UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

​LA MOLINA

Práctica N°3

Fecundación y desarrollo embrionario del

“Erizo de mar” (​Tetrapygus niger​)

Curso:
Zoología General

Profesor:
Richar Joel Morales Rodriguez

Grupo:
G/G*

Fecha del experimento:

11-09-15

Integrantes:
Barreda Ortiz, Valery Sue
Dávila López, Nieves del Rosario
Ramos Inga, Karla Janet
Travezaño Ambrosio, Mariella Alejandra

2015-II
 I. INTRODUCCIÓN

El espermatozoide y el oocito tienen estructuras especializadas relacionadas con la

fecundación. La fusión del espermatozoide y el oocito en la fecundación estimula al huevo a comenzar
a dividirse por mitosis siguiendo un patrón, mientras forma blastómeros y llega al estadío de mórula
(segmentación). Los blastómeros originan las tres capas embrionarias:ectodermo, mesodermo y
endodermo, también se forman el arquenterón y el blastoporo

Tetrapygus niger “erizo de mar” constituye uno de los organismos modelo más utilizados en los
estudios de fecundación y desarrollo embrionario temprano. Es una especie que guarda similaridad en
cuanto a dichos procesos con respecto a los mamíferos. Además es un organismo muy utilizado en
estudios de biología del desarrollo; debido a la fácil obtención de sus gametos 1​​, ya que se obtienen en
grandes cantidades, pueden ser inseminados fácilmente in vitro (en medio acuoso donde la
fecundación ocurre de forma natural) y también son sencillos de mantener en el laboratorio. Las
etapas de desarrollo temprano pueden ser identificadas claramente y los datos obtenidos pueden ser
comparados con el proceso de segmentación temprana en el hombre 1​​.

Los objetivos del presente informe son:

● Reconocer la morfología del erizo de mar
● Distinguir los gametos del erizo de mar
● Observar la fecundación del erizo de mar ​in vitro

II. MATERIALES Y MÉTODOS

A. Materiales biológicos

-4 erizos de mar adultos (Anexo A)

B. Materiales de Laboratorio

-Solución de KCl 0.5 Molar

-Gotero
-4 Jeringas de 5ml y aguja Hipodérmica (número 21)
-3 Láminas portaobjeto cóncava y su respectivo cubre objeto.

C. Métodos

Se reconoció la morfología externa del erizo de mar por medio de manipulación directa.

Se inyectó con una jeringa 0,5 M de KCl en las gónadas del erizo de mar, introduciendo
la jeringa en una zona que rodeaba la boca (parte oral).

A continuación, se colocó el erizo de mar en una placa petri y éste liberó sus gametos.

Finalmente, se sacó una muestra de los gametos y se observó su estructura con un

microscopio compuesto.
 III. RESULTADOS

IV. COMENTARIOS
● Aplicando la inyección del KCl a 0.5M sobre la membrana peristomáticas se pudo
estimular la liberación de gametos , lo cual provocó que sus pies ambulacrales
empezaran a moverse en diferentes direcciones .A través del ano se observó que en
machos sus gametos son de color blanquecino y en hembras es de color rojizo.
● Con la ayuda del microscopio se pudo diferenciar la morfología de los gametos
femeninos y masculinos , en donde el volumen del óvulo era mucho mayor que el el
espermatozoide.
● Cuando se realizó la unión de gametos se observó que habían miles de espermatozoides
alrededor del óvulo pero éste ya había experimentado un bloqueo rápido para evitar la
poliespermia . Al pasar los minutos la parte más externa del óvulo se volvió más clara y
la parte central de un color más rojizo.

V. RECOMENDACIONES

-Un factor que pudo limitar la observación de la fecundación es el de la temporada reproductiva, pues
los erizos de mar desarrollan sus gónadas durante el periodo de invierno ya que tienden a
reproducirse más en temporadas de primavera y verano 1​​.
-Tener en cuenta la edad del individuo para la colecta de gametos.

