Вы находитесь на странице: 1из 4

К вопросу о концентрации

гиалуроновой кислоты
в препаратах для
биоревитализации
1 ВВЕДЕНИЕ
Межклеточный матрикс – динамичная система.
Его структуры с различной скоростью непре-
рывно обновляются – разрушаются и одно-
На сегодняшний день среди различных инъек- временно восстанавливаются. Постоянство
ционных методов из арсенала современного клеточных структур дермы, как, впрочем, и
врача-косметолога одно из ведущих мест зани- всего организма, основано на согласованности
мает биоревитализация. По ставшему уже клас- процессов катаболизма и анаболизма. Наличие
сическим определению биоревитализацию рас- совершенной системы взаимосвязей, регуля-
сматривают как «….метод внутрикожных инъ- ции и координации этих процессов обеспе-
екций немодифицированной гиалуроновой чивает поддержание внутренних параметров
кислоты (гиалуронана), позволяющий достичь матрикса в пределах нормы. Необходимым
восстановления физиологической среды и нор- условием сохранения стационарного состоя-
мализации обменных процессов в дерме». ния клетки служит материальный и энергети-
Более чем 10-летний опыт применения натив- ческий обмен. И что самое важное – дефицит
ной гиалуроновой кислоты для биоревитализа- субстратов или избыток метаболитов, напри-
ции позволяет определить основные характе- мер гиалуроновой кислоты, являются стресс-
ристики подобных препаратов. Это особенно факторами и могут вызывать нарушение регу-
важно в современных условиях, когда на рынке ляции метаболизма и регенерации клеточных
инъекционных препаратов для эстетической структур дермы. В частности, избыточное
медицины представлены десятки биоревита- количество экзогенной гиалуроновой кислоты
лизантов, различающихся по концентрации, может приводить к нежелательным эффектам.
молекулярной массе, источнику происхожде-
ния гиалуроновой кислоты.
Эстетическая медицина предлагает anti-age-
программы не только для коррекции имею-
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

щихся нарушений, но и для стимуляции и опти- Учитывая вышесказанное, становится понятно,


мизации собственных возможностей кожи. что количество вводимой в кожу гиалуроновой
Безусловно, одним из основных методов реша- кислоты является чрезвычайно важным пара-
ющих эти проблемы, является биоревитализа- метром при проведении омолаживающих про-
ция. Основная цель применения данной мето- цедур. В связи с этим в НИИ Общей патологии
дики – пополнение гидратационного резерва и патофизиологии РАМН под руководством
тканей и воссоздание в коже благоприятных кандидата медицинских наук А.А. Московцева
естественных условий для функционирования была выполнена работа по изучению влияния
клеток, а значит, и для активизации синтеза концентрации гиалуронана на жизнеспособ-
эндогенной гиалуроновой кислоты и других ность фибробластов. Исследования проводи-
компонентов межклеточного матрикса дермы. лись на эндотелиоцитарной клеточной линии
человека EA.hy926 и фибробластах крайней
плоти человека.
В. Хабаров, кандидат химических наук, Следует отметить, что фибробласты из раз-
директор АНО «Научно-исследовательский личных анатомических областей имеют сход-
центр гиалуроновой кислоты», Москва, Россия ное морфологическое строение. Клетки линии

ЭСТЕТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА том XIV • №1 • 2015 3


