UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y TEXTIL

Departamento Académico de Cursos Electivos

BIOQUIMICA Y MICROBIOLOGIA
“BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO-TÉCNICAS DE TRABAJO EN
MICROBIOLOGÍA”
INTEGRANTES:
- ARGUMÉ SANDOVAL, JOSÉ
- BARZOLA YAUCE, NICK
- CARHUAPOMA LA SERNA, JOSE
- HUAMANI HURTADO, JAMIL

DOCENTES:
- PhD. NIETO JUAREZ, JESSICA
- Ing. ROJAS OROSCO, JANET

LIMA – PERÚ,
2019

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ÍNDICE
1. OBJETIVOS ........................................................................................................................ 3
2. FUNDAMENTO TEÓRICO .............................................................................................. 3
3. PARTE EXPERIMENTAL ................................................................................................ 4
3.1. Bioseguridad en el laboratorio ................................................................................... 4
a) Observaciones ............................................................................................................... 4
b) Conclusiones ................................................................................................................. 5
c) Recomendaciones .......................................................................................................... 5
3.2. Técnicas de trabajo en microbiología .................................................................... 5
a) Observaciones ............................................................................................................... 5
ESTERILIZACIÓN EN LA AUTOCLAVE .................................................................... 5
MANEJO DE MICROPIPETAS ....................................................................................... 6
HORNOS ............................................................................................................................. 6
b) Conclusiones ................................................................................................................. 6
c) Recomendaciones .......................................................................................................... 6
4. Bibliografía .......................................................................................................................... 6
5. APLICACIÓN INDUSTRIAL ........................................................................................... 7
6. CUESTIONARIO................................................................................................................ 7

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 1. OBJETIVOS
 Conocer las normas básicas de seguridad biológica en el laboratorio.
 Reconocer e identificar las señales de seguridad dentro del laboratorio 14 en el
cual se trabajará.
 Proponer alternativas de mejora, para el laboratorio, en el ámbito de seguridad.
 Tener una idea de cómo sería un apto laboratorio de bioquímica y microbiología.

2. FUNDAMENTO TEÓRICO
La BIOSEGURIDAD, se define como el conjunto de medidas preventivas, destinadas a
mantener el control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes biológicos,
físicos o químicos, logrando la prevención de impactos nocivos. (Bolano, 2011)
La bioseguridad debe entenderse como una doctrina de comportamiento encaminada a
lograr actitudes y conductas que disminuyan el riesgo del trabajador de la salud de
adquirir infecciones en el medio laboral. Compromete también a todas aquellas otras
personas que se encuentran en el ambiente asistencial, ambiente éste que debe estar
diseñado en el marco de una estrategia de disminución de riesgos. (Ministerio de Salud,
2004)
Clasificación de la OMS de los microorganismos infecciosos por grupos de riesgo
Grupo de riesgo 1 (riesgo individual y poblacional escaso o nulo)
Microorganismos que tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser
humano o los animales.
Grupo de riesgo 2 (riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo)
Agentes patógenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero que
tienen pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio,
la población, el ganado o el medio ambiente. La exposición en el laboratorio puede
provocar una infección grave, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces y
el riesgo de propagación es limitado.
Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo)
Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades humanas o animales graves, pero
que de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen medidas preventivas y
terapéuticas eficaces.
Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado)
Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los
animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente.
Normalmente no existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.
(Organización Mundial de la Salud, 2005)

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 3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Bioseguridad en el laboratorio
a) Observaciones
 El laboratorio donde se realizan las prácticas es uno destinado a la eduación
universitaria, por lo que cuenta con un nivel de bioseguridad nivel 1 (NBS-1).
 Entre las principales señales que encontramos en el laboratorio son las siguientes:

Señal Significado Foto de referencia

Atención: Riesgo eléctrico
Encontramos una al frente
del portón de salida.

Luces de emergencia
Se encuentran en los
pasillos de salida en caso
de apagón.

