Desinfección - Calidad de Agua

FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO
PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LABORATORIOS
LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 1 de 18
INFORMACIÓN BÁSICA
NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación de cloro residual en agua PRÁCTICA No.: 001

potable y cuantificación de coliformes totales y fecales
ASIGNATURA: Calidad Ambiental
TEMA DE LA PRÁCTICA: Determinación de cloro residual y cuantificación de coliformes totales y fecales
LABORATORIO A UTILIZAR:
LABORATORIO AGUA AIRE Y SUELO (Laboratorio a confirmar)
TIEMPO: 4 horas TRABAJO GRUPAL: TRABAJO INDIVIDUAL:

X
CONTENIDO DE LA GUÍA
(Para elaborar por el Docente)
COMPETENCIAS DISCIPLINARES. Aplica y analiza los fundamentos de clase a través de la práctica de
laboratorio validando los conceptos de desinfección, cloro residual, cloro combinado, demanda de
cloro, contaminación por coliformes (totales y fecales) y calidad de agua mediante la ejecución de una
práctica con componentes químicos y biológicos.
Conocer los diferentes subproductos que se pueden generar en la etapa de desinfección en aguas,
así como también conocer la técnica analítica de Cuantificación de Cloro Residual Libre, Cloraminas,
Cloro Total y Demanda de Cloro.
COMPETENCIAS INVESTIGATIVAS. Llevar a cabo la determinación de la dosis de cloro a aplicar en
aguas como fuentes de abastecimiento (Demanda de Cloro).
MARCO TEÓRICO.
La cloración es el proceso más utilizado para la desinfección de las aguas para consumo humano
debido a sus ventajas con respecto a costos y disponibilidad frente al resto de agentes oxidantes
fuertes que pueden usarse para el mismo fin (RAS, 2000). Todo sistema de potabilización en Colombia
debe incluir un sistema de desinfección con cloro para asegurar agua potable, no solo a la salida de
la planta sino en el sistema de conducción en la red.
En general, el cloro residual puede estar presente como libre o combinado y se puede escribir:
Cloro Residual total = cloro libre + cloro combinado
Al aplicar cloro al agua pura, se tiene que la relación entre el cloro agregado y el residual de cloro
formado, es directa.
La cuantificación de Cloro Residual se lleva a cabo por la técnica Espectrofotométrica del DPD. Cabe
indicar, que la práctica de Demanda de Cloro tiene como finalidad determinar la dosis óptima de cloro,
que debe agregársele a un agua cruda para que cumpla con el cloro residual después de la salida de
una PTAP. Para que de esta forma, se cumpla con la Normatividad vigente Res. 2115/2007 MPS y se
evite la generación de los Subproductos de Desinfección SPD, los cuales se consideran cancerígenos
y se deben evitar su formación en aguas tratadas.

LABORATORIOS
El objetivo principal del sistema de desinfección es eliminar contaminantes patógenos como virus y
bacterias. Uno de los indicadores ambientales más común, es la presencia de Escherichia coli o E.
Coli, proveniente de la contaminación fecal en el agua. Aguas con E. Coli pueden generar problemas
de gastroenteritis o inclusive la muerte (IDEAM, 2007). Para la detección en laboratorio se usa el
método de filtración por membrana mediante el cual se atrapan en la superficie de la membrana
microorganismos cuyo tamaño es mayor que el tamaño del poro 0.45 um (IDEAM 2007). Las bacterias
quedan sobre la superficie de la membrana para su posterior crecimiento en un medio de cultivo.
Otro de los métodos utilizados es la cuantificación de coliformes totales por NMP/mL, este método se
fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido
y gas al incubarlos a 35°C  1C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales
biliares. Los tubos se consideran positivos cuando presentan turbidez y tienen gases en la campana
de Durham (Universidad de Granda, sf)
Por último se realiza una determinación cualitativa de coliformes fecales por EMB, el cual es utilizado
para el aislamiento selectivo y la diferenciación de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y
escasas exigencias nutricionales (Montenegro Cataño, 2014) y determinación cualitativa de coliformes
fecales por EMB,
CONSULTA PREVIA.
1. ¿Cómo el cloro actúa sobre virus y bacterias para su eliminación? ¿Qué papel juegan los
coliformes totales y la E. coli en la calidad del agua?
2. ¿Cuál es la diferencia ente cloro residual y cloro total?.¿Qué es el cloro combinado? Qué
técnicas son usadas para determinar estos parámetros? ¿Qué es la demanda de cloro, cómo
se calcula?
3. ¿Qué consecuencias tiene adicionar cloro a un agua que tiene altas concentraciones de
materia orgánica?
PALABRAS CLAVE * Desinfección, Cloro Residual, Cloro combinado, Demanda de cloro, E. Coli.
METODOLOGÍA. Esta práctica será desarrollada en grupos de 4 estudiantes, teniendo en cuenta la

