Microbiologia – matéria ll

Genética Bacteriana

1) O Fenótipo são características que os genes expressam em determinado momento.

Alterações fenotípicas são alterações que ocorrem na expressão dos genes como característica, acontecem
em todos os indivíduos, são reversíveis e não são transmitidas aos descendentes.
Ex: mudança de pigmento, véu invasor.

2) O Genótipo é o conjunto de genes em um organismo.

Alterações genotípicas são alterações dos genes, acontecem em poucos indivíduos, são irreversíveis
e transmitidas aos descendentes. Formando um organismo mutante.

Fatores que promovem mutação:

-Fatores físicos: - Radiação (UV, íons, raios ionizantes α,β,γ. )Desarranjam o DNA por formação de íons,
se muda o DNA a bactéria morre.
Por exemplo: - a radiação Ultravioleta (não ionizante) excita eletróns a um nível de energia mais elevado. As
moléculas de DNA são bons absorvedores de luz ultravioleta, as bases nitrogenadas citosina e timina (A e
T), são mais vulneráveis a essas excitações, que podem modificar as propriedades de pareamento de bases.
A luz UV pode induzir que bases timinas adjacentes numa sequência de DNA pareiem-se entre si, formando
um dímero pesado. Porem as bactérias tem um mecanismo para reverter a formação destes dímeros,
chamado de fotorreativação.
- Radiação ionizante é a radiação que possui energia suficiente para ionizar átomos e moléculas.Pode
danificar nossas células e afetar o material genético (DNA). São exemplos de radiação ionizante as
partículas alfa, partículas beta (elétrons e protons), os raios gama, raios-x e neutrons.

-Fatores químicos: interferência eletrônica no DNA (bases aminadas, análogos do benzeno).

-Fatores biológicos:

*Sistema de reparo
As mutações realmente são eventos raros, mas as alterações na sequencia de bases do DNA são
relativamente comuns. Isso não representa nenhuma contradição porque a grande maioria das alterações que
surge no DNA é imediatamente corrigida, não sendo, portanto, transmitida para a próxima geração celular.
Se não existisse a possibilidade de consertar as alterações na sequencia de bases do DNA, em poucas
gerações a informação genética transmitida de uma célula para outra estaria muito modificada. O acúmulo
de mutações em genes importantes para o funcionamento celular rapidamente inviabilizaria o desempenho
normal das células e afetaria, no caso de seres multicelulares, as funções de tecidos e órgãos.
O acúmulo de mutações nas células é tão perigoso que, ao longo do processo evolutivo, todas as espécies
conhecidas desenvolveram mecanismos para reduzir ao máximo a possibilidade de ocorrer mutações. As
defesas contra mutações devem funcionar em todos os momentos da vida celular, não apenas na fase de
síntese ou replicação do DNA (fase S da interfase). Em conjunto, todas as proteínas que atuam na defesa
contra mutações constituem o chamado Sistema de Reparo do DNA, ou simplesmente Sistema de Reparo.
Como todo o sistema de reparo do DNA depende da atividade de proteínas específicas, podemos dizer que o
sistema de reparo presente em uma célula é determinado geneticamente.

Hayanne Kimura; 2012

-Taxa de mutação: é a frequência em que as mutações ocorrem.

Mutação natural: ocorre em 1 a cada 109 células. Geralmente as mutações são prejudiciais, pois algumas
bactérias perdem sua patogenicidade ou virulência e o bioquimismo, perda da capacidade de produção de
algumas substancias (mutante auxotrófico: começa a parasitar).

3) Recombinação Bacteriana é quando o DNA de um microrganismo se insere no DNA de outro

microrganismo. Na maioria dos casos, apenas uma parte do DNA é inserido.

Tipos de recombinação:

 Transformação (GRIFHT, 1928): uma parcela de material genético é assimilada por um

microrganismo.
Na sua experiência Grifht ingeriu pneumococos em ratos e analisou que a presença deste
microrganismo vivo com capsula matava o rato, a presença deste microrganismo, mas sem
capsula não matava o rato, mas quando se colocava pneumococos mortos com capsula e
pneumococos vivos sem capsula, o microrganismo sofria mutação e passava a ser um
pneumococos vivo com capsula, levando o rato à morte. Criando assim o principio da
transformação. Este tipo de recombinação está presente principalmente nos Streptococcus sp,
Neisseria sp, Haemophylus sp.

Competência Celular é a fase em que o microrganismo fica apto a receber material genético.

 Conjugação: processo em que ocorre união de duas células vivas ocorrendo passagem de
material genético.

OBS: BACTERIAS QUE FAZEM TRANSFORMAÇÃO NÃO FAZEM CONJUGAÇÃO.

