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Departamento de Medicina.
Adaptado por:
-Lda. Carla Martínez
Nutricionista, URL
Msc. en Coaching Nutricional y NEA, UVG/Nutriotional Coaching Barcelona
-Lda. Lourdes Cabrera.
Química Bióloga, USAC.
Msc. en Admon Ind. y empresas de servicio, USAC.
Las Prácticas de Biología y genética I, tienen como objetivo principal introducir al alumno los
conceptos y las técnicas básicas del laboratorio de Biología Celular. Para ello se ha diseñado una
serie de actividades prácticas con técnicas sencillas que permitirán que el alumno conceptualice y
aplique los conocimientos teóricos.
Cada sesión está estructurada en breves introducciones teóricas de los conceptos más importantes y
básicos, necesarios para la mejor comprensión y desarrollo de la parte experimental que se hará a
continuación. Dicha parte experimental constará de actividades individuales y experimentos en grupos.
CAPITULO I
Disposiciones Generales.
ARTÍCULO 1: Este normativo es de observancia general y obligatoria para estudiantes, investigadores y toda persona
autorizada que se encuentre dentro de las instalaciones del laboratorio.
ARTÍCULO 2: Alcance: Complejo de laboratorios del Campus San Pedro Claver S.J., de la Verapaz
CAPITULO II
Normas Generales.
a) Los estudiantes deberán acatar las normas de conducta siguientes:
ARTÍCULO 9: Las puertas exteriores e interiores deberán estar siempre libres de obstáculos, accesibles y en posibilidad
de ser utilizadas ante cualquier eventualidad.
ARTÍCULO 10: Se deberá utilizar vestuario adecuado: Bata blanca hasta la rodilla y de manga larga, gafas de
seguridad (si se les indicara), zapatos cerrados bajos, pantalones largos, cabello recogido, no usar ropa holgada,
corbata, joyería grande o gorras.
ARTÍCULO 11: El equipo de protección personal es obligatorio para que una persona pueda ingresar a realizar una
práctica de laboratorio (bata y gafas de seguridad (si se les indicara))
ARTÍCULO 12: Obligaciones del usuario: Los alumnos que trabajan en cada laboratorio deberán conocer las medidas
de seguridad establecidas (ubicación de extinguidor contra incendio, ducha, lava-ojos, control maestro del gas,
flipones y llave de agua).
c) Los estudiantes deberán acatar las normas de ingreso a las instalaciones que se detallan a continuación:
ARTÍCULO 13: Todo usuario debe observar y respetar el horario asignado para los laboratorios.
ARTÍCULO 14: El estudiante debe presentarse obligatoria y puntualmente a todas las sesiones del laboratorio.
ARTÍCULO 15: La persona deberá estar en buena condición de salud y no encontrarse bajo efectos de cualquier
medicamento, droga o bebida alcohólica que pueda disminuir su capacidad de concentración y que ponga en
riesgo su salud.
ARTÍCULO 16: El estudiante deberá llevar a la estación de trabajo, únicamente los accesorios necesarios para su
práctica. Los bolsones, bolsas y otras pertenencias las deberán dejar en el área asignada para este efecto sin
obstaculizar el paso.
ARTÍCULO 17: Se prohíbe el ingreso de personas ajenas que no pertenezcan al laboratorio y la salida temporal de
los alumnos.
d) Los estudiantes deberán acatar las normas de operación de los laboratorios que se detallan a continuación:
ARTÍCULO 18: Las guías y/o manuales de cada laboratorio son de uso obligatorio de los estudiantes para realizar
el proceso de enseñanza-aprendizaje de cada práctica específica. EL ESTUDIANTE DEBE LEER LAS PRÁCTICAS
DE LABORATORIO ANTES DE INGRESAR A LA MISMA PORQUE SERÁN SUJETOS A EVALUACIÓN.
ARTÍCULO 19: El usuario del laboratorio es corresponsable juntamente con el encargado del funcionamiento, limpieza,
cuidado y conservación este.
ARTÍCULO 20: En caso de algún desperfecto o problemas con el equipo, se deberá informar al encargado de
laboratorio antes de la práctica, de lo contrario se le atribuirá la responsabilidad al alumno. En caso de que el
estudiante dañe parcial o totalmente un material, deberá firmar un vale con su nombre, número de carne,
descripción del material dañado, fecha y firma, comprometiéndose a reponer el material durante las dos
prácticas siguientes, de no hacerlo perderá el derecho a ingresar al laboratorio. NOTA: El estudiante deberá
estar solvente al momento de realizar los exámenes parciales y el final de laboratorio.
