FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y AGRONOMÍA

ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA

LABORATORIO 1
“Normas de Bioseguridad y
Control de Crecimiento
Bacteriano”
Nombre del Profesor y Asignatura:
Microbiología

Estudiante:
Tatiana Godoy Gonzalez

Viña del Mar, Chile

2019
Índice

Introducción..............................................................................................

Objetivos....................................................................................................

2.1 Objetivo General...........................................................................

2.2 Objetivos Específicos....................................................................

Marco teòrico............................................................................................

3.1 Concepto de herida.......................................................................

Metodologìa ..............................................................................................

Conclusiones............................................................................................

Bibliografía................................................................................................
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Introducción
Se entiende por bioseguridad todas las medidas aplicadas que tienen como objetivo
minimizar los riesgos sanitarios y asegurar el éxito de los análisis microbiológicos e
incluye medidas relacionadas con las instalaciones, equipos y técnicas. La eficacia de
estas medidas debe reflejarse en una disminución de la carga microbiana.

El control de crecimiento bacteriano se puede realizar en equipos, materiales,

utensilios, superficies de instalaciones y/o superficies biológicas con diferentes técnicas,
según el lugar y, principalmente, según el objetivo: disminución de carga bacteriana o
eliminación total de carga por diferentes mecanismos, físicos o químicos.

El presente laboratorio consta de dos actividades relacionadas con medidas de

bioseguridad: la primera pretende evidenciar la carga microbiológica de las manos,
comparando cultivos de muestras de manos limpias y muestras de manos sucias, y, la
segunda, se relaciona con el control de crecimiento bacteriano en un utensilio de
manipulación corriente como es una esponja de lavadero, evidenciando la carga
bacteriana presente al no utilizar ninguna medida de control bacteriano.

La actividad 1, dice relación con la microbiota presente en la piel, éste es un conjunto

de microorganismos que habitualmente mantienen una relación simbiótica de tipo
comensal o mutualista con el hospedero, ésta puede ser residente permanente o
transitoria y cuando pierde el equilibrio es posible que aparezca la patogénesis.

La actividad 2, dice relación con la presencia y desarrollo mesófilos aerobios que

corresponden a todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de desarrollarse a
35ºC +/- 2ºC en presencia de oxígeno. Este recuento estima la microbiota total sin
especificar tipos de microorganismos, y refleja la calidad sanitaria, manipulación y las
condiciones higiénicas de materiales. Dentro de este grupo encontramos a los
coliformes cuyo representante más importante es Escherichia coli (coliformes fecales).
Se emplea como un indicador de contaminación fecal.
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El agar nutritivo es un medio de cultivo sólido, no selectivo y no diferencial en el que se

desarrollan todo tipo de bacterias no exigentes desde el punto de vista nutricional,
bacterias quimioorganotrofas. Contiene peptona de carne, extracto de carne, NaCl, agar
y H2O.
El agar EMB (eosina azul de metileno) Levine contiene azul de methileno, que inhibe a
las bacterias Gram positivas. Las bacterias Gram-negativas, fermentadoras de lactosa
(coliformes) al crecer en este medio producen “colonias nucleadas” (con centros
obscuros). Las colonias de E. coli y E. aerogenes pueden diferenciarse entre sí
tomando como base su tamaño y la presencia del pigmento verde metálico. Las
colonias de E.coli son pequeñas y producen el pigmento verde metálico.

es un medio selectivo y diferencial, adecuado para el crecimiento de enterobacterias,

que inhibe el crecimiento de bacterias Gram positivas y permite la diferenciación de
bacterias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa, dando lugar a colonias
incoloras, las no fermentadoras, y colonias de color azulado-negro con cierto brillo
metálico, las fermentadoras. Contiene peptona, lactosa, fosfato dipotásico, eosina, azul
de metileno, agar y H2O.

Objetivos

 Uno de los objetivos del presente laboratorio es demostrar la presencia de

microorganismos (microbiota) en manos sucias y compararlas con la
microbiota en manos después de lavado con agua y jabón y/o utilizando
alcohol al 70%, haciendo un recuento de colonias desarrolladas en un
medio de cultivo no selectivo (nutritivo).
 El segundo objetivo es demostrar la presencia de microorganismos
mesófilos y coliformes en un utensilio de uso común (esponja de lavadero),
haciendo un recuento de colonias desarrolladas en un medio selectivo y
diferencial para bacterias Gram negativas y fermentadoras de lactosa.
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Metodología
Actividad 1: ¿CUÁL ES LA IMPORTANCIA DE LA HIGIENE DE MANOS?