siguiente metodología:
1. Ingreso de los estudiantes a la práctica (Cada uno con sus elementos de bioseguridad:
guantes, tapabocas y bata)
2. Entrega y revisión de la consulta previa individual
3. Presentación de quiz individual sobre los objetivos, introducción, el marco teórico y la consulta
previa.
4. Retroalimentación de la consulta previa, incluyendo aclaración de las posibles dudas que
tengan los estudiantes
5. Explicación del procedimiento de la práctica por parte del docente
6. Entrega del material de laboratorio al grupo conformado por 5 estudiantes.
7. Desarrollo de la práctica
8. Realización y entrega del informe de laboratorio en la siguiente práctica de laboratorio
9. Entrega y revisión del material de laboratorio

LABORATORIOS
MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS A UTILIZAR (Para 5 grupos de 5 estudiantes)

La lista de materiales descritos en esta sección corresponde a la cantidad necesaria para llevar a cabo
la práctica por un grupo de laboratorio.
Materiales y Equipos Reactivos Materiales Estudiante
Espectrofotómetro Visible. Yodato de Potasio 1g. Bata de laboratorio
Previamente seco
5 Buretas de 25 mL Yoduro de Potasio 20 g. Guantes de Nitrilo
5 Pinzas para bureta. HCl 6N. (100 mL). Tapa bocas
5 Nueces dobles. Almidón Soluble 5%m/V. 25 mL. Gorro de laboratorio
Disolver 1.25 g almidón en 15 mL
de agua destilada, calentar la
solución y agitar constantemente
hasta disolver todo el almidón,
dejar enfriar y aforar a 25 mL.
5 Pipetas aforadas de 10 mL Tiosulfato de Sodio 0.025N. 250 Agua Cruda 1L en recipiente
mL (1.55g en 250 mL de plástico y 50 mL en recipiente
solución) estéril
5 Balones aforados de 100 mL Ácido acético concentrado. 50 Agua potable 50 mL en
mL recipiente plástico y 50 mL en
recipiente estéril
10 Erlenmeyer de 125 mL. Solución Buffer fosfato. 100
mL. Preparación. Disolver en
aproximadamente en 40 mL de
agua destilada 2.4g de
fosfato ácido disódico y 4.6g de
fosfatodiácido de potasio.
Adicionar 0.08g de la sal disódica
de EDTA disueltos en 40 mL de
agua destilada. Completar a
volumen en un matraz aforado de
100 mL.
5 peras de succión ó succionador. Solución Indicadora de Sulfato
de N,N dietil p-fenilendiamina:
Disolver 0.11g de Sulfato de N;N
dietil p-fenilendiamina y 0.02g de
EDTA disódico en un vaso de
precipitado con
aproximadamente 50 mL de agua
destilada y adicionar 1 mL de
ácido sulfúrico concentrado .
Luego, llevar a un matraz aforado
de 100 mL completando con
agua destilada.
5 Espátulas. Solución caldo Brilla. 500 mL (Ver
especificaciones del envase)
5 Vidrios de Reloj Solución de NaCl 0.85 % m/V.
200 mL esterilizado

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5 Goteros. Solución Buffer fosfato. 100