ARTÍCULO 21: Antes de operar cualquier equipo el alumno debe estar seguro de que sabe cuál es el funcionamiento
adecuado. En caso de que no esté seguro es su responsabilidad preguntar al encargado.
ARTÍCULO 22: Antes de utilizar cualquier equipo debe llenar el formato de control en el caso que sea aplicable.
ARTÍCULO 23: El usuario deberá llenar una solicitud de préstamo y contar con la aprobación de coordinación para
utilizar material o equipo de laboratorio. De no devolver el equipo y cristalería en las condiciones que se le entregó
deberá reponerlo.
ARTÍCULO 24: Se asignará a cada alumno una estación de trabajo no pudiendo utilizar otra posición sin el permiso del
catedrático.
ARTÍCULO 25: El área de trabajo y equipo asignado a cada estudiante o grupo de estudiantes deberá quedar
perfectamente limpio y seco al terminar cada práctica.
ARTÍCULO 26: Antes de retirarse de laboratorio el estudiante deberá lavarse las manos.
CAPITLO III
Accidentes
ARTÍCULO 27: De acuerdo con el tipo de accidente, se deberá proceder lo más pronto posible para brindar la
atención médica al herido, bajo las instrucciones del catedrático o encargado.
a. Accidentes leves; serán todos aquellos que no representen un riesgo para la vida de la persona y que podrán ser
atendidos dentro de las instalaciones de la URL, entre ellos puede mencionarse; cortaduras leves, quemaduras leves,
etc. Para estos casos se deberá contactar con el Centro Landivariano de Salud Integral Pedro Arrupe, S.J., extensiones
2621 ó 2644, para su respectivo chequeo.
b. Accidentes graves: serán todos aquellos en los que se encuentra en riesgo la vida de la persona (infarto, derrame,
heridas causadas por arma, etc.). Para estos casos se debe avisar al Centro Landivariano de Salud Integral Pedro
Arrupe, S.J. para tener acceso al Servicio de Alerta Médica (Teléfono: 2332 9422)
ARTÍCULO 28: Toda persona que se encuentre dentro de las instalaciones de la Universidad Rafael Landívar tendrá
cobertura de emergencias a través de la empresa Alerta Médica
CAPITULO IV
Sanciones
ARTÍCULO 29: El incumplimiento del presente normativo llevará a que la persona sea sancionada de la siguiente manera:
a. Primera Amonestación: verbal. Segunda Amonestación: representará la expulsión de la presente práctica y una tercera
vez se notificará a la Facultad para sancionarlo en la clase respectiva. En todos los casos se enviará un reporte escrito
a la Unidad de Normas de Convivencia Estudiantil –UNCE-.
b. El alumno que no posea el vestuario y equipo de protección adecuados para la práctica de laboratorio no podrá
ingresar al mismo, con la pérdida de los puntos correspondientes a la práctica.
CAPITULO VI
Normas específicas para laboratorios que utilicen Reactivos.
ARTÍCULO 30: Las prácticas que requieren uso de sustancias tóxicas requieren una preparación previa del
catedrático y los estudiantes. Al iniciar la práctica deberán conocer la toxicidad de las sustancias, sus características
y su manera de disposición.
ARTÍCULO 31: Toda sustancia tóxica o inflamable debe almacenarse siempre en áreas específicas y perfectamente
señaladas. El trabajo con sustancias tóxicas o volátiles deberá hacerse dentro de las campanas de extracción
localizadas en cada laboratorio. Nunca deberán tomarse frascos por la tapa o el asa lateral. Siempre deberán tomarse
con ambas manos, una en la base y la otra en la parte media.
ARTÍCULO 32: Nunca pruebe ni huela las sustancias químicas, a menos que el procedimiento lo señale.
ARTÍCULO 33: La manipulación de ácidos concentrados debe realizarse dentro de la campana de extracción.
ARTÍCULO 34: Para medir volúmenes de ácidos o bases concentrados, use probetas o buretas, nunca pipetas, ni
pipeteadores mecánicos.
ARTÍCULO 35: Nunca mezcle sustancias desconocidas a menos que el procedimiento lo indique.