Materiales: - 1 placa de agar nutritivo

Procedimiento: Designar un estudiante que no se lavara las manos al iniciar el práctico.

1. Defina una zona de trabajo, limpiando el mesón y encendiendo el mechero

2. Rotule su placa dos sectores: “Mano limpia” (L) y “Mano Sucia” (S).

3. Previo al lavado de manos, presione suavemente la yema de sus dedos en la placa

de agar nutritivo, en el sector rotulado como “mano sucia”.

4. Lave sus manos con agua y jabón y/o utilizando alcohol al 70%, vuelva a presionar
sus dedos en el sector rotulado como “mano limpia”

5. Incube a 37°C por 24 h.

6. Revise sus resultados y anote en su hoja de recolección de datos.

Actividad 2: MESÓFILOS AEROBIOS Y COLIFORMES

Materiales: - 1 placa de agar EMB Levine

Procedimiento: Utilizar la muestra problema entregada por su profesor (tubo de ensayo

con esponja de cocina en caldo nutritivo)

1. Utilizando una micropipeta tome un inoculo de muestra de 100 ul

2. Reparta este inoculo en su placa usando asa de Drigalsky

3. Repita este procedimiento con ambos medios de cultivo

4. Incube a 37°C por 24 h

5. Revise sus resultados y anote en su hoja de recolección de datos.

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Resultados
Actividad 1: ¿CUÁL ES LA IMPORTANCIA DE LA HIGIENE DE MANOS?

Figura 1: Fotografía cultivo en agar nutritivo de microbiota mano limpia (L) y mano sucia (S)
después de 1 semana de siembra.

Tabla de resultados actividad 1: Recuento de colonias

Agar EMB Levine (UFC/sector) Agar Nutritivo (UFC/sector)
Mano sucia - 24
Mano limpia - 9
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Actividad 2: MESÓFILOS AEROBIOS Y COLIFORMES

Figura 2: Fotografía cultivo Agar EMB Levine después de 1 semana de siembra.

Tabla de resultados actividad 2: RECUENTO DE COLONIAS.

Muestra problema Agar EMB Levine Agar Nutritivo
(UFC/sector) (UFC/sector)
Esponja de cocina en Incontable -
caldo nutritivo

Discusión de resultados
Actividad 1: El número de UFC en el sector ‘manos limpias’ (L) es menor al número de
UFC en el sector ‘manos sucias’ (S), esto puede ser explicado a la medida de
bioseguridad ‘lavado de manos’ que redujo la carga microbiana.

El desarrollo de UFC no permite discriminar qué microorganismos se desarrollan, pues

el agar nutritivo no es selectivo, ni diferencial.

Actividad 2: El número de UFC desarrolladas a partir de la muestra de caldo nutritivo

con esponja de lavadero es positiva e incontable. Esto se puede explicar por la
presencia de enterobacterias gran negativas fermentadoras de lactosa en utensilio en el
que se esperaba una alta carga de este tipo de bacterias.
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1 Bibliografía
 Enseñanza de la microbiología. Blog spot.
https://hkoraa.blogspot.com/2014/12/agar-emb.html. 30/12/19.
 Guía de interpretación de resultados microbiológicos de alimentos.
http://www.anmat.gov.ar/Alimentos/Guia_de_interpretacion_resultados_microbiologic
os.pdf. 31/12/19.
 Manual de prácticas laboratorio de microbiología. programa de química. Academia
de microbiología y parasitología. Dpto. ciencias químico biológicas icb, uacj. 2012.
https://bivir.uacj.mx/Reserva/Documentos/rva2011296.pdf 31/12/19.

 Microbiología. Microbiota normal. https://www.u-cursos.cl › OBMICROB1 › material

docente › bajar. 30/12/19

 Microbiología general. http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/microgeneral/wp-

content/uploads/2017/02/03-b-ESTERILIZACIÓN-2017.pdf. 31/12/19.