Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
SEGUNDO CUATRIMESTRE
Los estudios de laboratorio muestran, que al igual que todas las proteínas, las
enzimas son muy sensibles a los cambios de temperatura y acidez. Las enzimas funcionan
correctamente dentro un limitado rango de temperatura y pH. En condiciones de temperatura
elevada o pH alto (por encima de las condiciones óptimas para su funcionamiento), se
rompen las uniones débiles y se desarma la estructura tridimensional de la proteína (se
desnaturaliza) y pierde su capacidad para actuar como enzima.
Cada tipo de enzima funciona óptimamente a una determinada temperatura; si la
temperatura del medio en el que está la enzima se aleja de la óptima, la enzima disminuye su
actividad. Esta particularidad de las enzimas se puede representar en un gráfico como el siguiente:
El gráfico muestra cómo varía la actividad de la enzima (expresada en porcentajes) a medida que aumenta la
temperatura. La temperatura óptima de esta enzima es 40ºC. A esa temperatura la enzima funciona al 100%. A
temperaturas por debajo y por encima de los 40ºC la curva desciende, lo que muestra una disminución en la
actividad de la enzima. Por debajo de la temperatura óptima la actividad enzimática disminuye porque se reduce la
movilidad de la molécula, mientras que a temperaturas por encima de la óptima la reducción en la actividad se
atribuye a la desnaturalización. Las enzimas del cuerpo humano actúan preferentemente a temperaturas cercanas
a los 36-37ºC.
3
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
Enzimas y biotecnología
La mayoría de los procesos biotecnológicos tradicionales como la obtención de
yogur, la producción de cerveza o la fermentación de la uva para fabricar vino, son realizados
por las enzimas que cada microorganismo produce para su particular metabolismo. Sin
embargo también es posible realizar los procesos biotecnológicos con las enzimas, en ausencia
de los microorganismos.
La mayoría de las enzimas industriales se extraen de bacterias y hongos. Entre ellas:
Proteasa de bacilo, Amiloglucosidasa, αAmilasa de bacilo, Glucosa-isomerasa, Cuajo
microbiano, αAmilasa fúngica, Pectinasa, Proteasa fúngica.
Las enzimas presentan muchísimas aplicaciones y su utilización en el ámbito industrial
se lleva a cabo desde hace muchos años. Sus características específicas permiten a los industriales
ejercer un control más estricto de la calidad de sus productos.
En el siguiente esquema se mencionan algunas aplicaciones industriales de las
enzimas:
4
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
5
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
6
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
*
* Stone wash: Tipo de lavado industrial utilizando piedras que le da al material un aspecto “usado” o gastado”.
Amilasas
Al comenzar el tratamiento de la fibra, se debe extraer el almidón que la recubre
(proceso llamado desengomado).
El proceso de desengomado convencional puede ser realizado por hidrólisis (ruptura del
almidón en presencia de agua), donde los productos textiles son tratados con ácido, álcalis o
agentes oxidantes. También se puede eliminar por descomposición del almidón por
fermentación, en agua con microorganismos presentes en forma natural, que descomponen
el almidón del tejido.
Actualmente, estos tratamientos se encuentran en desuso debido a las dificultades
propias del método, dejando lugar al uso de las enzimas amilasas. Las amilasas son enzimas que
intervienen en la degradación del almidón. Para ello se utilizan las amilasas bacterianas
provenientes de Bacillus subtilis y Bacillus lichenformis, las cuales son estables a altas
temperaturas.
Para evitar la desnaturalización (pérdida de la estructura terciaria y la función) de esta
enzima durante el desengomado, primero se debe añadir agua, calentar hasta alcanzar la
temperatura óptima (entre 60 y 100ºC), establecer el pH óptimo (neutro) y entonces añadir la
enzima.
Según su temperatura óptima, se distinguen 3 grupos de amilasas:
temperatura óptima de 60-70ºC: se utiliza para el desengomado en un baño de larga
duración que dura entre 2 a 6 horas.
temperatura óptima de 80ºC: usadas en máquinas de lavado continuo por algunos
minutos.
temperatura óptima 100ºC: tratamientos con vapor por 1 a 2 minutos.
Lipasas
Son enzimas que degradan lípidos y son usadas en la industria textil, junto con las
amilasas, para el desengrasado de las fibras.
Pectinasas
En el tratamiento de las fibras de algodón, se deben extraer las pectinas de la pared de las
células primarias del algodón. Las enzimas pectinasas (que degradan esta sustancia) son
7
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
utilizadas en el lavado alcalino del algodón. Numerosos estudios realizados muestran que un
tratamiento usando solamente pectinasa, seguido por un enjuagado en agua caliente, es
capaz de hacer que la fibra de algodón se vuelva hidrófila y absorbente, facilitando su
posterior utilización.
Catalasas
En la industria textil la catalasa es utilizada para descomponer en oxígeno y agua el
peróxido de hidrógeno (H202) residual después del blanqueo de las fibras de algodón. La
remoción de este producto es necesaria para que las fibras puedan luego ser teñidas. La catalasa
es una enzima que se encuentra en organismos vivos y su empleo disminuye el consumo de
productos químicos, de energía y de agua.