Salida guía
Orientan al portón de salida
del laboratorio y se
encuentran en el interior
del laboratorio

Extintor
Se encuentra en el interior
del laboratorio, pero el
extintor no se encuentra
presente.

Tacho de residuos sólidos

Ubicado en el portón de
ingreso al laboratorio

Prohibido el ingreso a
personas no autorizadas
Ubicada en la puerta de
ingreso al almacén de
equipos de laboratorio.

4
 Prohibido el ingreso con
alimentos
Ubicado en el interior del
laboratorio

Prohibido fumar
Ubicado en el interior del
laboratorio.

Salida
Se encuentra en el portón
de salida del laboratorio.

b) Conclusiones
 Después de haber hecho el recorrido al laboratorio podemos bosquejar un
diseño del laboratorio, el cual será anexado al final del informe.
c) Recomendaciones
 Como ya se mencionó en las observaciones, se debería contar con un
extintor ante cualquier caso de incendio y este debe estar posicionado en
un área fácil de acceso como el lado derecho del portón de salida.
 Se debería implementar la señalización de uso de batas en los laboratorios
de investigación debido a que las personas dentro se encuentran expuestas
a peligros químicos.
3.2.Técnicas de trabajo en microbiología
a) Observaciones
ESTERILIZACIÓN EN LA AUTOCLAVE
 Las placas Petri son embolsadas por plásticos esterilizados, la placa Petri
que se encuentra en la parte superior de todas debe llevar un sticker de
verificación para la esterilización
 En el caso de los Erlenmeyer solo es necesario tapar la boquilla con papel
aluminio para realizarse la esterilización
 La esterilización que realizamos en el laboratorio es un método físico
donde solo utilizamos como agente desinfectante al vapor de agua a altas
temperaturas en la autoclave.
 La autoclave cuenta con un tubo de escape en la parte superior al costado
del manómetro, una vez que de este fugue vapor será el momento de cerrar
esta tubería con la llave anexada a este tubo.
 Una vez cerrada la llave del tubo de escape de la autoclave la presión
dentro de la autoclave comenzará a elevarse, este puede ser visualizado en
el manómetro y puede ser controlado abriendo o cerrando la llave de la
tubería de escape de vapor de agua.
 Debido a que nuestra autoclave tenía incorporada un manómetro con
sensor regulador una vez que el manómetro sobrepasaba los 15 psi una
ranura de escape era activada reduciendo la presión dentro del autoclave.

5
  Después de haber pasado el tiempo determinado para la esterilización (20
minutos), al retirar las placas Petri podemos visualizar la presencia de una
línea negra en el sticker colocado al inicio de la esterilización,
confirmando que se realizó de manera correcta esta operación.
MANEJO DE MICROPIPETAS
 Debido a que los volúmenes que usaremos para los cultivos en placas Petri
son muy pequeños se usan micropipetas las cuales se encuentran en un
colgador cada una identificada con el volumen correspondiente que estas
pueden absorber.
 Algunas micropipetas son fijas es decir sólo absorben el volumen indicado
en estas mientras que otras son regulables mediante un anillo en la parte
superior de estas micropipetas, de esta manera podemos modificar la
cantidad en la parte decimal, el número de decimales depende de la marca
de la micropipeta siendo de 2 o de 3 decimales.
 En caso de usar una micropipeta esta tendrá que ser utilizada con boquillas
descartables para evitar la contaminación de la próxima sustancia a
utilizar.
HORNOS
 En el laboratorio se cuentan con 3 hornos, uno que está en desuso debido
a fallas en la regulación de temperatura, el segundo que es digital con un
sistema de regulación funcionando en condiciones óptimas y el tercero que
es más considerado en procesos de conservación a bajas temperaturas.
b) Conclusiones
 La esterilización mediante la autoclave vendrá a ser la operación más
común en todas las prácticas del laboratorio de microbiología porque lo
que es necesario dominarla.
c) Recomendaciones
 Al igual que en cualquier tipo de laboratorio se deben tener extremado
cuidado al manipular los equipos ya que muy aparte de ser costosos,
perjudicarían a la ejecución de algún tipo de práctica posterior.
 En caso de tener algún percance con los equipos consultar con los
profesores a cargo.

