Fecha de publicación: Julio 2002

REVISTA de la SOCIEDAD QUÍMICA de MÉXICO

(Rev. Soc. Quím. Méx.) ISSN 0583-7693

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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 73-78

Investigación

Control de las propiedades texturales de ZrO2-TiO 2 Sol-Gel.

Efecto de parámetros de síntesis
María C. Barrera,*1 Margarita Viniegra,1 José Escobar3 y José A. de Los Reyes 2
1 Departamento de Química y 2Area de Ingeniería Química, UAM-Iztapalapa. Av. San Rafael Atlixco No. 186,
Col. Vicentina, Iztapalapa, México 09340, D. F.; Tel: 5804-4648; Fax: 5804-4900; E-mail: mcbd@xanum.uam.mx
3 Instituto Mexicano del Petróleo, Tratamiento de Crudo Maya. Eje Central Lázaro Cárdenas 152.

San Bartolo Atepehuacan. México 07730, D.F.

Recibido el 1 de noviembre del 2001; aceptado el 30 de enero del 2002

Resumen. Se sintetizó ZrO2-TiO 2 a varias composiciones por sol-gel
a baja temperatura con HNO 3, NH4OH o CH3COOH como aditivos.
Los alcogeles se calcinaron (300-700 °C) y caracterizaron por fisisor-
ción de N2, DRX y ATG-ATD. Al estudiarse diferentes composi-
ciones, relaciones H2O / alcóxido, aditivo / alcóxido y tipos de aditi-
vo fue posible modular las propiedades texturales de los óxidos
preparados. El máximo en el área específica se obtuvo en contenidos
cercanos al equimolar (muestras calcinadas a 500 °C). La formu-
lación rica en TiO 2 (85 % peso) fue la que presentó poros mayores
(5-8 nm).
Palabras clave: ZrO2-TiO 2, síntesis, texturas.
Abstract. ZrO2-TiO 2 at different compositions was prepared by low
temperature sol-gel method with HNO3, NH4OH and CH3COOH as
additives. The alcogels were calcined (300-700 °C) and characterized
by N2 physisorption, XRD and TGA-DTA. By varying the composi-
tion, the H2O / alkoxide and additive/alkoxide ratios and the type of
additive it was possible to modulate the textural properties of the pre-
pared oxides. The TiO 2-rich formulation (85 w %) was the one with
larger pores (5-8 nm). The maximum in surface area was found for
samples of composition near the equimolar (samples calcined at 500
°C).
Keywords: ZrO2-TiO2, synthesis, textures.

Introducción cado alternativas en lo referente a nuevos soportes con mejo-

En años recientes se ha incrementado el interés por el estudio
de nuevos materiales catalíticos aplicables al hidrotratamiento
(HDT) de fracciones derivadas del petróleo. El motivo princi-
pal consiste en que las formulaciones actuales probablemente
no podrán llevar a cabo la remoción de compuestos inde -
seables en las cargas a tratar hasta la concentración que fijarán
las normas para el control de emisiones contaminantes que en-
trarán en vigor en el futuro próximo. Éstas restringirán severa-
mente el contenido de azufre y compuestos aromáticos en los
combustibles de uso industrial y automotriz para que, sin per-
derse sus propiedades, las emisiones nocivas al ser humano se
reduzcan al mínimo [1]. La problemática se complica al con-
siderar que para la obtención de combustibles actualmente se
procesan crudos cada vez más pesados, y por ende, con mayor
contenido de las especies que se requiere remover. Los mate-
riales catalíticos que más comúnmente se utilizan a escala in-
dustrial para efectuar el HDT de cortes petroleros son el Co-
Mo y NiMo sulfurados soportados en alúmina [2]. Sin embar-
go, sus propiedades intrínsecas hacen que difícilmente puedan
ser utilizados en los esquemas de hidrodesulfuración profunda,
cuya puesta a punto será necesaria a la brevedad posible. Las
normas de calidad establecidas para combustibles diesel indi-
can la necesidad de nuevos catalizadores con alto poder hidro-
genante y gran resistencia al envenenamiento por azufre. A
este respecto se han propuesto diversas formulaciones de me-
tales nobles tales como el Pt o el Pd [3]. También se han bus-
res propiedades que el Al2 O 3 tradicionalmente utilizado. En
este sentido, se han estudiado materiales tales como TiO2 [4],
ZrO2 [5] y algunos tipos de zeolitas [6]. Otros materiales con
propiedades promisorias para su aplicación en esquemas de
HDT son los óxidos mixtos de Al2O 3 -TiO2 [7] y ZrO2 -TiO2
[5], entre otros. Aunque este último sistema presenta
propiedades interesantes como soporte de catalizadores para el
hidrotratamiento de gasóleo [5], los principales inconvenientes
que presenta son volumen poroso (Vp) reducido y distribución
de tamaño de poros (DTP) estrecha, situándose generalmente
el máximo en el intervalo de 3-5 nm [8]. Se ha reportado [9]
que debido al diámetro cinético de heterocompuestos de S pre-
sentes típicamente en cortes petroleros intermedios, se requie-
re de catalizadores con el máximo de la DTP en el intervalo 5
nm < Ø p < 10 nm (Ø p , diámetro de poro). Por ello, deben in-
vestigarse diversas metodologías que permitan la preparación
de óxidos mixtos ZrO2 -TiO 2 con mayores valores de área es-
pecífica (Sg), porosidad y diámetro de poros, características
que harían posible la aplicación exitosa de estos materiales en
el HDT de destilados medios (diesel).
En este trabajo se investiga el efecto del contenido de
TiO2 , del tipo de aditivo de síntesis y de las relaciones molares
H 2O / alcóxido y aditivo / alcóxido sobre las propiedades tex-
turales de soportes de ZrO2 -TiO 2 . Los materiales fueron carac-
terizados por fisisorción de N2 , difracción de rayos X y análi-
sis térmico.
74 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Fig. 1. Efecto de la composición y del aditivo de síntesis sobre el área
específica de ZrO2-TiO 2 sol-gel calcinado a 500 °C (h = 20, a =
0.05).
Fig. 2. Efecto de la composición sobre la estabilidad térmica de los
óxidos equimolar y rico en TiO 2 (ZT6040 y ZT1585, respectiva-
mente) preparados por sol-gel con HNO3 (h = 20, a = 0.05).
Parte experimental
Materiales. Los alcóxidos precursores fueron tetraisopropóxi-
do de titanio (98 % peso) y propóxido de circonio (70 % peso)
(solución en 1-propanol) (Aldrich). Se empleó isopropanol
99.9 % (Baker) como disolvente y agua desionizada mediante
un sistema Milli-Q (Millipore Corp.). Como aditivos de sínte-
sis se utilizaron HNO3 (66 %), NH4 OH (30 %) y CH3 COOH
(99.7 %) (Baker).
Síntesis de Soportes. Se prepararon soportes de ZrO2 (Z),
TiO2 (T) y de sus correspondientes óxidos mixtos (ZTxy, x: %
peso de ZrO 2 , y: % peso de TiO2 ) por técnica sol-gel a baja
temperatura de acuerdo a [10]. Se disolvieron los alcóxidos de
Ti y/o Zr en isopropanol y se enfriaron a la temperatura de
síntesis (~ 0 °C) utilizando un baño frío Cole-Parmer Polystat.
Posteriormente se adicionó la mezcla de hidrólisis (aditivo +
H 2O). Se emplearon 3 distintos aditivos: HNO 3 (A) como ca-
talizador de hidrólisis, NH4 OH (B) como catalizador de con-
densación y CH3 COOH (C) como agente complejante. Las
relaciones molares utilizadas fueron: 2-propanol / alcóxido =
65, H2 O / alcóxido = 20 y 30, aditivo / alcóxido = 0.05 y 0.2.
Estas dos últimas relaciones se designaron h y a, respectiva-
mente. Al término de la adición, los geles se dejaron madurar
durante 24 h a la temperatura de síntesis. Los alcogeles se
secaron a vacío y temperatura ambiente y luego se trataron en
mufla bajo el siguiente programa: de temperatura ambiente a
120 °C, manteniéndose estas condiciones por 2 h para luego
llegar a la temperatura final de calcinación (300, 500, 600 o
700 °C) a la que se permaneció por 4 h. Para ambas etapas se
empleó una rampa de calentamiento de 3 °C min–1 . De acuer-
María C. Barrera et al.
Fig. 3. Efecto de la composición sobre la distribución de poros de
ZrO2-TiO 2 sol-gel calcinado a 500 °C (h = 20, a = 0.05).
Fig. 4. Efecto del incremento en la relación molar H2O / alcóxido (h)
sobre la distribución porosa del óxido equimolar preparado con
HNO3 y calcinado a 500 °C (a = 0.05).
do a la nomenclatura utilizada, la última letra de cada clave re-
presenta el tipo de aditivo utilizado. Por ejemplo, el óxido
mixto con 60 % peso de ZrO2 preparado con HNO 3 se designa
como: ZT6040A.
Caracterización de Soportes. La caracterización textural de
los diferentes óxidos se realizó por fisisorción de N2 a –196
°C utilizando un aparato AUTOSORB-1 (QUANTACHRO-
ME) determinándose los parámetros de área específica (Sg)
por el método BET [11], la distribución de poros (DTP) por el
método BJH [12] y el volumen poroso (Vp ) con el valor máxi-
mo de volumen adsorbido. La identificación de fases cristali-
nas para los óxidos calcinados a distintas temperaturas se
efectuó por difracción de rayos X empleando un aparato Sie-
mens D-500 Kristalloflex. La radiación utilizada fue la CuKa
con λ = 0.15406 nm. Los termogramas (Análisis Termo-
gravimétrico, TG y Análisis Térmico Diferencial, ATD) co-
rrespondientes a las muestras secas a vacío y sin calcinar se
determinaron con un equipo Netzch Thermische Analize, STA
409 EP bajo atmósfera estática de aire.
Resultados y discusión
Fisisorción de N2. En acuerdo con reportes previos [8], el
área específica del ZrO 2 -TiO2 es función de la composición
(Fig. 1), con un máximo para el sólido ZT4060A (materiales
con h = 20, a = 0.05, preparados con HNO3 y calcinados a 500
°C). Para este óxido, la técnica sol-gel permite obtener mayor
área específica, en comparación con otras metodologías utili-
zadas por otros autores [13, 14]. El S g de las formulaciones
Control de las propiedades texturales de ZrO2 -TiO2 Sol-Gel. Efecto de parámetros de síntesis
Fig. 5. Efecto del aditivo de síntesis sobre la distribución de poros del
óxido equimolar calcinado a 500 °C (h = 30, a = 0.2).
Fig. 6. Efecto del aditivo de síntesis sobre la estabilidad térmica del
óxido equimolar calcinado a diferentes temperaturas (h = 20, a =
0.2).
mixtas llega a ser 3 veces mayor que las de los óxidos sim-
ples. El incremento es especialmente notable para óxidos con
contenido cercano al equimolar (ZT6040). La adición de
diferentes agentes (HNO3, NH 4OH, CH3 COOH) no afecta el
S g de este material. Para sólidos preparados con ácido nítrico
(A), la estabilidad térmica del material equimolar es mayor
que la del rico en TiO2 (ZT1585A), ya que su pérdida de área
específica en el intervalo de temperaturas estudiado es menor
(Fig. 2). El sinterizado del material es completo luego del
tratamiento a 900 °C (Sg = 15 m2 g –1, Vp = 0.14 cm 3 g–1 ).
La distribución de poros muestra un máximo en la fron-
tera micro-mesoporosa (Fig. 3) para el material equimolar
preparado con HNO3 (ZT6040A). Este hecho y su alta Sg indi-
can que se favorece la formación de partículas más pequeñas
que las del resto de los materiales preparados. La formulación
ZT1585A fue la que presentó poros de mayores dimensiones
con un máximo en el intervalo de 5-8 nm. Tal como se aprecia
en la Fig. 3, la presencia de ZrO2 en concentración moderada
(15 % peso) produce un incremento notable en la cantidad de
poros que presenta el TiO 2, sin afectar su tamaño. Por su
parte, el perfil de la DTP del ZrO2 sugiere una distribución
amplia de tamaño de partículas. El aumento en la relación
H 2O / alcóxido (h) de 20 a 30 produce una mayor cantidad de
mesoporos, desplazándose el máximo de la DTP del óxido e-
quimolar desde 2-4 nm (Fig. 3) a 3-6 nm (Fig. 4). En cuanto al
efecto de los distintos aditivos sobre la DTP de la misma
muestra (Fig. 5), se observa que el agente básico promueve un
aumento notable en el volumen poroso debido a una alta pro-
porción de poros de gran tamaño (Øp >10 nm). Efectos simi-
lares originados en el uso de aditivo alcalino (NH4OH) han
sido previamente reportados para otros sistemas de óxidos
mixtos [10]. La utilización de CH3COOH (agente complejan-
te) durante la síntesis de sólidos equimolares resulta en la for-
mación de partículas pequeñas de distribución de tamaños
75
Fig. 7. Efecto del aditivo de síntesis sobre la distribución porosa del
sólido rico en TiO2 (ZT1585) calcinado a 500 °C (h = 20, a = 0.05).
estrecha, reflejándose ésto en el perfil de su DTP, Fig. 5. A di-
ferencia de lo observado para óxidos mixtos Al 2 O 3 -TiO2
preparados vía sol-gel [10], la estabilidad térmica del sistema
ZrO 2 -TiO2 en el intervalo de 500 a 600 °C no mejora por la
adición del agente básico, Fig. 6. En la Fig. 7 se aprecia que el
aditivo básico promueve una distribución de poros bimodal
para el material ZT1585B. El máximo que se observa para es-
te óxido en la región de poros de diámetro pequeño (10 nm <
Øp ) es más estrecho y se desplaza a menores diámetros, en
comparación con el del sólido preparado con aditivo ácido. El
segundo máximo aparece en el intervalo de 20-40 nm. Estos
resultados pueden explicarse considerando que mientras que
el HNO 3 acelera la hidrólisis, el NH 4 OH lo hace con la con-
densación [15]. En medio alcalino, el crecimiento de las cade-
nas poliméricas durante esta etapa se orienta a la parte media,
produciéndose geles con alto grado de entrecruzamiento [15]
dando como resultado partículas voluminosas con grandes
espacios interpartícula que aumentan el volumen poroso. Por
otra parte, la complejación entre los acetatos y los átomos
metálicos (Ti y Zr) modifica la funcionalidad de los alcóxidos
precursores, definida ésta como el número de ligandos suscep-
tibles a ser removidos durante el proceso de formación del gel
[15]. La alta estabilidad de los enlaces entre los ligandos ace-
toxi terminales y los átomos metálicos impide el crecimiento
de grandes micelas, formándose cadenas cortas que resultan
en partículas pequeñas y de distribución de tamaño homogé-
nea [16]. La morfología de estas partículas propiciaría la dis-
tribución de poros estrecha y desplazada a diámetros peque-
ños tal, como se observa en la Fig. 5.
Los cambios en la textura de los óxidos mixtos obtenidos
al variar diversos parámetros de síntesis se resumen en la Ta-
bla 1. Aunque el uso del agente básico promueve mayor volu-
men poroso para las formulaciones ricas en titania (ZT1585,
Filas 12-14) su área específica prácticamente no se altera en
función del aditivo empleado. Caso contrario, para el óxido
equimolar (ZT6040) al utilizarse el catalizador de condensa-
ción (NH 4 OH) en lugar del de hidrólisis (muestras con a = 0.2
y h = 30) el área específica aumenta ligeramente (~ 10%) en
tanto que el volumen poroso se duplica (Filas 5 y 8). Asimis-
mo, el incremento en la relación HNO3 / alcóxido de 0.05 a
0.2 provoca una pequeña disminución en el área específica de
dicha formulación y un decremento importante en su V p (Filas
4 y 5). Un inconveniente de aumentar la cantidad de agente á-
cido radica en que se pueden alcanzar condiciones explosivas
durante la calcinación de los alcogeles, probablemente debido
76 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Fig. 8. Evolución de fases cristalinas con la temperatura de calcina-
ción para el óxido equimolar (ZT6040) preparado con HNO 3 (h = 20,
a = 0.05).
Fig. 9. Evolución de fases cristalinas con la temperatura de calci-
nación para el óxido rico en TiO 2 (ZT1585) preparado con HNO 3 (h
= 20, a = 0.05).
Fig. 10. Análisis térmico diferencial de los óxidos simples y mixtos
de ZrO2 y TiO2 sintetizados con HNO3 (h = 20, a = 0.05).
María C. Barrera et al.
a la presión generada por la eventual vaporización del disol-
vente ocluido en la matriz sólida. En esta línea, se han reporta-
do [17] fenómenos de esa naturaleza durante la síntesis de
ZrO 2 sol-gel, atribuyéndose este fenómeno a que la conden-
sación en medio ácido de los precursores alcóxido parcial-
mente hidrolizados podría conducir a la formación de porosi-
dad cerrada en donde el disolvente se acumularía. En nuestro
caso, al emplearse cantidades menores de ácido nítrico, se evi-
taron los problemas ya mencionados, quizá debido a la forma-
ción de una matriz sólida más abierta y porosa (Filas 4 y 5,
Tabla 1). El incremento en la relación NH 4 OH / alcóxido de
0.05 a 0.2 (muestras con h = 30) resulta en un aumento de
30% en el S g y el Vp se duplica (Filas 7 y 8). Este último valor
de volumen poroso (0.56 cm 3 g –1) es similar al valor máximo
reportado para este parámetro [18], para sólidos de composi-
ción y área específica semejante preparados por precipitación
a pH constante.
Difracción de rayos X. En la Fig. 8 se observa la evolución
térmica del sólido equimolar preparado con HNO3 (ZT6040A,
h = 20, a = 0.05), calcinado a diferentes temperaturas. A 300 y
500 °C se observa microcristalinidad, no registrándose señales
propias de TiO 2 (anatasa o rutilo). La cristalización a ZrTiO4
(JCPDD: 7-0290), se lleva a cabo a 700 °C. La transformación
desde una matriz amorfa a una cristalina produce una drástica
pérdida en propiedades texturales (Fig. 2), indicando que el
aumento en las dimensiones de los cristales redunda en un
mayor tamaño de partículas. Por su parte, el patrón del óxido
ZT1585A tratado a 300 °C muestra amorficidad para luego
transformarse al correspondiente a la fase anatasa (JCPDD:
21-1272), luego de la calcinación a 500 °C, Fig. 9. Al incre-
mentarse la severidad del tratamiento (700 °C) la estructura (y
la textura) permanecen prácticamente sin cambios. Esto difie-
re de lo observado para el TiO2 sol-gel preparado a condi-
ciones similares, el cual bajo condiciones severas se transfor-
ma a rutilo, o a una mezcla anatasa-rutilo con alta proporción
del último [19]. Este impedimento al cambio de fase sugiere
una fuerte interacción entre los óxidos componentes. la cual
limitaría la difusión en estado sólido a través de la cual se
daría el crecimiento de los cristales. En la misma línea, Weiss-
man y col. [5] consideran que la resistencia al sinterizado de
los sistemas mixtos ZrO 2 -TiO2 se relaciona a la presencia de
heteroenlaces Zr-O-Ti formados durante la condensación de
precursores alcóxido parcialmente hidrolizados.
Análisis Térmico. En los análisis térmicos diferenciales de
las muestras preparadas con HNO3 , a = 0.05 y h = 20 (Fig. 10)
se observan endotermicidades centradas a ~160 °C confirman-
do la remoción de especies fisisorbidas (agua y/o disolvente).
Todas las muestras presentan señales exotérmicas tanto de
combustión de residuos orgánicos como de cristalización a
distintas fases. Para el TiO2 se registra un pico corres-
pondiente a cristalización a anatasa a 400 °C [19], transforma-
ción que se desplaza a mayores temperaturas por la adición de
un 15 % de ZrO 2 (muestra ZT1585A), tal como se observó
por difracción de rayos X (Fig. 9). Por su parte, el óxido de
Control de las propiedades texturales de ZrO2 -TiO2 Sol-Gel. Efecto de parámetros de síntesis 77

Tabla 1. Efecto de la composición, del aditivo de síntesis (A: HNO3,

B: NH 4OH, C: CH3COOH) y del incremento en las relaciones mola-
res H2O / alc. (h) y aditivo/alc. (a) sobre las propiedades texturales de
las muestras calcinadas a 500 °C.
Fila Óxido a h Sg Vp
(mol adit. (mol adit. (m 2 g–1) (cm3 g–1)
mol alc.–1) mol alc.–1)

Fig. 11. Análisis térmico diferencial de la muestra equimolar 1 ZA 0.05 20 78 0.26

(ZT6040) sintetizada con diferentes aditivos (h = 20, a = 0.05). 2 ZT8515A 0.05 20 187 0.37
3 ZT6040A 0.05 20 258 0.18
4 ZT6040A 0.05 30 304 0.40
5 ZT6040A 0.20 30 272 0.26
6 ZT6040B 0.05 20 322 0.36
7 ZT6040B 0.05 30 240 0.28
8 ZT6040B 0.20 30 307 0.56
9 ZT6040C 0.20 30 230 0.20
10 ZT5050A 0.05 20 280 0.22
11 ZT4060A 0.05 20 291 0.25
12 ZT1585A 0.05 20 100 0.14
13 ZT1585B 0.05 20 97 0.20
14 ZT1585B 0.05 30 94 0.20
15 TA 0.05 20 45 0.06

Fig. 12. Análisis térmico diferencial de la muestra equimolar sinteti-

zada con NH4OH (ZT6040B, h = 20 y 30, a = 0.05).
circonio cristaliza, probablemente a un arreglo tetragonal [20]
a 420 °C. Esta cristalización se retarda en la muestra ZT85
15A por la presencia del segundo óxido (titania), efectuándose
en este caso a 600 °C.
Para el material equimolar (ZT6040A), la obtención de
una fase mixta retardaría la cristalización del ZrO 2 y del TiO2,
con lo cual se evita el sinterizado a baja temperatura. La cris-
talización a ZrTiO4 (observada en la Fig. 8) se registra a 700
°C, identificándose con una intensa exotermicidad. Este fenó-
meno coincide con la drástica pérdida de S g, la cual disminuye
en un 80% en el intervalo de 500-700 °C (Fig. 2) y además
sugiere un alto grado de interacción entre los óxidos compo-
nentes [21]. La evolución térmica del sólido ZT4060A fue
similar a la propia del equimolar por lo que no se le incluyó en
la Fig. 10.
Se estudió el efecto del aditivo de síntesis y de la relación
molar H2 O / alcóxido (h) sobre la evolución térmica del óxido
mixto equimolar. Los resultados se muestran en las Figs. 11 y
12. La menor intensidad de la señal exotérmica observada a
~700 °C para la muestra sintetizada con NH4 OH sugiere com-
posición más homogénea que la de la muestra preparada con
aditivo ácido, debido a que la cristalización a ZrTiO4 implica
una menor evolución de energía. Por tanto, la estructura del
óxido amorfo debe ser muy similar a la de la fase titanato. El
desplazamiento a menor temperatura de la señal en cuestión al
disminuir h de 30 a 20 (Fig. 12) también es indicio de la for-
mación de una matriz mixta de composición más homogénea.
Considerando que la cristalización al titanato se relaciona al
sinterizado masivo del material en cuestión (Fig. 2), nuestros
sólidos poseen mayor estabilidad térmica que preparaciones
de composición similar preparados por coprecipitación con
urea [22], en donde la formación del ZrTiO4 ha sido identifi-
cada a temperaturas menores (654 °C).
Conclusiones
A través del control de diversos parámetros de síntesis, la vía
sol-gel permite adecuar la textura de sistemas mixtos ZrO 2 -
TiO2 para su potencial aplicación en el hidrotratamiento de
cortes intermedios (diesel).
En función de su composición, los sistemas mixtos ZrO2 -
TiO2 exhiben notables mejoras en sus propiedades texturales,
con relación a las de sus óxidos componentes. Este efecto es
especialmente notable para formulaciones con composiciones
cercanas a la equimolar. El máximo en la DTP de los sólidos
equimolares preparados con aditivo ácido se desplaza a ma-
yores diámetros al aumentar la relación molar H2 O / alcóxido
de 20 a 30, incluyendo mesoporos en el intervalo 3 nm < Øp
<6 nm. En presencia de un catalizador de condensación
(NH4 OH) se obtienen muestras de volumen poroso incremen-
tado. Por otro lado, el aditivo complejante (CH3 COOH) pro-
mueve una disminución en el tamaño de las partículas forma-
das, con lo que las dimensiones de los espacios interpartícula
se reducen.
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 79-82

Investigación

Síntesis de 6-Acetamido- y 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolinas

Jorge A. Haro-Castellanos,1* Atilano Gutiérrez-Carrillo,3 Artemisa Romero-Martínez,2
Guillermo James-Molina,2 Leticia Ramírez-Chavarín1 y Wendy Pérez-Yescas1
1 Departamento Biología de la Reproducción. División de Ciencias Biológicas y de la Salud.
Universidad Autónoma Metropolitana. Plantel Iztapalapa. México, D. F.; A. P. 53-534. Tel: 5804-4901;
Fax: 5804-4930; E-mail: hcja@xanum.uam.mx
2 Departamento Sistemas Biológicos. División de Ciencias Biológicas y de la Salud.

Universidad Autónoma Metropolitana. Plantel Xochimilco. México, D. F.; A. P. 23-181.

3 Laboratorio de Resonancia Magnética Nuclear. Universidad Autónoma Metropolitana. Plantel Iztapalapa.

México, D. F.; A. P. 53-534.

Recibido el 28 de noviembre del 2001; aceptado el 4 de febrero del 2002

Resumen. En este trabajo se obtuvo 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1- Abstract. 6-Amino-1,2,3,4-tetrahydro-1-oxo-β-carboline (9) was

oxo-β-carbolina (9) por medio de dos rutas de síntesis, con mejor
rendimiento que el informado por Abramovitch (53.2 %): (a) por
optimización de la reducción de 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-
carbolina (8), utilizada en la vía de Abramovitch, empleando presión
de 20 p.s.i.; y (b) por una vía alternativa, a partir de p-nitroacetanilida
(5) con rendimiento global de 76.6 %. Además, como producto inter-
mediario se obtuvo 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolina
(12) con rendimiento de 92.4 % por ciclización de Fischer a partir de
la respectiva hidrazona (11), producto del cual no se encuentra infor-
mada su síntesis en la literatura. Los espectros de RMN confirman las
estructuras de los productos.
Palabras clave: 1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolinas, ciclización de
Fischer, condensación de Japp-Klingemann.
synthesized in the present work with better yields than reported by
Abramovitch (53.2 %), employing two different ways, the first one is
an improvement of Shapiro’s route last step (reduction of 6-nitro-
1,2,3,4-tetrahydro-1-oxo-β-carboline (8), increasing the yield to 73.8
%. The second, an alternative route from p-nitroacetanilide (5),
improved the yield to 76.6. Furthermore, the new product 6-acetami-
do-1,2,3,4-tetrahydro-1-oxo-β-carboline (12), was obtained by cicli-
zation of the respective hydrazone in 92.4 % of yield. RMN spectra
confirm the structures of the products.
Keywords: 1,2,3,4-Tetrahydro-1-oxo- β -carbolines, Fischer-
Ciclization, Japp-Klingemann-Condensation.

Introducción do-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolina (12), de las que re-

Las 1,2-dihidro-1-oxo-β-carbolinas, se conocen desde el pri-
mer cuarto del siglo XX en estudios relacionados con la sínte-
sis de los alcaloides harmina y harmalina [1,2], pero las
1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolinas aparecen hasta 1927,
obtenidas por Manske y Robinson [3]. Entre 1955 y 1956
Abramovitch y Shapiro [4,5] informan un método conve-
niente para la síntesis de estos heterociclos, basada en la con-
densación de Japp-Klingemann y la ciclización de Fischer,
con lo que obtuvieron además de la 1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-
β-carbolina, las sustituidas en C6 con los grupos metoxi, ben-
ciloxi y posteriormente [6] con metilo, cloro y nitro. En este
último trabajo [6] (Esquema 2) se informa también la obten-
ción de la 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolina (9),
por reducción catalítica de la 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-
β-carbolina (8).
Estos compuestos, intermediarios en la síntesis de indolal-
quilaminas [4-10], han sido objeto de numerosos estudios por
su importancia biológica y han dado origen a la síntesis de un
gran número de análogos, entre los que se encuentran la 6-
amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolina (9) y la 6-acetami-
cientemente se ha informado una notable actividad en la con-
ducta sexual de ratas macho [9] y cuya síntesis es objeto del
presente trabajo.
Resultados y discusión
La obtención de la 3-carbetoxi-2-piperidona (4), necesaria para
la síntesis de 6-amino- (9) y 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-
oxo-β-carbolina (12), se realizó por cianoetilación de malonato
de dietilo (1) con acrilonitrilo (2), seguida de hidrogenación
catalítica, de acuerdo con la técnica descrita por Albertson y
Fillman [11] (Esquema 1), y optimizada por Haro y col. [10].
Abramovitch [6] sintetizó 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-
oxo-β-carbolina (9) a partir de p-nitroanilina (6), por diazo-
ación y condensación con el producto de hidrólisis de 3-carbe-
toxi-2-piperidona (condensación de Japp-Klingemann), segui-
do por ciclización de Fischer (Esquema 2).
A diferencia de la técnica anterior, nosotros iniciamos con
p-aminoacetanilida (10), obtenida por reducción de p-nitroa-
cetanilida (5), y de manera similar se le aplicaron subsecuente-
80 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Jorge A. Haro-Castellanos et al.

Tabla 1. Rendimientos de las reacciones de Japp-Klingemann y

O O C N
+ Fischer con diferentes grupos en la misma posición del anillo aromá-
O O tico.
1 2
Grupo
EtONa / EtOH Reacción Nitro acetamido p-metoxi

H2 / Niquel- Raney Japp-Klingemann 100 88.5 74.8

1000 psi Fischer 96.6 92.4 66.9
C N 80°C
O O O NH

O O
3 4
Esquema 1. Obtención de 3-carbetoxi-2-piperidona, por cianoeti-
lación de malonato de dietilo y subsecuente hidrogenación catalítica
[10].
mente las reacciones de Japp-Klingemann y Fischer, con lo
que se obtuvo 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carboli-
na (12), la cual se transformó finalmente en 6-amino-1,2,3,4-
tetrahidro-1-oxo-β-carbolina (9) por hidrólisis ácida.
Para comparar los rendimientos globales de ambas rutas
de síntesis, la de Abramovitch y la realizada por nosotros en la
obtención de 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolina (9)
(Esquema 2), consideramos necesario tomar en cuenta el ren-
dimiento de hidrólisis de la p-nitroacetanilida (5) (materia pri-
ma en nuestra vía de síntesis), para obtener p-nitroanilina (6)
(materia prima en la vía de síntesis de Abramovitch y Shapi-
ro). El rendimiento informado es de 96 % [12].
En el caso de la primera síntesis fue necesaria otra con-
sideración, la de tomar el rendimiento de 100 % en la reacción
de Japp-Klingemann para la producción de la p-nitrofenil-
hidrazona de la 2,3-dioxopiperidona (7), puesto que, con base
en las cantidades de los reactivos (1.52 g, 0.011 moles de p-
O O
(a), (b):
H2 N HN
96 %
NO2 [12]
6 5
[6] (a), (b):
100 %
O2 N
N NH
N N
7 H O H
(a), (b):
[6] 96.6 %
O2 N
O O
nitroanilina y 1.7 g, 0.0099 moles de 3-carbetoxi-2-piperi-
dona) y el producto (2.8 g, 0.01129 moles de p-nitrofenil-
hidrazona de la 2,3-dioxopiperidona) informadas por Abramo-
vitch, el rendimiento resultaría ser de 113.6 % [6].
De esta manera, el rendimiento global para la ruta de A-
bramovitch [6] es de 53.2 %, mientras que en nuestro caso fue
de 76.6 %.
En ambas rutas de síntesis de 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-
1-oxo-β-carbolina (9), fundamentalmente se emplean cuatro
reacciones, pero la diferencia es el orden de la secuencia, sien-
do en el primer caso hidrólisis, reacción de Japp-Klingemann,
ciclización de Fischer y una reducción, y en el segundo la re-
ducción va al principio y la hidrólisis al final del proceso.
Debido al orden secuencial diferente de las reacciones, el
grupo unido al anillo bencénico, determina la magnitud de los
rendimientos, tal es el caso de la reacción de Japp-Klinge-
mann, en la que se desfavorece el rendimiento cuando el gru-
po electroatractor (nitro; 100 %; Tabla 1) se sustituye por un
electrodonador (acetamido; 88.5 %). De igual forma, en la
ciclización de Fischer el rendimiento disminuye de 96.6 % a
92.4 %.
Los resultados obtenidos en las reacciones de Japp-Klinge-
mann y Fischer son congruentes con los informados por
Abramovitch y Shapiro [4-6] como se puede ver en la Tabla 1, ya
que el grupo acetamido es un activador moderado, mientras que
el grupo metoxi es activador fuerte y el nitro desactivador fuerte.
En estas dos reacciones aludidas en el párrafo anterior, el
(c) : 95.6 %
HN rendimiento de nuestra vía de síntesis disminuye con relación
NO2 NH 2
a la ruta de Abramovitch, sin embargo, el rendimiento total
10 mejora (de 53.2 % a 79.6 %) debido a la mayor facilidad en la
(c): 88.5 %
O
reacción de reducción catalítica del grupo nitro en la p-nitro-
HN
acetanilida (5) con referencia a la 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1-
N NH
oxo-β-carbolina (8).
O
11
(c): 92.4 %
O Parte experimental
HN

N
NH
N
NH El cianoetilmalonato de dietilo (3) se produjo a partir de malo-
(b): 79.6 %
8 H O H O nato de dietilo (1), con acrilonitrilo (2), empleando una modi-
(a): 57.4 % (c): 98 % 12
[6] ficación [10] a la técnica descrita por Albertson y Fillman
H2 N [11]. La 3-carbetoxi-2-piperidona (4) se obtuvo por la técnica
N
NH descrita en el mismo trabajo [11]. La 6-nitro-1,2,3,4-tetrahi-
9 H O dro-1-oxo-β-carbolina (8), se sintetizó usando la técnica infor-
Global (a): 53.2 % [6] Global (b) :73.8 % Global (c) :76.6 % mada [6]. Las reducciones catalíticas se realizaron en un reac-
Esquema 2. Síntesis de 6-Amino-1:2:3:4-tetrahidro-1-oxocarbolina; tor Parr Modelo 4581. La identificación de los productos se
(a) Ruta de Abramovitch; (b) Ruta de Abramovitch modificada en el realizó con los datos espectroscópicos en RMN de 1 H y 13 C,
presente trabajo; (c) Ruta desarrollada en el presente trabajo. determinados en un espectrómetro Bruker modelo Avance
Síntesis de 6-acetamido- y 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolinas
DMX500 empleando DMSO-d6 como disolvente. Los puntos
de fusión se determinaron en un Fisher Digital Melting Point
Analyzer Model 355 y fueron corregidos.
Obtención de 6-nitro-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-
β-carbolina (8)
Para la síntesis de la carbolina 8 se empleó la técnica descrita
por Abramovitch [6]. Las constantes espectroscópicas son:
RMN 1 H (DMSO-d6, 500 MHz, asignaciones por Gradiente-
Cosy, Gradiente-Noesy y simulación de espines-NMRSIM-
Bruker) δ 12.39 (1H, s, H-9N), 8.62 (1H, d, J5,7 = 2.30, H-5),
8.08 (1H, dd, J5,7 = 2.30, J 7,8 = 9.07, H-7), 7.84 (1H, t, J2N,3 =
2.57, H-2N), 7.54 (1H, d, J7,8 = 9.07, H-8), 3.59 (2H, td, J2N,3
= 2.57, J3,4 = 6.95, H-3), 3.04 (2H, t, J3,4 = 6.95, H-4); RMN
13C (DMSO-d , 125 MHz, asignaciones por Gradiente-HSQC
6
y Gradiente-HMBC) δ 160.97 (C-1), 140.89 (C-6), 139.86 (C-
8a), 130.60 (C-9a), 124.18 (C-4b), 120.68 (C-4a), 118.78 (C-
7), 117.69 (C-5), 112.88 (C-8), 40.89 (C-3), 20.00 (C-4).
Obtención de p-aminoacetanilida (10)
Se colocaron 30 g (0.167 moles) de p-nitroacetanilida (5), en el
reactor Parr con 350 mL de metanol y 0.15 g de PtO 2 ; se agitó
mecánicamente para continuar con la inyección de H2 durante
4 h manteniendo la presión entre 20-40 psi. La temperatura ini-
cial fue de 24 °C y se incrementó espontáneamente hasta un
máximo de 44 °C. La mezcla de reacción se filtró y luego se
eliminó el disolvente a presión reducida quedando 23.92 g
(0159 moles) del producto, el cual después de purificar por
tratamiento con carbón activado y cristalización con etanol-
agua dio un pf 163-165 °C (informado [12]: 163.5-166 °C).
Obtención de p-acetamidofenilhidrazona
de la 2,3-piperidindiona (11)
Solución A (sal potásica del ácido 2-oxopiperidin-3-carboxíli-
co): Se disolvieron 6.8 g (0.0398 moles) de 3-carbetoxi-2-
piperidona (4) en una solución de 2.4 g de KOH en 80 mL de
agua y con agitación se dejó reposar a temperatura ambiente
por 24 horas.
Solución B (cloruro de p-acetamidobencendiazonio): Se
disolvieron 6.1 g (0.0407 moles) de p-aminoacetanilida (10)
en una mezcla fría de 11.0 mL de ácido clorhídrico concentra-
do y 60 mL de agua. La mezcla se enfrió a 0-5 ºC y se adi-
cionó una solución fría de 3.6 g (0.0522 moles) de nitrito de
sodio en 10 mL de agua. La temperatura se mantuvo a 0 ºC y
se destruyó el exceso de ácido nitroso con urea, a continua-
ción se neutralizó con carbonato de potasio al 10 % y se filtró
para eliminar impurezas.
La solución B (cloruro de p-acetamidobencendiazonio) se
adicionó a la solución A (sal potásica del ácido 2-oxopiperi-
din-3-carboxílico) con agitación eficiente y previamente en-
friada a 0-5 °C. Inmediatamente se llevó el pH a 3-4 por adi-
ción de ácido acético glacial frío, manteniendo la temperatura
entre 0-5 °C. Se continuó con la agitación en frío por 8 h y la
mezcla de reacción se guardó en refrigeración hasta el día
siguiente. El producto se separó por filtración, se secó y se
pesó (9.15 g, 0.0352 moles, 88.5 %, pf 253-5 °C).
81
Obtención de 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-
β-carbolina (12)
7.61 g. (0.0293 moles) de p-acetamidofenilhidrazona de la
2,3-piperidindiona (11) se calentaron a reflujo con 40 mL de
ácido fórmico al 85 % durante 2 h. Se adicionaron 80 g de
hielo-agua a la mezcla de reacción y se mantuvo por 2 h con
agitación. El producto se separó por filtración, se lavó con
agua y se secó. Al neutralizar el filtrado con NaHCO3 se obtu-
vo más producto, el cual después de lavar y secar, se reunió
con el anterior dando un total de 6.58 g (0.0271 moles; 92.4
%) con pf > 320 °C. RMN 1 H (DMSO-d 6 , 500 MHz, asigna-
ciones por Gradiente-Cosy, Gradiente-Noesy y simulación de
espines-NMRSIM-Bruker) δ 11.54 (1H, s, H-9N), 9.87 (1H, s,
HNCOCH3 ), 7.92 (1H, dd, J5,7 = 1.91, J5,8 = 0.74, H-5), 7.58
(1H, t, J2N,3 = 2.65, H-2N), 7.30 (1H, dd, J7,8 = 8.79, J5,8 =
0.74, H-8), 7.27 (1H, dd, J7,8 = 8.79, J5,7 = 1.91, H-7), 3.49
(2H, td, J3,4 = 6.94, J2N,3 = 2.65, H-3), 2.86 (2H, t, J3,4 = 6.94,
H-4), 2.04 (3H, s, CH3 CONH); RMN 13 C (DMSO-d 6 , 125
MHz, asignaciones por Gradiente-HSQC y Gradiente-HMBC)
δ 167.82 (CH3 CONH), 161.84 (C-1), 133.80 (C-8a), 131.91
(C-6), 127.82 (C-9a), 124.65 (C-4b), 118.06 (C-7), 117.96 (C-
4a), 112.45 (C-8), 109.84 (C-5), 41.15 (C-3), 23.95 (C-4),
20.36 (CH3 CONH).
Obtención de 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-
β-carbolina (9)
Método A: A 5 g (0.0206 moles) de 6-acetamido-1,2,3,4-
tetrahidro-1-oxo-β-carbolina (12) se adicionaron 20 mL de
HCl al 18 % y se calentó a temperatura de reflujo por 2.5 h.
La mezcla de reacción se vació en 20 g de agua-hielo con
agitación y se neutralizó con carbonato de sodio en frío, el
producto se filtró, se secó y se pesó (4.05 g, 0.0202 moles; 98
%; pf 280-2 °C; informado 281-282 °C [6]).
Método B: Se colocaron 12 g (0.0519 moles) de 6-nitro-
1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolina con 1 g de Pd / C y 700
mL de AcOH en el reactor Parr; se inyectó H2 a 20 psi con
agitación vigorosa y se mantuvo la presión a 16-20 psi a tem-
peratura ambiente. Al término de la reacción (2.5 h) se filtró la
mezcla de reacción y se eliminó el ácido acético por desti-
lación a presión reducida. El residuo se trató con agua, se neu-
tralizó con NaHCO3 , se filtró y se pesó (8.31 g, 0.0414 moles,
79.6 %; pf 280-2 °C; informado 281-282 °C [6]). RMN 1 H
(DMSO-d 6 , 500 MHz, asignaciones por Gradiente-Cosy,
Gradiente-Noesy y simulación de espines-NMRSIM-Bruker)
δ 11.07 (1H, s, H-9N), 7.40 (1H, d, J2N,3 = 2.38, H-2N), 7.11
(1H, m, H-7), 6.65 (1H, m, H-8), 6.66 (1H, m, H-5), 4.59 (2H,
sa, H2 N-C-6), 3.46 (2H, td, J2N,3 = 2.38, J 3,4 = 6.99, H-3), 2.78
(2H, t, J3,4 = 6.99, H-4); RMN 13C (DMSO-d 6 , 125 MHz, a-
signaciones por Gradiente-HSQC y Gradiente-HMBC) 162.13
(C-1), 141.65 (C-6),131.09 (C-8a), 126.82 (C-9a), 125.72 (C-
4b), 116.50 (C-4a), 115.63 (C-5), 112.68 (C-7), 101.70 (C-8),
41.20 (C-3), 20.44 (C-4).
82 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Conclusiones
Se desarrollaron dos vías de síntesis, ambas con mejor
rendimiento que el informado en la literatura (Tabla 1), para la
obtención de 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolina
(9). Además se describe la obtención de una nueva carbolina,
la 6-acetamido-1,2,3,4-tetrahidro-1-oxo-β-carbolina (12).
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12. Vogel, A. I., in: Vogel’s Textbook of Practical Organic
Chemistry. 5th. Ed. Longman Scientific & Technical, Great
Britain, 1989, 920.
 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 83-92
Investigación
Micromecánica de deformación de fibras de polietileno usando
espectroscopía Raman
P.I. González-Chi*1 y R. J. Young2
1 Centro de Investigación Científica de Yucatán, Calle 43, No. 130, Col. Chuburná de Hidalgo, Mérida 97200,
Yucatán, México. E-mail:ivan@cicy.mx
2 Manchester Materials Science Centre. University of Manchester/UMIST. Grosvenor Street, Manchester, M1 7HS, UK
Recibido el 25 de octubre del 2001; aceptado 26 de febrero del 2002
Resumen. La micromecánica de deformación en fibras de ingeniería
de polietileno fue estudiada con espectroscopía Raman. Se observó el
desplazamiento de la banda 1129 cm–1 respecto a la deformación o el
esfuerzo aplicados a tensión; esta banda corresponde al estiramiento
simétrico del enlace C-C de la cadena principal del polietileno. Así
mismo, el comportamiento de la fibra a compresión fue estudiado por
flexión a cuatro puntos. La banda Raman 1129 cm –1 se desplazó en
forma lineal tanto a tensión como a compresión hasta la falla. La
exactitud de las lecturas fue valorada estudiando la relajación de la
fibra y su efecto sobre el desplazamiento de la banda Raman así
como la variabilidad de la señal Raman a lo largo de la fibra.
Palabras clave: Espectroscopía Raman, análisis micromecánico,
fibra de polietileno.
Introducción
La espectroscopía Raman se basa en la detección de la radia-
ción electromagnética difractada inelásticamente, originada
por la interacción de las moléculas de un material con una
radiación monocromática. Este fenómeno fue reportado por
primera vez en 1928 por C.V. Raman en la India, sin embargo,
solo en los últimos años ha encontrado una gran aplicabilidad.
Cuando un haz de radiación electromagnética interactúa
con un material, la radiación puede ser transmitida, absorbida
o difractada. Un cuerpo trasparente transmitirá toda la radia-
ción sin cambiar la frecuencia del haz. La absorción de radia-
ción electromagnética depende principalmente de la naturaleza
vibracional de las moléculas del cuerpo receptor y de la fre-
cuencia de la radiación incidente. A temperatura ambiente, las
moléculas vibran permanentemente y, si su frecuencia corres-
ponde a la frecuencia de la radiación, la absorción tiene lugar,
lo cual cambia los modos vibracionales de las moléculas e in-
crementa su energía [1]. Este es el principio básico para espec-
troscopía infrarroja.
Un material es capaz de difractar radiación en tres dife-
rentes procesos: El campo eléctrico oscilante de la radiación
incidente induce un dipolo en las moléculas del material.
Dicho dipolo oscila a la frecuencia de la radiación y cuya
amplitud es controlada por la frecuencia de la vibración de las
moléculas, lo que conduce a la emisión de radiación. La ma-
yor parte de la radiación incidente es difractada elásticamente
Abstract. Raman spectroscopy was used to follow the micromecha-
nics of deformation for single filaments of High Performance Gel-
spun Polyethylene Fibres. The shift of the 1129 cm –1 Raman band
corresponding to the symmetric C-C stretching mode of polyethylene
was followed in tension as a function of the applied stress or strain.
The compressive behaviour of the fibre was also studied using Four-
point Bend geometry. The 1129 cm–1 Raman band shifted in a linear
fashion, both in tension and in compression until failure. The accura-
cy of the results was assessed by studying the effect of fibre relaxa-
tion on the Raman band shifting and also by measuring the variability
of Raman signal along the fibre.
Keywords: Raman spectroscopy, micromechanical analysis, polye-
thylene fibres.
(radiación Raleigh) de tal forma que su frecuencia no cambia
[2]. Una pequeña fracción de la radiación incidente es difrac-
tada inelásticamente; ésta corresponde al efecto Raman que se
produce por el intercambio de energía entre una molécula y
los fotones de la radiación incidente. La frecuencia de esta
pequeña fracción se encuentra desplazada respecto a la de la
radiación incidente en una cantidad equivalente a la frecuencia
de vibración de las moléculas.
La dispersión Raman de frecuencia menor a la de la inci-
dente es conocida como la radicación Stokes, y corresponde a
la transición de las moléculas a niveles altos de energía. La
dispersión Raman de frecuencia mayor a la de la incidente es
conocida como la radiación anti-Stokes, y corresponde a la
transición de las moléculas a niveles bajos de energía [3]. La
cantidad de energía ganada o perdida por los fotones (o des-
plazamiento en la frecuencia respecto a la radicación inciden-
te) depende del estado rotacional y vibracional específico de
cada molécula, el cual, a su vez, depende de la composición y
tipos de enlaces presentes en ella.
Uno de los problemas más importantes en espectroscopía
Raman es la fluorescencia, la cual se presenta cuando una
molécula excitada electrónicamente cae espontáneamente a
menores niveles de energía, emitiendo una fuerte radicación
que puede sobrepasar la señal Raman. Este fenómeno puede
ser intrínseco de la muestra o producida por sobre-exposición
al láser, el cual puede quemar el material o las impurezas que
este pueda contener. Existen varias formas de solucionar este
84 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
problema: usar diferentes frecuencias de excitación, usar pul-
sos o utilizar láseres de alta potencia de cercano infrarrojo co-
mo Nd:Yag
Las grandes ventajas que esta técnica posee son: No re-
quiere preparación de muestra, lo que permite probar piezas
reales (a diferencia de la espectroscopia de infrarrojo). Se
puede utilizar agua como disolvente, posee una alta sensibili-
dad a vibraciones de elementos poco pesados como carbono,
lo que la hace ideal para estudiar la cadena principal de polí-
meros. Se puede usar básicamente cualquier tipo de fuente,
desde UV hasta IR dependiendo del tipo de material. Se
pueden tomar espectros a frecuencias menores de 400 cm–1 y
la técnica es de naturaleza no destructiva.
La espectroscopía Raman ha evolucionado rápidamente
en los últimos años hasta convertirse en una técnica sencilla y
accesible. Hoy en día es una importante técnica analítica para
identificar la composición y estructura de materiales y está
siendo rápidamente adoptada por la industria como un medio
para determinar la calidad y consistencia de materiales no-
metálicos. Muchos fueron los problemas que en el pasado
impidieron que esta técnica fuera una herramienta de análisis
accesible, ya que los equipos eran caros, se requerían largos
tiempos de exposición y la adquisición y el procesamiento de
datos no eran simples. Tres fueron los avances tecnológicos
que invirtieron esta situación: El láser, las cámaras tipo CCD
y los filtros y gradillas holográficas.
Un espectrofotómetro moderno de micro-Raman consiste
de las siguientes partes:
a) Láser. Esta es la fuente para iluminar la muestra. Es consi-
derado como la fuente ideal para Raman, ya que el espec-
tro, por su débil naturaleza, requiere de una radiación inci-
dente muy fuerte. Provee un haz continuo de radiación mo-
nocromática a una frecuencia conocida y estable con una
intensidad típica para Raman en el intervalo visible de 30
mW. Cualquier tipo de láser puede utilizarse, sin embargo
los He-Ne (632.8 nm) y de Ar (488 y 514.5 nm) son muy
populares por su bajo costo, mínimo mantenimiento, com-
pactos, de fácil manejo, estables y enfriados por aire.
b) Monocromador. Su finalidad es separar la radiación inci-
dente de la radiación Raman y analizarla. Los primeros
monocromadores eran dispersivos basados en un doble
monocromador de larga distancia focal o en un triple mono-
cromador de distancia focal corta. Actualmente se usa un
filtro holográfico que evita la entrada de la radiación con la
misma frecuencia que la del haz incidente y transmite el
haz filtrado a una gradilla holográfica que separa la radia-
ción Raman en sus distintas frecuencias en una forma efi-
ciente y rápida.
c) Cámara CCD. Este tipo de cámara (“Charge Couple
Device”) es capaz de medir el más débil de los espectros
Raman. Es muy sensible y no puede ser sobresaturada. En
un principio un fotomultiplicador fue utilizado para conver-
tir la señal luminosa en eléctrica; sin embargo, poseía varias
P. I. González-Chi y R. J. Young
desventajas: Baja sensibilidad, alto ruido y largos tiempos
de exposición [4]. Un CCD es un arreglo óptico que se basa
en la acumulación de pixeles cargados fotogenerados [5].
Inicialmente, estas cámaras eran enfriadas con nitrógeno
líquido, ya que para mantener una relación ruido / señal
baja requerían de una operación a muy baja temperatura.
Las versiones modernas son enfriadas dieléctricamente y
han conducido a la construcción de sistemas de alta resolu-
ción, bajo costo, alta eficiencia y fácil uso.
d) Microscopio. Este provee del medio adecuado para mani-
pular y observar la muestra y para enfocar el láser sobre la
superficie de ésta en una área muy pequeña, permitiendo la
colección de espectros aún en piezas de dimensiones
reducidas. El microscopio es utilizado además para colectar
la radiación Raman y dirigirla hacia el monocromador y el
CCD.
e) Computadora. Colecciona, procesa y almacena las imá-
genes de la muestra y la información espectral obtenida por
el CCD. Además controla el monocromador y analiza el
espectro Raman.
f) Video. Los espectrofotómetros modernos poseen una
cámara de video que muestra la imagen magnificada de la
zona del especimen enfocada por el microscopio, de donde
se tomará el espectro. Permite, además, el exacto enfoque
del láser sobre la muestra sin que el operador corra riesgo de
sobreexposición a la radiación.
Muchos han sido los materiales estudiados por espectros-
copía Raman; sin embargo, existe un gran interés en los mate-
riales conocidos como “High Performance”. Este término en
inglés ha sido aplicado a materiales que presentan propiedades
extraordinarias; en el caso de fibras, este término se refiere a
fibras ligeras con muy alta resistencia mecánica. Las fibras de
polietileno (PE) preparadas por el método “Gel-spun” son
consideradas como las más fuertes fibras sintéticas hechas por
el hombre [6]: Son 10 veces más fuertes que el acero, pero tan
ligeras que flotan en el agua. La misma naturaleza propor-
cionó el modelo perfecto que condujo al diseño de este tipo de
fibra, el diamante: Un alto contenido de enlaces C-C de alta
resistencia es lo que le confiere a la gema su reconocida du-
reza. Como el diamante, la cadena principal de las moléculas
de PE está formada por enlaces C-C, que en la fibra se en-
cuentran alineados en la dirección axial de la fibra.
La espectroscopía Raman ha probado ser una buena técni-
ca para estudiar la deformación de fibras de ingeniería, las
bandas Raman correspondientes a los enlaces C-C se des -
plazan linealmente respecto a la carga o la deformación apli-
cadas. Esta relación ha sido aprovechada para el estudio mi-
cromecánico de materiales compuestos, ya que la carga o la
deformación transferida a una fibra usada como refuerzo, pue-
de ser directamente medida de su espectro Raman [7, 8, 9, 10,
11, 12, 13]. En el caso de las fibras de PE, es posible obtener
espectros Raman bien definidos [8, 12, 13, 14]; sin embargo,
Micromecánica de deformación de fibras de polietileno usando espectroscopía Raman
Fig. 1. Patrón de difracción de rayos X de ángulo amplio para Spectra
1000 (US).
la intensidad y el desplazamiento de sus bandas son relativa-
mente bajos en comparación con otros materiales como Ke-
vlar o polidiacetilenos, en los cuales la intensidad de sus ban-
das Raman se incrementa por resonancia y sus desplazamien-
tos son fuertes [14, 15]. El estudio de la deformación molecu-
lar de fibras “Gel-spun” de PE usando espectroscopía Raman
[7, 8, 13] demostró que las bandas correspondientes a las
vibraciones simétrica (1129 cm–1) y antisimétrica (1060 cm–1)
del enlace C-C muestran una distribución bimodal cuando son
deformadas. Este comportamiento se debe a la presencia de
dos tipos de cristales en la estructura de la fibra; uno de los
cuales, no se encuentra eficientemente orientado con el esfuer-
zo aplicado y en consecuencia su acoplamiento con éste es
pobre. Por lo tanto el desplazamiento de banda es menor [8,
10, 16]. Este comportamiento no es notorio a bajos niveles de
carga o deformación, ya que ambas bandas están muy cerca
una de la otra; la separación se hace más notoria a altos nive-
les de deformación. La principal inconveniencia de este fenó-
meno se presenta cuando se ajustan las bandas para determi-
nar su posición. Normalmente se usan ajustes gausianos o
lorencianos, los cuales son funciones simétricas. Se ha encon-
0 US
Flujo de Calor (W/g)
-10
TS
-20
-30
-40
0 50 100 150
o
Temperatura ( C)
Fig. 2. Termograma por calorimetría diferencial de barrido (DSC): 10
mg de muestra con rampa de calentamiento de 10° / min. Fibras de
polietileno Spectra 1000, sin (US) y con (TS) con tratamiento plasma.
85
trado que la separación de bandas es particularmente notoria a
niveles de deformación superiores a 1.5 %, lo cual conduce,
en un principio, a una banda asimétrica que posteriormente se
transforma en dos picos bien definidos [20, 25].
En el presente estudio, monofilamentos de PE fueron
deformados a tensión a diferentes niveles de carga o deforma-
ción y simultáneamente se observó el desplazamiento de la
banda a 1129 cm–1 . Las fibras fueron deformadas también
usando una geometría de flexión a cuatro puntos, lo que nos
permitió someter la fibra tanto a tensión como a compresión.
Finalmente, la exactitud de las lecturas en la fibra fue estudia-
da mediante el efecto de la relajación sobre el desplazamiento
de la banda Raman, así como la variabilidad de la banda a
1129 cm –1 a lo largo de la fibra bajo diferentes niveles de de-
formación.
Parte experimental
La fibra. Dos diferentes grados comerciales de fibras fueron
proporcionados por la empresa Allied-Signal, Petersburg,
USA: Spectra 1000 (US) y Spectra 1000 con tratamiento plas-
ma (TS)—El tipo exacto de tratamiento superficial es un
secreto industrial. El diámetro de la fibra fue de 34.2 ± 7.4 µm
para US y de 32.4 ± 5.4 µm para TS. El productor describe
estas fibras como materiales con un módulo elástico de 170
GPa, una resistencia de 3 GPa y una máxima elongación de
2.7 % (a una velocidad de deformación de 0.02 s–1 ) [6]. La
orientación molecular de estas fibras puede ser observada en
la Fig. 1, la cual corresponde a los patrones de difracción de
rayos X de ángulo amplio para US (TS presentó el mismo
comportamiento). Los patrones ecuatoriales agudos y la pre-
sencia de una capa de líneas meridionales indican que los
cristales están bien orientados a lo largo del eje principal de la
fibra [8].
La Fig. 2 muestra los termogramas de las fibras US y TS,
medidos por calorimetría diferencial de barrido (DSC). La
fusión de la fibra de PE tipo “Gel-spun” presenta picos endo-
térmicos múltiples que se atribuyen a la existencia de cristales
con dos componentes morfológicamente diferentes [18]. El
pico inicial de fundido es causado por la fusión de cristales or-
torrómbicos no constreñidos, el segundo pico se debe a la
transición de ortorrómbico a hexagonal. Algunas veces se pre-
senta un tercer pico, el cual se puede separar en varios picos
menores que se deben a la fusión de la fase hexagonal [19].
El punto de fusión (T m) y la entalpía de fusión (∆H) de US fue
146.9 ± 1.3 °C y 250.9 ± 14.6 J / g, respectivamente. Para TS,
Tm =147.4 ± 0.8 °C y ∆H = 234.8 ± 13.3 J/g. El grado de
cristalinidad de la fibra (x c) puede ser calculado dividiendo
∆H entre la entalpía de fusión de muestra 100 % cristalina;
200 250
este valor ha sido reportado como 295.5 J / g [20]. Para US, xc
= 84.9 ± 4.9 %, y para TS, 79.5 ± 0.4 %.
Espectrofotómetro Raman. El espectrofotómetro Raman uti-
lizado en el presente trabajo fue un Micro-espectrofotómetro
Renishaw 1000 [21] equipado con un láser He-Ne (633 nm)
86 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
de 30 mW de Spectra-Physics. El poder del láser en la superfi-
cie de la muestra pudo ser controlado en un intervalo de 0.1-
10 mW usando un filtro de atenuación. En el caso de las fibras
de PE, se usó una intensidad de aproximadamente 1.4 mW. El
espectrofotómetro estaba equipado con un microscopio
Olympus BH2 con objetivos de 20× y 50×. La principal carac-
terística del sistema Renishaw se basa en que el microscopio
puede ser operado como un sistema confocal [22] lo que per-
mite que el láser pueda ser enfocado de forma precisa a dife-
rentes niveles de profundidad en la muestra en la forma de una
pequeña elipse de 2 × 1 mm (ejes principales) con 2 mm de
penetración (objetivo de 50×). El monocromador es una reji-
lla de difracción simple con una resolución espectral de 1
cm–1 . La intensidad de las bandas Raman en materiales con un
alto grado de orientación molecular es muy sensible a la direc-
ción de polarización del láser; esto ocurre con las fibras de
ingeniería de PE y por ello, el instrumento está equipado con
un lente polarizador paralelo a la dirección axial de la fibra.
Finalmente, un detector multicanal tipo CCD (“Charge-cou-
pled device”) enfriado por aire, fue utilizado para el conteo de
fotones y registro de los espectros. La gran ventaja del sistema
Renishaw es su alta sensibilidad. Sin embargo, el poder del
láser, su alineamiento, el ajuste de las aperturas y el área del
CCD, necesitan un control adecuado para obtener buenos
resultados.
Procedimiento experimental
Desplazamiento de bandas inducido por el aumento en la
deformación. El desplazamiento de la banda Raman a 1129
cm–1 (ν) fue estudiado como función de la deformación (ε) de
la fibra PE en aire para determinar el cociente dν / dε, conoci-
do como el Factor de Sensibilidad Raman a la deformación
aplicada.
Los especímenes fueron preparados según el procedi-
miento antes descrito. Las fibras montadas en los marcos de
papel fueron pegadas por los extremos con adhesivo ciano-
acrílico a un marco de carga controlado por un micrómetro
(Fig. 3). El marco de carga fue colocado en la plataforma del
microscopio Raman y ambas orillas del marco de papel fueron
cortadas. La fibra fue ligeramente extendida, y un punto en su
parte central fue enfocado, de donde se tomó un espectro con
4 s de exposición. El paso siguiente fue deformar la fibra a
intervalos de 0.02 % usando el micrómetro. Después de cada
deformación se dieron 30 s para permitir que la fibra se rela-
jara. Se enfocó otro punto en el centro de la fibra y se tomó un
segundo espectro de 4 s. Este procedimiento se repitió hasta
alcanzar 1.5 % de deformación en la fibra.
Desplazamiento de bandas inducido por un aumento en el
esfuerzo. El desplazamiento de la banda Raman a 1129 cm–1
(ν) fue estudiado como función del esfuerzo (σ) aplicado a la
fibra PE en aire para determinar dν / dσ, conocido como el
Factor de Sensibilidad Raman al esfuerzo aplicado.
Filamentos individuales de la fibra fueron enrollados y
pegados a los extremos de marcos rectangulares de papel de
P. I. González-Chi y R. J. Young
Fibra de polietileno
Deformación Deformación
Marco de papel
Fig. 3. Deformación de un filamento de PE.
100 mm de largo, utilizando una resina epóxica (Ciba-Geigy
5052). Las muestras fueron almacenadas y probadas en un
cuarto con atmósfera controlada (23 °C ± 1 °C y 50 % ± 2 %
de humedad relativa) al menos una semana después de pega-
das para asegurarse que la resina había curado completamente.
La fibra enmarcada (100 mm de longitud de prueba) fue
sujetada a un marco de carga controlado por pesos muertos.
Uno de los extremos de este marco de carga poseía una
plataforma en donde pequeños eran depositados pequeños
pesos de 2 g. El extremo opuesto del marco poseía una celda
de carga de 1 N (Fig. 3). El marco de carga con la fibra se
colocó en la plataforma del microscopio Raman. El marco de
papel fue cortado por ambos lados, se enfocó un punto en el
centro de la fibra fue enfocado y se tomó un espectro de 4 s de
exposición.
Un peso de 2 g fue colocado en la plataforma del marco
de carga; 15 s después, la señal de la celda de carga se estabi-
lizó y se registró su lectura (este tiempo fue necesario para
permitir que la fibra reaccionara al esfuerzo aplicado). Se
enfocó la fibra y se tomó un nuevo espectro de 4 s. Este pro-
cedimiento fue repetido sistemáticamente a intervalos de 2 g
hasta un máximo de 48 g.
Flexión a cuatro puntos. El método de flexión a cuatro puntos
fue utilizado para estudiar la distribución de esfuerzos en una
fibra deformada tanto a tensión como a compresión. Una viga,
al ser flexionada a cuatro puntos, su parte central sufre
simultáneamente 2 tipos de deformación en su dirección axial:
una cara está sometida a tensión y la opuesta a compresión.
De esta forma, una fibra situada longitudinalmente en una de
las caras de la viga estará sometida a la deformación corres-
pondiente.
Una fibra continua fue ocluida en la superficie de una de
las caras de una barra de poli(acrilato de metilo) (PMMA) de
84 × 1.2 × 60 mm. Para ello una solución diluida de este mis-
mo material fue evaporada en la superficie de la barra para
formar una película de tal forma que la fibra fue cubierta com-
pletamente. Se tomaron espectros de 5s de exposición en el
centro de una fibra adherida, sometiendo esta cara de la barra
a tensión; de la misma forma, se tomaron espectros del centro
de una fibra adherida a la cara de la barra sometida a compre-
sión. Una pequeña galga extensométrica fue pegada a la barra
con adhesivo cianoacrílico y utilizada para controlar la defor-
mación aplicada a la barra a intervalos de aproximadamente
0.01 % (Fig. 4).
Relajación de la fibra. El cambio de posición de la banda a
Raman 1129 cm–1 en la fibra de PE fue estudiado como fun-
Micromecánica de deformación de fibras de polietileno usando espectroscopía Raman 87

