ANEXO 1

Curso: Cromatografía
Código: 401542
Nombre de la Tarea: Tarea 1 – Principios cromatográficos

Temáticas a desarrollar:
- Velocidad de migración de solutos: elución cromatográfica, tiempos de
retención, coeficiente de distribución, factor de retención, factor de
selectividad, resolución de la columna, eficiencia de la columna,
factores de retención, selectividad y aplicaciones.
- Cromatograma: ensanchamiento de banda, resolución de picos
cromatográficos y selectividad.
- Cromatografía plana: generalidades, fase estacionaria y fase móvil,
métodos de detección (revelado), metodologías usadas para la
cromatografía en papel, preparación de placas de cromatografía en
capa fina y aplicaciones.
- Cromatografía en columna: generalidades, fase estacionaria y fase
móvil.

Fecha de desarrollo: 6 de septiembre al 26 de septiembre de 2019

Nombre del estudiante: ___JUAN MANUEL

VILLEGAS__________________________
Código: __16861701______________
Programa: Ingeniería de Alimentos

EJERCICIO 1 – CROMATOGRAMA Y VELOCIDAD DE MIGRACIÓN DE

SOLUTOS

Tabla 1. Ejercicio 1.1 – Definición de conceptos de velocidad de migración

de solutos
Concepto Definición
Respuesta: analito es
Analito: un componente (elemento, compuesto o ion) de
interés analítico de una muestra que se separa de la

Elución cromatográfica:
Tiempo de retención:
Coeficiente de distribución:
Factor de retención:
Factor de selectividad:
Resolución de la columna:
matriz. Es una especie química cuya presencia
o contenido se desea conocer, identificable y
cuantificable, mediante un proceso de medición
química.
Respuesta: proceso por el cual todos los solutos
terminan por abandonar la columna
Respuesta: tiempo de retención tR: tiempo que tarda
cada sustancia en abandonar el sistema
cromatográfico. Esta retención se ejerce en función de
las características moleculares de cada compuesto.
Respuesta: constante de equilibrio que describe
la distribución de un soluto entre dos fases, para
definir el coeficiente de partición solo se utiliza una
forma de un soluto (kD). Cromatografía: separación
en la que los solutos se distribuyen entre fase móvil y
estacionaria.
Respuesta: es una medida del tiempo que un
compuesto permanece en la fase estacionaria, en
relación con el tiempo que permanece en la fase móvil.
Respuesta: FACTOR DE Selectividad. El factor de
selectividad de una columna para dos solutos A y B se
define como: La selectividad es una manera de medir
la eficiencia de una separación cromatográfica.
Respuesta: Resolución en las
columnas cromatográficas. Una
separación cromatográfica se optimiza variando las
 condiciones experimentales hasta que los
componentes de una mezcla se separan
completamente en el menor tiempo posible.

Respuesta: Los tiempos de retención cromatográficos

son característicos de los compuestos que
representan, pero no son únicos. ... Se puede calcular
a partir del tiempo de retención y de la velocidad de
Eficiencia de la columna: flujo en ml/min: Número de Platos Teóricos (N): es una
medida de la eficiencia de la columna.

Respuesta: En cromatografía de líquidos, la

compresibilidad de la fase móvil se desprecia, por lo
que el factor de corrección de la compresión no se
aplica. ... El factor de retención es una medida del
Factor de retención: tiempo que un compuesto permanece en la fase
estacionaria, en relación con el tiempo que permanece
en la fase móvil.

Respuesta: El factor de selectividad de una columna

para dos solutos A y B se define como:
La selectividad es una manera de medir la eficiencia
Selectividad: de una separación cromatográfica

Respuesta: Las teorías de la dispersión de la banda

en cromatografía de gases y de líquidos son
Ensanchamiento de banda:
prácticamente idénticas

Respuesta: : es una medida cuantitativa de su

capacidad para separar dos analitos (A y B), y permite
evaluar la separación entre dos bandas con
Resolución de picos: respecto a sus anchos:
Referencias bibliográficas: ABBOTT, David y ANDREWS, R. S. Introducción a
la Cromatografía. 3ra. Edición. Colección Exedra. Editorial Alhambra.
-

Tabla 2. Ejercicio 1.2 – Coeficiente de distribución

Concepto Definición Ejemplo

Sustancia que se encuentra

Soluto: Pigmentos y grasa
disuelta en otra.

Respuesta: Un Solvente es la
Solvente: sustancia que forma parte en mayor Agua
cantidad de una solución..
Respuesta: Una Solución es una
mezcla homogénea de dos o más
Solución: Octanol y agua
sustancias.

Respuesta: polar cuando uno de

sus extremos está cargado
positivamente, y el otro de manera
Polar: negativa agua

Respuesta: Apolar es todo

aquello que carece de polos
Apolar: octanol
 Respuesta: es una sustancia que
tiene afinidad por el agua.
Hidrófilo: agua

Respuesta: es aquellas sustancias

que son repelidas por el agua o que
Hidrófobo: no se pueden mezclar con ella. octanol

Respuesta: Una mezcla es un

material formado por dos o más
componentes unidos, pero no Pigmentos y grasa
Mezcla: combinados químicamente.

