MICROBIOLOGÍA ÍNDUSTRIAL IX-CICLO

AISLAMIENTO Y SELLECIÓN DE MICROORGANISMOS

PRODUCTORES DE ENZÍMAS (AMILASAS)
INTRODUCCIÓN

Las enzimas son proteínas que actúan como aceleradores de las reacciones
químicas, de síntesis y degradación de compuestos, éstas se encuentran en todos
los seres vivos y son piezas esenciales en su funcionamiento. Èstas tienen muchas
aplicaciones en diversos tipos de industrias, entre las que se destaca la alimenticia,
por ejemplo en la obtención de yogurt, o la producción de cerveza o de vino, ya que
el proceso de fermentación se debe a las enzimas presentes en los microorganismos
que intervienen en su producción.

La amilasa, es una enzima hidrolasa que tiene la función de catalizar la reacción de

hidrólisis de los enlaces 1-4 del componente α-amilasa al digerir el glucógeno y
el almidón para formar azúcares simples.

Las amilasas son comúnmente halladas en animales y plantas; sin embargo, para
fines industriales, las más utilizadas son aquellas de origen bacteriano o fúngico. Las
amilasas poseen una gran importancia en la producción de alimentos y de
biocombustibles. También presentan gran utilidad en la industria textil. Se han
utilizados amilasas para la obtención de jarabes fructosados.

Aunque estas enzimas son producidas por procariotas y eucariotas; la fuente

bacteriana es la preferida industrialmente por su crecimiento rápido y medios de
cultivo poco exigentes. Así, las bacterias productoras de amilasas más descritas
pertenecen al género Bacillus, entre éstas: B. subtilis, B. stearothermophilus, B.
licheniformis y B. amyloliquefaciens (Prakash y Jaiswal, 2010). A la vez, se han
reportado algunas bacterias amilolíticas halófilas como Chromohalobacter sp.
(Prakash et al., 2009), Halobacillus sp. (Amoozegar et al., 2003), Halomonas
meridiana (Coronado et al., 2000), Bacillus dipsosauri (Deutch 2002) y Micrococcus
sp. 4 (Khire 1994).

A nivel industrial, la degradación del almidón requiere diversas condiciones

catalíticas desde muy suaves hasta extremas, por ello la búsqueda de bacterias
productoras de amilasas de ambientes hipersalinos permitiría obtener fuentes
alternativas de enzimas con nuevas características

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IMPORTANCIA:

La detección de microorganismos productores de amilasas nos demostraría que

estas enzimas se pueden obtener a partir de microorganismos que se encuentran en
nuestro suelo. Estos microorganismos e pueden utilizar en industrias para la
Obtención de maltosa para jarabes de cerveza o confituras,
En la industria panadera se utiliza en procesos de fermentación,
En la industria textil remoción de almidón (apresto).

OBJETIVOS:

 Aislar microorganismos productores de la enzima amilasa obtenidos de

muestras de suelo y compost
 Detectar los microorganismos con mayor producción de amilasas.

MATERIALES:

 Bolsas plásticas
 1 gr de tierra de cultivo y humus c/u
 4 Tubos con solución salina estéril 0.9 % con 9 ml c/u
 2 placas de agar almidón 1%
 2 placas de agar nutritivo
 Lugol (indicador de producción de amilasas)
PROCEDIMIENTO:

1. Se obtuvo muestras de suelo y humus

2. Se Realizó diluciones sucesivas de hasta 10 -2 para c/u
3. Posteriormente se sembraron por técnica de agotamiento y estría en placas
con agar almidón 1%.Se dejó incubar a 37 °C por 24 horas
4. Luego seleccionamos las cepas que crecieron y la sembramos por duplicado
en agar almidón y agar nutritivo por puntura codificando cada una de ellas.
5. Transcurrido las 24h el que se sembró en agar almidón se le adicionó unas
gotas de lugól ( indicador de producción de amilasas)
6. Las cepas en agar nutritivo nos sirvieron para una segunda prueba de
confirmación con las cepas que presentaron halos en el agar peptona
7. Adicionamos lugól

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RESULTADOS:
Se midió el diámetro de los halos de las cepas productoras de amilasas para una
siguiente comparación con cada una de las mesas.

Medición de
Cepa con mayor
Grupo Cepas halos
producción de amilasas
(mm)
A1-6 8
A1-A 5
1 A1-6
H1-F 2
H1-G 3
G-3 12
G-6 5
2 G-1 2 G-3
M-3 2
M-1 2
3 S9 8 S9
TABLA N° 1 Cepas con su respectiva medida de halos de producción de amilasas

DISCUSIÓN Y CONCLUSIÓN:

 Se pudo determinar que la tierra de cultivo y el humos tienen bacterias

productoras de amilasas.
 Se logró observar demostrativamente la producción de enzimas (amilasas).
 Hubo una comparación entre las cepas de cada mesa y se constató que la
cepa G-3 perteneciente a nuestro grupo tuvo una mayor producción de
amilasas al presentar un diámetro de 12 mm.
 A pesar de poder determinar la producción de la enzima amilasa ninguna de
las cepas puede ser considerada como buena productora debido a que el
diámetro de los halos no es muy considerado.

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BIBLIOGRAFÍA:

 DURANGO, E. 2008. Producción de enzimas amilasa microbiana, mediante

fermentación en estado líquido. Fecha de consulta: 08/08/2017. Disponible en
[https://www.academia.edu].
 Pamela E. Canales.2014.Caracterización de bacterias halófilas productoras
de amilasas aisladas de las Salinas de San Blas en Junín fecha de
consulta:08/08/2017.Disponible en :
[http://www.redalyc.org/pdf/776/77632757018.pdf]
 VARGAS A. 2002 Selección y evaluación de bacterias del género bacillus
productoras de amilasa en cultivo sumergido .Fecha de consulta:
08/08/2017.disponible
en:[http://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtual/tesis/salud/vargas_as/vargas_as.htm

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ANEXOS:

Fig.1.
Adición de
Lugol para
la
comprobaci
ón de
producción
de amilasas

Fig.2.
Formación
de halos en
agar

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