Superficie interna 7500

Deformación por compresión
Fibra de polietileno
Carga Carga

7000

Intensidad
Deformación en Fibra

0.16 %
Carga Carga 6500
Superficie externa
Deformación por tensión 0.8 %

a) b) 1.4 %

6000
Fig. 4. Geometría de Flexión a cuatro puntos.
1090 1100 1110 1120 1130 1140 1150
Número de de
Número onda Raman
Onda Raman(cm
(cm ))
–1
-1

Fig. 6. Desplazamiento y ensanchamiento de la banda Raman a 1129

ción del tiempo a diferentes niveles de deformación. Las
fibras fueron montadas en marcos de papel. Cada especimen
fue pegado por sus extremos con pegamento cianoacrílico a
un marco de carga controlado por un micrómetro (Fig. 3). El
marco de carga fue entonces colocado en la plataforma del
microscopio Raman, el marco de papel fue cortado en ambos
lados y la fibra fue ligeramente estirada para mantenerla
estable. Un punto en la zona central de la fibra fue selecciona-
do al azar y 50 espectros fueron tomados en este punto con 2 s
de exposición (no se reenfocó entre espectros).
El paso siguiente fue deformar la fibra aproximadamente
0.5 %; de inmediato se enfocó al azar un punto central de la
fibra y 50 espectros de 2 s de exposición fueron tomados y de
esta forma monitorear los 100 s siguientes a la aplicación de la
deformación. A la muestra se le permitió relajarse libremente
por 10 minutos y entonces, un segundo punto central fue
seleccionado (para evitar sobre-exposición al láser) y otros 50
espectros fueron tomados como antes. Este procedimiento fue
repetido para 1 y 1.5 % de deformación en una sola fibra.
Distribución espectral. La distribución de la posición de la
banda Raman 1129 cm –1 , así como la variación de las medi-
ciones a lo largo de la fibra fueron monitoreadas.
La fibra montada en un marco de papel (Fig. 3.1) fue
pegada por sus extremos a un marco de carga usando pega-
mento cianoacrílico (Fig. 3). El marco de carga fue colocado
14000
13000
-1
1129 cm
12000 C-C simétrico
11000
Intensidad
cm–1 de la fibra de PE (US).
en la plataforma del microscopio Raman, el marco de papel
fue cortado por sus costados y la fibra ligeramente estirada
para mantenerla estable; un punto en la parte central de la
fibra fue escogido al azar y 50 espectros de 2 s de exposición
fueron tomados sin reenfoque. Después, 50 espectros más
fueron tomados al azar a lo largo de una sección central de la
fibra de 2 cm de largo.
El paso siguiente consistió en deformar la fibra un 0.5 %
usando el micrómetro del marco de carga. La fibra se dejó
relajar por 10 minutos; un segundo punto central fue escogido
al azar (para evitar sobre-exposición al láser) y dos grupos de
50 espectros fueron tomados como se explicó anteriormente.
Todo este proceso se repitió para 1 y 1.5 % de deformación en
la misma fibra.
Resultados y discusión
Movimiento de bandas inducido por deformación. La Fig.
5 muestra un espectro Raman típico de la fibra de PE [23].
Las bandas correspondientes a la vibración simétrica (1129
cm–1 ) y antisimétrica (1060 cm –1) del enlace C-C presentan
normalmente el movimiento mas grande respecto al esfuerzo
aplicado (dν / dσ) [12]. La banda a 1129 cm–1 presentó la más
alta intensidad y definición, por lo que fue seleccionada para
el presente estudio. La Fig. 6 muestra el movimiento y el
ensanchamiento de la banda 1129 cm–1 causado por el incre-
mento en el nivel de esfuerzo aplicado a tensión [16].
La Fig. 7 muestra la dependencia de la posición de la
banda Raman a 1129 cm –1 respecto a la deformación aplicada

-1
1418 cm
flexión de CH2 a tensión de 3 monofilamentos individuales tanto para US
10000

-1
como para TS. Los valores de dν / dε fueron calculados de la
1060 cm
9000
C-C asimétrico -1
pendiente de la regresión lineal de los resultados experimen-
1296 cm
torción de CH 2
torsión tales (Tabla 1). A pesar de la buena linealidad de los datos,
8000
cierto grado de variación fue encontrada, probablemente cau-
7000 sada por la lenta relajación de la fibra al ser deformada. Por
1000 1100 1200 1300 1400 1500 otra parte, la fibra pudo haberse despegado de la resina epóxi-
-1
Número de de
Número onda Raman
Onda (cm
Raman –1) )
(cm ca que la sostenía al marco de papel, lo que posiblemente
Fig. 5. Espectro Raman de la fibra de PE (US). causó un aumento la longitud de prueba de la fibra y por con-
88 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) P. I. González-Chi y R. J. Young

b) secuencia, en el nivel de deformación de la misma. La concen-

1127
TS tración de esfuerzos generados por el adhesivo epóxico en los
1
extremos de la fibra normalmente provoca la falla prematura
Número de Onda Raman (cm )
-1

1126 2
3 de un filamento [20]. Sin embargo, en el presente caso esta
1125 influencia fue leve ya que se usaron muestras con una longi-
tud de prueba larga. La fibra fue ligeramente pre-estirada para
1124
mantenerla estable y poder tomar el primer espectro. Sin
1123
embargo, esto produjo una variación en el intervalo de despla-
zamiento de la banda Raman ya que la deformación inicial no
1122 fue la misma para cada espécimen.
Este comportamiento ha sido observado con otras fibras
1121
de ingeniería como la de carbón [27, 28] o Kevlar [10, 11].
-0.1 0.0 0.1 0.2 0.3
Esfuerzo (Gpa)
0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 Debido a la alta cristalinidad y orientación longitudinal de los
Esfuerzo (GPa)
cristales en la estructura de la fibra, la aplicación de carga de-
Fig. 7. Desplazamiento de la banda Raman a 1129 cm–1 respecto a la
deformación aplicada a un monofilamento de PE deformado a ten- forma efectivamente los enlaces C-C y reduce su movilidad y
sión. a) US, b) TS. como consecuencia, su frecuencia de vibración. La principal
diferencia encontrada respecto a otras fibras de ingeniería es
que la fibra de PE presenta una menor rapidez de desplaza-
1132
b) miento; sin embargo, es lo suficientemente sensible para uti-
1131
lizarse para análisis micromecánico. Se observó también que
TS
1 la posición de la banda a un nivel de carga específico no era
Número de Onda Raman (cm )
-1

1130 2
3
muy estable con el tiempo.
1129
Desplazamiento de bandas inducido por esfuerzo. La Fig. 8
1128
muestra la dependencia de la posición de la banda a 1129
1127
cm–1 respecto al esfuerzo aplicado a tensión a monofilamentos
de US y TS. En ambos casos se observó un comportamiento
1126
lineal. La principal diferencia entre ambas fibras es que la
1125
fibra US mostró una mayor variación en la pendiente. La
Tabla 2 presenta los valores promedio de dn / ds calculados a
1124
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 partir de las pendientes de las distribuciones lineales. No se
Deformación (%)
Deformación (%) encontró evidencia de dependencia respecto al tiempo del
Fig. 8. Desplazamiento de la banda Raman a 1129 cm –1 respecto al desplazamiento de la banda Raman: Durante la prueba, cuan-
esfuerzo aplicado a un monofilamento de PE deformado a tensión. a) do un peso era agregado, la lectura de la celda de carga cam-
US, b) TS. biaba continuamente; sin embargo, después de 15 s la lectura
se estabilizaba.
La carga aplicada es medida durante el experimento y es
independiente de la longitud de prueba del especimen; por lo
1126
que el desprendimiento de la fibra no afecta los resultados
como en el caso anterior. Los valores medidos de dn / ds para
Número de Onda Raman (cm )
-1

PE son ligeramente bajos si se comparan con los de Kevlar

1125
[10, 11] y Carbón [27, 28]. Esto se debe a la naturaleza de la
fibra; sin embargo, el desplazamiento de la banda como resul-
1124
tado de la carga aplicada es claro y bien definido.
1123
Flexión a cuatro puntos. La Fig. 9 muestra la posición de la
banda Raman a 1129 cm–1 para la fibra US en función de la
1122
Tensión deformación aplicada a una viga de PMMA tanto a tensión
Compresión
como a compresión.
1121
La posición de la banda Raman para la fibra embebida en
-1.0 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 la viga antes de la deformación fue aproximadamente igual a
Deformación de la Barra
Deformación de PMMA
de la Barra (%) (%)
de PMMA la de la fibra en aire sin deformar; por lo tanto, el embebido de
Fig. 9. Desplazamiento de la banda Raman a 1129 cm-1 de la fibra de la fibra por evaporación no condujo a esfuerzos residuales. La
PE (US) en función de la deformación aplicada por flexión a cuatro banda a 1129 cm–1 es muy sensible a la deformación a tensión
puntos. y muestra una relación lineal (Fig. 9). Sin embargo, a compre-
sión se observan dos zonas; de 0 a -0.25 % de deformación la
Micromecánica de deformación de fibras de polietileno usando espectroscopía Raman 89

a) b)
1128

Número de Onda Raman (cm )

-1
1127

1126

1125
0%
0.5 %
1%
1124
1.5 %

0 40 80 720 760 800

Tiempo
Tiempo (s)
(s)
Fig. 10. Fallas reticulares (“kink bands”) generadas en la fibra de PE Fig. 11. Relajación de la fibra de PE (US) bajo diferentes niveles de
(US) a comprensión por flexión a cuatro puntos. deformación: a) 0-100 s, b) > 700 s después de la deformación inicial.

distribución es lineal y su pendiente es prácticamente idéntica
a la de la zona a tensión. La segunda zona a compresión se
encuentra mas allá de –25 % donde la posición de la banda se
estabiliza en un valor constante. Este comportamiento ha sido
observado en fibras de aramida [24, 25] pero en el caso de PE,
la parte lineal de la zona a compresión es mas corta.
A tensión la fibra muestra un desplazamiento de banda
con cierta dispersión, lo cual muy probablemente se deba a la
pobre interacción entre la fibra de PE y el PMMA. A compre-
sión la máxima posición de banda coincide con la generación
de fallas reticulares (“kink bands”) a lo largo de la fibra (Fig.
10) lo cual es un conocido modo de falla a compresión para
fibras de ingeniería [17]. Bajo esta condición la falla interfa-
cial evita que la deformación a compresión aplicada a la viga
ya no sea transmitida a la fibra, lo cual explica la presencia de
un valor máximo en la posición de la banda Raman. La zona
lineal de los datos a tensión y la de los datos a compresión
(hasta-0.25 %) fueron ajustados con una regresión lineal co-
mún para calcular el Factor de Sensibilidad Raman a deforma-
ción, dν / dε = 2.68 cm–1 / %.
Al comparar este resultado con el correspondiente a un
filamento deformado en aire (Tabla 1) la prueba en la viga
condujo a valores dν / dε mas altos. Este comportamiento
puede ser relacionado con la baja adherencia que la fibra de
PE mostró con la resina epóxica usada para pegar el filamento
al marco del papel. En trabajos previos con fibras cerámicas
[26] se encontró que al reducir la longitud de prueba de la
fibra en aire, dν / dε aumenta hasta alcanzar el valor obtenido
por flexión a cuatro puntos. El desprendimiento de la fibra de
la resina epóxica efectivamente incrementa la longitud de
prueba.
El esfuerzo a compresión de la fibra pudo ser estimado
usando flexión a cuatro puntos: la sección lineal en compren-
sión se extiende hasta -0.25% de deformación, la cual corres-
ponde a un movimiento de banda Raman de 0.675 cm–1 (usan-
do dν / dσ). Este desplazamiento puede ser transformado a
esfuerzo con dν / dσ (Sección 2.3.1) usando dε / dσ: 114.4 ±
34.4 MPa.
Relajación. La Fig. 11 muestra el cambio en la posición de la
banda Raman 1129 cm –1 en un punto de la superficie de la
fibra US como una función del tiempo a diferentes niveles de
deformación. La Fig. 11a corresponde al comportamiento de
los primeros minutos después de haber deformado la fibra y la
Fig. 11b al comportamiento 11 minutos después (a diferentes
niveles de deformación en la fibra). Claramente se observa el
proceso de relajación de la fibra: Justo después de deformar la
fibra, la banda Raman se desplaza a valores de número de
onda menores que los que presenta la fibra sin deformar; pero,
la relajación hace que con el tiempo, la banda Raman regrese
valores de número de onda mas altos. La velocidad de rela-
jación aumenta con el nivel de deformación aplicado a la
fibra, es por ello que la pendiente de la distribución aumenta
con la deformación (Fig. 11a). Después de 12 minutos, la
posición de la banda se estabiliza en un valor aproximada-
mente constante para cada nivel de deformación —la veloci-
dad de relajación se hace lenta.

Tabla 1. Factor Raman de sensibilidad a la deformación de 1129

cm–1 en PE. Tabla 2. Factor Raman de sensibilidad al esfuerzo de la banda 1129
cm–1 de PE.
Flexión a 4 puntos Monofilamento solo
Fibra dν / dε Dev. Std. dν / dε Dev. Std. Fibra dν / dσ Dev. Std.
(cm–1 / %) (cm–1 / %) (cm–1 / GPa) (cm–1 / GPa)

US 2.7 0.2 2.1 0.1 US 5.9 1.1

TS 2.3 0.3 TS 5.6 0.4
90 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) P. I. González-Chi y R. J. Young

US / En un punto
La deformación aplicada al monofilamento produce la
a)
15
10
0% deformación de los enlaces C-C de su estructura cristalina en
DS = 0.09
5
0
la dirección longitudinal. Esta deformación limita los movi-
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
miento vibracionales naturales del enlace, lo que se traduce en
15
0.5 %
una posición de banda a números de onda mas bajos, lo que se
No. de Lecturas

10
DS = 0.11
5
0 hace evidente al exponer el filamento a un rayo láser polariza-
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131

15
do en la dirección longitudinal de la fibra.
1%
10
DS = 0.12 Las fibras de PE usadas en el presente estudio tenían
5
0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
entre 80 y 85 % de cristalinidad; aunque éste, es un valor alto
15
y los cristales están orientados en la dirección longitudinal de
1.5 %
10
5
DS = 0.27 la fibra (Sección 2.1), la presencia de la fase amorfa en el
0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
material contribuye grandemente al proceso de relajación, ya
Númerode
Número deonda
Onda Raman
Raman (cm
(cm –1 ) )
-1
que, bajo tensión a deformación constante, los cristales son los
TS / En un Punto que responden de manera instantánea a la deformación aplica-
10 0% b) da (respuesta elástica), pero con el tiempo, los enredamientos
5
DS = 0.15
moleculares presentes en la fase amorfa fluyen, de tal forma
0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131 que las secciones de moléculas capaces de deslizarse se
10 0.5 % mueven (respuesta viscosa). Este fenómeno libera parte de la
No. de Lecturas

DS = 0.17
5
tensión aplicada y como consecuencia los enlaces C-C de la
0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131 zona cristalina recuperan parte de su movilidad hasta llegar a
10 1% un estado de equilibrio lo que se traduce en posiciones de
5
DS = 0.20
banda a números de onda mayores.
0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131

1.5 %
10
DS = 0.24
Distribución espectral. La Fig. 12 muestra la posición de la
5

0
banda Raman a 1129 cm–1 en un punto de una fibra a dife-
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
–1 ) -1
rentes niveles de deformación. La desviación estándar es
Número
Númerode
deonda
OndaRaman (cm(cm
Raman )
pequeña, lo que sugiere que los errores al azar asociados con
Fig. 12. Distribución de la posición de la banda Raman a 1129 cm –1
en un punto a diferentes niveles de deformación: a) US, b) TS. el equipo y a la recolección de los espectros es pequeña. Este
comportamiento es particularmente notorio a 0 % de deforma-
ción. Un incremento en los niveles de deformación produce
Tabla 3. Posición de la banda Raman 1129 cm–1 en PE medido en un un incremento en el valor de la desviación estándar; este com-
solo punto. portamiento es causado por el ensanchamiento de banda, lo
Fibra Deformación Media Dev. Std. que incrementa su asimetría y, por lo tanto, los errores de
(%) (cm–1 ) (cm–1 ) ajuste aumentan también [25].
La Tabla 4 presenta la media de la posición de la banda a
US 0 1129.73 0.09
1129 cm –1 de los espectros Raman tomados al azar a lo largo
0.5 1128.73 0.11
de 2 cm de la fibra PE a diferentes niveles de deformación. La
1 1127.75 0.12
desviación estándar en todos los casos es baja; sin embargo,
1.5 1126.71 0.27
tiende a ser más grande que para los espectros tomados en un
TS 0 1128.54 0.15
solo punto (Tabla 3). Este comportamiento es un claro reflejo
0.5 1127.38 0.17
de las diferencias estructurales existentes a lo largo de la fibra.
1 1126.29 0.20
Por otro lado, la media de la posición de la banda tiende a ser
1.5 1125.17 0.24
ligeramente mas grande, muy probablemente debido a la rela-
Tabla 4. Posición de la banda Raman 1129 cm–1 en PE a lo largo de jación de la fibra. Todos los espectros fueron obtenidos de la
2 cm. misma fibra, después de haber tomado los espectros en un solo
punto. La Fig. 13 muestra los histogramas de los espectros
Fibra Deformación Media Dev. Std.
Raman tomados al azar a lo largo de 2 cm de la fibra de PE
(%) (cm–1 ) (cm–1 )
sometida a diferentes niveles de deformación. Todos ellos pre-
US 0 1129.86 0.35 sentan distribuciones anchas a niveles bajos de deformación y
0.5 1129.31 0.21 mientras mayor es la deformación, más angosta es la distribu-
1 1128.17 0.22 ción. Aparentemente, la posición de la banda Raman es sensi-
1.5 1127.26 0.20 ble al ordenamiento local de las moléculas en la superficie de
TS 0 1128.54 0.38 la fibra causado por la deformación aplicada. Moléculas mejor
0.5 1127.38 0.22 orientadas en la dirección axial de la fibra implica un mayor
1 1126.29 0.20 acoplamiento a la deformación y por consecuencia, una
1.5 1125.17 0.17 respuesta Raman mas homogénea.
Micromecánica de deformación de fibras de polietileno usando espectroscopía Raman 91

US / En 2 cm
a)
10 0%
a)
DS = 0.35 US
5 10
En un Punto
0
0%

No. de Lecturas
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
5
DS = 0.09
10 0.5%
No. de Lecturas

5 DS = 0.21 0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
US
10 1% 10
En 2mm
DS = 0.22
5 0%
5
0 DS = 0.35
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
0
10 1.5 % 1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
DS = 0.20
5 Número de onda
Número Raman
de Onda (cm–1) (cm-1 )
Raman
0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
-1
Número de
Número deonda
OndaRaman (cm–1(cm
Raman ) )
b)
US
10
TS / En 2 cm En un Punto
b) 1.5 %
10 0% 5

No. de Lecturas
DS = 0.24 DS = 0.27
5
0 0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131 1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
No. de Lecturas

10 0.5 % US
DS = 0.22 10
5 En 2 mm
0 1.5 %
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131 5
DS = 0.20
10 1%
0
5 DS = 0.20 1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
0 Número
Númreode onda Raman
de Onda (cm–1) (cm-1 )
Raman
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131

10 1.5 %
Fig. 14. Comparación de las distribuciones de la posición de la banda
5 DS = 0.17 Raman a 1129 cm–1, en un punto vs. a lo largo de 2 cm: a) US a 0%,
0 b) US a 1.5%.
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
-1
Número de
Número deonda
OndaRaman (cm–1
Raman )
(cm )
Fig. 13. Distribución de la posición de la banda Raman a 1129 cm–1 a
lo largo de 2 cm de la fibra a diferentes niveles de deformación: a)
US, b) TS. TS
a)
10
En un Punto
No. de Lecturas

5 0%
DS = 0.15
Para tener una idea más clara de lo que está sucediendo,
0
es necesario comparar dos distribuciones de la misma fibra al 1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131

mismo nivel de deformación; una tomada en un solo punto y TS

10
la otra a lo largo de la fibra. Para el caso a 0 % de deforma- En 2 mm
0%
ción (Figs. 14a y 15a) el ensanchamiento es claramente causa- 5
DS = 0.24
do por las diferencias estructurales a lo largo de la fibra. 0
1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
Todos los espectros corresponden a una pequeña área en la -1
Número
Númerode de
onda Raman
Onda (cm–1) (cm )
Raman
superficie de la fibra y representan el promedio de todas las
moléculas en esa zona cuando el láser es movido a lo largo de
la superficie de la fibra, diferentes áreas son expuestas. Por b)
TS
otro lado, no existe control en el grado de penetración del 10
En un Punto
láser en la fibra, y lo más probable es que la estructura interna 5 1.5 %
No. de Lecturas

DS = 0.24
de la fibra sea diferente a la de la superficie, contribuyendo a
0
la variación. 1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131

Las Figs. 14b y15b se comparan dos distribuciones a un

TS
nivel de deformación mayor (1.5 %). El efecto del reorde- 10
En 2 mm
namiento de las moléculas en la superficie de la fibra es 5
1.5 %
DS = 0.17
aparentemente más fuerte que el ensanchamiento de las ban-
0
das: la desviación estándar de los espectros tomados a lo largo 1123 1124 1125 1126 1127 1128 1129 1130 1131
de la fibra tiende a ser más pequeña que la desviación estándar Número
Número dede
onda Raman
Onda (cm–1)(cm-1)
Raman
de los espectros tomados en un solo punto. Fig. 15. Comparación de las distribuciones de la posición de la banda
Raman a 1129 cm–1, en un punto vs. a lo largo de 2 cm: a) TS a 0 %
b) TS a 1.5 %.
92 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Conclusiones
La espectroscopía Raman probó ser un buen método para
entender la micromecánica de deformación de monofilamen-
tos de PE.
El estudio de la posición de la banda Raman a 1129 cm-1
respecto a la deformación en un monofilamento libremente
extendido, demostró que dν / dε es afectado por el despren-
dimiento de la fibra en los extremos del marco de papel, lo
que aumenta efectivamente la longitud de prueba. Esto condu-
jo a una diferencia entre dn/de medido por flexión de cuatro
puntos y medido en un monofilamento libre: para la fibra US,
2.7 cm –1 / % y 2.1 cm–1 / %, respectivamente. El factor de sen-
sibilidad Raman respecto al esfuerzo aplicado dν / dσ no es
afectado por la relajación o desprendimiento de la fibra como
lo es dν / dε. El valor obtenido fue 5.9 cm –1 / GPa (US).
El sistema Renishaw probó ser muy exacto para medir el
desplazamiento de bandas. Los histogramas tomados en un
punto mostraron poco ensanchamiento. Sin embargo, a altos
niveles de deformación, la disminución de la simetría de las
bandas causada por la división de la banda Raman (1129 cm–1)
incrementó la dispersión. Los histogramas obtenidos al azar a
lo largo de la fibra mostraron una distribución más ancha como
resultado de las irregularidades a lo largo de la superficie de la
fibra: Un espectro representa la difracción de todas las molécu-
las del área iluminada por el láser (2 µm de diámetro); el arre-
glo molecular es diferente a lo largo de la fibra. Cuando la
fibra es deformada, las moléculas en la superficie de la fibra se
alinean, conduciendo a una distribución más estrecha de lec-
turas al incrementar el nivel de deformación, ya que la transfe-
rencia de carga del material es más homogénea y eficiente.
Agradecimientos
P. I. G.-Ch. agradece al Consejo Nacional de Ciencia y
Tecnología por su apoyo financiero y R. J. Y. agradece a The
Royal Society por la Wolfson Research Professorship y a
EPSRC por su apoyo al programa de espectroscopía Raman
para el análisis de la deformación de fibras y materiales com-
puestos.
P. I. González-Chi y R. J. Young
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 93-104

Investigación

Determinación del estado de equilibrio de un sistema hídrico

Icela D. Barceló,1* Ignacio Allende,2 Hugo E. Solís,1 Anne-Laure Bussy, 1 y Carmen González1
1 Universidad Autónoma Metropolitana-Azcapotzalco, Av. San Pablo No. 180, Col. Reynosa Tamaulipas, Azcapotzalco,
México 02200, D.F. Tel: 55 5318-9360; Fax: 55 5318-9360; E-mail: ibarcelo@att.net.mx
2 Instituto Superior Politécnico José Antonio Echeverría, ISPJAE, La Habana, Cuba

Recibido el 27 de noviembre del 2001; aceptado el 12 de marzo del 2002

Resumen. Se comparan dos métodos analíticos para la determinación
del comportamiento químico de un sistema hídrico natural con poca
movilidad hidrodinámica. En el primero, se consideran únicamente
los iones calcio y al sistema carbonato; en el segundo se propone la
importancia de considerar la fuerza iónica y se comprueba a través de
un conjunto de ecuaciones, la relación del Ca2 +, H2CO3, HCO3– y
CO32–, con otros iones denominados iones ajenos presentes en un sis-
tema hídrico, con ello además, se demuestra la influencia de los iones
disueltos a los índices de saturación lo que hace deficiente el empleo
del primer método.
Palabras clave: Agua, sistema carbonato, contaminantes, curva de
estabilización, precipitación, iones ajenos.
Abstract. Two analytical methods are compared in order to deter-
mine the chemical behaviour of a natural water system, with low
hydrodynamic mobility. The first method considers only the carbo-
nate species and Ca2+ whereas the ionic force is taken into account in
the second. A series of equations is presented, in order to establish
the relations of Ca 2+, H2CO3, HCO3– y CO32– with other significant
ions that are present in the reservoir, called foreign ions. It is demon-
strated that foreign ions modify Saturation Indexes, discrediting the
first method.
Keywords: Water, carbonate species, contaminants, stability curve,
precipitation, foreign ion.

Introducción
El CO2 es un ácido débil de gran importancia en las aguas na-
turales, que proviene tanto del CO2 atmosférico, como de la
degradación microbiana de la materia orgánica y de los proce-
sos fotosintéticos. La presencia de minerales carbonatados en
los sedimentos en conjunto con el CO2 , generan un efecto de
amortiguación sobre el pH del agua, principalmente a través
de los dos siguientes equilibrios [1, 2]:
CO 2 ac CO 2 g
MCO3 s M 2 ++ CO 32–
El comportamiento de los contaminantes químicos en las
aguas naturales y residuales, es función de las propiedades
fisicoquímicas que predominan en éstas. La presencia del CO2
disuelto y de sus productos de ionización HCO3– y CO32– en
los cuerpos hídricos, influye en los equilibrios de precipitación
y disolución de compuestos inorgánicos [3]. La concentración
de este CO2 se puede relacionar con la presencia de bicarbona-
tos; para ello, es conveniente tomar en cuenta la cantidad de
CO 2 necesaria para mantener en disolución el HCO3 – que se
encuentra en el agua; este CO2 se define como CO2 de equili-
brio ([CO2 ] eq, [1]). Sin embargo, en un sistema natural, por los
procesos de producción citados anteriormente, puede existir
CO 2 disuelto en mayor o menor concentración respecto a
[CO 2 ]e q. Si se tiene [CO2] ac > [CO2 ]eq, el excedente de CO2
podrá reaccionar con los carbonatos presentes para formar más
bicarbonatos, según el siguiente equilibrio:
CO 2–
3 + CO 2 + H 2 O 2 HCO 3–
A este CO2 , se le denominará “potencialmente agresivo”,
y el agua correspondiente será “agresiva”, favoreciendo las
disoluciones, es decir, manteniendo en solución a los contami-
nantes [3-5]. Por lo contrario, si [CO2 ]ac < [CO 2 ]eq, el equili-
brio se desplazará hacia la izquierda, favoreciendo la preci-
pitación de carbonatos con los cationes presentes; en este caso,
el agua será de naturaleza “incrustante” [3-5].
Originalmente, los criterios de pH (pHs ) e índice de satu-
ración (Is) de Langelier, este último también conocido como
índice de Langelier [4, 6, 7], se utilizaron para el control en el
tratamiento de las aguas naturales que se empleaban en servi-
cio doméstico (potable) y en la industria [8], mediante su ca-
racterización en incrustantes o agresivas en función de los
iones Ca2+, Mg2+ y del sistema carbonato [8-11]. Otros inves-
tigadores [9] modificaron este índice con el objeto de conside-
rar interferencias debidas a sulfatos o iones alcalinos, por
ejemplo, en el tratamiento de aguas residuales de origen mine-
ro. Sin embargo, estas modificaciones se establecieron en for-
ma empírica.
Las descargas industriales y agrícolas han generado una
contaminación de los cuerpos acuáticos, en particular al incor-
porar compuestos inorgánicos, como los metales pesados, de-
rivados fosfatados, nitrogenados, etc. Las especies iónicas
94 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
provenientes de estos contaminantes influyen en la alcalini-
dad, la electroneutralidad, la salinidad y la fuerza iónica (entre
otros). El índice de Langelier [4, 6, 7], así como pHs, son de
gran utilidad, no solo para el control del tratamiento de aguas
de servicio, sino en la reutilización de aguas residuales y en la
caracterización de cuerpos hídricos contaminados para su sa-
neamiento. Sin embargo, para poder usar adecuadamente pH s
en aguas residuales industriales y agrícolas, es necesario mo-
dificarlo de manera que incluya de alguna forma la influencia
de estos iones disueltos en concentraciones relevantes.
Se ha observado que al aplicar pHs y por lo tanto Is, sin
considerar la fuerza iónica (µ), a dos aguas con la misma agre-
sividad, éstas pueden tener distintos índices de saturación o,
por el contrario, dos aguas con el mismo Is pueden presentar
agresividades diferentes [4, 8], lo que hace a este índice semi-
cuantitativo. Barceló [3] y Allende [4] han encontrado que un
mayor valor de Is (sin corrección por fuerza iónica), no coin-
cide necesariamente con una mayor agresividad, sino que sólo
es útil para definir cualitativamente si el agua es agresiva o
incrustante. También, permite calcular el pH que tendrá el
agua agresiva al estabilizarse si el exceso de CO2 se elimina
mediante una aeración (inyección de aire), o para el control
durante el proceso de desacidificación del agua; pero única-
mente en el caso de un tratamiento del agua en una planta
tratadora. En un cuerpo hídrico, río o presa, el interés será más
bien el estudio de la evolución de la calidad del agua y de los
equilibrios químicos en el tiempo y/o en el espacio. Para ello,
es necesario la obtención de un índice más cuantitativo, donde
se consideren formalmente las concentraciones del máximo
número de iones disueltos presentes, así como la fuerza ióni-
ca, ya que esta influye en los equilibrios químicos. Relacionar
los cocientes de las concentraciones de los iones componentes
de cierta especie química para obtener una relación de equilib-
rio, no sería confiable por su susceptibilidad ante cualquier
cambio del medio, como la influencia de otros iones presentes
que afectarían los equilibrios químicos; es importante consid-
erar las actividades en lugar de las concentraciones [12] para
garantizar realmente una constante de equilibrio, principal-
mente cuando se conoce la existencia de una multiplicidad de
iones en el sistema acuoso. Tener en cuenta lo anterior y con-
siderarlo en el cálculo del índice de Langelier, permite estu-
dios más finos del comportamiento químico de los contami-
nantes inorgánicos en un cuerpo hídrico y su influencia en la
naturaleza y calidad del agua.
En este trabajo, se presentan dos metodologías para carac-
terizar las aguas de un sistema hídrico contaminado y de poca
movilidad hidrológica; la primera considera únicamente la
influencia del calcio y del sistema carbonato, mientras que la
segunda toma en cuenta la fuerza iónica causada por otros
iones de importancia presentes en el medio, empleando los
índices de Langelier [3-5, 7, 9, 13]. Esta última propuesta se
presenta mediante una serie de ecuaciones que permiten llegar
a una determinación cuantitativa de la naturaleza del agua, a
través de una modificación a pH s , y por tanto a Is de Lange-
lier, a partir de las concentraciones de cationes y aniones de
influencia, presentes en el medio, diferentes del calcio y del
Icela D. Barceló et al.
sistema carbonato, aunque indirectamente estén relacionados.
Se demuestra que al combinar el conjunto de concentraciones
predominantes y la fuerza iónica resultante de estos iones,
modifica pHs cambiando la naturaleza del agua en función de
su clasificación en agresiva o incrustante.
El sistema hídrico seleccionado para el estudio, fue la
presa José Antonio Alzate, embalse situado en el curso del río
Lerma en el Estado de México, unos 30 kilómetros aguas aba-
jo del puente de la carretera Toluca-México. Se construyó
principalmente para el control de inundaciones y para irri-
gación [14]. La industrialización en el corredor Toluca-Lerma,
ha generado desechos industriales y el desarrollo de la ciudad
de Toluca y de poblados aledaños rurales ha producido tam-
bién desechos domésticos y agrícolas [15, 16]. Actualmente la
presa está altamente contaminada por las descargas de aguas
residuales industriales, agrícolas y municipales [3, 17-20].
Para ilustrar la metodología, se seleccionó una temporada, la
posterior al periodo de lluvias, en el mes de noviembre, cuan-
do el embalse está lleno [17].
Desarrollo de las ecuaciones
Ecuaciones matemáticas para la construcción de las curvas
de equilibrio considerando dominante al sistema carbonato
y al calcio. Para calcular [CO2 ]e q, es necesario tomar en cuen-
ta el pH del agua y las concentraciones de HCO3– y CO 3 2– .
Mediante los valores de las constantes del sistema carbonato
(ecuaciones 1 y 2), se construyó el diagrama de predominio de
las tres especies CO2, HCO3 – y CO3 2– en función del pH (Fig.
1), para una concentración total de 5.13 ± 0.86 mmol / L; este
valor representa el promedio medido en la presa J.A. Alzate
(36 medidas [3]).
K a1 [H 2 CO 3 ] = [H+ ] [HCO3 –] (1)
K a2 [HCO3– ] = [H+] [CO32– ] (2)
Un cuerpo hídrico superficial como esta presa, al ser un
sistema abierto, la concentración total de las especies carbona-
to no es constante (por el flujo atmosférico, catabólico y foto-
sintético), como sería el caso cuando se maneja un sistema
cerrado [10]. Por está razón, es más conveniente el empleo de
Concentración (mmol/l)
5 2-
CO2
HCO3
- CO3
4
3
2
1
0
2 4 6 8 10 12 14
pH
Fig. 1. Distribución de las especies carbonatadas en el agua de la
presa J.A. Alzate en función del pH.
û : intervalo de pH medidos in situ.
Determinación del estado de equilibrio de un sistema hídrico 95

la concentración de Ca2+ (mediante la electroneutralidad), en

lugar del HCO3– en los cálculos. pH = 6
A continuación se desarrollan las ecuaciones que per-
pH = 7
miten construir la curva de estabilización del agua respecto al

[H 2CO3]
CO 2 de equilibrio.
Se consideran las siguientes limitaciones:

1. Se estima que las actividades y las concentraciones son pH = 8

equivalentes (factores de actividad f ≈ 1).
2. La fuerza iónica y la temperatura del agua se conside- 1/2 [HCO3 ]
-

ran constantes (respectivamente 0.013 ± 0.005 mol / L

Fig. 3. Relaciones H2CO3–HCO3– para pH constante.
y 16 ± 3 °C [3]).
3. Se desprecian las concentraciones del H+ y del OH – por 3.5
ser muy bajas frente a otras especies (los pH del agua 3

[H2CO3] (x 10 -3 mol/l)
del embalse se encuentran entre 6 y 7.8 [3]).
2.5
4. A estos valores de pH, el ion CO32– no influye fuerte-
mente (Fig. 1). 2

5. Se consideran el Ca2+ y el HCO3 – (Fig. 1), como los 1.5

principales responsables de la salinidad del agua. 1
0.5
En consecuencia, la electroneutralidad del sistema acuoso 0
se resume a [4]: 0 0.7 1.4 2.1 2.8 3.5
- -3
1/2 [HCO3 ] (x 10 mol/l)
2[Ca2+] = [HCO3 – ] (3)
Fig. 4. Curva de evolución para agua en contacto con el aire.
Al combinar los equilibrios ácido-base (ecuaciones 1 y 2)
y el de disolución-precipitación (ecuación 4), se tiene la ecua- pasa por el origen. Por tanto, las curvas para diferentes valores
ción 5. de pH se representan por líneas rectas que pasan por el origen
(Fig. 3), y se observa que para mayores valores de pH, la pen-
K ps = [Ca2+ ][CO 3 2– ] (4) diente de la recta será menor.
K a2 (5)
[ H 2CO 3 ] = [ HCO 3– ]3 [H2 CO 3] = C [HCO 3– ] (6)
2 K a1 ⋅ K ps
Según Morel y Hering [21], la velocidad de difusión del
La ecuación es una parábola cúbica Y = AX3. Si se consi- CO2(g) en el agua es más rápida que la cinética de formación
dera la ordenada Y = [H 2 CO3 ] y la abscisa X = ½[HCO 3– ] (= del HCO3 – . En consecuencia, si el agua está en contacto con el
[Ca2+]), se obtiene la curva que se representa en la Fig. 2, que aire, se puede considerar constante [HCO 3– ], mientras que
se denominará “curva de estabilidad del agua respecto al CO2 [H 2CO 3 ] (=[CO2 ]ac ) será variable, debido al aporte atmosféri-
de equilibrio”. Esta se considera como referencia comparativa co. Así X = constante y Y = variable, esto correspondería a la
del desplazamiento del Ca2+ en disolución o precipitable, en recta paralela al eje [H2 CO 3] de la Fig. 4.
función del CO2 disuelto (H 2CO 3 ). Si el agua está en contacto con el CaCO3 , como sucede
Al despejar [H 2 CO 3 ] de la ecuación 1, considerando [H +] con el agua del fondo del embalse, se tiene el siguiente equi-
constante, se tiene la ecuación 6, que representa una recta que librio dinámico:

3.5 2+ –
CaCO 3 + CO 2 + H 2O Ca + 2HCO 3
3
[H2CO3] (x 10 -3 mol/l)

2.5 Lo cual indica que un mol de H2 CO 3 permite la forma-

2 ción de dos moles de HCO3 – , o su equivalencia en iones Ca 2+
(un mol). Si se considera el agua de fondo como un sistema
1.5
cerrado, se tiene la ecuación 7, representada en la Fig. 5.
1
0.5 [H 2CO 3] = –½ [HCO 3– ] + constante (7)
0
0 0.7 1.4 2.1 2.8 3.5 En la ecuación 5, se considera la relación (K a2 / K a1.K ps )
- -3
1/2 [HCO3 ] (x 10 mol/l) = constante, sin tomar en cuenta otros iones diferentes al cal-
Fig. 2. Curva de estabilización del CO2. cio y al sistema carbonato (limitación 5), esto conduce a que
96 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Icela D. Barceló et al.

log f = –0.5 z2 ε (12)

Las ecuaciones 1, 2, 4, 5 y 9 se corrigieron por los factores

de actividad. Al emplear la ecuación 12, todos los aniones y
[H2 CO3]

cationes monovalentes tendrán el mismo factor de actividad f1,

al igual que los aniones y cationes divalentes tendrán a f2 , etc.
En particular, las ecuaciones 2 y 4 se transforman:

- K a2 · [HCO3 –] = f2 · [H+ ][CO 3 2– ] (13)

1/2 [HCO3 ]
Fig. 5. Curva de evolución del agua en contacto con el CaCO3.
K ps = f2 2 · [Ca2+] [CO32– ] (14)

la curva de estabilidad sea igual para todas las aguas [4]. Esta Si se despeja [CO3 2– ] de la ecuación 13 y [OH– ] de la
simplificación se aleja mucho de la realidad, en particular en ecuación 15, y se sustituyen en la ecuación 8, se obtiene la
aguas contaminadas por cationes y aniones inorgánicos, donde ecuación 16.
es importante considerar la influencia de estos iones (“iones
ajenos”) en el agua, para mantener tanto la electroneutralidad f1 2 [H +] [OH –] = Kw (15)
y la fuerza iónica del medio, como los diferentes equilibrios 2K a2 [HCO 3 ] –
K
químicos que puedan presentarse. ⋅ + [HCO 3- ] + 2 w + = Alcalinidad + [H + ] (16)
f2 [H + ] f1 ⋅[H ]

Cálculo del pH de saturación considerando Al dividir la ecuación 14 entre la ecuación 13, al despejar
la fuerza iónica [HCO3– ] y al sustituir en la ecuación 16, se obtiene:

  K ps ⋅ [H ] 
+
 2K a2
Por definición, la alcalinidad del medio es [10]:  +
+ 1 ⋅  2+ 
 + 2K w + = Alcalinidad + [H + ]
 2
f ⋅ [H ]   2 a2
f ⋅ K ⋅ [Ca ]  f1 ⋅[H ] (17)
Alcalinidad = [HCO3 – ] + 2[CO3 2– ] + [OH– ] – [H +] (8)

y según Langelier [6]: Si se designa [H +] = [H+ ]s ; (concentración de H+ de satu-

ración), la ecuación se representa como:
pH s = pKa2 – pKps – log [Ca2+] – log[HCO3– ] (9)
 2K a2   K ps ⋅ [H+ ]s 
 + 1 ⋅  2+ 
 + 2 K w + = Alcalinida d + [H+ ]s
Cuando sea necesario tener en cuenta todos los iones, hay  2
f ⋅[H +
]s   2 a2
f ⋅ K ⋅ [Ca ]  f1 ⋅ [H ]s (18)
que considerar el efecto interiónico [8]. Este efecto traduce las
fuerzas de repulsión y atracción existentes entre los iones. La al despejar [H +]s :
magnitud del efecto interiónico es función de la fuerza iónica Kw
µ [22, 23], por lo que conviene tomar en cuenta la corrección 2+
Alcalinidad + [H + ] s –
f 2 ⋅ K a2 ⋅ [Ca ] f ⋅ [H + ] s
2

de las concentraciones por el factor de actividad f, para obten- [H + ]s = ⋅ 1

K ps 2K a2
er las actividades [22-24]. La fuerza iónica del embalse no fue +1 (19)
mayor de 0.1 mol / L en los muestreos y la temperatura se f 2 ⋅ [H + ]s
mantuvo en un promedio de 16 ± 3 °C [3]. Al considerar estos
datos, se seleccionó la ecuación de Debye-Hückel extendida ado que el pH promedio en el agua de la presa no es supe-
para el cálculo del factor de actividad [24]: rior a 8 ni inferior a 5, se pueden establecer las siguientes con-
sideraciones:
– 0.5 z 2 µ
log f = (10) 1. [H+ ]s y K w / [H+ ]s son muy pequeños con relación
1 + 0.9 µ a la alcalinidad.
donde: f = factor de actividad 2. 2K a2 / [H +] s es muy pequeño respecto a la unidad.
z = carga del ion cuyo coeficiente de actividad
se determina Lo que simplifica la ecuación 19 en:
µ = fuerza iónica del disolvente f ⋅K
[H + ]s = 2 a2 ⋅ [Ca 2+ ] ⋅ Alcalinidad (20)
K ps
Para simplificar la ecuación 10, se consideró:
Al aplicar logaritmos:
µ –log [H+] s = –log Ka2 + log Kps – log f2 – log [Ca2+]
ε= (11)
1 + 0.9 µ – log Alcalinidad (21)
Determinación del estado de equilibrio de un sistema hídrico
Se puede introducir el pH de saturación (pHs ) en la ecua-
ción 21 mediante la ecuación 22.
pHs = –log [H+] s – log f1 (22)
Se reemplaza log f1 y log f2 por su expresión en función
de ε, según la ecuación 12. Si se considera que la alcalinidad
es igual al contenido de bicarbonato (Fig. 1), la ecuación 21 se
escribe:
pHs = pKa 2 – pK ps – log[Ca2+ ] – log[HCO 3 –] + 2.5ε (23)
Al utilizar el índice de saturación propuesto por Langelier
[4, 6, 7, 10]:
Is = pH real – pHs (24)
con pHreal = pH medido in situ,
se considera que si Is < 0, el agua es “agresiva” y si Is > 0, el
agua es “incrustante”.
Mediante el criterio de Langelier, se pueden relacionar
los conceptos de corrosión e incrustación con la influencia
principal del sistema carbonato y de los cationes Ca2+ y Mg 2+,
en función del concepto de pH de saturación de cualquier
agua [4, 6, 7, 10]. Si el pH real del agua está por debajo de
pH s, el índice de saturación será positivo, entonces el equili-
brio de la reacción:
CaCO 3 + CO 2 + H 2O Ca 2 + + 2HCO 3 -
se desplazará hacia la izquierda, precipitando al CaCO3 ,
máxime si el agua no está saturada de CO 2 , mientras que
cuando existe un exceso de CO2 , la reacción se desplazará
hacia la formación de HCO3 –, y permaneciendo más Ca2+ en
disolución.
Cálculo del pH de saturación considerando iones
diferentes de Ca 2+ y de HCO3 –
Como se indicó antes, el índice de Langelier que se ha presen-
tado hasta el momento, incluye a la alcalinidad en función del
sistema carbonato y de la concentración de Ca2+. Para estu-
dios de caracterización o de comportamiento químico en sis-
temas acuáticos contaminados (ríos, costas, etc.), es impor-
tante relacionar el índice de saturación con la fuerza iónica y
el mayor número de iones disueltos medibles. A continuación,
se presentan las ecuaciones conducentes a este nuevo contex-
to, donde el índice de saturación de Langelier se expresa en
función de las concentraciones de los iones diferentes a
CO 3 2– , HCO3– y Ca2+ (“iones ajenos”).
Para el cálculo del pH de saturación en el que se conside-
ran los iones ajenos, se parte de una ecuación de electroneu-
tralidad más completa que la ecuación 3, como sigue:
97
[HCO3 – ] + 2[CO3 2– ] + [OH– ] + [An– ] + 2[An 2–] + 3[An3– ] +
...= [H +] + 2[Ca 2+] + [Cat+] + 2[Cat2+] + 3[Cat3+ ] + ... (25)
donde An 3– = aniones trivalentes
An 2– = aniones divalentes diferentes a CO3 2–
An – = aniones monovalentes diferentes a HCO 3–
y OH –
3+
Cat = cationes trivalentes
Cat2+ = cationes divalentes diferentes a Ca2+
Cat+ = cationes monovalentes diferentes a H +
Además, la fuerza iónica se puede escribir como:
µ = 1/2 [H +] + 1/2 [Cat+] + 2[Ca2+ ] + 2[Cat2+] + 9/2 [Cat3+]
+ ...+ 1/2[OH– ] + 1/2 [HCO3 – ] + 1/2 [An–] + 2[CO3 2–]
+ 2[An 2–] + 9/2 [An 3–] + ... (26)
Al combinar las ecuaciones 8 y 25, se obtiene otra defini-
ción de la alcalinidad (ecuación 27), que puede considerarse
como la diferencia entre la suma de las concentraciones en
miliequivalentes de todos los cationes (excepto el H+) y la
suma de las concentraciones en miliequivalentes de todos los
aniones procedentes de ácidos minerales diferentes de HCO3– ,
CO 3 2– y OH– .
Alcalinidad = 2 [Ca2+] + [Cat+ ] + 2 [Cat2+] + 3 [Cat3+ ] + ...
– [An– ] – 2 [An2– ] – 3[An 3–] – ... (27)
Los cationes y aniones trivalentes (o más) se pueden des-
preciar ya que prácticamente se encontrarían formando com-
puestos insolubles con más naturaleza covalente (reglas de
Fajans [25], diagramas de solubilidad [26]). Por lo tanto, los
cálculos siguientes se efectuarán en función de los iones
mono- y divalentes.
Para simplificar las ecuaciones, se definen los siguientes
parámetros en función de los iones ajenos:
A = 3 [Cat2+ ] + [Cat+ ] + [An 2–] (28)
B = 4 [An 2–] + 3/2 [An – ] – 1/2 [Cat+] (29)
C = 12 [Cat2+] + 5 [Cat+] – 4 [An 2–] – 3 [An –] (30)
A partir de estos parámetros, se pueden determinar tres
diferentes expresiones de la fuerza iónica. Al dividir la ecua-
ción 25 entre dos y al adicionar el resultado a la ecuación 26,
se establece la expresión A de la ecuación 28, con ello µ se re-
presenta según la ecuación 31. Si se sustrae la ecuación 25 de
la 26, tomando en cuenta la ecuación 29, se obtiene la ecua-
ción 32. Por último al multiplicar la ecuación 25 por dos y al
adicionar el resultado a la ecuación 26, despejando C de la e-
cuación 30, se define la ecuación 33.
µ = A + 3 [Ca 2+] + [CO32– ] + [H+ ] (31)
µ = B + 4 [CO3 2–] + 3/2 [HCO3– ] – 1/2 [H+ ] + 3/2 [OH– ] (32)
µ = 1/2 C + 6 [Ca2+] – 2 [CO32– ] – 3/2 [HCO3 – ] + (33)
5/2 [H +] – 3/2 [OH– ]
98 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Icela D. Barceló et al.

Generalmente, las aguas naturales no presentan un pH

C µ 1 12 K ps
menor de 4.5 ni mayor de 9.5, por lo que se puede despreciar Alcalinidad = A – B – – + (µ – A )2 – (43)
[H +] y [OH –]. Con estas restricciones, las ecuaciones 31 a 33 6 3 3 f 22
se simplifican en:
[CO3 2– ] por sus expresiones en las ecuaciones 39 y 41, se
µ = A + 3 [Ca2+] + [CO3 2–] (34) define nuevamente la alcalinidad en la ecuación 43.
µ = B + 4 [CO 3 2– ] + 3/2 [HCO3 – ] (35)
µ = 1/2 C + 6 [Ca2+ ] – 2 [CO3 2–] – 3/2 [HCO3 –] (36) µ = 1/2 [Cat+] + 2[Ca2+ ] + 2[Cat2+] + 1/2 [HCO3 – ] +

1 12 K ps 
Con estas ecuaciones, se determinan las expresiones de Alcalinidad = A – 2B + µ + (µ – A ) 2 –  (45)
[Ca2+] y alcalinidad en función de los iones ajenos y la fuerza 3  f 22 
iónica que se reemplazan en la ecuación 21. Al sustituir el
[CO3 2–] en la ecuación 34 por su expresión despejada de la
ecuación 14, se llega a: 1/2 [An – ] + 2[CO 3 2– ] + 2[An 2–] (42)
Por otro lado, si se combinan las ecuaciones 34 a 36, se
3 f22 [Ca 2+ ]2 – f2 2 · (µ – A)·[Ca2+] + K ps = 0 (37) tiene que C = 4A – 2B (44)
Lo que transforma la ecuación 43 en:
Esta ecuación de segundo grado tendrá las soluciones: Al reemplazar [Ca2+] y la Alcalinidad por sus expresiones

1 12K ps 
(µ – A ) + (µ – A ) 2 –
12 K ps
(µ – A ) – (µ - A ) 2 12 K ps pH s = pK a2 – pK ps – log µ – A + (µ – A) –
f 22
– 6 f 22 
[Ca 2 + ] = y [Ca 2+ ] =
f 22 
6 6 (46)
1  12K ps 
Se seleccionará la primera solución, con la que se obten- – log A – 2B + µ + (µ – A) – + 2.5e
3 f 22 
drá la más alta concentración de Ca2+ ; definiéndose de esta 
forma la ecuación 38.
en función de los iones ajenos (ecuaciones 38 y 45) en la
12 K ps ecuación 21, se define un pH de saturación en función de las
(µ – A ) + (µ – A )2 – concentraciones de los iones presentes, menos el Ca 2+ , el
f 22
[Ca 2 + ] = (38) HCO3– y CO 3 2– (ecuación 46).
6
12 K ps
Si se multiplica por dos la ecuación 34 y si se adiciona el µ– A= (µ – A) 2 – (47)
f 22
resultado a la ecuación 36, para luego reemplazar [Ca2+ ] por
su expresión en la ecuación 38 y despejando [HCO3– ], se llega Por lo general los cuerpos acuáticos contienen un pH que
a la expresión 39: no sobrepasa el valor de 8.3, así la concentración del CO32– es

[Ca 2+ ] =
(µ – A ) (48)
1  12 K ps 
[HCO 3 ] = ⋅  C – 2 µ + 4
–
(µ – A ) 2
–  (39)
3
3  f 22  2 (µ – B)
[HCO 3– ] = alcalinidad = (49)
3
6 K ps 1 despreciable. Al considerar lo anterior, la ecuación 41 se
[CO 23 – ] = (40)
f 22 12 K ps puede simplificar en:
(µ – A ) + (µ – A )2 –
f 22
pHs = pK a2 - pK ps – log
(µ – A ) – log
2(µ – B )
+ 2.5e (50)
3 3
1 12 K ps 
[CO 23 – ] = (µ – A ) – (µ – A ) 2 –  (41)
2  f 22  De la misma manera las ecuaciones 38, 39 y 45 también
simplifican en:
Al despejar [CO3 2– ] de la ecuación 14, y reemplazar Lo que genera la expresión simplificada de pHs en fun-
[Ca2+] por su expresión (ecuación 38), se llega a la ecuación ción de los iones ajenos:
40. Si se multiplican numerador y denominador por el conju-
gado del denominador, se simplifica la ecuación 40 en la
ecuación 41. Parte experimental
Al combinar las ecuaciones 27 y 35 con la definición
modificada de la fuerza iónica, considerando las simplifica- Medidas de campo y muestreo. La presa Alzate, por su
ciones anteriores (ecuación 42), y reemplazando [HCO3 –] y forma y tamaño se dividió en seis sitios (Fig. 6). Durante la
campaña de muestreo, se tomaron muestras a 20 cm de la
Determinación del estado de equilibrio de un sistema hídrico 99

Tabla 1. Profundidad, pH, temperatura y conductividad del agua en cada sitio de la presa Alzate.
Sitio Punto Profundidad pH* Temperatura Conductividad
(m) (°C)* (µmho / cm)*
A Superficie 2.30 6.47 19.0 1121
Fondo 6.42 15.6 1139
B Superficie 2.18 7.40 18.2 1333
Fondo 7.51 16.9 1729
C Superficie 2.23 7.69 21.6 1727
Fondo 7.70 18.1 1848
D Superficie 2.00 6.97 15.0 837
Fondo 6.87 15.0 842
E Superficie 3.94 6.87 16.0 980
Fondo 6.80 16.0 834
F Superficie 8.45 7.63 20.0 783
Fondo 7.37 16.0 787
*: Dispersión análitica relativa promedia (dispersión máxima), obtenidas con tres medidas: pH: 1.3 % (2.3 %), temperatura: 1.6 % (2.7 %),
conductividad: 0.3 % ( 0.6 %).

Tabla 2. Alcalinidad del agua en cada sitio de la presa Alzate (× 10–3

M*). HNO 3 concentrado (Merck, Suprapur). Se analizaron los
Punto Sitio cationes Ca2+, Fe2+, K +, Mg 2+, Mn2+ y Na + mediante espec-
A B C D E F trofotometría de absorción atómica por flama (Varian,
Spectra AA-20Plus). Los resultados están reunidos en la
Superficie 1.76 2.66 2.82 1.87 2.14 2.60 Tabla 4.
Fondo 1.89 2.68 2.84 2.18 2.17 2.60
*: Dispersión análitica relativa promedia = 2.0 %, dispersión máxima obtenida
= 3.3 %.
Resultados y discusión
superficie y en el fondo (el cual fue variable en cada sitio,
A partir de la Fig. 2, se determinó la situación de cada muestra
Tabla 1) de las diferentes columnas de agua para cada sitio de
de agua estudiada en función de las concentraciones [Ca2+] y
la presa, después de medir los parámetros fisicoquímicos
[HCO3 – ] medidas (Tablas 2 y 4) y de las ecuaciones 1 y 3, se
(temperatura, pH y conductividad).
consideraron las concentraciones iguales a las actividades (f =
Se estableció el momento de la recolección de muestras
1); el calcio y el sistema carbonato fueron las únicas especies
de agua mediante un estudio preliminar de parámetros fisico-
de influencia. La Fig. 7 ilustra los resultados encontrados para
químicos, incluyendo al oxígeno disuelto [3, 11]. Se selec-
el agua superficial (Fig. 7a) y en el fondo (Fig. 7b). En todos
cionó las 13 horas del día, donde se midió la concentración de
los sitios y en las dos profundidades, las aguas presentaron
oxígeno disuelto máxima, correspondiendo a una actividad
CO2 disuelto en exceso ([CO2 ]e x). El agua del sitio A resultó
microbiológica máxima y por consecuencia relativamente
más alejada de la curva de estabilidad, tanto en la superficie
reproducible en el agua. En la Tabla 1 se indican los valores
del pH, temperatura y la conductividad a la hora del muestreo,
así como la profundidad de cada columna de agua en los sitios
de recolección. 19° 27”55”LN
Río Lerma
salida
Pretratamiento y análisis
D
— Las aguas colectadas se filtraron con membranas de 0.45 F 99° 37”50”LW
µm de poro (HA, Millipore) para separar los compuestos E C
B
disueltos de los compuestos asociados con partículas [27]. 99° 42”15”LW
Las muestras filtradas se refrigeraron hasta su análisis.
— Se determinó la alcalinidad por potenciometría [28]. Los Río Lerma
resultados están reunidos en la Tabla 2. entrada
— Se determinaron las concentraciones aniónicas por espec-
trofotometría (NO3 – , HPO 4 2– [28]) o por volumetría (Cl–, Sitios de muestreo
A
SO 42– [3, 28]). Los resultados se indican en la Tabla 3. Poblados
— Las muestras destinadas al análisis de cationes se conser-
varon a pH ≈ 2, en refrigeración, mediante la adición de
Fig. 6. Sitios de muestreo en la presa Alzate.
100 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Icela D. Barceló et al.

