Кафедра патофизиологии ВГМУ

Методическая разработка для студентов

к лабораторному занятию по теме:

ПАТОФИЗИОЛОГИЯ ИНФЕКЦИОННОГО ПРОЦЕССА

Роль биопленок в инфекционной патологии человека

Прокариоты в природе существуют в двух формах с различными стратегиями выживания.

Свободно живущие популяции микроорганизмов с интенсивным клеточным делением и
развитыми системами активной и пассивной подвижности, быстро распространяющиеся в среде,
относятся к планктонным формам. «Оседлые», сессильные формы (sessile cell) имеют
выраженные механизмы специфической адгезии к поверхности различных субстратов, они
характеризуются медленной скоростью роста популяций и способностью агрегироваться в
клеточные консорциумы. Популяции сессильных клеток формируют биопленки – сообщества
клеток, адгезированных на субстрате.
Т.о., биопленки представляют собой образования, состоящие из живых клеток прокариот
(около 15%), погруженных в виде микроколоний в экзополимер-полисахаридный матрикс (на
долю которого приходится около 85% объема). В состав поверхностной оболочки и матрикса
биопленок входят белки, полисахариды, липиды и нуклеиновые кислоты.
В цикле формирования биопленки выделяют 4 стадии с общими особенностями,
независимо от типа микроорганизмов:
1. Стадия адгезии;
2. Стадия необратимого связывания с поверхностью;
3. Стадия созревания;
4. Стадия распространения.
На сегодняшний день предполагается, что 90% изученных видов таксономического домена
Bacteria способны формировать биопленки. Явление образования сложных консорциумов
прокариотами универсально в природе. Первые биопленки были обнаружены в природных
экосистемах. Непатогенные бактерии, комменсалы человека, существуют также в виде сложных
мультивидовых сообществах, образуя микроценозы кожи, кишечника, слизистых. Роль биопленок
в инфекционной патологии была оценена практически сразу же после их обнаружения, когда было
установлено, что сессильные формы бактерий малочувствительны к механизмам
неспецифической и специфической иммунной защиты, а также к действию антибактериальных
препаратов.
Микробиологические исследования показали, что в биопленке по-иному, в сравнении с
чистыми культурами бактерий, происходят их многочисленные физиологические процессы, в том
числе продукция метаболитов и биологически активных веществ. Сообщество организует единую
генетическую систему в виде плазмид-кольцевых ДНК, несущих поведенческий код для членов
биопленки, определяющих их пищевые (трофические), энергетические и другие связи между
собой и внешним миром. Последнее получило название «социальное поведение (quorum sensing)
микроорганизмов». Реакция микроорганизмов на изменение условий окружающей среды в
биопленке существенно отличается от реакции каждого отдельного вида в монокультуре. Такая
организация обеспечивает ее физиологическую и функциональную стабильность и,
следовательно, является залогом конкурентного выживания в экологической нише.
В настоящее время известно, что бактерии способны колонизировать и формировать
биопленки на любых медицинских имплантатах, катетерах, эндотрахеальных трубках, а также
поверхности кожи, слизистых оболочек, зубов и т.д. Микроорганизмы, образующие биопленки,
отличаются повышенной выживаемостью, что создает серьезную проблему в медицинской
практике, поскольку в хирургических и реанимационных отделениях клиник широко
используются различные инвазивные материалы. Образование биопленок при этом ведет к
возникновению тяжелых инфекционных осложнений, в т. ч. сепсиса, ассоциированных с
применением катетеров, устройств для искусственной вентиляции лёгких и др.
 К настоящему времени накопилось значительное количество данных о том, что
микроорганизмы в составе биоплёнки влияют на течение хронических воспалительных
заболеваний. До 60% инфекций (инфекции дыхательных и мочевыводящих путей, остеомиелиты,
эндокардиты, инфекционные осложнения при муковисцидозе, и др.) вызваны сессильными
формами бактерий. Формирование биопленок в очаге воспаления ведет к хронизации
инфекционного процесса и сопровождается неудовлетворительными результатами
антибиотикотерапии. Биопленки обладают высоким уровнем устойчивости к действию антител,
антибиотиков, антисептиков, дезинфектантов, а также к фагоцитам. К сожалению, стандартные
методы антибактериального лечения направлены на отдельно существующие планктонные клетки,
тогда как бактерии внутри биоплёнки размножаются и вновь диссеминируют после завершения
курса лечения, нередко формируя очаги хронической персистирующей инфекции, способствуя
рецидивированию заболевания. Когда биопленки достигают определенного размера, от них
начинают отрываться части, которые разносятся с кровотоком по организму.
К числу заболеваний, связанных с присутствием биоплёнок, относят инфекции мочевых
путей (вызванные E. coli и другими бактериями), мочекаменную болезнь, катетер-
ассоциированные инфекции кровотока – КАИК (золотистый и коагулазонегативные стафилококки,
другие бактерии и грибы рода Candida), стоматологические проблемы (зубной камень, кариес,
гингивит), хронический простатит, инфекции среднего уха у детей (обусловленные, например,
Haemophilus influenzae), хронический синусит, хроническую обструктивную болезнь лёгких
(ХОБЛ), муковисцидоз, инфекционный эндокардит, хронический остеомиелит, инфекции
протезированных клапанов и суставов и т.д.
Сейчас не вызывает сомнений необходимость пересмотра концепции патогенеза различных
хронических инфекций, используя имеющиеся данные о биопленках. В практическом отношении
это требует внедрения новых методов диагностики и лечения. Среди методов, которые позволяют
идентифицировать микроорганизмы в составе биопленок, можно назвать современные
молекулярные методы (электрофорез в геле и высокоэффективную жидкостную хроматографию с
флюоресцентной гибридизацией in situ). В клинических лабораториях всё шире используют
полимеразную цепную реакцию (ПЦР), ПЦР с обратной транскриптазой и другие исследования.
Терапевтическое воздействие на биопленки может быть направлено на механизмы
первоначальной адгезии бактерий к поверхности, блокирование синтеза или разрушение
полимерного матрикса, нарушение обмена информацией между членами сообщества
микроорганизмов, и сочетание вышеперечисленных методов с бактерицидными препаратами.
Способом улучшения проникновения в биопленку антимикробных препаратов может являться и
совершенствование форм их доставки. Подобное лечение, действующее на структуру или
функции биопленок, может оказаться более эффективным, чем стандартная антибактериальная
терапия.

Использованные источники:

1. Бактериальные биопленки и инфекции - В.В. Гостев, С.В. Сидоренко - Научно-

исследовательский институт детских инфекций ФМБА России, Санкт-Петербург.
2. Обзор методов борьбы с микробными биоплёнками при воспалительных заболеваниях
— П.А. Хренов, Т.В. Честнова — Вестник новых медицинских технологий – 2013 – № 1
Электронное издание.

Методическая разработка составлена

ст. преподавателем кафедры
И.В. Лигецкой