mL. Preparación. Disolver en
aproximadamente en 40 mL de
agua destilada 2.4g de
fosfato ácido disódico y 4.6g de
fosfatodiácido de potasio.
Adicionar 0.08g de la sal disódica
de EDTA disueltos en 40 mL de
agua destilada. Completar a
volumen en un matraz aforado de
100 mL.
1 Balón aforado de 500 mL Almidón Soluble 5%m/V. 25 mL.
Disolver 1.25 g almidón en 15 mL
de agua destilada, calentar la
solución y agitar constantemente
hasta disolver todo el almidón,
dejar enfriar y aforar a 25 mL.
5 Pipetas graduadas de 10 mL. Tiosulfato de Sodio 0.025N. 250 mL
(1.55g en 250 mL de solución).
8 Balones aforados de 10 mL ó 25 mL Ácido
o 25 acético concentrado. 50 mL
mL.
20 Tubos de ensayo previamente lavados
Solución
y KIO3 0,025N (Disolver
purgados con agua destilada, dejar secar
0.0896 g KIO3 disueltos en 100 mL)
invertidos.
5 Gradillas. Agar Bilis Verde Brillante, para
monitorear E.coli previamente
esterilizado.
4 Tubos de ensayo con 9 mL de NaCl 0.85%
50 mL HCl 6N
m/V previamente esterilizados con tapón de
algodón.
81 tubos de ensayo tapa rosca con
campana de Durham invertida y 9 mL
de Caldo Brilla previamente
esterilizado
1 mechero.
6 Pipetas graduadas de 5 ml
previamente esterilizadas.
15 Frascos ámbar de capacidad de
500 mL.
Manejo de Materiales y Equipo
Para disminuir los factores de riesgo es necesario considerar las siguientes recomendaciones:
El uso de la bata de laboratorio es obligatorio para evitar contacto con la piel o la ropa.
Obligatorio el uso de guantes de nitrilo.
Uso de gafas para manejo de reactivos.
Cada estudiante se debe responsabilizar por el buen manejo de los implementos de laboratorio
asignados para la realización de la práctica. Cualquier daño del material será asumido por el
estudiante, así que se debe ser muy cuidadoso en la utilización de materiales, reactivos y equipos así
como ser muy ordenados para evitar al mínimo incidentes de daño del material, el material que sea
roto debe ser repuesto por cada uno de los grupos de trabajo.

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Asesorarse del profesor en el manejo acertado de un equipo desconocido o del procedimiento correcto
antes de proceder a desarrollarlo.
FRASES H Y P:
A continuación se detalla las frases de Peligro y prevención para los reactivos a utilizar durante
la práctica:
Ácido Acético:
H226: Líquido y vapores inflamables.

H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves.
H332: Nocivo en caso de inhalación. Consejos de prudencia
P210: Manténgase alejado de fuentes de calor, chispas, llama abierta o
superficies calientes.
P280: Llevar guantes, prendas, gafas y máscara de protección.
P301+P330+P331: EN CASO DE INGESTIÓN: Enjuáguese la boca. NO
provoque el vómito.
P305+P351+P338: EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar
cuidadosamente con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de
contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir aclarando. P303+P361+P353: EN
CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo): Quítese inmediatamente
las prendas contaminadas. Aclárese la piel con agua o dúchese.
P501: Elimínense esta sustancia y su recipiente en un punto de recogida
de eliminación residuos especiales o peligrosos, conforme a la
reglamentación local, regional, nacional y/o internacional.
Tiosulfato de sodio:
H411: Tóxico para los organismos acuáticos, con efectos nocivos

duraderos.
P273: Evitar su liberación al medio ambiente
Hipoclorito de Sodio:
H400: Muy tóxico para los organismos acuáticos.
H314: Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves.
P273: Evitar su liberación al medio ambiente.
P301+P330+P331: EN CASO DE INGESTIÓN: Enjuagarse la boca. NO
provocar el vómito.
P303+P361+P353: EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo):
Quitarse inmediatamente las prendas contaminadas. Aclararse la piel con
agua o ducharse.
P304+P340: EN CASO DE INHALACIÓN: Transportar a la víctima al
exterior y mantenerla en reposo en una posición confortable para respirar.
P310: Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN
TOXICOLOGICA o a un médico.

LABORATORIOS
P363: Lavar las prendas contaminadas antes de volver a usarlas.
PROCEDIMIENTO A UTILIZAR
1. Valoración del Tiosulfato
Se traspasa el reactivo Tiosulfato (Na2S2O3) 0.025 N a la bureta, se adicionan en un matraz 10,0 mL (medidos
con pipeta) de la disolución de yodato de potasio 0.025 N, 0.4 g de yoduro de potasio y 3 mL de ácido clorhídrico
concentrado.
Se valora inmediatamente el triyoduro formado mediante la disolución de tiosulfato. Cuando el color de la

disolución empieza a ser débilmente amarillo, se agregan unas gotas de almidón y se sigue valorando hasta
decoloración completa.
El procedimiento debe repetirse con al menos tres alícuotas diferentes de 10,00 mL de disolución de yodato
potásico, lo cual permite obtener el volumen medio de tiosulfato sódico.
Prueba Tiosulfato gastado (mL)