3 A
3

[H2 CO3] (x 10 mol/l)

A

[H2 CO3] (x 10 mol/l)

2.5 2.5

-3
2

-3
2
E
1.5 E 1.5
D
1 D 1
0.5 C F
0.5 C
F B
B
0 0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3
- 2+ -3
1/2 [HCO 3 ] = [Ca ] (x 10 mol/l) - 2+ -3
1/2 [HCO3 ] = [Ca ] (x 10 mol/l)

Fig. 7. Diagramas de equilibrio en la fase acuosa de la superficie y del fondo en varios

sitios de la presa J.A. Alzate. Se consideraron únicamente al Ca y al sistema carbonato
(a: superficie, b: fondo).

como en el fondo. Este estado se justifica por el valor prome-
dio del pH medido in situ, que fue el más bajo (Tabla 1), ya
que es un sitio donde predomina el agua residual industrial.
En los sitios E y D, el [CO2 ]ex fue menor que en el sitio A, y
el agua de los sitios B, C y F se acercó más a la estabilidad del
sistema carbonato.
El sitio A presentó la diferencia más importante entre el
agua de la superficie y la del fondo, notándose un aumento en
[CO2 ]ex del fondo. En el sitio F, la concentración del CO 2ex
del agua de fondo fue casi el doble del valor calculado en la
superficie, sin embargo, en ambos casos las concentraciones
resultaron muy bajas respecto al sitio A, lo que le resta impor-
tancia a esta variación. Los sitios E y D mostraron simultánea-
mente una tendencia al aumento de la superficie al fondo,
aunque en menor proporción, esto puede provenir de la
degradación microbiológica del material orgánico presente en
los sedimentos, principalmente como resultado de los proce-
sos oxidativos del material orgánico biodegradable en CO2 .
En una segunda etapa, se volvieron a calcular los valores
de [H2 CO 3 ] para cada muestra de agua, tanto en superficie
como en fondo, empleando la curva de estabilidad de la Fig. 2
y la ecuación 1, pero considerando esta vez los iones ajenos
en la ecuación de electroneutralidad, y tomando en cuenta la
fuerza iónica del medio (a través de los factores de actividad).
Al ser diferente la fuerza iónica de cada muestra, esta última
modificación, en particular, genera una curva de estabilidad
diferente para cada agua colectada. En la Fig. 8, se represen-
tan los resultados obtenidos por este método. La curva repre-
sentada por la línea sólida es la misma que en las Figs. 2 y 7,
mientras que la línea punteada, corregida por la fuerza iónica,
muestra el promedio de todas las curvas obtenidas (12 mues-
tras). Es interesante notar que si las nuevas curvas son muy
similares entre sí (lo que parece lógico para muestras pertene-
cientes al mismo cuerpo hídrico), el desplazamiento de la
curva generada por la fuerza iónica no es despreciable y
aumenta con las concentraciones. En ambas profundidades, si
se emplea la primera curva como referencia, por ejemplo en el
caso de los sitios D y E como muy cercanos a la estabilidad
del sistema carbonato respecto al CO 2eq, se origina un error
grave, ya que estos se pueden considerar muy cercanos a la
estabilidad del sistema carbonato; situación diferente se pre-
senta al emplear la curva corregida, en este caso el agua de los
sitios D y E presentan un exceso de CO2 relativamente impor-
tante, lo mismo sucede con los sitios B y C, que en la curva

Tabla 3. Concentraciones aniónicas el agua en cada sitio de la presa Tabla 4. Concentraciones catiónicas el agua en cada sitio de la presa
Alzate (× 10–3 M). Alzate (× 10–3 M)*.
Sitio Punto [Cl–] [SO42–] [HPO42–] [NO 3–] Sitio Punto [Ca2+] [Fe2+] [K+] [Mg2+] [Na+ ]
A Superficie 2.09 1.79 0.11 0.24 A Superficie 0.97 0.033 0.051 0.60 4.38
Fondo 2.12 1.79 0.11 0.21 Fondo 0.97 0.046 0.047 0.58 6.59
B Superficie 2.14 1.49 0.09 0.19 B Superficie 0.86 0.019 0.037 0.58 3.30
Fondo 1.81 1.61 0.09 0.29 Fondo 0.84 0.048 0.040 0.56 3.35
C Superficie 1.38 1.56 0.06 0.16 C Superficie 0.77 0.015 0.026 0.52 3.54
Fondo 1.35 1.42 0.06 0.16 Fondo 0.83 0.014 0.027 0.52 3.41
D Superficie 1.41 1.31 0.06 0.32 D Superficie 0.77 0.015 0.026 0.48 3.26
Fondo 1.24 1.33 0.06 0.24 Fondo 0.74 0.016 0.021 0.49 3.30
E Superficie 1.13 1.23 0.05 0.24 E Superficie 0.72 0.018 0.020 0.46 2.80
Fondo 1.13 1.20 0.05 0.32 Fondo 0.72 0.016 0.021 0.47 2.52
F Superficie 1.27 1.18 0.06 0.19 F Superficie 0.74 0.016 0.022 0.50 2.81
Fondo 1.18 1.18 0.05 0.24 Fondo 0.71 0.015 0.019 0.46 2.25
*: Dispersión análitica relativa promedia (dispersión máxima), obtenidas con *: Dispersión análitica relativa promedia (dispersión máxima), obtenidas con
tres medidas: [Cl–]: 4.0 % (7.1 %), [SO42–]: 4.4 % (6.3 %), [HPO42–]: 6.1 % tres medidas: [Ca2+]: 1.7 % (2.8 %), [Fe2+]: 0.4 % (1.3 %), [K+ ]: 1.6 % ( 2.5
(9.0 %), [NO 3–]: 5.3 % (7.2 %). %), [Mg 2+]: 1.5 % (2.5 %), [Na+ ]: 0.7 % (0.8 %).
Determinación del estado de equilibrio de un sistema hídrico
3 3
[H2 CO3] (x 10 mol/l)
2.5
-3
2
1.5
1 1
0.5
0 0
0 0.5
1/2 [HCO3 ] (x 10 mol/l)
Fig. 8. Diagramas de equilibrio en la fase acuosa de la superficie y del fondo en varios sitios
de la presa J.A. Alzate, considerando la influencia de más cationes y aniones además del Ca
sólida están por arriba y en el otro caso se desplazan hacia
abajo. Además la curva punteada es la específica para las
condiciones de los parámetros medidos en el agua de la presa
de este estudio
Con la comparación de las Fig. 7 y 8, se demuestra que
no se puede simplificar el conjunto de compuestos inorgáni-
cos disueltos de un agua contaminada como un sistema donde
se considera únicamente al Ca2+ y al HCO3 –. En particular, en
el caso de la presa J.A. Alzate, no se verifica la ecuación 3,
donde 2[Ca2+] = [HCO 3 – ]. El empleo de la concentración
medida para el bicarbonato, así como de las actividades, mo-
difica poco la posición relativa de los puntos, pero provoca un
traslado importante del conjunto de puntos hacia la derecha.
Este fenómeno tiene una consecuencia considerable en la per-
cepción de la calidad del agua de los sitios B, C y F, que
pasan de un ligero exceso a una deficiencia en CO2, lo que
podría interferir negativamente en decisiones futuras relativas
a estos sitios, ya que de sitios con tendencia agresiva, donde el
calcio y el carbonato estarán en estado disuelto, pasan a sitios
de naturaleza incrustante, en donde existe la probabilidad de
que el calcio tienda a precipitar. Por último, se nota que al
considerar las concentraciones en lugar de las actividades, el
cálculo sobrestima a la concentración de CO2 disuelto.
La comparación entre los resultados encontrados en la
superficie (Fig. 8a) con los del fondo (Fig. 8b) muestra el
mismo comportamiento de [H2 CO3 ] de una profundidad a la
otra con los dos métodos (Fig. 7 y 8), aunque en una amplitud
menor, mientras que [Ca2+] (Fig. 7) tiene una evolución inver-
sa (con excepción del sitio C) a la de ½[HCO3 –] (Fig. 8).
Los índices de saturación de Langelier permiten también
determinar la naturaleza de una agua como agresiva o incrus-
tante, pero con más claridad, ya que se maneja un valor único
en lugar de la posición de un punto en un plano (Fig. 7 y 8).
Sin embargo, el empleo de logaritmos puede modificar la per-
cepción de los resultados, aminorándolos.
Se presentan en la Fig. 9 los índices de saturación obteni-
dos para cada sitio, donde se consideran primero (sist. 1), úni-
camente a los iones Ca2+ y HCO3– donde se utilizó la ecuación
9 para los cálculos. En otro caso (sist. 2), tomando en cuenta
además a los cationes Mg2+, Na +, K+, Fe2+ y los aniones Cl–,
SO 4 2– , NO3 –, HPO 4 2– , cuyas concentraciones son influyentes,
a través de la fuerza iónica, para los cálculos se utilizó la
101
A
[H2 CO3] (x 10 mol/l)
2.5
A
-3
2
1.5 E
E
D
D
C 0.5 F C
F
B B
1 1.5 2 2.5 3 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3
- -3 - -3
1/2 [HCO 3 ] (x 10 mol/l)
ecuación 23. Como se observa en los diagramas respecto al
CO2 disuelto (Fig. 7 y 8), se pueden clasificar los sitios en tres
grupos: el sitio A como el más agresivo (aunque se supone
que en el sist. 1, Is es un indicador cualitativo) en ambas pro-
fundidades, las aguas de los puntos B, C y F con una agresivi-
dad baja o características tendientes a una posible naturaleza
incrustante y los puntos D y E con agresividad intermedia.
Sin embargo, en la caracterización de las aguas, se pre-
sentan contradicciones: la Fig. 7 y el sistema 1, se basan en el
predominio de los iones Ca2+ y HCO3 – y deberían presentar
resultados parecidos y, por el contrario, la primera clasifica a
todas las muestras como agresivas cuando el Is es positivo en
varios casos; similarmente, si se compara la Fig. 8 con el sist.
2, en la que ambos toman en cuenta la fuerza iónica generada
por iones ajenos, la situación se invierte, donde el Is presenta
únicamente carácter agresivo aun cuando la Fig. 8 indica un
déficit de CO2 disuelto en los sitios B, C y F. Esta contradic-
ción demuestra que las dos formas de caracterizar la natu-
raleza del agua no reflejan los mismos fenómenos y no se
pueden emplear igualmente. Las Fig. 7 y 8 ilustran única-
mente el estado de estabilidad del agua respecto al CO2 de
equilibrio, y no se podrá hacer el nexo con las características
agresivas o incrustantes de las aguas estudiadas.
La evolución de los índices de saturación entre la superfi-
cie (Fig. 9a) y el fondo (Fig. 9b), en los dos sistemas, muestra
la misma tendencia que la evolución del CO2 disuelto: el agua
del fondo es más agresivo que el de la superficie en los sitios
A, D, E y F, y más incrustante en los sitios B y C.
Al igual que la comparación de las Fig. 7 y 8, el estudio
de los sistemas 1 y 2 considerados en la Fig. 9, demuestra la
influencia notable de los iones ajenos en la caracterización de
las aguas. En particular, el sist. 1 clasifica cuatro muestras
como agresivas (B superficie y fondo, C fondo y F superficie),
mientras que el sist. 2 presenta a todas como agresivas. De he-
cho, se observa que la influencia de los iones ajenos sobre los
índices de saturación es un desplazamiento hacia valores más
negativos o un desplazamiento de las aguas hacia característi-
cas más agresivas, donde otra vez, reduce el valor de la infor-
mación dada cuando se considera un sistema simplificado de
manera exagerada, y hace que el Is modificado por la fuerza
iónica se acerca más a la realidad, generando una información
más confiable.
102 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Icela D. Barceló et al.

0.3 También se muestran en la Fig. 9 (que se representó como

concentr.) los resultados de los cálculos cuando se utilizó la
expresión del índice de saturación dependiente de la fuerza
-0.3 iónica y de las concentraciones de los iones ajenos, eliminan-
do por completo las concentraciones de los iones Ca2+ y
IS

HCO3– (ecuación 46). Estos Is resultaron prácticamente idén-

-0.9 ticos a los del sist. 2, lo que apoya todavía más la necesidad de
tomar en cuenta la fuerza iónica en el cálculo de los índices de
sist.1 sist.2
concentr. conductiv. Langelier. Además, esta serie de ecuaciones indica que con
-1.5 esta corrección, el índice pasa de cualitativo a cuantitativo, y
A B C D E F se pueden aceptar las comparaciones entre diferentes sitios de
Sitio
misma característica, lo que aumenta el valor de este indi-
0.3
cador. Por último, la restricción de estos cálculos a aguas na-
turales con pH inferior a 8.3, permite considerar al bicarbona-
to como la especie más importante, aunque está relacionado a
-0.3
la fuerza iónica y a la expresión B (ecuación 29), sigue siendo
el principal responsable de la alcalinidad (ecuación 49).
IS

La medida de todos los iones del sist. 2 puede parecer

-0.9
muy compleja, sin embargo, la información que refleja es más
sist.1 sist.2 estricta y cuantitativa. No obstante, si se tiene poca informa-
concentr. conductiv.
-1.5 ción sobre la contaminación del cuerpo hídrico, se corre el
A B C D E F riesgo de omitir algunas especies iónicas de importancia,
Sitio generando errores en el cálculo del Is. En particular, en estu-
Fig. 9. Indices de saturación del agua de los sitios de la presa J.A. dios sencillos, como para tratamiento de aguas provenientes
Alzate (a: superficie, b: fondo).
de plantas industriales, en el que no se requiere de un estudio
detallado sobre los equilibrios químicos, al contrario del caso
de estudios más finos como el de cuerpos hídricos. Eaton et
al. [28] presentan una relación empírica que permite calcular
0.4 la fuerza iónica mediante la conductividad, simplificando los
Aguas incrustantes análisis y los cálculos: (51)
B
0.0
F
µ = 1.6 × 10 –5 C (con µ, fuerza iónica y C, conductividad)
-0.4
Is (sist. 1)

C
Empleando las ecuaciones 23, 24 y 51 es posible calcular
-0.8 D los Is midiendo solamente temperatura, conductividad, pH,
E [Ca2+] y alcalinidad. La diferencia observada con los Is del
-1.2
A Aguas agresivas sist. 2 (Fig. 9, conductiv.) es poco importante (en promedio
-1.6
0.04), y tiende a un desplazamiento hacia aguas más incrus-
6.4 6.7 7.0 7.3 7.6 7.9
tantes. Todavía se necesita repetir el estudio con nuevas mues-
pH medido tras para verificar la realidad de esta tendencia. Sin embargo,
se tiene aquí un cuarto método para calcular los Is que forta-
0.4
Aguas incrustantes
lece la importancia de la influencia de los iones ajenos en este
0.0
B cálculo.
Eso implica que, si se quiere llevar a cabo la caracteri-
C
-0.4 zación completa de un cuerpo hídrico, incluyendo estudios de
Is (sist. 1)

F especiación química y determinación de predominio de

-0.8 especies químicas, es decir establecer los equilibrios químicos
D
del conjunto de especies químicas que coexisten bajo las con-
E
-1.2 diciones de CO2 disuelto, pH, temperatura, fuerza iónica, etc.,
A Aguas agresivas
en una cierta estación del año, es necesario (y se tienen todos
-1.6 los datos para ello) considerar la expresión del índice de
6.4 6.7 7.0 7.3 7.6 7.9 Langelier en función de los iones ajenos (ecuación 46).
pH medido En la Fig. 10, se presenta un gráfico de Is (sist. 2) vs.
Fig. 10. Indices de saturación del agua de la presa J.A. Alzate en fun- pH real, donde se nota claramente la diferencia de valores de Is
ción del pH medido in situ (a: superficie, b: fondo).
en cada sitio. Si bien, todos los sitios resultaron agresivos, A,
D y E presentaron propiedades aún más agresivas que los
Determinación del estado de equilibrio de un sistema hídrico
otros. El menos agresivo fue el sitio B, tanto en el agua de la
superficie como la del fondo. La zona A, en toda la columna
de agua (superficie y fondo), según el modelo de Langelier es
la más agresiva. Se puede observar que los sitios B, C y F en
superficie y fondo, son los más cercanos a la estabilización (Is
= 0) y relacionados con el CO2 eq, como lo indican también las
concentraciones de CO2 disuelto, lo que demuestra la gran
influencia de los bicarbonatos en los índices de Langelier.
Existe una aparente relación lineal entre el Is y el pH real, sin
embargo, necesita verificarse con otros muestreos en dife-
rentes estaciones del año.
Conclusiones
1. Los sistemas hídricos naturales tienden hacia una estabi-
lización heterogénea del agua relacionada con los equilibrios
químicos. En particular, la relación de estabilidad de un agua
frente al equilibrio del sistema carbonato puede favorecer
reacciones de precipitación cuando el sistema se encuentra
debajo de la curva de estabilidad o reacciones de disolución
cuando el sistema se encuentra arriba de la curva de estabili-
dad. Esta caracterización de un agua es importante para prede-
cir el comportamiento del Ca2+ disuelto o su tendencia a la
precipitación, siempre y cuando no existan otros cationes y
otros aniones diferentes a HCO3– en aguas a pH entre 5 y 8.3;
ya que para el tratamiento de aguas a pH < 5, se tendrá que
considerar a H+, y para el tratamiento de aguas a pH > 8.3, se
tendrá que considerar a CO3 2– . Aún más, para agua en
tratamiento con pH > 9, se deberá considerar además a OH– .
2. Los diagramas CO 2 / HCO3 – permiten determinar la estabi-
lidad de un sistema hídrico respecto al CO2 en exceso, siem-
pre y cuando no existan iones en concentraciones importantes
que influyan en los equilibrios químicos del sistema carbonato
y en la concentración del Ca2+. Sin embargo, la contaminación
de un agua implica en general un aumento de las concentra-
ciones iónicas, lo que hace caduca la suposición anterior. En
este caso es importante considerar la fuerza iónica.
3. Los índices de Langelier, cuando consideran la influencia
de la mayoría de los iones presentes en la ecuación de elec-
troneutralidad y en la fuerza iónica, son más precisos, además
de más sencillos de interpretar. La evolución de la diferencia
que existe entre el valor de los índices para un sistema sencillo
y un sistema más complejo permite demostrar a su vez la
influencia de la contaminación sobre estos índices.
4. La expresión de pHs en función de la fuerza iónica y de las
concentraciones de los iones ajenos permite demostrar que el
pHs modificado por la fuerza iónica, al contrario del pHs ori-
ginal de Langelier, genera un Is que se puede considerar como
un indicador cuantitativo de la naturaleza agresiva o incrus-
tante de diferentes aguas, permitiendo su comparación y su
clasificación.
103
5. Es importante considerar las ecuaciones relacionadas con
H2 CO3 , HCO3 –,CO3 2–, Ca 2+ y con los iones ajenos cuando se
requieran estudios finos, donde se necesite conocer los dife-
rentes equilibrios entre especies inorgánicas, en un cuerpo de
agua natural que ha sido contaminado por descargas resi-
duales de origen industrial o agrícola, donde se han incorpora-
do contaminantes orgánicos, o cuando se necesite la determi-
nación de las especies químicas (especiación).
6. En la presa J.A. Alzate, se observaron aguas agresivas en
todos los sitios de la presa, con más agresividad en el sitio A,
que es el más contaminado. Comparando lo obtenido en
superficie y en fondo, las aguas superficiales de las zonas E y
F (las de mayor profundidad), demostraron que el CO 2 no
proviene solamente de la atmósfera, sino del sedimento y en
particular de los procesos biológicos que ocurren en su seno.
7. Por fin, se podría reducir la parte analítica de la determi-
nación de los índices de Langelier, empleando una relación
empírica entre la fuerza iónica y la conductividad, disminu-
yendo también los errores analíticos que se introducen en los
cálculos, cuando se necesite desarrollar técnicas de trata-
miento de aguas residuales de origen industrial, con contami-
nantes inorgánicos.
Agradecimientos
Este trabajo se realizó con el apoyo del Consejo Nacional de
Ciencia y Tecnología a través del proyecto 34154-T.
Referencias
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 105-108
Investigación
Estudio por dicroísmo circular de la desnaturalización térmica
de la subtilisina BPN'. Modelo irreversible de dos estados
Salvador R. Tello-Solís * y Alfonso Arroyo-Reyna
Área de Biofisicoquímica. Departamento de Química. Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa.
Apartado Postal 55-534, México 09340, D.F., Iztapalapa, México. E-mail: srts@xanum.uam.mx
Recibido el 28 de enero del 2002; aceptado el 3 de abril del 2002
Resumen. Se estudió la desnaturalización térmica de la subtilisina
BPN’ por dicroísmo circular. Se observa que el proceso fue fuerte-
mente dependiente de la velocidad de calentamiento, como es de es-
perarse para un proceso de desplegamiento que se encuentra bajo
control cinético, debido a la presencia de una reacción irreversible. El
proceso de desnaturalización térmica sigue un modelo simple de dos
estados (N → D). Se calculó la energía de activación (E) para la reac-
ción por diferentes métodos. El valor de E obtenido fue muy similar
variando de 266 a 339 kJ mol–1.
Palabras clave: Subtilisina BPN’, desnaturalización, dicroísmo cir-
cular, irreversibilidad.
Introducción
Hoy en día, la desnaturalización térmica de proteínas es estu-
diada intensamente. La investigación de los procesos de
desnaturalización puede ayudar a elucidar el mecanismo del
proceso contrario, esto es, el plegamiento de las proteínas. El
desplegamiento térmico de muchas proteínas globulares
pequeñas es altamente cooperativo y sigue un mecanismo de
dos estados, bajo condiciones de equilibrio [1, 2]. La calori-
metría diferencial de barrido se ha utilizado ampliamente en
los últimos 25 años para el estudio de las transiciones térmicas
en proteínas. Esta técnica da información sobre la energía y el
mecanismo del proceso de plegamiento / desplegamiento de
las proteínas [2, 3]. El análisis de los datos calorimétricos
requiere que el proceso de desplegamiento sea reversible.
Cuando hay irreversibilidad en el proceso de desnaturaliza-
ción, esto es, cuando se está bajo control cinético, es necesario
realizar un estudio calorimétrico más complejo [4-6]. Para al-
gunas proteínas que se obtienen en bajas concentraciones,
dichos estudios son prácticamente imposibles de realizar.
En este trabajo empleamos un método alternativo para el
estudio de la desnaturalización térmica de una proteína, la sub-
tilisina BPN’, a pH 7.5. El método consiste en el monitoreo
de la elipticidad, seguida por dicroísmo circular, en función de
la velocidad de calentamiento.
Parte experimental
Todos los reactivos utilizados fueron grado analítico (Merck,
Alemania).
Abstract. Thermal denaturation of Subtilisin BPN' was studied by
circular dichroism. It was observed that the process was strongly de-
pendent on the heating rate, as is expected for an unfolding process
kinetically controlled due to presence of an irreversible reaction.
Thermal unfolding process follows a simple two-state mechanism (N
→ D). The activation energy (E) to this reaction was calculated by
different methods. The obtained values for E were rather than similar
to one another, varying from 266 to 339 kJ mol–1.
Keywords: Subtilisin BPN’, denaturation, circular dichroism, irre-
versibility.
Se utilizó rutinariamente agua desionizada en la prepara-
ción de todas las disoluciones y reguladores.
Enzima. La subtilisina BPN' se obtuvo de un extracto comer-
cial (EC 3.4.21.62) de Sigma Chemical Co, St. Louis, Mo,
E.U.A.
Purificación. Un gramo del extracto comercial de subtilisina
fue disuelto en 25 mL de regulador de fosfatos 0.01 M, pH
7.5, filtrado por membrana Millipore y aplicado a una colum-
na de filtración en gel TSK-HW 50 F (2.5 × 54 cm) (Merck,
Alemania), acoplada a un sistema de colección LKB. La
columna fue equilibrada con regulador de fosfatos 0.01 M, pH
7.5, se colectó con un flujo de 1 mL / min. Las fracciones con
actividad proteolítica fueron unidas en una nueva fracción,
concentradas y recromatografiadas en una columna de fil-
tración en gel Biosep sec-S2000 (0.78 × 30.0 cm) (Phenome-
nex ) acoplada a un sistema cromatogáfico líquido de alta re-
solución, Varian 9000, utilizando como eluyente regulador de
fosfatos 0.01 M, pH 7.5.
La purificación final se llevó a cabo por intercambio ióni-
co en cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Diso-
luciones de un mililitro de aproximadamente 1.0 mg de proteí-
na / mL fueron inyectadas en una columna de sulfopropilo SP-
5PW (0.75 × 7.5 cm) (Bio-Rad, E.U.A.), acoplada a un cro-
matógrafo Varian 9000. Los componentes proteicos fueron
eluídos de la columna con una velocidad de flujo de 0.7 mL /
min empleando un gradiente lineal de KCl (0-1M) en regu-
lador de fosfatos 0.01 M, pH 7.5.
106 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Electroforesis en gel de poliacrilamida. Después de la
purificación, la homogeneidad de la enzima, se determinó por
electroforesis en gel de poliacrilamida [7] tanto en presencia
como en ausencia de dodecilsulfato de sodio (SDS), en un sis-
tema PhastSystem de Pharmacia.
Actividad proteolítica. Durante las etapas de purificación la
actividad proteolítica fue rutinariamente ensayada a pH 7.5
por una modificación del método de Anson [7], usando como
sustrato hemoglobina (Sigma) al 2 % (desnaturalizada por
calentamiento), en un regulador de fosfatos 0.01M, pH 7.5, a
una temperatura de 30 °C.
Inhibición de la subtilisina. Para prevenir la autohidrólisis,
durante los estudios de dicroísmo circular, la acción enzimáti-
ca de la subtilisina fue inhibida con fluoruro de fenilmetilsul-
fonilo (PMSF) 10 mM [8].
Concentración de proteína. Durante las diferentes etapas de
purificación, la concentración de proteína total fue determina-
da por el método de Lowry. En los estudios de actividad y
dicroísmo circular, la cantidad de proteína fue calculada es-
pectrofoto métricamente a 280 nm, utilizando la absorbencia
específica, de 11.7 [9].
Dicroísmo circular. Los espectros de dicroísmo circular (DC)
se obtuvieron en un espectropolarímetro Jasco J-715, equipa-
do con un portacelda rectangular con controlador de tempera-
tura tipo Peltier PTC-348WI y agitación magnética. La tem-
peratura fue medida en el interior de la celda con la sonda ex-
terna del sistema Peltier. Los espectros en la región del UV le-
jano (190-240 nm), para el estudio del cambio conformacional
en función de la temperatura se realizaron en una celda de re-
corrido óptico de 1.0 cm. La subtilisina fue disuelta en un re-
gulador de fosfatos 0.01 M, pH 7.5 a una concentración de 20
µg / mL. Los espectros de dicroísmo circular son reportados
como elipticidad por residuo medio (θ)MWR , la cual fue calcu-
lada utilizando una masa molecular de 110 por residuo.
La desnaturalización térmica se siguió por el cambio en la
elipticidad a 220 nm. El cambio de temperatura en la muestra
(de 25 a 70 ºC), controlada con el sistema Peltier, se realizó a
velocidad de calentamiento constante. Se seleccionaron veloci-
dades de calentamiento de 0.5 a 5.0 grad / min (con una pre-
cisión de ± 0.02 grad / min). Las elipticidades observadas
fueron transformadas a fracción de proteína desnaturalizada, fD :
θ ? −θ ?
fD = (1)
θ D −θ ?
Donde θT es la elipticidad de la muestra a la temperatura
T y θN y θD son las elipticidades del estado nativo y del estado
desnaturalizado, respectivamente. La reversibilidad de la tran-
sición se estudió, también, por el cambio en la elipticidad a
220 nm.
Salvador R. Tello-Solís y Alfonso Arroyo-Reyna
Análisis de datos
Los datos de elipticidad obtenidos a partir del estudio de la
desnaturalización térmica fueron analizados asumiendo un
proceso irreversible de dos estados:
? →
?
D (2)
Donde N es el estado nativo, D el estado desnaturalizado
irreversiblemente y k la constante de velocidad de primer or-
den la cual obedece la ecuación de Arrhenius.
Sánchez-Ruiz et al. [4] han propuesto varios métodos
para el análisis de las curvas calorimétricas basados en el me-
canismo anterior. Tres de estos métodos pueden ser adaptados
a los estudios por dicroísmo circular [10, 11].
El primero relaciona la temperatura media de la curva de
transición (Tm ) del estado nativo al estado desnaturalizado,
con la velocidad de calentamiento, v:
v AR E
ln = ln − (3)
Tm2 E RTm
donde A es el factor pre-exponencial de la ecuación de Arrhe-
nius. Por lo que, a partir de un gráfico del ln v / Tm 2 en función
de, se obtendrá una línea recta con pendiente igual a –E / R.
El segundo método relaciona la fracción de proteína en el
estado nativo, fN , (fN + fD = 1), como una función de la tempe-
ratura según:
  1  E  1 1 
ln  ln    =  −  (4)
  f n   R  Tm T 
Por lo que un gráfico de ln (ln (1 / fN )) en función de 1/T
dará una pendiente m = –E / R, a partir de la cual se podrá cal-
cular la energía de activación del proceso, E.
El tercer método relaciona la fracción de proteína en el
estado nativo, fN , la constante de velocidad de la reacción, k,
en función de la temperatura y la velocidad de calentamiento
v:
d ln f N k A  −E 
= – = – exp   (5)
dT v v  RT 
entonces, a partir de un gráfico del ln k en función de 1/T se
obtendrá una línea recta con pendiente igual a –E / R.
Resultados y discusión
Los espectros de DC, a pH 7.5, en la región del ultravioleta
lejano (190-240 nm) para la subtilisina BPN’ nativa (25 °C) y
la subtilisina BPN’ desnaturalizada (70 °C), por efecto del
aumento de la temperatura, se muestran en la Fig. 1. Los cam-
bios observados son atribuibles a la pérdida de estructura se-
Estudio por dicroísmo circular de la desnaturalización térmica de la subtilisina BPN’...
cundaria [10-13]. Además, se observó que no existe reversibi-
lidad en el proceso de desnaturalización térmica (Fig. 1).
Efecto de la velocidad de calentamiento
en la desnaturalización térmica de la subtilisina BPN’
La Fig. 2, muestra las curvas de transición térmica seguidas a
diferentes velocidades de calentamiento, por monitoreo de la
elipticidad a 220 nm. Como se observa en la Fig. 2, la transi-
ción de la desnaturalización fue fuertemente dependiente de la
velocidad de calentamiento, como es de esperarse para un pro-
ceso de desplegamiento que se encuentra bajo control ci-
nético, debido a la presencia de una reacción irreversible [10-
13]. Asímismo, las muestras que fueron calentadas a tempera-
turas superiores a 70 °C (temperatura a la cual la transición
había sido completada) no mostraron reversibilidad de la señal
de DC cuando fueron enfriadas a 25 °C.
Desde el punto de vista del carácter irreversible de la
desnaturalización térmica de la subtilisina BPN’, se analizaron
las curvas de transición en términos de un modelo irreversible
simple de dos estados:
? →
?
D
Se utilizó la ecuación 3 para el análisis de las curvas de
transición. En la Fig. 3 se muestra el diagrama de ln v / T m2 en
función de 1 / Tm , de la pendiente de la línea recta resultante
(coeficiente de correlación 0.99), se obtuvo un valor para la
energía de activación, E = 339 ± 18 kJ / mol. El factor preex-
ponencial de Arrhenius fue de 1.3 × 10 54 min–1 .
En la Fig. 4 se muestra el diagrama de ln (ln (1 / fN)) en
función de 1 / T, para la velocidad de calentamiento de 2 grad
/ min, en donde se obtuvo una línea recta con pendiente m =
–E / R, a partir de la cual se calculó el valor de la energía de
Fig. 1. Espectros de dicroísmo circular en función de la temperatura
de la subtilisina BPN’ a pH 7.5. () enzima nativa a 25 °C, (.-.-)
enzima desnaturalizada a 70 °C y (. . .) enzima desnaturalizada, en-
friamiento a 25 °C.
107
1.0
0.8
0.6
fD
0.4
0.2
0.0
320 325 330 335 340 345
Temperatura (K)
Fig. 2. Curvas de transición térmica en función de la velocidad de
calentamiento, para la subtilisina BPN’, a pH 7.5. La fracción de pro-
teína desnaturalizada fD, se calculó como se indica en el texto. El pro-
ceso se siguió por monitoreo de la elipticidad a 220 nm. Velocidades
de calentamiento: (n) 0.5 grad / min, (ο) 1.0 grad/min, (•) 2.0 grad /
min, (¸) 4.0 grad / min y (q) 5 grad / min.
activación, E. Diagramas similares fueron trazados para las
demás velocidades de calentamiento, obteniéndose buenas
relaciones lineales (coeficiente de correlación de 0.99). El
valor promedio de la energía de activación, 285 ± 3 kJ mol–1 .
En la Fig. 5, se presenta el gráfico de ln fN en función de
la temperatura absoluta, para calcular los valores de la cons-
tante de velocidad, k, ecuación 5, para una velocidad de calen-
tamiento de 5 grad / min. A partir de los diferentes valores de
k calculados, se construyó el diagrama de Arrhenius corres-
pondiente (Fig. 6) y se determinó la energía de activación del
proceso de desnaturalización (tercer método). Diagramas si-
milares fueron trazados para las demás velocidades de calen-
tamiento, obteniéndose buenas relaciones lineales (coeficiente
de correlación de 0.99). El valor promedio de la energía de
activación, 266 ± 11 kJ mol–1 . Por lo tanto, se observa una
concordancia entre los tres métodos utilizados para calcular la
energía de activación, de la desnaturalización térmica de la
subtilisina BPN’, a pH 7.5.
El valor promedio para la energía de activación (E = 297
kJ / mol) del desplegamiento térmico de la subtilisina BPN’,
determinado en este trabajo, es del mismo orden del valor
promedio reportado para el desplegamiento térmico de enzi-
mas proteolíticas de masa molecular semejante a la subtilisina
BPN’ (27.5 kDa), como son: actinidina (27.5 kDa, E = 217 kJ
/ mol) [12] y bromelaína (25.8 kDa, E = 206 kJ / mol) [13].
Conclusión
La desnaturalización térmica de la subtilisina BPN’ a pH 7.5,
está bajo control cinético y sigue un modelo irreversible de
dos estados.
108 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Salvador R. Tello-Solís y Alfonso Arroyo-Reyna

1.5
-10.0

1.0

-10.5
0.5

0.0
ln (v/(Tm) )

-11.0
2

ln k
-0.5

-11.5 -1.0

-1.5

-12.0
-2.0

-2.5
-12.5 294 296 298 300 302 304 306
296 297 298 299 300 301 302
5
5 10 /T (1/K)
10 /Tm (1/K)

Fig. 3. Diagrama de ln v / Tm2 en función de 1 / Tm para la subtilisina Fig. 6. Diagrama de Arrhenius para la curva de transición correspon-
BPN’ a pH 7.5. diente a una velocidad de calentamiento de 5 grad / min. Las constan-
tes de velocidad fueron calculadas a partir de la ecuación 5 (Fig. 5).

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0
128.
-1

-2

-3
ln fN

-4

-5

-6

-7
328 330 332 334 336 338 340 342

Temperatura (K)

Fig. 5. Diagrama de ln fN en función de la temperatura absoluta, para

calcular las constantes de velocidad según la ecuación 5. Velocidad
de calentamiento 5 grad / min.
 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 109-114
Investigación
Calores isostéricos de adsorción de CO 2 en zeolitas naturales mexicanas
Rosario Hernández-Huesca,* Gelacio Aguilar-Armenta
Centro de Investigación de la Facultad de Ciencias Químicas, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Boul. 14 Sur y Av.
San Claudio, Ciudad Universitaria, Puebla 72570, Pue. México. Tel.: (2) 2 29-5500 Ext. 7383; Fax: (2) 2 295-584;
E-mail: mvhernan@siu.buap.mx
Recibido el 7 de diciembre del 2001; aceptado el 2 de mayo del 2002
Resumen. Se estudió la capacidad que presentan las zeolitas natu-
rales mexicanas erionita (ZAPS), mordenita (ZNT) y clinoptilolita
(ZN-19), de adsorber CO2 a t ≤ 27 °C. La medición de las isotermas
de adsorción se realizó en un sistema volumétrico de alto vacío, cons-
truido en vidrio Pyrex y equipado con válvulas libres de grasa. Se es-
tableció que en la erionita, el CO2 se adsorbe en mayores cantidades
que en la mordenita y la clinoptilolita, debido a que la primera posee
una densidad catiónica y volumen de microporo mayor que las otras
dos muestras. La muestra ZAPS presentó el mayor de los calores
isostéricos de adsorción total, debido a que esta muestra puede poseer
una heterogeneidad energética superficial mayor que las otras mues-
tras. Las muestras ZAPS, ZNT y ZN-19 provienen de yacimientos
ubicados en los estados de Sonora, Tamaulipas y San Luis Potosí,
respectivamente.
Palabras clave: Adsorción, CO2, zeolitas naturales, calor isostérico.
Introducción
El estudio energético del proceso de la adsorción de un gas, es
una etapa obligada para conocer el comportamiento de un
absorbente en los procesos cíclicos de separación de mezclas
gaseosas. En este sentido, el calor isostérico de adsorción de
los componentes de una mezcla de gases, es una variable im-
portante para describir el proceso de adsorción [1] y es la
clave para desarrollar un proceso de separación de gases, tal
como el proceso de vaivén de presión (PSA) [2, 3]. El proceso
de optimización de la unidades de PSA para la separación de
mezclas de gases se basa en los datos experimentales en el
equilibrio de la cantidad de sustancia adsorbida así como la
selectividad en función de la presión, temperatura y composi-
ción [4].
Los calores de adsorción han sido considerados como un
indicador de la heterogeneidad energética de un adsorbente en
la adsorción. Para un adsorbente con superficie energética -
mente homogénea, el calor isostérico de adsorción de un gas
puro no depende de la cantidad de adsorbato. Sin embargo, el
calor isostérico de adsorción disminuye con el incremento de
la cantidad de sustancia adsorbida, cuando el adsorbente es
energéticamente heterogéneo y puede incrementarse al aumen-
tar la cantidad de adsorbato, cuando existen fuertes interaccio-
nes laterales entre las moléculas adsorbidas [5].
La heterogeneidad energética de un adsorbente depende
de la distribución de micro y mesoporos de diferente forma y
Abstract. In this work, the adsorption equilibrium isotherms of CO2
in Mexican natural zeolites erionite (ZAPS), mordenite (ZNT) and
clinoptilolite (ZN-19) have been measured at t ≤ 27 °C using a glass
high-vacuum volumetric system, equipped with grease-free valves.
The amount of adsorbed CO2 was greater on ZAPS than on ZNT and
ZN-19 because the cationic density and micropore volume of erionite
are greater than those of mordenite and clinoptilolite. The adsorption
isosteric heat for ZAPS sample was greater than for the other two
zeolites because the higher surface energetic heterogeneity of ZAPS
sample. The ZAPS, ZNT and ZN-19 are samples from deposits of
Sonora, Tamaulipas and San Luis Potosí, respectively.
Keywords: Adsorption, CO2, natural zeolites, isosteric heat.
tamaño, así como de la distribución de sitios de adsorción de
diferente naturaleza química (polaridad) dentro de los poros.
La heterogeneidad energética de un adsorbente peletizado pue-
de incrementarse en presencia de un material aglutinante, aun-
que el adsorbente sea homogéneo energéticamente [6].
El modelo de los efectos térmicos que acompañan los ci-
clos de adsorción-desorción requieren un balance de energía
basado en los calores de adsorción de los componentes indivi-
duales de la mezcla. La medición experimental de estos pará-
metros es muy difícil [4], por lo cual, los calores de adsorción
de los gases puros son usualmente obtenidos a partir de las
isotermas de adsorción mediante la ecuación de Clapeyron.
Los valores de calores isostéricos así obtenidos serían poco
confiables si no se tomaran precauciones extremas para asegu-
rar la reversibilidad y reproducibilidad de las mediciones.
En este trabajo se reportan resultados de un estudio sobre
la capacidad que presentan algunas zeolitas naturales mexica-
nas de adsorber CO2 a diferentes temperaturas, además se eva-
lúan los calores isostéricos de la adsorción de CO2 , calculados
a partir de las isotermas de adsorción mediante la ecuación de
Claussius Clapeyron, con el fin de obtener información sobre
las características energéticas de la superficie del adsorbente.
Las muestras de erionita (ZAPS), mordenita (ZNT) y clinop-
tilolita (ZN-19), provienen de yacimientos ubicados en los
estados de Sonora, Tamaulipas y San Luis Potosí, respectiva-
mente.
110 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
3.0
2.5
2.0
(mmol/g)
1.5
a
1.0
0.5
0.0 P el intervalo de presiones de equilibrio estudiado, disminuye en
0 50 100 150 200
(Torr)
Fig. 1. Isotermas de adsorción de CO2 en (l)ZAPS, (n)ZNT, (t)
ZN-19 y (*) CG a 27 °C.
Parte experimental
La adsorción del CO2 se midió en un sistema volumétrico al
alto vacío, equipado con válvulas libres de grasa. El vacío pre-
vio (1 × 10 –2 Torr) fue creado por una bomba convencional y
el alto vacío (1 × 10 –7 Torr) por una bomba turbomolecular
(Balzers). Las muestras zeolíticas fueron activadas in situ a
300 °C en un horno no programable, hasta alcanzar presiones
residuales del orden de 10–4 Torr. Las presiones de los gases
en el sistema volumétrico se midieron digitalmente por un
transductor de presión APR-010 (Balzers) y el alto vacío por
un transductor TPR-017 (Balzers). Las temperaturas de
medición fueron controladas por un ultratermostato (Haake L)
con una precisión de ± 0.2 °C, excepto la temperatura de 0 °C,
la cual fue controlada por un baño de hielo flotante.
Resultados y discusión
Adsorción de CO2
En este trabajo no se incluyen las isotermas de adsorción de
CO 2 a 17 ºC de las tres muestras zeolíticas naturales, ya que
éstas han sido reportadas en un trabajo anterior [7]. En la Fig.
1 se presentan las isotermas de adsorción de CO2 a 27 ºC. Con
fines de comparación en esta figura se incluye también la iso-
terma de adsorción en carbón activado CG. Se observa que las
isotermas de adsorción para las tres muestras zeolíticas au-
mentan bruscamente a bajas presiones de equilibrio, lo cual
podría obedecer a dos factores: a) las moléculas de CO2 pene-
tran libremente, es decir, sin dificultades estéricas, a través de
las ventanas de entrada hacia los microporos; y b) el CO 2 inte-
racciona específicamente con determinados centros de adsor-
ción presentes en la estructura microporosa de las zeolitas.
Al tomar en cuenta que la erionita (ZAPS), mordenita
(ZNT) y clinoptilolita (ZN-19) adsorben moléculas con diá-
metro cinético (σ) no mayor que 4.3, 3.9 y 3.5 Å respectiva-
mente [8], y que σ(CO2 ) = 3.3 Å, es obvio que el proceso de
la adsorción de este gas no está limitado por el factor estérico.
Rosario Hernández-Huesca y Gelacio Aguilar Armenta
A diferencia de las isotermas de adsorción del CO2 en las
zeolitas, la isoterma obtenida en carbón activado CG no pre-
senta el salto brusco en la zona inicial, ni tampoco una zona
de saturación a bajas presiones de equilibrio.
De lo anterior se deduce que las tres zeolitas naturales pre-
sentan una alta capacidad de adsorción del CO2, aunque consi-
derablemente más alta para ZAPS, que para las otras dos, con-
servándose esta propiedad a presiones bajas o grados de cober-
tura pequeños; se observa, además, que las capacidades de
adsorción de ZNT y ZN-19 son muy parecidas, es decir, la
capacidad que presentan las zeolitas de adsorber CO2 , en todo
el orden (ZAPS) > (ZNT) ≈ (ZN-19). A diferencia de las zeoli-
tas, la superficie del carbón activado es prácticamente no polar,
provocando que su capacidad de adsorber CO2 sea inferior a la
de las zeolitas, especialmente a bajas presiones de equilibrio, a
pesar de que el carbón activado CG también es un adsorbente
microporoso y con una superficie específica y volumen de
microporo superiores a los de las zeolitas (Tabla 1).
El hecho de que la capacidad que presentan las zeolitas de
adsorber CO 2 en todo el intervalo de presiones de equilibrio
estudiado, disminuya en el orden (ZAPS) > (ZNT) ≈ (ZN-19),
está relacionado con dos propiedades: 1) número de cationes
disponibles por unidad de masa de las zeolitas deshidratadas
(densidad catiónica) y 2) volumen límite de microporo. La
cantidad de CO2 adsorbida a bajas presiones de equilibrio
(pequeños grados de cobertura) es directamente proporcional
a la primera propiedad, mientras que a presiones altas (gran-
des grados de cobertura) juega un papel determinante el volu-
men de microporo. La cantidad de cationes, los cuales repre-
sentan los “centros activos específicos” para la adsorción de
las moléculas del CO2 , depende de la relación Si / Al. Así, por
ejemplo, para zeolitas naturales se sabe [8] que el valor de la
relación Si / Al se encuentra entre los siguientes límites; erio-
nita: 2.9 ≤ Si / Al ≤ 3.7; mordenita: 4.17 ≤ Si / Al ≤ 5.0 y
clinoptilolita: 4.25 ≤ Si / Al ≤ 5.25. Es decir, a presiones bajas
la adsorción en la erionita (ZAPS) es mayor porque hay
mayor cantidad de Al, y por lo tanto mayor densidad catióni-
ca, que en las otras dos muestras. Por otro lado, la semejanza
observada entre las capacidades de adsorción de la mordenita
y clinoptilolita en todo el intervalo de presión de equilibrio
estudiado, se puede atribuir a que la relación Si / Al, así como
el volumen de microporo (Tabla 1), de estas zeolitas son muy
semejantes.
Adsorción irreversible de CO2
Para encontrar la cantidad de CO2 adsorbida irreversible-
mente, en las “zeolitas vírgenes”, es decir, recién activadas
térmicamente al alto vacío, se obtuvo la isoterma de adsorción
a una temperatura dada e inmediatamente después, a esa
misma temperatura, el adsorbente se sometió a evacuación
hasta alcanzar una presión residual P < 6 × 10 –4 Torr. Una vez
terminada esta etapa, se realizó nuevamente la medición de la
isoterma de adsorción. La diferencia entre la primera (total) y
segunda (reversible) isotermas representa la cantidad de CO2
adsorbido irreversiblemente, es decir, aquella cantidad de
Calores isostéricos de adsorción de CO2 en zeolitas naturales mexicanas 111

adsorbato que no fue posible desorber a la temperatura experi- 3.0

mental dada. En la Fig. 2 se observa que las tres muestras pre-
sentan una adsorción irreversible del CO2 . La cantidad relativa 2.5
de CO 2 adsorbido irreversiblemente a 50 Torr disminuye en la
secuencia: ZN-19 (17 %) > ZNT (9 %) > ZAPS (5.8 %). Para 2.0

(mmol/g)
P > 50 Torr la proporción de CO2 adsorbido irreversiblemente
para cada muestra permaneció constante. Se evaluó, asimis- 1.5

a
mo, la adsorción irreversible a una presión de 0.4 Torr, esta-
bleciéndose la secuencia: ZN-19 (31 %) > ZAPS (14 %) >> 1.0

ZNT (≈ 0 %).
Como puede observarse, a presiones bajas (0.4 Torr), la 0.5

proporción de la adsorción irreversible aumenta para ZN-19 y

0.0 P
ZAPS, pero para ZNT prácticamente desaparece. El hecho de
0 50 100 150 200 (Torr)
que la adsorción irreversible relativamente sea mayor a pre-
siones bajas, es decir, a pequeños grados de cobertura, puede Fig. 2. Adsorción total (símbolos llenos) y reversible (símbolos
obedecer a que las moléculas de CO2 ocupen los centros de vacíos) de CO2 en (¡) ZAPS, (n) ZNT, (¸) ZN-19 y a 27 °C.
adsorción (determinados cationes) más activos, lo que con-
duce a que sea más difícil desorberlas. Esta fuerte interacción 40

entre las moléculas de CO 2 y los cationes presentes en la 35

estructura de las zeolitas, es mucho mayor para ZN-19 que pa- 30

(kJ/mol)
ra las otras dos muestras.
25

20
Calores Isostéricos de la adsorción total de CO2

Q iso
La determinación del calor isostérico de adsorción se hizo, a 15

partir de las isotermas de adsorción a 17 ºC y 27 ºC, aplicando 10

la ecuación de Claussius-Clapeyron: 5
a
0
(mmol/g)
− ∆H = Qiso = R[(T2T1 ) (T2 − T1 )] ln ( P2 P1 )
0.0 1.0 2.0

Fig. 3. Calores isostéricos de la adsorción total de CO2 a partir de las

isotermas a 17 y 27 °C en (l)ZAPS, (o)ZNT y (¸)ZN-19.
De acuerdo con los resultados obtenidos (Fig. 3), la carac-
terística común de las tres muestras consiste en que el calor
isostérico de adsorción se incrementa al aumentar la cantidad 40

de sustancia adsorbida, es decir, existe una fuerte interacción 35

adsorbato-adsorbato. En esta figura se observa que para ZN- 30

19 y ZNT se obtiene un comportamiento muy similar, en cam-
(kJ/mol)

25
bio para ZAPS la curva Q iso = f(a) presenta dos máximos. Se
20
observa también, que el aumento de la adsorción provoca un
Q iso

incremento del calor isostérico más marcado para ZNT y ZN- 15

19 que para ZAPS. Estos resultados probablemente obedezcan 10

a que ZAPS puede poseer una heterogeneidad energética 5
mayor que las dos primeras, compensándose en mayor grado 0
a
para esta muestra los dos factores siguientes: a) heterogenei- (mmol/g)
0.0 1.0 2.0 3.0
dad energética (interacciones adsorbente-adsorbato) que con-
Fig. 4. Calores isostéricos de la adsorción total de CO2 a partir de las
duce a la disminución del calor de adsorción; b) interacciones isotermas a 0 y 20 °C en (l)ZAPS, (o)ZNT y (t)ZN-19.
adsorbato-adsorbato, que conducen al aumento del calor de
adsorción.
Tabla 1. Superficie específica (S, m2 / g) y volumen de microporo
Por otro lado, el hecho de que el calor isostérico de adsor- (V0, cm3 / g) de los adsorbentes en estudio. Modelo: Langmuir (N2,
ción (Fig. 3) en ZN-19 permanezca prácticamente invariable 75.5 K).
en la región de 0.3 a 1.0 mmol / g, probablemente esté obede-
ciendo a la ocupación, en esa región, de centros de adsorción Muestra S V0
de bajo potencial de adsorción; probablemente ya se hayan ZAPS 509 0.1876
ocupado para a < 0.3 mmol / g los centros de adsorción más ZNT 325 0.1186
activos. Este razonamiento puede estar soportado por el hecho ZN-19* — 0.1078
de que precisamente ZN-19 es la que presenta mayor propor- CG 688 0.2484
ción de adsorción irreversible. Desafortunadamente, para va- * V0 por adsorción de H2O (T = amb.)
112 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Rosario Hernández-Huesca y Gelacio Aguilar Armenta

40 40

35 35

30 30
(kJ/mol)

Q iso (kJ/mol)
25 25

20
Q iso

20

15 15

10 10
5 5

0
a a
(mmol/g) 0
(mmol/gr)
0.0 1.0 2.0 3.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0

Fig. 5. Calores isostéricos de la adsorción total (l) y reversible (¡) Fig. 7. Calores isostéricos de la adsorción total (n) y reversible (o)
de CO2 en ZAPS a partir de las isotermas a 17 y 27 °C. de CO2 en ZNT a partir de las isotermas a 0 y 20 °C.

40 40

35 35

30 30
Q iso (kJ/mol)

(kJ/mol)
25 25

20 20

Q iso
15 15

10 10

5 5
a a
0 (mmol/g) 0 (mmol/gr)
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0

Fig. 6. Calores isostéricos de la adsorción total (t) y reversible (¸) Fig. 8. Calores isostéricos de la adsorción total (t) y reversible (¸)
de CO2 en ZN-19 a partir de las isotermas a 17 y 27 °C. de CO2 en ZN-19 a partir de las isotermas a 0 y 20 °C.

lores de a < 0.3 mmol / g, que corresponden a la adsorción i-
rreversible en las tres muestras y, por lo tanto, donde se debe-
ría haber observado una disminución drástica del calor de ad-
sorción, este no se pudo evaluar con una exactitud aceptable.
Con el fin de comparar estos resultados, se midieron los
calores isostéricos a partir de las isotermas a 0 y 20 ºC (Fig.
4), observándose un comportamiento muy similar al anterior.
Sin embargo, estas curvas presentan una disminución inicial
(para valores de a < 0.3) para las tres muestras, debido a las
interacciones adsorbato-adsorbente y, posteriormente, un
incremento a medida que aumenta la cantidad de sustancia
adsorbida y por lo tanto la aparición de las interacciones
adsorbato-adsorbato.
En la Tabla 2 se presentan los valores de la constante de
Henry, calculados a partir de las isotermas de adsorción de
CO 2 mediante la ecuación o isoterma de Henry a bajos grados
de cobertura. Cabe mencionar que la muestra ZN-19 presenta
el mayor valor en la constante de Henry para la adsorción total
a 0 y 20 °C, lo que confirma que es esta muestra la que pre-
senta mayores interacciones adsorbato-adsorbente, tal como se
puso de manifiesto al estudiar la adsorción irreversible y es
por tanto la que presenta una mayor disminución en el calor
isostérico de adsorción a bajas presiones de equilibrio (Fig. 4).
Calores Isostéricos de la adsorción reversible de CO2
El objetivo de este estudio consistió en evaluar la influencia
de la adsorción irreversible en las propiedades energéticas del
proceso de adsorción. A diferencia de la medición del calor
isostérico de la adsorción total, ahora se determina el calor de
adsorción en las muestras que contenían previamente molécu-
las de CO2 adsorbidas irreversiblemente. Los resultados (Figs.
5 y 6) revelan que la cantidad preadsorbida irreversiblemente
influye en el comportamiento de la curva Q iso = f(a). Es intere-
sante observar de las figuras que los calores isostéricos de la
adsorción reversible, a una determinada cantidad de CO2
adsorbido, adquieren valores más altos que los de la adsorción
total (reversible + irreversible). El aumento del calor isostéri-
co de la adsorción reversible, respecto al de la adsorción total,
probablemente obedezca a que los cuadrupolos (– O-CC++-O– )
de la molécula preadsorbida y el de la molécula que proviene
desde la fase gaseosa se orientan favorablemente entre sí,
provocando el surgimiento de fuerzas electrostáticas de atrac-
ción, es decir, surgen mayores interacciones adsorbato-adsor-
bato. Además, si tenemos en cuenta que la superficie ya está
cubierta por una capa de adsorbato (superficie más homogé-
nea), es muy probable que en este proceso las interacciones
adsorbato-absorbente disminuyan considerablemente, lo cual
puede estar soportado por el hecho de que la constante de
Henry para la adsorción reversible de CO2 a 17 y 27 °C en
Calores isostéricos de adsorción de CO2 en zeolitas naturales mexicanas 113

Tabla 2. Valores de la constantes de Henry para la adsorción de CO2.

Muestra 0°C 17°C 20°C 27°C
Total Rev Total Rev Total Rev Total Rev
ZAPS 0.221 — 0.148 0.108 0.206 — 0.137 0.127
ZNT 0.354 0.333 0.167 0.139 0.400 0.306 0.159 0.138
ZN-19 0.417 0.399 0.174 0.149 0.490 0.421 0.168 0.149

1.8 35

1.6 30
1.4
25
a (mmol/g)

Q iso (kJ/mol)
1.2

1.0 20

0.8 15

0.6
10
0.4
5
0.2
P 0
a
0.0 (mmol/g)
0 100 200 300 (Torr) 0.0 0.4 0.8 1.2

Fig. 9. Isotermas de adsorción total (l) y reversible (¡) de CO2 en Fig. 10. Calores isostéricos de la adsorción total (l) y reversible (¡)
CG a 17 °C. de CO2 en carbón activado CG a partir de las isotermas a 17 y 27 °C.

estas muestras disminuye aproximadamente en un 15 % en
promedio con respecto a la adsorción total. Estos dos fenó-
menos, por tanto, conducen a un aumento del calor isostérico
de la adsorción reversible.
Es interesante observar de la Fig. 5, que el calor isostérico
de la adsorción reversible en ZAPS prácticamente permanece
constante. Es decir, las moléculas adsorbidas irreversiblemen-
te hicieron a la superficie más homogénea energéticamente.
En las Figs. 7 y 8 se muestran los resultados obtenidos a 0
y 20 ºC para la mordenita y clinoptilolita, respectivamente. En
ninguna de las dos muestras se observa la disminución inicial
del calor isostérico de la adsorción reversible, como es el caso
de la adsorción total, debido a que en esta última predominan
las interacciones adsorbente-adsorbato, mientras que en la
adsorción reversible no pueden participar los centros de adsor-
ción más activos, ya que éstos se encuentran ocupados previa-
mente por las moléculas adsorbidas irreversiblemente; este
hecho se pone de manifiesto con la disminución de los valores
de la constante de Henry para la adsorción reversible de CO2 a
0 y 20 °C en estas muestras, con respecto a la adsorción total
(Tabla 2).
Adsorción de CO2 en carbón activado CG
En la discusión de la Fig. 1 se comparó la capacidad que pre-
senta el carbón activado CG de adsorber CO2 con la de las
zeolitas. El estudio de la adsorción reversible del CO2 en CG
(Fig. 9) reveló que existe una cantidad de adsorción irre-
versible proporcionalmente casi igual a la registrada para las
zeolitas. Este hecho experimental puede obedecer a la existen-
cia en la superficie del carbón de centros activos de adsorción
con los cuales la molécula de CO2 interacciona fuertemente.
Se sabe que en los carbones activados existen “grupos superfi-
ciales de oxigeno” [9], por lo que estos pueden servir como
centros activos para la adsorción del CO2 . Por otro lado, el
hecho de que el carbón activado CG presente menor capaci-
dad de adsorber CO2 que las zeolitas (Fig. 1), probablemente
obedezca a que la cantidad de los centros activos de adsorción
por unidad de superficie (concentración superficial de los cen-
tros activos) en el carbón CG sea menor que en las zeolitas.
En la Fig. 10 se presenta el calor isostérico de adsorción
total y reversible de CO2 en CG en función de la cantidad de
sustancia adsorbida. A diferencia de lo observado para las
zeolitas, el calor isostérico de la adsorción reversible adquiere
valores inferiores a los de la adsorción total. Es evidente que
la superficie del carbón es más homogénea energéticamente
que la de las zeolitas, ya que el calor isostérico de la adsorción
total en CG no presenta extremos de la función Q iso = f(a),
observándose una leve y paulatina disminución al aumentar la
cantidad de sustancia absorbida. Por otro lado, el hecho de
que los valores de los calores isostéricos de la adsorción re-
versible sean menores que los de la adsorción total puede obe-
decer a que la concentración superficial de centros de adsor-
ción es muy baja en comparación con la de las zeolitas. El
calor isostérico de la adsorción reversible permanece práctica-
mente constante al inicio y, al aumentar la cantidad de sustan-
cia adsorbida aparece un aumento por las interacciones adsor-
bato-adsorbato, pero este aumento no es tan brusco como en el
caso de las zeolitas.
Conclusiones
Se estableció que el CO2 en la erionita se adsorbe en mayores
cantidades que en la mordenita y la clinoptilolita, debido a que
la primera posee una densidad catiónica y volumen de micro-
poro mayor que las otras dos muestras. El hecho de que el car-
114 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
bón activado CG presente menor capacidad de adsorber CO2
que las zeolitas, probablemente esté obedeciendo a que la can-
tidad de los centros activos de adsorción por la unidad de
superficie en el carbón CG sea menor que en las zeolitas. La
muestra ZAPS presentó el mayor de los calores isostéricos de
adsorción total, debido probablemente, a que esta muestra
puede poseer una heterogeneidad energética mayor que las
otras muestras. Los calores isostéricos de la adsorción rever-
sible en las zeolitas incrementan con respecto a los calores de
la adsorción total, debido a que en este caso se han reducido
las interacciones adsorbato-adsorbente y por tanto predominan
las interacciones adsorbato-adsorbato.
Rosario Hernández-Huesca y Gelacio Aguilar Armenta
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Spain. Elsevier Science Publishers, 1990.
 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 115-119
Investigación
Estudio de la composición química del aceite cíclico ligero
proveniente de crudos mexicanos
Georgina C. Laredo,* Yolanda Figueroa, José Luis Cano, Ma. Teresa Mares y Jesús Castillo
Instituto Mexicano del Petróleo. Programa de Tratamiento de Crudo Maya. Eje Central Lázaro Cárdenas 152.
Col. San Bartolo Atepehuacan. México 07730, D.F. Tel: 011-(55)-3003 6615; E-mail: glaredo@imp.com
Recibido el 21 de enero del 2002; aceptado el 16 de mayo del 2002
Resumen. Con el objetivo de encontrar nuevas aplicaciones y/o for-
mas de procesamiento para el aceite cíclico ligero (ACL) que es un
producto de la desintegración catalítica que usualmente era empleado
como componente de la carga a hidrotratamiento para la producción
de diesel, se obtuvo la distribución química a lo largo de la curva de
destilación. Se presenta también la distribución química y la caracte-
rización completa de seis muestras diferentes de aceite cíclico ligero
provenientes de refinerías mexicanas. Para lograr este objetivo se
desarrolló un nuevo método de análisis cuantitativo utilizando cro-
matografía líquida de alta eficiencia (CLAE).
Palabras clave: Diesel, petróleo, aceite cíclico ligero (ACL), destila-
dos medios, compuestos aromáticos, cromatografía líquida de alta
eficiencia (CLAE).
Introducción
En México, el predominio del crudo Maya (48 % de los 49775
millones de barriles al 1 de Enero de 1996) [1] caracterizado
por tener altas concentraciones de compuestos azufrados, ni-
trogenados y aromáticos, ha incrementado la necesidad de
disponer de mejores tecnologías de procesamiento para la
obtención de combustibles que cumplan en forma satisfactoria
con las demandas ambientales [2]. De acuerdo con las especi-
ficaciones de diciembre de 1999 de la Environmental Protec-
tion Agency (EPA), el combustible diesel que pretendía ser
certificado debía tener un contenido de poliaromáticos menor
al 11 % en volumen, menos de 350 ppm de azufre en peso y
un número de cetano mínimo de 51 [2]. El alto contenido de
compuestos de azufre, nitrógeno y sobre todo de aromáticos
del aceite cíclico ligero (ACL)[3] ha ocasionado que su em-
pleo como componente para la producción de diesel en Méxi-
co, se vea restringido, y que, mientras no se implementen
modificaciones en el proceso de hidrotratamiento, la prepa -
ración de este combustible va de depender mayormente del
procesamiento de gasóleo ligero primario, cuyos contenidos
de azufre, nitrógeno y aromáticos son mucho más bajos. Esto
ha traído como consecuencia que la utilidad del aceite cíclico
ligero y por lo tanto, potencial económico como combustible
se haya visto reducido.
Como puede verse en la Tabla 1, es factible encontrar una
buena cantidad de trabajo de caracterización de aceite cíclico
Abstract. In order to find suitable applications and / or to develop
new methods for processing light cycle oil (LCO), a product of Fluid
Catalytic Cracking, which was formerly used as a feedstock for diesel
fuel production, its chemical compound distribution along the distil-
lation curve was obtained. Additionally, the distribution of chemical
compound for six different light cycle oils from several Mexican
sources and a complete physical and chemical characterization of the
samples were also presented. In order to get a reliable evaluation, a
new quantitative liquid chromatographic (HPLC) method was deve-
loped.
Keywords: Diesel, petroleum, light cycle oil (LCO), middle distil-
lates, aromatic, high performance liquid chromatography (HPLC).
ligero en la literatura [4-12]. El contenido de azufre, nitrógeno
y aromáticos, así como el índice y/o el número de cetano, son
factores claves para determinar su factibilidad de procesa -
miento, y por lo tanto, su valor como combustible. El conte-
nido de compuestos de azufre en estas muestras va desde 0.16
hasta 2.91 % en peso. El nitrógeno total y el nitrógeno básico,
van de 17 y 30 hasta 1260 y 185 ppm respectivamente. El con-
tenido de compuestos aromáticos obtenido mediante el método
FIA fluctúa entre 37 y 74 % (en volumen), aunque Danaher
[5] reporta un aceite cíclico ligero con un contenido de 82 %
(en peso) obtenido mediante la técnica de CLAE. Como con-
secuencia del alto contenido de compuestos aromáticos, el
índice y/o el número de cetano de todas estas muestras es muy
bajo, entre 20 y 29.
Erwin [8] lleva a cabo la caracterización por tipo de com-
puesto presentes en determinado intervalo de destilación, uti-
lizando para ello espectrometría de ultravioleta (UV) (Fig. 1).
Este estudio lo realiza con el fin de conocer la calidad de la
ignición y la generación de partículas de los combustibles
atribuidos a este producto. Como puede verse en esta figura, el
contenido de compuestos monoaromáticos va disminuyendo
conforme se incrementa la temperatura de ebullición, el con-
tenido de compuestos diaromáticos presenta un máximo a 282
ºC y el contenido de compuestos poliaromáticos se comienza a
incrementar a partir de los 280 ºC. El contenido de com-
puestos saturados se mantiene entre el 40 y el 60 %.
116 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
70
60
50
40
30
20
10
0
200 220 240 260 280 300 320 340 360
Temperatura T50 %, ºC
Fig. 1. Composición Química del Aceite Cíclico Ligero contra Tem-
peratura de Ebullición de acuerdo con Erwin [8]. Saturados (u), mo-
noaromáticos (n), diaromáticos (p), poliaromáticos (l).
Entre estos resultados, el único aceite cíclico proveniente
de crudos mexicanos que ha sido caracterizado es el reportado
por Ancheyta y colaboradores [12]. Es necesario un estudio
completo dadas las características del crudo mexicano, parti-
cularmente del crudo maya, y del efecto de estas característi-
cas en los productos de la desintegración catalítica.
El objetivo de este trabajo es presentar el estudio de seis
muestras de aceite cíclico ligero derivados de crudos mexi-
canos. En el caso particular del aceite cíclico ligero prove-
niente de la refinería de Tula, se obtuvo la composición a lo
largo del intervalo total de destilación, mediante un frac-
cionamiento cada 25 ºC, similar al efectuado por Erwin [8].
Finalmente, para obtener resultados confiables fue nece-
sario el desarrollar una técnica de análisis cuantitativo ya que
las técnicas empleadas para estas caracterizaciones usual-
mente son ultravioleta UV, espectrometría de masas (EM) y
solo recientemente cromatografía líquida de alta eficiencia
(CLAE).
Parte experimental
Caracterización de los aceites cíclicos ligeros. En la Tabla 2
se presentan las técnicas empleadas para la caracterización
física y química de cada una de las muestras.
Obtención de las fracciones del destilado. El aceite cíclico
ligero proveniente de Tula, se sometió a destilación TBP me-
diante la técnica ASTM D-2892, que implica un equipo Older
Shaw de 2 pulgadas de diámetro interno y 15 etapas teóricas,
separándose las fracciones cada 25 ºC.
Análisis cromatográfico. Las muestras de aceite cíclico
ligero estudiadas y las fracciones obtenidas fueron caracteri-
zadas mediante un cromatógrafo de líquidos de alta resolución
WATERS modelo 600E, con base en un método desarrollado
a partir de modificaciones a las normas ASTM D-2549 e IP-
391-90. Una cantidad reproducible de muestra seca diluida en
heptano es inyectada a un cromatógrafo de líquidos utilizando
heptano como fase móvil a una velocidad de flujo de 1 mL /
Georgina C. Laredo et al.
100%
Distribución de Compuestos, %p
80%
Polares
60%
Poliaromaticos
40% Diaromaticos
Monoaromaticos
20%
Saturados
0%
Tula Cd. Salina Cruz Cadereyta Salamanca Minatitlán
Madero
Fig. 2. Distribución por tipo de compuestos de muestras de aceite
cíclico ligero proveniente de las refinerías de PEMEX.
min, previamente desgasificado con helio y una columna de
m-Bondapack-NH 2 de 3.9 × 300 mm (WATERS, 84040)
como fase estacionaria. Se permite la elución de los com-
puestos aromáticos hasta la aparición de fluoranteno. Una vez
detectado este, se invierte el flujo para permitir la salida de los
compuestos polares. La columna esta conectada en serie a un
detector de ultravioleta visible (WATERS modelo 996) ajusta-
do a 254 nm y a un detector de índice de refracción (WA-
TERS modelo 410). El análisis cuantitativo se desarrollo me-
diante la correlación de las áreas empleando estándares de
compuestos aromáticos comerciales.
Resultados y discusión
Muestras de ACL Completas. La caracterización completa de
las muestras de aceite cíclico ligero provenientes de diferentes
refinerías se puede ver en la Tabla 3. El contenido de azufre
en las muestras de aceite cíclico ligero de las diferentes refi-
nerías estuvo entre el 2.14 y el 3.52 % peso, y en todos los ca-
sos es mayor al de los aceites cíclicos ligeros reportados en la
literatura [4-12]. El contenido de nitrógeno total y de nitró-
geno básico va desde 445 y 38 para los más bajos hasta 972 y
230 respectivamente y se encuentra en un rango de valores si-
milar al reportado en la literatura [4-12]. El contenido de aro-
máticos en todas las muestras es de alrededor 70 %, es decir
se encuentran en el límite superior de los reportados en la lite-
ratura [4-12]. En la Fig. 2 se muestra la distribución completa
por tipo de compuesto. Las muestras de aceite cíclico ligero
que provienen de las Refinerías de Cadereyta y Cd. Madero
contienen la mayor proporción de compuestos de tipo
aromático y los de menor, Tula y Salina Cruz. Esto sin embar-
go, no es un valor fijo, pues depende de la composición de la
carga de desintegración catalítica, del tipo de mezcla de cru-
dos y de la severidad en que sea procesado en cada refinería.
Los componentes más importantes de todas las muestras estu-
diadas, son los compuestos de tipo diaromático. El índice de
cetano entre 25 y 30 como resultado del alto contenido de
compuestos aromáticos.
Dado que durante el hidrotratamiento, un mayor conte-
nido de compuestos de azufre, nitrógeno y aromáticos dificul-
Estudio de la composición química del aceite cíclico ligero proveniente de crudos mexicanos 117

Tabla 1. Características físicas y químicas de algunos aceites cíclicos ligeros.

