AGAR BRUCELLA

(MEDIO GENERAL Y ENRIQUECIDO)

USO

Medio recomendado para el aislamiento y cultivo de Bucella spp. Al ser adicionado con sangre se
utiliza para el aislamiento y ciultivo de Brucella spp y de microorganismos aerobios y anaerobios
nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras clínicas. Permite la
observación de las reacciones de hemólisis.

FUNDAMENTO

En el medio de cultivo la tripteína, la peptona de carne y el extracto de levadura constituyen la

fuente de nitrógeno, carbono, aminoácidos, vitaminas, minerales y cofactores necesarios para el
crecimiento de microorganismos. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y el bisulfito de
sodio favorece el desarrollo microbiano. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico del medio
y el agar es el agente solidificante.

Puede ser utilizado como medio base para ser suplementado con sangre o antimicrobianos,
lográndose así un medio más enriquecido o selectivo de acuerdo con el aditivo.

INSTRUCCIONES

Suspender 43 g de polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos. Calentar con agitación
frecuente y hervir durante 1 minuto para la disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y
esterilizar por autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
 AGAR COLUMBIA

(MEDIO GENERAL Y ENRIQUECIDO)

USO

Medio de cultivo nutritivo utilizado para el crecimiento de diversos microorganismos. Al ser

suplementado con sangre permite el crecimiento de microorganismos exigentes y la clara
visualización de reacciones de hemólisis. También puede ser utilizado como base para la
preparación de Agar chocolate.

FUNDAMENTO

Este medio camina las virtudes de la peptona, la tripteína, el extracto de levadura y el extracto de
corazón, que favorecen el desarrollo de microorganismos exigentes y la obtención de colonias
eugónicas. El almidón incrementa el desarrollo de las neisserias y las reacciones de hemólisis de
algunos estreptococos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el Agar es el agente
solidificante.

Puede ser utilizado como medio base para suplementado con sangre o con antimicrobianos,
lográndose así un medio más enriquecido o selectivo de acuerdo con el aditivo

INSTRUCCIONES

Suspender 44 g de polvo en 1 litro de agua purificada. Calentar con agitación frecuente y hervir
durante un minuto para disolución total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en
autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
 Medio OF
(Identificación)
USO

Medio de cultivo utilizado en las pruebas bioquímicas de identificación bacteriana

en base al metabolismo oxidativo-fermentativo del as bacterias Gram negativas,
a la movilidad y producción de gas.

FUNDAMENTO

En el medio de cultivo, el agregado del hidrato de carbono en concentración al 1%,

permite que los microorganismos utilicen para su desarrollo dicha sustancia,
evitando que bacterias aeróbicas metabolicen la tripteína presente con la
consecuente producción de reacción alcalina, la que se neutraliza por la ligera
acidez producida por un microoganismo oxidativo. El fosfato dipotásico agrega
capacidad reguladora, el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, y el azul
de bromotimol es el indicador de pH que vira al color amarillo en medio ácido luego
de la oxidación o fermentación del hidrato de carbono. El contenido de agar otorga
la propiedad de ser un medio semisólido y permite determinar la movilidad y la
distribución de los productos ácidos. La glucosa es el hidrato de carbono mas
frecuente que se agrega al medio basal O.F., pero también pueden agregarse otros
azúcares (lactosa, sacarosa, maltosa, manitol o xilosa) según el metabolismo del
microorganismo en estudio.

Cuando un microorganismo es inoculado en 2 tubos del medio O.F. conteniendo el

mismo hidrato de carbono, y uno de los 2 tubos es sellado con vaselina o parafina
antes de la incubación, se puede diferenciar correctamente el metabolismo oxidativo
o fermentativo, así como la no utilización de un hidrato de carbono por la bacteria
en estudio.

INSTRUCCIONES

Suspender 9.8 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos. Calentar
con agitación frecuente y hervir 1 minuto para disolución total. Distribuir en
recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Agregar de manera aséptica el hidrato de carbono en estudio en concentración final
al 1%. Distribuir en tubos estériles y dejar solidificar en posición vertical.

Nota:
alternativamente agregar el hidrato de carbono previo a la esterilización. En
este caso se debe esterilizar en autoclave a118°C durante 10 minutos.