1
2
3
4
V1 + V2 + V3 + V4
𝑉𝑜𝑙. Na2 S2 O3 ∙ 5H2 O = = Vgastado (mL)
4
0,025 N ∗ 10 ml
[Na2 S2 O3 ∙ 5H2 O] = =
Vgastado
En un matraz adicionar: Titular con Tiosulfato

10 mL de yodato de 0.025 N
potasio (KIO3) 0.025 N. (Hasta conseguir una
0.4 g de yoduro de coloración amarilla
potasio (KI) clara)
Seguir titulando con Agregar unas gotas

tiosulfato hasta lograr de almidón hasta
eliminar el color por conseguir una
completo coloración oscura
Medir el volumen
de tiosulfato
gastado y
determinar su
concentración
Diagrama de flujo para la valoración del tiosulfato


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2. Estandarización de la solución de hipoclorito
Prepare una solución madre de hipoclorito de sodio de aproximadamente 100 mg / L.

Al igual que con el tiosulfato, se estandariza la solución madre de hipoclorito preparada.
Coloque 2 mL de ácido acético y 10 a 25 mL de agua libre de demanda de cloro en un matraz. Añadir
alrededor de 1 g KI. Mida en el matraz un volumen adecuado de solución de cloro. Al elegir un volumen
conveniente, tenga en cuenta que 1 ml de Na2S2O3 0.025N es equivalente a aproximadamente 0.9 mg
de cloro. Titule con Na2S2O3 0.025N estandarizado hasta que el color amarillo del yodo casi
desaparezca. Agregue 1 a 2 ml de solución indicadora de almidón y continúe la titulación hasta que
desaparezca el color azul.
Determine el blanco agregando cantidades idénticas de indicador de ácido, KI y almidón a un volumen
de agua libre de demanda de cloro correspondiente a la muestra utilizada para la titulación. Realice la
titulación en blanco A o B, según corresponda.
Prueba Tiosulfato gastado (mL)

1
2
3
4
Donde:
N = normalidad de Na2S2O3,
A = mL titulante por muestra
B = mL titulante para el blanco (Se adiciona o se sustrae de acuerdo a la titulación del blanco requerido.
En un matraz adicionar: Titular con

10 mL solución madre de Tiosulfato 0.025 N
hipoclorito (Hasta conseguir
1 mL ácido acético glaciar una coloración
0.5 gr yoduro de potasio amarilla clara)
Seguir titulando con Agregar unas gotas de

tiosulfato hasta almidón hasta
lograr eliminar el conseguir una
color por completo coloración azul oscura
Medir el volumen de
tiosulfato gastado y
determinar la
concentración real de
cloro en la solución
Diagrama de flujo para la valoración de solución madre de hipoclorito


LABORATORIOS
Curva de calibración de concentraciones de cloro.
Use agua y material de vidrio sin demanda de cloro para preparar los estándares. Desarrollar color
adicionando 5 mL de fosfato y 5 mL de reactivo indicador de DPD en el matraz y luego agregar 10 mL
del estándar de cloro con mezcla completa. Llene el fotómetro o la celda colorimétrica con la solución
del matraz y lea el color a 515 nm. Devuelva el contenido de la celda al matraz y titule con FAS
estándar como un control de la concentración de cloro.
[Cl2] ppm Absorbancia

0,3
0.6
1
1,5
2
3
Una vez realizadas las diluciones

correspondientes, se procede a
Calcular el volumen adicionar en un tubo de ensayo:
correspondiente para 10 mL de muestra
preparar soluciones con 0.5 indicador DPD
concentraciones de cloro de
0.3, 0.6, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0 0.5 Buffer fosfato
ppm de Cl2
Con los datos

obtenidos, realizar la Llenar una celda del
curva de calibración espectofotómetro y
medir la absorbancia a
515 nm.
Procedimiento para realizar la curva de calibración
Medición de cloro residual libre y combinado en agua potable
a. Cloro libre: Coloque 0,5 ml de reactivo fosfato y reactivo indicador DPD en un tubo de ensayo o una
celda fotométrica. Añadir 10 ml de muestra y mezclar. Leer color inmediatamente (Lectura A).
b. Monocloramina: continúe agregando un cristal muy pequeño de KI (aproximadamente 0.1 mg) y
mezcle. Si se espera que la concentración de dicloramina sea alta, en lugar de pequeños cristales,
agregue 0.1 ml (2 gotas) de solución de KI recién preparada (0.1 g/100 ml). Lea el color
inmediatamente (Lectura B).
c. Dicloramina: continúe agregando varios cristales de KI (aproximadamente 0.1 g) y mezcle para
disolver. Dejar reposar unos 2 minutos y leer color (Lectura C).
d. Tricloruro de nitrógeno: coloque un cristal muy pequeño de KI (alrededor de 0,1 mg) en un tubo de
ensayo limpio o una celda fotométrica. Añadir 10 ml de muestra y mezclar. A un segundo tubo o celda,
agregue 0,5 ml de reactivo de tampón e indicador; mezcla. Agregar el contenido al primer tubo o celda
y mezclar. Lea el color inmediatamente (Lectura N).