Propiedad Referencia
4 5 6 7 8 9 9 9 10 11 12
Gravedad, ºAPI 17.7 18.4 18.1 24.5 17.6 20.6 22.5 26.2 22.7 27.5
Azufre total, %p 1.42 0.246 1.0 0.18 0.69 1.51 0.30 1.11 0.17 0.16 2.91
Nitrógeno total, ppmp 1260 90 803 59 934 420 17 490 643
Nitrógeno básico, ppmp 122 59 73 42 30 51
Numero de bromo, g Br2 / 100 g 5.6 8.9 7.9 3.6
Índice de cetano 20 26.3 28.8 26.1
Numero de cetano 23.9 25.2 25.2 29.5
Temperatura de anilina, ºC 24.6 9.8
Índice de refracción a 20 ºC 1.525 1.5558 1.5537 1.5366 1.5321 1.5129
Análisis FIA, % v
Parafinas 24.1 40 20.9 29.5 31.5 62.2
Olefinas 2.0 0 3.6 1.5 0 0.7
Aromáticos 73.9 60 75.5 69 68.5 37.1
Aromáticos, % p Técnica UV CLAE CLAE MS UV1 UV1 UV1 UV1 MS
Mono 17.7 4.0 11.2 13.4 6.3 8.64 8.6 8.8 21.6 20.7
Di 29.7 74.3 49.5 45.6 28.3 18.25 25.9 28 31.6 36.3
Tri 11 9.5 0.3 9.1 10.79 8.7 1.4 5.9 13.6
Poli 2.3 3.7 0.8 1.44 0.4
Totales 60.7 82.0 71.0 59.3 43.7 39.1 43.2 38.2 59.5 70.6 53.2
Destilación ASTM , D-86
TIE 183 205 172 235 178 163 158 186 64
10 249 255 245 247 236 226 232 206 246
50 281 294 261 280 289 273 251 271 285
90 333 339 292 334 349 322 271 349 322
TFE 350 356 359 309 365 376 340 285 467
1 % p como Carbono

ta el procesamiento, pues requiere de una mayor cantidad de
consumibles (hidrógeno, catalizador, etc.) y el producto
obtenido es de menor calidad [13], los aceites cíclicos prove-
nientes de Cd. Madero y de Cadereyta son de una calidad me-
nor, y en consecuencia tienen un menor valor económico.
Distribución Química del ACL proveniente de Tula. De
acuerdo con la Fig. 3, la composición química para cada una
de las fracciones del aceite cíclico ligero contra temperatura
de ebullición presenta las siguientes características:
a) El contenido total de compuestos saturados aumenta
conforme aumenta la temperatura de ebullición.
b) El contenido de compuestos monoaromáticos desciende
conforme se incrementa la temperatura de ebullición.
c) Los compuestos diaromáticos presenta una distribución
con un máximo de concentración aproximadamente a
288 ºC.
d) A partir de los 260 ºC y hasta los 340 ºC, el contenido
de compuestos poliaromáticos se incrementa conforme
aumenta la temperatura de ebullición y a partir de este
punto se mantienen aproximadamente constantes.
e) El contenido de compuestos polares aumenta conforme
aumenta la temperatura de ebullición después de los
262 ºC.
Las distribuciones encontradas fueron similares a las des-
critas por Erwin [8].
El conocimiento de la distribución química del aceite cí-
clico ligero permite llevar a cabo modificaciones en el proceso.
Por ejemplo, se sabe que entre los componentes del aceite cícli-
co ligero, los compuestos que suelen ocasionar mayores di-
ficultades en relación con el envenenamiento del catalizador o la
demanda de una mayor proporción de consumibles durante el
proceso de hidrotratamiento, son los compuestos poliaromáticos
y polares [13]. Entre las tecnologías que podrían emplearse para
el aprovechamiento del aceite cíclico ligero podría sugerirse la
separación en dos fracciones: una fracción ligera (< 290 ºC) rela-
tivamente fácil de hidrotratar, y una fracción pesada (> 290 ºC)
que contiene la mayor parte de los compuestos poliaromáticos y
polares y que es mas difícil de hidrotratar. Estas fracciones
podrían ser procesadas por separado a condiciones de severidad
diferentes y, de acuerdo a sus propiedades finales de contenido
de azufre, nitrógeno, aromáticos y número de cetano, ser incor-
poradas como carga a hidrotratamiento junto con el gasóleo lige-
ro primario o bien, al producto terminado. Otra opción intere-
sante sería la de incorporar la fracción ligera del aceite cíclico
ligero en una proporción específica como mezcla dentro de la
carga a hidrotratamiento y evaluar la calidad del combustible
producido. Opciones de este tipo han sido propuestas por
Panarello y Moggi [14] para la producción de diesel con conte-
nido de azufre ultra bajo a partir de gasóleo ligero primario.
118 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Georgina C. Laredo et al.

Tabla 3. Características físicas y químicas de algunos aceites cíclicos ligeros.

Refinería Tula Cd. Madero Salina Cruz Cadereyta Salamanca Minatitlán
Propiedad
Peso específico (20 / 4 ºC), g / mL 0.9338 0.9442 0.9336 0.9573 0.9448 0.9373
Azufre total, %p 2.98 2.93 2.73 3.52 2.90 2.14
Nitrógeno total, ppmp 903 445 675 972 833 566
Nitrógeno básico, ppmp 64 38 38 70 58 230
Índice de cetano 30 25 29 25 29 30
T. de inflamación, ºC 112 116 127 129 93
T. de escurrimiento, ºC –21 –6 0 -6 3
T. de anilina, ºC 39.2 14.8 24 25.4 34.2
Índice de refracción 1.546 1.5841
Color > –16 L 2.0 > –16 L 3.0 L 2.0 L 2.0
Aromáticos totales, % p 67.38 74.98 67.74 74.72 71.69 68.81
Distribución de compuestos, % p
Saturados 32.28 20.1 30.46 20.23 30.01 27.44
Monoaromáticos 17.59 17.03 15.31 15.21 14.89 17.33
Diaromáticos 26.28 53.01 35.35 38.91 32 33.77
Poliaromáticos 10.84 6.52 9.8 15.94 11.77 12.19
Polares 13.01 3.34 9.08 9.71 11.33 9.27
Totales 100 100 100 100 100 100
Destilación ASTM D-86
TIE 211 226 226 216 206 179
10 263 264 263 259 269 255
30 292 284 286 284 283 285
50 334 297 299 302 298 314
70 341 308 320 327 313 341
90 362 333 347 355 335 368
TFE 396 362 372 380 363 402

Tabla 2. Métodos de análisis físicos y químicos. 80

70
Propiedad Unidades Método
60

Peso específico, (20/4 ºC) g / mL ASTM D-70 50

Azufre total %p ASTM D-4294 40

Nitrógeno total ppmp ASTM D-4629 30

Nitrógeno básico ppmp UOP-313 20

10
Índice de cetano ASTM D-976
0
Temperatura de inflamación ºC ASTM D-92 175 225 275 325 375 425

Temperatura de escurrimiento ºC ASTM D-97 Temperatura T50 %, ºC

Temperatura de anilina ºC ASTM D-611 Fig. 3. Composición química contra temperatura de ebullición del
Índice de refracción ASTM D-1218 aceite cíclico ligero proveniente de la refinería de Tula (Mezcla Istmo
Color ASTM D-1500 / Maya 60 / 40). Saturados (u), Monoaromáticos (n), Diaromáticos
Aromáticos totales % peso ASTM D-2459 (p), Poliaromáticos (l), Polares (Ð).
Distribución de compuestos % peso IP-391-1990
Destilación ºC ASTM D-86

Conclusiones

Se presenta el resultado de la caracterización física y química de seis muestras de aceite cíclico ligero provenientes de diferentes
refinerías mexicanas, así como la distribución química de uno de ellos. Se encontró que estos aceites cíclicos ligeros tienen un
contenido mayor de azufre y de aromáticos en comparación con los reportados en la literatura para este tipo de carga. Esto es
debido a que estos productos provienen del procesamiento de crudos pesados como es el Maya. La distribución química a lo largo
de la curva de destilación es muy similar a la distribución química reportada para este tipo de destilado. Finalmente, la caracteri-
zación física y química de un determinado producto permite planear las condiciones de procesamiento más eficientes para obtener
el mayor beneficio económico.
Estudio de la composición química del aceite cíclico ligero proveniente de crudos mexicanos
Referencias
1. Beck, J. R. Oil & Gas J. 1996, 94 (4-22) 45-46.
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Petr. 1992, 24, 68-76.
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Refin. Assoc. [Techn. Paper] AM-87-58.
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Selectivity of Synthetic Fuels presented before the Division of Fuel
Chemistry. Am. Chem. Soc. Washington DC, August, 1992, 1915-
1923.
119
9. Suchanek, A. J.; Hamilton, G. 1992, Nat. Petr. Refin. Assoc.
[Techn. Paper] AM-92-19.
10. Shi, Y.L.; Shi, J.W.; Zhang, X.W.; Shi, Y.H.; Li, D.D. 1993, Nat.
Petr. Refin. Assoc. [Techn. Paper] AM-93-56.
11. Corma, A.; Martínez, A.; Martínez-Soria, V. J. Catal. 1997, 169,
480-489.
12. Ancheyta, J.; Rodríguez, S.; Valenzuela, M.A. Energy & Fuels
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13. Girgis, M.J.; Gates, B.C. Ind. Eng. Chem. Res. 1991, 30, 2021-
2058.
14. Panarello, F.; Moggi, A. in: 1998 Symposium on Recent Advan-
ces in Heteroatom Removal presented before the Division of Fuel
Chemistry Inc. Am. Chem. Soc. Dallas TX, March-April, 1998.

Investigación
Acid-base equilibrium studies of 2-(aminomethyl)benzimidazole
in aqueous solution
Araceli Sierra-Zenteno, Carlos A. Galán-Vidal,* Rafael Tapia-Benavides
Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Centro de Investigaciones Químicas, Ciudad Universitaria,
Carretera Pachuca-Tulancingo km 4.5, Pachuca 42076, Hidalgo, México. Tel: (52-771) 72000, Ext. 6785;
Fax: (52-771) 72109. E-mail: galanv@uaeh.reduaeh.mx
Recibido el 23 de enero del 2002; aceptado el 27 de mayo del 2002
Abstract. The acid-base equilibrium constants of the 2-(amino -
methyl)benzimidazole 2AMBZ in aqueous solutions have been deter-
mined at 25 °C by means of nuclear magnetic resonance spec-
troscopy (13C NMR), and corroborated by potentiometric and spec-
trophotometric techniques. pKa values were obtained from experi-
mental data using the computer programs HypNMR, SUPERQUAD
and SQUAD respectively, finding pKa1 = 3.103 ± 0.079, pKa2 =
7.624 ± 0.063 and pKa3 = 12.540 ± 0.038 by NMR at variable ionic
strength. Likewise, it was possible determine the deprotonation me-
chanism of 2AMBZ.
Keywords: 2-(aminomethyl)benzimidazole, pKa, HypNMR, SU-
PERQUAD, SQUAD.
Introduction
There is a considerable interest in benzimidazole due to its
known biological activity. It has been used to develop many
pharmaceutical utility drugs such as omeprazole, mebenda -
zole, astemizole, etc. [1]. Thus, some metallic complexes of
benzimidazoles have been proposed as low-molecular-weight
mimetic models of the active sites in some metalloproteins
[2,3].
Particularly, 2-(aminomethyl)benzimidazole (2AMBZ)
(Fig. 1) has a special relevance. Recently it has been employed
to develop new, interesting antimicrobial, antiparasite and
AIDS antiviruses agents [4-12], as well as useful compounds
for the treatment of cancer, diabetic retinopathy, osteoporosis,
arthritis, etc. [13-17]. Most of these studies have been the sub-
ject of diverse patents.
Because of the biological and commercial importance of
2AMBZ, some studies have determined the acidity constants
[18-20] and stability constants for complexes with Cu(II) and
Ni(II) [19-20]. These thermodynamic parameters can be used
to obtain a better understanding of their biological properties,
as well as to optimize synthetic routes.
In these reports graphical methods have been used for
equilibrium constant determination, and they do not describe
clearly the methodology and experimental conditions. Like-
wise, in some cases comparisons with other techniques do not
appear and it does not allow to evaluate the quality of the
results, and the reported statistic are not well defined.
Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 125-130
Resumen. Las constantes de equilibrio ácido-base del 2-(aminometil)
bencimidazol 2AMBZ en solución acuosa han sido determinadas a 25
°C mediante resonancia magnética nuclear (13C RMN), y corrobo-
radas por técnicas potenciométricas y espectrofotométricas. Los valo-
res de pKa fueron obtenidos a partir de los datos experimentales,
usando los programas computacionales HypNMR, SUPERQUAD y
SQUAD respectivamente, encontrando pKa1 = 3.103 ± 0.079, pKa 2 =
7.624 ± 0.063 y pKa3 = 12.540 ± 0.038 por RMN a fuerza iónica
variable. Asimismo, fue posible determinar el mecanismo de despro-
tonación del 2AMBZ.
Palabras clave: 2-(aminometil)bencimidazol, pKa, HypNMR, SU-
PERQUAD, SQUAD.
Previous works report the first and second pKa of
2AMBZ [19-20]. Only one reference reports the third [18].
In the present work the acidity constants of 2AMBZ were
determined in aqueous solutions at 25 ºC by potentiometry,
spectrophotometry UV/Vis and for the first time by 13 C NMR
techniques. Computational programs were used to process the
information in order to obtain statistical parameters that allow
evaluating in a better way the quality of the results. From the
studies of 13 C NMR it was possible to establish clearly the de-
protonation mechanism. Although the acid-base mechanism
has been reported elsewhere, there are discrepancies between
published mechanisms [18,19].
Experimental
Purification. 2-(Aminomethyl)benzimidazole dihydrochloride
hydrate is commercially available with a 98 % of purity (Al-
drich), therefore it was purified by recrystallization from abso-
lute ethanol, as reported elsewhere [19-21], and obtained as a
white crystalline solid. The melting point was determined
using a Büchi B-545 (263 °C) [21]. Also, the IR absorption
spectrum was obtained for the recrystallized solid in a TF-IR
2000 Perkin-Elmer spectrophotometer, matching with the one
reported in the FT-IR spectra catalog [22]. Finally, the ele -
mental analysis EA was obtained in a CHNS / O Analyzer
2400 Perkin Elmer found: C, 40.8 %; H, 5.7 %; N 17.3 %.
Calc. for C8 H11 N3 Cl2 ,H 2 O: C, 40.3 %; H, 5.5 %; N, 17.7 %.
126 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Salvador R. Tello-Solís y Alfonso Arroyo-Reyna

The recrystallized 2-(aminomethyl)benzimidazole dihy- H 2Cl

drochloride hydrate was then used in its purified form for all
experiments.
NMR determinations. NMR spectra were recorded in a
JEOL Eclipse 400 MHz spectrometer with an auto tune 5-mm
probe (P-31 to N-15 NMR tunable probe VT) at a constant
temperature of 25 ± 1 °C (corroborated with methanol [23]) u-
sing TMS as electronic reference. Experimental parameters
for 13C nucleus were as follows: spectral frequency = 100.53
MHz, spectral width = 25.19 KHz (250 ppm), 32 K data
points in the frequency domain, pulse width = 3.17 µs (9.5 µs
at 90o flip angle), number of scans = 3995. Spectra were ac-
quired using single pulse proton decoupling and coupling
experiments.
Spectra were recorded for solutions of 0.1M 2AMBZ at
pH values between 1.1 and 13.2, with 10 % v/v of D2O for
lock. pH measurements were obtained using a Radiometer-
Copenhagen PHM 250 pH-meter equipped with a ORION
combined ROSS pH-electrode. Calibration of the electrode
system was performed with Radiometer-Copenhagen IUPAC
standard buffers of pH 4.005, 7.000 and 10.012 ± 0.010
obtained cell efficiency greater than 98 %. The temperature of
the solutions was kept constant to 25 ± 0.01 °C with a ther-
mostatable cell holder and a Techne Tempette TE-8D tempe-
rature controlled water bath.
The refinement of the equilibrium constants was done
using the HypNMR program [24] from 13 C chemical shifts.
The program refines equilibrium constant values by minimiz-
ing the sum of residual squares between calculated (δ i calc) and
observed (δ iobs) chemical shifts U (eq 1). Wi are the weights
assigned to each observation and ideally should be equal to
the reciprocal of the variance of the measurement.
7
6
8 N1 NH3
5
2 10
9 3N
4
H
Fig. 1. 2-(aminomethyl)benzimidazole dihydrochloride.
Absorbance data were recorded approximately every 0.5
pH units in a UV-Vis Perkin-Elmer Lambda 40 spectrophoto-
meter and pH values were monitored with the same equipment
used in the NMR determinations. Constant temperature was
kept at 25 ± 0.01 °C.
The determination of the equilibrium constants was done
using SQUAD [25,26]. This program is analogous to Hyp
NMR, and calculates the best values for the stability constants
of the proposed equilibrium model from absorption spectra by
employing a non-linear least square approach to minimize the
sum of residual square for absorbance U. The program also
calculates absorptivity coefficients for each one of the absorb-
ing species in the range of wavelength and pH studied.
In order to determine the number of absorbing species in
solution, the absorbance matrices were analyzed using TRI-
ANG [27].
Potentiometric determination. pH titrations of 20 mL of
0.001, 0.005, 0.01 and 0.05 M of 2AMBZ solutions were per-
formed under nitrogen atmosphere with carbonate-free solu-
tions of NaOH at a constant temperature of 25 ± 0.01 °C. The-
se titrations were done by triplicate at variable and 0.1 M io-
nic strength NaClO4 .
NaOH solutions were standardized with potassium hydro-
gen phthalate and these were obtained by dilution of a stock
solution containing 50 % w/v of NaOH low in carbonates, fil-

( )
tered and was kept in a dessicator over ascarite [28].
U = ∑i Wi δ icalc − δ iobs
2
(1)

Spectrophotometric determination. Absorbance versus time C4-C7

studies. In order to demonstrate absorbance on time indepen- C5-C6

C8-C9
dence during measurements, absorption spectra for 48 h for 1 (a) C2
C10

× 10 –4 M 2AMBZ solutions at different pH values were re-

corded. In all cases a maximum variation of 1.5 % was obser-
ved over this period, indicating stability of the different acid- (b)

base species.
160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20

Spectrophotometric data. Two aqueous solutions of 2AMBZ

of the same concentration were prepared, one at low pH adjus- (c)
ted with HCl, and other at high pH adjusted with NaOH. The
128.5 128.0 127.5 127.0 126.5 126.0
experiments were carried out in two steps: the basic solution
was added to the acid solution in order to obtain different
pH’s until reach neutral pH, and the acid solution was added (d)
to the basic solution in order to obtain different pHs until
reach neutral pH. The study was carried out at concentrations 115.5 115.0 114.5
13
114.0 113.5 113.0

of 1.5 × 10–4 , 1 × 10 –4, 5 × 10 –5 and 2 × 10 –5 M 2AMBZ solu-

ppm C

tions at variable and 1.0 M ionic strength adjusted with Fig. 2. 13C NMR spectra of 0.1 M 2AMBZ aqueous solutions at 25
NaClO4. All experiments were done by triplicate. °C. (a) decoupled experiment, (b), (c) and (d) coupled 13C-1H experi-
ment. Chemical shifts are reference to TMS frecuency.
Estudio por dicroísmo circular de la desnaturalización térmica de la subtilisina BPN’... 127

14 H
7
8 N1 NH3 N NH3
12 6 -H
pH = 13.20 2 10
5
9 3N +H N
10 4 pKa1
H H
8 1
pH = 9.12 2
6

4
+H -H pKa2
pH = 5.30

2
N NH2 +H N NH2
0
pH = 1.10
N -H N
-2 pKa3
170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30
H
13 4 3
ppm C

Fig. 3. 13C NMR spectra of 0.1M 2AMBZ aqueous solutions at 25 °C Fig. 4. Schematic representation of deprotonation of 2-(aminome-
at different pH’s. thyl)benzimidazole dihydrochloride.

The titrations were performed using an automatic DL53
Mettler titrator equipped with a combined Ag / AgCl glass
electrode and a borosilicate glass burette of 10 mL.
Acid-base constants were calculated from the experimen-
tal data corresponding to the pH titration’s with the aid of the
SUPERQUAD program [26,29]. It refines equilibrium cons-
tant values by minimizing the weighting sum of residual squa-
res for cell potentials U. The weighting factor Wi is assigned
for each observation as the inverse of the variance which is
calculate from uncertainties of potential and titrant volume
measurements by a standard error propagation formula.
Results and discussion
NMR Study. The molecule of 2AMBZ (Fig. 1) has a set of
three pairs of chemically equivalent carbons, besides C of
methylene group and C-2, consequently only five distinct sig-
nal can be observed (Fig. 2a). The assignment of 2AMBZ was
done with an experiment of 13 C NMR spectra coupled with 1 H
(Fig. 2b).
The Figs. 2c and 2d show the coupling patterns of 13 C-1 H
that allow to differentiate the signal of C4-C7 (δ = 114.5 ppm)
respect to C5-C6 (δ = 127.37 ppm). Furthermore it was possi-
ble to discern the resonance frequencies of C2 (d = 143.51
ppm), C8-C9 (d = 131.01 ppm) and C10 (d = 34.543 ppm).
Therefore, the equivalent nucleus of C4 and C7 are only cou-
pled at three hydrogen atoms (H4, H5, H6 and H7, H6, H5
respectively), the greater multiplicity of C5 and C6 is due to
coupling with four hydrogen atoms (H4, H5, H6 and H7)
(Figs. 2c and 2d). By other hand, C2 is only coupled with
hydrogen atoms of methylene; this signal has multiplicity of
three and is easily differentiated of C8 and C9, which have
couplings with three different hydrogen atoms. Finally, the
methylene carbon C10 has a multiplicity of three. The assig-
nement was corroborated with a HMBC experiment and is in
accord with previous reports [30].
The number of signals in all spectra does not change dur-
ing the procedure of pH variation (Fig. 3), because of symme-
try and tautomerism phenomena.
In the diprotonated chemical species 1 (Fig. 4), there is a
plane of symmetry perpendicular to annular system, causing
the equivalence chemical of different aromatic carbons; C5
with C6, C4 with C7 and C8 with C9. On the other hand, in
bencimidazolic species monoprotonated 2 and neutral 3, the
imidazolic ring carries a tautomeric process, the proton is
transferred from N1 to N3 (Fig. 4).
From the chemical shifts of 13C NMR (Fig. 5) it was po-
ssible to find the values of the acid-base constants. The results
obtained with the HypNMR program (Tab. 1) have a good sta-
tistic and agree with previous reports (Tab. 2).
The 13 C NMR spectra also provide information about the
deprotonation mechanism of 1. Chemical shifts change signi-
ficantly when the pH is varied and the identification the four
molecular structures during this process was possible. It is
known that the formation of ammonium salts causes protec-

Table 1. HypNMR, SQUAD and SUPERQUAD results for pKa values of 2-(aminomethyl)benzimidazole.
Method I [2AMBZ] / M n pKa1 pKa2 pKa 3 σ χ2
NMR1 var 0.1 95 3.103 ± 0.079 7.624 ± 0.063 12.540 ± 0.038 4.1 × 10–2 25.1
Spectrophotometric2 var 2-15 × 10–5 1032 2.777 ± 0.111 7.481 ± 0.073 12.593 ± 0.010 1.5 × 10–2 nd
Spectrophotometric2 1.0 2-15 × 10–5 1032 2.982 ± 0.116 7.887 ± 0.082 12.487 ± 0.015 1.6 × 10–2 nd
Potentiometric3 var 1-50 × 10–3 420 2.996 ± 0.006 7.569 ± 0.003 nd 4.5 12.7
Potentiometric3 0.1 1-10 × 10–3 101 3.044 ± 0.016 7.611 ± 0.008 nd 5.0 22.0
1HypNMR, 2SQUAD, 3SUPERQUAD. I = Ionic strength adjusted with NaClO4; n = number of experimental data; σ = U / n ; var = ionic strength variable; nd =
not determinated. Uncertainties are the standard deviations. Equilibrium constant units mol L–1.
128 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Salvador R. Tello-Solís y Alfonso Arroyo-Reyna

Table 2. pKa values of 2-(aminomethyl)benzimidazole reported at literature.

Method T (°C) Ionic strength / M pKa1 pKa2 pKa3 Reference
Spectrophotometric 25 0.3 (NaClO4) 3.17 ± 0.03 7.83 ± 0.07 nr [20]
Spectrophotometric 30 0.3 (NaClO4) 3.14 ± 0.06 7.68 ± 0.05 nr [20]
Spectrophotometric 27 var 3.1 8.1 ± 0.5 12.8 [18]
Fluorescence 27 var 1.8 8 12 [18]
Potentiometric 30 0.2 (NaClO4) 3.45 ± 0.02 7.30 ± 0.02 nr [19]
Potentiometric 30 0.5 (NaClO4) 3.33 ± 0.02 7.02 ± 0.02 nr [19]
nr = not reported; var = ionic strength variable. Meanings of uncertainties are not reported.

tion phenomena in the carbon atoms bonded at nitrogen atoms
[31]. So, the chemical shifts of carbon nucleus in α position
with respect to quaternary nitrogen are shifted to high field
respect to free amine. In our case, we found that when the pH
of 1 increases, the signals of C2, C8, C9 and C10 are shifted
to low field. Although, in Fig. 5 it can be observed that only
the positions C2 and C10 were affected by the successive lost
of protons bonded at nitrogen atoms of the molecule. The
chemical shifts of C8 and C9 are constants between pH 4 and
11. This can be explained if we assume that the first deproto-
nation site occurs at imidazolic nitrogen producing the mono-
cationic species 2, whereas the second deprotonation site
180
(a)
C2
C8-C9
170
C5-C6
C4-C7
C Chemical shift (ppm)
occurs in NH3 group. On the other hand it has been reported
that the resonance frequencies of C5 and C6 are affected by
inductive effects produced by imidazolic nitrogens [31] , thus
any deprotonation of these nitrogen atoms will shift the sig-
nals of C5 and C6 to low frequencies. The spectra show that
these chemical shifts are constants between 4-11 pH confirm-
ing that the second deprotonation site is at NH3 . The proposed
deprotonation mechanism is according to Dash [19], but does
not with Sinha [18].
Spectrophotometric study. Absorption spectra of 2AMBZ
show one isosbestic point at acid solutions and other one at
basic pH range, indicating two chemical species in equilibrium
corresponding to pKa 1 and pKa 3 . At the range of neutral pH it
is difficult observe the isosbestic point, because there are small
changes on absorption spectra [18] due to the tautomeric
process mentioned earlier. From pH-absorbance matrices TRI-
ANG indicated the presence of at least 3 or 4 absorbing species

160
over the pH interval studied, corresponding with a model of
150 three pKa (four species).
The equilibrium constants refined by processing absorp-
140
tion spectra using SQUAD are given in Table 1. The values
130 are comparable to NMR results obtained and previously re-
13

ported information (Tables 1 and 2). Using spectrophotome-

120 tric refined values and the absorptivity coefficients calculated
with the program, it was possible the simulation of the spectra
110
0 2 4 6 8 10 12 14 for each concentration and pH with a spreadsheet. Fig. 6
pH
1.6
42
C10 (b)
1.4
41

1.2
13C Chemical shift (ppm)

40

1.0
Absorbance

39
0.8
38
0.6
37
0.4
1.70
36
6.80
0.2
10.80
35 13.62
0.0
34 240 250 260 270 280 290 300
0 2 4 6 8 10 12 14 λ (nm)
pH
Fig. 6. Absorption spectra simulated (solid lines) and experimental
Fig. 5. Chemical shifts in 2AMBZ 0.1 M solutions at 25 °C against (symbols) at different values of pH for a total concentration of
pH. 2AMBZ of 1.5 × 10–4 M I=var.
Estudio por dicroísmo circular de la desnaturalización térmica de la subtilisina BPN’...
9 Acknowledgements
8
7 through project No. J-27920-E. We acknowledge Professor A.
6
pH
5
4
3 Topçu, G. J. Heterocyclic Chem. 1995, 32, 1767-1773.
2 Thorp, D.; Thornton, P. ; Lockhart, J. C. J. Chem. Soc., Dalton
0.0 0.5 1.0 1.5 2.0
Volume 0.1887M NaOH (mL)
Fig. 7. Simulated (solid lines) and experimental (symbols) potentio-
metric titration curve for 20 mL of 2AMBZ 0.01M. I=var.
shows overlapped experimental and simulated spectra, as can
be seen that the simulation agrees very well with the experi-
mental results.
Potentiometric study. The Fig. 7 shows a typical titration curve
of 2AMBZ with NaOH solution. By this method it was possible
to determine two constants, because the low concentration of
the NaOH solutions used in the titration do not allow to reach
values of pH as high as the ones required to refine conveniently
the third pKa, which is between 12 and 12.8 [18]. The values
obtained are collected in Table 1 and show good statistical para-
meters, they are in agreement with the values found with the
others techniques and the values published previously (Tab. 2).
Using the values refined with SUPERQUAD it was possi-
ble to simulate the data obtained with a spreadsheet. The si-
mulated and experimental potentiometric curves are shown in
the Fig. 7, the simulation agrees very well with the experi-
mental results.
Conclusions
The pKa values determined for 2AMBZ for a model of three
acid-base equilibriums are clearly explained by NMR, spec-
trophotometry and potentiometry.
It may be noted that values obtained here are consistent
among the techniques used with a good statistical, and they
are in agreement with values reported in the literature. Like-
wise, it was confirmed that the value of the third pKa is
12.540 ± 0.038 (NMR). This equilibrium constant has been
reported previously, but without statistical information [18].
From 13 C NMR studies it was possible to determine the
deprotonation mechanism of 2AMBZ. This work is the first
report on the determination of acid-base constants of 2-
(aminomethyl)benzimidazole by this technique.
129
This work was financially supported by CONACyT (México)
Vacca for the copy of the SUPERQUAD program.
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 131-135

Investigación

Efecto de la (E)-3-butil-8-estiri1-1-propilxantina sobre la asimetría

motora en rata
Alejandro Muñoz-Zurita, Jesús Sandoval-Ramírez,* Carmen Parra-Cid y Daniel Limón-Pérez de León

Facultad de Ciencias Químicas. Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. México. Apartado postal 1742,
Puebla 72000, Pue. México. Tel.: 01-222-2295-500 Ext. 7382; Fax: 222-2295-584; E-mail: jsandova@siu.buap.mx

Recibido el 9 de febrero del 2002; aceptado el 11 junio del 2002

Resumen. Se describe la síntesis de la (E)-3-butil-8-estiri1-1-propil-
xantina (A15Bu) a partir de 6-aminouracilo (6) y un estudio biológi-
co con el modelo experimental antiparkinsoniano de conducta de gi-
ro, en ratas de cepa Wistar. Al administrar el compuesto A15Bu en
ratas lesionadas con 6-hidroxidopamina (6-OHDA) en la sustancia
nigra pars compacta la asimetría motora se redujo en un 75 %.
Palabras clave: Antagonistas de receptores de adenosina, xantinas,
quimioselectividad, agentes antiparkisonianos, modelo de asimetría
motora.
Abstract. Herein we describe the synthesis of (E)-3-butyl-1-propyl-
8-styrylxanthine (A15Bu) starting from 6-aminouracil (6) and a bio-
logical study with the antiparkinsonian experimental model of rota-
tional behavior using Wistar rats. When the xanthine derivative
A15Bu was administered to rats lesioned with 6-hydroxydopamine
(6-OHDA) at the substantia nigra pars compacta, the asymmetric
motor behavior was reduced by 75 %.
Keywords: Adenosine receptors antagonist, xanthines, chemoselec-
tivity, antiparkinsonian drugs, asymmetric motor model.

Introducción cientemente se ha reportado la participación de los receptores

A 2A en las conductas motoras [7] y se ha encontrado que los
La adenosina es una molécula producida en algunos órganos y nuevos antagonistas A2A revierten los estados catalépticos in-
tejidos que modula una gran variedad de funciones biológicas ducidos por fármacos antagonistas dopaminérgicos D1 y D2
en el sistema nervioso central (SNC) y periférico, su efecto se cuando son aplicados en el caudo-putamen [7]; dicha actividad
lleva a cabo a través de la interacción con uno o más de los también se observa cuando disminuye la producción de dopa-
cuatro subtipos de receptores que se conocen en la actualidad: mina [8]. Esto sugiere que los receptores A2A modulan la acti-
A 1, A2A , A2B y A 3 [1]. Se ha propuesto que los subtipos A1 y vación de los receptores D2 regulando la transmisión GABA-
A 2A juegan papeles complementarios en la regulación de la a- érgica estriadopalidal [9]. Otros estudios han demostrado que
denosina [2]. El subtipo A2B se expresa en células de tejidos el efecto estimulante de los antagonistas A2A , se debe a un blo-
dañados o inflamados y facilita la movilización del calcio in- queo de los receptores A2A en el estriado [10]. Se sugiere que
tracelular [2]. Las funciones del subtipo A3 no se han caracte- los antagonistas adenosinérgicos de tipo A2A tienen efectos
rizado totalmente pero los compuestos que activan o inhiben a motores y pueden revertir la asimetría motora o el estado hipo-
estos receptores son estudiados por su potencial uso terapéuti- cinético; inclusive, se ha reportado recientemente que nuevos
co en enfermedades del corazón y el cáncer [3]. antagonistas A2A se encuentran ya en la fase II de experimen-
Las metilxantinas como la teofilina (1) son conocidas des- tación [11]. Nosotros nos hemos interesado en la síntesis de
de hace mucho tiempo por sus efectos estimulantes sobre el
SNC debido a su efecto bloqueador de los receptores de ade-
nosina, aunque no son antagonistas selectivos; sin embargo, se
ha reportado que los antagonistas de los receptores adeno- O O
H CH3
sinérgicos del subtipo A2A pueden ser útiles como agentes H3 C N N
NH
N N N
antiparkinsonianos; no obstante, se desconocen muchos aspec- N
O N N O N N
tos del papel que desempeñan en dicho padecimiento [4]. CH3 CH3
N N
CH3
Se ha descubierto un gran número de antagonistas A2 muy
1 2 3
selectivos entre los que se incluyen por ejemplo, derivados de
NH2 NH
xantinas, adeninas, 1,2,4-triazolo[1,5-a]quinoxalinas y pirazo-
N
lo[3,4-d]pirimidinas como 2, 3, 4 y 5, respectivamente (Fig. 1). N N
N
Los compuestos derivados de la teofilina (1) que con- N N S H2N
S N N
tienen en la posición 1 a grupos lipofílicos como el n-propilo O
son reconocidos fácilmente por los receptores de la adenosina
[5]. Además, se ha descubierto que el sustituyente estirilo con 4 5
isomería (E) en la posición 8 confiere selectividad por los
Figura 1
receptores adenosinérgicos del tipo A2A [6]. Por otra parte, re-
132 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Alejandro Muñoz-Zurita et al.

xantinas como probables antagonistas de receptores de la O O O

adenosina selectivos, con efectos sobre la conducta motora y HN
a) HMDS /
N N
NO
(NH 4)2SO4 NaNO2
por tanto, como agentes antiparkinsonianos que permitan una O NH 2
b) PrI AcOH
N O N NH 2 O N NH 2
nueva terapéutica contra esta enfermedad neurodegenerativa. H H H
La síntesis de la molécula modelo se llevó a cabo tomando 6 7 8

como base la experiencia lograda en la síntesis de otros deri-

vados xantínicos [12, 13].
O O
H
NH2 N
Na2 S2 O4 N C6 H5 CH=CHCO 2H N
O
NH 4OH EDC
O NH2 O NH2
Resultados y discusión N
H
N
H
9 10
La síntesis de la xantina A15Bu funcionalizada en posiciones
1-, 3-, y 8- se llevó a cabo a partir del 6-aminouracilo (6) de
acuerdo con el esquema de trabajo mostrado en la Fig. 2 [12]. O
H
O
H
N N
Para llevar a cabo la alquilación selectiva de 6 en posi- Bu Br
N N
O KOH
ción 3, se forma in situ el derivado trisililado utilizando canti- K2 CO3 O N NH2 O N N

dades prácticamente equimolares de hexametildisilazano

(HMDS) y cantidades catalíticas de (NH 4 )2 SO 4 seguido por la
adición de un equivalente de yoduro de n-propilo. El derivado
alquilado 7 se aisla por precipitación en agua, con un 92 % de
rendimiento en ausencia de producto dialquilado.
La nitrosación quimio- y regioselectiva en posición 5, pa-
ra obtener el derivado 8 se realiza utilizando nitrito de sodio
en medio ácido acuoso. Nosotros hemos encontrado que los
mejores rendimientos (aprox. 80 %) se obtienen cuando la
reacción se realiza a temperatura ambiente y dichos rendi-
mientos son equiparables o superiores a los reportados en la
literatura [14]. Los derivados nitroso son fácilmente reconoci-
bles por su intenso color naranja y por la banda intensa en el
infrarrojo hacia 1510 cm–1 [15].
Para realizar la reducción del grupo nitroso y obtener el
compuesto 9, se empleó el método que utiliza ditionito de
sodio en medio básico. Dado que la diamina 9 es muy inesta-
ble, ésta se debe someter de forma inmediata a la próxima
reacción en ausencia de luz y oxígeno, para evitar la descom-
posición. Con lo anterior la diamina 9 se obtiene con un 65 %
de rendimiento.
La obtención de la amida 10 se efectuó haciendo reaccio-
nar el ácido trans-cinámico con la diamina 9 y empleando el
clorhidrato de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida
(EDC) como agente acoplante, con rendimientos cuantita-
tivos. Esta es una reacción totalmente quimioselectiva pues
solamente reacciona el grupo amino unido a la posición 5.
Los datos espectroscópicos de IR y de RMN de protón
establecen que la doble ligadura del grupo estirilo permanece
inalterada, pues tanto el dato de 971 cm –1 como la constante
de acoplamiento de 15.8 Hz son características para una doble
ligadura con estereoquímica trans [15, 16].
Sobre la amida 10 se puede realizar una alquilación qui-
mioselectiva en posición 1 utilizando un equivalente de bro-
muro de n-butilo, en presencia de K2C O3 , obteniéndose un
rendimiento del 76 %.
Finalmente, la reacción de ciclización para obtener la (E)-
3-butil-8-estiri1-1-propilxantina se llevó a cabo por tratamien-
to de 11 con una solución acuosa de KOH, en metanol, a re-
flujo durante 3 h, con un rendimiento del 69 %.
11 12
Figura 2
En la literatura, para caracterizar a compuestos uracílicos
o xantínicos se han utilizado por lo general, los métodos es-
pectroscópicos de RMN, IR y Masas haciendo caso omiso de
la espectroscopía UV-Vis. En este artículo presentamos los
datos de UV-Vis de los derivados uracílicos 7, 8, 10 y 11 así
como el de la xantina A15Bu que al igual a los obtenidos de
otros derivados en nuestro laboratorio muestran una gran utili-
dad en la elucidación de sus estructuras; así, los derivados del
6-aminouracilo con el grupo (E)-estirilcarboxamido unido a la
posición 5 generan espectros con λ max promedio de 270 nm,
en tanto que el derivado xantínico A15Bu muestra una absor-
ción en 342 nm.
Farmacología
Para llevar a cabo la evaluación de la xantina A15Bu, se uti-
lizaron ratas macho adultas de la cepa Wistar, provenientes
del Bioterio Claude Bernard de la BUAP, con un peso de 250-
280 g los cuales fueron mantenidos en cajas de lámina acrílica
las cuales fueron mantenidas bajo las mismas condiciones de
agua y alimento, con un ciclo de luz / oscuridad de 12 × 12 h,
a una temperatura de 22 °C.
La evaluación de conducta motora se realizó a través del
Modelo de conducta de giro: a un grupo de animales se les
administró 16 µg de 6-OHDA (disueltos en una solución a-
cuosa de ácido ascórbico al 0.1 %) en la sustancia nigra pars
compacta mediante una cirugía estereotáxica en las coorde-
nadas: AP = –4.9; L = +2.0; P = –6.5 [17]. Ocho días después
se evaluó la lesión dopaminérgica administrando metanfeta-
mina (8 mg / kg vía s.c.). Se consideró el número de giros
ipsilaterales para cada roedor a partir de la administración de
metanfetamina 70 min. Solamente 16 animales presentaron
diez o más giros por min (Fig. 3).
Efecto de la (E)-3-butil-8-estiril-1-propilxantina sobre la asimetría motora en rata
Figura 3
Quince días después de la lesión, los animales fueron
divididos en el grupo control (n = 8) al cual se le administró
aceite mineral en dimetilsulfóxido (DMSO) en una relación
1:5 y al grupo experimental (n = 8) se le administró el A15Bu
como probable antagonista A2A a una dosis de 1.0 mg / kg vía
s.c. Después de diez minutos a ambos grupos nuevamente se
les realizó la prueba de conducta de giro con metanfetamina
(8.0 mg / kg vía s.c.) y se evaluó el número de giros por 70
min (Fig. 4).
En la Fig. 3 se muestra la evaluación de la lesión dopami-
nérgica en la cual se contó el número de giros ipsilaterales
entre el minuto 10 al 70 después de la administración de la
metanfetamina (8 mg / kg vía s.c.) a ambos grupos de ratas. Se
observó un incremento significativo del número de giros a
partir del minuto 20 hasta alcanzar un máximo en el número
de giros entre el minuto 40 al 70, respecto al grupo control. El
número máximo de giros fue de 20.45 ± 0.9 al minuto 40 y de
18.45 ± 1.0 al minuto 60 de la administración de la metanfeta-
mina. El grupo al que se le administró el vehículo durante los
70 minutos de registro (triángulos, Fig. 3) no presentó giros
ipsilaterales.
Por lo tanto los siguientes experimentos para evaluar el
posible antagonista se realizaron entre el minuto 40 al 70
después de la administración de metanfetamina. Cinco días
después y bajo las mismas condiciones experimentales, se
administró el derivado de las xantinas A15Bu como probable
antagonista A2A a razón de 1 mg / kg vía s.c. al grupo experi-
mental y al grupo control el vehículo. La administración del
vehículo se hizo diez minutos antes de la administración de la
metanfetamina (8 mg / kg vía s.c.).
Encontramos que hubo una disminución del número de
giros aunque no significativa en el minuto cuarenta (Fig. 3).
Sin embargo, encontramos una diferencia significativa *p <
0.05 del 40 al minuto 70 de experimentación. El decremento
significativo en el número de giros se inició a partir del minu-
to cincuenta y esta diferencia se mantuvo hasta el minuto 70,
en la cual hubo una disminución significativa de un 75 %
respecto a su grupo control (Fig. 4).
Así, en este estudio mostramos que la asimetría motora
producida por el daño dopaminérgico con 6-OHDA en la sus-
tancia nigra pars compacta (Fig. 4) fue revertida cuando se
aplicó el compuesto A15Bu como supuesto antagonista A2A .
133
Parte experimental
Los puntos de fusión fueron determinados por la técnica de
capilar abierto en un fusiómetro Melt-temp usando la escala
de grados centígrados y no fueron corregidos. Los espectros
de infrarrojo se midieron en un espectrofotómetro NICOLET-
MAGNA FT-IR-750, los datos se expresan en cm–1 . Los es-
pectros de UV fueron obtenidos en un equipo BECKMANN
DU-7000 empleando soluciones etanólicas al 98 %; las longi-
tudes de onda se expresan en nm. Los espectros de RMN de
1H y 13C se realizaron en un espectrómetro JEOL eclipse a
400 y 100 MHz, respectivamente, utilizando DMSO-d 6 y
CDCl3 como disolventes y las señales de los protones rema-
nentes de los disolventes deuterados como referencia interna.
Los espectros de masas se determinaron a 70 eV en un espec-
trómetro Hewlett Packard 5989A, acoplado a un cromatógrafo
de gases Hewlett Packard 5990 serie II; los datos se expresan
en relación m/z.
6-amino-3-propiluracilo (7). En un matraz de fondo redondo
de 50 mL, provisto de refrigerante para reflujo, se prepara una
suspensión de 5.08 g (40 mmol) de 6-aminouracilo, en 12.65
ml (60 mmol) de HMDS y 0.243 g (1.92 mmol) de (NH4 ) 2
SO 4; la mezcla se calienta bajo atmósfera de argón y agitación
magnética hasta llegar al reflujo con lo cual se obtiene una
solución transparente y homogénea; después de 15 minutos se
disminuye la temperatura (40-50 ºC), se añaden 3.9 mL (40
mmol) de yoduro de n -propilo y el medio de reacción se
calienta hasta reflujo. La reacción se monitorea por CCF usan-
do como eluyentes CH2Cl2 : CH 3 OH (9:1) hasta la desapari-
ción de la materia prima (aprox. 3 h). Se deja enfriar hasta 40
ºC y se añaden 20 mL de solución saturada de Na2S 2O 3 (45g /
100 mL) con lo cual se obtiene una suspensión que se agita
durante 30 minutos y a continuación se agregan lentamente 20
mL de solución saturada de NaHCO3 . Se filtra al vacío, se
enjuaga con agua fría, benceno y finalmente con éter dietílico.
Rendimiento: 92 %. Polvo blanco amorfo: pf 267-269 °C (lit.
275 ºC [14]); UV (EtOH) λmax (ε) 261 (3508) nm; IR (KBr)
νmax 2930, 1741, 1631 cm–1; RMN 1H (DMSO-d6 , 400 MHz)
δ 6.32 (2H, b, -NH 2 ), 4.53 (1H, s, H-5), 3.59 (2H, t, -CH2 -N-
3, J=7.32 Hz), 1.46 (2H, m, -CH2 CH 2C H3 , 7.32 Hz), 0.80,
(3H, t, -CH2CH 2 CH 3 , J=7.32 Hz); RMN 13C (DMSO-d 6 , 100
MHz) δ 163.67 (C-4), 154.53 (C-2), 151.92 (C-6), 74.66 (C-
Figura 4
134 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
5), 21.52 (-CH2CH 2 CH3 ), 11.73 (-CH2CH 2 CH3 ); EMIE: m/z
(int. rel.): 169 [M]+ (22), 127 (100).
6-amino-5-nitroso-3-propiluracilo (8). En un matraz de 50
ml equipado con embudo de adición, barra magnética y at-
mósfera inerte se disuelve 7 (5 mmol, 0.84 g) en AcOH al 80
%, se comienza a agregar 10 mmol (0.69 g) de NaNO 2 disuel-
to en 5 mL de agua durante un lapso de 45 minutos. Al caer
las primeras gotas, la solución cambia de color (de blanqueci-
na a violácea) y conforme se adiciona mas solución de
NaNO 2 , aparece un sobrenadante naranja o amarillo intenso.
Al finalizar la adición de la solución de NaNO2 se deja en
agitación vigorosa durante 40 minutos más y se enfría a 0 ºC
para que el producto precipite. Se filtra al vacío y se enjuaga
con agua fría. Se seca en un desecador al alto vacío. Rendi-
miento: 79 %. Polvo amarillo amorfo: pf > 300 ºC; UV
(EtOH) λ max (ε) 320 (5920) nm; IR (KBr) νmax 3294, 3185,
1511 cm–1; RMN 1 H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11.37 (1H, b,
N 1 -H), 3.79 (2H, t, -C H 2 -N-3, J=7.32), 1.60 (2H, m, -
CH 2 CH 2 CH 3 , J=7.32), 0.89 (3H, t, -CH2 CH 2 CH 3 , J=7.32);
RMN 13C (DMSO-d 6 , 100 MHz) δ 161.84 (C-4), 150.27 (C-
2), 145.49 (C-6), 140.31 (C-5), 40.23 (-CH 2 -N-3), 21.37 (-
CH 2CH 2CH 3 ), 11.76 (-CH2 CH 2CH 3).
5,6-diamino-3-propiluracilo (9). En un matraz de 100 mL
provisto con barra de agitación y canasta de calentamiento, se
prepara una solución de 10 mmol (1.98 g) de 6-amino-5-
nitroso-3-propiluracilo (8) en 50 mL de NH 4 OH al 12.5 %
acuoso, la solución color rojo intenso se calienta hasta que
alcance una temperatura cercana a los 70 °C, enseguida se
comienza a agregar el Na 2 S2 O4 (aproximadamente 3 equiva-
lentes, 0.522 g) en pequeñas porciones durante un lapso de 10
minutos. La cantidad que se agrega debe ser suficiente para
que la solución se decolore. Inmediatamente se destila el agua
al vacío hasta que queden aproximadamente 15 mL de agua,
con lo cual se forma un precipitado cremoso, que se filtra rá-
pidamente al vacío y se somete a la próxima reacción debido a
su inestabilidad ante el ambiente. Rendimiento: 60-65 %.
Agujas cristalinas amarillas, descomponen antes de fundir.
(E)-6-amino-5-estirilcarboxamido-3-propiluracilo (10). En
un matraz de fondo redondo, provisto de barra de agitación y
atmósfera inerte se prepara una suspensión de 6.5 mmol (1.19
g) de 5,6-diamino-3-propiluracilo (9), 6.5 mmol (1.18 g) de
ácido trans-cinámico y 6.5 mmol (1.2 g) de EDC en 60 mL de
solución al 50 % de CH3 OH y se deja en agitación constante.
La reacción se sigue por placa (CH2Cl2 : CH3 OH, 9:1) hasta
que se consuma la materia prima (aprox. 10 h). Se enfría la
suspensión a 0 ºC y el precipitado formado se filtra al vacío
dentro de la campana de extracción. El precipitado se enjuaga
con agua fría y después con CH3 OH helado. Se seca al alto
vacío. Rendimiento: 76.9 %. Polvo blanco amorfo: descom-
pone antes de fundir; UV (EtOH) λ max (ε) 272 (6670) nm; IR
(KBr) νmax 3318, 3187, 1648 cm–1; RMN 1 H ( DMSO-d6 , 400
MHz): δ 8.7 (1H, b, NH amida), 7.41 (6H, m, 5 arom. y -
CH=), 6.85 (1H, d, -CH=, J=16.08), 6.11 (2H, b, -NH2), 3.6
Alejandro Muñoz-Zurita et al.
(2H, t, -CH 2-N-3, J= 6.2), 1.5 (2H, m, -CH2 CH2 CH 3, J= 7.32),
0.81 (3H, t, -CH2CH 2 CH 3 , J= 7.32); RMN 13 C (DMSO-d 6 ,
100 MHz): δ 165.58 (C=O amida), 161.15 (C-4), 150.49 (C-
6), 150.39 (C-2), 139.44(-CH=), 135.50 (arom.), 130.04
(arom.), 129.55 (arom.), 128.04 (arom.), 122.93 (=CH-),
87.69 (C-5), 40.20 (-CH 2-N-3), 21.50 (-CH2 CH2 CH 3), 11.76
(-CH 2 CH2 CH3 ).
(E)- 6-amino-1-butil-5-estirilcarboxamido-3-propiluracilo
(11). En un matraz de fondo redondo de 50 mL, provisto con
barra de agitación y atmósfera inerte, se disuelve 1 mmol
(0.314 g) de 10 en 5 mL de DMF, a la solución se agrega 1
mmol (0.138 g) de K2 CO 3 y posteriormente se añaden 1.5
mmol de CH3 (CH2 ) 3 Br y se deja en agitación constante; la
reacción que se va siguiendo por CCF (CH2 Cl2 : CH 3OH, 9:1),
hasta que se consuma el material de partida. Se agregan 8 mL
de agua destilada y se forma un precipitado blanquecino que
se enfría a 0 ºC y posteriormente se filtra al vacío. Se purifica
al disolverse en 5 mL de DMF y precipitando por la adición
de 10 mL de agua, se filtra al vacío y se seca adicionando 15
mL de éter dietílico. Rendimiento: 66 %. Polvo blanco amor-
fo: pf 273-274 ºC; UV (EtOH) λ max (ε) 271 (8523) nm; IR
(KBr) νmax 3319, 1731, 1652 cm –1 ; RMN 1 H (CDCl3 , 400
MHz): δ 8.14 (1H, b, -NH amida), 7.30 (5H, m, arom.), 6.76 y
7.55 (1H, d, -CH=, J=15.36), 5.82 (2H, b, -NH2 ), 3.78 (4H, m,
-CH 2-N-1 y -CH 2-N-3, J=7.32), 1.58 (4H, m, -CH2CH 2CH 3 , y
-CH2 CH2 CH 2CH 3 , J=7.32), 1.36 (2H, m, -CH2 CH2 CH 2 CH3 ,
J=7.32), 0.91 (3H, t, -CH2 CH 2 CH 3 , J=7.32), 0.88 (3H, t, -
CH 2C H2 CH 2 CH 3 , J=7.32); RMN 13 C (CDCl 3 , 100 MHz) δ
165.89 (C=O amida), 160.13 (C-4), 150.06 (C-6), 148.52 (C-
2), 142.17 (arom.), 134.41 (-CH=), 130.06 (arom.), 129.39
(arom.), 128.90 (arom.), 128.03 (arom.), 119.88 (=CH-),
92.05 (C-5), 43.43 (-C H 2 -N-3), 43.20 (-CH 2 -N-1), 30.11
(-CH 2 C H 2 C H 2 C H 3 ), 21.20 (-CH2 C H 2 C H 3 ), 20.09 (-
C H 2 CH 2 C H 2 C H 3 ), 13.75 (-CH 2 C H 2 C H 3 ), 11.37 (-
CH2 CH2 CH 2CH 3).
(E)-3-butil-8-estiri1-1-propilxantina (12). Se solubiliza 1
mmol (0.369 g) de 11 en 4 mL de solución de KOH al 20 %,
se adicionan 30 mL de metanol, se calienta hasta reflujo du-
rante 3 horas, la reacción se monitorea por CCF (CH 2 Cl2 :
CH3 OH, 9:1). Cuando se ha consumido la materia prima se
adiciona lentamente HCl conc. hasta que el pH ~3. Se enfría
para precipitar el producto, posteriormente se filtra al vacío y
se adicionan 15 mL de agua fría, finalmente se seca adicio-
nando 15 mL de éter dietílico. Rendimiento 69 %. Polvo blan-
co amorfo: pf 278-280 °C; UV (EtOH) λmax (ε) 342 (8785)
nm; IR (KBr) νmax 3388, 1705, 1662, 1642 cm –1; RMN 1 H
(CDCl3 , 400 MHz): δ 13.20 (1H, b, N-H), 7.36 (5H, m,
arom.), 7.09 y 7.77 (1H, d, -CH=, J= 15.36), 4.19 (2H, t, -
CH2 -N-3, J=7.32), 4.11 (2H, t, -CH 2 -N-1, J=7.32), 1.80 (4H,
m, 2 -CH 2 CH2 CH3 y -CH2CH 2 CH2 CH3 , J=7.32), 1.43 (2H, m,
-CH2 CH 2 CH 2 C H 3, J=7.32), 0.99 (6H, m, -CH 2 C H 2C H 3 Y
CH2 CH 2 CH 2CH 3 , J=7.32); RMN 13 C (CDCl3 , 100 MHz): δ
156.00 (C-6), 151.40 (C-2 ), 150.98 (C-8), 149.9 (C-4),
137.03 (=C-), 135.71 (arom.), 129.39 (arom.), 128.98 (arom.),
Efecto de la (E)-3-butil-8-estiril-1-propilxantina sobre la asimetría motora en rata
127.28 (arom.), 115.39 (-C=), 107.37 (C-5), 43.83 (-CH2 -N-
3), 43.61 (-CH 2 -N-1), 30.16 (-CH2 CH 2 CH 2 C H 3 ), 21.5 (-
CH 2 CH 2 C H 3 ), 20.11(-CH 2 C H 2 CH 2 CH 3 ), 13.88(-CH 2 C H 2
CH 3 ), 11.51 (CH2 CH 2 CH 2 CH 3 ); EMIE: m/z (int. rel.): 352
[M]+ (100).
Agradecimientos
A.M.-Z. agradece al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnolo-
gía el apoyo económico otorgado a través de la beca crédito
121993.
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 136-139

Investigación

Evidence for a Strained Cyclic Allene in the Ring Closure Reaction

of Enynylketenes
Mario Fernández,*1 Alejandro Ramírez,2 Ramón Hernández,1 Mario Ordóñez 1
1 Centro de Investigaciones Químicas, Universidad Autónoma del Estado de Morelos, Av. Universidad 1001.
Chamilpa, Cuernavaca 62210, Morelos, México. Tel/Fax: 01(777) 329-7997; E-mail: mfz@ciq.uaem.mx
2 Facultad de Ciencias, Universidad Autónoma del Estado de Morelos

Recibido el 20 de febrero del 2002, aceptado el 19 de junio del 2002

Abstract. We show in this paper using HF and MP2 ab initio calcu-
lations that the ring closure of 5 generates an intermediate best des-
cribed as the closed-shell cyclic allene 6a, instead of the usually assu-
med diradical nature reported in the literature. This intermediate then
gives rise to the formation of 7. The closed-shell cyclic allene nature
of the lowest-lying singlet was confirmed using CASSCF calcula-
tions.
Keywords: cyclic allene, Hartree-Fock, MP2, CASSCF, benzoquino-
nes.
Resúmen. Utilizando cálculos HF y MP2 ab initio, demostramos que
la reacción de ciclización de 5 genera un intermediario cuyas carac-
terísticas concuerdan con las de un aleno cíclico de capa cerrada 6a
en lugar de la usualmente aceptada naturaleza diradicálica reportada
en la literatura. Este intermediario, posteriormente da lugar a la for-
mación de las benzoquinonas 7. La naturaleza de aleno cíclico de
capa cerrada fue confirmada con cálculos CASSCF.
Palabras clave: aleno cíclico, Hartree-Fock, MP2, CASSCF, benzo-
quinonas.