Después del blanqueo, se produce el enjuague, se aplica ácido acético y se aplica la
catalasa en un baño nuevo o en propio baño de teñido por aproximadamente 10 minutos, a
temperaturas entre 20 y 50ºC, con un pH de entre 6 y 10.
Peroxidasas
Los restos de peróxido de hidrógeno utilizados en la etapa de blanqueo, en contacto con
pigmentos sensibles a la oxidación, pueden provocar pequeñas alteraciones en la tonalidad
causando reducción en el color. En el proceso convencional, los residuos de peróxido de
hidrógeno son removidos a través de varios enjuagues o de la adición de un reductor
inorgánico, el cual causa gran carga de sales en los efluentes. Para minimizar este efecto, se
utilizan las peroxidasas que reducen el peróxido de hidrógeno. La cantidad de enzimas usada
es menor que la cantidad de agente reductor inorgánico y no causan problemas ecológicos,
como la elevada carga de sales.
Las peroxidasas también pueden ser utilizas después del teñido, para la reducción de
colorantes residuales.
Celulasas
Las fibras están compuestas básicamente de celulosa la cual, al ser un material no
biodegradable, constituye un problema para el posterior tratamiento de efluentes.
Las celulasas son enzimas que degradan las fibras de la superficie (fibras sueltas y
microfibrillas) haciendo a los tejidos más lisos y blandos.
También son usadas para producir la apariencia “stonewashed” en los jeans.
Tradicionalmente esta apariencia en los tejidos Denim (nombre de la tela con que se
realizan los jeans) es otorgada por un proceso que utiliza piedra-pómez para desgastar el color
localmente por roce. Este proceso presenta muchas desventajas ya que causan el desgaste
rápido y rotura de las máquinas utilizadas, provocan gran abrasión empeorando la calidad de
la tela y causan problemas ambientales ya que se generan efluentes no biodegradables.
La ventaja en la utilización de celulasas en el proceso de desgaste del jean en relación al
proceso convencional, es que no causa gran degradación de la fibra como la piedra- pómez
y el desgaste es más uniforme.
Las celulasas son utilizadas juntamente con las piedras o sustituyéndolas totalmente.
El procedimiento general para su aplicación consiste en:
introducción de los artículos de celulosa en la máquina
ajuste de las condiciones del baño de tratamiento con pH entre 5,5 y 8,0 y
temperaturas de 50 a 60ºC
adición de la enzima y control de las condiciones de reacción (tiempo, temperatura,
pH y agitación mecánica)
interrupción de la actuación de la enzima: agregando carbonato de sodio
y/o aumentando la temperatura hasta 80ºC durante 10 minutos
Al culminar este proceso, se suele realizar un tratamiento de limpieza con un agente
blanqueante para resaltar los contrastes y eliminar la reposición de microfibras teñidas de color
azul que enmascaran el efecto logrado.
Estas enzimas no sólo se utilizan en el proceso de stone-wash de telas para jeans, sino
que también se utilizan en telas destinadas a la confección de blusas y faldas, porque el proceso
enzimático les otorga una textura aterciopelada similar a la seda natural.
Lacasas
Son enzimas del tipo fenol-oxidasa dependiente de cobre que tiene la capacidad de
catalizar reacciones de desmetilación. Este es un paso importante en la biodegradación de
8
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
9
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
biorremediación fue acuñado a principios de la década de los ‘80, y proviene del concepto de
remediación, que hace referencia a la aplicación de estrategias físico-químicas para evitar el daño y
la contaminación en suelos. Los científicos se dieron cuenta que era posible aplicar estrategias
de remediación que fuesen biológicas, basadas esencialmente en la observación de la capacidad de
los microorganismos de degradar en forma natural ciertos compuestos contaminantes.
Entonces, la biorremediación surge como una rama de la biotecnología que busca
resolver los problemas de contaminación mediante el uso de seres vivos (microorganismos y
plantas) capaces de degradar compuestos que provocan desequilibrio en el medio ambiente, ya
sea suelo, sedimento, fango o mar.
Tipos de biorremediación
En los procesos de biorremediación generalmente se emplean mezclas de ciertos
microorganismos o plantas capaces de degradar o acumular sustancias contaminantes tales como
metales pesados y compuestos orgánicos derivados de petróleo o sintéticos. Básicamente, los
procesos de biorremediación pueden ser de tres tipos:
Degradación enzimática
Este tipo de degradación consiste en el empleo de enzimas en el sitio contaminado con
el fin de degradar las sustancias nocivas. Estas enzimas se obtienen en cantidades industriales
por bacterias que las producen naturalmente, o por bacterias modificadas genéticamente que
son comercializadas por las empresas biotecnológicas. Por ejemplo, existe un amplio número de
industrias de procesamiento de alimentos que producen residuos que necesariamente deben ser
posteriormente tratados.
En estos casos, se aplican grupos de enzimas que hidrolizar (rompen) polímeros
complejos para luego terminar de degradarlos con el uso de microorganismos (ver en la
próxima sección). Un ejemplo lo constituyen las enzimas lipasas (que degradan lípidos) que se
usan junto a cultivos bacterianos para eliminar los depósitos de grasa procedentes de las paredes
de las tuberías que transportan los efluentes.