К вопросу о концентрации фибробластов. При концентрации гиалуро-
новой кислоты 2 масс % происходит гибель
гиалуроновой кислоты в пре- 20–25% клеток.
паратах для биоревитализации Главная функция фибробластов дермы – уча-
стие в метаболизме межклеточного вещества.
Состояние и функция основных внеклеточных
EA.Hy926 воспроизводят основные морфоло- компонентов соединительной ткани – колла-
гические, фенотипические и функциональные геновых, эластических и ретикулярных воло-
характеристики, присущие эндотелиальным кон и межклеточного матрикса – зависят от
клеткам макрососудов. функциональной активности фибробластов.
Жизнеспособность клеток оценивали мето- Совершенно очевидно, что снижение мета-
дом исключения витального красителя трипа- болической активности клеточных структур
нового синего. Обработка данных проводилась может приводить к рассогласованию процес-
с использованием критерия Краскела–Уоллиса сов катаболизма и анаболизма. Поэтому необ-
и программного обеспечения Statistica, постро- ходимо избегать нежелательной передозиров-
ение графиков осуществлялось в программной ки препарата, а для этого нужно точно знать,
среде Origin Pro 9.0, аппроксимация кривых – какое количество биоревитализанта будет без-
с использованием 3-параметрического лога- опасно для пациента при инъекционном введе-
рифмического уравнения и 4-параметрическо- нии препарата.
го логистического уравнения сигмоидальной Оценим, сколько гиалуронана может быть
зависимости доза–ответ. введено пациенту однократно. Если зона инъек-
ции имеет приблизительные размеры 20х20 см
(400 см2), то при средней толщине дермы

3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ
ОБСУЖДЕНИЕ
4 мм объем дермального слоя составит 160 см3.
Физиологическая концентрация гиалуроно-
вой кислоты в дерме составляет 0,05 масс %
(0,5 мг/мл) [1]. Таким образом, физиологиче-
Результаты экспериментов представлены на ское количество гиалуронана в зоне предпола-
рисунке 1. гаемой инъекции составляет 160 см2 х 0,5мг/
см3 = 80 мг.
Многочисленные исследования [1, 2] пока-
зывают, что возрастное уменьшение содержа-
ния эндогенной гиалуроновой кислоты в коже
пациентов становится заметным только после
60-летнего возраста, а основные колебания
ее количества связаны с сезонным фактором,
(в частности, уменьшение ее содержания в
коже в летний период происходит главным
образом под воздействием УФ-облучения). Как
правило, эти колебания составляют 15–20% от
ее физиологического содержания.
Отсюда следует, что максимальный биоре-
Рис. 1. Метаболическая активность эндотелиоци- витализирующий эффект может быть достиг-
тов EA.hy926 (кривые 1 и 2) и фибробластов край- нут при введении 2–2,5 мл 0,5%-ного или
ней плоти (кривые 3 и 4) при 24- и 48-часовом (соот- 1–1,5 мл 1%-ного гиалуронанового гидрогеля.
ветственно) действии препаратов гиалуроновой Необходимо отметить, что 1%-ный (10 мг/
кислоты с различной начальной концентрацией мл) раствор гиалуроновой кислоты, по нашему
мнению, является предельным по концентра-
Результаты, представленные на рисунке 1, ции для биоревитализанта. Остановимся на
показывают, что повышенная концентрация этом подробнее.
гиалуронана в культуральной жидкости (выше Хорошо известно свойство макромолекул гиа-
значения 0,5 масс %, или 5 мг/мл) приводит луронана даже при сравнительно небольших
к дозозависимому снижению выживаемости концентрациях (порядка 0,05–0,1 масс %) обра-

4 ЭСТЕТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА том XIV • №1 • 2015