Introduction our previous results. We present results concerning the lowest

singlet and triplet states since theses multiplicities characterize
Strained cyclic allenes have recieved considerable attention in the cyclic allene and the diradical species respectively.
the literature regarding their bonding and reactivity [1]. Since
allenes in rings with less than nine members can not adopt
their preferred linear geometry, several structures have been Theoretical calculations
proposed for singlet 1,2-cyclohexadiene, suggesting that they
could exist as dipolar or diradical species [2]. In order to achieve our goal, we performed HF, UHF and MP2
We have recently reported [3] using Hartree-Fock Self full geometry optimizations using the standard 6-31G** basis
Consistent Field (HF) and single reference frozen-core second of the Gaussian-94 program [7] on both structures 6 and, 6a
order Möller-Plesset (MP2) ab initio calculations that the ring presented in Scheme 2 and on simpler models of these in
closure of dienyne 1 generates an intermediate that can best be which the phenyl group is replaced by a hydrogen atom res-
described as the cyclic allene 2 and not the diradical form 3 pectively and referred to as structures 8 and 9. The triplet spe-
(Scheme 1), in agreement with earlier literature reports in which
the cyclic allene 1,2-cyclohexadiene is favored over other
species [4]. CH3 O O
O
CH3O C
In the light of the above result, we decided to analyze the Ph
Ph
last step of the original Moore’s benzoquinone synthesis [5] CH3 O
OR
CH3O
(Scheme 2) using ab initio calculations. The main goal of this OR
4 5
study is to characterize the nature of the intermediate obtained
by the ring closure of 5 as the diradical 6, as it has been postu-
lated in the past [6], or the cyclic allene 6a, in analogy with

O OCH3 O OCH3 O O O .
O OCH3 CH3 O Ph
CH3 O Ph CH3O Ph
Ph OCH3 OCH3
CH3 O CH3O Ph CH3 O Ph or .
or
. . CH3 O R CH3O CH3 O
CH3 O OTMS O O O
R R
O O
TMS TMS 7 6a 6

1 2 3 R = H, allyl, Si(CH 3 )3

Scheme 1 Scheme 2
Evidence for a Strained Cyclic Allene in the Ring Closure Reaction of Enynylketenes 137

O O . O O
CH3O H 1 1
CH3 O H CH3O 6 H CH3O 6 H
2 2

CH3O
. CH3O 5 3
H CH3O 5 3
CH3 O 4 4
O O O O
H H H
8 9 10 11
HF-triplet MP2-triplet
Scheme 3
C 1 -C2 1.44 C2 -C3 1.31
C 2 -C3 1.35 C3 -C4 1.44
cies were also calculated for the simpler models using unre- C 3 -C4 1.39 C4 -C5 1.35
stricted Hartree-Fock (UHF) and unrestricted Möller-Plesset C 4 -C5 1.41 C5 -C6 1.41
C 5 -C6 1.38
(UMP2) calculations. C 6 -C1 1.45
It must be said that an open-shell singlet state (the coun-
°
terpart of the lowest triplet state) must also exist and that we Bond Distances ( A )

have tried to obtain this state through UHF calculations start-
ing from the triplet state; however even though during the first
few SCF cycles the open-shell state was lower in energy, after
8 iterations the closed-shell singlet state turned out to be
favored. The stability of this closed-shell solution was tested
(including HF instabilities) by using the Stable=Opt option in
the G98 program.
The most important result of these calculations is that the
strained cyclic allene structure 6a corresponds to the ground
state of the intermediate rather than the diradical 6. For struc-
ture 8 our UHF calculations predict a triplet ground state
which lies 27.15 kcal / mol below the optimized singlet struc-
ture, while at the UMP2 level the singlet is favored as the
ground state by 19.6 kcal / mol. These findings are in agree-
ment with the common observation that the HF description
favors the higher multiplicities but electron correlation effects
are larger for the closed-shell species and thus we expect that
higher level calculations will not modify the present results. It
is important to mention that for structure 9 we did not antici-
pate a low energy triplet state and in fact, our calculations pre-
dict a singlet ground state 18.9 kcal / mol below the triplet at
the UHF level and 81.0 kcal / mol at the UMP2 level. It is in-
teresting to know that correlation effects are crucial to obtain
reliable singlet-triplet energy gaps for these molecules.
We are confident that the conclusions derived for the sim-
pler models 8 and 9 should hold for the actually synthesized
structure 7 derived from intermediate 6 or 6a since we have
performed HF and MP2 optimizations on the singlet states of
O
O
1
CH3O 6
1
H CH3O 6 H
2 2
CH3O 5 3
H CH3O 5
4
3 between C 4 -C 5 in the ring. However at the HF level structure 9
4
Scheme 5
these latter molecules and have found that the presence of the
phenyl group has a very small effect on the geometry (i.e. the
internuclear distances between carbon atoms that define the
cyclic allene structure). This implies that in Scheme 1 the
reaction intermediate is a singlet cyclic allene and there is lit-
tle chance that the triplet diradical can play a role in the reac-
tivity of these systems. This is contrary to the usual assump-
tions made for these type of chemical reactions. The existence
of diradical character has been found for structure 8 at the
UHF level for the triplet state by graphically analyzing the
spin density and it corresponds to the chemical drawing
depicted for structure 6 (without the phenyl group) in agree-
ment with chemist’s conventional wisdom.
Structures
The analysis of the optimized geometries for structures 8 and
9 indicates significant differences depending on the level of
theory used and on the multiplicity of the state considered.
First we discuss the distinctive features of the allene moiety in
the singlet state using the molecular structures 8 and 9 of
Scheme 3. We must stress that the ground state singlet 8
turned out to be —as it was confirmed by the previously men-
tioned CASSCF calculations- the closed-shell cyclic allene
and that the diradical species 9 lie well above the cyclic
allene.
The conventional picture would propose three double
bonds linking atoms C2 -C 3 , C3-C4 and C 5 -C 6 and a single bond

O O is better describes as structure 10 where the bond lengths C3 -

H
10 8 C4 and C4 -C 5 are intermediate between a single and a double
bond (1.43 Å). The previously mentioned conventional picture
HF-singlet MP2-singlet
is reproduced at the MP2 level as can be seen in structure 8 of
C2 -C3 1.33 C2 -C3 1.34 Scheme 4. At both levels of theory we find that the six-mem-
C3 -C4 1.43 C3 -C4 1.35
C4 -C5 1.43
bered ring is non-planar, it has a conformation which can be
C4 -C5 1.46
C5 -C6 1.34 C5 -C6 1.37 described as ‘boat’ with carbon atoms C4 and C1 out of the
° plane, the former being significantly more bent.
Bond Distances (A)

Scheme 4
138 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
The final feature which we consider worth of mentioning
is the different orientation of the methoxy groups depending
on the level of calculation. At the HF level the methoxy group
linked to carbon C6 lies in the plane of the ring while the
methoxy linked to carbon C 5 is facing downwards. Even
though we used this geometry as starting point for the MP2
optimization, the converged structure has the methoxy linked
to C5 planar and the other methoxy facing upwards. It should
be mentioned here that we did not search for all possible sta-
ble conformers for these molecules.
The most striking features for the triplet state of structure
10 (Scheme 3) are that the six-membered ring becomes planar
and the C 3 -C 4 and C 4 -C 5 bond lengths (Scheme 5) change dra-
matically compared with the singlet state.
At the HF level, structure 10, the C3 -C4 distance is redu-
ced to a value intermediate between a single and a double
bond and a similar change is observed in the C4 -C 5 bond but
to a lesser extent. At the MP2 level, structure 11, the single or
double bond nature of the C3 -C 4 and C 4 -C 5 bonds is the oppo-
site of what was found for the singlet state, i.e., the C3 -C 4
bond is weakened while the C4 -C 5 bond becomes a double
bond. Comparing the quantitative geometrical data of the
structures in Scheme 4 and Scheme 5, we must conclude that
the HF description leads to completely unreliable results for
the cyclic allene (singlet) as well as for the diradical (triplet)
species. Thus electronic correlation effects are crucial in des-
cribing these molecular systems
This type of molecules represent a true challenge for
modern quantum chemistry given the competition between
closed and open-shell structures (singlet as well as triplet
states) and their size and stereochemical complexity.
We are presently working on systematic description of
these molecules using a variety of ab initio and DFT methods
in analogy to the work which is currently being done on the
Myers-Saito and Schmittel cyclizations [8], cyclizations
which have also been the subject of several important recent
theoretical studies. However, one of the important differences
with our problem at hand is that the active electrons in these
structures are always found on carbon atoms, while in our in-
termediate molecule an oxygen atom linked to a six-membe-
red ring is involved.
In the newest and most complete study dealing with the
highly reactive nature of the diradicals involved in the Myers-
Saito and Schmittel cyclizations the emphasis is therefore put
only on the study of singlet and triplet open-shell species [8c].
However, if the main question is aimed at finding the most
stable structure of these type of molecules, we think that cru-
cial information is missing regarding the energetic position of
the closed-shell singlet structure, which was not envisaged in
that work. In fact, as was shown in a pioneering ab initio work
concerning the 1,2, cyclohexadiene by Schmidt et al. [9], it is
the closed-shell singlet structure the one which is favored over
the singlet open-shell diradical species. However we must
stress that the latter one can actually play a major role in the
reactivity of this molecule.
Mario Fernández et al.
In order to give further support to our results and conclu-
sions, we have performed state-averaged CASSCF calcula-
tions on the two lowest roots for the singlet species, we found
that the lowest root corresponds to the closed -shell species, as
we had already shown. However, in order to obtain a more re-
liable energy difference between the closed-shell and the sin-
glet diradical, we tried to optimize the orbitals for the second
root aiming at state specific CASSCF calculation for the sin-
glet diradical (using the triplet biradical orbitals as starting
point). Unfortunately this was not possible as convergence
problems were found. Pursuing these calculations further
would be a very time consuming task and is out of the scope
of this work.
Conclusions
Our calculations show that the most stable intermediate in the
Moore benzoquinone synthesis is the cyclic allene 6a and not
the diradical 6. We have confirmed the presence of the diradi-
cal as a triplet at 19.6 Kcal / mol above the cyclic allene. We
have also observed very strong changes on the electronic
structure as the molecule passes from singlet to triplet nature,
this being based on the fact that the lowest singlet is not relat-
ed to the two-open-shell diradical. Finally, there are also
strong effects (structurally and energetically) arising from the
non-dynamical electronic correlation on both, the allene and
the diradical which show the limitation of using single-config-
uration based methods on these systems.
Acknowledgements
The authors wish to thank CONACyT for providing financial
support for this work through projects 3112P-E9607, 34673-E
and 3446E.
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Evidence for a Strained Cyclic Allene in the Ring Closure Reaction of Enynylketenes 139

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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 140-144
Investigación
Preparación, caracterización y efecto de la temperatura de fijación
del pilar en la adsorción de vapor de agua de una arcilla pilarizada
de aluminio
Socorro López,1 Guillermo Osorio,2 Tzayhrí Gallardo1* y Sofía Arellano1
1 Escuela Nacional de Ciencias Biológicas (ENCB-IPN); Departamento de Biofísica. Plan de Ayala y Carpio s/n, Col. Santo
Tomás. México 11340, D.F. Tel. (52) 5729-6000, Ext. 62305; Fax/Tel: (52) 5341-2335; E-mail: tgallard@bios.encb.ipn.mx
2 Departamento de Ingeniería Bioquímica, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas (ENCB-IPN)
Recibido el 8 de febrero del 2002; aceptado el 20 de junio del 2002
Resumen. En este trabajo se preparó una arcilla pilarizada de alu-
minio (Al-PILC) a partir de una arcilla natural mexicana. Estas
fueron caracterizadas por análisis químico, termogravimétrico y
difracción de rayos X, los cuales dieron evidencia del proceso de pi-
larización. El efecto de la temperatura de fijación del pilar en la ad-
sorción de vapor de agua de la Al-PILC se evaluó por medio de las
isotermas de adsorción a 23 °C. Las temperaturas de fijación del pilar
utilizadas fueron 200, 300, 500 y 900 ºC. Los resultados indicaron
que la mayor adsorción de vapor de agua se obtuvo a una temperatura
de fijación de 200 ºC, diminuyendo con el aumento en la temperatura
de fijación del pilar. Se aplicaron los modelos de GAB (Guggenheim,
Anderson & Boer) y HJ (Harkins & Jura) a las isotermas de la Al-
PILC, encontrando que el modelo de GAB se ajusta en todo el inter-
valo de humedades relativas, por lo que se recomienda su aplicación
para este tipo de materiales adsorbentes inorgánicos.
Palabras clave: Arcilla pilarizada, adsorción de vapor de agua, iso-
termas de sorción de PILCs, modelos de isotermas.
Introducción
Las arcillas son hidrosilicatos con estructuras laminares con
átomos ordenados en grupos de planos paralelos y unidos
fuertemente entre sí en forma de láminas. Dentro del espacio
interlaminar se encuentran cationes como Ca 2+, Na +, Mg2+ y
K + entre otros, susceptibles al intercambio catiónico [1]. Esta
propiedad se puede aprovechar para modificar la naturaleza de
su espacio interlaminar, lo que ha permitido preparar arcillas
pilarizadas o PILC (Pillared Interlayer Clay) [2]. Estos mate-
riales se preparan a partir de arcillas tipo esmectita, modifi-
cadas por la intercalación de polímeros inorgánicos que, por
un tratamiento térmico, forman una galería de “pilares” entre
las laminillas estructurales de la arcilla. Como resultado se ob-
tiene un material arcilloso poroso de una gran superficie
específica [3]. El interés por estos materiales ha crecido
enormemente desde su introducción, habiéndose preparado
PILC’s a partir de polihidroxicationes de Zr, Fe, Ni, Cu, Cr, y
Al [4], [5]. Las PILC’s así obtenidas presentan diferentes ca-
racterísticas de superficie específica, tamaño de poro y ter-
moestabilidad, dependiendo de la naturaleza del polihidroxi-
catión intercalado [6]. Las PILC’s de aluminio presentan una
notable termoestabilidad y diámetro de poro del mismo orden
Abstract. An aluminium pillared clay (Al-PILC) was prepared from
a Mexican natural clay. Both clays were characterized by chemical
analysis, thermogravimetric analysis and X-ray powder diffraction,
giving evidence of the intercalation of the aluminium pillars in the
interlayer space of the clay. The effect of the fixing pillar temperature
(200, 300, 500 and 900 °C) on the water vapor adsorption capacity of
the Al-PILC was studied comparing their water vapor adsorption
isotherms at 23 ºC. The Al-PILC prepared at a fixing pillar tempera-
ture of 200 °C showed the highest water vapor adsorption capacity.
This capacity decreased as the fixing pillar temperature increased.
The GAB (Guggenheim, Anderson & Boer) and HJ (Harkins & Jura)
isotherm models were applied to the experimental data, obtaining that
the GAB model described them in the whole relative humidity range
and therefore its use is recommended for inorganic adsorbents.
Keywords: Pillared clays, water vapor adsorption capacity, PILCs
sorption isotherms, isotherms models.
que las obtenidas con otros polihidroxicationes. Estas propie-
dades les confiere un gran atractivo para ser utilizadas como
catalizadores en la industria del petróleo [7]. Dadas las carac-
terísticas de termoestabilidad, tamaño de poro y superficie
específica, las Al-PILC tienen gran potencialidad de ser
empleadas como adsorbentes en otras aplicaciones [8]. Con
base en lo anterior, se planteó en el presente trabajo el estudio
de la capacidad de este material de adsorber vapor de agua
para su eventual utilización como material desecante. Con este
fin, se preparó y caracterizó una arcilla pilarizada de aluminio
y se estudio su capacidad de adsorción de vapor de agua a
diferentes temperaturas de fijación del pilar. Además, debido a
su naturaleza porosa, se aplicaron los modelos matemáticos de
GAB y Harkins & Jura a las isotermas de sorción para selec-
cionar aquel que mejor representara el fenómeno.
Materiales y métodos
Arcilla original y modificada. La arcilla original utilizada en
este trabajo fue una bentonita proporcionada por la Industria
Inertes y Filtrantes de la Ciudad de México, la cual se tamizó a
través de una malla No. 65 (diámetro 0.210 mm).
Preparación, caracterización y efecto de la temperatura de fijación del pilar en la adsorción...
La arcilla pilarizada de aluminio (Al-PILC) se preparó si-
guiendo el método de Torkaz y Shabtai [4] que consistió en
poner en contacto una solución del agente pilarizante con la
arcilla natural en una relación equivalente a 3 mmoles Al / g
de arcilla, en agitación constante durante 15 h. Posteriormente
se filtró la arcilla y se lavó con agua desionizada hasta prueba
negativa de cloruros. La fijación del pilar se realizó tratando
las muestras durante 24 h a las temperaturas de 200, 300, 500
y 900 °C. El agente pilarizante se preparó adicionando lenta-
mente una solución de hidróxido de sodio 0.2 N a una solu-
ción 0.2 N de Al(OH)3 .6H2 O hasta obtener un pH de 4.35 que
corresponde a una relación OH / Al de 1.85. Esta solución se
mantuvo en reflujo durante 6 h.
Caracterización de las arcillas. La caracterización de la
arcilla natural y pilarizada se llevó a cabo por análisis quími-
co, termogravimetría y difracción de rayos X.
El análisis químico se realizó utilizando la técnica de
fusión con una mezcla de carbonatos de sodio-potasio, deter-
minando la composición química de las arcillas por espectros-
copía de absorción atómica y gravimetría [9].
El análisis termogravimétrico (TG) y termogravimétrico
diferencial (DTG) de las arcillas se realizó en un Termoana-
lizador AT Modelo 1090 en el intervalo de temperatura de 25-
900 °C a una velocidad de 10 °C / min. Para obtener eviden-
cias de pilarización [10], se calcularon, a partir de los termo-
gramas, las pérdidas de peso en tres intervalos de temperatura:
a) 25-200, b) 200-500 y c) 500-900 °C.
Los difractogramas de rayos X se obtuvieron en un di-
fractómetro Siemmens D-500 con filtro de niquel y radiación
de Cu Kα operado a 30 kV y 20 mA. Los valores de la
primera reflexión d(001) determinados mediante la ecuación
de Bragg fueron utilizados para calcular la distancia interlami-
nar de las arcillas (∆d), restando al valor d(001) el espesor de
las láminas de silicato (9.5 Å) [11].
Superficie específica. La evaluación de la superficie específi-
ca de las arcillas, se llevó a cabo analizando por el modelo de
BET las isotermas de N2 obtenidas a –196 ºC mediante un
analizador automático C.I. Electronics LTD Mark 2.
Adsorción de vapor de agua. El estudio de la adsorción de
vapor de agua se realizó determinando las isotermas de sor-
ción de las muestras, por el método de la cámara de equilibrio
a humedad relativa (H.R) constante [12]. El método consiste
en colocar una pequeña muestra de material en una cámara a
humedad relativa constante, dejando que se logre el equilibrio
y determinando el contenido de humedad adsorbida por
gravimetría. La H.R se controló con soluciones de ácido
sulfúrico a diferentes concentraciones [13] verificándola con
un higrómetro digital Cole Parmer 37950-00. El efecto de la
temperatura de fijación del pilar sobre la adsorción de vapor
de agua de la Al-PILC se obtuvo determinando la isoterma de
adsorción de cada una de las arcillas preparadas a las dife-
rentes temperaturas de fijación (200, 300, 500 y 900 ºC).
141
Resultados y discusión
Caracterización de la arcilla original y pilarizada (Al-
PILC). En la Tabla 1 se presentan los resultados del análisis
químico en % base seca, de la arcilla original y la arcilla pila-
rizada de aluminio (Al-PILC), así como la composición calcu-
lada de esta última en base a 100 g de arcilla original (SiO2
constante). Estos resultados indican que para una base de SiO2
constante, la cantidad de aluminio en la Al-PILC, aumentó de
20.1 a 31.8 g (58 % de aumento), mientras que la cantidad de
Fe, Ca, Mg, Na y K disminuyeron, lo que indica que el poli-
hidroxicatión de aluminio se introdujo en el espacio interlami-
nar a expensas de los cationes intercambiables, lo cual es evi-
dencia del proceso de pilarización.
Los termogramas TG y DTG de la arcilla original y pila-
rizada se presentan en la Fig. 1, dividiendo los termogramas
en tres etapas. Las pérdidas de peso correspondientes a cada
etapa, se presentan en la Tabla 2. La pérdida de peso obtenido
en la primera etapa (25-200 °C) corresponde a la eliminación
de agua adsorbida entre las láminas para ambas arcillas. Se
observa una mayor pérdida de peso para la Al-PILC debido a
la mayor cantidad de agua adsorbida por la presencia de los
OH de los pilares intercalados en el espacio interlaminar. La
pérdida de peso en la segunda etapa (200-500 °C), está rela-
cionada con la remoción de grupos hidroxilo de los extremos
de las láminas de la arcilla original y de los pilares en el caso
de la Al-PILC, por lo que, en esta última, nuevamente la pér-
dida de peso fue mayor que en la arcilla original, debido al
número de grupos hidroxilo introducidos en el espacio inter-
laminar durante la pilarizacion de la arcilla. Finalmente, la
pérdida de peso en la tercera etapa (500-900 °C) para la arcilla
original, corresponde a la deshidroxilación estructural interna
de las láminas arcillosas que es caracterizada por el pico
endotérmico en la gráfica DTG alrededor de los 660 °C. En
esta etapa la Al-PILC presentó una pérdida de peso conside-
rablemente mayor (Tabla 2) que la de la arcilla natural. La
desaparición del pico endotérmico de la Al-PILC en el DTG,
puede indicar que en esta última se establecieron nuevos tipos
de enlaces químicos entre los pilares y las láminas de la arci-
lla. El perfil general de las curvas TG y DTG, concuerdan con
lo reportado por Occelli [5] para una arcilla pilarizada de alu-
minio en comparación con la bentonita original.
La Fig. 2 muestra los difractogramas obtenidos para la
arcilla natural y para la Al-PILC a una temperatura de fijación
del pilar de 200 °C. En esta figura se puede observar el
desplazamiento del ángulo de la primera reflexión d(001) a
valores menores de 2θ, ocasionado por la expansión del espa-
cio interlaminar de la arcilla por el proceso de pilarización. En
la Tabla 3 se presenta el efecto de la temperatura de fijación
del pilar sobre la primera reflexión d(001) y la distancia inter-
laminar ∆d. En esta tabla se puede observar que la distancia
interlaminar en la PILC preparada a una temperatura de
fijación de 200 °C y 300 °C, presenta la máxima distancia
interlaminar, mientras que a temperaturas mayores de fijación
(500-900 °C), la distancia interlaminar disminuye, debido a
que se va perdiendo la estructura pilarizada. En virtud de la
142 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Socorro López et al.

Tabla 1. Análisis químico de la arcilla y AI-PILC.

105

100 OXIDO ARCILLA Al-PILC % en peso

TG
% en peso base: 100 g Al-PILC base: 100g
Peso (%)

95 arcilla original
90
SiO2 70.3 65.5 70.3
85 Al 2O3 20.1 29.6 31.8
I II III
Fe 2O3 2.5 1.5 1.6
80
0 200 400 600 800 1000
CaO 1.8 0.2 0.2
Temperatura (°C) MgO 2.8 1.9 2.0
Na 2O 2.0 1.0 1.1
0 200 400 600 800 1000 K2O 1.0 0.6 0.6
0

-0.02 Tabla 2. Análisis termogravimétrico. Pérdida de peso (%).

-0.04
DTG MUESTRA ETAPA 1 ETAPA 2 ETAPA 3
-0.06
25-200 ºC 200-500 ºC 500-900 ºC
-dW/dT

-0.08

-0.1
Arcilla 7.214% 0.66 % 0.6825 %
Al-PILC 10.57% 3.359 % 1.86 %
-0.12

-0.14 I II III
-0.16
Tabla 3. Efecto de la temperatura de fijación del pilar en la distancia
Temperatura (°C)
interlaminar de la AI-PILC.
Fig. 1. Análisis termogravimétrico (TG) y termogravimétrico diferen-
cial (DTG) de la arcilla natural (-------- ) y la Al-PILC ( ). Muestra d(001) Å ∆d Å
Arcilla 14.7 5.2
PILC 200ºC 17.7 8.16
PILC 300ºC 17.7 8.16
PILC 500ºC 16.6 7.15
PILC 900ºC 8.19 ------

Adsorción de vapor de agua. En la Fig. 4 se presentan las

Fig. 2. Difractogramas de rayos X de arcilla natural mexicana y de la
Al-PILC (temperatura de fijación del pilar 200 °C).
destrucción estructural de la muestra, la distancia interlaminar
a 900 °C no pudo ser determinada.
Superficie específica. La Fig. 3 muestra las isotermas de
adsorción desorción de N2 de la arcilla natural y Al-PILC
empleadas para obtener la superficie específica aplicando el
modelo de BET. La superficie específica obtenida para la
arcilla natural fue de 74.8 m2 / g mientras que para la Al-PILC
fue de 240.3 m2 / g. El aumento de la superficie específica en
la Al-PILC (equivalente a 321.3 %) es debido a la exposición
de las regiones internas de la arcilla y de las superficies de los
pilares intercalados [4, 7].
isotermas de adsorción para vapor de agua de las muestras Al-
PILCs preparadas a distintas temperaturas de fijación del
pilar. Se observa de esta figura, que la Al-PILC preparada a la
temperatura de fijación de 200 °C presentó la mayor capaci-
dad de adsorción de vapor de agua y que al aumentar la tem-
peratura de fijación, la capacidad de adsorción disminuye,
perdiéndose por completo a la temperatura de fijación de 900
°C. Este efecto es debido a la pérdida paulatina de la estruc-
tura del pilar en la Al-PILC al ser tratada a temperaturas cada
vez mayores. Si se observan los resultados del espaciamiento
interlaminar y del análisis termogravimétrico de la Al-PILC
(Tablas 2 y 3), se puede inferir que a temperaturas de fijación
del pilar por arriba de 200 °C, la estructura de los pilares cam-
bia debido al proceso de deshidroxilación, llegando a la des-
trucción total de la estructura a la temperatura de 900 °C.
Tradicionalmente las isotermas de adsorción de diversos
materiales adsorbentes, se han analizado utilizando los mode-
los de adsorción propuestos por Langmuir y Brunauer Emmett
y Teller ó BET [16], [17]. Inclusive, las isotermas de adsor-
ción de nitrogeno de arcillas y arcillas pilarizadas se analizan
con el modelo de BET [15]. Sin embargo, si se observan las
isotermas de adsorción de vapor de agua para la Al-PILC a las
temperaturas de fijación de 200-500 °C (Fig. 4), estas presen-
tan una forma inusual para sólidos microporosos que no se
ajustan a los modelos antes mencionados. Un modelo que ha
resultado ser muy exitoso para describir las isotermas de
Preparación, caracterización y efecto de la temperatura de fijación del pilar en la adsorción...
Fig. 3. Isotermas de adsorción (A) y de desorción (B) de nitrógeno,
de la arcilla natural y de la Al-PILC.
adsorción de vapor de agua de polvos alimenticios que son
descritos principalmente por isotermas del tipo II es la isoter-
ma de Gugenheim-Anderson-Boer (GAB) [18]. Este modelo
cubre el intervalo de H.R de 0.0-0.9 que incluye la zona de
condensación capilar. Las isotermas de la Fig. 4 se parecen a
aquellas de varios productos alimenticios, por lo que el mode-
lo de GAB se aplicó a las isotermas de vapor de agua de estos
materiales arcillosos. Otro modelo aplicable a materiales
porosos en el intervalo de humedades relativas de 0.3-1.0 que
cubre condensación capilar, es el de Harkins y Jura (HJ) [19],
el cual también se aplicó a las isotermas de la Fig. 4 para
tratar de describirlas.
La Fig. 5 presenta las isoterma a 23 °C de la Al-PILC
(temperatura de fijación de 200 °C) y las correspondientes
isotermas de GAB y HJ, como ejemplo de los resultados
obtenidos con las demás isotermas (300-500 °C tempratura de
fijación del pilar). Esta figura indica que el modelo de GAB
representa adecuadamente la isoterma de adsorción de la Al-
PILC en prácticamente todo el intervalo de H.R., mientras que
HJ se desvía a valores superiores de 0.8 para la Al-PILC. Co-
mo ambos modelos cubre la zona de condensación capilar, los
resultados mostrados en la Fig. 5 indican que aparentemente a
altos valores de H.R en los sólidos estudiados, se presenta
condensación capilar, lo cual deberá ser corroborado en traba-
jos futuros.
0.25
0.2
X
200°C
0.15 300°C
500°C
0.1
900°C
0.05
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 Ed. Pergamon Press, New York, 1981.
H.R.
Fig. 4. Efecto de la temperatura de fijación del pilar en la adsorción
de vapor de agua de la Al-PILC a 23 ºC. X-gramos de agua / gramos
de sólido seco, H.R.-humedad relativa.
143
0.5
0.4
X
0.3
0.2
0.1
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
H.R
Fig. 5. Isotermas de adsorción de vapor de agua de la Al-PILC: datos
experimentales (♦); modelo de Harkins y Jura (--------) y modelo de
GAB ( ). X-gramos adsorbidos de agua/g de sólido seco, H.R. -
Humedad relativa.
Conclusiones
El análisis químico y termogravimétrico, comprobaron la
pilarización con el polihidroxicatión de aluminio de la arcilla
natural utilizada. La difracción de Rayos X permitió compro-
bar que a consecuencia del proceso de pilarización, se presen-
tó una expansión de la distancia interlaminar, de 5.2 Å para la
arcilla original a 8.16 Å para la Al-PILC.
Con el proceso de pilarización en la arcilla natural se
logró un incremento del 321.3 % del área específica (arcilla
natural: 74.8 m 2 / g; Al-PILC: 240.3 m2 / g).
La adsorción de vapor de agua en la Al-PILC diminuyó al
incrementar la temperatura de fijación del pilar por arriba de
200 °C debido a la deshidroxilación de los pilares.
Las isotermas experimentales de la Al-PILC se ajustaron
al modelo de GAB en todo el intervalo de H.R. empleado, lo
que hace recomendable su uso no solo en materiales alimenti-
cios como ha sido utilizado sino también en materiales adsor-
bentes inorgánicos.
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 145-158
Investigación
A comparative ab initio Study of the Isomerizations and Hydrolyses
of neutral and anionic M-Pyrophosphate Complexes, with M = Ca, Zn
William J. McCarthy, 1 Ludwik Adamowicz,2 Humberto Saint-Martin3* and Iván Ortega-Blake3
1 Biotechnology Center, Utah State University, Logan, Utah 84332, U.S.A.
2 Department of Chemistry, University of Arizona, Tucson, Arizona 85721, U.S.A.
3 Centro de Ciencias Físicas, Universidad Nacional Autónoma de México, Apartado Postal 48-3, Cuernavaca, Morelos 62251,
México. E-mail: humberto@fis.unam.mx
Recibido el 15 de febrero del 2002; aceptado el 25 de junio del 2002
Abstract. In this work ab initio calculations were performed on
anhydrous and monohydrated gas-phase calcium and zinc dications
chelated with various anionic pyrophosphate species: H 2P2O72 –,
HP2O73– and P2O74–. The cleavage of the M-pyrophosphate into a me-
taphosphate and an orthophosphate coordinated by the dication was
also investigated. The studied isomerization reactions were [M ·
HNP2O7](2-N)– → [HN PO4·M·PO3](2-N)– where N = 0, 1, 2, and M = Ca,
Zn. These reactions were also studied in the presence of one water
molecule and also with a continuum model to mimic the solvation
effects. It was found that the interaction with a water molecule stabi-
lizes the pyrophosphates relative to their metaphosphate isomers.
Moreover, upon interacting with the dianionic complexes, the water
molecule readily breaks and produces a hydroxide anion: H2O + [M ·
P2O7]2– → [HO · M · HP2O7]2–. The latter dianionic complexes result-
ed virtually isoenergetic with the hydrolyzed [M · (HPO4)2]2– com-
plexes. The results were compared to previous data of magnesium-
containing complexes. This comparative analysis shows that the dif-
ferences in the structures imposed by the various cations may play an
important role in the allosteric transformations of the substrate, that
ultimately promote the hydrolysis. Though not conclusive, evidence
was found that Zn2+ has a similar oxidizing power on M-pyrophos-
phates as Mg2+, whereas the oxidizing power of Ca2+ is significantly
lower. Nevertheless, the electronic density on the M-pyrophosphates
and on the M-phosphates turned out to be very similar for the three
cations, and thus the main difference in their biochemical role when
interacting with phosphates stems from their different coordination
properties, that could even lead to the presence of a hydroxide anion
in the first hydration shells of Mg- and Zn-pyrophosphates.
Keywords: Pyrophosphate hydrolysis, metal cations, nucleophilic
substitution, coordination properties, ab initio calculations.
Introduction
The concepts of supramolecular chemistry [1] are based on the
existence of oligomolecular supermolecules; arrays of compo-
nents held together by intermolecular forces. These concepts
lead to consider the relevance of non-covalent interactions,
such as the coordination properties of metal cations, in proce-
sses of molecular recognition. As it would be expected, exam-
ples of this type of chemistry appear in biochemistry; for
instance, in aqueous solution, the forces acting between mole-
cules vary from weak Van der Waals interactions to intermole-
cular interactions that can hold together assemblies of mole-
Resumen. En este trabajo se realizaron cálculos ab initio de los dica-
tiones calcio y zinc quelados con varias especies aniónicas de piro-
fosfato, en la fase gaseosa, anhidros y monohidratados: H2P2O72–,
HP2O73– y P2O74–. También se investigó la separación del M-pirofos-
fato en un metafosfato y un ortofosfato coordinados por el dicatión.
Se estudiaron las reacciones de isomerización [M · HN P2O7](2-N)– →
[HNPO4·M·PO3](2-N)– con N = 0, 1, 2, y M = Ca, Zn. Estas reacciones
también se estudiaron en presencia de una molécula de agua y tam-
bién con un modelo continuo para simular los efectos de solvatación.
Se encontró que la interacción con una molécula de agua estabiliza
los pirofosfatos en relación a sus isómeros con metafosfatos.
Además, al interactuar con los complejos dianiónicos, la molécula de
agua rápidamente se rompe y produce un anión oxidrilo H2O + [M ·
P2O7]2– → [HO · M · HP2O7]2–. Estos últimos complejos dianiónicos
resultaron virtualmente isoenergéticos con los complejos hidrolizados
[M · (HPO 4)2]2–. Se compararon los resultados con datos previos de
complejos con magnesio. Este análisis comparativo muestra que las
diferencias en las estructuras impuestas por los diversos cationes
puede jugar un papel importante en las transformaciones alostéricas
del sustrato, que finalmente promueven la hidrólisis. Aunque no con-
cluyente, se encontró evidencia de que Zn2+ tiene sobre los M-piro-
fosfatos un poder oxidativo similar al de Mg2+, en tanto que el poder
oxidativo de Ca 2+ es significativamente menor. Sin embargo, la den-
sidad electrónica en los M-pirofosfatos y en los M-fosfatos resultó ser
muy similar para los tres cationes, y entonces la diferencia principal
en sus papeles bioquímicos cuando interactúan con fosfatos proviene
de sus diferentes propiedades de coordinación, que incluso podrían
llevar a la presencia de un anión oxhidrilo en las primeras capas de
hidratación de Mg- y Zn-pirofosfatos.
Palabras clave: hidrólisis de pirofosfato, cationes metálicos, sustitu-
ción nucleofílica, propiedades de coordinación, cálculos ab initio.
cules. Examples of the latter are the hydrogen bond and the
coordination properties of ions. The relevance of this type of
interaction to the hydrolysis of pyrophosphate was realized
three decades ago, when George et al. [2] proposed that the
free energy of the reaction in solution was due to the diffe-
rence in hydration energies between reactants and products.
Both experimental [3, 4] and theoretical [5-8] studies have
been performed to obtain estimates of the hydration energies
of pyrophosphate and orthophosphate.
More recent experimental studies [9-13] concluded that
the true substrate for pyrophosphatases is the dianionic com-
plex [Mg · P2 O 7] 2- . However, structural data from high reso-
146 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
lution X-ray experiments [14] show the presence of four metal
cations in the active site of the pyrophosphatase from the bud-
ding yeast Saccharomyces cerevisiae, leading to propose that
the true substrate is the neutral complex [Mg2 · P2 O 7 ]. This
latter species is unlikely to exist in solution under physiologi-
cal conditions [15], so the question arises of how it can be
formed within the active site. At any rate, the species to be
studied should be the complexes coordinated by a metal ca-
tion. Thus, to answer the question of why Nature chose phos-
phates for biochemical transformations [16], the coordination
properties of the metal cation have to be taken into account.
For instance, the experimental characterization of the mem-
brane-bound pyrophosphatase of Rhodospirillum rubrum
showed that it can utilize zinc complexes as substrates for the
hydrolysis of pyrophosphates, with a slightly smaller efficien-
cy, and a distinctly different concentration dependent kinetics,
than those for magnesium containing complexes, whereas it
cannot utilize calcium complexes for the same purpose [9,
15]. It is also known that the interaction of zinc ions with
CaMgP 2O 7 granules from cells of the snail Helix aspersa faci-
litates the hydrolysis of pyrophosphate to orthophosphate
[17].
Moreover, the ubiquity of phosphoryl transfer reactions in
biochemistry poses the question of whether or not there is a
general mechanism. The potential transition state structures
range from totally dissociative, with an isolated metaphospha-
te intermediate, to totally associative, with a pentacoordinated
phosphorus, depending on the electronic distibution. From an
analysis of the changes in charge in the hydrolysis of GTP,
derived from linear free energy relationships [18], it was con-
cluded that the mechanism should be dissociative [19]. In the
case of ATP, the oxygen that bridges the ß- with the γ−phos-
phates is expected to be the atom that develops the largest
change of charge upon the transition state [20]. However,
from the locations of the arginines obtained from the crystal
structure of the UMP / CMP kinase from Dictyostelium dis-
coideum [21], it was concluded that during the reaction nega-
tive charges are formed at the transferred phosphoryl group,
but not at the phosphate bridging oxygen, and that this is con-
sistent with an associative mechanism. More recent studies
[22, 23] emphasize the importance of hydrogen bonding [22]
and of the stabilization of the charges on the pyrophosphate
oxygens [23] in the formation of the substrate-enzyme com-
plexes, that suggest an associative mechanism with an “explo-
ded”' transition state where the bond to the pyrophosphate
leaving group is nearly broken and the bond with the incom-
ing nucleophile is barely formed. Thus, qualitatively the me-
chanism is intermediate between associative and dissociative
[20].
The theoretical attempts to elucidate the mechanism for
the hydrolysis of pyrophosphates started with ab initio calcu-
lations of equilibrium structures [5, 24-26], and continued
with the evaluation of electrostatic effects [7, 8], without tak-
ing into account metal dications. More recently, Ma et al. [27]
performed ab initio calculations and found that the asymmetry
of the electrostatic interactions induced by Mg 2+ produced the
William J. McCarthy et al.
elongation of one of the bridging P-O bonds with respect to
the other. This allowed them to propose the isomerization [Mg
· H 2P 2O 7 ] → [H2 PO 4 · Mg · PO3 ] as an intermediate step of
the hydrolysis. Further studies were done to investigate the
applicability of the same mechanism to anionic complexes
[28, 29]. One of these studies [29] has shown that the Mg2+
cation can stabilize the dianionic complex [HO · Mg ·
HP 2O 7 ]2 .
Another study was made to explore the differences bet-
ween complexation to calcium instead of magnesium [30],
where the isomerization reaction enthalpies and energies
resulted significantly higher for the calcium-pyrophosphates
than for their magnesium counterparts, due mainly to a large
positive contribution of correlation energy. It has recently
been shown [31] that this effect is spurious because the lack of
adequate d functions in the basis set used in Ref. [30] makes it
incapable of effectively correlating the 3s and 3p electrons.
Thus, the results that depend on correlation energies have to
be revised. Moreover, though the geometries found in Ref.
[30] were obtained from optimizations at the SCF level of the-
ory, it is also worthwhile to revise the conclusion that the
structural differences between the complexes of calcium and
magnesium are dominated by the inherent coordination pro-
perties of their ions, and that they determine the differences in
the energies of the isomerization reactions. These results sug-
gest that the metallic ion involved plays quite an important
role and, because of its intimate coordination with the
pyrophosphate, this role must be prevalent in the catalytic site.
Furthermore, it is known that the coordination properties of
metallic ions are substantially different for each case and thus
an analysis of the differences arising among a variety of
pyrophosphate species coordinated to metallic cations can
shed light on the mechanism of hydrolysis. Therefore, in this
work we present a comparative study of anhydrous calcium-
and zinc-pyrophosphates in their isomerizations to their me-
taphosphate containing counterparts:
[M · HN P2 O7 ](2 – N )– → [HN PO 4 · M · PO3 ](2 – N )– (1)
where N = 0, 1, 2, and M = Ca, Zn. Then, two approaches are
made to study the effect of the aqueous environment on the
relative stabilities of the structures that were found; first, an
estimate of their solvation free energies by means of the pola-
rizable continuum model of Cossi et al. (PCM [32]), and then
by the interactions of the various complexes with a single
water molecule,
H 2O + [M · H NP 2O 7 ](2 – N) – → [H 2 O · M · H NP2 O 7] (2-N)–
H 2O + [HNPO4 · M · PO 3 ](2 – N) – →
[H 2 O · H NPO4 · M · PO 3] (2 – N)– (2)
Finally, the hydrolyses to M-orthophosphates were also
considered:
H2 O + [M · H 2P 2O 7 ] → [H 2 PO 4 · M · H 2 PO 4]
H2 O + [M · HP2 O7 ] – → [H 2 PO 4 · M · HPO 4 ]–
A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...
H 2O + [M · P 2O 7 ]2– → [HPO4 · M · HPO 4] 2– (3)
The recently designed 6-31+G* basis sets [33, 34] for Ca
and Zn permit a refinement of the results previously found for
Ca-phosphates [30], and a direct comparison with the Mg-
phosphates, with the same accuracy. Thus, we can test the sta-
bility of the hydroxy anionic complexes [HO · Mg · HP 2O 7 ]2–,
and look into various possible routes for the hydrolysis of
pyrophosphates that may explain the selectivity of the enzyme
for Mg.
Computational Details
All electronic energies and harmonic vibrational frequencies
were determined with the use of the GAUSSIAN98 [33] suite
of programs. The standard basis set 6-31+G** was used for all
atoms [34-36].
Geometry optimizations were performed with the SCF
method. The order of these stationary-point structures was
subsequently classified with calculated SCF harmonic fre-
quencies from an analytically determined hessian. Unless oth-
erwise stated, all reported equilibrium geometries correspond
to structures in which the hessian eigenvalues are positive.
Single point energy calculations using Møller-Plesset se-
cond-order perturbation theory (MP2) were then performed on
the SCF-optimized geometries to evaluate electron correlation
contributions to the electronic energy.
The estimates of the energies ∆EeSCF and ∆EeMP2 of the
isomerizations and of the hydrolyses, as well as of the interac-
tions with water, were computed with the SCF optimized
geometries. The calculation of the enthalpies included a term
∆Eth 298 that includes the zero-point energy (ΖPE) and the ther-
mal vibrational energy at T = 298.15 K, both computed with a
harmonic approximation [37]:
∆Hº = ∆EeSCF + ∆Ee MP2 + ∆Eth298 (4)
Fig. 1. Anhydrous [M · HN P2O7](2-N)– complexes: structures 1a and 1b
correspond to N = 2; structure 2 to N = 1, and structures 3a and 3b to
N = 0. The staggered 3a is optimal for M = Zn whereas the eclipsed
3b is optimal for M = Ca; both are isoenergetic for M = Mg.
147
The reference state is at P = 0.1 MPa. The vibrational
entropies were also computed with a harmonic approximation
and a canonical partition function, and summed to the transla-
tional, the rotational and the electronic entropies according to
standard statistical mechanics relationships [37]. The free
energies were computed as the difference:
∆G = ∆H – T ∆S (5)
To study the effect of the aqueous environment on the re-
lative stabilities of the structures that were found, we made an
estimate of their solvation free energies by means of the pola-
rizable continuum model of Cossi et al. (PCM [32]).
An analysis of the charges on the dianionic complexes
was made by means of Mulliken’s population analysis [38]
and of the CHELPG [39] scheme.
Results
In this section, the geometries of the Ca- and Zn-pyrophos-
phates, and the energies of their isomerizations and hydrolyses
will be compared to their magnesium-containing counterparts.
The data for these latter are taken from Ref. [29].
In the discussion of the structures depicted in Figs. 1-5,
we will refer to the leftmost phosphorus with the three non-
bridging oxygens bonded to it and the bridging oxygen as the
orthophosphate moiety, and to the rightmost phosphorus with
its respective three nonbridging oxygens as the metaphosphate
moiety. Also, the abbreviation “M-PPi” will be used for the
metal-pyrophosphate complexes.
Anhydrous isomerizations
M-pyrophosphates
The stationary geometries found for both Zn · H2 P2 O 7 and Ca
· H2 P2 O 7 were the staggered configurations 1a and 1b (Fig. 1)
that correspond to those previously found [29] for Mg ·
H2 P2 O 7. In fact, the complexes with Zn have a very small de-
viation from their Mg-containing counterparts, whereas the
complexes with Ca have Ca · O distances that are consistently
longer than the Mg · O distances by ~ 0.4 Å (Table 1), in full
agreement with the results of Ref. [30].
In the case of Ca, structure 1b has a lower enthalpy (∆Hº
= –20.8 kJ / mol) and a lower free energy (∆Gº = –25.4 kJ /
mol) than 1a, as it happened [29] with Mg. In the case of Zn
the differences are small enough (∆Hº = –1.2 kJ / mol and ∆Gº
= 3.3 kJ / mol) to consider them isoenergetic. The asymmetry
of the electrostatic interactions induced by the cation produces
in both structures the elongation of one bridging P-O bond
with respect to the other; the size of this effect being the same
for the three cations, Mg, Ca and Zn: ∆r = 0.2 Å for 1a, and
∆r = 0.07 Å for 1b (Table 1).
The equilibrium geometries found for the monoanionic
[M · HP2 O7 ] – complexes resulted very similar to their magne-
sium counterpart (structure 2 in Fig. 1). In all cases, the bridg-
148 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) William J. Mc Carthy et al.

Table 1. Geometrical parameters of M-pyrophosphatesa.

Structure Mg Ca Zn Mg Ca Zn Mg Ca Zn
P-O-P r(M-O1) r(O1-P1)
1a 120.6 121.2 121.5 2.998 3.368 2.968 1.544 1.542 1.544
1b 125.5 127.7 127.4 3.039 3.431 3.000 1.585 1.589 1.586
2 126.9 129.5 128.5 2.856 3.222 2.828 1.606 1.607 1.609
3a 139.3 154.9 138.5 2.665 2.468 2.678 1.611 1.649 1.612
3b 130.7 138.8 129.8 2.587 2.781 2.596 1.673 1.667 1.668
7a 119.5 120.9 120.2 3.038 3.383 3.037 1.544 1.541 1.545
7b 124.9 127.9 126.4 3.090 3.468 3.066 1.589 1.596 1.590
8 126.9 129.0 127.5 2.927 3.282 2.918 1.606 1.597 1.606
9a 138.6 153.7 139.3 2.744 2.453 2.744 1.597 1.631 1.601
9b 123.2 126.5 123.7 3.128 3.425 3.130 1.607 1.604 1.605
r(O1-P2) r(M-O2) r(M-O3)
1a 1.743 1.748 1.741 1.939 2.283 1.948 1.925 2.244 1.927
1b 1.660 1.650 1.655 2.009 2.328 2.028 2.013 2.336 2.041
2 1.663 1.663 1.661 1.878 2.203 1.876 1.924 2.236 1.932
3a 1.704 1.712 1.694 1.951 2.317 1.978 1.951 2.314 1.978
3b 1.673 1.667 1.668 2.053 2.340 2.058 2.053 2.340 2.058
7a 1.745 1.752 1.739 1.943 2.306 1.996 1.965 2.266 1.953
7b 1.657 1.640 1.651 2.032 2.343 2.077 2.035 2.365 2.060
8 1.663 1.671 1.660 1.930 2.268 1.946 1.935 2.253 1.936
9a 1.708 1.728 1.695 2.000 2.361 2.035 2.000 2.401 2.037
9b 1.668 1.674 1.670 1.985 2.315 1.992 2.029 2.398 2.171
r(M-O4) r(M-O3)
1a 1.970 2.297 2.008
1b 1.881 2.207 1.875
2 1.963 2.276 2.011
3a 1.840 2.183 1.834
3b 2.053 2.341 2.058 2.053 2.341 2.058
7a 2.017 2.322 2.034 2.031 2.461 2.032
7b 1.911 2.261 1.907 2.024 2.407 2.026
8 1.987 2.294 2.037 2.074 2.447 2.101
9a 1.844 2.194 1.832 2.157 2.550 2.221
9b 2.029 2.341 2.045 1.900 2.201 1.886
a The P-O-P angle is in degrees and the distances in Å. The numbering of atoms corresponds to Figs. 1 and 3.

ing P-O bond of the proton free moiety is longer than the
other, 1.66 Å vs. 1.61 Å, as a result of the asymmetry of the
electrostatic interactions induced by the cation; the six non-
bridging oxygens are in a staggered arrangement as viewed
along an axis connecting the phosphorus atoms; the metal
cation is coordinated to three oxygens. The > P-O-P < angle is
very similar for the three cations, and once again the Ca · O
distances are ~ 0.35 Å longer than for the other two cations
(Table 1).
For the most relevant species in aqueous solution, the
dianionic [M · P2 O7 ]2– complexes, two equilibrium geometries
were determined with the SCF level of theory, one staggered
and one eclipsed (3a and 3b, respectively, Fig. 1). Though
both configurations are very similar to their magnesium-con-
taining counterparts, that are practically isoenergetic [28], in
this case Ca2+ clearly favors the eclipsed configuration by ∆Gº
= –43.3 kJ / mol, in agreement with Ref. [30]; whereas Zn2+
favors the staggered geometry by ∆Gº = –35.4 kJ / mol. In
fact, the eclipsed configuration of [Zn · P 2O 7 ]2– has one imagi-
nary frequency and thus is not a minimum, but a transition
state.
The different relative stabilities of structures 3a and 3b
for the different cations are due to the balance among the
attractive interactions of the cations with the oxygens in the
pyrophosphate, the repulsive interactions of the oxygens and
the strain induced on the structure of the pyrophosphate; thus,
although the arrangement of oxygens in the vicinity of the
cations roughly reproduces their respective coordination pro-
perties, there are some deviations due to the two excess elec-
trons: the distances from the cations to the water molecules in
their respective first hydration shells obtained from numerical
simulations [40, 41] for Ca2+ range from 2.38 Å to 3.13 Å, for
Mg2+ from 1.93 Å to 2.66 Å, and for Zn2+ from 1.82 Å to 2.74
Å. In the staggered configuration 3a, each of the three cations
is surrounded by three oxygens; the oxygen closest to the
cation is at a significantly shorter distance for Ca (2.18 Å) and
A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate... 149

Table 2. Geometrical parameters of M-metaphosphates and M-orthophosphates.a

Structure Mg Ca Zn Mg Ca Zn Mg Ca Zn
r(M-O1) r(M-O2) r(M-O3)
4 2.009 2.343 2.014 2.001 2.360 2.025 2.052 2.400 2.059
5 1.927 2.250 1.940 1.927 2.250 1.940 2.119 2.479 2.152
6a 2.039 2.329 2.053 2.039 2.329 2.053 2.039 2.329 2.069
6b 1.866 2.175 1.876 1.866 2.175 1.876 1.949 2.332 1.947
6c 1.873 2.181 1.884 1.873 2.181 1.884 2.218 2.584 2.278
10a 2.030 2.372 2.039 2.033 2.372 2.046 1.924 2.278 1.920
10b 2.080 2.379 2.080 2.375 2.130 2.481
11 1.949 2.261 1.979 1.938 2.261 1.942 1.970 2.346 1.963
12a 2.112 2.398 2.087 2.035 2.331 2.028 2.112 2.398 2.087
12b 2.011 2.346 2.032 2.018 2.346 2.044 2.036 2.376 2.109
13 2.022 2.360 2.039 2.022 2.377 2.039 2.022 2.360 2.039
14 2.088 2.450 2.117 2.091 2.451 2.120 1.942 2.262 1.955
15 2.008 2.334 2.013 2.008 2.334 2.041 2.008 2.334 2.021
r(M-O4) r(M-O5)
4 2.050 2.401 2.078
5 2.119 2.479 2.152
6a 1.963 2.346 1.961
6c 2.218 2.584 2.283
10a 2.020 2.390 2.048
10b 2.074 2.418 2.057 2.424
11 2.075 2.433 2.140
12a 1.968 2.341 1.942 2.326 2.607 3.530
12b 1.911 2.200 1.896
13 2.022 2.377 2.039
14 1.942 2.262 1.955
15 2.008 2.334 2.022
a Distances in Å. The numbering of atoms corresponds to Figs. 2, 4 and 5.

Table 3. Energies, enthalpies, entropies and solvation energies of the isomerizations of anhydrous M-pyrophosphates a.
Reaction ∆Ee SCF ∆Ee MP2 ∆Eth298 ∆H° ∆S° ∆∆Gsol
M = Ca
1a → 4 –41.2 –3.7 –1.8 –46.7 65.3 127.1
1b → 4 –7.3 –17.3 –1.3 –25.9 49.9 111.0
2→5 –31.1 –6.5 –2.2 –39.8 64.8 148.1
3a → 3b –47.4 –2.3 0.5 –49.2 –19.8 16.3
3a → 6a –26.0 –7.2 –0.3 –33.5 87.6 126.5
3b → 6a 21.4 –4.9 –0.8 15.7 107.4 110.2
3b → 6b 66.3 –2.0 –0.6 63.7 89.7 52.9
3b → 6c 65.3 –7.5 –0.6 57.2 65.1 69.4
M = Zn
1a → 4 –31.0 –9.6 –1.3 –41.9 52.6 104.3
1b → 4 –16.3 –25.8 –1.0 –43.1 37.5 112.1
2→5 6.3 –4.3 –1.9 0.1 59.5 94.7
3a → 3b 39.5 –9.0 –2.8 27.7 –25.7 0.0
3a → 6a 58.2 1.5 –0.9 58.8 73.4 137.7
3a → 6b 29.9 –2.5 –0.3 27.1 67.6 86.9
3a → 6c 62.6 –14.8 –3.1 44.7 25.3 87.3
a All energies and enthalpies in kJ / mol. Entropies are in J / (mol K). The last column has the differences in solvation free energies between reactants and pro-
ducts, computed with PCM [32].
150 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) William J. McCarthy et al.

Poincaré condition is not fulfilled [42] and thus the bond

orders cannot be obtained. Nevertheless, the analysis of the
Mulliken charges suggests that Mg and Zn withdraw a signifi-
cant amount of electronic charge from their surrounding oxy-
gens. A more complete discussion of the charge distribution
will be made in section 3.4.

M-metaphosphate isomers
The anhydrous metaphosphates H2 PO 4 · M · PO 3 (4, Fig. 2)
are also structurally similar to their magnesium counterpart:
the two hydrogens remain attached to the moiety that becomes
the orthophosphate coordinated to the cation by the two pro-
ton-free oxygens; the protons are hydrogen-bonded to the
oxygens of the same moiety. The metaphosphate is also coor-
Fig. 2. Anhydrous putative [HNPO4 · M · PO3](2-N)– intermediates for dinated to the cation by two oxygens so that the metal has four
the hydrolyses of M-PPi complexes. Structure 4 corresponds to N = total ligands in a tetrahedral configuration. As it was the case
2; structure 5 to N = 1, and structures 6a, 6b and 6c to N = 0. 6a and for the M-PPi complexes, the most notable differences among
6b are isoenergetic for M = Mg, whereas the global minimum for M
= Ca is the former, and for M = Zn, the latter. Structure 6c is isoener- Mg-, Ca- and Zn-phosphates are the oxygen-metal bond dis-
getic to 6b for M = Ca, and to 6a for M = Zn. tances, that for Zn are slightly longer than for Mg (between
0.05 Å and 0.10 Å) and shorter than for Ca (Table 2). This
corresponds to the difference in the mean radii of their first
hydration shells [40, 41]. Once again, the structural results of
for Mg (1.84 Å), whereas it remains at “hydration distance” Ref. [30] are reproduced in the present work.
from Zn (1.83 Å). In the eclipsed configuration 3b, each of As it was mentioned in the introduction, the previously
the three cations is surrounded by four oxygens at distances reported [30] free energy of the isomerization 1a → 4 for Ca-
within their first hydration shells: 2.34 Å for Ca, 2.05 Å for pyrophosphate turned out to be largely positive (∆Gº = 106.7
Mg and 2.06 Å for Zn. In the case of Ca, also the bridging kJ / mol), due to spurious effects in the correlation energy. As
oxygen is at “hydration distance” in both configurations: 2.47 expected [31], a well-balanced basis set produces a different
Å in 3a, and 2.78 Å in 3b, so the total coordination numbers value (Table 3); the free energy found in the present work
grow to four and five, respectively. This can explain why the (∆Gº = –66.2 kJ / mol) was very similar to that of Mg-
two structures are stable with Ca, and also their relative stabi- pyrophosphate (∆Gº = –70.4 kJ / mol). The result for the iso-
lities. The fact that the interaction of oxygen with Zn has a
very deep minimum at short distance [41] favors the “tighter”
coordination of 3a over 3b, because in the former it can over-
come the oxygen-oxygen electrostatic repulsion, that the
fourth oxygen makes so strong in 3b as to make it a transition
state. The coordination properties of Mg allow it to stabilize
equally well both structures; though 3b provides a more com-
plete hydration, the oxygen-oxygen repulsion in 3a is more
easily overcome by the interactions with the cation.
As mentioned previously, the two excess electrons make
the difference with respect to simple hydration: as it has been
reported [29], the Mulliken analysis of the charges shows that
there is a significant transfer of charge to the cation; in the
eclipsed configuration the Mulliken charges on Mg and Zn are
very similar, 0.49e and 0.42e, whereas for Ca it is 1.34e, and
in the staggered configuration the values are 0.77e for Mg,
0.61e for Zn and 1.43e for Ca. Though not a definite test,
these results suggest a more marked transfer of charge to Zn, a
very similar effect for Mg, and a less important one for Ca.
The energy gain due to this effect allows the staggered struc-
ture 3a to be stable for both Ca and Mg, in spite of a coordina-
tion that is tighter than in simple hydration. An analysis of the Fig. 3. Monohydrated [H2 O · M · HNP 2O 7] (2 – N)– complexes.
Structures 7a and 7b correspond to N = 2; the latter has a lower ener-
effect of this transfer of charge on the bonds would be in
gy for the three cations. Structure 8 corresponds to N = 1, and struc-
order; unfortunately, because the positions of the ions in the ture 9a to N = 0. The three ions stabilize the hydroxide anion found in
[M · P2 O7 ]2– complexes make ring-like structures, the Hopf- 9b, that has a much lower energy than 9a (Tables 5 and 6).
A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...
merization of Zn-pyrophosphate was ∆Gº = –57.6 kJ / mol
(Table 6). The contribution of solvation energies obtained
with the PCM model made a large difference: the free energy
became largely positive for both Ca- and Zn-pyrophosphates,
whereas it remained negative for Mg-pyrophosphate (Tables 3
and 6).
The isomerization 1b → 4 yields very similar results to
1a → 4, though the estimated effect of the solvent is larger in
the case of Zn-PPi, and smaller in the case of Ca-PPi (Tables
3 and 6).
The isomerization product [HPO4 · M · PO3 ]– is structure
5 (Fig. 2). The behavior of the cation-oxygen distances is the
same as that found for the hydration shells of the metal cations
[40, 41] (Table 2). The calculated free energy of the isomeri-
zation 2 → 5 is largest for the calcium complexes, ∆Gº =
–59.1 kJ / mol, and smallest for the zinc complexes, ∆Gº =
–17.7 kJ / mol (Tables 3 and 6).
Three stationary geometries were found for the dianionic
metaphosphate isomer [PO4 · M · PO3 ] 2– ; we have found it
convenient [29] to label them by the number of oxygens from
the orthophosphate and from the metaphosphate coordinated
to the cation, so the structures are a 3 × 1 (6a, Fig. 2), a 2 × 1
(6b, Fig. 2), and a 2 × 2 (6c, Fig. 2) configurations. Though 6a
and 6c have four oxygens coordinated to the cation, the Zn · O
distances are longer. This results in considerably higher ener-
gies compared to the optimal geometry 6b, ∆Gº = 30 kJ / mol.
Once again, Zn2+ coordination depends more on bringing the
ligands closer than increasing their number in the first shell.
Fig. 4. Monohydrated putative [H2O · HN PO4 · M · PO3](2 – N)– inter-
mediates for the hydrolyses of the M-PPi complexes. Structures 10a
and 10b correspond to N = 2; the latter was not found for M = Zn.
Structure 11 corresponds to N = 1, and structure 12a to N = 0. Once
again, the three ions stabilize the hydroxide anion in 12b, with a
much lower energy than 12a, but still higher than 9b (Tables 5 and
6).
151
The Mulliken charges on Zn show the same oxidizing power
as for the pyrophosphates: 0.99e in 6a, 0.63e in 6b and 0.66e
in 6c. In the case of Ca2+, the 2 × 1 configuration has an ener-
gy similar to the 2 × 2, both being higher than the 3 × 1 by
∆Gº = 40 kJ / mol, and the Mulliken charges are 1.43e in 6a,
1.51e in 6b and 1.54e in 6c. For Mg2+, the 3 × 1 geometry is
virtually isoenergetic to 2 × 1, ∆Gº = 6.4 kJ / mol, and the
Mulliken charges are 1.00e in the former and 0.83e in the lat-
ter. The situation of the metaphosphate isomers is similar to
that for the pyrophosphate complexes: due to their distinctly
different coordination properties, and to their different oxidiz-
ing powers, the three cations favor different geometries; thus
Ca2+ favors more ligands in the first shell, Mg2+ makes the
two configurations isoenergetic, and Zn2+ favors the geometry
that has the oxygens of the first shell closer to the cation. This
repeated pattern can be seen in Tables 1 and 2, where a com-
parison is made of the M · O distances between the various
equilibrium geometries found for all the M-pyrophosphates
and the M-phosphates, where M = Ca, Mg, Zn.
The isomerization 3a → 6b is predicted to be endother-
mic for Zn 2+, ∆Hº = 27 kJ / mol; the change in entropy
accounts for a smaller, but still positive free energy, ∆Gº = 7
kJ / mol (Tables 3 and 6). In the case of Ca2+, the isomeriza-
tion 3b → 6a is also predicted to be endothermic, ∆Hº = 16
kJ/mol, but the change in entropy is large enough to yield a
negative free energy, ∆Gº = –16 kJ / mol. However, the con-
tribution of solvation leads to the same result as for Zn2+, a
largely positive free energy, ∆G aq = 94 kJ / mol, whereas in
the case of Mg 2+ it is this contribution that leads to a negative
free energy of the isomerization 3b → 6b [29].
Isomerizations of monohydrated species
The approximation with a continuum model to account for
hydration effects is obviously too restrictive when looking
into a process where one water molecule gets broken.
Therefore in this section the study is extended to explicitly
include that water molecule.
M-pyrophosphates
The equilibria of structures 1a and 1b with one water mole-
cule produced the stationary configurations 7a and 7b, respec-
tively (Fig. 3). For both cations, the perturbation on the
geometries of the M-pyrophosphates turned out to be rather
small; the difference produced on the bond lengths was of less
than 0.05 Å, and on the bond angles of less than 1º (Table 1).
In structure 7a, the hydrogens of the water molecule point to a
direction away from the pyrophosphate, whereas in 7b one of
them makes a hydrogen-bond with an oxygen of the
metaphosphate moiety. This feature is more pronounced for
the monoanionic structure 8 (Fig. 2), that results from the
interaction of water with structure 2, and even more for the
dianionic species 9a, but in this case the hydrogen-bond is
made with the orthophosphate moiety. In all cases, the interac-
tion with the water molecule is characterized by a largely ne-
gative enthalpy and by a largely negative change in entropy,
152 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) William J. McCarthy et al.