Otras enzimas que rompen polímeros utilizados de forma similar son las celulosas,
proteinasas y amilasas, que degradan celulosa, proteínas y almidón, respectivamente. Además de
hidrolizar estos polímeros, existen enzimas capaces de degradar compuestos altamente tóxicos.
Estas enzimas son utilizadas en tratamientos en donde los microorganismos no pueden
desarrollarse debido a la alta toxicidad de los contaminantes. Por ejemplo, se emplea la enzima
peroxidasa para iniciar la degradación de fenoles y aminas aromáticas presentes en aguas
residuales de muchas industrias.
Remediación microbiana
En este tipo de remediación se usan microorganismos directamente en el foco de la
contaminación. Los microorganismos utilizados en biorremediación pueden ser los ya
existentes (autóctonos) en el sitio contaminado o pueden provenir de otros ecosistemas, en
cuyo caso deben ser agregados o inoculados.
La descontaminación se produce debido a la capacidad natural que tienen ciertos
organismos de transformar moléculas orgánicas en sustancias más pequeñas, que resultan menos
tóxicas. El hombre ha aprendido a aprovechar estos procesos metabólicos de los
microorganismos. De esta forma, los microorganismos que pueden degradar compuestos
tóxicos para el ambiente y convertirlos en compuestos inocuos o menos tóxicos, se aprovechan
en el proceso de biorremediación. De esta forma, reducen la polución de los sistemas acuáticos
y terrestres.
La gran diversidad de microorganismos existente ofrece muchos recursos para
limpiar el medio ambiente y, en la actualidad, esta área está siendo objeto de intensa
10
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
investigación.
Existen, por ejemplo, bacterias y hongos que pueden degradar con relativa facilidad
petróleo y sus derivados, benceno, tolueno, acetona, pesticidas, herbicidas, éteres, alcoholes
simples, entre otros. Los metales pesados como uranio, cadmio y mercurio no son
biodegradables, pero las bacterias pueden concentrarlos de tal manera de aislarlos para que
sean eliminados más fácilmente.
Las actividades microbianas en el proceso de biorremediación se pueden resumir en el
siguiente esquema:
Ventajas:
Las plantas pueden ser utilizadas como bombas extractoras de bajo costo para
depurar suelos y aguas contaminadas.
Algunos procesos degradativos ocurren en forma más rápida con plantas que con
microorganismos.
Es un método apropiado para descontaminar superficies grandes o para finalizar la
descontaminación de áreas restringidas en plazos largos.
Limitaciones:
El proceso se limita a la profundidad de penetración de las raíces o aguas poco
profundas.
Los tiempos del proceso pueden ser muy prolongados.
La biodisponibilidad de los compuestos o metales es un factor limitante de la
captación.
Las plantas pueden incorporar las sustancias contaminantes mediante distintos procesos
que se representan en la siguiente ilustración y se explican en la tabla que continúa:
11
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
12
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
Plásticos Biodegradables
En búsqueda de una solución a los problemas ambientales que originan los plásticos se
han desarrollado plásticos biodegradables a partir de materias primas renovables, derivadas
de plantas y bacterias. Estos productos no son sólo biodegradables, sino también compostables,
lo cual significa que se descomponen biológicamente por la acción de microorganismos y
acaban volviendo a la tierra en forma de productos simples que pueden ser reutilizados por los
seres vivos, es decir que reingresan al ciclo de la materia.
14
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
Hoy en día las enzimas forman parte de los procesos industriales y de las actividades
domésticas. Por ejemplo, al lavar la ropa las enzimas son las que hacen el trabajo sucio de sacar
las manchas. Efectivamente, el detergente en polvo tiene enzimas que remueven
selectivamente las manchas de aceites, proteínas o almidones de la ropa. Las enzimas son
biocatalizadores, proteínas que aceleran los procesos de degradación, transformación o
fabricación de sustancias. Las enzimas que se usan industrialmente son producidas en
grandes cantidades por bacterias y hongos que se cultivan en tanques llamados fermentadores.
Estas enzimas se vienen usando desde hace más de 40 años con el objetivo de reemplazar a los
compuestos sintéticos, minimizar el uso del agua y el consumo de energía, ya que antes las
manchas sólo podían ser removidas con blanqueadores y altas temperaturas. La mayoría de las
enzimas que están hoy en el mercado han sido mejoradas por técnicas de ingeniería de proteínas
o provienen de microorganismos recombinantes (genéticamente modificados) para optimizar
su proceso de fabricación.
El origen de la suciedad
Existe una gran cantidad de suciedad en la ropa que proviene de:
Desechos que genera el cuerpo y las bacterias que viven en la piel humana. Cada día una
persona genera escamas de piel, sudor, sebo, triglicéridos, ácidos grasos y colesterol.
2
La microflora de la piel humana (hasta 1,5 millones de bacterias viven en 1cm ) se
alimenta de estos desechos orgánicos y produce compuestos adicionales que con
frecuencia despiden un fuerte olor.
Sustancias que derivan de productos de higiene personal como lociones, cremas,
desodorantes, maquillaje y lacas.
15
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
Jabones y detergentes
Eliminar la suciedad no es un reto menor. Los parámetros que pueden influir en los
resultados y en la satisfacción del consumidor son variados, y van desde el tipo de tejido y la
tintura empleada, hasta demandas de comodidad, bajo costo, cuidado de los tejidos y eficiencia.