4. Bibliografía
 Bolano, A. (2 de Julio de 2011). SlideShare. Obtenido de
https://es.slideshare.net/doctor-Alfredo-Bolano/bioseguridad-en-el-laboratorio
 Ministerio de Salud. (2004). En PRONAHEBAS, MANUAL DE
BIOSEGURIDAD (pág. 11). Lima.
 Organización Mundial de la Salud. (2005). Manual de bioseguridad en el
laboratorio.

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 5. APLICACIÓN INDUSTRIAL

Bioseguridad en el laboratorio: medidas importantes para el trabajo seguro

El profesional del laboratorio de análisis clínicos, de diagnóstico o de patología clínica
está siempre expuesto a la posibilidad de infectarse con muestras de patógenos altamente
infecciosos. Las medidas de bioseguridad que deben tomarse en cuenta en la práctica
laboral ya fueron establecidas por organismos nacionales e internacionales y deben ser
seguidas a plenitud. A pesar de ello, y por falta de conocimiento del riesgo en el manejo
del material contaminado, del tipo de muestra que se procesa o de las medidas de
bioseguridad que se deben seguir, así como la falta de un equipo de protección adecuado,
condiciones laborales inhóspitas y un incorrecto desecho del material infeccioso, se
presentan accidentes de trabajo. En este artículo, el principal objetivo es dar a conocer de
manera general la importancia de la bioseguridad en los laboratorios que manejen
material biológico infeccioso.
Comentario
Como responsables o miembros de un laboratorio, tenemos la obligación de conocer las
medidas de bioseguridad relativas a nuestro trabajo. Para ello, debemos de ser capaces de
identificar el grupo de riesgo al que pertenece el patógeno con el que estemos en contacto
y, el nivel de bioseguridad al que corresponde el laboratorio. También debemos estar al
tanto de las precauciones universales que se deben tomar en cualquier tipo de instalación.

6. CUESTIONARIO

1. Indicar 5 posibles causas de riesgo en el laboratorio y justificar su respuesta.

 La localización del extintor. Al estar alejado de las mesas de laboratorio y
estar en el piso, no facilita su localización y en los segundos que uno se
demora en encontrarlo y llevarlo hasta el lugar del incendio, pueden ser
vitales para apagarlo.
 Al utilizar la campana extractora hay un posible riesgo eléctrico puesto
que los cables necesitan mantenimiento y están expuestos y muy cerca a
la campana existe una mesa la cual representa un riesgo, ya que en caso de
emergencia obstruye el paso.
 Riesgo eléctrico por las conexiones expuestas.
 Riego químico dentro del laboratorio ya que hay productos que no están
etiquetados y carecen de pictogramas.
 Los tachos no están rotulados, pueden tener residuos no dañinos hasta
sustancias corrosivas y toxicas.

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2. Cree usted, que se necesiten señalización y/o pictogramas en el laboratorio donde
se realiza la práctica de laboratorio del curso de bioquímica y microbiología, diga
cuales y donde debería ir (puede realizar un esquema).
En la puerta del laboratorio de
bioquímica y microbiología
debería ir el símbolo de seguridad
biológica.

No hay una señalización del

extintor en donde está el extintor

Etiquetado para cada tacho, y si es

posible agregar tachos con sus
respectivos colores

En la puerta del almacén no se ha

visto una señal. El almacén
contiene todos los químicos a
utilizar y hay que tener cuidado
ante un peligro de incendio.

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 3. Elaborar un diagrama de proceso para la manipulación de residuos sólidos en el
laboratorio.