Table 4. Enthalpies, entropies and free energies of the interactions of M-phosphates with one water molecule a.
Reaction ∆H° ∆S° ∆G° ∆∆Gsol ∆Gaq
M = Ca
1a + H2O → 7a –107.3 –126.6 –69.6 57.4 –12.2
1b + H2O → 7b –117.8 –135.1 –77.5 80.8 3.3
2 + H2O → 8 –114.7 –123.7 –77.8 41.3 –36.5
2 + OH – → 9bb –199.6 –119.5 –164.0 153.3 –10.8
3a + H2O → 9a –135.5 –140.0 –93.7 100.2 6.5
3b + H2O → 9bc –330.0 –130.3 –291.2 266.4 –24.8
4 + H2O → 10a –82.2 –131.5 –43.0 23.5 –19.5
4 + H2O → 10b –90.5 –116.5 –55.8 47.4 –8.4
5 + H2O → 11 –72.2 –125.0 –34.9 16.5 –18.4
5 + OH – → 12bb –66.9 –91.3 –39.7 20.6 –19.1
6a + H2O → 12a –130.2 –176.3 –77.6 136.9 59.3
6b + H2O → 12bc –252.7 –144.8 –209.5 171.7 –37.8
M = Zn
1a + H2O → 7a –119.0 –78.3 –95.7 105.8 10.1
1b + H2O → 7b –137.4 –110.8 –104.4 66.0 –38.4
2 + H2O → 8 –97.3 –131.6 –58.1 42.9 –15.2
2 + OH– → 9bb –181.6 –123.7 –144.7 67.0 –77.7
3a + H2O → 9a –100.6 –136.2 –60.0 100.1 40.1
3b + H2O → 9bc –327.3 –125.7 –289.8 215.0 –74.8
4 + H2O → 10a –82.8 –132.8 –43.3 7.5 –35.8
5 + H2O → 11 –72.3 –135.9 –31.8 8.3 –23.5
5 + OH – → 12bb –62.0 –105.2 –30.6 –49.1 –79.7
6b + H2O → 12a –63.6 –159.0 –16.2 100.7 84.5
6b + H2O → 12bc –207.0 –141.0 –165.0 90.5 –74.5
a All energies and enthalpies are in kJ / mol. Entropies are in J / (mol K).
b Interactions of monoanionic M–phosphates with a hydroxide anion.
c In these cases the water molecule releases a proton to the phosphate and the resulting hydroxide remains coordinated by the metal cation. The last two columns

are the differences in solvation free energies between reactants and products, and the free energies in aqueous solution, computed with PCM [32]. The latter was
computed as ∆Gaq = ∆G° + ∆∆Gsol.

the latter coming from the restrictions on the motion of the
water molecule; however, all the free energies still turned out
to be largely negative (Table 4).
The optimal configuration of the monohydrated dianionic
M-pyrophosphates is structure 9b, where the water molecule
was hydrolyzed into a proton that binds to one of the oxygens
of the pyrophosphate, and a hydroxide anion, that gets coordi-
nated by the metal cation. The free energies of the reactions
H 2O + [M · P 2O 7 ]2– → [HO · M · HP2 O 7] 2– , were even larger
than for the simple interactions of the previous paragraph
(Table 4). The resulting M-pyrophosphates have an intramole-
cular hydrogen-bond that contributes to the bending of the >
P-O-P < angle by more than 12º, relative to their anhydrous
counterparts (Table 1). Both 9a and 9b are staggered configu-
rations, showing that in the eclipsed geometry the pyrophos-
phate is subject to a strain, that is released when one of its
oxygens coordinated by the cation can be substituted.
Structure 9b can also be viewed as the monoanionic M-
pyrophosphate 2 interacting with a hydroxide anion [29]. The
interaction energies computed from 2 + OH – → 9b for M =
Ca and Mg are very similar, ∆Gº = –164 kJ / mol vs. ∆Gº =
–162 kJ / mol, whereas for Zn it is somewhat smaller, ∆Gº =
–145 kJ / mol (Table 4).
Hence the inclusion of a water molecule makes no appre-
ciable difference for the neutral and monoanionic species,
whereas for the dianionic cases it readily leads to the water
hydrolysis.
M-metaphosphate isomers
The interaction energies of the neutral M-metaphosphate com-
plexes with one water molecule, 4 + H2O → 10a (Fig. 4),
were large and very similar for the three cations, ∆Gº ≈ –44.0
kJ / mol. However, the structure 10b, that turned out to be
more stable for M = Mg and M = Ca, was not found for M =
Zn. It is worth noticing that in 10a the cation coordinates four
oxygens, whereas in 10b it coordinates five oxygens.
In agreement with previous results [29], the interaction
with one water molecule stabilized the M-pyrophosphates
with respect to the M-metaphosphates (Tables 4, 5 and 6).
This effect was enhanced by the solvation free energies. Thus,
the isomerizations from structures 7a and 7b to structures 10a
and 10b were all predicted as non-spontaneous in aqueous
solution, with the exception of 7a → 10a in the case of zinc,
whose free energy turned out to be ∆G aq = 0.8 kJ / mol.
The interaction of the monoanionic M-metaphosphate
complexes with one water molecule leads to structure 11 (Fig.
A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate... 153

Table 5. Energies, enthalpies, entropies and solvation energies of the isomerizations of monohydrated M-pyrophosphates a.
Reaction ∆Ee SCF ∆Ee MP2 Eth298 ∆H° ∆S° ∆∆Gsol
M = Ca
7a → 10a –21.9 –1.5 1.7 –21.7 60.4 93.2
7b → 10a 22.3 –11.2 –1.5 9.6 53.5 53.7
7a → 10b –24.9 –6.0 1.1 –29.8 75.4 117.1
7b → 10b 19.3 –15.8 –2.1 1.4 68.5 77.6
8 → 11 2.8 1.6 –1.6 2.8 63.5 94.3
9a → 9b –272.8 31.2 –2.1 –243.7 –10.0 146.4
9a → 12a –23.0 –5.5 0.2 –28.3 51.4 127.1
9b → 12b 96.6 –0.6 –2.9 93.1 92.9 15.5
M = Zn
7a → 10a –3.3 –2.7 0.3 –5.7 –1.8 6.0
7b → 10a 25.0 –13.6 0.0 11.6 15.5 53.6
8 → 11 18.4 8.2 –1.6 25.0 55.3 60.1
9a → 9b –229.0 32.5 –2.5 –199.0 –15.2 114.9
9a → 12a 62.9 5.4 –4.2 64.1 44.9 87.5
9b → 12b 122.0 0.0 –2.3 119.7 78.0 –21.4
a Allenergies and enthalpies are in kJ / mol. Entropies are in J / (mol K). The last column has the differences in solvation free energies between reactants and
products, computed with PCM [32].

Table 6. Comparison of the isomerizations free energies of M-

pyrophosphates a .
Reaction ∆G° ∆Gaq
Mg Ca Zn Mg Ca Zn
1a → 4 –70.4 –66.2 –57.6 –18.1 60.9 46.7
1b → 4 –64.1 –40.8 –54.3 2.5 70.2 57.8
2→5 –39.6 –59.1 –17.7 –8.1 89.0 77.0
3a → 6b 1.1 –6.4 6.9 12.4 62.8 93.8
3b → 6a 8.8 –16.3 1.5 23.2 93.9 139.2
7a → 10a –10.0 –39.7 –5.2 36.4 53.5 0.8
7a → 10b –17.1 –52.3 22.7 64.8
7b → 10a 3.9 –6.4 6.8 44.9 47.3 60.4
7b → 10b –3.1 –19.0 31.3 58.6
8 → 11 –4.9 –16.1 8.5 22.5 78.2 68.6 Fig. 5. Hydrolyzed M-orthophosphates. Structure 13 corresponds to
9a → 9b –213.3 –240.7 –194.5 –117.5 –94.3 –79.6 the neutral [H2PO4 · M · H2PO4] complex; structure 14 to the [H2PO4 ·
9a → 12a 12.6 –43.6 50.7 82.0 83.5 138.2 M · HPO4]– complex, and structure 15 to the [HPO 4 · M · HPO4]2–
9b → 12b 82.9 65.4 96.4 83.6 81.0 75.0 complex. This latter turned out to be isoenergetic to 9b, but when sol-
vation is taken into account the hydrolyses 9b → 15 are predicted to
a Allenergies are in kJ / mol. The free energy in aqueous solution was com- be spontaneous (Table 8).
puted as ∆Gaq = ∆G° + ∆∆Gsol.

4), and in all cases it is weaker than the interaction of the M-
pyrophosphates. The interaction with water stabilizes the M-
pyrophosphates to such an extent that the isomerization 8 →
11 becomes endothermic and non-spontaneous for M = Zn
(Tables 4, 5 and 6). The estimates of the solvation free ener-
gies produce the same result, the stabilization of M-pyrophos-
phates.
As it occurred with the anionic M-pyrophosphates, the
interaction of structures 6a and 6b with a water molecule led
to a stationary state with a water molecule, 12a, and a very
stable configuration with a hydroxide anion, 12b (Fig. 4),
even considering the free energies of solvation. The isomeri-
zation 9b → 12b turned out to be endothermic and non-spon-
taneous in all cases, whereas the isomerization 9a → 12a
turned out to be exothermic and spontaneous for M = Ca.
However, the free energy of solvation shifted towards non-
spontaneity in all cases (Tables 4, 5 and 6).
It is worth noticing the relatively large contribution of the
entropy to the estimates of the isomerization free energies.
The data presented in Tables 3, 4 and 5 were obtained from
standard statistical mechanics [37] applied to the harmonic
frequencies computed from second derivatives of the energies.
Typically, a scaling factor of 0.9 is applied to the theoretical
SCF frequencies [37]. This scaling would affect the thermal
energy ∆Eth298 and the vibrational contribution to the entropy,
that are a small percentage of the total enthalpy and entropy;
154 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Fig. 6. Schematic comparison of the relative free energies ∆Gº (in kJ
/ mol, vertical axis) for the stationary states found in this work,
referred to structures 1a, 2 and 3a in each case. From top to bottom,
the neutral, monoanionic and dianionic complexes. From left to right,
M = Ca, M = Mg and M = Zn. The lines drawn as a reference corres-
pond to the reactions in Tables 4, 6 and 8.
Fig. 7. Schematic comparison of the relative free energies in aqueous
solution ∆Gaq (in kJ / mol, vertical axis) for the stationary states
found in this work, referred to structures 1a, 2 and 3a in each case.
They were computed as ∆Gaq = ∆Gº + ∆∆Gsol , the latter term
obtained with PCM [32]. From top to bottom, the neutral, monoan-
ionic and dianionic complexes. From left to right, M = Ca, M = Mg
and M = Zn. The lines drawn as a reference correspond to the reac-
tions in Tables 4, 6 and 8.
William J. McCarthy et al.
nevertheless, to assess a quantitative estimate of the accuracy
of our calculations, we computed the vibrational contributions
with scaling factors of 0.9 and 1.1 on the frequencies. The
total effect on the free energies is less than ±5 kJ / mol in all
cases. Therefore, the qualitative conclusions for the isomeriza-
tions are not modified, exception made of the reaction 9a →
12b for Zn2+ , that has a value in the limits of accuracy of this
study, ∆G aq = –4.6 kJ / mol, and thus could be reversible. At
any rate, this is still in agreement with the experimental obser-
vation that Zn-pyrophosphate can be used as substrate by
pyrophosphatases.
Hydrolysis reactions
The optimal geometry found for the product H2 PO 4 · M ·
H2 PO 4 (structure 13, Fig. 5) has the metal cation aligned with
the phosphorus atoms and coordinating four oxygens, two
from each phosphate, forming two O-M-O orthogonal planes,
quite similar to structure 4. The Zn · O distances are only 0.02
Å longer than the Mg · O, whereas the Ca · O distances are
0.34 Å longer. The hydrolysis 7a → 13 was predicted to be
both exothermic and spontaneous (Tables 7 and 8), with very
similar free energies for Mg and Zn complexes. The effect of
solvation in Zn-PPi is opposite to Mg-PPi and Ca-PPi, for it
enhances the hydrolysis. The reaction 7b → 13 was also pre-
dicted to be both exothermic and spontaneous (Tables 7 and
8), with very similar free energies for the three cations. The
effect of solvation is most marked for Zn-pyrophosphate, so
the predicted free energy in aqueous solution is 72 % of the
value for Mg-pyrophosphate.
The optimized geometry of the [H 2 PO 4 · M · HPO 4 ] –
complexes is structure 14 (Fig. 4) and has the same features as
structure 13. The hydrolysis 8 → 14 reproduces the trend of
the isomerization 2 → 5, with a largest free energy for calci-
um and a smallest for Zn, and a most marked effect of hydra-
tion on the calcium complexes (Tables 6, 7 and 8).
The fully hydrolyzed dianionic complex resulted in struc-
ture 15, where the cation coordinates four oxygens, in a 2 × 2
arrangement. The predicted free energies of the hydrolyses 9b
→ 15 are rather small (Tables 7 and 8), in the limits of accura-
cy of the ab initio method employed. Opposite to the isome-
rizations to a metaphosphate intermediate, the contribution of
solvation leads to negative free energies in all cases.
Analysis of the charge distribution on the dianionic M-PPi
and M-Pi complexes
Because all schemes to assign atomic charges are somewhat
arbitrary, we decided to use two different approaches: (1) one
that yields information of the electron density in the vicinity
of each atom, Mulliken’s population analysis [38], and (2) one
that yields information of the electrostatic potential, the
CHELPG scheme [39]. This latter was preferred over the pre-
viously used [29] CHELP [43] because it is less sensitive to
changes in the orientations of the molecules [39]. The values
obtained from CHELPG still depend on the van der Waals
A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate... 155

Table 7. Energies, enthalpies, entropies and solvation energies of the Table 8. Comparison of the hydrolysis free energies of M-pyrophos-
hydrolyses of M-pyrophosphates a. phatesa.
Reaction ∆E eSCF ∆Ee MP2 ∆Eth298 ∆H° ∆S° ∆∆Gsol Reaction ?G° ?Gaq
M = Ca Mg Ca Zn Mg Ca Zn
7a → 13 –137.5 34.3 1.6 –101.6 37.6 74.3 7a → 13 –87.1 –112.8 –84.8 –61.0 –38.5 –94.5
7b → 13 –93.3 24.5 –1.6 –70.4 30.7 34.8 7b → 13 –73.2 –79.6 –72.9 –48.5 –44.8 –35.0
8 → 14 –98.9 36.4 –2.0 –64.5 39.3 62.3 8 → 14 –62.7 –76.3 –53.5 –40.1 –14.0 –34.6
9b → 15 –18.9 19.8 1.9 2.8 35.7 –49.5 9b → 15 –4.4 –7.9 6.8 –26.4 –57.4 –41.1
M = Zn a Allenergies are in kJ / mol. The free energy in aqueous solution was com-
puted as ∆Gaq = ∆G° + ∆∆Gsol.
7a → 13 –120.1 28.5 –0.3 –91.9 –23.7 –9.7
7b → 13 –91.8 17.6 –0.6 –74.8 –6.3 37.9
8 → 14 –76.4 36.4 –2.8 –42.8 35.8 18.9
9b → 15 –2.9 17.1 0.9 15.1 27.8 –47.9
Although the hydrolysis of pyrophosphates in living cells
a All energies and enthalpies are in kJ / mol. Entropies are in J / (mol K). The occurs in a specific environment, determined by the catalytic
last column has the differences in solvation free energies between reactants
site of the enzyme [14, 45, 46], theoretical studies of the reac-
and products, computed with PCM [32].
tions in vacuo are helpful to discriminate intramolecular
effects from the contributions of various intermolecular inte-
ractions. In this case, based on a previous study [30], the dif-
radii given to the various atoms; in this case they were: 2.00 Å ferences in coordination properties between ions were propo-
for P, 1.70 Å for O and 1.45 Å for H, as standard Breneman sed as an explanation for the experimental data that the mem-
radii in GAUSSIAN98; whereas for the metal cations they brane-bound pyrophosphatase of Rhodospirillum rubrum can
were taken from Ref. [44]: 1.73 Å for Mg, 2.00 Å for Ca, and utilize zinc complexes as substrates for the hydrolysis of
1.39 Å for Zn. pyrophosphates, with a slightly smaller efficiency, and a dis-
The results are shown in Table 9, where it can be seen tinct concentration dependent kinetics, than those for magne-
that the cations withdraw a substantial amount of negative sium containing complexes, whereas they cannot utilize calci-
charge, with the oxydizing power in the order Zn ≥ Mg > Ca. um complexes [9, 15]. The results obtained in the present
In all cases, the Mulliken charge on the bridging oxygen in work support that proposal.
both 3a and 3b is large and negative, showing a high electron The structural differences found to occur in the equilibri-
density around it; the CHELPG charge is smaller, but still sig- um geometries of the Zn-pyrophosphate complexes and their
nificant, and reflects an anionic electrostatic potential. The isomerization products, relative to their magnesium-contain-
Mulliken charges on the phosphoryl moieties show a lower ing counterparts, are mainly due to a more rigid coordination
electron density, but the CHELPG charges reflect a higher by Zn2+ . The 2 × 1 geometry found for the dianioninc com-
electrostatic potential, thus making the phosphoryl moieties plex [PO4 · Zn · PO 3 ]2– allowed for a more complete study of
susceptible of strong electrostatic interactions, but with a low the isomerization products of Ca-pyrophosphates and Mg-
probability of chemical bonding. Upon isomerization to 6a, pyrophosphates; the coordination properties of Ca 2+ favor the
6b and 6c, the Mulliken negative charge on the bridging oxy- 3 × 1 configuration, that has more ligands in the first shell;
gen diminishes while the CHELPG charge increases; thus the Mg2+ makes the 2 × 1 and the 3 × 1 configurations virtually
electron density is lower, but the anionic field stronger. The isoenergetic, and Zn2+ favors the 2 × 1 geometry, that has the
behavior of the monohydrated complexes 9a and 12a shows ligands closer to it than in the 3 × 1 geometry.
the same trend, that remains equal for the complexes with The interactions of the complexes with one water mole-
hydroxide anions 9b and 12b. cule are all characterized by a large enthalpy and a large
decrease in entropy (Table 4). This reflects mainly the strong
Discussion and conclusions interaction with the metal cation as well as the restriction
imposed by its coordination properties on the positions attain-
The results presented in the preceeding section show the struc- able by the water molecule. ∆H – T∆S compensatory relation-
tural differences imposed by the cations on pyrophosphate, ships have also been found in a study of the thermodynamics
due to their distinctly different coordination properties, that in of phosphate and pyrophosphate anions binding by polyam-
the case of Ca2+ favor a larger amount of ligands in its first monium receptors [22], where hydrogen bonding is found to
hydration shell, whereas in the case of Zn2+ favor “tighter” be crucial in anion coordination. In agreement with a previous
structures, where the ligands are at shorter distances from the result [29], the interactions of the dianionic M-pyrophosphate
cation. The properties of Mg2+ allow for both types of coordi- complexes lead readily to the breaking of the water molecule,
nation, so the Mg-pyrophosphate and Mg-phosphate complex- producing very stable [HO · M · HP 2O 7 ]2– , complexes. This
es can adopt the conformations of both zinc-complexes and supports the previously advanced idea that a hydroxide anion
calcium-complexes. can be stabilized by the metallic cation in the catalytic site.
156 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) William J. McCarthy et al.

Table 9. Charges on dianionic M-Phosphates a.

Structure M O PO3 PO3 Structure M O PO3 PO3 H2O
3a 9a
Mg 0.77 –1.48 –0.53 –0.76 0.66 –1.47 –0.62 –0.74 0.17
1.51 –0.84 –1.32 –1.35 1.50 –0.81 –1.35 –1.33 –0.01
Ca 1.43 –1.64 –0.89 –0.90 1.44 –1.62 –0.99 –0.86 0.03
1.63 –0.87 –1.39 –1.37 1.64 –0.86 –1.38 –1.36 –0.04
Zn 0.61 –1.48 –0.48 –0.65 0.58 –1.47 –0.61 –0.66 0.16
1.33 –0.85 –1.24 –1.24 1.35 –0.81 –1.27 –1.26 –0.01
3b 9b HPO3
. HO.

Mg 0.49 –1.35 –0.57 –0.57 0.88 –1.47 –0.06 –0.66 –0.70

1.47 –0.75 –1.36 –1.36 1.48 –0.79 –0.54 –1.32 –0.83
Ca 1.34 –1.40 –0.97 –0.97 1.54 –1.43 –0.22 –1.02 –0.87
1.61 –0.77 –1.42 –1.42 1.76 –0.82 –0.60 –1.39 –0.95
Zn 0.42 –1.50 –0.46 –0.46 0.81 –1.46 –0.02 –0.66 –0.67
1.34 –0.78 –1.28 –1.28 1.40 –0.81 –0.52 –1.29 –0.78
6a 12a PO3
. H2O
.

Mg 1.00 –1.28 –0.91 –0.81 0.88 –1.25 –0.92 –0.80 0.09

1.43 –1.19 –1.38 –0.86 1.46 –1.16 –1.39 –0.88 –0.03
Ca 1.43 –1.32 –1.17 –0.94 1.43 –1.30 –1.21 –0.94 0.02
1.63 –1.25 –1.45 –0.93 1.65 –1.21 –1.46 –0.94 –0.04
Zn 0.99 –1.28 –0.88 –0.83 0.99 –1.27 –0.93 –0.80 0.01
1.36 –1.17 –1.31 –0.88 1.34 –1.12 –1.32 –0.87 –0.03
6b 12b HPO3
. HO.

Mg 0.83 –1.16 –0.90 –0.77 0.86 –1.12 –0.19 –0.83 –0.72

1.30 –1.16 –1.33 –0.81 1.51 –1.11 –0.63 –0.93 –0.84
Ca 1.51 –1.35 –1.22 –0.94 1.59 –1.27 –0.49 –0.95 –0.88
1.62 –1.27 –1.42 –0.93 1.75 –1.13 –0.72 –0.96 –0.94
Zn 0.63 –1.08 –0.88 –0.67 0.81 –1.10 –0.21 –0.83 –0.67
1.31 –1.16 –1.29 –0.86 1.43 –1.10 –0.59 –0.94 –0.80
6c 15 HPO3
. HPO3
.

Mg 0.68 –1.33 –1.35

1.43 –1.71 –1.72
Ca 1.54 –1.35 –1.22 –0.97 1.53 –1.77 –1.76
1.61 –1.28 –1.42 –0.91 1.67 –1.84 –1.83
Zn 0.66 –1.07 –0.91 –0.68 0.64 –1.31 –1.33
1.30 –1.16 –1.29 –0.85 1.38 –1.69 –1.69
a Charges
in e. For each element, the first row shows the charges obtained from Mulliken's population analysis [38], and the second row, those obtained from the
CHELPG scheme [39].

Moreover, the hydroxide anion is stable even taking into
account the solvation energies (Table 4) so the theoretical pre-
diction is that the dissociation of a water molecule should
occur in the aqueous solution. This seems contradictory to
experimental data [47] of aqueous solutions of HP 2O 7 3– at pH
7.0; when either Mg or Zn is added, the change in pH shows
that a proton is released from the complex, that should thus be
converted into [M · HP 2 O 7 ] 2– . The theoretical prediction
obtained here and in a previous work [29] leads to conclude
that the proton is released from one water molecule, leaving a
hydroxide anion attached to the complex. The permanence of
such a complex depends on the exchange rate between the
first and the second hydration shells. The results from nuclear
magnetic resonance experiments [48] show that this rate is
slow for both Mg2+ and Zn2+, whereas it is somewhat faster
for Ca2+. It has been shown in numerical simulations [40, 41]
that this is due to the fact that both Mg2+ and Zn2+ have a
depletion layer between their respective first and second hyra-
tion shells, where neither oxygens nor hydrogens are present,
this being strict for Mg2+ and a little less so for Zn2+ . On the
other hand, Ca2+ allows hydrogens in the region between its
first and second hydration shells, a situation that would imme-
diately conduce to the transfer of the hydroxide anion to the
bulk, by means of proton exchanges (proton jumps). Thus, the
A comparative ab initio study of the isomerizations and hydrolyses of neutral and anionic M-pyrophosphate...
former two cations should be able to maintain the hydroxide
anion attached more easily than the latter. This would make a
rather important difference because Mg-PPi and Zn-PPi would
carry their nucleophile into the active site of the enzyme,
whereas Ca-PPi would not be able to do the same.
The relative gas-phase free energies of the various stable
configurations found in this work are depicted in the graphs of
Fig. 6. The effect of solvation can be seen in the correspond-
ing graphs of Fig. 7. For the completely anhydrous complex-
es, the energies of the isomerizations of the Zn-pyrophos-
phates are somewhat higher than those of the Mg-pyrophos-
phates, whereas for the Ca-pyrophosphates these energies are
consistently lower (Table 8). Thus, it would seem that the
hydrolysis through a metaphosphate intermediate should be
facilitated by calcium; however, when the solvation energy is
taken into account, the picture changes: Ca-pyrophosphates
become generally more stable with respect to their metaphos-
phate isomers than Mg- and Zn-pyrophosphates. These results
allow for a reconsideration of the previously proposed disso-
ciative mechanism [29]: the species entering the catalytic site
should have structure 9b. The hydroxide anion would be
attracted by the metallic cation in the catalytic site, and substi-
tuted by a water molecule, thus converting the dianionic 9b
into the monoanionic 8. This latter can be anchored in the cat-
alytic site [14] and isomerize to 11. The results in Table 8
show that this reaction should be spontaneous for anhydrous
Ca-PPi and Mg-PPi, and reversible for Zn-PPi; though the
effect of full solvation is to impede these isomerizations in the
three cases (compare Fig. 6 to Fig. 7), it is to be expected [14,
45, 46] that the catalytic site regulates the amount of water
molecules that surround the substrate, thus permitting the va-
riation of the free energies of the isomerizations. It is to be
noted that this mechanism requires the M-PPi complex to
carry its own nucleophile inside the catalytic site; this is possi-
ble for fully hydrated Mg-PPi and Zn-PPi, whereas Ca-PPi
would lose the hydroxide anion in the aqueous solution. This
would explain why the hydrolyses of both Mg- and Zn-
pyrophosphates can be catalyzed by the enzyme, whereas the
hydrolysis of Ca-pyrophosphate cannot.
Recent studies [49, 50] on phosphate ester hydrolysis in
aqueous solutions compared the associative vs. the dissocia-
tive mechanisms, and showed that the experimental results
can be interpreted in terms of either of them, because the bar-
riers for the associative pathways are similar to those of the
dissociative pathways; thus an enzyme active site could select
either of these mechanisms depending on the particular elec-
trostatic environment. From our analysis of the charges we
found that the three cations, Ca2+ , Mg2+ and Zn2+, produce
very similar electronic distributions on the dianionic complex-
es and thus would promote similar reaction paths. This is in
agreement with various experimental studies on Rhodos-
pirillum rubrum chromatophores showing that the ATPase
complex can catalyze Ca-ATP hydrolysis [51-53], albeit with
different kinetics than Mg-ATP. Thus, we can confidently
assert that the main difference in the biochemical roles of
Ca2+ , Mg2+ and Zn2+ in their interactions with pyrophosphates
157
stem from their distinctly different coordination properties.
Because the data presented in this work do not consider
the association of the metaphosphate with a nucleophile, they
cannot discriminate how associative or dissociative the me-
chanism of hydrolysis should be; what they show is the feasi-
bility of a partly dissociative path, and the stabilization of a
hydroxide anion that can act as a nucleophile stronger than a
water molecule, in agreement with the proposal in Ref. [14].
Therefore, in this work we have found evidence of the
relevance of the intermolecular interactions in the energetics
of pyrophosphate hydrolysis. The facts that hydrated Ca2+ is
bigger and has a lower oxidizing power than both Mg2+ and
Zn2+ may also provide an explanation to the observation [15]
that the former cannot activate the hydrolysis of pyrophos-
phates chelated to tripositive ions by the membrane-bound
pyrophosphatase of Rhodospirillum rubrum whereas the two
latter do. Nevertheless, a recent study [54] of the soluble
Rhodospirillum rubrum F1-ATPase showed that unisite
hydrolysis in presence of Ca 2+ is many-fold higher than with
Mg2+. The previous hypothesis cannot explain this phenome-
non as yet. However it is worth noticing that ATP has three
phosphates, thus a different structure, and the active sites of
ATPases are bigger than those of PPi-ases [20]. Further stu-
dies are required to clarify this.
Acknowledgments
This research was supported by the NSF, U. S. A.-CONA-
CyT, Mexico, Cooperative Science Program, Grant INT-
931326, by DGAPA-UNAM, Grant ES-112896 and by
CONACyT, Grant L004-E. H. S.-M. Wishes to thank the
Mexico-U. S. A. Foundation for Science for a fellowship that
allowed him a ten-week stay at U. of A.
Supporting Information Available
Tables listing the cartesian coordinates of all the structures
shown in this paper, referred to their respective PMI frames,
with their SCF//SCF and MP2//SCF energies. This material
can be obtained by request [55] to humberto@fis.unam.mx.
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Northwest Laboratory, P.O. Box 999, Richland, Washington
99352, USA, and is funded by the U.S. Department of Energy.
The Pacific Northwest Laboratory is a multi-program laboratory
operated by Battelle Memorial Institute for the U.S. Department
of Energy under contract DE-AC06-76RLO 1830. Contact David
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55. Saint-Martin, H. Technical Report BP-02-98, 1998, Centro de
Ciencias Físicas, UNAM. Available upon request via E-mail:
humberto@fis.unam.mx.
 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 159-166
Investigación
Adsorción de salicilato de sodio en solución acuosa sobre carbón activado
R. Leyva Ramos*, L. G. Velázquez Vargas, J. Mendoza Barrón y R. M. Guerrero Coronado
Centro de Investigación y Estudios de Posgrado. FCQ, Universidad Autónoma de San Luis Potosí, Av. Dr. M. Nava. No 6,
San Luis Potosí 78210, SLP, México. Tel: (444)8262-440; Fax: (444)8262-372; E-mail: rlr@uaslp.mx
Recibido el 1o. de diciembre del 2001; aceptado el 28 de junio del 2002
Resumen. Los datos experimentales de adsorción del salicilato sobre
carbón activado se interpretaron satisfactoriamente por la isoterma
Prausnitz-Radke. La capacidad de adsorción aumenta al disminuir el
pH, pero disminuye al aumentar la temperatura y cuando }l carbón se
oxida con HNO3. A pH de 5 y 11, la capacidad aumenta ligeramente
con la adición de NaCl, pero no a pH de 3. Se concluye que el meca-
nismo de adsorción del salicilato es dependiente del pH y de la intera-
cción entre la molécula del salicilato y la superficie del carbón.
Palabras clave: Adsorción, salicilato, Prausnitz-Radke, carbón.
Introducción
La presencia de compuestos orgánicos en aguas subterráneas,
potables y residuales municipales e industriales, representa un
serio peligro para el medio ambiente y, en particular, para la
salud humana. La gran mayoría de estos compuestos son tóxi-
cos, cancerígenos y resistentes a la biodegradación natural
(recalcitrantes)[1]. Las principales fuentes de estos com-
puestos orgánicos son las descargas industriales y municipales
y los lixiviados de confinamientos de residuos industriales y
municipales. Los compuestos orgánicos tóxicos más frecuente-
mente encontrados son los compuestos fenólicos y el salicilato
es uno de los más típicos, ya que tiene aplicaciones muy diver-
sas [2].
Los compuestos orgánicos se pueden eliminar del agua
mediante varios procesos y entre estos destaca la adsorción
sobre carbón activado, que es la mejor tecnología disponible
para tratar soluciones acuosas que contienen los compuestos
orgánicos siguientes: solventes aromáticos, aromáticos polinu-
cleares, aromáticos clorados, surfactantes, compuestos fenóli-
cos, pesticidas, herbicidas, aminas aromáticas y alifáticas de
alto peso molecular y colorantes orgánicos solubles [1].
El carbón activado es el adsorbente más versátil y efi-
ciente para remover compuestos orgánicos en solución acuosa.
Su capacidad de adsorción se debe no solamente a su gran área
específica sino también a su naturaleza, la cual depende con-
siderablemente del proceso de oxidación-activación empleado
para preparar el carbón activado [3, 4]. En solución acuosa el
carbón activado tiene un comportamiento anfotérico, esto sig-
nifica que la carga de su superficie depende del pH de la solu-
ción. Este comportamiento es muy importante en la adsorción
de solutos débiles, porque éstos se pueden adsorber como mo-
Abstract. The experimental adsorption data of salicylate onto activa-
ted carbon were interpreted satisfactorily by the Prausnitz-Radke
isotherm. The adsorption capacity increases diminishing the pH, but
decreases increasing the temperature and when the carbon is oxidized
with HNO3. At pH 5 and 11, the capacity increases lightly with the
NaCl addition, but no at pH 3. It is concluded that the adsorption me-
chanism of salicylate is dependent upon the pH and the interaction
between the salicylate molecule and the carbon surface.
Keywords: Adsorption, salicylate, Prausnitz-Radke, carbon.
léculas disociadas o sin disociarse. Dependiendo del pH de la
solución, el soluto disociado puede ser atraído o repelido por
interacciones electrostáticas entre la superficie del carbón y la
molécula del soluto disociado [5]. Por otro lado, el soluto sin
disociar puede acumularse en la superficie debido a interac-
ciones hidrofóbicas entre la molécula del soluto y el solvente o
bien por la afinidad específica que puede existir entre la
molécula del soluto y los sitios activos del carbón. Por lo
tanto, la adsorción de un compuesto orgánico sobre carbón ac-
tivado depende de las interacciones entre la molécula orgánica
y los sitios activos del carbón, es decir los complejos superfi-
ciales del oxígeno [6].
El ácido salicílico y sus derivados constituyen aproxima-
damente la mitad del total de medicamentos derivados del
alquitrán de hulla que se producen en los Estados Unidos [2].
Por otro lado, el salicilato presente en las aguas residuales se
debe remover para evitar la contaminación de ríos, lagos y
mantos acuíferos. En un estudio anterior [7] se reportó que el
salicilato se adsorbió sobre carbón activado y la masa adsorbi-
da disminuyó drásticamente cuando el pH se incrementó de 1 a
13; sin embargo, es necesario investigar más detallada y exten-
samente la adsorción de salicilato sobre carbón activado. Esto
permitirá saber si el salicilato presente en solución acuosa se
puede remover mediante la adsorción sobre carbón activado.
El objetivo del presente trabajo es investigar el efecto de
las interacciones moleculares entre el salicilato y la superficie
del carbón, así como el efecto del pH y de la temperatura sobre
la isoterma de adsorción. Además, se estudiará el efecto de la
oxidación del carbón sobre la capacidad de adsorción y la re-
versibilidad de la isoterma de adsorción, y se elucidará el me-
canismo de adsorción.
160 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Metodología experimental
En este estudio se usó carbón activado marca Barneby-Sut-
cliff, denominado comercialmente como PE y fabricado a par-
tir de concha de coco. El carbón activado se trató mediante el
procedimiento siguiente: se lavó varias veces con agua desti-
lada, hasta que el agua ya no presentó polvo de carbón sus-
pendido, luego se secó en una estufa a 383 K durante 24 h y se
guardó en un recipiente de plástico cerrado. El carbón se ca-
racterizó físicamente por medio de un equipo de fisisorción,
marca Micromeritics, modelo ASAP 2010, y además, se le de-
terminaron los sitios ácidos y básicos por el método de titu-
lación ácido-base propuesto por Boehm [8].
La determinación de la carga del carbón activado en solu-
ción acuosa así como la variación de ésta con respecto al pH
se efectuó por el método de titulación potenciométrica ácido-
base reportado en la literatura [9,10]. A partir de esta informa-
ción se evaluó el punto de carga cero (PCC) del carbón. Más
detalles sobre la metodología y los cálculos se pueden encon-
trar en Ruiz Salazar [10].
El carbón se oxidó con ácido nítrico mediante el procedi-
miento siguiente: A un vaso de precipitado de 1000 mL se
agregaron 40 g de carbón tratado y se añadieron 200 mL de
una solución de ácido nítrico al 50 % v/v. Luego, se calentó
durante 2 h aproximadamente, procurando que la temperatura
no fuese mayor de 323 K, se dejó enfriar la solución a tempe-
ratura ambiente (≈ 20 ºC) y se drenó la solución ácida. El car-
bón se dejó en agua desionizada durante 24 h, y enseguida se
lavó varias veces con agua desionizada hasta que el pH del
agua de lavado se mantuvo constante y cercano al pH del agua
desionizada. Posteriormente, se secó en una estufa a 383 K
durante 24 h y se guardó en un rec©piente cerrado.
Los datos experimentales de la isoterma de adsorción se
obtuvieron en#un adsorbedor de lote consistente de un matraz
Erlenmeyer de 500 mL, colocado dentro de un baño a tempe-
ratura constante. La solución del adsorbedor se mezcló por
medio de una barra de agitación recubierta con Teflón, accio-
nada por una placa de agitación colocada debajo del baño de
temperatura constante. El carbón se colocó en canastillas de
malla de Nylon para evitar que la fricción entre las partículas
y la pared formase polvos finos que interfirieran con el análi-
sis de la solución.
La concentración del salicilato de sodio en solución acuo-
sa se determinó por un método espectrofotométrico UV-
Visible. La absorbancia se midió mediante un espectrofotó-
metro UV-Visible de doble haz, marca Shimadzu, modelo
UV-160, a una longitud de onda de 297 nm. La concentración
de la muestra se determinó preparando previamente una curva
de calibración, concentración contra absorbancia, en un inter-
valo de concentraciones de 1 a 20 mg / L, al mismo pH de la
muestra.
Los datos de las isotermas de adsorción se obtuvieron en
el adsorbedor de lote, contactando 0.5 o 0.25 g de carbón con
un volumen de 250 o 500 mL de una solución de salicilato de
sodio de concentración inicial conocida y pH ajustado previa-
mente. Antes de agregar el carbón se tomó una muestra de 10
R. Leyva Ramos et al.
Tabla 1. Propiedades fisicoquímicas del carbón activado PE.
Propiedad Carbón sin oxidar Carbón oxidado
Area específica, m2 / g 1055 974.9
Diámetro promedio 2 2
del poro, nm
Concentración de sitios 0.20 1.00
ácidos, meq / g
Concentración de sitios 0.44 0.14
básicos, meq / g
mL para corroborar la concentración inicial del salicilato de
sodio en la solución. El carbón se agregó a la solución de sali-
cilato y se dejaron en contacto durante 6 o 7 días, tiempo sufi-
ciente para alcanzar el equilibrio. En cada periodo de tiempo
el pH de la solución se midió por medio de un pHmetro y se
ajustó a un cierto valor adicionando, según el caso, solución
de HCl o NaOH 0.01 M. Se consideró que ya se había alcan-
zado el equilibrio cuando las concentraciones de dos muestras
consecutivas no varían significativamente. Las concentra-
ciones de las muestras se determinaron mediante el procedi-
miento indicado, mientras que la cantidad de salicilato adsor-
bido sobre el carbón se calculó mediante un balance de masa.
La reversibilidad de la adsorción se investigó efectuando
experimentos de desorción, consistentes en realizar un experi-
mento de adsorción y, una vez que se alcanzó el equilibrio, el
carbón saturado con salicilato de sodio se removió de la solu-
ción y se colocó dentro de un volumen conocido de una solu-
ción sin salicilato de sodio y de pH conocido. Esta etapa se
efectuó removiendo la canastilla de Nylon conteniendo el car-
bón activado saturado y lavando la canastilla con agua destilada
para eliminar la solución de salicilato atrapada o adherida a las
partículas de carbón dentro de la canastilla. La etapa de lavado
se realizó sumergiendo la canastilla en agua desionizada
durante 10 seg. El carbón y la solución se dejaron en contacto
durante 5 días, para alcanzar un nuevo equilibrio. En este perio-
do el pH de la solución se mantuvo constante, adicionando so-
lución de HCl o NaOH 0.01 M. La cantidad de salicilato que
permaneció adsorbido se calculó por un balance de masa.
Para evaluar el efecto de la adición de NaCl en la isoter-
ma de adsorción se realizaron experimentos de adsorción a pH
de 3, 5 y 11 agregando NaCl a la solución para obtener con-
centraciones de 0.01 y 0.1 M de NaCl.
Resultados y discusión
Caracterización fisicoquímica del carbón activado
Las propiedades fisicoquímicas del carbón activado se exhi-
ben en la Tabla 1. Los valores del área específica y el diáme-
tro promedio del poro se encuentran dentro del intervalo de
valores reportados en la literatura para los carbones activados
[7, 11]. Como se puede observar en la Tabla 1, el carbón acti-
vado contiene aproximadamente el doble de sitios básicos con
respecto a los sitios ácidos.
Adsorción de salicilato de sodio en solución acuosa sobre carbón activado 161

Tabla 2. Valores de las constantes de las isotermas de Freundlich y Langmuir.

pH T(°C) Freundlich Langmuir
k n % Desv K qm % Desv (%)
(L 1/n mmol 1 – 1 / ng–1) (%) (L / mmol) (mmol / g) (%)
2 25 2.674 6.07 2.19 55.12 2.502 8.62
3 25 2.523 5.37 4.16 25.54 2.459 6.79
3* 25 2.021 4.97 2.38 23.98 2.006 7.72
3** 25 2.708 6.27 3.38 312.8 1.998 8.54
5 25 0.907 3.75 4.02 8.333 1.024 6.96
7 25 0.603 3.83 5.18 12.13 0.617 13.95
9 25 0.510 3.27 2.17 15.96 0.450 8.83
9 15 0.515 3.74 0.94 18.79 0.476 8.80
9 40 0.364 3.75 4.98 11.72 0.364 3.55
11 25 0.393 3.16 5.25 14.49 0.366 19.73
11* 25 0.217 2.22 2.43 3.397 0.261 5.04
11** 25 0.524 2.59 5.85 43.30 0.263 9.22

* Carbón oxidado con HNO 3

** Etapa de desorción

Tabla 3. Valores de las constantes de la isoterma de Prausnitz-Radke.

pH T a b β % Desv
(°C) (L / g) (Lβ mmol–β) (%)
2 25 666.8 251.0 0.861 1.33
3 25 240.1 95.17 0.852 3.91
3* 25 231.4 114.1 0.831 1.75
3** 25 9.837 × 104 3.636 × 104 0.841 3.40
5 25 30.05 32.02 0.792 2.78
7 25 1.857 × 106 3.078 × 106 0.739 5.18
9 25 5.578 × 105 1.092 × 106 0.693 2.17
9 15 135.1 263.0 0.745 0.81
9 40 5.172 14.12 0.938 3.34
11 25 66.85 171.10 0.705 4.38
11* 25 5.726 × 104 2.648 × 105 0.553 2.32
11** 25 29.82 67.80 0.722 2.71
*Carbón oxidado con HNO3
**Etapa de desorción.

Como era de esperarse, la superficie del carbón se modi-
ficó al oxidarlo con ácido nítrico. En la Tabla 1 se observa que
la oxidación del carbón provocó que la concentración de los
sitios ácidos aumente 5 veces y, por el contrario, la de los
sitios básicos disminuye cerca de 3 veces. Resultados simi-
lares han sido reportados para otros carbones [12]. También,
se observa que el área específica disminuye ligeramente con
dicha modificación mientras que el diámetro promedio de los
poros prácticamente se mantiene constante.
aC
q= (3)
1 + bC ß
Las constantes de estas isotermas se evaluaron por un
método de mínimos cuadrados mediante el método de opti-
mización de Rosenbrock y quasi-Newton [14]. Los valores de
las constantes de cada isoterma, así como los porcentajes de
desviación promedio absoluto, se muestran en las Tablas 2 y
3. El porcentaje de desviación promedio se definió de la ma-
nera siguiente:

Isotermas de adsorción 1 qcal − qexp

Los datos experimentales de las isotermas de adsorción se
% Desv =
N
∑ qexp
× 100 % (4)
ajustaron con las isotermas de Langmuir, Freundlich y Praus-
nitz-Radke [13] que se expresan matemáticamente como: Donde N = número de datos experimentales
qm KC
q= (1) Se consideró que la isoterma que mejor ajustó a los datos
1 + KC es aquella que presenta el menor porcentaje de desviación
1

q = kC n (2) promedio absoluto. Revisando los valores de los porcentajes

de desviación promedio reportados en las Tablas 2 y 3, se
162 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) R. Leyva Ramos et al.

3,0 Usando estos valores se preparó el diagrama de espe-

ciación que se muestra en la Fig. 2. En este diagrama se obser-
2,5
va que a pH de 2 o menor, la especie predominante es el ácido
pH=2
Moles adsorbidos, mmol/g

2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
Concentración en el equilibrio, mmol/L
Fig. 1. Efecto del pH en la isoterma de adsorción del salicilato de so-
dio sobre el carbón activado PE. T = 298 K. Las líneas representan la
isoterma de Prausnitz-Radke.
notó que la isoterma de Prausnitz-Radke ajusta mejor los
datos experimentales que las isotermas de Langmuir y
Freundlich. En base a lo anterior se consideró que la isoterma
de Prausnitz-Radke interpreta los datos en condiciones diver-
sas de temperatura y pH. Esto se debe a que la isoterma de
Prausnitz-Radke tiene tres parámetros de ajuste, mientras que
las isotermas de Langmuir y Freundlich solamente tienen dos.
Los datos experimentales de las isotermas se muestran en
la Fig. 1, en donde las líneas continuas representan a las iso-
termas de Prausnitz-Radke. Los datos de las isotermas que se
exhiben en la Fig. 1 no siguen el comportamiento de la isoter-
ma de Langmuir porque la masa de salicilato adsorbido no se
hace asintótica a altas concentraciones, sino continúa incre-
mentando cuando se aumenta la concentración. Por esta razón,
la isoterma de Langmuir no interpreta correctamente los datos
de la isoterma de adsorción.
Efecto del pH en la isoterma de adsorción
pH=3 salicílico sin disociar (H2 Sa); a pH = 3, valor muy cercano a
pH=5
pH=7 pK 1 = 2.97, se encuentran presentes las especies H2 Sa y HSa–1
pH=9
pH=11
en una relación cercana de 1 / 1; y a pH entre 5 y 11, la
especie predominante es HSa–1 . Con base en que el salicilato
se adsorbe sobre el carbón activado en el intervalo de pH entre
2 y 11, entonces el salicilato se adsorbe como ácido salicílico
sin disociar y también como anión HSa–1 .
1,2 1,4 La masa de salicilato adsorbido a pH de 2 y 3 es mucho
mayor que a pH de 9 y 11. Con base en el diagrama de espe-
ciación, se puede concluir que la especie H2 Sa se adsorbe
mucho más que la especie HSa–1. A pH = 2 la especie H2 Sa
representa 90.3 % molar del salicilato total presente en la
solución, mientras que a pH = 3 la especie de H2Sa es 48.3 %.
Suponiendo que en este intervalo de valores de pH el salicila-
to se adsorbe únicamente como H2 Sa, entonces la isoterma
puede expresarse en términos de los moles de H2 Sa adsorbido
contra la concentración de H2 Sa. Esta concentración se estima
por medio del diagrama de especiación, la concentración total
del salicilato y el pH de la solución. La isoterma del H 2Sa cal-
culada de esta forma se exhibe en la Fig. 3.
La característica más sobresaliente de la Fig. 3 es que los
datos a pH = 2 y pH = 3 se pueden representar por una sola
isoterma de adsorción, considerando que H2 Sa es la única
especie que se adsorbe. Por lo anterior, la disminución de la
cantidad de salicilato adsorbido cuando el pH aumenta de 2 a
3, puede atribuirse a que la fracción molar o la concentración
de la especie H 2Sa disminuye al aumentar el pH de la solución.
La isoterma de adsorción del H2 Sa se representa por la
isoterma de Prausnitz-Radke siguiente:
495 .5 * CH 2 Sa
q= (5)
1 +180 .1* C H 2Sa
0 .863

En la Fig. 1 se muestran las isotermas de adsorción a una tem-

peratura de 298 K y para valores del pH de la solución de 2, 3,
5, 7, 9 y 11. En esta figura se observa que a medida que se
aumenta el pH de la solución, de 2 a 11, la masa de salicilato
adsorbido disminuye consigerablemente. En este intervalo de
pH la máxima capacidad de adsorción, qm , obtenida por medio
de la isoterma de Langmuir (Tabla 2), disminuye un poco más
de seis veces. Esto indica que la adsorción del ion salicilato es
favorecida por la presencia de iones hidrógeno en la solución.
Los parámetros de esta isoterma son cercanos a los valo-
res que se habían calculado a pH = 2 (Tabla 3), sin considerar
alguna especie en particualr. Esto se debe a que pH = 2, la
especie H2 Sa predomina, correspondiendo al 90.3 % molar de
todo el salicilato presente en la solución.
1,0

Un comportamiento similar ha sido reportado para la adsor- 0,9

ción de ácidos carboxílicos aromáticos sobre carbón activado 0,8

[15]. Es importante mencionar que se hicieron experimentos a 0,7

Fracción molar

pH = 1, pero no se reportaron debido a que se formó un preci- 0,6 -2

Sa
0,5 -1
pitado blanco que probablemente sea ácido salicílico. HSa
0,4 H2Sa
Esta bien documentado que el ácido salicílico (H2 Sa) es
0,3
un ácido débil con pK1 = 2.97 y pK 2 = 13.40 [16]. Las reac- 0,2
ciones de disociación son las siguientes: 0,1
+
H 2Sa ↔ HSa + H –1
pK1 = 2.97 0,0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
−2 +
HSa –1
↔ Sa + H pK 2 = 13.4 pH

Fig. 2. Diagrama de especiación del ácido salicílico.

Adsorción de salicilato de sodio en solución acuosa sobre carbón activado 163

3,0 4,0

9. 837 x10 4 C Isoterma de la etapa de adsorción

3,5 q= Isoterma de la etapa de desorción
2,5 1 + 3. 636 x10 4 C 0. 841
Moles de H2Sa adsorbidos, mmol/g

3,0

Moles adsorbidos, mmol/g

2,0 Desorción
494.5C qo 2a
q= 2,5
2 4 0C
1 + 180.1C 0. 863
2d q=
qe 1 + 9 5.1 7C 0. 853
1,5 2,0
qTeo

1,5 Ad
sor
1,0 ció
n

1,0 q´e
0,5 pH=2
pH=3 0,5
Co
C´ e C´ Teo Ce
0,0
0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2
Concentración de H 2 Sa en el equilibrio, mmol/L Concentración en el equilibrio, mmol/L

Fig. 3. Efecto del pH en la isoterma de adsorción del H2Sa sobre el Fig. 4. Ilustración del proceso de adsorción-desorción del salicilato
carbón activado PE. de sodio pH = 3 y T = 298 K.

Reversibilidad de la adsorción del salicilato V

de sodio sobre el carbón activado qTeo = − ′ + q0
CTeo (8)
m
La reversibilidad de la adsorción se investigó realizando expe- ′
a ⋅ CTeo
rimentos de adsorción-desorción. En la etapa de adsorción, el qTeo = (9)
′ )ß
1 + b ⋅ (CTeo
salicilato se adsorbe sobre el carbón activado al introducir el
carbón en una solución de salicilato de sodio, mientras que en
En caso de que la adsorción no sea reversible, entonces
la de desorción el salicilato se desorbe al colocar el carbón
qe’ es mayor que qTeo y Ce’ es menor que C’ Teo.
saturado con salicilato en una solución que no contiene salici-
Los datos e isotermas que se obtuvieron en la adsorción y
lato. El proceso de adsorción-desorción se ilustra en la Fig. 4.
la desorción del salicilato se graficaron en las Figs. 5 y 6 para
Durante la adsorción, la concentración del salicilato (C)
valores del pH de 3 y 11, respectivamente. En la Fig. 3 se
disminuye de Co hasta Ce, mientras que la masa de salicilato
observa que los datos de desorción no se encuentran sobre la
adsorbido (q) aumenta de 0 a q e. Realizando un balance del
isoterma de adsorción, esto indica que la adsorción no es
salicilato, se obtiene la ecuación siguiente:
reversible a pH = 3. Por otro lado, los resultados a pH = 11
V V graficados en la Fig. 6 revelan que la adsorción es reversible
q=− C + Co (6)
m m para Ce’ ≥ 0.011 mmol / L o q e’ > 0.091 mmol / g porque los
datos de desorción siguen el mismo comportamiento que la
isoterma de adsorción; pero no lo es para Ce’ ≥ 0.011 mmol /
Esta es la ecuación de una línea recta que expresa la
L o qe’ > 0.091 mmol / g porque los datos de desorción no
relación entre q y C durante la adsorción. Una vez que se
corresponden a la isoterma de adsorción.
alcanza el equilibrio, entonces q = q e y C = Ce y este punto se
El porcentaje de desorción del salicilato adsorbido se esti-
encuentra sobre la isoterma de adsorción. Esta etapa de adsor-
mó por medio de la ecuación siguiente:
ción se ilustra en la Fig. 4.
En la desorción, la concentración del salicilato aumenta
q o − q ′e
de 0 a Ce’, mientras que la masa de salicilato adsorbido se % Desorción= ×1 00% (10)
reduce de qo a q e’. El termino qo corresponde a la masa de qo − q Teo
salicilato que se adsorbió en la etapa de adsorción (q o = q e).
En este caso, la relación entre q y C se representa por la
ecuación lineal siguiente:
V
q=− C + q0 (7)
Moles adsorbidos, mmol/g

m
En el equilibrio q = q e’ y C = Ce ’. La etapa de desorción
se exhibe en la Fig. 4, que muestra un dato de adsorción y su
correspondiente para la desorción, la adsorción se designó con
a y la desorción con d. La desorción y adsorción se realizaron
usando la misma relación V / m y por lo tanto las líneas rectas
que las representan son paralelas (Fig. 4).
Si la adsorción es reversible entonces el nuevo equilibrio se
Concentración en el equilibrio, mmol/L
encuentra sobre la isoterma de adsorción y éste se representa en
la Fig. 4 como qe’ = qTeo y Ce’ = C’ Teo. Los valores de qTeo y Fig. 5. Isotermas de adsorción del proceso de adsorción-desorción T
C’Teo se pueden calcular resolviendo las ecuaciones siguientes: = 298 K y pH = 3.
164 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) R. Leyva Ramos et al.

0,24 3,0

2 9.8 2C
0,22 q=
1 + 6 7.8 0C0 .722 2,5
0,20

0,18

Moles adsorbidos, mmol/g

Moles adsorbidos, mmol/g

0,16 2,0
6 6.8 5C
q'e=0.091 mmol/g q=
0,14 1 + 1 7 1.1C 0. 705
0,12 1,5 pH=3 Carbón sin oxidar
pH=3 Carbón oxidado con HNO
3
0,10
pH=11 Carbón sin oxidar
0,08 1,0 pH=11 Carbón oxidado con HNO3

0,06

0,04 0,5
C'e=0.011 mmol/L Isoterma de la etapa de desorción
0,02 Isoterma de la etapa de adsorción
0,00 0,0
0,00 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,13 0,14 0,15 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4

Concentración en el equilibrio, mmol/L Concentración en el equilibrio, mmol/L

Fig. 6. Isotermas de adsorción del proceso adsorción-desorciónT = Fig. 8. Efecto de la oxidación del carbón en la isoterma de adsorción
298 K y pH = 11. del salicilato de sodio T = 298 K.

El numerador representa la masa de salicilato que se de- Efecto de la temperatura sobre la isoterma de adsorción
sorbió mientras que el denominador es la masa de salicilato El efecto de la temperatura sobre la isoterma de adsorción se
que se desorbería si la adsorción fuera reversible. Es impor- estudió determinando la isotermas a las temperaturas de 288,
tante aclarar que los porcentajes de desorción dependen de la 298 y 313 K y pH de 3 y 9. Las isotermas a pH = 9 se exhiben
relación V / m. en la Fig. 7, donde se observa que a medida que se aumenta la
El porcentaje de desorción se puede considerar como un temperatura, la isoterma de adsorción diminuye. Al incrementar
criterio de reversibilidad. La adsorción es reversible cuando el la temperatura de 288 K a 298 K se provoca una ligera disminu-
porcentaje de desorción es igual a 100 % pero no lo es cuando ción de la isoterma, pero el aumento de 298 K a 313 K provoca
es menor de 100 %. A pH = 3 los porcentajes de desorción una disminución considerable. En promedio, la capacidad de
varían de 18 % a 84 %, entonces a este pH la adsorción no es adsorción se reduce 5.3 % y 19.1 % cuando la temperatura se
reversible. A pH = 11 el porcentaje de desorción es igual a aumenta de 288 a 298 K y de 298 a 313 K, respectivamente.
100 %, cuando la masa de salicilato adsorbido al final del pro- Estos valores se estimaron comparando las masas máximas de
ceso de desorción, q e’, es menor de 0.091 mmol / g; y está en salicilato adsorbido, qm (Tabla 2). No se muestran los resulta-
el intervalo de 75 a 100 % para q e’ mayor de 0.091 mmol / g. dos del efecto de la temperatura a pH = 3 porque se observó un
En otras palabras, la adsorción es reversible cuando q e ’ es comportamiento muy similar que a pH = 9.
igual a qTeo, para pH = 11; esta condición se alcanza cuando la El comportamiento anterior puede explicarse consideran-
isoterma de adsorción y la de desorción se empalman. Una do que al aumentar la temperatura las moléculas de salicilato
posible explicación de estos resultados es que la adsorción en solución poseen más energía, por lo que requieren más
puede ocurrir por dos mecanismos, uno que es reversible energía para adsorberse. Por otro lado, la energía vibracional
(adsorción física) y otro que no lo es (adsorción química). La de las moléculas adsorbidas crece cuando se eleva la temper-
adsorción física ocurre exclusivamente para q ≤ 0.091 mmol / atura, y de esta manera, más moléculas adsorbidas poseen la
g, mientras que la adsorción física y química se llevan a cabo suficiente energía para desorberse [7]. Por lo anterior, a mayor
para q > 0.091 mmol / g. Esto implicaría que la adsorción ocu- temperatura se adsorbe un menor número de moléculas de
rre en dos tipos de sitios activos diferentes. salicilato.

Efecto de la oxidación del carbón en la isoterma de adsorción

0,5 Este efecto se investigó determinando la isoterma de adsor-
ción sobre el carbón sin oxidar y el carbón oxidado con
0,4 HNO3. Los resultados se exhiben en la Fig. 8 para pH = 3 y
Moles adsorbidos, mmol/g

pH = 11. Para estos valores del pH, la oxidación del carbón

0,3 provoca una disminución de la capacidad de adsorción, la cual
es más pronunciada a pH = 11 que a pH = 3, esto se observa al
0,2
T=15 °C comparar los valores de qm para el carbón sin oxidar y para el
T=25 °C
T=40 °C
oxidado (Tabla 2). Se puede puntualizar que a pH = 3 la masa
0,1 máxima de salicilato adsorbido se reduce 18.4 % y a pH = 11,
t
33.75 %. Por otro lado, la oxidación del carbón provoca que
0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
los sitios ácidos aumenten cinco veces, mientras que los sitios
Concentración en el equilibrio, mmol/L básicos disminuyen un poco más de tres veces. Resultados
Fig. 7. Efecto de la temperatura en la isoterma de adsorción del sali- similares se han reportado en otros trabajos sobre la oxidación
cilato de sodio sobre el carbón activado PE pH = 9. del carbón activado con HNO 3 [12].
Adsorción de salicilato de sodio en solución acuosa sobre carbón activado 165

2,8 30
2,6
2,4 20
2,2 KCl=0.01 M
pH=3, NaCl=0.0 M
KCl=0.1 M
2,0
Moles adsorbidos, mmol/g

pH=3, NaCl=0.1M
pH=5, NaCl=0.0 M 10
1,8 pH=5, NaCl=0.1 M

2
Carga, mC/m
1,6 pH=11, NaCl=0.0 M
pH=11, NaCl=0.01 M
1,4 0
pH=11, NaCl=0.1 M
1,2
1,0 -10
0,8
0,6
-20
0,4 PCC=7.13
0,2
0,0 -30
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Concentración en el equilibrio, mmol/L pH

Fig. 9. Efecto de la adición de NaCl en la isoterma de adsorción T = Fig. 10. Distribución de la carga del carbón sin oxidar contra el pH
298 K. de la solución.