O plasmídeo F é um plasmídeo (DNA extra cromossomal - informações adicionais) especial,

responsável pela síntese de pili F que tem função de ligar uma bactéria na outra.
As bactérias que possuem plasmídeo F são chamadas de bactérias F+ ou machos. As que não
apresentam plasmídeo F são chamadas de bactérias F- ou fêmeas.
Enquanto o pile está sendo formado, a bactéria macho copia todos os seus plasmídeos e transfere
esses plasmídeos copiados para a fêmea, fazendo a bactéria fêmea virar macho e com o tempo a
bactéria macho acaba passando os plasmídeos originais, se tornando fêmea.
Portanto a população F- é maior do que a F+.

-Incorporação do plasmídeo: é quando invés de ficar solto no citoplasma, o plasmídeo se une ao

DNA (por crossing over), formando a célula HFR (high frequence of recombination) e esta célula
faz varias copias do seu material genético e passa para uma bactéria F-, mas o plasmídeo F não
passa, o que faz com que a bactéria F- permaneça F-. Uma célula HFR pode se transformar em
F+ e vive –versa.
Esse processo de conjugação é mais realizado pelos bastonetes gram negativo.

Tipos de plasmídeos:

-Plasmídeo conjugativo: é a mesma coisa que plasmídeo F.

-Plasmídeo não conjugativo: não é o plasmídeo F.
-Plasmídeo bacteriocinogenicos: produzem substancias que servem como antibióticos – mata
bactéria.
Hayanne Kimura; 2012
 -Plasmídeo de resistência a antibióticos: geram substancias que degradam diversos tipos de
materiais.

 Transdução: processo em que o DNA bacteriano é transmitido para outra bactéria através de
vírus.
O vírus quando deixa seu material genético na célula e se multiplica, acaba que em um deles
invés de ter material genético do vírus, adere material genético da célula, formando um pseudo
vírus, que possui DNA bacteriano, e quando este pseudo vírus se conecta a outra célula, mistura
o DNA da célula com o DNA bacteriano, ocorrendo uma recombinação bacteriana.

Controle de Microrganismos
Controle de microrganismos é o controle da multiplicação dos microrganismos, tendo por objetivo a
prevenção de doenças infecciosas, prevenção da deterioração de alimentos, perda de materiais utilizados
pelo homem.

Para a prevenção de doenças infecciosas, o homem toma medidas como: tomar banho todos os dias, lavar
as mãos, limpar o ambiente, objetos, instrumentos.
Para prevenir a deterioração de alimentos, conservam-se os alimentos na geladeira, onde a temperatura é
menor, diminuindo o metabolismo e assim a multiplicação de MOs.
Para prevenir a perda de materiais usados pelo homem costuma-se lavar as roupas, tapetes, moveis livros,
objetos, etc.

Existem três métodos de controle microbiano, estes três se dividem de varias maneiras.
Os 3 métodos são : - remoção (retira o MO) , - inibição (diminui o metabolismo do MO), - morte
(interrompe irreversivelmente o metabolismo do MO).

Definição de termos para controle microbiano:

-Esterilização: é todo processo que remove ou mata toda forma de vida.

-Pasteurização: muito usado em leites e sucos. É o processo no qual se aquece a substancia que contem os
microrganismos a uma temperatura acima de 76° C, permanece nessa temperatura por alguns segundos,
depois ocorre uma queda brusca de temperatura, matando as bactérias patógenas e algumas saprófitas.
-Desinfecção: é todo processo físico ou químico que mata as patogênicas não necessariamente as
saprófitas. Mata as patogênicas porque estas estão acostumadas a temperatura e ph do nosso corpo, não
suportando grandes variações. Este processo é utilizado em objetos ou tecido morto.
-Antissepsia: é todo processo físico ou químico que mata as patogênicas não necessariamente as saprófitas.
Este processo é utilizado em tecidos vivos.
- Assepsia: é todo processo que impede a entrada de microrganismos em locais que não os contem.
Exemplo= quando passamos álcool na pele antes de tomarmos injeção.
-Microbicida: é tudo aquilo que mata microrganismo.
-Microbiostático: é tudo aquilo que inibe o microrganismo.

Condições que afetam o controle microbiano

As bactérias esporuladas são mais resistentes do que as não esporuladas.

As saprófitas são mais resistentes do que as patogênicas.
Os vírus envelopados são mais resistentes do que os não envelopados.

Hayanne Kimura; 2012

 Na fase de declínio do crescimento microbiano fica mais fácil controlar os microrganismos, porque possui
menos nutriente e mais substancia toxica. As variações de temperatura, pH, nutrientes e atmosfera, quanto
mais desfavoráveis ao MO, mais fácil se torna mata-los.
Porém a Penicilina gosta de atuar na fase LOG, que é a fase que apresenta maior crescimento microbiano.

Controle microbiano por agentes físicos

-Temperatura

As baixas temperaturas diminuem o metabolismo, diminuindo a multiplicação dos microrganismos.

As temperaturas de congelamento fazem com que a água presente no microrganismo se solidifique,
aumentando o volume interno do MO fazendo com que ele ‘’exploda’’.

As altas temperaturas matam por calor seco ou calor úmido.