LABORATORIOS
Tabla. Determinación de cloro residual libre y combinado
Lectura NCl3 ausente NCl3 Presente

A Cloro libre Cloro libre
B-A NH2Cl NH2Cl
C-B NHCl2 NH2Cl2 + ½ NCl3
N Cloro libre + ½ NCl3
2 (N-A) NCl3
C-N NHCl2
En el caso de que la monocloramina esté presente con NCl3, será incluirse en la Lectura N, en cuyo
caso obtener NCl3 de 2 (N-B).
Realizar el procedimiento anterior

En un tubo de ensayo y agregar 10 mL muestra y
adicionar: mezclar nuevamente.
0.5 mL de Buffer fosfato (Si se presenta una coloración
0.5 mL de reactivo DPD y roja indica presencia de cloro)
10 mL de agua destilada
Medir a 515 nm (Blanco)
Añadir un cristal de
yoduro de potasio y Llenar una celda del
mezclar. (Si se presenta espectofotómetro y medir
una coloración roja más la absorbancia a 515 nm
intensa indica presencia para determinar el cloro
de monocloraminas).
libre (Lectura A).
Sobre la misma muestra

en la celda añadir
Medir la absorbancia y exceso de cristales de
determinar el valor de yoduro de potasio y
monocloraminas, mezclar hasta la
(Lectura B). disolución. Reposar de 3
a 5 minutos.
Una vez transcurridos

los 3 o 5 minutos,
medir la absorbancia y
determinar el valor de
dicloramina.
(Lectura C).
Procedimiento para determinación de cloro residual libre y combinado
Determinación de la demanda de cloro en agua cruda

La muestra de agua cruda se divide en submuestras (200 mL) y cada una se dosifica con la
solución de oxidante estandarizada (cloro) para producir una serie de dosis crecientes (2 ppm,
2.5 ppm y 3.0 ppm Cl2). Después del tiempo de contacto apropiado (30 minutos), se miden el
oxidante residual, el pH y la temperatura, y la demanda se determina por la diferencia entre
el valor inicial y concentraciones finales.

LABORATORIOS
Agregue cantidades
crecientes de solución de
Mida 5 porciones de cloro estándar a las
muestra iguales de 200 porciones sucesivas de
ml en botellas tapadas la serie. 2 ppm, 2.5 ppm,
de gran capacidad para 3.0 ppm, 3.5 ppm, 4.0
permitir la mezcla ppm.
Agregar en un tubo de Llenar una celda del

ensayo 10 mL de muestra, espectofotómetro con 10
0.5 mL de Buffer fosfato y mL de agua cruda, 0.5 mL
0.5 mL de reactivo de Buffer fosfato y 0.5 mL
de reactivo DPD y medir la
absorbancia a 515 nm libre
(Blanco).
Realizar los cálculos de

demanda de cloro como:
Medir la absorbancia y 𝑫𝒆𝒎𝒂𝒏𝒅𝒂 𝒅𝒆 𝒄𝒍𝒐𝒓𝒐 =
determinar el valor de
cloro libre a 515 nm,
Dos𝒊𝒔 𝒅𝒆 𝒄𝒍𝒐𝒓𝒐−𝒄𝒍𝒐𝒓𝒐
(Lectura A). 𝒓𝒆𝒔𝒊𝒅𝒖𝒂𝒍 libre
Procedimiento para determinación de la demanda de cloro
Cuantificación de coliformes fecales por NMP/mL en aguas crudas y potables
Determinación de coliformes totales en agua potable y agua cruda por el método de