La disminución de la capacidad de adsorción con la oxi- pacidad de adsorción. La anterior explicación fue sugerida por
dación del carbón se puede explicar considerando que la Cooney y Wijaya [15].
adsorción del salicilato de sodio ocurre principalmente en los
sitios básicos del carbón, entonces la disminución de la capa- Carga superficial del carbón
cidad de adsorción se puede atribuir a la reducción del número La distribución de la carga superficial del carbón con respecto
total de sitios básicos causada por la oxidación. Sin embargo, al pH de la solución se evaluó mediante un método de titu-
el porcentaje de reducción en la capacidad de adsorción no es lación. En la Fig. 10 se exhiben los resultados del carbón sin
proporcional al porcentaje de disminución de los sitios bási- oxidar. El punto de carga cero (PCC) del carbón es el pH al
cos. El carbón es un adsorbente heterogéneo y puede tener cual la carga superficial es neutra; el PCC del carbón PE sin
varios tipos distintos de sitios básicos. La concentración de los oxidar es igual 7.13. A pH menores del PCC, la superficie está
sitios básicos que se reporta en la Tabla 1 corresponde al total. cargada positivamente y a pH mayores del PCC, está cargada
El salicilato se puede estar adsorbiendo en un cierto tipo de negativamente. La distribución de la carga sobre el carbón
sitio básico y quizás por esta razón la reducción de la capaci- oxidado también se determinó y se encontró que el PCC del
dad de adsorción no es proporcional a la disminución de la carbón oxidado es de 3.05. Así, la oxidación del carbón dis-
concentración total de sitios básicos. minuye el PCC porque se formaron más sitios ácidos sobre la
superficie del carbón.
Efecto de la adición de NaCl en la isoterma de adsorción
En la Fig. 9 se muestra el efecto de la adición de NaCl sobre Mecanismo de adsorción
la isoterma de adsorción y se nota que la adición de NaCl no Con base en la discusión anterior, se puede suponer que la
afecta la capacidad de adsorción a pH = 3, esto puede atri- adsorción del salicilato de sodio no ocurre por medio de un
buirse a que el salicilato se adsorbe como ácido salicílico mecanismo único y es función de varios tipos de interacción
(H2 Sa) sin disociar, por lo que la adsorción no se debe a inte- entre el soluto y la superficie del carbón, así como del pH de
racciones electrostáticas que pudieran ser afectadas por la la solución.
presencia de los iones Na+ y Cl– . Sin embargo, la adición de A pH ≤ 3, la superficie está cargada positivamente, por lo
NaCl afecta considerablemente la adsorción del salicilato a que la especie que se adsorbe solo puede ser H 2 Sa, que es neu-
pH = 11, provocando un aumento de la capacidad de adsor- tra. En estas condiciones, las atracciones electrostáticas pare-
ción. En la Fig. 9 se nota que aumentando la concentración de cen no influir en la adsorción. A pH entre 5 y 7 la especie que
NaCl de 0.01 a 0.1 M, aumenta la cantidad de salicilato se adsorbe es H2 Sa–1 y la superficie está cargada positiva-
adsorbido. mente, por lo tanto la atracción electrostática entre la superfi-
Resultados similares se reportan en el caso de la adsor- cie y el anión favorece la acumulación del HSa –1 sobre la
ción de ácido benzoico sobre carbón activado, cuando se adi- superficie del carbón. La disminución en la capacidad de
ciona NaCl [15]. Este efecto puede explicarse suponiendo que adsorción al aumentar el pH se puede atribuir a que la carga
el salicilato se esta adsorbiendo como anión HSa– , pero no por también disminuye. A pH entre 7 y 11, la superficie esta car-
intercambio iónico. En estas condiciones, el anión salicilato gada negativamente y la especie presente es el HSa–1, por lo
adsorbido hace que la superficie del carbón esté cargada nega- tanto existe repulsión entre el anión y la superficie. La adsor-
tivamente, y por esta razón los aniones salicilato que están en ción ocurre al vencer esta repulsión electrostática.
solución son repelidos de la superficie y no se adsorben. Al
agregar cationes Na+ se considera que estos son atraídos por la
carga negativa del anión HSa– adsorbido, reduciendo la repul-
sión a los aniones salicilato y de esta manera se aumenta la ca-
166 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Conclusiones
La isoterma de adsorción del salicilato sobre el carbón activa-
do PE se ajustó mucho mejor mediante la isoterma de Praus-
nitz-Radke. Esta es muy dependiente del pH; la isoterma dis-
minuye drásticamente cuando el pH aumenta de 3 a 11 y la
máxima adsorción se obtiene a pH = 2. La isoterma también
depende de la temperatura y disminuye con la temperatura.
La oxidación del carbón activado con HNO3 aumenta la
concentración de los sitios ácidos pero disminuye la concen-
tración de los sitios básicos. La capacidad de adsorción del
carbón se reduce al oxidarlo, porque parte del salicilato se
adsorbe sobre los sitios básicos.
Los estudios de reversibilidad de la adsorción del salicila-
to demostraron que la adsorción no es reversible a pH = 3,
lográndose porcentajes de desorción entre 18 y 84 %. A pH =
11 la adsorción es reversible para q menores de 0.091 mmol /
g, pero no lo es para q mayores de este valor.
Para aquellos valores de pH entre 5 y 11, la adición de
NaCl causa un aumento de la masa de salicilato adsorbido,
porque los iones Na + interactúan con el ion HSa– adsorbido
sobre la superficie y, de esta manera, reducen la repulsión
entre los ion HSa– adsorbidos y los aniones HSa– que están en
solución. Sin embargo, a pH = 3, la adición de NaCl no afecta
la isoterma de adsorción porque el salicilato está adsorbido
como H 2Sa.
La adsorción de salicilato ocurre por dos mecanismos,
uno que es reversible y otro que no lo es. Además, el mecanis-
mo que predomina depende del pH de la solución.
R. Leyva Ramos et al.
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Liapis, A. I., Ed., Engineering Foundation, USA, 1986, 185-194.
16. Lide, D. R. Handbook of Chemistry and Physics, 76th Edition,
CRC Press, 1995-1996.
 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 167-174
Revisión
Análisis por inyección en flujo: herramienta clave para
la automatización analítica
María del Pilar Cañizares Macías*
Facultad de Química, Universidad Nacional Autónoma de México. Ciudad Universitaria, Coyoacán 04510, México, D.F.
Tel: 5622-3786; Fax: 5622-3723. E-mail: pilarm@servidor.unam.mx
Recibido el 30 de mayo del 2001; aceptado el 11 de enero del 2002
Resumen. El análisis por inyección en flujo (FIA, por sus siglas en
inglés: Flow Injection Analysis), en sus diferentes versiones, es una
de las formas más avanzada que el químico analítico tiene a su dis-
posición para manipular disoluciones acuosas o mezclar reactivos y
así, sin intervención humana, finalmente transportar al lugar de medi-
da los componentes de una o más reacciones químicas. En este traba-
jo se hace una revisión desde el inicio del Análisis por Inyección en
Flujo hasta nuestros días y el futuro que le espera a esta técnica
analítica que cada vez es más utilizada en los laboratorios de rutina
de diversas áreas (clínica, farmacéutica, ambiental y de alimento),
gracias a su gran versatilidad.
Palabras claves: Análisis por Inyección en Flujo, desarrollo del FIA.
Introducción
El uso de los métodos automáticos de análisis va ligado al
concepto de sustitución de una operación o medida estática
realizada manualmente por una operación y medida continua o
secuencial. Este concepto lo introdujo Skeggs en 1957 [1] al
describir el primer sistema de flujo continuo segmentado
empleando burbujas de aire para dividir el flujo de la muestra
en muchas porciones individuales. Este sistema se utilizó,
principalmente, en laboratorios de análisis clínicos en la déca-
da de los 60 cuando salieron al mercado los primeros autoana-
lizadores semiautomáticos. La importancia de estos métodos
radicaba principalmente en la disminución de la manipulación
del analista en el progreso de la reacción, obteniendo una me-
todología que solo podía ser “semiautomatizada” debido al
poco desarrollo en los programas de computación capaces de
procesar los datos obtenidos por el instrumento analítico, en
muchos casos, los datos eran recolectados por medio exclusi-
vamente de un graficador de carta.
Entre los métodos automáticos de análisis se encuentra el
Análisis por Inyección en Flujo (FIA: flow injection analysis)
concepto introducido por Ruzicka y Hansen en el primer
artículo publicado en 1975 [2] aunque en 1970 Nagy, Feher y
Pungor [3] describen el uso de electrodos de grafito para me-
diciones voltamperométricas de muestras inyectadas, por
medio de una jeringa hipodérmica, dentro de un portador, sin
segmentar el flujo. Este trabajo es quizás el primer informe a-
cerca de lo que podría ser lo que posteriormente se llamo
Abstract. Flow Injection Analysis (FIA) in its different versions, is
one of the most advanced technique that can be used to manage aque-
ous solutions or to mix reagents without the human hand by the ana-
lytical chemist and so, finally, carry to the measurement place the
compounds of one or more chemical reactions. A revision from the
beginning of the FIA until our days and the expected future for this
analytical technique, which is more and more applied in clinical,
pharmacological, environmental and food routine laboratories becau-
se of its good versatility, is made in this paper.
Keywords: Flow injection, development of FIA.
análisis por inyección en flujo. El impacto que esta técnica
provocó en muchos investigadores resultó en el desarrollo de
nuevas metodologías por FIA, especialmente en el análisis de
aguas. Para 1979 se contaba ya con 80 publicaciones y hoy, a
25 años de los inicios del FIA, el número de publicaciones
estimado es de 10,000.
Análisis por inyección en flujo
En la década de los sesenta el método automático continuo de
análisis más utilizado fue sin duda el análisis por flujo seg-
mentado (SFA: segmented flow analysis). En esta técnica las
muestras son aspiradas secuencialmente y entre ellas se sitúan
burbujas de aire que separan (segmentan) el flujo establecido,
incluido un ciclo de lavado para evitar contaminación entre
muestras; las burbujas de aire se eliminan antes de que alcan-
cen la celda de flujo localizada en el detector. El análisis por
inyección en flujo tiene su antecedente en el SFA; pero en
FIA, a diferencia del SFA, el flujo no esta segmentado y la
muestra es inyectada en lugar de aspirada, en el momento de
la detección no se alcanza ni el equilibrio físico ni químico.
En la Fig. 1 se muestran las configuraciones generales para
FIA y SFA.
En los primeros trabajos de FIA se presuponía la existen-
cia de un flujo turbulento para explicar la ausencia de conta-
minación mutua de dos muestras inyectadas sucesivamente en
el flujo [2]. En trabajos publicados posteriormente White y sus
168 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
A)
FLUJO
PORTADOR MUESTRA PORTADOR
B)
AIRE
AIRE
AIRE
FLUJO
AIRE
LAVADO MUESTRA LAVADO
Fig. 1. A) Configuración básica para Análisis por Inyección en Flujo;
B) Configuración básica para Análisis por Flujo Segmentado.
colaboradores [4], Stewart [5] y Ruzicka y su grupo [6] de-
mostraron que para sistemas de flujo continuo el número de
Reynolds era casi siempre inferior a 2000, por lo que se puede
asegurar que existe un régimen laminar en el transporte de
materia a través de los tubos, mientras que para el SFA el
número de Reynolds es mayor o igual a 3000, debido al régi-
men turbulento que se lleva a cabo.
La existencia de un régimen de flujo laminar proporciona
importantes ventajas al FIA: a) zona de muestra bien definida,
b) caudales reducidos, y por lo tanto, consumo pequeño de
reactivos y c) alta frecuencia de muestreo, lo que simplifica el
montaje al no ser necesario una presión elevada ni burbujas
separadoras de aire para evitar la contaminación mutua de
muestras al ser inyectadas sucesivamente.
Dispersión controlada: fundamento del FIA
Las condiciones de trabajo habituales del FIA ocasionan que
el bolo de muestra inyectado no alcance el equilibrio químico
ni físico, además de originar que este se diluya (disperse) en la
disolución portadora o en el reactivo
El régimen laminar produce una zona bien definida del
bolo de muestra inyectado produciéndose un gradiente de con-
centración a lo largo de todo el bolo. En la Fig. 2 se muestra la
dispersión que sufre la muestra a lo largo de una configu-
ración FIA, al ser un sistema continuo se obtiene una señal
María del Pilar Cañizares
transiente cuyo máximo corresponde a la parte del bolo menos
diluida.
Existen dos mecanismos que contribuyen a la dispersión
del bolo de muestra inyectado:
a) El transporte por convección desarrollado en condiciones de
flujo laminar, que origina un perfil parabólico donde la velo-
cidad lineal de las moléculas en las paredes del tubo es igual
a cero, mientras que las moléculas que se encuentran en el
centro del tubo viajan al doble de la velocidad media; y
MUESTRA
b) El transporte por difusión debido a la formación de gra-
dientes de concentración (horizontales y/o verticales) en
diferentes momentos del transporte por convección.
Por lo tanto, la forma de una señal FIA (pico) dependerá
del tiempo en el que el bolo de muestra se encuentra dentro
del sistema. A tiempos demasiado cortos la dispersión es prác-
ticamente cero y no se genera un gradiente de concentración
en el bolo inyectado; por otra parte, tiempos de estancia largos
ocasionan una dispersión muy acusada originando picos muy
anchos. Debido a esto es necesario establecer cual es el tiem-
po de residencia más adecuado, siendo un parámetro difícil de
decidir. Generalmente, la señal óptima es aquella en el que el
AIRE
MUESTRA
transporte por convención y por difusión influye de la misma
manera, no predominando uno sobre el otro, aunque evidente-
mente esta decisión dependerá de la reacción que se va a lle-
var a cabo.
Las características del pico (tiempos de arranque, residen-
cia y ancho de banda y altura o área del pico) dependen de las
características hidrodinámicas del sistema FIA, caudal, volu-
men de inyección, longitud del reactor, etc., siendo difícil es-
tablecer un modelo teórico de la dispersión capaz de predecir
Dirección del
Flujo
Portador Portador
Señal Analítica
h
Inyección
∆T
Dirección del
Flujo
T(s)
Fig. 2. Señal obtenida en una configuración FIA. En la parte superior
se muestra la dispersión que sufre el bolo de muestra en el tubo abier-
to al pasar a lo largo de la configuración; h, altura; DT, ancho de
pico.
Análisis por inyección en flujo: herramienta clave para la automatización analítica. Una revisión de su historia
el comportamiento de un bolo inyectado en una configuración
FIA. Generalmente los sistemas FIA tiene más de un canal por
lo que debe tenerse presente las confluencias (tamaño y geo-
metría), la geometría de la celda de flujo, las conexiones, el
volumen de inyección, etc.
Diversos autores han discutido la aplicación de algunos
modelos teóricos en las condiciones experimentales del FIA
entre los que destacan el “modelo de Taylor” que solo es
aplicable a caudales bajos y reactores de gran longitud [7, 8,
9, 10] y el “modelo de tanques en serie” utilizado por Ruzicka
y Mottola que esta basado en el desarrollo de platos teóricos
como en cromatografía líquida. La validez del modelo es
dudosa cuando N (número de platos teóricos) es pequeño, lo
que ocurre cuando la longitud del reactor no es extremada-
mente larga, lo que es habitual en FIA.
Es así como el coeficiente de dispersión de Ruzicka es el
parámetro más adecuado para caracterizar la dispersión en un
sistema FIA y fue propuesto por Ruzicka y sus colaboradores
en 1975 [2]. Se trata de una medida directa de la dilución que
sufre el trozo de muestra inyectado cuando pasa por el detec-
tor. Se define como la relación matemática de concentraciones
de la muestra antes (C o) y después (C) de que haya tenido
lugar el proceso de transporte en una configuración de FIA, es
decir el inverso del factor de dilución:
D = Co / C
Este parámetro define el grado de dilución que ha sufrido
una muestra en diferentes momentos del transporte. A cada
punto del pico FIA le corresponde un coeficiente de disper-
sión, así en el máximo de la curva D = Co / Cmax.
Como siempre existe una relación entre la señal analítica
detectada (absorbancia, milivoltios, intensidad de fluorescen-
cia, etc.), el registro de la misma (altura) y la concentración de
la muestra o de su producto de reacción (C) el coeficiente de
dispersión puede calcularse a partir de la altura de la señal sin
sufrir dispersión y de la señal registrada en el diagrama; de
esta manera D = Ko h o / K1 h max, donde Ko y K1 son las cons-
tantes de proporcionalidad que ordinariamente tienen el
mismo valor ya que a las concentraciones trabajadas no varía
la relación entre la concentración y la señal o altura. Por lo
tanto el coeficiente de dispersión es una relación de alturas: D
= h o / h max.
Desde el punto de vista práctico la dispersión del bolo de
muestra inyectado dependerá de las condiciones hidrodinámi-
cas del sistema. La dispersión global del sistema puede con-
siderarse como la sumatoria de las dispersiones originadas en
las tres parte del sistema FIA: la dispersión originada tanto
por el volumen de muestra como por los aspectos geométricos
del sistema de inyección, la dispersión por la geometría del
reactor y el caudal establecido y por la dilución provocada por
la geometría de la celda de flujo. Con este principio se puede
establecer, de manera general, que la altura de la señal FIA
depende principalmente del tiempo de residencia del bolo de
muestra inyectado en el sistema. A mayor tiempo de residen-
cia mayor dispersión, por lo que reactores largos o caudales
169
bajos incrementan la dispersión. Por otra parte, volúmenes de
inyección pequeños incrementan la dilución de la muestra dis-
minuyendo la altura del pico FIA.
Cuando ocurre una reacción química, considerar la dis-
persión como un fenómeno puramente físico como consecuen-
cia de proceso de convección o difusión no es correcto. Los
aspectos cinéticos deben ser considerados en FIA ya que la
medición se realiza en condiciones de no-equilibrio, esta con-
tribución no es tan significativa en SFA debido a que en este
caso ya se ha alcanzado el equilibrio en el momento de la
medición.
Una reacción química puede alterar el valor del coefi-
ciente de dispersión en FIA de dos maneras: a) cuando se
mide la propiedad del producto de la reacción que se produce
en el flujo, que es la situación habitual; en este caso la con-
tribución química hace que el valor de la dispersión práctica
disminuya por lo tanto cuanto mayor sea la velocidad de reac-
ción menor es la dispersión. b) Cuando se mide la propiedad
de uno de los componentes de la reacción que desaparece en
el flujo con el tiempo. En este caso la contribución química
hace aumentar el valor del coeficiente de dispersión. Cuanto
mayor sea la velocidad de reacción mayor es la dispersión.
Painton y Mottola [11] han considerado este último caso en un
artículo muy interesante donde determinan la contribución
cinética, debido a la desaparición del dicromato, de la reac-
ción entre el dicromato (muestra monitoreada a 352 nm) y el
ácido ascórbico (portador) que está fuertemente influenciada
por el pH ya que al disminuir el pH se aumenta la velocidad
de reacción aumentando la dispersión.
Pasado, presente y futuro del análisis
por inyección en flujo
Para 1975 Ruzicka y Hansen publicaron el primer artículo de
una serie de informes sobre análisis por inyección en flujo. En
este artículo describen los conceptos de los sistemas de flujo
continuo segmentado y no-segmentado y sus diferencias. Para
ejemplificar esas diferencias realizan la determinación colori-
métrica de naranja de metilo, de fosfatos, por el método del
azul de molibdeno, y la determinación electroquímica de amo-
nio. En todas las determinaciones la frecuencia de muestreo
era superior a las 200 inyecciones por hora con una precisión
entre el 1 y 2 %. En el segundo artículo de esta serie Ruzicka
y Stewart [12] describen los principales parámetros que se
deben optimizar en un sistema FIA: volumen de muestra,
diámetro del tubo, longitud del tubo, etc., ejemplificada por la
determinación de fósforo en plantas.
Para 1979 Hansen y Ruzicka publicaron un artículo donde
demostraban la confiabilidad del FIA para determinaciones
analíticas para tres parámetros diferentes [13]: cloruros, fos-
fatos y una titulación de un ácido fuerte con una base fuerte. La
determinación de cloruros se basa en la reacción con tiocianato
de mercurio liberando tiocinato que reacciona cuantitativa-
mente con Fe(III) formando un complejo color rojo que es pro-
porcional a la concentración de cloruros en disolución. La con-
170 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) María del Pilar Cañizares

Tabla 1. Determinaciones analíticas por FIA en muestras de agua.

Analito Tipo de agua Detección Concentraciones Frecuencia de muestreo Referencia
Fe total Natural Espectrofotometría 0.1-30 ppm 180 m / h 15
Pb, Cd, Zn, Cu Agua de mar Absorción atómica Cu 5-20 µg / L 180-250 m / h 16, 19
Zn 5-20 µg / L
Pb 25-100 µg / L
Cd 205-10 µg / L
pH, alcalinidad, Agua potable Potenciometría PH 3-11 100-150 m / h 17
iones totales Espectrofotometría Alcalinidad 5.0-600 µg / mL
Iones totales 0.7-2.8 meq / L
Cl-2.8-27 meq / L Cl-
Ca y Mg Agua potable Espectrofotometría Ca 2.0-25 µg/mL; 25-400 µg / mL 30-35 m / h 18
Ca y Mg 2.0-280 µg / mL
DQO Agua residual Espectrofotometría 0-100 µg / mL 20, 27
Mn Agua de mar Quimiluminiscencia 1-10 nM 10 m / h 21
Carbono orgánico Agua residual Espectrofotometría 0.1-2.0 µg C / mL 45 m / h 22
y natural
Fe III y Fe II Agua sintética Espectrofotometría FeII 0.1-120 µg / mL
Fe total 0.2-120 µg / mL 40-60 m / h 23
Fosfatos Agua de mar Espectrofotometría 0.75-4 µM 90 m / h 24
Al especiación Agua natural Espectrofotometría 0.1-180 µg / L 60 m / h 25
Cl– y SO4 2– Agua natural Espectrofotometría 10-500 µg / mL 200 m / h 26

figuración es muy sencilla, de un solo canal, obteniendo una
frecuencia de muestreo de aproximadamente 120 / h con una
precisión menor al 2 %. Para la titulación de un ácido fuerte
con una base fuerte, las muestras ácidas se inyectan dentro del
sistema de flujo continuo utilizando una cámara de mezclado
para controlar el gradiente de dilución de las muestras. El por-
tador utilizado es NaOH que contiene azul de bromotimol
como indicador. En este caso no se mide la altura del pico FIA
sino el ancho a una altura fija, generalmente, cuando se rea-
lizan titulaciones, el ancho del pico se mide a la mitad de éste.
En otras aplicaciones Krug y su grupo [14], realizaron la
determinación turbidimétrica de sulfato en muestras acuosas
en un intervalo de concentraciones de 40 a 140 ppm y con una
velocidad de muestreo de 180 / h y precisión de 0.85 %. En
este trabajo se presenta los efectos de la concentración del
reactivo, el caudal del reactivo y la longitud de los reactores.
Como se puede ver los primeros trabajos realizados por
FIA estuvieron enfocados a contaminantes en agua, debido a
que se trata de una matriz fácil de trabajar y en muchos casos
con pocas interferencias ya que generalmente no se trabajaba
con aguas residuales. En la Tabla 1 se muestran algunas de las
determinaciones que se han realizado por FIA en distintos
tipos de agua.
Para mediados de la década de los 80’ s las metodologías
FIA ampliaron su campo de trabajo realizando determina-
ciones simultáneas y preconcentraciones en configuraciones
cada vez mas complicadas pero más eficientes y con una alta
probabilidad de automatización. Luque de Castro y su grupo
[28] describen una configuración en la que un bolo de muestra
queda dentro de un sistema cerrado permitiendo que éste pase
repetidamente a través de un detector simple (espectrofotó-
metro) hasta que la muestra se dispersa casi en su totalidad
dentro del portador. La señal obtenida esta dada por una serie
de picos cuyos máximos o mínimos define la curva cinética de
la reacción que se está llevando a cabo. Por medio de esta
configuración es posible determinar los parámetros cinéticos
de una reacción así como también la posible aplicación en
métodos de concentración o dilución de muestras.
Este mismo grupo de trabajo [29] desarrolló, en 1987, un
método para realizar la determinación simultánea de pH, alca-
linidad y concentración iónica total en agua potable. El pH se
midió por medio de un electrodo combinado de pH insertado
en el flujo portador. La alcalinidad y los iones totales los de-
terminaron por medio de dos titulaciones utilizando naranja de
metilo para la determinación de alcalinidad y fenolfataleina
para los iones totales, además para esta última determinación
utilizan una microcolumna catiónica.
El uso de resinas y fases estacionarias en configuraciones
FIA ha permitido que los niveles de concentración de los ana-
litos determinados sean cada vez más pequeños ampliando el
campo de automatización por medio del FIA. Este tipo de
microcolumnas generalmente se han insertado en sistemas
FIA acoplados a detectores de absorción atómica donde han
tenido un gran desarrollo. Sven Olsen y sus colaboradores
[30] utilizaron una microcolumna de Chelex 100 para pre-
concentrar en línea plomo, cadmio y zinc, en muestras de a-
gua de mar, alcanzando concentraciones de 10 ppb para plo-
mo y de 1 ppb para los otros dos. La velocidad de muestreo
Análisis por inyección en flujo: herramienta clave para la automatización analítica. Una revisión de su historia 171

Tabla 2. Determinaciones enzimáticas por FIA.

Enzima Parámetro Referencia
Alcohol deshidrogenasa Etanol en suero (inmovilización en CPG*) 34
Glucosa oxidasa Glucosa (inmovilización en nylon) 35
Glucosa oxidasa / peroxidasa Glucosa (co-inmovilización en CPG) 36
β-D-glucoronidasa Ácido glucónico, suero 37
β-lactamasa Penicilina (inmovilización en CPG) 38
Ureasa Hg (II) por inhibición de la ureasa 39
β-galactosidasa Sodio en suero 40
*CPG: Vidrio de poro controlado

fue entre 30 y 60 muestras por hora dependiendo del tiempo
de pre-concentración requerido. En otro trabajo, Zhaolun Fang
y su grupo [31] realizan el estudio de 122 resinas catiónicas
débiles además de Chelex 100 y 8-quinolol para la pre-conce-
tración de Cd, Zn, Pb y Cu, alcanzado niveles de hasta 0.03
µg / L para el Zn en 8-Quinolol.
La incorporación de microcolumnas en los sistemas FIA
llevó consigo la incorporación de reactores enzimáticos au-
mentando la selectividad en muchas de las determinaciones
que se habían estado realizando. La mayoría de las investiga-
ciones están enfocadas a la inmovilización de la enzima en
esferas de vidrio de poro controlado utilizada principalmente
por su simplicidad y las buenas propiedades que ofrece el
vidrio como matriz inerte, aunque los grandes avances que ha
tenido la electroquímica ha permitido el desarrollo de sensores
enzimáticos con mayor sensibilidad.
Uno de los primeros trabajos en considerar las enzimas
inmovilizadas en configuraciones de flujo no segmentado fue
el realizado por Gorton y Ogren [32] donde inmovilizan glu-
cosa oxidasa y ureasa para la determinación de glucosa y urea
en sangre y orina. Para la determinación de ambos parámetros
en este tipo de muestras es necesaria una membrana dializado-
ra situada entre el sistema de inyección y el reactor, con obje-
to de eliminar interferencias de matriz.
Diversos métodos potenciométricos para la determinación
de parámetros clínicos han sido puestos a punto basándose en
el uso de electrodos enzimáticos. Uno de los requisitos para
que un sensor enzimático pueda utilizarse en un sistema de
flujo es que la membrana sea resistente, ya que, además de
soportar las características de la corriente, su manipulación es
constante. Muchos métodos de inmovilización de enzimas
para la construcción de electrodos proporcionaban membranas
frágiles y la integridad mecánica de la membrana portadora de
la enzima se dañaba después de un periodo corto de uso. Ma-
scini y Palleschi [33] realizaron la determinación potenciomé-
trica simultánea de glucosa y urea en suero inmovilizando las
ånzimas sobre mallas de nylon que se fijan en sensores de oxí-
geno y amonio obteniéndose un buen funcionamiento y resis-
tencia mecánica
Muchas de las investigaciones a lo largo de la década de
los 80’s estuvieron enfocadas a determinaciones enzimáticas
por FIA principalmente con aplicaciones clínicas alcanzando
un gran número de publicaciones. En la Tabla 2 se muestran
algunos de estos ejemplos.
Ya para la última década del siglo XX el desarrollo en
FIA estuvo enfocado principalmente al desarrollo de sensores
químicos y bioquímicos (que incluye a los sensores enzimá-
ticos) el acoplamiento de extracciones en línea (líquido-líqui-
do, líquido-sólido, etc.) y el pre-tratamiento de muestras cn
línea.
Los sensores en flujo donde se integra la separación con
la detección se basan en el uso de resinas de intercambio o
fases estacionarias como C18 que se empacan en una celda de
flujo localizada en un detector no destructivo (por ejemplo
fotómetro o fluorímetro) donde los analitos o los prjductos de
reacción son inmovilizados temporalmente. Este tipo de sen-
sores implica un gran intervalo de aplicaciones. Por ejemplo,
el Cr(VI) se puede cuantificar reteniendo el producto de su
reacción con difenilcarbazida en una resina de intercambio
catiónico [41]. Otra determinación donde se retiene el produc-
to de reacción en una celda fluorimétrica empacada con una
resina aniónica, es la reportada por #hen. y sus colaboradores
para la determinación de c‰anuros donde se utiliza una confi-
guración de flujo continuo de confluencia de zonas para in-
yectar simultáneamente la muestra y el reactivo piridoxal 5-
fosfato [42]. También para la determinación de aluminio [43]
en agua Cañizares y Luque de Castro utilizan un sensor en
flujo fluorimétrico donde el aluminio reacciona con la hidra-
zona del salicilpicolinoilaldehido (SAPH) para formar un
complejo fluorescente que se retiene en C18 que esta empaca-
do en la celda de flujo localizada en el paso óptico del instru-
mento. Utilizando la misma reacción pero una configuración
diferente los mismos autores logran discriminar entre las
diferentes especies de aluminio [44] (aluminio ácido reactivo,
aluminio total monomérico, aluminio monomérico no lábil y
lábil) por medio de una modificación al método Driscoll [45].
Existen otro tipo de sensores en flujo que se basan en la
integración de la reacción y la detección por la inmovilización
de uno o varios reactivos y/o el catalizador (que puede ser una
enzima) en un soporte apropiado. La inmovilización de un
reactivo Localizado en la celda de flujo se puede utilizar para
la determinación de una gran variedad de especies por dife-
rentes principios de detección. En un artículo reportado por
Wang se explican algunos ejemplos representativos de este
tipo de inmovilización utilizando electrodos con la superficie
modificada e insertados en un sistema de flujo continuo [46].
En uno de estos sistemas, un electrodo de carbono es modifi-
cado inmovilizando Fe(III) / Fe(II) que responden ampe-
172 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
rométricamente a varios oxidos de nitrógeno [47]. Para la
determinación de polifenoles en aceite de oliva se ha acoplado
una extracción líquido-líquido en línea con un sensor localiza-
do en la celda de flujo de un espectrofotómetro. El reactivo de
Folin Cicalteau se inmoviliza en una resina aniónica y los
fenoles son extraídos, con bicarbonato de sodio, realizando un
cambio iterativo del flujo portador. Así los fenoles extraídos
reaccionan con el reactivo inmovilizado para formar azul de
molibdeno que también permanece retenido y se lee espectro-
fotométricamente. En este sensor se logra integrar la reacción
derivatizadora, la retención y la detección in situ [48].
También se han desarrollado sensores bioquímicos basa-
dos en la detección directa del potencial de membrana induci-
do por una enzima inmovilizada que no requiere de la intro-
ducción de una referencia interna [49], o la inmovilización de
la enzima ureasa o penicilasa en una membrana selectiva para
el producto de reacción [50] sí como algunos biosensores
potenciométricos y conductimétricos para la detección de pes-
ticidas organofosforados [51]. Algunos de estos biosensores
se basan en la inmovilización de una enzima en composites de
grafito con una resina epóxica [52] pero pocos de los biosen-
sores electroquímicos están acoplados a un sistema de flujo
continuo debido a los problemas hidrodinámicos del sistema.
Algunos de los electrodos en flujo se basan en el acoplamien-
to de un compuesto electroactivo con una gran resistencia
mecánica para soportar el flujo continuo como es el composite
de PVC-grafito [53, 54] y electrodos de grafito modificados
por medio de enzimas inmovilizadas, como el desarrollado
por Yarapolov y su grupo para la determinación de fenoles
[55] o el biosensor para fosfatos utilizado por Gavalas y
Chaniotakis [56].
Actualmente el Análisis por inyección en flujo esta enfo-
cado al pretratamiento de muestras en línea para evitar la
mayor manipulación de las mismas. Varios investigadores han
logrado acoplar estos dos sistemas con gran éxito. Karlberg
[57] y su grupo así como el grupo de Zhao-Lung Fang [58]
han combinado el pretratamiento de muestras con técnicas de
inyección en flujo y técnicas de inyección secuencial acopla-
das a electroforesis capilar.
Dentro del campo de análisis de alimentos donde el pre-
tratamiento de la muestra suele ser laborioso y por lo tanto
produce errores significativos en la cuantificación de los ana-
litos, las determinaciones por FIA son una alternativa idónea.
Noguira y su grupo [59] realizaron la determinación conduc-
timétrica de cloruros en leche utilizando un sistema de inyec-
ción secuencial y una cámara de diálisis en la configuración
FIA para eliminar interferencias de proteínas y sólidos sus-
pendidos. En al análisis de vinos muchos parámetros se han
automatizado disminuyendo el tiempo de análisis y de reac-
tivos, por ejemplo: para la determinación selectiva de dióxido
de sulfuro y ácido sulfhídrico se ha utilizado una membrana
de separación para difusión de gases que elimina los pasos de
destilación y titulación del método convencional [60]; para la
determinación electroquímica simultánea de dióxido de azufre
y ácido ascórbico [61] y en la determinación de azúcares
reductores donde han utilizado un sistema automatizado de
María del Pilar Cañizares
adiciones estándar y detección espectrofotométrica [62] y un
sistema de inyección secuencial con una unidad de diálisis
[63], en ambos métodos existe una ahorro apreciable de tiem-
po, entre 11 y 18 muestras por hora, y una precisión del 2 %
aproximadamente.
Dentro del campo farmacéutico, Wei Li [64] desarrolló un
sistema de análisis por inyección en flujo en la modalidad de
“stopped-flow” para la determinación fluorimétrica simultanea
de vitaminas B1, B2 y B6 en complejos vitamínicos realizando
una disolución de las tabletas sólidas en línea; Almendral [65]
y su grupo de trabajo han realizado una extracción líquido-
líquido en línea de Bi(III) en productos para la gastritis y
úlcera duodenal. La determinación se basa en la formación un
complejo entre el tetrafeniarsenioso y el tetrayodobismutato
(III), el producto de reacción se extrae con cloroformo utilizan-
do una cámara de diálisis y se lee a 363 nm.
El análisis por inyección en flujo es una técnica tan ver-
sátil que se ha podido realizar estudios en línea y en vivo para
la determinación de calcio en sangre insertando un tubo de
microdiálisis en la oreja de un conejo obteniéndose una pre-
cisión del 3 % [66]. También se ha logrado producir, a nivel
microescala, ácido maléico a partir de ácido fumárico el cual
se aspiró a través de un sistema de flujo continuo donde se
acoplaron reactores enzimáticos, con fumarasa y malato
deshidrogenasa inmovilizadas, obteniéndose una conversión
de hasta el 95 % y una precisión del 3 % [67].
Otra metodología bastante interesante debido a la confi-
guración utilizada es la desarrollada por Danielsson y Valcár-
cel [68] donde evalúan la cantidad de nicotina en rapé uti-
lizando membranas líquidas. La muestra sólida se pasa direc-
tamente, sin ningún pretratamiento, a través de la unidad de
membrana líquida donde la nicotina pasa de la membrana
(polipropilen-n-undecano) a un receptor ácido. Entre cada
muestra la membrana se regenera añadiéndole n-undecano.
La tendencia de las metodologías por análisis por inyec-
ción en flujo es disminuir los pasos de pretratamiento de mues-
tras y miniaturizar las metodologías de forma automatizada para
que los errores de manipulación sean menores y aumente la pre-
cisión de los resultados, ya que es posible llevar a cabo varias
determinaciones de una misma muestra en un tiempo menor de
análisis lo que conlleva a una gran disminución de reactivos y
por lo tanto de desechos, claves para mejorar el control de cali-
dad de las mediciones analíticas. En un laboratorio de rutina,
muchas veces, no es posible realizar las determinaciones por
triplicado ya que se tienen que analizar muchas muestras y el
costo de análisis sería muy elevado, lo que hace que el análisis
por inyección en flujo sea la mejor alternativa en una gran can-
tidad de análisis. Existen varios trabajos que demuestran la dis-
minución de tiempo y costos así como la alta precisión en las
determinaciones por FIA. Por ejemplo, se ha realizado la deter-
minación fluorescente de L-carnitina en preparados farmacéuti-
cos obteniéndose una precisión del 0.96 % y una reproducibili-
dad para 144 muestras del 1.47 % [69].
Shiowatana [70] y su grupo diseñaron un sistema de flujo
donde realizan una extracción secuencial para la especiación
de metales en suelos, demostrando que el tiempo de extrac-
Análisis por inyección en flujo: herramienta clave para la automatización analítica. Una revisión de su historia
ción utilizando este sistema disminuía de sobre manera: de 4 a
5 horas en comparación con el método convencional que es de
2 a 3 días. En un trabajo realizado por Kolev y sus colabo-
radores demuestran que se obtiene una precisión adecuada,
entre el 1 y 4 %, en la determinación amperométrica de
fenoles en agua utilizando una cámara de pervaporación para
eliminar la etapa de filtración o de extracción en fase sólida
que se requiere para los métodos cromatogáficos [71].
En un estudio realizado para la determinación de nitratos
y nitritos en agua se comparó el método convencional [72]
con el método utilizado por FIA en cuanto a tiempo y costos
por determinación [73]. En ambos métodos la determinación
se basa en la reacción de los nitritos con la sulfanilamida para
formar la sal de diazonio que reacciona con el N-1-naftiletil-
endiamina para medir un azo compuesto que se lee espectro-
fotométricamente a 540 nm. En el caso de los nitratos estos se
reducen a nitritos por medio de una columna de cadmio. El
ahorro que se logró utilizando la metodología por FIA fue del
85 % por determinación, con una frecuencia de muestreo de
37 determinaciones por hora contra 5 logradas por el método
convencional.
Conclusiones
La mayoría de los programas de investigación, a nivel mun-
dial, en Química Analítica están enfocados a mejorar la cali-
dad en los resultados analíticos. El Análisis por Inyección en
Flujo es una de las técnicas en la que este objetivo se puede
cumplir y es una de las formas más sencillas para automatizar
una determinación.
Dada su trascendencia en la calidad analítica, la automati-
zación de las etapas del proceso analítico, que conectan la
muestra con el instrumento, es una de las metas más impor-
tantes de la química analítica contemporánea. Sin embargo la
automatización de estas etapas no es una tarea fácil. Por esta
razón, es que aun continúan en uso metodologías manuales en
la gran mayoría de los laboratorios analíticos de control.
Paralelamente se ha ido demostrando en los últimos años,
que para la automatización de las etapas preliminares del pro-
ceso analítico, las técnicas continuas, particularmente el
Análisis por Inyección en Flujo, es la forma más versátil, fle-
xible y de menor costo para realizar una gran cantidad de
operaciones del proceso analítico. Además de la adición de la
muestra, dilución, calentamiento, mezclas, adición de reacti-
vos (operaciones que igualmente se pueden realizar con anali-
zadores discontinuos en discreto), con FIA se pueden realizar
procesos de diálisis, pervaporación, destilación, extracción
con disolvente y otras separaciones con un alto grado de pre-
cisión, exactitud y rapidez.
También es importante destacar que, además de involu-
crar costos muchísimo menores que los analizadores discon-
tinuos en discreto, tienen mayor compatibilidad con diferentes
detectores (potenciométricos, amperométricos, espectrofoto-
métricos, AA, fluorescencia, etc).
173
Por lo tanto, se puede afirmar que la altísima relación efi-
ciencia / costo que proporcionan las técnicas FIA para realizar
procesos automáticos, lo hace altamente rentable y lo sitúa
como una alternativa idónea para la obtención de resultados
de gran calidad.
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 175-179

Comunicación Técnica

Optimización del método de determinación de arsénico en aguas potables

por espectrofotometría UV-Vis con dietil ditiocarbamato de plata
F. Pérez Moreno,1 F. Prieto García,*1 E. Barrado Esteban,2 A. Rojas Hernández,3 y M. A. Méndez Marzo4
1 Centro de Investigaciones Químicas. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo. Carretera Pachuca-Tulancingo,
km 4.5. Pachuca 42076, Hidalgo, México. E-mail: prietog@uaeh.reduaeh.mx
2 Departamento de Q. Analítica. Fac. Ciencias. Universidad de Valladolid. Prado de la Magdalena s/n. Valladolid 47005, España
3 Área de Química Analítica. Departamento de Química. Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa. México 09340, D.F.
4 Centro de Investigaciones de Materiales y Metalurgia. Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo.

Carretera Pachuca-Tulancingo, km 4.5. Pachuca 42076, Hidalgo, México

Recibido el 1o. de octubre del 2001; aceptado el 18 de febrero del 2002

Resumen. Se lleva a cabo la optimización de la actual Norma Oficial
Mexicana NOM-AA-46-1981, que establece el método espectrofo-
tométrico para la determinación de arsénico con dietilditiocarbamato
de plata, en aguas naturales, residuales, estuarias y costeras. El límite
de detección establecido en dicho documento (0.10 mgL–1) no per-
mite definir valores reales en aguas de pozos a los niveles estableci-
dos por las normativas Nacionales e Internacionales (< 0.050 mgL–1).
Optimizando mediante un diseño experimental basado en parámetros
de Taguchi los volúmenes de HCl, tiempo de calentamiento, longitud
de onda y volumen de aforo, se consigue disminuir el límite de detec-
ción hasta 3.5 veces (0.028 mgL –1), lo que permite obtener valores
analíticos comparables con los obtenidos por absorción atómica (ge-
neración de hidruros).
Palabras clave: Arsénico, cuantificación, agua, UV-visible, ditiocar-
bamato de plata.
Abstract. The optimisation of the current NOM-AA-46-1981 is per-
formed. This establishes the spectrophotometric method for the deter-
mination of arsenic with silver diethyldithiocarbamate, in natural,
waste, estuary and seawaters. The detection limit (0,10 mgL–1), does
not permit to define real values in wall waters in the established le-
vels by the National and International regulations (< 0,050 mgL–1).
Optimizing with a Taguchi parameter design, the HCl volumes, time
of heat, wavelength and even volume, we could decrease the detec-
tion limit in 3.5 times (until 0.028 mgL–1), that could be comparated
with the results obtained by Atomic Absorption (hydride generation).
Keywords: Arsenic, cuantification, water, UV-visible, silver diethyl-
ditiocarbamate.

Introducción La toxicidad por metales es consecuencia de su no

La ciudad de Zimapán, Estado de Hidalgo (México), se en-
cuentra ubicada dentro del distrito minero del mismo nombre,
cuyo contenido de As natural es evidente debido a la presencia
de minerales arsenicales: arsenopirita, FeAsS o FeS 2 .FeAs 2
[1]; Rejalgar, As2 S2 ; Oropimento, As2S 3 ; Loellingita, FeAs 2
y Tennantita, Cu12As4 S13 [2; 3] entre otros. Así también, las
actividades mineras para la extracción de Pb, Zn, Cu, Fe, Ag y
Au de los recursos minerales de la zona [1, 4] han traído como
consecuencia un incremento en el contenido de As en las a-
guas de los pozos de la región, rebasando los límites máximos
permitidos por la Normativa Oficial Mexicana [NOM-127-
SSA1-1996] [5] (valores reales que oscilan desde 0.02 a 1.25
mgL –1 ), por lo que la población que actualmente se estima es
cercana a los 42,000 habitantes [6], están afectadas por este e-
lemento.
Las concentraciones máximas permisibles para As en
aguas de consumo humano, emitidas por la Norma Oficial
Mexicana [5], Organización Mundial de la Salud [7], Estados
Unidos de América [8] y Boletín Oficial del Estado en España
[9], por ejemplo, son coincidentes en el valor de 0.050 mgL–1.
biodegradabilidad, lo que ocasiona que se acumulen en los
distintos puntos del ciclo ecobiológico y en los sistemas hidro-
geológicos [10-12]. Compuestos arsenicales producen tras -
tornos hepáticos, neurológicos, hematológicos, cardíacos y
hasta la muerte [7, 13]. Éstos son considerados venenos de ca-
rácter protoplasmático que actúan principalmente por inhibi-
ción de los sistemas enzimáticos; personas intoxicadas de for-
ma crónica pueden presentar diferentes síntomas: anorexia,
diarreas, náuseas, así como problemas en el sistema nervioso y
cutáneo [14].
El transporte y movilidad de los iones metálicos que se
puede producir a través del manto freático [15], trae como
consecuencia el incremento de las concentraciones de éstos en
las aguas subterráneas, sobre todo de aquellos elementos
metálicos que son considerados como tóxicos o peligrosos y
muestran carácter acumulativo, provocando una contami-
nación natural y/o debida a las actividades humanas. Por lo
tanto, es conveniente y se hace obligatorio mantener un buen
control de la calidad del agua, especialmente de aquélla de
“calidad potable” y que se distribuye a las poblaciones. En su
caso, puede requerirse instalar plantas para el tratamiento y/o
176 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Diagrama de Pourbaix de As
1.5
1 riormente, es perjudicial para la salud, y en algunos lugares
H3AsO4
0.5 H 2AsO4
-
H3 AsO3
0 H2AsO3 -
Eº`
-0.5
H 2O/H2
Asº
-1
AsH3
-1.5
-2
0 1 2 3 4 5 6 7
pH
Fig. 1. Diagrama de Pourbaix para el arsénico
depuración, de acuerdo con las características adecuadas para
resolver las problemáticas propias en cada región que se trate.
Esto último requeriría lógicamente que se tomen en considera-
ción factores económicos, sociales y políticos, entre otros.
La Organización Mundial de la Salud ha realizado inves-
tigaciones de calidad de agua y ha llegado a la conclusión de
que 1/10,000 habitantes tiene riesgo de adquirir cáncer de piel
debido a la ingestión diaria de agua con concentraciones de
0.002 mgL–1 de arsénico [8]. Por consiguiente, el límite máxi-
mo permisible de arsénico para el agua destinada al consumo
humano tiende a reducirse y actualmente en España es de
0.010 mgL–1 [16], mientras que en México se ha establecido
en 0.045 mgL–1 con una disminución gradual anual de 0.005
mgL –1 hasta alcanzar el límite máximo permisible de 0.010
mgL–1 [17], entre otros.
El arsénico se encuentra en las aguas de pozos de Zima-
pán, mayoritariamente como especies de As(V), cuyas espe-
cies H2 AsO 4 – y HAsO 4 –2 son menos tóxicas que las del
As(III); de acuerdo al potencial y al pH (> 0.350 y > 7) res-
pectivamente, medidos in situ e interpolados en el Diagrama
de Pourbaix de Arsénico, construido aplicando equilibrios ge-
neralizados para este elemento [18], en base a los datos de la
tabla de potenciales presentados por Burriel [3], y a las cons-
tantes de disociación de Ringbom [19], para estas especies a
fuerza iónica de cero; según se puede apreciar en la Fig. 1.
Filtro de algodón con
Pb(Ac) 2
Fig. 2. Esquema de instalación para la determinación de arsénico en
aguas naturales según (NOM-AA-46-1981).
F. Pérez Moreno et al.
La determinación de la concentración de arsénico en
aguas potables es importante ya que como se mencionó ante-
O2 /H2O
las aguas potables no cumplen con las normas establecidas.
HAsO 4- 2
AsO4- 3
Por ejemplo, se tiene conocimiento que la presencia de los
altos contenidos de arsénico, en el agua que es suministrada
por los pozos a la población de la ciudad de Zimapán, Hidal-
go, rebasan los limites máximos permisibles establecidos por
la Normativa Mexicana; así como decisiones de la Comisión
8 9 10 11 12 13 14
Nacional del Agua de clausurar ciertos pozos (Pozo Mühi,
cerrado desde 1994).
En este trabajo se estudia la optimización de la técnica
espectrofotométrica de la normativa mexicana para poder
determinar cuantitativamente el contenido de arsénico con un
límite de detección menor al 0.050 mgL–1 , es decir se intenta
disminuir el actual límite de detección.
Parte experimental
Materiales y equipos
Para la realización del trabajo se utilizó el esquema de monta-
je como el que se muestra en la Fig. 2 y que establece la refe-
rencia [20]. Se utilizó un espectrofotómetro UV-Vis, marca
Perkin Elmer, modelo Lamda 2S, con celdas de vidrio de 1 cm
de recorrido óptico. Para realizar evaluaciones comparativas
de los resultados, adicionalmente fueron analizadas las misma
muestras y patrones estándares en un espectrofotómetro de
absorción atómica con generación de hidruros marca Varian,
modelo 860. Los resultados para obtener las curvas de calibra-
do fueron procesados mediante el programa CURVEXPER
1.3, y los resultados fueron evaluados por el programa ANO-
VA, versión 3.2. En todos los casos se utilizaron reactivos
grado analítico de la firma J. T. Baker y agua desionizada.
Procedimientos
Se utilizó el método espectofotométrico del dietilditiocarba-
mato de plata (DEDTCP) establecido como normativa para la
determinación de arsénico en aguas de consumo humano [21].
Disolución de En este método, el arsénico se reduce a arsina por el zinc en
DEDTCP
medio ácido [22] según:
4 Zn(s) + 8 H 3O +(ac) + H 3 AsO 4 (ac) →
AsH 3(g) 12 H 2O + 4 Zn +2 (ac)
(1)
La arsina se pasa a través de un depurador conteniendo
disolución de acetato de plomo para la retención de S–2 que
Muestra pudiera introducir interferencias en la cuantificación como
Agitador magnético principal interferencia para esta técnica, y después a un tubo
absorbente (Fig. 2) que contenga una disolución de Dietildi-
Parrilla de
Termoagitación tiocarbamato de Plata (DEDTCP) en piridina, para la forma-
ción de un complejo rojo soluble, cuya intensidad de color es
proporcional al contenido de arsénico en la muestra [21]:
Optimización del método de determinación de arsénico en aguas potables por espectrofotometría UV-Vis... 177

H 3 As + 6 AgL + 3 Py → 6 Ag + AsL 3 + 3 L – + 3 PyH+ (2) 3,3

COMPLEJO ARSENICAL
3,0 CON DEDTCP
Siendo L– el dietilditiocarbamato y AsL 3 el complejo cuya 2,8

absorbancia se mide. 2,6

En la Fig. 3, se muestra el espectro visible que se obtuvo 2,4

A 2,2
para el complejo coloreado. Como se observa para un rango 2,0
524,97 nm

comprendido entre 520 y 540 nm, se obtiene la máxima señal 1,8

de absorbancia (525 nm como máximo experimental). 1,6

1,4

1,2
Optimización 1,0

0,8

Este método no puede considerarse adecuado para la detec- 0,6

0,4
ción de bajas concentraciones de arsénico en aguas de consu- 0,2

mo humano, entre otros aspectos, por su límite de detección 420 460 500 540 580 620 660 700 740

(0.10 mgL–1), por lo que se ha procedido a optimizar el mis- nm

mo, con el fin de disminuir el límite de detección a valores in-
feriores a 0.050 mgL–1, por lo que podría ser aplicado en el
control de calidad de las aguas potables. Para ello se ha utili-
zado un diseño experimental mediante de parámetros de Ta-
guchi [23] que incluye:
1. Variantes a la NOM-AA-46-1981
a) Factor de señal a medir. Absorbancia (mayor es mejor).
b) Factores de control. Se tomaron como factores de control,
las variables que se muestran en la Tabla 1, considerando dos
niveles de aplicación (mínimo y máximo).
c) Factores de ruido. Tomando en consideración que la nor-
mativa establece que la preparación del patrón estándar de
arsénico se realice en medio alcalino de NaOH y a partir de
Na 2 HAsO 4 , y la posibilidad de disponer de As4 O 10 , y di-
solverlo en medio de HNO3 a fin de obtener H3 AsO4 , se deci-
dió trabajar en ambos medios (alcalino y ácido), considerando
como factor de ruido (R) el medio de preparación de los patro-
nes. Igualmente, en la normativa se establece realizar un trata-
miento previo de pre-reducción a los estándares y las mues-
tras, que consiste en adicionar una disolución de KI en ácido
ascórbico y ácido clorhídrico, para favorecer la formación de
la arsina. Con la previsión de que se puedan presentar pérdi-
das del analito por la pre-reducción, se tomó el criterio de no
realizar ésta. Teniendo en consideración que con la adición de
3.0g de Zn en polvo y no en virutas o granallas (logrando una
mayor superficie de contacto en el medio), se tiene una canti-
dad suficiente y en exceso de Zn0 que permite garantizar la
reducción de As(V) a As(III) en medio ácido. Se tomó por
consiguiente como un segundo factor de ruido este criterio y
ambos se muestran en la Tabla 2.
Fig. 3. Espectro visible del complejo coloreado.
2. Condiciones no variadas (recomendadas por la NOM),
tomados como factores de control constantes
— Zn metálico en polvo: 3.0 g
— Volumen de Dietilditocarbamato de plata (DEDTCP):
4.0 mL
3. Matriz del diseño experimental
Dado que se tienen 4 factores de control a 2 niveles, puede
utilizarse un diseño del tipo L8 [24]; es decir se requiere de 8
experimentaciones según la matriz de diseño que se muestra a
continuación, que a dos niveles de ruido, significan 16 expe-
riencias, según [23], realizadas por duplicado. La tabla 3
muestra además los distintos sets de experiencias.
Análisis y discusión
A partir de la matriz del diseño se realizaron todas las expe-
riencias para la preparación de las curvas de calibrado. Me-
diante el tratamiento matemático correspondiente se concluye
que las condiciones óptimas son las que aparecen en la Tabla
4, que han sido obtenidas del ANOVA que de manera gráfica
se observa en la Fig. 4.
Como se puede apreciar, el valor de la longitud de onda
de 525 nm se aproxima al recomendado por la NOM-AA-46-
1981 (535 nm), y los demás parámetros se modifican. En tales
condiciones se realizaron las experiencias confirmatorias y la
curva de calibrado final correspondiente. En todos los casos se

Tabla 1. Variables de control para el diseño experimental de optimización.

Factores o variables Longitud de onda Volumen de HCl Tiempo de calentamiento Volúmenes de aforo
de control (nm) conc. a adicionar (mL) “B” 35 °C-45 °C (min) “C” de los estándares (mL) “D”
Niveles de los factores
Mínimo 525 5.0* 15* 25
Máximo 535* 10.0 30 35* (1)
Nota: Los valores de los niveles señalados (*) son los recomendados por la NOM. La técnica señala el volumen de 35 mL, como no son disponibles matraces
volumétricos para aforar y ganar en precisión de los resultados, se tomó la decisión de volúmenes de 25 mL (clase A) para el aforo.
178 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) F. Pérez Moreno et al.

Tabla 2. Factores o variables considerados como Ruido (R).

Factores o variables de Ruido pre-reducción Medio de preparación de estándares
Niveles de los factores
Mínimo Sin Ácido (pH = 0.0 con HNO3)
Máximo Con* Alcalino (pH = 14.00 con NaOH) *
Nota: Los valores de los niveles señalados (*) son los recomendados por la NOM.

Tabla 3. Matriz del diseño experimental.

Experimentos Factor A Factor B Factor C Factor D Factor Ruido (Pre-reducción)
Nivel 1 (sin) Nivel 2 (con)
1 1 1 1 1 1 2
2 1 1 1 2 3 4
3 1 2 2 1 5 6
4 1 2 2 2 7 8
5 2 1 2 1 9 10
6 2 1 2 2 11 12
7 2 2 1 1 13 14
8 2 2 1 2 15 16
Nota: Esta matriz de diseño es la misma para el segundo factor de ruido (medio ácido y alcalino).

encontró que los mejores resultados se logran sin pre-reduc- Esto significa que se ha logrado optimizar esta técnica,
ción como factor de ruido, a diferencia de lo que se señala en para realizar análisis de arsénico en aguas de consumo huma-
la NOM. Se llegó a la curva de calibrado para las condiciones no. Se ha logrado disminuir el límite de detección planteado
optimizadas, con una correlación aceptable r2 = 0.9942 y una por la NOM-AA-46-1981 en aproximadamente 3.5 veces
desviación estándar (s) de 0,0079. La ecuación de la línea (desde 0.10 mgL–1 a 0.028 mgL–1).
recta fue: En la segunda serie de experimentos (Factor de ruido:
medio ácido o medio alcalino en la preparación del patrón es-
A = 0.069 + 0.002[As(III)] tándar), se encontraron los mismos resultados anteriores, pero
trabajando en medio alcalino, tal y como recomienda la NOM.
Con ello se logró un límite de detección de 0.028 mgL–1, En este caso se logra mejorar la correlación lineal de la curva
calculado a partir del valor medio de 20 determinaciones de la de calibrado con respecto a la anterior (r 2 = 0,9978 y una des-
señal de absorbancia con el blanco (Ab ) y su desviación están- viación estándar de 0,0044; disminuyendo el valor del inter-
dar (sb ): cepto en el origen. La ecuación de la línea recta fue:
Am = Ab + ksb, siendo k = 3
A m = 0.055 + 0.002[As(III)]
Tomando entonces la expresión:
Límite de detección = Cm = [Am – Ab ] / m Para desarrollar de forma confirmatoria las posibilidades
reales de aplicación de la técnica modificada, lo cual permite
donde: Cm es la concentración mínima de analito que puede que pueda ser aplicado este método espectrofotométrico como
detectarse para un 95 % como nivel de confianza y m es la método de rutina en el control de calidad del agua potable a
pendiente de la recta [24]. suministrar a la población de Zimapán, sin grandes costos por
inversiones en equipos de absorción atómica, se procedió a
analizar muestras traídas del Distribuidor General de aguas de
50 pozos de Zimapán (salida a los consumidores). Se les reali-
49
48
zaron las determinaciones correspondientes por espectrosco-
47 pía de absorción atómica con generación de hidruros (AA-
46
45 GH) por tratarse de una técnica con un límite de detección de
44 0.002 mgL–1 y por la técnica establecida por la NOM-AA-46-
43
42 1981 con las modificaciones requeridas según las evalua-
41
A1 A2 B1 B2 C1 C2 D1 D2
ciones de optimización realizadas.
Asimismo se les realizaron los análisis a las mismas a-
Fig. 4. ANOVA. Criterio “mayor-mejor”. Variable A (longitud de
onda) a nivel 1; Variable B (Volumen de HCl conc. a adicionar) a guas, luego de haberlas pasado a través de resinas de inter-
nivel 2; Variable C (Tiempo de calentamiento) a nivel 2 y Variable D cambio iónico, como método en evaluación para disminuir los
(Volumen de aforo de los estándares) a nivel 1. contenidos de las especies arsenicales contenidas en las mis-
Optimización del método de determinación de arsénico en aguas potables por espectrofotometría UV-Vis...
Tabla 5. Resultados comparativos de los experimentos confirmatorios.
Análisis de arsénico
por absorción atómica con generación de hidruros (mgL–1)
N° Análisis Agua del distribuidor Después de la columna
de intercambio iónico
1 0.499 < 0.002
2 0.493 < 0.002
3 0.493 < 0.002
4 0.497 < 0.002
5 0.496 < 0.002
Media 0.496 < 0.002
Desv. est. 0.003 — 0.026
% Desv. estándar 0.526 — 5.211
relativa
mas. Los análisis fueron realizados en cinco réplicas y los
resultados son los que se muestran en la siguiente Tabla 5.
Como se aprecia, la comparación estadísticas de las medias
arrojan similares resultados.
Además se puede apreciar, tanto por el método de AA-
GH como por el método propuesto por la NOM-AA-46-1981
con las modificaciones requeridas (trabajando en medio alcali-
no), que se alcanzan resultados con porcentajes de desviación
estándar relativa (% DER) muy buenos (< de un 6 %).
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179
Análisis según NOM-AA-46-1981
modificada, en medio alcalino. (mgL –1)
Agua del distribuidor Después de la columna
de intercambio iónico
0.460 < 0.028
0.495 < 0.028
0.513 < 0.028
0.530 < 0.028
0.496 < 0.028
0.499 < 0.028
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 180-184
Comunicación Técnica
Formación de ozono en la Ciudad de México durante una porción
de primavera e invierno en cámaras de esmog exteriores
Julio Sandoval* y José Luis Jaimes
Instituto Mexicano del Petróleo. Eje Central Lázaro Cárdenas No. 152, Col. San Bartolo Atepehuacan,
Delegación Gustavo A. Madero, México 07730, D.F. Tel: 5333-6756; Fax: 5877-988; E-mail: jsandov@www.imp.mx
Recibido el 28 de septiembre del 2001; aceptado el 12 de marzo del 2002
Resumen. Se realizaron estudios para determinar el potencial de for-
mación de ozono del aire de la Ciudad de México en abril y diciem-
bre de 1995 utilizando la metodología de irradiación de aire cautivo.
Se capturó aire ambiente matutino en un sistema experimental consti-
tuido por cámaras de teflón expuestas a la irradiación solar. La com-
posición de los hidrocarburos y óxidos de nitrógeno, la temperatura y
la irradiación solar fueron diferentes en los dos meses del año. Sin
embargo, la formación de ozono fue similar en abril y en diciembre.
Palabras clave: Ozono, cámaras de esmog, reacciones fotoquímicas.
Introducción
Debido a las emisiones de precursores, a las condiciones me-
teorológicas y a la localización geográfica de la Cuenca de
México, el ozono excede la norma de calidad del aire en la
mayoría de los días del año, acentuándose específicamente
durante invierno y primavera [1]. Esto se debe en parte a la
dispersión de los contaminantes por variación de la velocidad
de los vientos durante las dos estaciones señaladas. El propósi-
to de este trabajo es utilizar una herramienta experimental que
permite determinar la formación de ozono en aire ambiente
matutino cautivo en una cámara de esmog, en la cual se lleven
a cabo las reacciones fotoquímicas de los hidrocarburos y los
óxidos de nitrógeno bajo la influencia de la irradiación solar
natural para explicar las contingencias en una porción de las
dos estaciones del año; y de esta manera complementar los tra-
bajos que han utilizado modelos computacionales para simular
el potencial de formación de ozono debido a la fotoxidación
de hidrocarburos y a las condiciones climáticas de la ciudad de
México [2, 3]. Lo anterior es con la finalidad de entender con
mayor profundidad las causas que dan origen a la formación
de ozono bajo las condiciones de la cuenca.
Tomando en cuenta lo anterior y con referencia a los tra-
bajos de cámaras de esmog realizados en la primavera de 1995
en la ciudad de México [4] donde se encontró una ecuación
empírica que predice al ozono con buena correlación de la
temperatura máxima promedio del día, dio la pauta para llevar
a cabo trabajos similares bajo condiciones climatológicas dife-
rentes, como es el caso del invierno del mismo, año que ge-
neralmente presenta estabilidad atmosférica debido a la baja
velocidad de los vientos, de irradiación solar y de la tempera-
tura máxima promedio diaria [5]. Carter [6] menciona que con
Abstract. Some studies were carried out to determine the potential of
Mexico City's air on ozone formation in April and December 1995.
The Captive-Air Irradiation methodology (CAI) was employed for it.
Ambient morning air was captured in an experimental system consti-
tuted by teflon chambers exposed to solar irradiance. The hydrocar-
bon and nitrogen oxide concentrations, temperature and solar irra-
diance were different in both months of the year. However, the ozone
formation was similar in April and December.
Keywords: Ozone, smog chambers, photochemical reactions.
respecto a esta última variable existen estudios limitados de
los efectos de la temperatura sobre la formación de ozono, de-
bido a que en los experimentos de cámaras de esmog exterio-
res no se puede tener un control de temperatura para hacer un
estudio sistemático. Sin embargo, trabajando en diferentes es-
taciones del año se pueden utilizar las condiciones climatoló-
gicas naturales de radiación y temperatura para estudiar su
efecto sobre la formación de ozono.
Por otro lado, los estudios realizados en cámaras de
esmog interiores indican que, aunque los efectos de los com-
puestos orgánicos volátiles (COV’s) sobre la formación de
ozono pueden ser medidos, estos efectos dependen de las
condiciones ambientales del lugar adonde los COV’s son emi-
tidos, y que no necesariamente resultan ser los mismos que se
obtienen en el laboratorio [7]. Uno de los métodos que se usan
para cuantificar el impacto de los COV’s sobre la formación
de ozono en el laboratorio es la “reactividad incremental”, la
cual es definida como el cambio de ozono causado por la adi-
ción de una pequeña cantidad arbitraria del COV de prueba en
una mezcla de gas representativa del aire dividida por la canti-
dad de COV de prueba adicionada. Sin embargo, se ha encon-
trado que esta medida depende en gran manera de la disponi-
bilidad de los óxidos de nitrógeno (NO x) que tradicionalmente
se miden por la relación de COV’s / NO x. En general, los
COV’s tienen una alta reactividad a bajas relaciones de COV’s
/ NO x y son significativamente menores cuando las relaciones
COV’s / NOx son altas. Dado que para altas condiciones de
NOx la cantidad de ozono se determina por los niveles de radi-
cales formados por las reacciones de los COV’s, y cuando los
NOx son bajos se limita la formación de ozono. No obstante
que la reactividad incremental determinada en cámaras de
esmog no representa las condiciones ambientales reales, se ha
Formación de ozono en la Ciudad de México durante una porción de primavera e invierno... 181

desarrollado una escala de reactividad incremental denomina- Tabla 1. Promedios mensuales de concentraciones de ozono y tem-
da máxima reactividad incremental (MRI) para el cálculo de peratura máxima.
factores ajustados de reactividad (FARs) aplicados a emi - Ozono [ppm] Temperatura °C
siones vehiculares, con la finalidad de determinar su potencial Año Abril Diciembre Abril Diciembre
hacia la formación de ozono en áreas urbanas.
1988 0.170 0.208 19.0 13.0
El cálculo de los FARs determinados por la MRI no pue- 1989 0.152 0.169 16.0 12.5
de ser aplicado con buena predicción en escenarios que pre- 1990 0.204 0.226 16.2 13.2
sentan altas relaciones de COV’s / NO x como es el caso de la 1991 0.213 0.217 19.8 13.3
ciudad de México donde se han encontrado relaciones que 1992 0.181 0.226 17.7 15.7
variaron de 12 a 39 ppbC / ppb [8]; ya que esta escala de reac- 1993 0.173 0.231 18.3 14.5
tividad se determinó para escenarios no limitados de NOx, es 1994 0.166 0.208 17.6 15.0
decir, con relaciones de COV’s / NOx bajos que propician una
mayor reactividad de los COV’s en cámaras de esmog interio-
res cuyos datos han servido para evaluar los mecanísmos que temperatura máximas diarias [10] en las estaciones Tlane-
se utilizan en los modelos atmosféricos que predicen reactivi- pantla, Xalostoc, Merced, Pedregal y Cerro de la Estrella. De
dad en áreas urbanas [9]. Probablemente la falta de correla- la cual se observa un marcado contraste en las mediciones de
ción de las evaluaciones de reactividad incremental en cáma- temperatura durante abril y diciembre. En general las tempera-
ras de esmog interiores y las predichas por los modelos atmos- turas de abril son mayores en comparación con diciembre. De
féricos para relaciones de COV’s / NOx sea el hecho de no modo que esta variable sirvió de base para el diseño de experi-
tener datos de laboratorio que tomen en cuenta el efecto de la mentos el cual consistió en determinar el número de días mí-
temperatura, ya que ésta variable puede influir en los mecanis- nimos a experimentar durante abril y diciembre. Los días del
mos que auspician la formación de ozono en el aire ambiente mes de referencia tomado fue de 31 días y para un intervalo
de cualquier escenario. Por lo tanto, deben llevarse a cabo de confianza del 95 % se encontró que mínimo 12 días eran
estudios experimentales que consideren de una manera sis- suficientes para el estudio.
temática el efecto de la temperatura para que la reactividad Las pruebas se enfocaron principalmente en la determina-
incremental usada para determinar los FARs incluya el efecto ción de la influencia de los precursores de ozono bajo condi-
de esta variable. ciones naturales de irradiancia solar. Para esto se utilizaron
En México no se cuenta con sistemas experimentales para tres cámaras de teflón llenadas con aire ambiente matutino
obtener de datos en la dirección antes mencionada, pero se recolectado cada mañana entre las 7.00 y las 8.00 a.m. De las
puede intentar un acercamiento como el que presenta este tra- tres cámaras una de ellas se usó como cámara de control y en
bajo usando cámaras de esmog exteriores para explorar la las restantes se seguió la evolución de la formación de ozono.
posibilidad de dar respuesta al efecto de la temperatura sobre
la formación de ozono. Sistema experimental

