Discusión

Se procede a realizar la prueba de cromatografía de capa fina. La cromatografía de capa fina

consiste en la separación de los componentes de una mezcla a través de la migración
diferencial sobra cada capa fina de absorbente, retenida sobre una superficie plana (Sharapin,
2000). Este tipo de cromatografía tiene aplicaciones similares a las de cromatografía de
líquidos. Se aplica para desarrollar las condiciones para las separaciones en cromatografía de
líquidos en alta resolución. La cromatografía tiene amplio uso en laboratorios clínicos e
industriales (Skoog, James & Crouch, 2008)

En este método de cromatografía hay dos tipos de fases, una móvil, que es el disolvente que
se colca en la cámara; y otra estacionaria que es donde se agregan las muestras. La separación
se logra porque algunas sustancias son más fuertemente retenidas por la fase estacionaria,
mientras que otras se desplazan mejor en la fase móvil (Bolaños, Herrera & Luts, 2003).

Se toma una placa de cromatografía y se marca con un lápiz la línea base del nivel de
disolventes a 0.5 cm del extremo inferior y luego otra a 0.5cm del extremo superior, que va
a ser la línea de frente de disolvente. En la línea de abajo se agrega una pequeña muestra de
cada sustancia de los siguientes compuestos (indicando en la placa):

1. Rojo de Fenol
2. Rojo Congo
3. Cafeína
4. Aspirina
5. Azul de Metileno

Luego se coloca la placa en una cámara de desarrollo con butanol y ácido acético. Se deja la
placa dentro de la cámara hasta que el disolvente se desplace hasta el frente de disolvente.
Luego se pasa por una luz ultravioleta y por la cámara de yodo. Las láminas de yodo son
sensibles a los compuestos orgánicos que están en la placa y dan productos oscuros. En
cuanto a la luz fluorescente, los componentes de la muestra amortiguan la fluorescencia del
material de tal forma que toda la placa exhibe fluorescencia, excepto los lugares donde se
encuentran los componentes de la muestra (Skoog, James & Crouch, 2008). Se debe indicar
dónde está la máxima altura que llegó a alcanzar la sustancia aplicada al arrastrarse con el
disolvente. Luego se averigua el Rf y se comparan los resultados obtenidos. Esto se repite
usando con los colorantes para determinar Rf.

Con este tipo de cromatografía, aunque posee diversas ventajas como la simplicidad del
equipo, el bajo costo y la rapidez; también se presentan ciertos problemas que conllevan a
errores y a valores muy variados entre sustancias similares como el hecho de que el disolvente
no migre de manera regular, o el tiempo que transcurre entre el revelado y la lectura de la
placa. La presencia de manchas puede deberse a la aplicación de sustancias en baja
concentración que necesitan de la aplicación de un volumen mayor de la solución que se va
a analizar (Sharapin, 2000). Todo esto puede afectar la eficiencia de esta técnica y por esa
razón los valores obtenidos difieren un poco entre sí.

En cuanto al uso de disolventes, deben buscarse aquellos más volátiles para que se evaporen
antes de ingresar las placas a la cámara de yodo y así evitar manchas que generen
incertidumbre sobre donde está la marca de la muestra. Además, se debe tomar en cuenta la
polaridad de este y la acidez o basicidad (Walton & Reyes, 1983).

(a) (b)

Figura 3. Estructuras disolvente A. (a) Acetato de etilo, (b) ácido acético (Wolfram Alpha,
2012).

(a) (b)

Figura 4. Estructuras disolvente B. (a) Formato de etilo, (b) ácido fórmico. (Wolfram Alpha,
2012).

Conclusiones
1. En esta práctica logramos conocer y aplicar la cromatografía por capa fina, sus características
y los factores que influyen en la separación por cromatografía, además de aprender a calcular los
valores del factor de retención de las sustancias para poder deducir la relación que existe entre la
polaridad de las sustancias que se analizan con la de los eluyentes que se utilizan con ellas y así
mismo poder aplicar un criterio para identificar la pureza de sustancias de acuerdo con la
pigmentación (es) que estas presenten al realizar la cromatografía.
2. En este informe se logró conocer y como aplicar la cromatografía por capa fina, sus
características y los factores que influyen en la separación por cromatografía
3. Se aprendió a como calcular los valores del factor de retención de las sustancias para poder
deducir la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan con la de los
eluyentes que se utilizan con ellas y así mismo poder aplicar un criterio para identificar la pureza
de sustancias de acuerdo con la pigmentación (es) que estas presenten al realizar la cromatografía.

Bibiografia:

Bolaños, P. (2007). Química Orgánica (5ta. Edición). México: Pearson Educación.

Sharapin, N. (2000). Fundamentos de Tecnología de Productos Fisoterapéuticos. Área
de Ciencia y Tecnología del Convenio Andrés Bello & Red Iberoamericana de
Productos Fito farmacéuticos. Editado por Roberto Pinzón, 1ª edición, Colombia, año
Pp161-164.
Skoog, D.; James, F.; Crouch, S. (2008) Principios de Análisis Instrumental. Editorial
Cengage Learning S.A., 6º edición, México, Pp848-849.
Walton, H.; Reyes, J. (1983). Análisis Químico e Instrumental Moderno. Editorial
Reverté, edición en español, España, Pp332-333.

Herrera, J. (2005). Biología molecular del gen. Madrid: Editorial Médica

Panamericana, D.L.

Wolfram Alpha. (2012). Wolfram Alpha. Biología Molecular. Editorial Reverté,

edición en español, España, Pp332-333.