NMP/mL.
Adicionar 1 mL de muestra cruda y de agua potable en un tubo de ensayo y completar con 9 mL de NaCl para
completar dilución de 10-1.
Luego, agregar 1 mL de la dilución 10-1 en el tubo de ensayo #2 y completar con NaCl hasta 10 mL para obtener
dilución 10-2.
Finalmente en el tubo de ensayo #3, agregar 1 mL de dilución 10-2 y completar hasta 10 mL con NaCl para
obtener dilución 10-3.
Posteriormente, agregar 1mL de cada una de las diluciones en 3 tubos de ensayo c/u con caldo verde bilis y una
campana de Durham en c/u, obteniendo 9 muestras, 3 por cada dilución obtenida.
Incubar las muestras a 37 °C y luego observar los cambios, para finalmente cuantificarlos mediante la tabla de
Número más probable (NMP).
Cuantificación de coliformes totales

NMP/mL en agua potable.
Dilución # de tubos (+)
10-1
10-2
10-3
NMP/mL

LABORATORIOS
Tomar una porción de agua según su origen:

Tipos de agua Coliformes totales
Potable de consumo público 100 ml
Envasadas 250 ml
Manantiales 15; 60; 100 ml
Lagos, depósitos 4; 15; 60; 100 ml
Acometidas 0,08; 0,15; 0,5; 1,4 ml
De playas 0,08; 0,15; 0,5; 1,4 ml
De ríos 0,003; 0,01; 0,02; 0,08 ml
Residuales cloradas 0,003; 0,01; 0,02; 0,08 ml
Residuales sin tratar 0,0001; 0,0003; 0,001; 0,003; 0,01 ml
Fuente: www.coli.usal.es
Realizar la dilución del agua Adicionar 1ml de agua

cruda y agua potable, mediante cruda en el tubo 1 y
el uso de NaCl en 3 tubos
completar con 9ml de
para, con un total de 6 tubos
de dilución. NaCl, para una dilución
10-1.
Adicionar 1ml del tubo 1 al tubo

Tomar 1ml de cada uno de los
2 y completar con 9ml de NaCl
3 tubos de las diluciones del
para una dilución 10-2,
agua cruda y agregar a 3 tubos
adicionar 1ml del tubo 2 al tubo
con caldo verde bilis brillante
3 y completar a una dilucion 10-
“tubos con campana de 3
, repetir el paso para agua
durham”, cada uno. potable.
Incubar los 6 tubos con caldo a

Repetir el paso anterior con los 37ºC durante 48 horas, analizar
3 tubos de agua potable, los cambios que se presenten
agregando 1ml a los 3 tubos en el medio y hacer conteo de
con caldo verde bilis brillante. los tubos que presenten
variaciones.
Procedimiento para cuantificación de coliformes totales por el método NMP
Determinación de coliformes totales y fecales

Para la determinación cualitativa de coliformes fecales por EMB en agua potable y agua cruda, sedeben tomar
las muestras de agua cruda y agua potable y sembrarlas en el medio AGAR EMB (Eosina y Azul de metileno).
Se cierran rápidamente las cajas de Petri evitando una posible contaminación de éstas.
Llevar a la incubadora. Incubar por 48 horas y posteriormente determinar los coliformes fecales.

LABORATORIOS
Realizar la siembra de
las muestras de agua a Sembrar un 1ml de
analizar, se hace uso muestra de agua
de 3 cajas de Petri con potable como blanco
agar EMB (Eosina y del proceso en la caja
Azul de Metileno) de Petri 1.
Incubar las 3 cajas de

Petri a 37ºc durante Sembrar un 1ml de
48horas, analizar la muestra de agua cruda
presencia de colonias en cada una de las
en el agar y hacer cajas de Petri 2 y 3
conteo
Procedimiento para determinación cualitativa de coliformes totales y fecales
BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA.
METCALF & EDDY, INC., George Tchobanoglous, Franklin Burton, H. David Stensel. Wastewater
Engineering: Treatment and Reus. 4a ed. Mc Graw Hill. 2003
AWWA. Standard Methods for Examination of Water and Wastewater.20th edition. 1999.
Lozano, Romero y Urbina. Manual Practicas Laboratorio 1 de Química Orgánica. Escuela de

Química, Facultad de Ciencias, Universidad Industrial de Santander. 2013.
Montenegro Cataño, S. S. (26 de agosto de 2014). E.M.B. Agar (con Eosina y Azul de Metileno).
Obtenido de SlideShare: https://es.slideshare.net/Suldery/agar-emb
Rodríguez, Carlos H., demanda química de oxígeno por reflujo cerrado y volumetría. Subdirección
de Hidrología, Grupo Laboratorio de Calidad Ambiental. IDEAM. 2007
Universidad de Granada. (s.f.). Universidad de Granada. Obtenido de

https://www.ugr.es/~pomif/pom-ali/ma-i/ma-i-3-nmp_recuento.htm
ELABORÓ REVISÓ APROBÓ
Grupo o Programa de: Director de Programa de: Jefatura de Laboratorios