ARTÍCULO 36: Cuando prepare soluciones de sustancias químicas, no altere la técnica establecida para ello. Una
vez preparada la solución, debe rotularla indicando composición, concentración, fecha, nombre, y el nombre de la
persona que la preparó.
ARTÍCULO 37: Antes de usar un reactivo químico o una solución lea cuidadosamente la etiqueta para identificar el
contenido, tome exactamente la cantidad necesaria y tape el recipiente.
ARTÍCULO 38: Nunca devuelva sobrantes de sus mediciones a los frascos originales para evitar contaminación.
ARTÍCULO 39: Al dejar de usar los reactivos o soluciones, regréselos a su lugar de almacenamiento, esto facilitará su
trabajo experimental y el de sus compañeros.
ARTÍCULO 40: Tenga siempre su mesa de trabajo con el mínimo de riesgos potenciales. En casos de ensuciarse la mesa
límpiela inmediatamente con una toalla húmeda.
ARTÍCULO 41: En caso de salpicadura de un ácido o una base en la piel o en la bata, enjuáguelo inmediatamente,
excepto en el caso de ácido sulfúrico, ya que deberá enjuagarse con una solución de bicarbonato de sodio.
ARTÍCULO 42: Las sustancias volátiles, los desechos orgánicos y/o tóxicos requieren tratamiento especial, y no se deben
desechar en el lavatrastos. Nunca debe mezclar desechos orgánicos con ácidos y oxidantes. Los desechos químicos,
se deben poner en botellas apropiadas y rotuladas. Deseche todas las sustancias siguiendo las indicaciones del
catedrático o instructor, siempre habrá un envase en la campana de extracción que indique el tipo de desechos que
debe colocar en cada envase.
ARTÍCULO 43: Las sustancias no tóxicas, no inflamables y solubles en agua pueden ponerse en el lavatrastos siempre
usando cantidades grandes de agua para lavarlos del sistema. Si hay alguna duda, pregunte a su auxiliar o instructor.
ARTÍCULO 44: Cuando se calientan soluciones o sustancias que desprenden gases corrosivos o tóxicos, debe usarse
la campana de extracción. El calentamiento de tubos de ensayo se efectúa inclinando el tuvo 45º en dirección opuesta
a usted y la que se encuentren los compañeros de trabajo.
ARTÍCULO 45: Manipular con cuidado cualquier equipo de vidrio, termómetros, cristalería, ya que puede poner en riesgo
la seguridad del grupo o la propia.
ARTÍCULO 46: Los procesos de evaporación deben ser vigilados continuamente, ya que un recipiente calentado
después de que se evapore el líquido que contiene puede rajarse o explotar.
CAPITULO VII
Normas específicas para laboratorios biológicos
ARTÍCULO 47: Todas las actividades que se realicen con animales en laboratorios estarán bajo la responsabilidad del
profesor e instructor del laboratorio.
Los restos de animales deberán ser colocados en bolsas de plástico y no deberán ser desechados directamente en
la basura.
ARTÍCULO 48: Cualquier derrame de muestras biológicas o de cultivo de microorganismos deberá ser comunicado al
catedrático del laboratorio, quien supervisará el proceso de descontaminación del área.
ARTÍCULO 49: Antes de desechar cultivos de microorganismos o muestras biológicas, deberá procederse a su
destrucción o inactivación de acuerdo a instrucciones del catedrático o instructor.
ARTÍCULO 50: Queda prohibido desechar sustancias al drenaje o por cualquier otro medio sin autorización del
responsable del área.
REQUISITOS PARA EL LABORATORIO
El estudiante:
Cada parte se calificará sobre 100 y luego se hará la equivalencia a la nota neta
2. Pre laboratorio
Es grupal (dependiendo de la cantidad de estudiantes en cada sección de laboratorio, se formarán grupos
de 2 o 3 integrantes).
No se calificarán pre-laboratorios sin nombre y no se recibirán en fechas tardías.
El tipo de letra a utilizar es ARIAL
Número de letra: 12
Partes de un pre-laboratorio:
a. Membrete: el cual lleva:
Universidad, Sede, Facultad, carrera, curso (margen derecho).