A diferencia del jabón tradicional, la tecnología de los detergentes modernos es bastante
compleja.
Un jabón es la sal alcalina (generalmente de sodio o potasio) de un ácido graso de
cadena larga. Posee dos partes, la cola que es lipofílica (afín a las sustancias grasas) y repele el agua
(hidrófoba), y la cabeza que es hidrófila (afín al agua) o polar.
La acción limpiadora del jabón reside en la facultad que tiene la cola hidrocarbonada de
la molécula de jabón de disolver las gotitas de grasa insolubles en agua. Las moléculas de jabón
rodean a la suciedad hasta incluirla en una envoltura denominada micela, la parte apolar
(hidrófoba) de la molécula de jabón se disuelve en la gotita de grasa mientras que los grupos
polares, se orientan hacia la capa de agua que los rodea. La repulsión entre cargas iguales evita
que las gotas de grasa se unan de nuevo. Se forma así una emulsión que se puede separar de la
superficie que se está lavando.
Los jabones se preparan por medio de una reacción química llamada saponificación de
aceites y grasas. Si el álcali utilizado es hidróxido de sodio se obtiene un jabón duro o sólido, en
cambio con hidróxido de potasio el jabón es blando o líquido.
Los jabones son inefectivos para la limpieza en agua dura (contiene sales de metales
pesados, especialmente hierro y calcio), ya que el jabón reacciona con las sales de hierro y calcio
y, en consecuencia, no disuelve el jabón y precipita en forma de sales insolubles (costra de
las bañeras). Esta limitación de los jabones como agentes de limpieza ha dado impulso a
la industria de los detergentes, cuyas sales son solubles en agua.
Un detergente comercial es una mezcla de varios componentes cada uno con una
misión específica. El componente activo de un detergente es similar al de un jabón, y suele ser
un producto sintético normalmente derivado del petróleo. La tecnología de los detergentes
16
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
modernos satisface estas necesidades durante el proceso de lavado mediante dos procesos: la
eliminación física y la modificación química de las manchas por hidrólisis o por oxidación
(blanqueo), lo cual tiene como resultado su disolución, y/o decoloración respectivamente.
Los detergentes actuales contienen diferentes aditivos que intentan satisfacer la
demanda de los consumidores. Entre ellos:
Agente tensioactivo o "surfactante": Es el componente que tiene una función
similar al del jabón. Tiene propiedades humectantes, detergentes y emulsionantes.
Facilita la tarea del agua al conseguir que esta moje mejor los tejidos, lo que a su vez
incrementa la actividad de las enzimas. Además, tiene propiedades hidrofóbicas e
hidrofílicas y juegan un rol clave en la remoción de suciedad. Un buen surfactante
reemplaza a las lipasas en la remoción de lípidos y grasas.
Agentes coadyuvantes: Ayudan al agente tensioactivo en su labor. Entre ellos se
encuentran componentes que “ablandan” el agua y permiten lavar en aguas duras; otros
que evitan la reposición de la suciedad manteniéndola en suspensión, y otros que
blanquean manchas obstinadas.
Agentes auxiliares: Incluye componentes que evitan que el polvo se adhiera, sustancias
que contrarrestan la tendencia de la ropa a ponerse amarilla; estabilizadores de
espuma, colorantes, perfumes y enzimas que rompen las moléculas de proteínas,
lípidos, almidones, eliminando manchas de restos orgánicos como leche, sangre, aceites,
etc.
17
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
removerse con detergentes convencionales y agua. Las enzimas usadas son producidas
principalmente por Bacillus licheniformis o B. Amyloliquefaciens y Aspergillus flavus mediante
fermentación. Existe un considerable interés en el desarrollo de mejores proteasas para
polvos de lavado a través de ingeniería de proteínas, para evitar su oxidación.
Amilasas: aceleran la degradación de los residuos de almidón de alimentos como papa,
chocolate, etc. Las amilasas no son componentes esenciales de los detergentes
porque tienen una acción limitada sobre los carbohidratos. En adición, los carbohidratos
son solubles en agua y tienden a ser fácilmente removidos con la mayoría de los
detergentes y agua. La amilasa de Bacillus licheniformis es corrientemente agregada a
los jabones en polvo. Esta enzima es resistente a la degradación de las proteasas, es
activa a temperaturas de 85ºC y puede tolerar valores de pH cercanos a 10. El
problema más grande con las amilasas en la formulación de detergentes es la oxidación.
La ingeniería de proteínas ha sido usada para crear una amilasa resistente a la oxidación.
Lipasas: Las lipasas deben mezclarse con los lípidos para romperlos por hidrólisis,
pero las lipasas son solubles en agua y los lípidos son insolubles en agua. Por lo tanto, la
hidrólisis sólo ocurre en la interface entre la gota lipídica y la fase acuosa, lo que causa
que la reacción sea relativamente lenta e inefectiva. Además, las condiciones dentro de
una lavadora de ropa son hostiles para una enzima y la mayoría de las lipasas no son
suficientemente estables en esas condiciones. Por lo tanto, se busca desarrollar lipasas
que permitan la remoción de manchas de grasas a bajas temperaturas de lavado. Una
combinación de búsqueda y manipulación genética ha conducido a la introducción
reciente de lipasas en los jabones en polvo. Un ejemplo es la lipasa Humicola, que se logró
producir en Aspergillus oryzae y que se conoce como "Lipolasa".