Ingeniería Ambiental Henry Guillermo Acosta German Vargas
Fecha: Agosto de 2019 Fecha: Agosto de 2019 Fecha:
INFORME DE LABORATORIO
(Para elaborar por el Estudiante)

LABORATORIOS
ESTUDIANTES: ASIGNATURA:
▪
▪
▪ GRUPO:
▪
▪
▪
NOTA:
▪
▪
CARRERA: TRABAJO GRUPAL: TRABAJO INDIVIDUAL:
FORMULE TRES HABILIDADES QUE DESEE ADQUIRIR O DESARROLLAR A TRAVÉS DE LA

PRÁCTICA DE LABORATORIO.
•
•
•
Elabore un Mapa conceptual del tema a tratar en la Práctica de Laboratorio.
RESULTADOS.
Complete las siguientes tablas (determine desviación donde sea necesario), teniendo en
cuenta el procedimiento realizado.
Tabla 1. Datos de Cloro por titulación y medición con colorímetro o espectofotómetro.
Parámetro Medición 1 Medición 2 Valor promedio
Concentración de cloro
utilizada

LABORATORIOS
Cloro por titulación después de

reacción
Cloro libre (medición con
clorímetro) después de reacción
Cloro Residual (medición con
clorímetro) después de reacción
1. Graficar “cloro residual total vs dosis de cloro” para la estimación por el

método yodométrico y usando el clorímetro.
2. Estimar la dosis requerida de cloro añadir al agua problema fijando un residual

de norma entre 0.2 y 2 mg/l.
3. Realizar un análisis de los resultados obtenidos y plantear posibles hipótesis

que expliquen los resultados obtenidos de acuerdo a la teoría.

LABORATORIOS
CUESTIONARIO.
1. Realice una curva de cloro libre y cloro total vs. Dosis teórica, los resultados son coherentes?
Explique
CAUSAS DE ERROR Y ACCIONES PARA OBTENER MEJORES RESULTADOS
CONCLUSIONES
APLICACIÓN PROFESIONAL DE LA PRÁCTICA REALIZADA.


LABORATORIOS
BIBLIOGRAFÍA UTILIZADA. Utilizando las normas APA
ANEXOS
RUBRICA DE EVALUACIÓN
RUBRICA DE EVALUACIÓN BIOLOGÍA

INDIVIDUAL CRITERIOS DE EVALUACIÓN NOT
Estudiante 0 – 1,5 1,6 - 2,9 3,0 - 3,9 4,0 - 4,5 4,6 - 5,0 A
1.
Habilidad
2.
3.
4.
5.
6.
NOT
GRUPAL % 0 – 1,5 1,6 - 2,9 3,0 - 3,9 4,0 - 4,5 4,6 - 5,0
A
Son
No son Son Son
Organiza los resultados organizados Son
precisos o organizados organizados,
y algunas precisos y
obtenidos a través del no ayudan a y ayudan a precisos y
veces ayudan a la
(aprender a hacer)
uso de dibujos, gráficas, la la ayudan a la

Procedimental
ayudan a la comprensió
tablas y formulas. comprensió entendimien entendimient
comprensió n del tema
n del tema to del tema o del tema
n del tema
35%
Se limita a Hace
Hace Analiza la Infiere la
Hace uso adecuado de la relaciones
referencia informació información
los conceptos al recopilació básicas
competencia
a la n obtenida y
momento de aplicarlos n de la de la
informació relacionad la relaciona
en la práctica informació informació
n en la a con la con su
experimental propuesta n n con la
práctica práctica realidad
solicitada práctica
Establece las diferencias
entre técnicas analíticas
(aprender a
Cuantificación de Cloro
Cognitiva
conocer)
Residual Libre,
25%
Cloraminas, Cloro Total.