VI. ANEXOS
A. Figura de la parte oral de un erizo de mar (​Tetrapygus niger)​

B. CUESTIONARIO

1.- Averiguar bajo qué condiciones se puede lograr la activación del ovocito para realizar
segmentación sin necesidad de fecundación, y cómo se da este mecanismo.
 Esto se presenta sobre todo en la partenogénesis , pues es el desarrollo de un óvulo sin una
fecundación previa .El espermatozoide no es necesario para la reproducción, la clave para la
preservación de la especie debe de estar en el óvulo. La partenogénesis viene siendo determinada
por el segundo corpúsculo polar . Se puede diferenciar como natural y experimental . En la
experimental se acontece por la activación del huevo y su posterior segmentación a través de
estímulos diferentes como son el calor , frío, traumatismo, rayos ultravioleta , sustancias químicas . En
ocasiones el estímulo activa directamente los dos procesos ( ovular y segmentar ) , mientras que en
otros casos se hace independientemente. Resultando así un método de una sola fase y método de
dos fases . Siendo la segunda un modo de corregir o regularizar los defectos de la primera​7​ ​.

En la partenogénesis apomíctica (apomixis) Se suprime la división reduccional de la meiosis y solo

tiene lugar una división de maduración similar a una mitosis, que da por resultado una gameta
femenina con un número cromosómico igual al de las células somáticas (2n). Como no existe
recombinación por crossing-over (intercambio de segmentos entre cromátides hermanas), los
descendientes de hembras apomícticas son clones de sus madres. Los gorgojos exhiben este tipo de
partenogénesis.

2.Hacer un cuadro comparativo de la composiciòn y funciòn de : Cubierta gelatinosa, membrana

vitelina, membrana de fertilización y membrana celular en el ovocito de mar

Cubierta gelatinosa Membrana vitelina Membrana de fertilización Membrana celular

Composición Función Composición Función Composició Función Compos Función

n ición

Contiene un Atraer o Glucoproteínas Es esencial Glucopro Sirve de Glico Regula el

péptido de 14 activar al diferentes, para la -teínas barrera -lípidos, flujo de
aminoácidos espermato- complementada unión diferentes,t previniendo el glicopro ciertos
denominado zoide s con específica iene la acceso de teínas iones
resac. extensiones de de especie misma otros durante la
glicoproteínas de del composició espermatozoi fecundació
la membrana espermato n que el des, este n y debe
celular y por -zoide saco fenómeno es ser capaz
postes vitelinos vitelino, denominado de
proteináceos, pues es la bloqueo lento fusionarse
que adhieren la expansión de con la
membrana del saco polispermia membrana
vitelina la vitelino del
 membrana espermatoz
celular oide.

3.- ¿Cuáles son los mecanismos que se llevan a cabo en el ovocito de especies con fecundación
externa para evitar la polispermia y la fecundación por espermatozoides de otras especies? Dar
ejemplos.

Las especies han evolucionado distintos modos para impedir la unión de más de dos núcleos
haploides. La forma más común es evitar la entrada de más de un espermatozoide en el gameto
femenino 2​​. Aunque muchos espermatozoides se adhieren a las cubiertas que rodean al oocito, es
importante saber que sólo uno se fusiona con la membrana plasmática de este y libera el núcleo en su
citoplasma 3​​. El óvulo de erizo de mar tiene dos mecanismos para evitar la polispermia:

1) Bloqueo Rápido: Es alcanzado cambiando el potencial eléctrico de la membrana celular del

gameto femenino. Esta membrana proporciona una barrera selectiva entre el citoplasma del
gameto femenino y el ambiente externo, de modo tal que la concentración iónica del gameto
femenino difiere ampliamente de aquella de su alrededor. Esta diferencia de concentración es
especialmente significativa para los iones de sodio y de potasio. El agua de mar tiene una
concentración particularmente alta del ion sodio, mientras que el citoplasma del óvulo contiene
relativamente poco sodio. Lo inverso sucede con los iones de potasio. Esta condición es
mantenida por la membrana celular, que tenazmente inhibe la entrada de los iones de sodio al
ovocito e impide que los iones de potasio se filtren hacia el ambiente 2​​.

