REACTIFS BIOLABO CALCIUM

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M é t h o d e Ar s e n a z o I I I
FABRICANT :
BIOLABO SA, Réactif pour le dosage quantitatif du calcium
02160, Maizy, France dans le plasma ou le sérum humains, ou les urines.

REF 90004 R1 : 2 x 125 mL R2 : 1 x 10 mL

CODE CNQ :TX

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SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
Tel : (33) 03 23 25 15 50
IVD USAGE IN VITRO
Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1) (2) STABILITE ET CONSERVATION

Dans l’organisme humain, le calcium a de nombreuses fonctions, non
seulement en tant que constituant des os et des dents, mais aussi en
tant qu’élément indispensable à l’activité neuro-musculaire et à la
coagulation sanguine.
La concentration du calcium sérique peut être altérée par une mauvaise
absorption intestinale, et par une modification du taux de protéines
plasmatiques, en particulier l’albumine, qu’il est important de déterminer
conjointement au taux de calcium.
L’hypercalcémie est associée à l’hyperparathyroïdie, au myélome
multiple, aux néoplasies osseuses et parathyroïdiennes et aux états
accompagnés d’une déminéralisation rapide de l’os.
L’hypocalcémie est associée à l’hypoparathyroïdisme, et dans certains
cas, à la néphrose et à la pancréatite aiguë.
PRINCIPE (4)
A pH légèrement acide et en présence d'ions calcium, le
métallochromogène Arsenazo III forme un complexe coloré, dont
l’absorbance mesurée à 650 nm (640-660) est proportionnelle à la
concentration en calcium dans le spécimen.
REACTIFS
flacon R1 REACTIF ARSENAZO III
Tampon imidazol pH 6,8 à 25°C > 90 mmol/L
Arsenazo III > 0,18 mmol/L
Agent tensio-actif 0,1 %
Conservateur
flacon R2
ETALON
Calcium 100 mg/L (2,5 mmol/L)
PRECAUTIONS
Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un
usage in vitro.
• Utiliser des équipements de protection (blouse, gants, lunettes).
• Ne pas pipetter avec la bouche.
• En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment à
l’eau et consulter un médecin.
• Les réactifs contiennent de l’azide de sodium (concentration < 0,1%)
qui peut réagir avec les métaux tel que le cuivre ou le plomb des
canalisations . Rincer abondamment.
• La fiche de données de sécurité peut être obtenue sur simple
demande.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES REACTIFS
Les réactifs sont prêts à l 'emploi.
Stocker à 18-25°C, à l’abri de la lumière
• Avant ouverture :
Les réactifs sont stables jusqu'à la date de péremption indiquée sur
l’étiquette.
• Après ouverture :
Le réactif R1 est stable au moins 3 mois en l’absence de
contamination.
Stabilité de l’Etalon (flacon R2) : plusieurs semaines après ouverture
(transvaser la quantité nécessaire, bien reboucher le flacon et stocker à
18-25°C).
Ne pas utiliser le réactif s’il est trouble ou si son absorbance à 650 nm
> 0,400.
Ce coffret peut voyager à température ambiante.
PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (1)
Sérum ou plasma hépariné :
Ne pas utiliser le citrate, l’oxalate ou l’EDTA. Sang prélevé sur patient à
jeun, avec un minimum de stase veineuse, et en dehors de tout
exercice physique ou après avoir restauré la circulation pendant au
moins 1 minute.
Urines de 24 h : acidifier avant dosage avec 20 à 30 mL d’HCl 6N pour
dissoudre tout le calcium éventuellement précipité.
Diluer (1 + 2) dans de l’eau distillée préalablement au dosage.
Le calcium total est stable :
• au moins 7 jours à 2-8°C.
• 6 mois à –20°C.
Un séjour prolongé au congélateur peut entrainer une évaporation, une
lyophilisation ou une coprécipitation avec la fibrine (plasma hépariné) ou
les lipides.
INTERFERENCES (3)
L’analyse bichromatique, multilongueur d’onde ou la réalisation d’un
blanc sérum permet de réduire les interférences positives ou négatives
liées à une hémolyse importante, un ictére, une lipémie, aux
paraprotéines ou au magnésium.
Pour éviter toute contamination avec le calcium environnemental,
manipuler avec précaution les contrôles, spécimens et calibrants.
Utiliser de préférence des tubes et cuvettes à usage unique, laver la
verrerie avec HCl 1N puis bien rinçer à l’eau déminéralisée.
Les flacons en plastique ou en verre sont susceptibles d’adsorber le
calcium durant le stockage, surtout sur des solutions diluées.
Young D.S. a publié une liste des substances interférant avec le
dosage.
REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES
1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales.
2. Sérums de contrôle normaux et pathologiques.
Version : FT 90004 21 02 2005
CALIBRATION MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE)
• Etalon du coffret (flacon R2) ou BIOLABO-Multicalibrator REF 95015. L’intensité de la coloration varie avec la température.
• Ou tout calibrant raccordé sur une méthode ou un matériau de Maintenir la température constante pendant toute la série de mesure.
référence.
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur et
des conditions de conservation du réactif. Mesurer dans des tubes à essais Blanc Etalon Dosage
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants : bien identifiés :
1. Changement du lot de réactif. Réactif 1 mL 1 mL 1 mL
2. Après opération de maintenance sur l’analyseur.
3. Les valeurs de contrôle obtenues sortent des limites de confiance Eau distillée 20 TL
indiquées, même après utilisation d’un deuxième flacon de sérum de
contrôle fraichement reconstitué. Etalon 20 TL