Demanda de Cloro y
determinación de
coliformes totales y
fecales

LABORATORIOS
Describe la técnica de
determinación de la
dosis de cloro a aplicar
en aguas como fuentes
de abastecimiento
(Demanda de Cloro)
Participa Participa
Hace parte
Parcialme en el activament
No hace del trabajo
Desarrolla habilidades nte hace trabajo e el trabajo
parte del propuesto
de trabajo en equipo, parte del propuesto propuesto
trabajo por el
priorizando la toma de trabajo por el por el
propuesto equipo de
decisiones y la escucha propuesto equipo de equipo de
por el acuerdo a
de diferentes propuestas por el manera manera
equipo parámetro
equipo responsabl responsabl
s básicos
(aprender a ser)
Socio afectiva
e y puntual e y puntual
Frecuente
A veces
15%
mente Muestra
muestra Muestra
reprocha Muestra una
una actitud una actitud
el trabajo una buena sobresalien
favorable favorable
de sus actitud te actitud
Cuida, respeta y exige frente a la frente a la
pares y frente a la frente a la
respeto frente a la clase y se clase e
docente, y clase e clase e
interacción con sus limita a interactúa
justifica interactúa interactúa
pares y docentes responder ocasional
sus con sus frecuentem
por las mente con
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trabajo en docente
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grupo
Construye
el informe
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Practica el uso de No Construye
el informe laboratorio de manera
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medio de identificación y el informe manera el
laboratorio acuerdo a te el
diferenciación en la de informe de
(aprender a convivir)
de manera los informe de

elaboración de informes laboratorio laboratorio
Comunicativa
incompleta requerimie laboratorio

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15%
mínimos
Ocasional Hace un
Hace un
No hace mente Hace uso uso
buen uso
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Utiliza lenguaje técnico del
lenguaje de un lenguaje te del
para referirse a los lenguaje
técnico lenguaje técnico lenguaje
diferentes conceptos técnico
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que relaciona en la apropiado
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LABORATORIOS
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Desinfección - Calidad de Agua

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FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 1 de 18

NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación de cloro residual en agua PRÁCTICA No.: 001

ASIGNATURA: Calidad Ambiental

TEMA DE LA PRÁCTICA: Determinación de cloro residual y cuantificación de coliformes totales y fecales

TIEMPO: 4 horas TRABAJO GRUPAL: TRABAJO INDIVIDUAL:

Cloro Residual total = cloro libre + cloro combinado

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 2 de 18

METODOLOGÍA. Esta práctica será desarrollada en grupos de 4 estudiantes, teniendo en cuenta la

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 3 de 18

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS A UTILIZAR (Para 5 grupos de 5 estudiantes)

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 4 de 18

5 Goteros. Solución Buffer fosfato. 100

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 5 de 18

H226: Líquido y vapores inflamables.

H411: Tóxico para los organismos acuáticos, con efectos nocivos

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 6 de 18

P363: Lavar las prendas contaminadas antes de volver a usarlas.

1. Valoración del Tiosulfato

Se valora inmediatamente el triyoduro formado mediante la disolución de tiosulfato. Cuando el color de la

Prueba Tiosulfato gastado (mL)

En un matraz adicionar: Titular con Tiosulfato

Seguir titulando con Agregar unas gotas

Diagrama de flujo para la valoración del tiosulfato

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 7 de 18

2. Estandarización de la solución de hipoclorito

Prepare una solución madre de hipoclorito de sodio de aproximadamente 100 mg / L.

Prueba Tiosulfato gastado (mL)

En un matraz adicionar: Titular con

Seguir titulando con Agregar unas gotas de

Diagrama de flujo para la valoración de solución madre de hipoclorito

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 8 de 18

Curva de calibración de concentraciones de cloro.

[Cl2] ppm Absorbancia

Una vez realizadas las diluciones

Con los datos

Procedimiento para realizar la curva de calibración

Medición de cloro residual libre y combinado en agua potable

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 9 de 18

Tabla. Determinación de cloro residual libre y combinado

Lectura NCl3 ausente NCl3 Presente

Realizar el procedimiento anterior

Sobre la misma muestra

Una vez transcurridos

Procedimiento para determinación de cloro residual libre y combinado

Determinación de la demanda de cloro en agua cruda

PROCESO: GESTIÓN DE RECURSOS, INFRAESTRUCTURA Y

LA-FM-007 Versión: 4 Fecha: 15/03/2019 Página 10 de 18

Agregar en un tubo de Llenar una celda del

Realizar los cálculos de

Procedimiento para determinación de la demanda de cloro

Cuantificación de coliformes fecales por NMP/mL en aguas crudas y potables

Determinación de coliformes totales en agua potable y agua cruda por el método de

Cuantificación de coliformes totales