Celulasas: En 1985 se introdujo al mercado un tipo revolucionario de enzima celulasa para
detergentes, Cellulasa, producida por el hongo Humicola insolens para remoción de
suciedad, y restaurador de suavidad y color de fibras de algodón. Las celulasas aceleran
la degradación de pequeñas fibras que endurecen la ropa y opacan los colores sin
afectar las fibras principales de la ropa, mejorando así la suavidad y los colores de la
misma.
18
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
Bioingeniería de enzimas
Durante las últimas décadas, nuevos desarrollos en enzimología en combinación con la
aplicación del ADN y la ingeniería de proteínas han conducido a la bioingeniería de
enzimas. La ingeniería de proteínas consiste en modificar una proteína existente o crear
una nueva proteína con propiedades específicas. Estas tecnologías avanzan con el estudio de
los extremófilos, la identificación de nuevos compuestos y las rutas metabólicas, y la
caracterización molecular y bioquímica de componentes celulares.
Debido a que muchos procesos industriales requieren altas o bajas temperaturas o pH
ácidos o alcalinos, los organismos extremófilos que viven en condiciones ambientales extremas
de temperatura, salinidad, etc., se han convertido para las industrias en atractivas fuentes de
enzimas. Por ejemplo, en la industria de los detergentes y jabones para la ropa de uso hogareño
se utilizan biocatalizadores que quiten las manchas a baja temperatura, mientras que en
tratamientos de esterilización de ropa de quirófano se prefiere un jabón que tenga
biocatalizadores que funcionen a altas temperaturas. La industria del cuero y las pieles requiere
enzimas que degraden proteínas de la piel de los animales en condiciones de alta salinidad o
minerales. En cada caso se emplearán enzimas provenientes de diferentes extremófilos.
En una primera instancia, los propios organismos eran la fuente de donde se extraían las
enzimas. Luego, se clonaron los genes de los extremófilos que codifican dichas enzimas y
actualmente se las produce a escala industrial en microorganismos recombinantes que fueron
transformados para que sobreproduzcan la enzima de interés en biorreactores.
19
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
ACTIVIDAD 1.
1. ¿Qué son las enzimas desde el punto de vista estructural?
2. ¿Cuál es la función de las enzimas?
3. ¿Porqué es impensable el metabolismo en las células sin enzimas?
4. ¿Cuales son los campos de aplicación más importantes de las enzimas en la industria?
ACTIVIDAD 2.
Las dos curvas que se muestran en el siguiente gráfico representan la actividad de dos tipos
diferentes de enzimas.
ACTIVIDAD 3.
Texto 1: Patatas OGM que transforman su fécula en fructosa
Un artículo de la revista Biotechnology and Bioengineering anuncia la creación de un nuevo tipo de
patata OGM por parte de la Universidad Jules Verne de Amiens (Francia). Se trata de una patata
a la que se la ha incorporado genes procedentes de bacterias que producen enzimas (alfa amilasa)
que descomponen la fécula de la patata en glucosa, y una segunda enzima (glucosa isomerasa)
que transforma la glucosa en fructosa. Estas enzimas solo trabajan a altas temperaturas. El
resultado es una patata que aparentemente es normal, pero que en cuanto se calienta a unos 65º
se transforma en una pequeña fábrica química transformando la fécula en fructosa, un
edulcorante que se utiliza en muchos productos alimentarios, incluyendo aquellos que son
especiales para diabéticos, que no toleran el azúcar normal (sacarosa).
20
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
ACTIVIDAD 1.
a) Unir con flechas, teniendo en cuenta las características de las enzimas utilizadas en la industria
textil:
ACTIVIDAD 2.
1. El último grito de la moda: telas hechas de arroz y plumas
En el futuro podría ser perfectamente factible usar vestidos y trajes fabricados con materiales
derivados de plumas y desechos vegetales. Así lo afirman los científicos de la Universidad de
Nebraska, quienes están planeando desarrollar métodos para convertir los desechos de la
actividad agropecuaria en fibras textiles, como una manera de reducir el empleo de fibras
sintéticas derivadas del petróleo. En el caso de las plumas, que normalmente son un desecho de
la producción avícola, consiguieron transformarlas en fibras que lucen como la lana, y en el caso
del rastrojo de arroz, las telas resultantes se parecen a las de lino o algodón. “Esperamos que
esta investigación estimule el interés por emplear desechos o productos secundarios de la
actividad agropecuaria para hacer fibras y telas”, señaló Yiqi Yang, profesor de Ciencias Textiles
de esa Universidad. Con millones de toneladas de plumas de pollo y rastrojo de arroz que se
descartan cada año, estos materiales representan una alternativa abundante y barata a las fibras
sintéticas basadas en derivados del petróleo. Pero además, a diferencia de las fibras sintéticas,
son biodegradables. El proyecto más avanzado es el de arroz. El rastrojo consiste en los tallos
de la planta de arroz, que quedan después de la cosecha de esos granos. Como el lino y al
algodón, el rastrojo de arroz está compuesto principalmente de celulosa. Usando una especial
combinación de químicos y enzimas, los investigadores lograron desarrollar fibras a partir del
rastrojo. “Las propiedades de estas fibras indican que podrían emplearse para confeccionar telas
usando las máquinas textiles comunes. El resultado tendrá una apariencia similar a las telas de
lino o algodón”, explicó Yang. En cambio las plumas de pollo están constituidas principalmente
de queratina, la misma proteína que tiene la lana. Los investigadores están trabajando para
fabricar fibras inclusive mejores que la lana, basándose en la arquitectura particular que tienen
ciertos aportes de las plumas.
