conforman el catáfilo de cebolla

9) Verde de metileno

Pertenece al grupo de los indicadores neutros que ya se explacron anteriormente


dando un resultado muy similar al del rojo neutro marcando de forma muy definida
la pared celular y el nucleo y tiñendo de verde el citoplasma.

Figura 24. observación a 40X citoplasma, pared celular y núcleo

10) Verde de malaquita

Este colorante es cationico es decir que penetra de forma total las paredes de la
celula vegetal y la tiñe completamente haciendo posible la identificacion de
diferentes estructuras en este caso el nucleo, el citoplasma y la pared, este puede
ser utilizado como contracoloración azul verdosa junto con la safranina.
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Figura 25. Observacion 40X pared celular, citoplasma y Nucleo

11) Safranina

Este colorante al igual que el verde malaquita es cationico, se lo considera un


colorante nuclear es decir que colorea los nucleos de rojo como se puede observar
en la figura 26 y se utiliza al igual que el verde de malaquita como
contracoloración .

Figura 26. observación 40X Núcleo, citoplasma y pared celular


12) Lugol

Este es un indicador que penetra a la celula a traves de los poros presentes en la


memebrana celular o pared celular, tiñe la célula de un color amarillo y hace mas
visible el núcleo como se puede observar en la Figura 27.

Figura 27. Definición del núcleo

Segunda parte

En esta parte se pudo observar las células que conforman la hoja de elodea
ceparadas por la pared celular y dentro se puede observar pequeñas estructuras de
color verde que serian los cloropastos.
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Figura 28. observacion 100X celúlas que conforman una hoja de Elodea, pared
celular y cloroplastos.

Tercera parte
En este aparatado se pudieron observar algunas estructuras celulares de una
celula procariota animal en una muestra bucal, las estructuras que se identificaron
con el núcleo, la emembrana celular y el citroplasma en los distintion lentes
microscopicos como se describen en las siguientes imágenes.

Figura 29. Tejido celular 10X


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Figura 30. Celula procariota de los lados en la zona bucal núcleo, citoplasma y
memebrana celular 100X

Figura 31.: Célula 40X lados de la zona bucal: núcleo, citoplasma y membrana
celular

Figura 32. Células de la lengua núcleo, citoplasma y memebrana celular 100X


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Conclusiones:

Las celulas animales y vegetales a pesar de ser eucariotas tienen notorias


diferencias en tu conposición, una de las diferencias más notorias es su forma ya
que las celulas animales son mas circulares y no poseen pared celular, mientras
que las celulas vegetales son ovaladas y tienen pared celular la cual se logró
distinguir con cada uno de los indicadores utilizados. Ambas celulas poseen nucleo
que en el caso de las celulas animales esta teñido de purpura gracias a la tingción
de gram mientras que en las vegetales los indicadores mas adecuados para
identificar el nucleo fueron: glucol, verde de metileno, verde de malaquita,
zafranina, cristal violeta, entre otros ya que por su carácter quimico (acido, basico,
cationico, anionico, neutro e indiferente) se puede distingir su estructura. El
citoplasma en la celula animal tambien tiño de color violeta pero más claro que el
del nucleo mientras que, en las celulas vegetales los indicadores adecuador para
diferenciar esta estructura son el verde de metileno, el verde de malaquita, el azul
de metileno, el cristal violeta y el lugol. Otros reactivos como el agua destilada y
la glicerina solo sirvieron para identifical el tegido celular.
Se pueden identificar los cloroplastos los cuales son organelos bastante grandes en
la hoja de elodea, para identificar este no se necesito de ningun reactivo, solo la
hoja, agua.

Bibliografía:

acción, C. y. (12 de 09 de 2016). Colorantes y sus fundamentos de acción . Obtenido de


https://campus.usal.es/~histologia/histotec/general/gene11/gene11.htm

AGUDELO, R. S. (s.f.). GUIA DE LABORATORIO "CELULA". ARMENIA .

ALDANA, D. (2016). LAB BIOLOGIA . MEDELLIN.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LITORAL. (2015). BIOLOGIA. concentos básicos.

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