La Fig. A muestra en forma esquemática el sistema experi-

Parte experimental
Lugar de monitoreo
Los experimentos se realizaron en las instalaciones del
Instituto Mexicano del Petróleo (IMP) situado sobre la calle
de Azcapotzalco-la Villa entre el eje central Lázaro Cárdenas
y la avenida Vallejo. Dos vías con alto tráfico vehicular locali-
zadas al norte de la ciudad de México y cerca de la zona in-
dustrial Vallejo considerada como una fuente importante de e-
misión de precursores de ozono.
Experimentos
Para establecer el programa experimental se analizó el com-
portamiento del ozono y la temperatura a través de los años
para los meses de abril y diciembre a partir de los datos de la
red automática de monitoreo de la Ciudad de México. De
donde se obtuvo la tabla 1 que muestra la estadística descripti-
va mensual de la concentracion promedio de ozono (ppm) y la
mental. Las cámaras 1 y 3 indican el conjunto de experimen-
tos a realizar en un día dado, la cámara 2 del centro sirvió
como cámara de control. Este sistema trabajó durante 14 días
en abril y 21 días en diciembre haciendo un total de 70 prue-
bas con aire ambiente de la ciudad de México. Todas ellas
fueron réplicas, con la finalidad de disponer de información
confiable y para asegurar que los problemas presentados
durante la experimentación no evitaran la interpretación de los
resultados.
Operación de las cámaras y mediciones
Las cámaras de aproximadamente 500 litros fueron construi-
das con películas de teflón FEP tipo A de 0.5 mm y selladas
en la orilla mediante calor y presión; y se colocaron a un me-
tro de altura sobre una plataforma de madera. La cámara de
control sirvió para la toma de muestra de HC al inicio y para
medir la temperatura de la cámara por aspersión; las dos cá-
maras adyacentes sirvieron para determinar el máximo de o-
zono alcanzado durante el día.
182 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Julio Sandoval y José Luis Jaimes

HCNM [ppb]
MUESTREADOR DE
HIDROCARBUROS
8000
6000
4000
2000
0
0 5 10 15 20 25
Días Experimentados

TERMOMETR O
HC Diciembre HC Abril
VALVULAS
SELECTORAS Fig. 1. Concentración inicial de HCNM. Abril y diciembre 1995.
AUTOMATICAS

BULBO PYREX
ANALIZADORES
NOx
CO O3
S I S T E M A DE A D Q U I S I C I O N
DE DATOS
Fig. A. Sistema experimental.
Al finalizar el experimento se evacuaban las 3 cámaras y
se llenaban con aire libre de hidrocarburos para dejarlas en
limpieza durante la noche. Al día siguiente se hacía una revi-
sión para desechar las cámaras que presentaron fugas y las
que no presentaron problemas se evacuaban. Posteriormente
las tres cámaras eran llenadas con 30 litros de aire limpio y
reevacuadas nuevamente (procedimiento establecido previo al
trabajo experimental para verificar limpieza de las cámaras).
Después de esta operación las cámaras eran llenadas con aire
ambiente de la mañana y enseguida se tomaba una muestra en
la cámara de control para determinar la composición inicial de
hidrocarburos. Estas muestras fueron analizadas por cromato-
grafía de gases para conocer la concentración inicial de hidro-
carburos de cada mañana.
El monitoreo de los NO x y el O3 se realizó tomando 8
litros aproximadamente de muestra en forma secuencial de las
cámaras 1 y 3 cada hora, desde el inicio hasta el final del
experimento. Esto se hizo utilizando un analizador modelo 42
para NO x equipado con filtro de nylon para remover ácido
nítrico y un modelo 49 para el O3 de la marca Thermo Envi-
ronmental Inc. Los COV’s se determinaron en el laboratorio
de química de la atmósfera del IMP por cromatografía de
gases basándose en la norma T0-14 expedida por la Agencia
de Protección Ambiental de los Estados Unidos. La tempe-
ratura se midió cada hora utilizando un termopar de aspiración
conectado a la cámara de control. El flujo ultravioleta se mi-
COV’S y NO x en el aire ambiente matutino y de la irradiación
solar que incidió durante las pruebas en cada mes del año.
COMPRES OR BULBO PYREX
BOMBA DE Las Figs. 1 y 2 muestran las diferentes concentraciones
VACIO
DE AIRE iniciales de los hidrocarburos no metánicos (HCNM) y NOx
que resultaron durante los dos experimentos. Estas diferencias
se deben a las condiciones meteorológicas que prevalecen en
ambos meses del año. Ya que abril se caracteriza por una alta
dispersión de los contaminantes como consecuencia de una
mayor velocidad de los vientos que imperan en ese mes y
sucede lo contrario en diciembre. De manera que tanto las
concentraciones de los HCNM y de NO x son mayores en
diciembre con respecto al mes de abril.
Por otro lado la relación de HCNM / NO x en promedio
fue mayor en abril y menor en diciembre. Sin embargo, en
ambos casos se producen cantidades similares de ozono. Cabe
señalar que en los días en que hubo relaciones similares en
ambos meses también hubo similitud en la formación del
máximo de ozono tal como lo muestran las Figs. 3 y 6. Es
importante enfatizar que los experimentos con replicas presen-
taron una variación de 4.2 % con respecto al máximo de
ozono de cámara a cámara, una incertidumbre del muestreo de
14.6 y una incertidumbre del análisis de 12.
En cuanto a la radiación solar la diferencia se marcó con
mayor amplitud. En abril se presentó en promedio una radia-
ción alrededor de 40 watts / m2 , mientras que en diciembre
cae hasta aproximadamente 15 watts / m2 , según la Fig. 5.
Este comportamiento también se presentó con la temperatura,
véase Fig. 6.
De los resultados se puede inferir que la producción de
ozono resultante en ambas meses del año es similar aún cuan-
do las condiciones meteorológicas sean diferentes. Esto se
debe en principio a las magnitudes de concentraciones ini-
600
500
NOx [ppb]

dió con un radiómetro Eppley de luz u.v colocado junto al sis- 400
tema experimental. 300
200
100
Resultados y discusión 0
0 5 10 15 20 25
Con la finalidad de comparar los máximos de ozono encontra- Días Experimentados
dos durante los días de ambos meses se ordenaron de menor a NOx Diciembre NOx Abril
mayor valor. Los cuales en general resultaron como conse-
cuencia de la magnitud de las concentraciones iniciales de los Fig. 2. Concentración Inicial de NOx. Abril y diciembre 1995.
Formación de ozono en la Ciudad de México durante una porción de primavera e invierno... 183

50
40

Rad. U.V. W/m2

60
HCNM/NOx

30
40
20
20
10
0 0
0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25

Días Experimentados Días Experimentados

Rel HC/NOx Diciembre Rel Hc/NOx Abril Rad. U.V. Diciembre Rad. U.V.Abril

Fig. 3. Relación HCNM / NOx de abril y diciembre 1995. Fig. 5. Radiación U.V. Abril y diciembre 1995.

1000
800 40
Max. Ozono [ppb]

600 30

T oC.
400 20

200 10

0 0
0 5 10 15 20 25
0 5 10 15 20
Días Experimentados
Dias Experimentados

Ozono Diciembre Ozono Abril

Temp. °C.
oC. Diciembre Temp. °C.
oC Abril

Fig. 4. Formación de ozono en abril y diciembre 1995. Fig. 6. Temperatura (°C). Abril y diciembre 1995.

ciales de HCNM y NOx , de radiación y temperatura que carac-
terizan en especial a cada mes del año, lo cual explica la per-
sistencia de las altas concentraciones de ozono independiente-
mente del mes.
En resumen, aunque en diciembre la irradiación y la tem-
peratura son bajas las altas concentraciones de ozono se dan
por la mayor concentración inicial de HCNM y NO x, que en
consecuencia dieron relaciones de HCNM / NO x aproximada-
mente de 15; condición bajo la cual se tiene una mayor benefi-
cio hacia las reacciones que auspician la formación de radi-
cales a partir de los contaminantes primarios y en consecuen-
cia la formación de ozono. Sin embargo, en abril las relacio-
nes de HCNM / NOx fueron mas altas, lo cual llevaría a supo-
ner que la formación de ozono debería de ser más baja como
consecuencia de tener una atmósfera saturada de hidrocar-
buros y altamente limitada de NOx, pero la evidencia experi-
mental dice lo contrario. Probablemente la alta formación de
ozono se explique por la presencia de una mayor radiación so-
lar en este mes del año.
Otro punto importante a resaltar es el hecho que se presen-
ta en la Fig. 4, donde prácticamente se juntan los máximos de
ozono de los dos meses comparados, y que también resultan
coincidir con sus relaciones respectivas de HCNM / NOx según
Fig. 3. De manera que la diferencia sobre la formación de
ozono es la irradiación solar que incide sobre la temperatura.
Para sustentar los resultados se realizó un análisis de
regresión múltiple a los datos de abril y diciembre consideran-
do al ozono como variable dependiente, y a la temperatura
máxima del día, los HCNM y NOx iniciales, la relación
HCNM / NO x y la irradiación ultravioleta como variables
independientes. La variable que presentó mayor correlación
hacia la formación de ozono en abril fue la temperatura con
coeficiente de correlación parcial de 0.6 y confiabilidad de
99.5 %, mientras que para diciembre fue la concentración de
NO x con coeficiente de correlación parcial de 0.75 y confiabi-
lidad de 99.97 %. Los resultados también se sometieron a la
prueba de medios con “t” de student, estableciendo la hipóte-
sis de investigación que propone que los dos experimentos
difieren significativamente entre sí en cuanto a la influencia
de temperatura y NO x a formar ozono en abril y diciembre.
Para un nivel de confianza de 0.05 y 33 grados de libertad t =
1.697 y en el caso de la temperatura se obtuvo un valor de t =
10.3 y para la concentración de NO x t = 5.725 confirmando las
conclusiones del trabajo.
Conclusiones
Debido a la influencia de las condiciones meteorológicas que
incrementan la frecuencia y duración de inversiones térmicas
por presencia de sistemas anticiclónicos de altura localizados
en los estados del centro del país, en diciembre las concentra-
ciones iniciales de hidrocarburos y óxidos de nitrógeno resul-
taron ser mayores con respecto al mes de abril. Sin embargo,
hubo coincidencia en la alta formación de ozono dentro de las
cámaras. Los resultados permiten inferir que la alta formación
de ozono en abril se debe a la alta irradiación que en conse-
cuencia provoca una elevación de la temperatura, condiciones
184 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
muy características de este mes. Mientras que en diciembre
las altas concentraciones óxidos de nitrógeno pueden ser las
responsables de las altas concentraciones de ozono en la ciu-
dad de México. Aún cuando, el propano y el butano que son
poco reactivos predominan en la composición global del aire.
Aunque estos resultados son globales permiten explicar la
persistencia de las altas concentraciones de ozono durante
abril y diciembre en la ciudad de México y crean la necesidad
de llevar a cabo experimentos controlados con la finalidad de
estudiar los efectos de la radiación y la temperatura para mez-
clas representativas de aire de la ciudad de México. Pero en
un sistema experimental que utilice bolsas de mayor tamaño
para disminuir los efectos de pared y con control de tempera-
tura.
Julio Sandoval y José Luis Jaimes
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 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 185-188
Comunicación Técnica
Bioconversión anaerobia como una alternativa para la remoción
de DQO contenido en aguas residuales del rastro municipal
de la Ciudad de Saltillo, Coahuila, México
Jesús Rodríguez,* Gerardo J. Sosa y Yolanda Garza
Departamento de Biotecnología, Facultad de Química, Universidad Autónoma de Coahuila. Blvd. Venustiano Carranza
e Ing. José Cárdenas V., Col. República. Saltillo, Coahuila 25280, México. Tel: (8) 415-57-52; Fax: (8) 415-95-34;
E-mail: jrodrigu@alpha1.sal.uadec.mx
Recibido el 21 de septiembre del 2001; aceptado el 24 de junio del 2002
Resumen. Para la Bioconversión anaerobia de DQO contenido en
aguas residuales del rastro de Saltillo, México, se realizó mediante el
arranque de un reactor UASB-híbrido, empacado con bauxita en la
parte superior. La temperatura del reactor fue controlada a 38 °C. La
adaptación del lodo tuvo una duración de 10 días y después se proce-
dió a la alimentación continua con una carga orgánica inicial de 0.9
hasta 6.5 g D Q O / L /día; el pH se mantuvo entre 7.1 y 8.2. Se midió
la producción de ácidos grasos volátiles y el flujo de biogas. El arran-
que se realizó en 30 días y la eficiencia del tratamiento fue superior al
80 % cuando la carga orgánica oscilo en el rango de 5-6 g D Q O / L /
día y un tiempo de retención hidráulica no menor de 2 días.
Palabras clave: bioconversión, anaerobio, reactor UASB-híbrido, a-
guas residuales de rastro.
Introducción
Las aguas residuales de los rastros se caracterizan por contener
alta concentración de proteínas, grasas, aceites, sólidos sus-
pendidos y otros productos de la industria de la carne, así co-
mo pH básicos. La disposición efectiva de este tipo de aguas
ha tomado gran importancia debido a los requerimientos nor-
mativos tan estrictos considerados para la calidad de los eflu-
entes [1, 2]. Cuando tecnologías como la recuperación de pro-
teínas, el desecado o la utilización de los desechos del rastro
para alimentación animal no son aplicables, el tratamiento
anaerobio puede ser una solución para la depuración de las
aguas residuales. El tratamiento anaerobio de la demanda
química de oxígeno contenido en las aguas residuales del ras-
tro puede biotransformar por arriba del 80 % de la materia
orgánica [2-4]. Los reactores anaerobios que han tenido el
mayor éxito en el tratamiento de aguas residuales son aquellos
que usan un flujo ascendente con lodo granular [5-]. Este tipos
de reactores pueden soportar altas cargas orgánicas alcanzando
eficiencias de remoción desde un 70 a un 95 %, dependiendo
de la composición del agua residual [10, 11]. La mayoría de
los reactores que han sido usados a escala industrial han trata-
do efluentes con concentraciones altas de carga orgánica, los
cuales presentan una DQO mayor de 2000 mg / L. Los eflu-
entes de la industria alimentaria pueden clasificarse en dos
tipos: aquellos mayores de 2000 mg / L y aquellos menores de
1000 mg / L [10]. Las aguas residuales del rastro municipal de
Abstract. Start-up of an UASB-hybrid reactor, packed with bauxite
at the top, was made for treatment of slaugterhouse wastewater of
Saltillo, México. The reactor temperature was controlled at 38 °C.
Sludge adaptation was made for 10 days; continuous feeding was
then began at organic load rates of 0.9 g COD / L / day. The pH va-
lues fluctuated in the range of 7.1-8.2. Production of volatile fatty
acids and the biogas flow were measured. The removal efficiency
was achieved graduating the velocity of feeding and the hydraulic
retention times. For the start-up stage a period of 30 days was needed
and the wastewater treatment efficiency was above 85 %.
Keywords: Bioconversion, anaerobic, UASB-hybrid reactors, waste-
water.
la ciudad de Saltillo, México, están clasificadas dentro del
primer grupo [5, 10, 13, 17].
Este trabajo se realizó en un reactor tipo UASB (Upflow
Anaerobic Sludge Blanket) con un filtro anaerobio interno, los
cuales tienen una eficiencia de remoción de la materia orgáni-
ca por arriba del 80 % [4,12]. En ellos la tasa específica de
producción de metano se observa como una función lineal de
la tasa específica de consumo de sustrato [3,13].
El propósito del presente trabajo fue la optimización de la
remoción del DQO contenido en las aguas residuales de la
industria cárnica de Saltillo, Coahuila, México.
Materiales y métodos
Todos los experimentos de esta investigación se realizaron uti-
lizando un reactor tipo UASB-híbrido. El reactor fue construi-
do de material acrílico con un volumen de trabajo de 13.5 L,
1.70 m de altura y 10.5 cm de diámetro interno, provisto con
una chaqueta para calentamiento. Se adaptó una plataforma a
una altura de 1.5 m para colocar el material de bauxita, soporte
utilizado para la inmovilización de las células. El inóculo fue
previamente incubado utilizando agua residual del rastro dilui-
da y a una temperatura de 38 °C durante 30 días; durante este
tiempo el reactor funcionó en estado intermitente. Posterior-
mente, el reactor fue cargado con agua residual y durante dos
días se mantuvo en reflujo a una velocidad de 500 mL / min.
186 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Jesús Rodríguez et al.

Tabla 1. Comparación de la composición del agua residual del rastro

municipal de Saltillo en el influente y efluente del reactor UASB.
Parámetro Entrada Salida
DQO (g / L) 13 2
pH (H+ ) 8 8.2
Sulfatos (mg / L) 900 409
Fosfatos (mg / L) 417 78
SSV (mg / L) 3120 355
SST (mg / L) 5820 466
AGV (ac. acético) (mg / L) 5867 0.3
Alcalinidad del CaCO3 (mg / L) 588 448 Fig. 1a. Comparación de la carga orgánica (CO) y eficiencia en fun-
Grasa y aceite (mg / L) 256 162 ción del tiempo.
Nitrógeno (Kjeldahl) (g / L) 531 500
Nitratos (mg / L) 396 310
zamiento de un líquido, después de remover el CO2 por absor-
ción en solución de hidróxido de sodio. La demanda química
para facilitar la formación de gránulos. La alimentación con- de oxígeno (DQO) fue medida tres veces por semana usando
tinua del reactor fue iniciada a una tasa de 0.9 g de DQO / L / el método colorimétrico [17].
día y un pH mantenido en un rango de entre 7.1 y 8.2. El
recipiente que contenía agua residual fue agitado continua-
mente para evitar la sedimentación de la materia orgánica. La Resultados y discusión
producción de ácidos grasos volátiles (AGV) fue evaluada
midiendo la alcalinidad [9]. La temperatura de operación del Es importante enfatizar que la eficiencia de un proceso anaer-
reactor fue mantenida a 37 °C. Las características evaluadas obio está relacionada con el arranque del reactor, de acuerdo
del agua residual en la entrada y salida del reactor se muestran con las recomendaciones de Lettinga y Hushoff [5,17].
en la Tabla 1. Durante los primeros cinco días del proceso se alimentó el
El análisis del agua residual fue realizado de acuerdo con reactor con cargas orgánicas de 0.3-1.0 g DQO /L/ día (Fig.
los métodos estándar [14]. Los valores obtenidos en este tra- 1a). Durante este tiempo, la eficiencia de tratamiento no
bajo fueron logrados con un mínimo de tres muestras por sem- superó el 30 %. Al incrementar la tasa de alimentación de la
ana durante 80 días. carga orgánica se observó un incrementó lineal en la eficien-
cia del tratamiento (ET) a partir del décimo día. Sobre el día
Aguas residuales del rastro municipal de Saltillo, Coahui- 20, el reactor alcanzó el 65 % de eficiencia de tratamiento, la
la, México. Se utilizaron aguas residuales provenientes direc- cuál disminuyó a partir del día 70 por la pérdida de la capaci-
tamente del proceso de matanza del rastro de Saltillo Coahui- dad buffer del influente debido a un exceso en la producción
la. Este tipo de agua residual posee una alta alcalinidad así de ácidos grasos volátiles (AGV), que trajo como consecuen-
como un elevado contenido de materia orgánica. El volumen cia la disminución del pH, de 7.8 a 6.2 (Fig. 1a y Fig. 1b). La
de desechos de este proceso varia entre 85 y 120 m3 / día. En capacidad buffer del influente se aprecia en la misma Figura
la Tabla 1 se muestran las características definidas para este 1b; además la ligera diferencia entre el pH interno y el pH
tipo de agua. externo, esta relacionada con la concentración de iones hidró-
geno, que en la fase interna, donde se encuentran los gránulos,
Inóculo. El lodo utilizado fue obtenido de un proceso de su concentración es mayor y para el caso del pH externo
tratamiento de aguas residuales generadas por la industria ocurre una dilución de la concentración de los iónes hidró-
láctea. La concentración y la actividad específica de este lodo geno, el pH del efluente y de influente fueron 7.2 y 8.2 respec-
fueron de 10-15 g SSV / L y 0.02-0.03 g CH4-DQO / g SSV / tivamente.
día, respectivamente (SSV, sólidos suspendidos volátiles). El
inóculo usado para el arranque fue añadido al reactor hasta el
30 % de su volumen.

Análisis. El análisis de los ácidos grasos volátiles, metanol,

metano y bióxido de carbono fue realizado tres veces por se-
mana utilizando cromatografía de gases, según lo descrito por
Varfolomeev et al. [15] y Kalyuzhnyi et al. [16]. El flujo de
gas fue medido con un detector electrónico de flujo tipo com-
pacto DENEB CDF-402, diseñado específicamente para cuan-
tificar la producción de metano y bióxido de carbono. El volu-
men de metano producido diariamente fue medido por despla- Fig. 1b. Comportamiento de pH en función del tiempo.
Bioconversión anaerobia como una alternativa para la remoción de DQO contenido en aguas residuales...
Fig. 1c. Medición del tiempo de retención hidráulico (TRH).
Fig. 1d. Medición de los AGV’s por medio de la alcalinidad.
El tiempo de retención hidráulica en el curso del trata-
miento anaerobio se disminuyó gradualmente hasta 1.5 días;
en este tiempo se observó el inicio de la acidificación del reac-
tor (Fig. 1c). La ET disminuyó abruptamente hasta 55 %. El
valor de a (coeficiente de alcalinidad) fluctuó en un intervalo
de 0.63-0.90 durante los primeros 60 días de operación (Fig.
1d). Los valores de la tasa de carga orgánica investigados no
excedieron de 6.5 g DQO /L /día (Fig.1a). En este punto, la
eficiencia de tratamiento alcanzó un valor máximo de 85%
(Fig. 1a). Esto se logró manteniendo una concentración de áci-
dos grasos volátiles menor de 0.05 g /L (Fig. 2a). Se encontró
que el etanol, el acetato, el propionáto y el butirato eran los
principales constituyentes del efluente.
El estudio microscópico de la apariencia de las muestras
de lodo tomadas del reactor en el día quince mostraron la for-
mación de gránulos pequeños con un tamaño promedio de
0.8-1.0 mm de diámetro.
La alta eficiencia del tratamiento y el exitoso arranque del
reactor estuvieron relacionados con la adaptación y el origen
del inóculo, puesto que éste provenía del tratamiento del agua
residual con alto contenido de suero de queso [8]. El tiempo
de retención hidráulica al cual se obtuvo el 85 % de eficiencia
de remoción fue menor de los 5 días considerados en la lite-
ratura [18]. Durante los 70 días de operación del reactor no se
observó formación de espuma, flotación de lodos, acidifi-
cación del reactor (el pH del efluente fluctuó en un intervalo
entre 8.0-8.4, Fig. 1b) o limitación por nutrientes, indicando
esto el desarrollo de una comunidad microbiana balanceada
dentro del reactor [19]. Después de 20 días de operación se
observó agregados granulares de lodo de 1 a 2 mm de diáme-
tro y la acumulación de agregados blancos distribuidos en el
lecho del lodo; aparentemente, su presencia no influyó en la
ET del reactor.
187
Fig. 2a. Medición del DQO del influente y efluente vs. eficiencia en
función del tiempo.
Fig. 2b. Medición de la carga orgánica (CO) vs. producción de bio-
gas.
En los procesos de granulación durante el arranque de un
reactor UASB-híbrido existen muchos factores involucrados
[20, 21, 22, 23]; entre los cuales podemos considerar la pre-
sión originada por la concentración de hidrógeno; la remoción
de materia finamente dispersa del inóculo, la presión que se
originó a partir de la velocidad superficial del flujo ascendente
y de la velocidad de producción de gas, lo que permitió que
durante los primeros veinte días de lograra un 75 % de la efi-
ciencia de tratamiento alcanzada a los 70 días de trabajo.
Después de este tiempo se observó flotación y dispersión del
lodo, lo que condujo a la disminución brusca de la producción
de gas (Fig. 2b).
Otra razón que pudo haber influido en una granulación
exitosa puede estar relacionada con la baja producción de
acetato en el reactor, la cual permaneció por debajo de 0.325
mg / L durante el periodo de arranque (Tabla 1). Sayed et al.
[24] reportaron, utilizando un efluente similar y un reactor
UASB, un proceso de metanización a partir del DQO removi-
do en el intervalo de 45 a 75 % con cargas orgánicas similares
y tiempos de retención hidráulica de entre 20 y 40 horas.
Polprasert et al. [6] reportaron metanización del DQO removi-
do en el intervalo de 44 a 78 %, trabajando con efluentes de
rastro de menor concentración y tiempo de retención hidráuli-
ca de entre 25 y 26 horas. Se sabe que una baja concentración
de acetato promueve predominantemente el crecimiento de
Methanotrix en lugar de Methanosarcina, lo que trae consigo
la formación de buenos gránulos [16]. Es importante enfatizar
que para mantener una operación estable del reactor se deben
satisfacer dos condiciones: el lecho de lodos se debe mantener
bien mezclado y se debe mantener la eficiencia de operación
en el nivel más alto. El lavado de lodos generalmente no era
muy apreciable a una velocidad de alimentación orgánica li-
geramente superior a 6.5 g DQO / L / día.
188 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
Conclusiones
El proceso de arranque del reactor, así como la adaptación y
reactivación del inóculo se realizaron con éxito. La granula-
ción se obtuvo rápidamente debido al intervalo de velocidades
aplicadas durante los dos días de reflujo y probablemente al
hecho de que el inóculo fue tomado de un reactor que estuvo
trabajando con aguas residuales de suero de queso. Durante la
investigación del proceso UASB-híbrido no se presentó el
fenómeno de formación de espuma y flotación de lodos
debido al buen funcionamiento del bioreactor, combinado con
la presencia de un filtro y soporte de bauxita colocado en la
parte superior del reactor. La cantidad de biogás producida fue
un indicativo del buen funcionamiento del bioreactor, alcan-
zando a ser ésta superior a los 1400 mL/h cuando la carga
orgánica osciló entre los 5 y 6 g de DQO /L /día, y su conte-
nido de metano fue superior al 80 %.
En el día 71 se incrementó la carga orgánica a 6.5 g de
DQO / L / día y después de 24 horas se observó una disminu-
ción del pH a 6.8 y un aumento en la producción de ácido gra-
sos volátiles hasta 0.077 g / L, reduciéndose la eficiencia de
remoción. Por esta razón, es necesario mantener la carga
orgánica en 6.0 g de DQO / L / día y un tiempo de retención
hidráulica no menor de dos días.
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21. Morvai, L.; Miháltz, P.; Czakó, L. Wat. Sci. Tech. 1992, 25, 113-
122.
22. Guiot, S.R.; Pauss, A.; Costerton, J.W. Wat. Sci. Tech. 1992, 25,
1-10.
23. Farrah, S.R.; Bitton, G. Appl. Environ. Microbiol. 1983, 45, 174-
181.
24. Cail, R.G.; Badford, J. P. Biotech. Lett. 1985, 7, 493-498.
25. Sayed, S.; De Zeeuw, W.; Lettinga, G. Agricult. Waste. 1984, 11,
197-226
 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 189-192
Historia y Desarrollo de la Química en México
Minería e inquisición en la Nueva España del siglo XVIII; el caso Morel
Liliana Schifter Aceves, Patricia Elena Aceves Pastrana* y Alba Dolores Morales Cosme
Universidad Autónoma Metropolitana, Unidad Xochimilco, Calzada del Hueso 1100, Col. Villa Quietud. México 04960, D.F.
E-mail: shoffy14@hotmail.com
Recibido el 20 de marzo del 2002; aceptado el 3 de mayo del 2002
Resumen. El presente trabajo pretende ilustrar la relación existente
entre la química y la minería durante el siglo XVIII novohispano a
partir de las actividades del francés Esteban Morel, personaje rele-
vante en la historia de la ciencia de la Nueva España por su papel
como introductor de la inoculación de la viruela en las colonias espa-
ñolas. También pretende esclarecer las circunstancias de su miste-
rioso suicidio en una cárcel secreta de la Inquisición y su relación con
las actividades mineras que llevaba a cabo en el distrito de Real del
Monte en Hidalgo.
Palabras clave: Minería, inquisición, Esteban Morel, Nueva España.
Introducción
La relación entre la química y la minería siempre ha sido cer-
cana y cordial además de fructífera. Esto es especialmente
cierto para el siglo XVIII, cuando la explotación de plata a
partir de su amalgamación con mercurio floreció en toda la
Hispanoamérica colonial. Además de estar vinculada a la me-
talurgia y la mineralogía, la química era una actividad unida a
la práctica de médicos y farmacéuticos, quienes la utilizaban
como herramienta para averiguar las propiedades curativas de
las plantas y de otros recursos terapéuticos de origen animal y
mineral.
Modernizar el estudio de la materia médica fue el objetivo
de la cátedra de botánica instituida en territorio virreinal en
1788. Impartida por el farmacéutico Vicente Cervantes, la cáte-
dra fue un espacio para la difusión y aplicación de los sistemas
de Linneo y Lavoisier; sin embargo, la instrucción formal de la
química se estableció por primera vez en 1797, en el Real
Colegio de Minería, inaugurado cuatro años antes. Que los
médicos, los farmacéuticos y los mineros mantuvieran estre-
chas relaciones se ilustra a través de las actividades realizadas
por el médico Esteban Morel en Real del Monte, Hidalgo.
Introductor de la inoculación de la viruela en estos territorios
en 1779, Morel encontraría en Real del Monte un escenario
para desarrollar sus inquietudes en el campo minero y revelar
sus amplias relaciones con la comunidad científica local.
Si bien es cierto que la posesión de minas de plata durante
este período era sinónimo de abundancia y riqueza, también lo
es que eran objeto de silenciosas envidias y fieras disputas.
Uno de los distritos más ricos y prósperos durante ese periodo
fue precisamente Real del Monte. Esta zona fue una de las
Abstract. In the present work it is intended to highlight the intense
relationship between chemistry and minnig that took course during
the XVIII century in New Spain as related to the frenchman Esteban
Morel. This fellow was extremely important in the scientific platform
of the New Spain because of his role as the first physician who prac-
ticed the inoculation of smallpox in the spanish colonies. Furthermo-
re, it is suggested that his misterious suicide while imprisoned in the
Inquisition was a consequence of his mininng activities in the state of
Hidalgo, Mexico.
Keywords: Minning, inquisition, Esteban Morel, New Spain.
más explotadas por los españoles desde mediados del siglo
XVI, cuando se puso en boga el innovador e ingenioso método
de amalgamación de la plata con mercurio y sal común desa-
rrollado por Bartolomé de Medina, conocido como el método
de patio [1]. Una de las minas más famosas y codiciadas de
Real del Monte era la mina de Morán, que durante 1792 y has-
ta 1794, fue propiedad de Morel. Su encarcelamiento por la
Inquisición en 1794 con el consecuente embargo de todos sus
bienes —la mina de Morán incluida— despierta numerosas
interrogantes acerca de la relevancia de la mina y los medios
utilizados por los novohispanos de la época para hacerse de su
posesión. Asimismo, este episodio ilustra algunos aspectos de
los intereses, formas de trabajo y relaciones sostenidas por la
comunidad de profesionales vinculados con la química, la mi-
nería y la medicina en la Nueva España.
Métodos y técnicas
Como todo trabajo historiográfico, la metodología consistió en
la revisión, selección e interpretación de fuentes primarias
recopiladas en diferentes archivos de la Ciudad de México. Es-
tos fondos documentales son: El Archivo General de la Nación,
el Archivo Histórico de la Ciudad de México y el Archivo His -
tórico del Palacio de Minería.
El trabajo sigue los lineamientos de la historia social de
las ciencias, que nos permite entender el ejercicio científico
como una praxis señalada por el contexto en el que tiene lugar.
Desde esta perspectiva, el caso del doctor Morel permite
reconocer la existencia de una comunidad de profesionales al
tanto de las teorías científicas en boga, e interesada en su in-
190 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002)
tercambio y discusión. Al mismo tiempo es posible acercarnos
a sus formas de organización y vinculación profesional y per-
sonal, aspectos que revelan la existencia de una infraestructura
local —conformada por instituciones, publicaciones, conoci-
mientos teórico-prácticos— a partir de la cual se hace posible
la adquisición, adaptación, rechazo o puesta en práctica de
nuevos saberes.
Resultados
Esteban Morel nació en Auberre, diócesis de Marsella en
1744. Durante su adolescencia cursó estudios de gramática y
filosofía en Marsella para después encaminar sus intereses
hacia la medicina. Tras concluir su educación básica, Morel se
enlistó como estudiante de medicina en las Universidades de
Aix en Provence y Montpellier; de esta última obtuvo el título
de médico en 1764 [2].
Durante sus años de estudiante tuvo la oportunidad de a-
sistir a las cátedras de notables científicos de la época, tal es el
caso de Henri Haguenot (1687-1775), el cual impartía cursos
de cirugía y farmacia en la ilustre Universidad de Montpellier.
Haguenot fue miembro fundador de la Real Academia de
Ciencias de Montpellier, una de las más notables del siglo
XVIII. También fue alumno de la cátedra de Franςois De
Sauvages (1706-1767), un médico egresado de Montpellier
que se hizo célebre tras el éxito con el que fue recibido su tra-
bajo desarrollado en colaboración con el ilustrísimo Herma-
nnus Boerhaave y que consistió en la elaboración de un nuevo
sistema de clasificación de las enfermedades basándose única-
mente en la observación de los síntomas. De Sauvages tam-
bién fue miembro de la Real Academia de Ciencias de Mont-
pellier y en 1752 recibió un reconocimiento Real por su dis-
tinguida labor.
Las cátedras de anatomía y fisiología, las cursó bajo la
tutela de Franςois De Lamure (1717-1787), cuyos trabajos
sobre la dinámica del movimiento cerebral le valieron su pu-
blicación en la Real Academia de Ciencias de París en 1752.
No podemos dejar de mencionar la cátedra de Paul-
Joseph Barthez (1734 -1806) que fue colaborador de La
Enciclopedia en la cual publicó varios trabajos sobre el vita-
lismo, ni la cátedra de química impartida por Gabriel-Franςois
Venel (1723-1775), que al igual que Barthez también publicó
numerosos artículos de química, farmacia y fisiología en La
Enciclopedia.
De lo anterior se intuye que la formación de Esteban
Morel en las áreas de la medicina, la farmacia y la química fue
sólida y abundante.
Luego de finalizar los cursos correspondientes y en sus
propias palabras, “como es costumbre de los médicos de la
Europa, de no pasar a una libre propia práctica sin haber
seguido y estudiado con observación la de los grandes médi-
cos” [3], Morel llevó a cabo varias estancias en diferentes hos-
pitales bajo la tutela de varios médicos especializados en
diversas áreas; gracias a esta experiencia puso en práctica su
sentido de la observación para aprender lo más posible acerca
Liliana Schifter Aceves et al.
de las enfermedades y los remedios que debían aplicarse para
su cura. Una vez concluida esta etapa de estudiante y apren-
diz, Morel pasó a la aplicación de los conocimientos recién
adquiridos y poco después comenzaría un largo éxodo que
duraría el resto de su vida.
Apenas un año después de haberse recibido, Morel aban-
donó su país con destino a la isla de Guadalupe bajo auténtica
comisión del Rey de Francia, para ejercer el servicio de médi-
co en los hospitales militares de aquella provincia. El trabajo
implicado en el ejercicio de sus obligaciones requería de todo
su esfuerzo, el joven médico tenía que visitar hasta trescientos
enfermos diariamente, disponiendo para esta tarea únicamente
de una hora u hora y media. El resto del tiempo que pasaba en
el hospital, lo empleaba en la distribución de alimentos y
medicamentos para todos los pacientes, así como para realizar
las operaciones quirúrgicas que hicieran falta en el orden que
mejor conviniese a los enfermos.
Durante su estancia en el Caribe, Morel ejerció su profesión
en otras islas pertenecientes a la corona francesa, tal es el caso
de La Martinica y La Margarita. Posteriormente estuvo en
Venezuela y después en Cuba y Nueva Orleans antes de estable-
cerse en la capital de la Nueva España en 1778, previas escalas
en Guanajuato y Real de Catorce, lo que le permitió familiari-
zarse con dos de los distritos mineros más ricos del país [4].
Aunque aparentemente nunca ejerció su profesión de
manera formal en ninguna institución novohispana, Morel fue
una figura presente en el ámbito científico colonial. Su sólida
preparación le impulsó a llevar a cabo diversos trabajos duran-
te su estancia en nuestro país; muchos de ellos realizados en la
rebotica de sus amigos farmacéuticos y en especial en el esta-
blecimiento de Antonio Arbide, encargado de la botica del
Hospital General de San Andrés, uno de los nosocomios más
importantes de la ciudad.
Entre los trabajos desarrollados por Morel se pueden citar
los siguientes:
— Ensayos sobre la composición de la sal sedativa y el
jabón mineral
— Introducción del método para la elaboración de ether
vitriólico
— Estudios fisicoquímicos de aguas minerales
de la Ciudad de México y sus alrededores
— Estudio de las propiedades del pulque
— Introducción del método de La Garaye para
la preparación de la sal esencial de quina
Sin embargo, la mayor aportación de Morel a la población
novohispana y a la medicina colonial, fue la introducción de la
inoculación de la viruela en 1779. Acerca de este tema, el borla-
do de Montpellier publicó un largo y detallado trabajo en el
cual discute las ventajas de implementar este método en la
Nueva España para proteger a la población contra las terribles
epidemias de viruela que azotaban nuestro territorio con una
frecuencia aterradora. El título del trabajo era: Disertación
sobre la utilidad de la inoculación y hasta donde se sabe fue el
primero en la Nueva España acerca de este tema [5].
Minería e Inquisición en la Nueva España del siglo XVIII; el caso Morel
La medicina y la farmacia, no fueron las únicas áreas de
interés de este inquieto galeno, también tuvo una tormentosa e
intensa relación con la minería novohispana a través de una
mina situada en el distrito de Real del Monte en Hidalgo; la
Mina de Morán.
La relación de Morel con la Mina se remonta al año de
1789, cuando era el apoderado (o encargado de los procesos
legales) del entonces dueño de la mina, don Anselmo Montero.
Los documentos consultados indican que en ese entonces tenía
que hacerle frente a las acusaciones de Joseph Manuel Val-
carce, quien alegaba que la mina estaba abandonada y el sueldo
de los obreros era miserable. Esta acusación era muy grave, ya
que según las nuevas ordenanzas para la dirección, régimen y
gobierno de la minería en la Nueva España, vigentes desde
1783, si alguien podía demostrar que una mina estaba abando-
nada y presentaba una propuesta interesante para su explota-
ción, la mina pasaba a ser de su propiedad. Sin embargo, este
no era el caso, ya que Valcarce se retiró de la contienda a prin-
cipios de 1790 y la mina siguió en posesión de Montero [6]. Un
año más tarde, Montero cedió la mitad de la mina a su apodera-
do, y en 1792, debido a su regreso a su natal España, le vendió
a Morel la mitad restante por trescientos pesos, mismos que
recibió de contado el 17 de abril de 1792. Al año siguiente el
nuevo propietario habría de enfrentar nuevas acusaciones, esta
vez por parte de Joseph Belio, un hombre importante en el
panorama minero en México ya que era diputado territorial de
Minería de la jurisdicción de Pachuca y además era dueño de
algunas minas en El Chico, Hidalgo, donde además dirigía un
importante proyecto para desaguar algunos terrenos circun-
dantes de la zona los cuales sospechaba eran ricos en oro y
plata. Esto implicaba que era un hombre muy rico, ya que en
ese entonces los proyectos hidráulicos de acondicionamiento y
desagüe de minas eran extremadamente costosos [7]. A diferen-
cia de Valcarce, Belio esgrimió una estrategia diferente.
Presentó una denuncia ante el Real Tribunal de Minería en la
que argumentaba que de acuerdo a las ordenanzas ya men-
cionadas, Morel no podía ser dueño de minas en la Nueva
España dado su carácter de extranjero. Morel se defendió pre-
sentando ante el Tribunal una Real Orden fechada el 27 de no-
viembre de 1791, a través de la cual el Rey de España, Carlos
IV, le permitía desempeñar su profesión en nuestro país y como
tal era un extranjero tolerado. El Tribunal falló a su favor; aun-
que el expediente de la disputa permaneció abierto.
Aparentemente, una vez más, Morel había logrado defen-
der su mina; sin embargo su victoria no fue muy larga. El 5 de
septiembre de 1794, fue encarcelado por la Inquisición y sus
bienes fueron embargados, entre ellos la mina. Debía responder
a los cargos de herejía, desobediencia a las leyes de Dios, lec-
tura y posesión de libros prohibidos y divulgación de noticias
acerca de la Revolución Francesa.
Es significativa la coincidencia cronológica entre el litigio
por la posesión de la mina y el juicio promovido en su contra
por la Inquisición y que condujo a su arresto.
Las acusaciones, los acusadores, algunos documentos y el
registro del juicio de Morel, se encuentran reunidos en un ex-
pediente inquisitorial resguardado en el Archivo General de la
191
Nación. Este documento largo y rico en datos, fechas, nom-
bres y lugares, nos evoca incontables imágenes. Sus líneas dan
vida a Morel, nos revelan sus expresiones, creencias, costum-
bres e incluso sus amoríos y su temperamento. También
incluye las opiniones de calificadores y consultores a lo largo
del proceso y algunos papeles que se encontraron en posesión
de Morel al ser arrestado. Por último, contiene el testimonio
del mismo Morel recogido en las audiencias a las que fue so-
metido.
De su lectura se desprenden escenas de la vida cotidiana
tanto del médico como de la gente que frecuentaba, nos per-
mite introducirnos en la intimidad de sus casas, carruajes, bo-
ticas y negocios, además de que revela la identidad de los que
formaron el núcleo amistoso que Morel cultivó en nuestro
país. El médico francés y sus contertulios se reunían periódi-
camente para intercambiar libros, opiniones y discutir las teo-
rías sobre la materia, la naturaleza espiritual o material del al-
ma, el origen del mundo, así como los últimos acontecimien-
tos políticos.
Algunos de estos personajes eran bastante célebres en la
esfera científica de la Nueva España del siglo XVIII, tal es el
caso de Fausto De Elhuyar, destacado químico descubridor
del tungsteno, que además tuvo bajo su encargo la supervisión
de las minas de la Nueva España y la evaluación del posible
establecimiento en ellas de nuevas técnicas para optimizar la
extracción de metales. Eventualmente, De Elhuyar llegaría a
ser director del Tribunal y del Colegio de Minería; en este úl-
timo tuvo a bien el inaugurar la primera cátedra de química
impartida por él mismo en 1796 [8]. Entre los tertulianos de
Morel, también podemos contar a Francisco Xavier Sarría,
autor junto con Fausto De Elhuyar, del Suplemento al Ensayo
de metalurgia (1791) cuya importancia radica en que fue el
primer texto en castellano que explicó de manera sistemática
la teoría de Lavoisier y sus colaboradores; y Vicente Cer-
vantes, miembro de la Real Expedición Botánica de la Nueva
España, fundador del Jardín Botánico de la Nueva España y
primer traductor al castellano del Tratado elemental de
Chimica de Lavoisier [9].
Durante su estancia en la cárcel, de septiembre de 1794
hasta febrero de 1795, Morel fue sometido a varias audiencias
en las cuales fue interrogado acerca de sus actividades y creen-
cias. En las sesiones Morel admitió haber vivido en amasiato
con una mujer a la que hacía pasar por su recamarera, haber
transcrito algunos extractos de cartas que tenían que ver con la
Revolución Francesa para hacerlos circular entre sus conocidos
y haber estado en contacto durante su estancia en su país natal
con los libros de Montesquieu, Rosseau y Buffon; todos ellos
autores prohibidos por la Inquisición en ese entonces. Sin em-
bargo, se declaraba inocente de los cargos de herejía y falta de
observancia a las leyes de Dios. Esto no impidió el que le pre-
sentaran una acusación por escrito que contaba con más de
ciento treinta capítulos diferentes. La audiencia en la que esto
tuvo lugar habría de ser la última.
El domingo 15 de febrero de 1795, los custodios lo en-
contraron encerrado en su cuarto y bañado en su propia san-
gre; tenía una herida profunda y larga en el lado izquierdo del
192 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Liliana Schifter Aceves et al.

cuello provocada por unas pequeñas tijeras que en ese en- Referencias
tonces se utilizaban para recortarse la barba. Estaba vivo, sin
embargo, antes de brindarle atención médica, sus captores, 1. Probert, A., En pos de la plata, Compañía Real del Monte y
siempre más preocupados por el bienestar del alma que el del Pachuca S.A, México, 1987, 121-130.
2. Archivo General de la Nación, Hospitales, 1783, vol. 47, exp. 29,
cuerpo, intentaron convencerlo de que se confesase, a lo que
“Solicitud de Don Esteban Morel a la plaza de médico al Hospital
él se negó. No obstante, tres sacerdotes se dieron a la tarea de Real de Naturales”, fs. 464-473.
disuadirlo durante una hora. Finalmente, y después de haber 3. ibid., fs. 470-472.
logrado su cometido, llamaron al médico, pero por lo profun- 4. ibid., fs. 473.
do de la herida y la cantidad de sangre que había perdido no 5. Schifter Aceves, L. Medicina, farmacia, minería e Inquisición en
el siglo XVIII mexicano: el caso de Esteban Morel (1744-1795),
lograron salvarlo y murió a las 10:30 de la mañana.
tesis de licenciatura en Química Farmacéutica Bióloga, UNAM,
El 19 de junio de 1795, el Santo Oficio ordenó que se fi- 2001, 100-120.
jara una tabla en la Iglesia Metropolitana en la que figurara su 6. Archivo Histórico del Palacio de Minería, Morán, De, mina, Real
nombre, patria y delito, para perpetua memoria de sus pecados del Monte, Hidalgo: (1794-II-69 d.22).
[10]. 7. Archivo Histórico del Palacio de Minería, Morán, De, mina, Real
del Monte, Hidalgo: (1793-VII-66 ).
Así concluyó la vida del introductor de una práctica que
8. Palacios Remondo, J. “Los Hermanos Delhuyar: el aislamiento del
habría de convertirse en la mayor aliada de la medicina novo- Wolframio” en Aceves Pastrana, Patricia (ed), La química en
hispana en la guerra contra la viruela y que se estima, salvó Europa y América (siglos XVIII y XIX), Estudios de historia social
numerosas vidas en la última década del siglo XVIII mexi- de las ciencias Químicas y biológicas, 1, UAM-X, México, 1994.
cano. 9. Saladino García, A. “La química divulgada por la prensa ilustrada
del Nuevo Mundo” en Aceves Pastrana, Patricia (ed), La química
Su vida, a diferencia de la de sus amigos y compañeros de
en Europa y América (siglos XVIII y XIX), Estudios de historia
tertulia habría de terminar de manera trágica y violenta. Los social de las ciencias Químicas y biológicas, 1, UAM-X, México,
demás tertulianos nunca fueron convocados ante el Tribunal, 1994.
si bien eran importantes figuras en la plataforma social, 10. Archivo General de la Nación, Inquisición, 1795, vol. 1379, exp.
económica, científica y educativa de nuestro país, eso no im- 11. “Relación de causa seguida por el Santo Oficio contra el doc-
tor Don Esteban Morel”, fs. 228-286.
pedía el que fueran personajes bastante inquietos y que se reu-
11. Archivo Histórico del Palacio de Minería, Morán, De, mina, Real
nieran a menudo con personas que varias veces resultaron del Monte, Hidalgo: (1796-V-83 d.5)
encarceladas por el Santo Oficio. Habrá de suponerse enton- 12. del Río, Andrés M. Elementos de Oritognosia, 1795-1805, ed y
ces, que la cuestión de la nacionalidad era un factor con un estudio introductorio Raúl Rubinovich Kogan, México, Instituto
peso específico importante para esta organización. de Geología, Facultad de Química, Facultad de Ingeniería,
Sociedad de Exalumnos de la Facultad de Ingeniería, UNAM,
Además de ser francés, recordemos que Morel era dueño
1992, p. 32.
de la Mina de Morán en Real del Monte, una de las minas más
codiciadas debido a su riqueza en el contenido de plata funda-
mentalmente. Ya mencionamos anteriormente que cuando
Morel fue encarcelado, estaba en curso un juicio en el que Jo-
seph Belio buscaba quedarse con la mina; a raíz de su arresto,
Morel perdió la propiedad de la misma, y una vez que todos
sus bienes fueron embargados, la mina quedó a merced del
mejor postor. Al año siguiente de la muerte de Morel, el que
aparece como propietario de la mina de Morán es precisa-
mente Joseph Belio, quien la tendría en su haber hasta 1799,
cuando la mina volvería a ser motivo de numerosos pleitos y
denuncias [11]. Vale la pena mencionar que poco tiempo
después el yacimiento sería propiedad de Andrés Manuel del
Río, profesor del Real Seminario de Minería. Además de ser
el descubridor no reconocido del Vanadio, del Río fue el in-
ventor de una máquina de columna de agua o sistema de sifón,
primer proyecto tecnológicos aplicado en América para el de-
sagüe de yacimientos mineros, utilizada inicialmente en la
mina del Morán [12].
Se mantiene aún la interrogante acerca de la importancia
que tuvo esta mina en el desenlace de esta historia.
 Revista de la Sociedad Química de México, Vol. 46, Núm. 2 (2002) 193-195
Obituario
Francisco Giral González: un verdadero maestro
Andoni Garritz
Facultad de Química de la Universidad Nacional Autónoma de México. Ciudad Universitaria, Circuito Escolar. México 04510,
D.F. Tel.: (55) 5622-3439
El pasado mes de enero perdimos a un verdadero maestro. Fa-
lleció Francisco Giral González, alguien a quien, ya lo creo,
mucho nos esforzaremos por emular, pero nunca lograremos
sustituir. Dice Jaime Kravzov [1] que poseía don Francisco
“esa cualidad que es síntesis de generosidad, sabiduría y am-
plitud de criterio, capaz de contagiar en quienes le rodean la
pasión por el conocimiento, que hace que esos otros se intere-
sen por el camino del saber, dándole continuidad a su bús-
queda de una aplicación más humana de la ciencia”. Nada, un
verdadero maestro.
Recuerdo cuando don Francisco nos decía, una y mil ve-
ces, que Alfonso X, nuestro rey sabio, hizo la primera y mejor
definición de lo que debe ser una Universidad como «…ayun-
tamiento de maestros y escolares… hecho con voluntad y con
entendimiento de aprender los saberes», sólo que, añadía el
doctor Giral, desde la plataforma de las ciencias experimen-
tales modernas, yo le agregaría los haceres a los saberes, o
dejaría bien claro que el «saber» incluye el «saber hacer».
Así, en pocas palabras, nunca perdonó a Alfonso X el Sabio
no haber hecho explícito que la Universidad pretende el apren-
dizaje de los haceres y los saberes, ambos al mismo tiempo,
ambos iguales en importancia, ambos indispensables. Estaba
de acuerdo con Bernardo Houssay, premio Nobel argentino
por sus logros en la experimentación fisiológica y bioquímica,
cuando decía: «el desprecio al trabajo manual es una tradi-
ción que nos viene desde la época colonial».
Decía don Paco —como amablemente nos permitía a los
jóvenes dirigirnos a él— “No se puede hacer ciencia experimen-
tal, y muy particularmente, no se puede hacer química, sin una
buena dosis de trabajo manual, de esos «haceres» que omitió la
definición de Las Partidas. Como químico experimental, puedo
proclamar muy alto el inmenso placer que he sentido siempre
que he tenido que realizar una muy buena experimentación, al
comprobar la suprema actividad humana que significa realizar
algo nuevo con las manos dirigidas por la propia mente” [2].
*Semblanza publicada en la revista Educación Química 2002, 13, 74-76.
El doctor Giral vio nacer su interés científico en las rebo-
ticas familiares, primero con el recuerdo de su abuelo, Francis-
co González Serrano, y posteriormente con el ejemplo de su
padre, José Giral Pereira, a quien considera como «su maestro
de la vida, maestro de vocación y maestro de profesión»,
ambos fundamentales en su desarrollo personal y en su irre-
nunciable propósito de considerar a la farmacia, sobre todo,
como un servicio sanitario, y un apoyo sustancial para el que-
hacer de la medicina.
Además de los ejemplos familiares, el perfil científico del
doctor Giral se delineó gracias a maestros como don Miguel
Catalán, quien en el bachillerato lo inició en la química y la
física; don Enrique Moles, profesor de Química Inorgánica, y
don Antonio Madinaveitia, director de su tesis profesional y
posteriormente Director fundador del Instituto de Química en
1941, en México, donde ambos lograron sus aspiraciones de
vivir en la libertad y en el ambiente propicio para sus investi-
gaciones.
Obtuvo los doctorados en Farmacia y en Ciencias Quími-
cas por la Universidad Central de Madrid, en la que su padre
llegó a fungir como Rector. Completó su formación científica
durante un posgrado que cursó en Heidelberg, Alemania. Allí
llegó por consejo del célebre maestro Richard Willstäter,
Premio Nobel de química en 1913, quien lo había recomenda-
do con su más joven discípulo, Richard Kuhn, premio Nobel
posteriormente en 1939. Con Kuhn publicó varios trabajos, de
1933 a 1935, en revistas científicas alemanas y españolas. Esta
etapa de su vida académica fue sin lugar a dudas decisiva para
su carrera como investigador.
En febrero de 1936 ganó por oposición la cátedra de quí-
mica orgánica aplicada a la farmacia de la Universidad de
Santiago de Compostela. Debido a su clara filiación republica-
na, fue destituido por razones políticas en noviembre de ese
mismo año por la Junta de Burgos. Se desempeñó en diversas
actividades químico industriales al servicio del gobierno de la
República Española y tras la derrota de éste por las fuerzas
falangistas, fue internado en un campo de concentración en
194 Rev. Soc. Quím. Méx. Vol. 46, Núm. 2 (2002) Andoni Garritz
Francisco Giral González: un verdadero maestro
Francia, en donde fue invitado por don Salvador Zubirán para
viajar a México. Así llegó a México el joven catedrático, co-
mo parte del exilio español, gracias a la generosa iniciativa so-
lidaria del gobierno del general Lázaro Cárdenas.
Como hombre de ciencia y profesor universitario, en Mé-
xico dirigió unas 200 tesis de licenciatura, maestría y doctora-
do, es autor de alrededor de un centenar de artículos científi-
cos basados en trabajos de investigación experimental, publi-
cados en revistas especializadas, nacionales y extranjeras,
sobre temas como fitoquímica, esteroides, medicamentos
antipalúdicos, vitaminas, química de grasas animales y vege-
tales, química de insectos, entre otros. Publicó, adicional-
mente, unos 200 artículos y folletos de difusión, discusión y
divulgación sobre la enseñanza de la química, productos natu-
rales, alimentos e historia de la química y la farmacia. Es así-
mismo, autor de más de una docena de libros y traductor de
textos que, por su importancia, se han convertido en clásicos.
Como todo gran maestro, nos dejó una pléyade de alum-
nos, como Yoloxóchitl Bustamante, Ángela Sotelo, Lydia Ro-
dríguez-Hahn, Ofelia Espejo, Alfredo Büttenkleper, Ana Lui-
sa Anaya, Silvia del Amo, María Teresa Reguero, Marisela
Plascencia, Pedro Castañeda y Juan Senosiain, entre otros me-
xicanos, y entre los extranjeros al chileno Mario Silva, al cu-
bano Francisco Coll, y a los colombianos Jairo Calle y Rosa-
bel Segura. Porqué no mencionar que también ayudó a forjar a
sus hijos, José, Adela y Carmen como profesionales destaca-
dos de la ingeniería química, él, y la farmacia, ellas. Una de
las últimas tesis que dirigió, quizás la última, fue la de Ángela
López Giral, su nieta, quien recibió su influencia para realizar
un doctorado en química orgánica-productos naturales.
Son innumerables las distinciones que recibió durante su
desempeño académico y profesional. Destacan entre ellas el
nombramiento como profesor emérito de la UNAM; los docto-
rados honoris causa por las Universidades Nacional de México,
La Habana, Lima, Caracas y Sao Paulo; los premios nacionales
“Leopoldo Río de la Loza” en ciencias farmacéuticas, “Andrés
Manuel del Río” de la Sociedad Química de México, y “Martín
de la Cruz” del sector salud; las membresías correspondientes
de la Academia de Ciencias Farmacéuticas de México, de la
Academia de Ciencias Exactas Físicas y Naturales de la
República Argentina, de la Sociedad Química del Perú y de la
Asociación de Química y Farmacia del Uruguay. Asímismo, se
desempeñó como asesor de la Organización de las Naciones
Unidas para la Educación, la Ciencia y la Cultura (UNESCO) y
de la Organización Mundial de la Salud (OMS).
El doctor Giral, maestro extraordinario, humanista de
excepción y universitario por vocación, promovió y realizó
con impecable coordinación los distintos aspectos de la mi-
sión universitaria, que son las tres características de la actitud
del hombre ante el conocimiento universal: la adquisición (in-
vestigación), la transmisión (enseñanza) y la aplicación (utili-
zación) de ese conocimiento.
En 1980, a su regreso a Salamanca donde, después de la
muerte de Francisco Franco, retoma por un corto tiempo su
cátedra del departamento de química orgánica en la Facultad
de Farmacia, Giral se refiere al papel de los universitarios
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frente a los retos de un país: “como universitario del exilio
pienso hoy que un Estado moderno, una nación de vanguardia
—aunque ya no alcance la posición de soberana del mundo—
es hoy el fruto de la iluminación y la dirección de sus gradua-
dos de estudios superiores, sustancialmente los titulados uni-
versitarios, no sólo en su aspecto docente como formador de
profesionales sino también —y ante todo— en su aspecto rec-
tor del pensamiento libre, del juicio crítico político-social y de
la investigación científica. Soy partidario de aceptar la respon-
sabilidad ante la nación entera del desarrollo del país y pienso
que los universitarios debiéramos asumir el compromiso de
defender y mantener la calidad, la intensidad y la continuidad
de la vida universitaria como la mejor forma de contribuir al
progreso espiritual y material de España, independientemente
de su organización política y de su tendencia social.”
Otra frase notable de don Francisco Giral llama la aten-
ción porque no expresa resentimiento alguno por haber perdi-
do la guerra y su trabajo en su país natal, quizás porque logró
cumplir con su tarea de universitario cabal en otro país,
México: “Acaso, en aquella aurora de esperanzas que empeza-
ba a brillar en 1936 se nubló el alba de un nuevo siglo de oro
español. Los universitarios del exilio no deseamos reclamar
nada con violencia material ni con violencia espiritual, segui-
remos clamando con esclarecida dialéctica, sin agresiones,
con tolerancia recíproca, por la firmeza de nuestras ideas en
torno a la formación de mejores universitarios, de mejores
ciudadanos dotados de voluntades firmes, inteligencias claras
y corazones nobles” [3].
Y cerramos como iniciamos, con palabras de Jaime Krav-
zov [1]: “Sus alumnos reconocemos que el doctor Giral,
además de sus enseñanzas farmacéuticas, nos supo inculcar el
amor a la ciencia, el compromiso con la verdad, una ética in-
quebrantable frente a nuestra disciplina y el deber ineludible de
luchar por un mundo más justo para todos”. El maestro Giral
ya no está con nosotros, ahora acompaña en nuestro recuerdo a
su querida esposa, colega de profesión, testigo entusiasta de su
presencia internacional, colaboradora lúcida y desinteresada en
su proyecto de vida, doña Petra Barnés. Descansen en paz.
Referencias
1. Kravzov, J., Francisco Giral González. En Nuestros Maestros,
tomo I, págs. 97-100, Edición de la UNAM, México, 1996.
2. Giral, F. Teoría y práctica de la enseñanza de la química, en Semi-
nario de teoría de la ciencia, Miguel A. Quintanilla (editor), Edicio-
nes Universidad de Salamanca, págs. 177-201, Salamanca, 1982.
3. Giral, F. Comentarios químico-farmacéuticos a la historia españo-
la en América, Ediciones Universidad de Salamanca, Salamanca,
1980, 101 págs.