a. ¿En qué año y en dónde se realizó la investigación?
b. ¿Cuál fue el objetivo de esta investigación? ¿Cuáles fueron los resultados obtenidos?
c. ¿Cuál es la importancia y los beneficios de estos desarrollos?
d. ¿Cuál sería el aporte de la biotecnología en este nuevo proyecto?
21
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
de las hojas (apéndices epidérmicos). Luego transformaron plantas de algodón, donde los genes
se expresaron también correctamente, observándose la producción de melanina en las células
epidérmicas y la coloración marrón de las fibras.
1. Relatar cuál es la novedad que presenta este artículo.
2. ¿Cuáles serían los resultados de este procedimiento?
3. ¿Cuál sería el beneficio de este proceso?
ACTIVIDAD 3.
Completar el párrafo con los términos que se indican a continuación: PLÁSMIDO –
CELULASA – GEN – VECTOR – FERMENTADORES - RESISTENCIA A
ANTIBIÓTICOS – PURIFICACIÓN - INGENIERÍA GENÉTICA –
TRANSFORMADAS – RECOMBINANTE - BACTERIAS
Texto:
Como primer paso, se debe detectar y aislar el _____ que codifica para la enzima de interés (en
este caso, la enzima _______). Mediante la aplicación de las técnicas de _______ ______, se
debe introducir el gen aislado en un ____ de transgénesis (en este ejemplo, un ________) y
luego incorporarlo en _________. Este vector también posee genes de ________ _
__________ los cuales al estar presentes en el genoma de las bacterias transformadas permiten
la selección durante el crecimiento de los microorganismos resistentes a los antibióticos.
Una vez que las bacterias están ___________, se procede a cultivarlas en recipientes especiales
llamados _________. Después de seleccionar la cepa de bacterias que presente el mayor grado
de producción de enzima ___________ se procede a la _________ de la celulasa hasta obtener
un producto comercializable.
22
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
ACTIVIDAD 1
Elegir la/s respuesta/s correctas en las siguientes opciones múltiples:
2- La biorremediación involucra...
a-...el uso de organismos vivos.
b-...el uso de compuestos sintéticos.
c-...el uso de “remedios”.
d-...el uso de componentes celulares.
e-...el uso de enzimas libres.
5- La ingeniería genética...
a-...no puede aplicarse en biorremediación porque no tiene sentido tratar de modificar a los
descomponedores.
b-...puede permitir que las bacterias presenten mayor capacidad para producir enzimas
implicadas en el mecanismo de degradación.
c-…permite agregarle a plantas genes de microorganismos para que sean mejores
biorremediadoras.
d-Ninguna opción es correcta.
ACTIVIDAD 2.
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _A_ _ _ _
2 __ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _M_ _
3 B_ _ _ _ _ _ _ _
4 _ _ _ _ _ _ _ _ _ I_ _ _ _ _ _ _ _
5 _ _ _ _E_ _ _ _ _ _ _ _ _
6 _ _N_ _ _
7 T_ _
8 _ _ _ _ E_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
1. Proceso por el cual se usan plantas para contener, remover o neutralizar contaminantes.
2. Organismos microscópicos utilizados en la digestión de sustancias contaminantes.
3. Microorganismos que emplean el petróleo como fuente de energía.
4. Proceso por el cual las plantas captan y modifican metales pesados o compuestos orgánicos y
los liberan a la atmósfera con la transpiración.
23
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
5. Proceso por el cual las plantas se usan para concentrar metales en las partes cosechables (hojas
y raíces).
6. Uno de los tipos de microorganismos utilizados en saneamiento ambiental.
7. Compuesto tóxico altamente explosivo.
8. Proceso por el cual las plantas estimulan el crecimiento de bacterias descontaminantes en sus
raíces.
ACTIVIDAD 3.
Modifican bacterias que viven en las plantas para ayudar con la limpieza del medio
ambiente
El uso de plantas para limpiar o restaurar el medio ambiente se denomina fitorremediación, y
como toda tecnología, suele tener sus limitaciones. Por ejemplo, los compuestos contaminantes
o sus metabolitos pueden matar o dañar a las plantas, o volver al medio ambiente por
evaporación en las hojas. Pero un grupo de investigadores del Departamento de Energía del
Laboratorio Nacional Brookhaven de Estados Unidos y sus colegas de Bélgica encontraron una
manera para mejorar el proceso: transferir genes de bacterias del suelo que normalmente
degradan contaminantes a bacterias que residen en las plantas. Mostraron que esta estrategia
puede emplearse en fitorremediación y, usando estas bacterias “reforzadas”, aumentaron la
capacidad de las plantas de degradar tolueno. “Lo que hicimos fue introducir los genes
correspondientes a una vía metabólica de degradación en bacterias que residen en las plantas.