Sección, nombre y carné de los integrantes. (margen izquierdo)
b. No. de práctica (centrado)
c. Título de la práctica (centrado y con negrita)
d. Introducción: con margen justificado con números romanos (I): debe abarcar ¾ de página
e. Fundamento teórico con margen justificado y se coloca con números arábigos (1):
e.1. Material y Equipo: Aquí se incluye la teoría de todo lo que se utilizará. Si se colocan imágenes
deben estar debidamente identificadas (No., título y fuente bibliográfica (ver ejemplo más adelante).
e.2. Hoja de Seguridad: de todos los reactivos y/o soluciones a utilizar. con su respectiva fuente
bibliográfica. (Si no se utilizan reactivos y/o soluciones se coloca N/A).
e.3. Preguntas pre-práctica: se deben responder las preguntas que vienen marcadas como “pre-
práctica” en color azul que se encuentran en cada práctica en el manual de laboratorio (si no hay
preguntas pre práctica se debe colocar N/A).
3. Post laboratorio:
Es grupal (dependiendo de la cantidad de estudiantes en cada sección de laboratorio, se formarán
grupos de 2 o 3 integrantes).
No se calificarán pre-laboratorios sin nombre y no se recibirán en fechas tardías.
El tipo de letra a utilizar es ARIAL
Número de letra: 12
Partes de un post-laboratorio:
a. Membrete: igual al del pre-laboratorio
b. No. de post-laboratorio (centrado)
c. Título (centrado y con negrita)
d. Abstract o Resumen: con margen justificado y números romanos (I):
Debe abarcar ¼ de página. Se redacta en pasado; se coloca en “párrafo” un resumen de los
resultados obtenidos.
e. Resultados con margen justificado y números arábigos (1):
Todo se debe reflejar en tablas y/o gráficas (si se colocan gráficas debe haber por lo menos 2
variables para poder realizar una comparación).
Cada tabla y/o gráfica debe tener una breve explicación antes de colocarla y debe estar debidamente
identificada, por ejemplo:
Fuente: (normativaVancouver)
Las fotografías a incluir son de las muestras de la práctica, no de los estudiantes trabajando en
el laboratorio.
4. Evaluación corta
- Se evaluará en base al contenido del pre-laboratorio y el instructivo de la práctica a realizar.
PRACTICA 1
Objetivos:
I. Que el alumno conozca y maneje adecuadamente el material y equipo de laboratorio más
utilizado en la investigación biológica.
II. El alumno identificará el material y equipo de laboratorio de biología para adquirir buenas
prácticas de manejo de éste, dentro del laboratorio.
Introducción:
Para trabajar con responsabilidad en una profesión relacionada con el cuerpo humano, es deseable y
necesario un grado de conocimiento sólido y lo más completo posible.
Es importante que el alumno sea responsable en el manejo del equipo y material del laboratorio.
Material y equipo:
(*) Material debe llevar al laboratorio por
grupo
*Marcadores, 1 hoja de papel en blanco y
tijeras.
Material de cristalería: Parafilm,
Papel pH
Pipetas Gotero
Probetas Asas bacteriológicas,
Gradillas para tubos
Matraz (Erlenmeyer, Estufas de calentamiento
Kitazato, Balón aforado) Mechero de Bunsen
Lámparas de alcohol
Vasos de precipitados o Beaker Rejilla de asbesto
Cubre y portaobjetos Pinzas para tubo de ensayo,
Balanza granataria
Cajas de Petri
Vidrios de reloj
Morteros
Tubos de ensayo
Agitadores de vidrio
Termómetros
PRE PRÁCTICA:
El alumno investigará cada uno de los materiales y equipos citados anteriormente y deberá realizar un cuadro
sinóptico para clasificarlos según su función.
PROCEDIMIENTO:
1. La catedrática explicará las funciones y los usos más importantes, así como algunas aplicaciones del material
y equipo tan necesarios en el quehacer científico de la biología.
2. Se les distribuirá por grupos equipo y material del laboratorio variado.
3. Cada grupo deberá rotular con su nombre el equipo y/o material entregado y luego clasificar de acuerdo a
la función que realizan: 1- Volumétricos, 2- de Mezcla, 3- Medición, 4- de Sostén, 5- para Separar, 6- como
Recipientes, 7- Aparatos, 8- Uso Especifico
PRACTICA 2
OBJETIVOS:
- Explicar el funcionamiento de las partes primarias del microscopio compuesto y del estereoscopio.
- Llevar a cabo montajes y enfocar apropiadamente
- Usar el microscopio óptico y el estereoscopio para observar muestras biológicas.