Spécimen 20 TL
CONTROLE DE QUALITE CODE CNQ :TX
Bien mélanger. Incuber 1 minute à température ambiante.
• BIOLABO EXATROL-N (valeurs normales) REF 95010.
Lire les absorbances à 650 nm (640-660) contre le blanc réactif.
• BIOLABO EXATROL-P (valeurs pathologiques) REF 95011. La réaction est stable 60 minutes à l’abri de la lumière.
• Tout autre sérum de contrôle titré pour cette méthode.
• Programme externe de contrôle de la qualité. Remarques :
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants : Analyse bichromatique : 2ème longueur d’onde 700 nm.
• Au moins un contrôle par série. Des procédures spécifiques sont disponibles pour les analyseurs
• Au moins un contrôle par 24 heures. automatiques. Contacter le service technique BIOLABO.
• Changement de flacon de réactif.
• Après opération de maintenance sur l’analyseur.
CALCUL
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de
confiance indiquées, appliquer les actions suivantes : Le résultat est déterminé d’après la formule :
1. Répéter l’opération en utilisant le même contrôle.
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, préparer un sérum Abs(Essais)
Sérum ou plasma : Résultat = X Concentration de l’Etalon
de contrôle fraîchement reconstitué et répéter le test. Abs(Etalon)
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre
calibrant ou un calibrant fraîchement reconstitué et répéter le test. Urines diluées (1+2) : multiplier le résultat ci dessus par le facteur de dilution 3.
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer à nouveau
en utilisant un autre flacon de réactif et répéter le test.
5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service REFERENCES
technique BIOLABO ou le revendeur local.
(1) TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R. Ashwood,
W.B. Saunders (1999) p. 1395-1406, p.1435-1439..
INTERVALLES DE REFERENCE (2) (2) Clinical Guide to Laboratory Test, 3rd Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 102-104.
th
(3) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4 Ed. (1995) p. 3-
CALCIUM TOTAL dans le sérum 115 à 3-125
(4) BAUER J. P., Affinity and stochiometry of calcium binding Arsenazo III, Anal.
Population mg/L mmol/L
Biol. Chem.(1981), 110, p.61-72
Prématuré 62-110 [1,55-2,75]
0-10 jours 76-104 [1,90-2,60] Made in France
10 jours –24 mois 90-110 [2,25-2,75]
24 mois-12ans 88-108 [2,20-2,70] Version : FT 90004 21 02 2005
12 ans-18 ans 84-102 [2,10-2,55]
18-60 ans 86-100 [2,15-2,50]
60-90 ans 88-102 [2,20-2,55]
> 90 ans 82-96 [2,05-2,40]

CALCIUM TOTAL dans les urines de 24 h :

< 300 mg/24 h (< 7,5 mmol/24 h).
Il est recommandé à chaque laboratoire de définir ses propres valeurs
de référence pour la population concernée.

PERFORMANCES
Intra-série Taux Taux Inter-série Taux Taux
N =20 moyen élevé: N = 20 moyen élev:
Moyenne mg/L 88,2 140,2 Moyenne mg/L 89.6 141.4
S.D. mg/L 0,4 0,6 S.D.mg/L 1,13 2,0
C.V. % 0,5 0,4 C.V. % : 1,26 1,42
Limite de détection : environ 2,1 mg/L
Sensibilité pour 10 mg/L :0,070 Abs. à 650 nm.
Comparaison avec réactif du commerce :
y = 1,0259 x -1,811 r = 0,9943

LIMITE DE LINEARITE
La réaction est linéaire jusqu’à 150 mg/L (3,75 mmol/L). Au-delà, diluer
le spécimen avec de l’eau déminéralisée et refaire le dosage en tenant
compte de la dilution dans le calcul du résultat. La limite de linéarité
dépend du rapport de volume spécimen/réactif.

Fabricant Date de péremption IVD Usage »in vitro« Température de conservation REF Référence du produit Consulter la notice LOT Numéro de lot