зовывать в водных растворах вязкие гидрогеле- ную конформацию, и начинают «тянуть на себя»
вые структуры. Молекула гиалуроновой кисло- воду из межклеточного (интерстициального)
ты с молекулярной массой1–1,5 млн Да способна пространства дермы. (То же самое происходит,
сорбировать как минимум в 100 раз больше воды, когда сжатая губка освобождается от деформи-
чем весит сама. Таким образом, в 1%-ном раство- рующих напряжений.)
ре гиалуронана вся вода находится в связанном Таким образом, высококонцентрированные
состоянии. Его макромолекулы в таком раство- гели гиалуронана при внутрикожных инъекци-
ре обнаруживают значительную вариабельность ях приводят, как ни парадоксально это может
конформации, но, как правило, приобретают показаться, не к росту, а напротив, к снижению
структуру среднестатистического полужестко- уровня гидратации дермы. Это подтверждается
го клубка. Формируя более или менее жесткий результатами клинических испытаний, прове-
клубок, молекулы полисахарида захватывают денных в 2008 году в Институте пластической
огромное количество воды и образуют весьма хирургии и косметологии МЗ РФ под руковод-
крупные домены. Как показали гидродинами- ством В.Г. Змазовой [6].
ческие исследования [3–5], реальная плотность Для испытаний был взят биоревитализант с
цепей гиалуронана внутри молекулярного доме- концентрацией гиалуроновой кислоты 1,4% и
на невысока (около 0,1–0,5 масс %), но зави- молекулярной массой 1,6 млн Да. Аппаратные
сит от его молекулярной массы. При введении измерения качественных характеристик кожи
такого геля в кожу двухвалентные ионы кальция проводили в динамике – до применения иссле-
и магния из межклеточного матрикса дермы дуемого препарата и через 2 и 4 недели после
связываются с молекулами привнесенной гиа- его введения. У всех пациентов влажность
луроновой кислоты и формируют поперечные кожи в течение первых 2 недель после инъек-
ионные сшивки полимерных цепей. С увеличе- ции уменьшилась (на 8–14%). Через 2 недели
нием плотности поперечных сшивок гель при- после инъекции также у всех испытуемых влаж-
обретает труднорастворимую объемную струк- ность кожи стала постепенно возрастать, и к
туру. При этом уменьшается величина его пор, концу 4-ой недели ее рост составил 12–15% от
что затрудняет проницаемость такой структуры начального уровня. Эти данные свидетельству-
для ферментов расщепления (гиалуронидаз). ют о том, что как только количество экзогенной
В результате замедляются и распределение геля (введенной) гиалуроновой кислоты в результа-
в межклеточном пространстве дермы, и катабо- те биодеградации уменьшалось до обычных
лизм гиалуроновой кислоты. физиологических значений, препарат начинал
С ростом концентрации в геле гиалуроновой оказывать свое ревитализирующее действие.
кислоты, особенно при превышении значения Подобная дозозависимость может при-
1 масс %, образуется плотная межмолекуляр- водить к ряду негативных последствий.
ная сетка, что приводит к значительному росту Общеизвестное изречение Авиценны «Все есть
его вязкости. В концентрированных гидроге- лекарство и все есть яд» как раз и означает, что
лях гиалуроновая кислота уже не может суще- физиологическое действие различных хими-
ствовать как «независимое тело» и приобре- ческих соединений и физических факторов
тать различные пространственные структуры. имеет, как правило, дозозависимый характер.
Возможны лишь такие конформации, в которых Перераспределение интерстициальной воды
каждое дисахаридное звено каждой макромоле- межклеточного матрикса при введении значи-
кулы занимает в пространстве лишь то место, тельных количеств гиалуроновой кислоты, без-
которое не занято соседними макромолекула- условно, является стресс-фактором для дермы.
ми. Поэтому в концентрированных растворах Вместо того чтобы «...достигать эффекта ожив-
молекулярные клубки значительно переплете- ления кожи и повышать ее адаптационные воз-
ны между собой и местами образуют области с можности благодаря воссозданию качествен-
пониженным содержанием воды. В этих обла- ного межклеточного матрикса и повышению
стях гиалуроновая кислота как бы недораство- пролиферативной активности фибробластов в
рена и представляет собой некоторое подобие генетически запрограммированных пределах»,
сжатой губки. При попадании таких гидрогелей как это пишут в статьях по биоревитализации,
в водную среду, а дерма на 70–80% состоит из инъекции больших количеств гиалуроновых
воды, клубки гиалуроновой кислоты расправля- препаратов, напротив, приводят к дестабилиза-
ются, принимая наиболее энергетически выгод- ции тканевого и клеточного гомеостаза. Потеря

ЭСТЕТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА том XIV • №1 • 2015 5