El potencial eléctrico a través de la membrana plasmática varía de -70 mV a +20 mV al cabo

de unos pocos segundos de haber entrado el espermatozoide. El potencial de membrana
regresa lentamente a su nivel original mientras se forma la membrana de fecundación a partir
de los gránulos corticales y de la membrana vitelina. Si la despolarización es impedida, se
produce la polispermia, pero ¿cómo es bloqueada la polispermia por la despolarización?
todavía no se ha esclarecido 3​​.

2) Bloqueo Lento: El bloqueo rápido de la polispermia es pasajero, debido a que el potencial de

membrana del óvulo del erizo de mar se mantiene positivo por solo cerca de un minuto. Este
breve cambio de potencial no es suficiente para impedir la polispermia de manera permanente,
y la polispermia puede producirse todavía si los espermatozoides unidos a la membrana
vitelina no han sido eliminados de algún modo. Esta eliminación es llevada a cabo por la
reacción de los gránulos corticales (o reacción cortical), un bloqueo mecánico para la
polispermia más lento que llega a ser activo cerca de un minuto después de la primera fusión
exitosa entre el espermatozoide y el gameto femenino 2​​.
 La entrada del espermatozoide en el oocito da lugar al comienzo de una onda de liberación de
calcio y lleva a que los gránulos corticales, localizados justo debajo de la membrana plasmática
en el huevo maduro, liberen su contenido en el exterior de aquella por exocitosis. Esto hace
que la membrana vitelina se separe de la membrana plasmática. El contenido de los gránulos
corticales contribuye a la membrana vitelina para formar la membrana de fecundación, y
además proporciona una capa hialina entre esta y la membrana plasmática del huevo. Ambas
estructuras evitan que el espermatozoide se una a esta 3​​.

4.- ¿Existe viabilidad en organismos poliploides? Dar ejemplos.

Sí, existen en primer lugar, organismos que presentan más de dos series completas de cromosomas:
es decir, que su número de cromosomas en el núcleo es mayor a 2n (4n, 6n,8n, etc) y usualmente son
plantas.
Un dato interesante es que a medida que aumenta el número de cromosomas, las células del
organismo presentan mayor tamaño 4​​.
Sin embargo, todos los organismos que tengan un número impar de cromosomas sean esencialmente
estériles, ya que la distribución de cromosomas es aleatoria y por tanto la cantidad de cromosomas en
cada gameto no será necesariamente uniforme. Un ejemplo sería si se tiene un organismo triploide
(3n), el gameto llevaría entre n a 2n.
También, la poliploidía puede ser provocada artificialmente.

La poliploidía es un mecanismo ventajoso para los organismos que son incapaces de cambiar su
ambiente y que por tanto necesitan incrementar su variabilidad genética. Es por ello que este
fenómeno se presenta mayormente en las plantas (sin movilidad) 6​​.
Algunos ejemplos que se mencionan en libros:

Los plátanos, las manzanas de sidra y las peras europeas son todas especies triploides que se
propagan a través de esquejes asexuales​(5)​.

Algunos tejidos animales son poliploides (los tejidos del hígado). Sin embargo, los animales poliploides
son muy raros:
La mayoría de estos organismos se reproducen de dos formas: hermafrodíticamente (como lo hacen
las sanguijuelas, algunos gusanos turbelarios y algunos gusanos de tierra) o partenogenéticamente
(como en el camarón de las salinas, áfidos y rotíferos).
Se ha encontrado la poliploidía espontáneamente en salamandras, pero no llegan a establecerse en la
población. Esto se debe a que los animales son en general poco tolerantes a alteraciones en el
número de cromosomas 5​​.