No calor seco, como utilizado nas estufas e fornos, o microrganismo é morto por oxidação das proteínas
(desnaturação proteica) com ausência de água.
No calor úmido,como utilizado no autoclave e nos processos de pasteurização, há a presença de água,
sendo ela liquida ou em vapor, matando o MO por fervura quando em água liquida e quando em vapor
sobre pressão, apresenta maior poder de penetração, matando os MOS em uma temperatura mais baixa e
em menor tempo do que pelos processos de calor seco.

EX: calor seco: 170° C --- 1 hora

Calor úmido: 125° C--- 15 minutos.

Na autoclave esterilizam-se materiais como: instrumentos, tecidos, utensílios, meios de cultura, líquidos
não oleosos.
No forno esterilizam-se óleos, vidrarias, metais, instrumentos cortantes.

- Filtração

No processo de filtração ocorre a remoção dos microrganismos, utilizando-se porcelana porosa,

membranas de acetato de celulose, filtros de barro, tampão de algodão.
O processo de filtração tem uma vantagem em relação à autoclave, pois na autoclave pode ocorrer
alteração do liquido no qual o microrganismo se encontra.

-Radiação

Promovem a mutação do DNA do microrganismo, muitas vezes matando-o.

Ex: raios UV, raios ionizantes α, β, γ.

- Pressão osmótica

Quando utilizamos sal ou açúcar em algum meio no qual esta inserido o MO, controlamos o seu
crescimento porque ocorre uma variação da pressão osmótica, levando ao processo de osmose, que
desidrata o MO.

Controle microbiano por agentes químicos

Um antimicrobiano ideal deveria conter as seguintes características:

- atividade seletiva: atuar apenas no MO, nunca no hospedeiro.

- amplo espectro de ação: matar o maior número possível de MO patógenos.
- baixo custo: não deve ser muito caro, para que várias pessoas de diferentes rendas possam ter acesso.
- ausência de efeitos colaterais: não prejudicar o hospedeiro.

Hayanne Kimura; 2012

 - ausência de poder corrosivo: não corroer o local onde está sendo aplicado.
- ausência de poder tintorial: não mudar a cor do local. Ex: a tetraciclina colore os dentes de verde e
amarelo.
- fácil disponibilidade: ser fácil de encontrar.
- solubilidade em água: pois a água é o solvente universal.
- alta estabilidade: permanecer estável, para durar vários dias.
- atividade em matéria orgânica de MO patogênico: pois muitos MOS são importantes para o nosso
metabolismo.
- alto poder de penetração: que se espalhe por várias partes do corpo.
- homogeneidade: ser homogêneo, dissolvendo perfeitamente em água.
- poder desodorizante: não conter cheiro.

Principais grupos químicos:

-ALCOOL: solubiliza (dissolve) lipídeos, causa desnaturação das enzimas e tem poder desidratante.
O álcool tem maior ação quando a cadeia carbônica é menor; porém o seu poder de ação varia com o nível
de diluição e o poder microbicida do álcool.
Por exemplo: o metanol (CH3-OH) tem cadeia menor do que o etanol (CH3-CH2-OH), porém o metanol é
muito toxico para o nosso organismo, então geralmente usamos produtos a base de etanol. O etanol em
grande concentração tem poder microbiostático, pois elimina muita água do microrganismo, fechando os
poros e assim impedindo a entrada do álcool para desnaturar as enzimas do MO. Quando utilizado em
menor concentração, elimina menos água, permitindo a entrada do álcool, desnaturando as enzimas, tendo
poder microbicida.

- FENOIS: causam desnaturação proteica.

Ex: fenol 0,5% (vacinas); cresóis (desinfecção); ácido salicílico (1/1000); alimentos.

-HALOGENIOS: são os elementos da coluna 7 A ( bromo, flúor, cloro, ástato, iodo)

São oxidantes (matam por oxidação das proteínas) e quelantes (se unem a outras substancias).
Ex: cloro ( Cl2, HClO)—poder de limpeza
Iodo ( I2, álcool iodado)---- limpeza para as mãos
Flúor – é oxidante e quelante de cálcio (fluoapatita) microbicida- atua na enzima erolase.

-METAIS: são quelantes, fazendo com que a proteína perca a forma.

*Prata (Ag6, AgNO3- 1/1000)

*Cobre (Cu6, Cu12)

-FLUOR( F3) : tem poder de quelação e inibição enzimática.

-ALDEIDO: Polimeriza as proteínas ( une as proteínas) fazendo com que estas percam sua função,matando
o MO.
Ex: *formol (paraformaldeido)- esteriliza material odontológico, gastando cerca de 24 horas e os matérias
tem que estar sem crosta, tecidos, sangue.
*Formalina – solução de 37-40% - esteriliza instrumentos
Locais fechados.

*Glutaraldeído (2%): esteriliza instrumentos urológicos, lentes de aumento, instrumentos usados nas áreas
pulmonares.

Hayanne Kimura; 2012