2.

Resultados y Cálculos

Tabla 1. Datos de curva estándar de Maltosa

Maltosa Abs.
(mg/ml) 540nm
0.000 0.000
0.383 0.151
0.787 0.331
1.195 0.516
1.6 0.694
2.01 0.858
Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las enzimas

1
0.9
0.8
0.7
Absorbancia (540nm)

0.6 y = 0.4327x - 0.0059

R² = 0.9995
0.5
0.4
)

0.3
0.2
0.1
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5
-0.1
Maltosa (mg/ml)

Figura 1. Curva estándar de maltosa

Cálculo demostrativo de la determinación de la concentración de maltosa (0,1%)

𝑦 = 0,4327𝑥 − 0,0059

𝑦 + 0,0059
𝑥=
0,4327

0,419 + 0,0059
𝑥=
0,4327

𝑥 =0,98197365 (mg/ml)
 Tabla 2. Datos obtenidos a Temperatura 20 °C
Tiempo Abs. Maltosa
(min) 540nm (mg/ml)
0 0 0
3 0,262 0,61913566
6 0,495 1,15761498
9 0,747 1,74000462
12 0,96 2,23226254
Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las enzimas

2.5

2
Maltosa (mg/ml

1.5

1 y = 0.1862x + 0.0327
R² = 0.9987
0.5

0
0 2 4 6 8 10 12 14
tiempo (min)

Figura 2. Maltosa vs Tiempo a 20 °C

Tabla 3. Datos obtenidos a Temperatura 30 °C

Tiempo Abs. Maltosa
(min) 540nm (mg/ml)
0 0 0
3 0,475 1,11139358
6 0,759 1,76773746
9 1,062 2,46799168
Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las enzimas

3
Maltosa (mg/ml

y = 0.2687x + 0.1277
2.5
R² = 0.9834
2

1.5

0.5

0
0 2 4 6 8 10

tiempo (min)
Figura 3. Maltosa vs Tiempo a 30 °C
 Tabla 4. Datos obtenidos a Temperatura 40 °C
Tiempo Abs. Maltosa
(min) 540nm (mg/ml)
0 0 0
1 0,21 0,49896002
2 0,419 0,98197365
3 0,566 1,32170095
5 0,919 2,13750867
Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las enzimas

2.5
Maltosa (mg/ml

y = 0.4221x + 0.0594
2 R² = 0.9958
1.5

0.5

0
0 1 2 3 4 5 6

tiempo (min)
Figura 4. Maltosa vs Tiempo a 40 °C

Tabla 5. Datos obtenidos a Temperatura 50 °C

Tiempo Abs. Maltosa
(min) 540nm (mg/ml)
0 0 0
3 0,705 1,64293968
6 1,217 2,82620753
Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las enzimas

3.5
Maltosa (mg/ml

3 y = 0.471x + 0.0766
R² = 0.9913
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0 1 2 3 4 5 6 7

tiempo (min)
Figura 5. Maltosa vs Tiempo a 50 °C
 Tabla 6. Datos obtenidos a Temperatura 60 °C
Tiempo Abs. Maltosa
(min) 540nm (mg/ml)
0 0 0
1 0,621 1,4488098
2 0,936 2,17679686
Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las enzimas

2.5
Maltosa (mg/ml

y = 1.0884x + 0.1201
2 R² = 0.9647

1.5

0.5

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5

tiempo (min)
Figura 6. Maltosa vs Tiempo a 60 °C

Tabla 7. Datos obtenidos a Temperatura 70 °C

Tiempo Abs. Maltosa
(min) 540nm (mg/ml)
0 0 0
1 0,825 1,92026808
2 1,132 2,62976658
Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las enzimas

3
Maltosa (mg/ml

y = 1.3149x + 0.2018
2.5
R² = 0.934
2

1.5

0.5

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5

tiempo (min)
Figura 7. Maltosa vs Tiempo a 70 °C
 Cálculo demostrativo de la velocidad relativa

𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑
𝑣 𝑟𝑒𝑙𝑎𝑡𝑖𝑣𝑎 = 𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑚á𝑥𝑖𝑚𝑎 x 100%

0,1862
𝑣 𝑟𝑒𝑙𝑎𝑡𝑖𝑣𝑎 = 1,3149 x 100%

𝑣 𝑟𝑒𝑙𝑎𝑡𝑖𝑣𝑎 =14,16

Cálculo demostrativo de la Temperatura Real

T real= 0,1*T enzima+0,9*T sustrato

T real= (0,1*50) + (0,9*75)

T real= 72,5

Tabla 8. Valores de velocidad relativa

Temperatura Temperatura Velocidad Velocidad Relativa (%)
(°C) Real (°C)
20 20 0,1862 14,1607727
30 30 0,2687 20,4350141
40 40,342 0,42210 32,1013005
50 50 0,471 35,8202145
60 59,12 1,0884 82,7743555
70 68 1,3149 100
75 72,5 0,7325 55,7076584

Fuente: Laboratorio de Ingeniería de las enzimas

120

100
velocidad relativa (%)

80

60

40

20

0
0 10 20 30 40 50 60 70 80
temperatura real ( °C)

Figura 8. T. real vs V. relativa

 Cálculo de Factor de dilución real
10,0050
𝐹. 𝐷. = = 49,875
0,2006

Cálculo demostrativo de la actividad enzimática

0,4221 𝑚𝑔 𝑚𝑎𝑙𝑡𝑜𝑠𝑎 1𝑚𝑚𝑜𝑙 103 𝜇 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑎𝑙𝑡𝑜𝑠𝑎 1𝑚𝑙 𝑉𝑇

𝑉= ∗ ∗ ∗ ∗ 49,8753
𝑚𝑙 ∗ 𝑚𝑖𝑛 342,3 𝑚𝑔 𝑚𝑎𝑙𝑡𝑜𝑠𝑎 1𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑎𝑙𝑡𝑜𝑠𝑎 0,1 𝑚𝑙 𝑒𝑛𝑧𝑖𝑚𝑎

Uβ
𝑉 = 615,0267
𝑚𝑖𝑛

Actividad enzimática de la β amilasa a diferentes temperaturas.

Temperatura (°C) Velocidad (mg/ml*min) Actividad (U/ml Enzima)
20 0,1862 271,9836
30 0,2687 392,4920
40 0,4221 615,0267
50 0,471 686,2771
60 1,0884 1585,868
70 1,3149 1915,893
75 0,7325 1067,299