- Preparar una muestra húmeda y determinar la magnificación y el tamaño.
- Adquirir destreza para calcular las medidas de estructuras celulares, células y organismos.
- Dar a conocer las unidades de medida de mayor uso en micrometría.
- Reconocer la importancia del microscopio en el desarrollo de las ciencias biológicas.
Marco teórico:
Debido a las limitaciones de nuestros sentidos, necesitamos de un instrumento para descubrir muchas cosas
que nos gustaría encontrar acerca de la estructura de los organismos vivos. Con el microscopio podemos
observar estructuras y movimientos tan pequeños que a simple vista es imposible lograr.
Parte mecánica:
Pie o soporte: sirve como base al microscopio y en él se encuentra la fuente de iluminación.
Platina: superficie sobre la que se colocan las preparaciones. En el centro se encuentra un orificio que
permite el paso de la luz. Sobre la platina hay un sistema de pinza o similar, para sujetar el portaobjetos
con la preparación, y unas escalas que ayudan a conocer qué parte de la muestra se está observando.
La platina presenta 2 tornillos, generalmente situados en la parte inferior de la misma, que permiten
desplazar la preparación sobre la platina, en sentido longitudinal y transversal respectivamente.
Tubo: cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio. Constituye el soporte de oculares y objetivos.
Revólver porta objetivos: estructura giratoria que contiene los objetivos.
Brazo o asa: une el tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el microscopio para trasladarlo de
lugar.
Tornillo macrométrico o de enfoque grosero: sirve para obtener un primer enfoque de la muestra al
utilizarse el objetivo de menor aumento. Desplaza la platina verticalmente de forma perceptible.
Tornillo micrométrico o de enfoque fino: sirve para un enfoque preciso de la muestra, una vez que se ha
realizado el enfoque con el macrométrico. También desplaza verticalmente la platina, pero de forma
prácticamente imperceptible. Es el único tornillo de enfoque que se utiliza, una vez realizado el primer
enfoque, al ir cambiando a objetivos de mayor aumento.
Parte óptica
Oculares: son los sistemas de lentes más cercanos al ojo del observador, situados en la parte superior
del microscopio. Son cilindros huecos provistos de lentes convergentes cuyo aumento se reseña en la parte
superior de los mismos (normalmente 10X en los microscopios que se utilizarán en esta práctica).
Dependiendo de que exista uno o dos oculares, los microscopios pueden se mono o binoculares.
Objetivos: son sistemas de lentes convergentes que se acoplan en la parte inferior del tubo, mediante
el revólver. En esta estructura se pueden acoplar varios objetivos (ordenados de forma creciente según
sus aumentos, en el sentido de las agujas el reloj). Un anillo coloreado es distintivo de los aumentos de
cada objetivo, que también van reseñados en el lateral del mismo. Algunos objetivos no enfocan bien la
preparación al aire, y se deben de utilizar con un aceite de inmersión (normalmente van marcados con un
anillo rojo).
Condensador: sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los concentra sobre la
preparación, de manera que proporciona mayor o menos contraste. Se regula en altura mediante un tornillo
(letra J de la figura).
Fuente de iluminación: en los microscopios a utilizar, el aparato de iluminación está constituido por una
lámpara halógena de bajo voltaje (12V) situada en el pie del microscopio. La luz procedente de la
bombilla pasa por un reflector que envía los rayos luminosos hacia la platina.
Diafragma o iris: sobre el reflector de la fuente de iluminación. Abriéndolo o cerrándolo permite graduar la
intensidad de la luz.
Transformador: ya que el voltaje de la bombilla es menor que el de la red, es necesario para enchufar el
microscopio. Algunos modelos ya lo llevan incorporado en el pie del microscopio. Además, el transformador
dispone de un potenciómetro para regular la intensidad de la luz.
Montaje y enfoque de una preparación microscópica
Antes de observar la preparación al microscopio, esta debe de ser montada sobre vidrio. Para ello existen
dos piezas de vidrio denominadas portaobjetos (porta), que, como su nombre indica, es el soporte
sobre el que va la muestra, y cubreobjetos (cubre) que siempre ha de colocarse sobre la muestra. Una
vez colocada la muestra en el porta, se debe añadir una gota de agua, o de la solución acuosa
pertinente, antes de colocar el cubre, para evitar interfases agua-aire, que provocan zonas ciegas.