Respuesta: que dos sustancias no

son capaces de combinarse para
formar una mezcla homogénea. Se
Inmiscible: dice que los componentes son Agua y grasas
"inmiscibles".

Concepto Definición Fórmula

Respuesta: es una magnitud que
depende únicamente de la
temperatura y en algunos casos si
puede depender de la concentración
Coeficiente de
pues algunas veces el soluto existe
distribución: en formas disociadas o asociadas
en una de las fases.

Relación de conceptos
Cuando el coeficiente de distribución tiene un valor ________, la
concentración del soluto en un solvente apolar es ________ que la
concentración del soluto en un solvente polar. Por el contrario, si el
coeficiente de distribución tiene un valor ________, la concentración del
soluto en el solvente apolar es ___52_____ que la concentración del soluto
en un solvente polar.
Referencias bibliográficas:
-

Tabla 3. Ejercicio 1.2 – Factor de retención

Cromatograma 1 Cromatograma 2
Factor de retención (k’) 4,5 11
Fase más densa (solvente)
Soluto
Concepto Definición
Respuesta: El cromatograma es un registro gráfico
bidimensional obtenido en un medio absorbente, que
Cromatograma: muestra la separación de sustancias mediante una
cromatografía.

Respuesta: El tiempo de retención en un

separador se determina dividiendo el volumen del
líquido dentro del recipiente por la tasa de flujo del
Tiempo de retención (tR): líquido.

Respuesta: El tiempo muerto es el tiempo requerido

para la elución de un componente no retenido (ver la
Figura 1, mostrado como un pico de aire o de
Tiempo muerto (tM): componente no retenido, con la escala de la línea
base en minutos).

Respuesta:
Ancho de banda (W):
Respuesta: Es la señal ofrecida por el detector ante
Señal en un cromatograma: una determinada variación

Referencias bibliográficas: 1.- Análisis Instrumental Rubinson y Rubinson 2001

Editorial Pretice Hall
 2.- Análisis Químico Cuantitativo Daniel Harris 3era edición 2007 Editorial Reverté
3.- Principios de Análisis Instrumental Skoog Holler Nieman

Tabla 4. Ejercicio 1.2 – Cromatograma

Compuesto pico “a” Compuesto pico “b”
Tiempo de
retención
corregido
(tR’)
Factor de
retención
(k’)
Número de
platos
teóricos (N)
Altura de
plato (H)
Factor de
selectividad
(α)
Resolución
(Rs)
Resolución
con relación
al factor de
retención
Resolución
con relación
a la
selectividad
Resolución
con relación
a la
eficiencia
 Tabla 5. Ejercicio 1.2 – Características de un cromatograma
Pregunta Respuesta
¿Qué indica el tiempo de Respuesta:
retención en el análisis
cromatográfico realizado?
¿Qué indica el número de Respuesta:
platos?
Respuesta:
¿Qué indica la altura de plato?
¿Qué relación tiene la Respuesta:
resolución con el factor de
retención, la selectividad y la
eficiencia?
Referencias bibliográficas:
-

EJERCICIO 2 – CROMATOGRAFÍA PLANA

Tabla 6. Ejercicio 2.1 – Definición de conceptos de cromatografía plana

Concepto Definición
Respuesta:
Fase estacionaria:
Respuesta:
Fase móvil:
Respuesta:
Métodos de detección o revelado:
Respuesta:
Cromatografía de papel:
Respuesta:
Cromatografía en capa fina:
Referencias bibliográficas:
-
 Tabla 7. Ejercicio 2.2 – Cálculo Rf ensayo 1 y 2
Muestra “a”
Ensayo 1
Cálculo de Rf.

Muestra “a”

Cálculo de Rf.

Muestra “b”

Cálculo de Rf.

Ensayo 2
Muestra “c”

Cálculo de Rf.

Muestra “d”

Cálculo de Rf.

Tabla 8. Ejercicio 2.2 – Justificación ensayos 1 y 2

Pregunta Respuesta
Para el ensayo 1, ¿qué significa Respuesta:
que la muestra “d” presentara
un desplazamiento de 2,8 cm y
la muestra patrón fue de 3,3?
Para el ensayo 2, ¿por qué se Respuesta:
empleó esa composición de
fase móvil?
Para el ensayo 2, ¿Por qué la Respuesta:
muestra “c” no presentó un
desplazamiento con la
composición de la fase móvil?
Para el ensayo 2, ¿por qué se Respuesta:
tiene un frente de disolvente?
Para el ensayo 2, indique desde Respuesta:
la estructura de cada muestra,
cuál es la afinidad con la fase
móvil.
Referencias bibliográficas:
-

EJERCICIO 3 – CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA

Tabla 9. Ejercicio 3 – Cromatografía de columna

Cromatografía en
Aspecto Cromatografía plana
columna
Eluyente
Se realiza por la
distancia recorrida de la
Separación
muestra en la fase
estacionaria
Longitud de la fase
estacionaria
Velocidad de flujo
Tiempo de separación
Cantidad de muestras Se pueden separar
a separar varias muestras.
Fase móvil
Fase estacionaria
Detección
Factores que influyen
en la separación
Afinidad de la fase
móvil con la polaridad
de los analitos
Referencias bibliográficas:
-