4. Que criterios deberían tener en cuenta para el manejo de los residuos sólidos de la
facultad.

En todos los laboratorios se deberían tener en consideración generalmente los siguientes

puntos:
 Se debe manejar siempre un actuar con la menor afectación al medioambiente.
 Reducir en lo posible la empleabilidad de un determinado reactivo,
microorganismo para evitar una contaminación generalizada en la zona de trabajo.
 Clasificar los residuos sólidos y determinar si estos son “no peligrosos”,
“peligrosos” o “peligrosos especiales”.
 En cada una de estas clasificaciones ver la manera de un tratamiento previo a la
disposición final.

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  Determinar qué tipo de tratamiento es el adecuado desde el punto de vista
económico y medioambiental para el residuo en consideración y el procedimiento
para llevarlo a cabo.
 Procurar en lo posible recuperar los residuos sin dañar sus características
operativas.

5. Dibujar las cabinas de bioseguridad de contención 3 y 4.

CABINA CLASE 2 CABINA CLASE 3

Ideal para laboratorio NBS-3 Ideal para laboratorio NBS-4

El aire que succiona desde el laboratorio
tiene una velocidad lineal aproximada de
100 pies lineales por minuto.
Los conductos contaminados,
positivamente presurizados, están
rodeados por conductos de aire
negativamente presurizados.
Cualquier fuga en el conducto
contaminado se quedará en la cabina y no
llegará al medio ambiente.
Recicla el 70% del aire dentro de la
cabina.
Permite el uso de químicos no inflamables
que deban ser usados coincidencialmente
con ageste de bajo o moderados riesgo
biológico.
Es una cabina totalmente cerrada. Su
construcción es sellada a los gases
Suministra máxima protección al
trabajador y al ambiente. La ventana es
sellada, no es posible abrirla
La colocación de los materiales dentro de
la cabina se realiza a raves de una caja de
paso, doble puerta sellada, que puede ser
descontaminada entre usos.
La inyección y la extracción del aire a la
cabina se realiza a través de filtros de
HEPA
El aire extraído pasa a través de dos o un
filtro de HEPA y a través de un
incinerador

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 6. Realizar esquema sobre proceso de esterilización para cultivar una cepa bacteriana
en la placa Petri.

El método por calor húmedo consiste en el uso de vapor saturado en una autoclave. La
autoclave destaca entre los procedimientos más comunes para esterilizar los medios de
cultivo y el material del laboratorio. Este quipo utiliza el vapor de agua contenido en una
olla cerrada para elevar la presión en su interior y la temperatura durante 20 min que es
el tiempo adecuado para la destrucción de virus, bacteria y hongos.
7. ¿Cuál es la diferencia entre una incubadora normal y una con aire forzado?
La incubadora es un equipo diseñado para mantener una cámara a temperatura, atmósfera
y humedad controladas, con el fin de conservar organismos vivos en un entorno que
resulte adecuado para su crecimiento. Entre las aplicaciones más comunes, se citan las
siguientes: incubación de cultivos bacteriológicos, virales, micológicos, celulares,
determinación de la demanda biológica de oxígeno (DBO) y conservación de biológicos.
“La diferencia fundamental de una incubadora normal y una con aire forzado es el medio
de transferencia de calor”.
Incubadora Normal: Gobernada por la conducción térmica. El conjunto de resistencias
eléctricas transfiere directamente el calor a las paredes de la cámara, donde se incuban las
muestras. Las resistencias constituyen una región de alta temperatura, mientras que la
cámara es una región de menor temperatura.
Incubadora con aire forzado: Gobernada por la convección térmica. El calor generado por
el sistema de resistencias es transferido a un fluido –aire– que circula en la cámara de
incubación, transfiriendo el calor a las muestras; la eficiencia de este proceso depende de
los patrones de flujo del mismo. En general el aire ingresa a la incubadora por la parte
inferior y es calentado en un compartimiento, desde el cual fluye a la cámara de
incubación.

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 8. ¿Cuál es la temperatura y el tiempo que se requiere para lograr la
esterilización de materiales en el horno seco?
Para esterilizar materiales de laboratorio en horno seco se requieren las siguientes
relaciones de temperatura (°C) y tiempo (horas):
 160°C – 1 hora
 170°C – 40 min.
 180°C – 20 min.

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