VII. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA

 1. Zamora S, Stotz W. Ciclo reproductivo de ​Tetrapygus niger​ (Echinodermata: Echinoidea) en los
localidades de la IV Región, Coquimbo, Chile. Revista Chilena de Historia Natural. 1993; 66:
155-169.
2. Gilbert S. Biología del desarrollo. 7° edición. Buenos Aires: Editorial Médica
Panamericana.2005
3. Jessell, Lawrence, Meyerowitz, Robertson, Smith. Principios del desarrollo. 3° edición. España:
Editorial Médica Panamericana. 2010
4. LUDWIG E. Manual de Laboratorio de Morfología Vegetal. Turrialba,Costa Rica,​1​: 11 (2000)
5. JENKINGS J. Genética, Boston, ​5​:189-191(1986)
6. EDITORIAL COMPLUTENSE. ​ Diccionario de Biología​,España, 23 (1998)
7. G.PALOMERO,J.A.VEGA .Lecciones de Embriología . Editorial : Universidad de Oviedo
8. PATTEN M. Embriología básica de Patten. México 126(1990)
9. PURVES D. Vida. Buenos Aires, Argentina ​42​:901 (2009)

1.- que sustancia atrae al esperma

3.- proteasa generadas

4.- ¿Cómo influye la actina en el cono acrosómico?
La actina se polimeriza (de g-actina a f-actina)​8​, transformándose filamentos que compondrán el cono
acrosómico o de fecundación; por lo que la relación entre la actina y el cono acrosómico,es que esta
primera le brindará la estructura o soporte. La actina es la base del proceso acrosómico. La
participación del filamento es el siguiente:
El filamento o proceso acrosómico se extiende fuera de la cabeza del espermatozoide, esto ocurre
porque los filamentos sirven para facilitar la introducción del espermatozoide al óvulo: El filamento está
recubierto con moléculas de reconocimiento específico de especie llamado bindina, quienes al
contactar con los receptores de la envoltura vitelina del óvulo, provocan la fusión de las membranas
plasmáticas del espermatozoide y del óvulo 9​​.
2.-Reacción acrosómica
La reacción acrosómica en los erizos de mar es iniciada por el contacto de los espermatozoides con la
capa gelatinosa del óvulo, el cual provoca la exocitosis de la vesícula acrosómica del espermatozoide
y la liberación de enzimas proteolíticas que pueden abrir un sendero a través de la cubierta de gelatina
de la superficie del óvulo, deben reaccionar al menos tres compuestos de la membrana del
espermatozoide con la capa gelatinosa del óvulo,esta unión abre canales iónicos de calcio en la
membrana celular, permitiendo el ingreso de calcio a la cabeza del espermatozoide .La activación de
esta reacción constituye una barrera para que se produzcan fecundaciones entre especies diferentes
La segunda parte de la reacción acrosómica involucra la extensión del proceso acrosómico. Esta
protuberancia se origina a partir de la polimerización de moléculas de actina globular en filamentos de
actina . Se piensa que el influjo de iones de calcio (Ca+2) activa a la proteína RhoB, localizada en la
región acrosómica y en la pieza media del espermatozoide del erizo de mar,esta proteína que se une
a GTP ayuda a organizar el citoesqueleto de actina en muchos tipos de células, y se piensa que es
activa en la polimerización de la actina para producir el proceso acrosómico.

5.- Para evitar la polispermia existen eventos a corto y largo plazo ¿Cuáles son y cómo interviene el
Na​+​ y la polaridad?

Bloqueo rápido: Es un mecanismo físico. Al ingresar el primer espermatozoide, ingresan a su vez

iones de Na​+​ o K​+​ que despolarizan la membrana e impiden el ingreso de más espermas al haber
carga positiva tanto en el espacio intracelular como en el extracelular.

Bloqueo lento: Se da por un mecanismo químico. La información genética del espermatozoide se

fusiona con el óvulo, esto aumenta la concentración de Ca​2+​ que es usado como señal para activar los
gránulos corticales que se encuentran alrededor de la membrana internamente. Estos se unen a ésta
liberando proteasas para acabar con los otros espermatozoides formando la membrana de
fecundación, además el oocito, libera mucopolisacáridos que repolarizan la membrana creando la
gradiente osmótica que permite un gran ingreso de agua.