Inoculando las plantas con estas bacterias, denominadas “endófitas”, podríamos hacer que las
plantas sean capaces de degradar una gran variedad de contaminantes orgánicos”, dijo Daniel
van der Lelie, uno de los investigadores en el proyecto. Los científicos empezaron introduciendo
los genes de una bacteria que degrada tolueno en otra bacteria que coloniza naturalmente las
raíces y tallos de una planta modelo. Seleccionaron las bacterias endófitas que habían adquirido
la capacidad de degradar tolueno y las usaron para inocular las plantas. Al cabo de un tiempo,
confirmaron que las raíces y brotes estaban colonizados por bacterias capaces de crecer en un
medio de cultivo con tolueno. Probaron, además, que las plantas inoculadas también podían
crecer en presencia de tolueno, en condiciones en las que las plantas sin inocular morían. Aún
más, vieron que las plantas inoculadas con las bacterias endófitas modificadas liberaban tres o
cuatro veces menos tolueno a la atmósfera. El próximo paso es probar la técnica en álamos y
sauces, que son árboles de raíces profundas usados en fitorremediación. “En los árboles, los
contaminantes suelen demorar muchas horas o días hasta alcanzar las hojas. Eso nos da el
tiempo suficiente como para conseguir una degradación eficiente con las bacterias endófitas”,
agregó van der Lelie. Los científicos ya aislaron 150 especies de bacterias que viven como
endófitas en los álamos, e iniciaron experimentos para ver cuáles serían las más fáciles de
modificar genéticamente.
1. ¿Cuáles son los individuos estudiados que se mencionan en el artículo y cuáles son las
características de cada uno de ellos?
2. ¿Cuál de ellos son los que metabolizan sustancias contaminantes?
3. En el artículo se menciona que usarán “bacterias reforzadas”. ¿Qué quieren decir estos
términos?
4. Las plantas utilizadas en este estudio, ¿son transgénicas?
5. ¿Cuáles son las perspectivas que tienen los investigadores a partir de los resultados
obtenidos?
ACTIVIDAD 4
Los gráficos diagramados a continuación representan, cada uno de ellos, los resultados
obtenidos antes y después de un tratamiento biológico mediante el empleo de bacterias no
transgénicas aplicado de Residuos Mineros y Metales Pesados. Las sustancia tratadas son:
arsénico (As), cadmio (Cd), cobre (Cu), plomo (Pb), aluminio (Al), zinc (Zn) y manganeso (Mn).
24
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
6. ¿Para cuáles de los compuestos tratados dirían que este método de tratamiento no resulta
muy eficiente? ¿Cómo es posible determinarlo a partir de observar el gráfico Qué solución
podría ofrecer la biotecnología para los casos mencionados en la respuesta anterior, en los
cuales los microorganismos empleados no logran resolver el problema de la contaminación?
7. Sugerir cómo sería el método de ingeniería genética que deberían aplicar los investigadores
para desarrollar microorganismos capaces de degradar aquellos contaminantes más difíciles
de degradar naturalmente.
ACTIVIDAD 5.
Se presentan en una tabla los resultados de un tratamiento de descontaminación
ambiental mediante el empleo de microorganismos.
25
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
ACTIVIDAD 1.
La siguiente fotografía muestra los resultados de una experiencia en la cual se dejaron en la tierra
durante diferentes períodos de tiempo tres envases de shampoo fabricados a partir del polímero
PHB, sintetizado en plantas. A partir de este dato responder a las consignas que siguen a
continuación:
a) ¿Cuál fue el método empleado para fabricar el plástico del cual se fabricaron los envases?
b) ¿Qué ocurrió con estos envases a lo largo del tiempo? ¿A qué se debe este proceso?
c) ¿Cuál será el objetivo del envase “control”?
d) Si se compara con el tiempo que tarda en degradarse un envase de plástico sintético,
¿qué se podría concluir acerca de las ventajas de la producción de bioplásticos en
plantas?
ACTIVIDAD 2.
a. Analizar en cada esquema, cuál es el destino del plástico en cada caso, cuál es la utilidad que
se encuentra a estos desechos, y buscar más información de estos procesos y las etapas que
involucran.
b. Indicar si los plásticos a los que hacen referencia estos esquemas son polímeros naturales o
sintéticos. Justificar la respuesta e indicar cuál es la diferencia entre estos tipos de materiales
desde el punto de vista de su estructura y de su destino en la naturaleza (si son biodegradables
o biodestructibles).
c. Explicar cuál es la importancia de realizar estos procesos de reciclaje para el cuidado del
ambiente, y analizar cuál sería el destino de los plásticos en caso de no utilizar estos métodos.
d. Explicar por qué estos procesos no serían necesarios en caso de utilizar bioplásticos.
Esquema 1
Esquema 2
26
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
ACTIVIDAD 3.
En la siguiente tabla se reproducen datos acerca del tiempo que tardan diferentes materiales en
reciclarse en la naturaleza. Después de analizarlo, responder a las preguntas que aparecen a
continuación.
a. Tomando en cuenta el tiempo que tardan en degradarse los materiales, indicar cuál resulta
más conveniente utilizar: ¿un envase de telgopor o uno de papel? ¿botellas de vidrio o
envases de plástico?
b. ¿De qué depende el mayor o menor tiempo que tarda un producto en degradarse?
c. ¿Qué solución ofrecerían los bioplásticos desde el punto de vista del tiempo de degradación?
d. ¿En qué nivel de la tabla, aproximadamente, se incluiría un bioplástico?