К вопросу о концентрации количество введенной гиалуроновой кислоты.
Кожа человека – орган, который первым при-
гиалуроновой кислоты в пре- нимает на себя действие множества внешних
паратах для биоревитализации негативных факторов. Она обладает высоким
адаптивным и регенеративным потенциалом.
Поэтому одноразовое превышение вводимой
влаги фибробластами и другими структурными дозы гиалуронана, конечно, не окажет значитель-
элементами дермы приводит к изменению рН, ного пагубного воздействия. Но нельзя забывать,
ионного состава и ионной силы межклеточной что курсы биоревитализации включают, как пра-
среды, что может нарушать нормальное функ- вило, 3–5 инъекционных процедур и проводятся
ционирование и активность матриксных белков с периодичностью 2–3 раза в год. Такие «омола-
вследствие изменения их структуры или частич- живающие» инъекции биоревитализанта с пре-
ной их денатурации. На поверхность белковых вышением допустимой водимой дозы гиалуроно-
агрегатов выходят гидрофобные аминокислоты вой кислоты способны в течение нескольких лет
– триптофан, тирозин, фенилаланин, которые в применения значительно ухудшить состояние
трехмерной структуре белков обычно располо- кожи пациента. Наша задача – обратить внима-
жены внутри макромолекулы. Эти аминокисло- ние врачей-косметологов, да и самих пациен-
ты активно поглощают УФ-излучение с длиной тов на возможные последствия таких процедур.
волны 280 нм, и белки становятся более чувстви- Необходимо помнить, что наличие долго не рас-
тельными к данной части спектра. Как результат сасывающихся папул после введения биоревита-
возникает нестабильная конформация белков, лизанта – не просто косметический недостаток, а
приводящая к их агрегации и формированию серьезная причина отказаться от использования
отложений (амилоидов). такого препарата.
Кроме того, в результате возбуждаемых В свете затронутой темы может возникнуть
УФ-излучением процессов переноса энергии вполне закономерный вопрос – возможна ли
гидрофобные аминокислоты могут участвовать подобная ситуация с филерами на основе гиа-
в образовании синглетного кислорода – актив- луроновой кислоты, поскольку концентрация
ной формы кислорода, участвующей в процес- полисахарида в них составляет 2% и более?.
сах окислительного стресса. Синглетный кис- Мы считаем, что при применении филеров эти
лород, являясь предшественником гидроксиль- проблемы маловероятны, т.к. сорбирующая
ного радикала, способствует появлению меж- способность поперечно-сшитой гиалуроновой
молекулярных сшивок в белках межклеточного кислоты в разы меньше, чем немодифициро-
матрикса дермы. Это крайне нежелательный ванной.
процесс, приводящий к ухудшению физико-
химических свойств коллагена, снижению его
эластичности и способности к набуханию, раз- Литература
витию резистентности к коллагеназе и вероят- 1. kuo JW. Practical aspects of hyaluronan based medical
ности формирования коллагеноза. products. – NY: CRC Press Taylor, 2005.

4
2. Хабаров ВН, Бойков ПЯ, Селянин МА. Гиалуроновая
кислота. Получение, свойства, применение в биологии
ВЫВОДЫ и медицине. – М.: Практическая медицина, 2012. С.
224.
Данные, приведенные в настоящей статье, по 3. Atkins ED, Sheehan JK. Hyaluronates: Relation between
нашему мнению, убедительно указывают на Molecular Conformations. Science, 1973;179(4073):562–
важность учета при проведении эстетических 564.
процедур такого параметра, как концентрация 4. Dea IC, Moorhouse MR. Hyaluronic Acid: A Novel, Double
гиалуронана в препаратах для биоревитали- Helical Molecule. Science, 1973;179(4073):560–562.
зации. На практике определить, произошла 5. Cleland RL, Wang JL. Ionic polysaccharidcs. III. Dilute
ли передозировка биоревитализанта, можно solution properties of hyaluronic acid fractions. Biopolymers,
по длительности существования папул после 1970;9(7):799–810.
выполнения инъекций. Папулы в точках инъе- 6. Хабаров ВН, Михайлова НП. Гиалуроновая кислота.
цирования, которые не рассасываются в тече- Применение в косметологии и медицине. – LAMBERT
ние суток, прямо указывают на избыточное Acad Publ, 2012:155.

6 ЭСТЕТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА том XIV • №1 • 2015