27
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
ACTIVIDAD 1.
1. ¿Qué son las enzimas desde el punto de vista estructural?
2. ¿Cuál es la función de las enzimas?
3. ¿Cuál es la finalidad del uso de enzimas en los detergentes para la ropa?
4. Indicar cuáles son las enzimas que se agregan a los detergentes.
5. ¿Cuáles son las ventajas del uso en los detergentes de enzimas provenientes de
microorganismos recombinantes?
6. ¿Cuál es el mecanismo de acción del jabón?
7. ¿Cuál es la diferencia entre jabón y detergente?
8. ¿Cuál es el aporte de la biotecnología moderna en la fabricación de detergentes enzimáticos?
ACTIVIDAD 2.
En un laboratorio de bioquímica se midió la actividad de la amilasa de la saliva humana a
diferentes temperaturas, entre 0°C y 100°C.
a) Indicá cuál es la función de esta enzima, cuál es su sustrato y cuál es el producto que se
mediría en esta reacción.
b) Representá en un gráfico los resultados que se habrán obtenido en la experiencia. Señalá
en el gráfico cuál sería la temperatura óptima de esta enzima.
c) Explicá cuáles son las causas de la variación en la actividad enzimática en temperaturas
inferiores a la óptima y en temperaturas superiores a ella.
d) ¿Qué es la especificidad enzimática? ¿Qué experiencia propondrías para demostrar la
especificidad de la amilasa? ¿Qué resultado esperarías obtener?
e) ¿Cómo se representa en la ilustración la especificidad enzimática?
f) Indicar cuál sería el producto de esta reacción si el sustrato fuese una proteína, si fuese
almidón, si fuese ADN, o si fuese una grasa (suponiendo que se degrada hasta sus unidades
o monómeros).
ACTIVIDAD 3.
Investigar cuál es el principal componente de cada tipo de alimento y, a partir de esto, sugerir
qué tipo de enzima se utilizaría si la ropa estuviera manchada con ese producto:
La ropa se manchó con.... Qué tipo de enzima debería usar para limpiar la ropa...
Huevo
Mayonesa
Sangre
Pasto y barro
Leche
Aceite
Crema
Caramelo
ACTIVIDAD 4.
A continuación se presenta un artículo sobre un proyecto de investigación a realizarse en Chile.
“El uso de enzimas a bajas temperaturas posee un gran potencial, tanto en las formulaciones de detergentes
28
BIOTECNOLOGÍA – JOSÉ MARTÍ – VIVIANA ODETTI
(proteasas y lipasas), como en la industria de alimentos, salud, etc, fundamentalmente por el ahorro de energía.
El krill antártico es extraordinariamente interesante como fuente de enzimas de propiedades únicas,
específicamente de proteasas y lipasas que son altamente activas a bajas temperaturas.
En este proyecto diseñado por investigadores chilenos se utilizarán conocimientos de avanzada de biotecnología,
bioquímica y química que permitan la caracterización y purificación de proteínas; como así también conocimientos
de ingeniería de proteínas para investigar, caracterizar, y mejorar la producción de proteasas y lipasas criofílicas
(de acción a bajas temperaturas) de krill antártico para ser utilizadas en la formulación de detergentes y en la
industria de alimentos. Los investigadores participarán activamente en el clonado de las enzimas óptimas, tanto
para la caracterización fina de las proteínas como para presentar alternativas de aplicación industrial viables y
de bajo costo en caso que las enzimas de interés se encuentren en el extracto de krill en concentraciones
relativamente bajas o si por condiciones impredecibles la captura del krill se hiciera difícil. Se realizará un estudio
detallado de la proteasas de krill que incluye la secuenciación de las mismas y posteriormente mediante ingeniería
de proteínas se intentará mejorar las propiedades, por ejemplo para obtener proteasas que funcionen eficientemente
a bajas temperaturas. Por otro lado se hará un estudio detallado de todas las lipasas presentes en extractos de
krill, con alta actividad a baja temperatura, su caracterización y estabilidad en presencia de los diferentes
componentes de los detergentes y la separación y purificación de las enzimas. Las proteasas y lipasas serán
caracterizadas en detalle y aquellas con mayor potencial industrial para la formulación de detergentes serán
seleccionadas”.
1. ¿Cuál es el objetivo del proyecto?
2. ¿Qué beneficio trae el uso de enzimas a bajas temperaturas según el texto?
3. ¿Qué otros beneficios representa para el lavado de ropa?
4. ¿A qué se denomina enzima criofílica?
5. ¿Qué función cumplen las proteasas y las lipasas en el lavado de ropa?
6. Investigar qué es el Krill y dónde habita. A partir de lo investigado deducir por qué el Krill es
fuente de enzimas criofílicas.
7. ¿De qué otros organismos se podrían aislar enzimas apropiadas para la formulación de
detergentes?
8. ¿Qué características deberán presentar las enzimas de Krill para ser apropiadas en la fabricación
de detergentes?
9. ¿Qué tipo de conocimientos requieren los investigadores para trabajar en el tema?
29