Para enfocar la preparación se ha de seguir de forma minuciosa el protocolo descrito debajo de la figura.
Consejos prácticos
En los microscopios que requieren transformador, el enchufe a la red y desenchufe debe hacerse sobre el
transformador, y nunca debe desenchufarse el microscopio del transformador.
Se debe mantener apagada la luz del microscopio siempre que no se esté utilizando, ya que la vida media
de la bombilla es corta.
Siempre se debe comenzar el enfoque con el objetivo de menor aumento.
Anotar siempre el número de aumentos con el que se observa la preparación. Para calcularlo basta
multiplicar el número de aumentos del objetivo por el de los oculares. Hacer esquemas y dibujos
de lo observado con cada aumento.
Salvo que se indique lo contrario no utilizar nunca el objetivo de inmersión, ya que se requiere un aceite
especial sin el que, además de no enfocar bien, existe una gran probabilidad de dañar la lente al rozar
con el cubreobjetos.
EL MICROSCOPIO ÓPTICO
A. OCULARES
B. REVOLVER
C. OBJETIVOS (los aumentos en el ext.)
D. PLATINA
E. Tornillos para desplazar la preparación sobre la platina en sentido
longitudinal y transversal
F. CONDENSADOR
G. Tornillo MACROMÉTRICO
H. Tornillo MICROMÉTRICO
I. DIAFRAGMA IRIS
J. Tornillo para regular la altura del condensador
K. INTERRUPTOR
L. Regulador de la Intensidad de Luz
M. PINZAS para ajustar la preparación sobre la platina
N. PIE O SOPORTE
Pre práctica:
Pre- práctica:
1.- Enumere tres diferencias entre el microscopio óptico y el microscopio estereoscópico:
2.- Explique ¿Qué es la capacidad de ampliación?
3.- Explique ¿Cómo se define el poder de resolución?
Procedimiento:
1. Enfoque del microscopio
- Enchufar el microscopio al transformador y éste a la red (NUNCA ENCHUFAR EL MICROSCOPIO
DIRÉCTAMENTE A LA RED. SIEMPRE QUE NO SE ESTÉ MIRANDO POR EL MICROSCOPIO HAY QUE
APAGAR LA LUZ).
- Bajar la platina hasta el tope.
- Colocar una hoja de helecho en un porta objetos 4.- Colocar el porta objetos en la platina
- Poner el objetivo de menor aumento.
- Subir la platina accionando el tornillo macrométrico y mirando la muestra desde fuera hasta alcanzar el
tope superior. En ningún caso tocar la muestra con los objetivos.
- Mirando por los oculares, bajar lentamente la platina con el tornillo macrométrico hasta conseguir ver el
objeto lo más nítido posible.
- Ajustar el enfoque con el tornillo micrométrico hasta verlo claramente.
- Para observar la muestra a mayores aumentos cambiar de objetivo con un simple giro del revolver (SIN
MOVER EN NINGÚN CASO EL TORNILLO MACRO). Las pequeñas variaciones que puede observar en
el enfoque se producen al cambiar de objetivo y se corrigen con el tornillo micrométrico.
- Para observar otros campos, desplazar la preparación moviendo los tornillos de la platina.
- Para cambiar la muestra.
- Bajar la platina.
- Colocar el objetivo de menor aumento
- Quitar la muestra y colocar la siguiente
2. Papel Milimetrado
Calcule la estimación del diámetro visual correspondiente al objetivo de mayor aumento de su
microscopio. Hay que seguir los siguientes pasos:
a) Recortar un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado.
b) Ponerlo sobre la abertura central del portaobjetos
C) Observando por el ocular y con el objetivo de 4X, mover la muestra hasta lograr que la línea 0 mm
quede en el borde izquierdo del campo visual
d) Enfocar con el objetivo de menor aumento 4X hasta que se vea con claridad. Enfocar la preparación
quiere decir situarla a la distancia del objetivo que permite su observación nítida.
e) Contar el número de milímetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos líneas es un milímetro) y
estimar aproximadamente la fracción sobrante, si la hay.
El resultado será el diámetro del campo visual para este aumento: ______________________________
LA CÉLULA (PARTE 1)
OBJETIVOS:
Pre- práctica:
MATERIAL Y EQUIPO:
• Palillo o Bajalenguas
• Lámpara de alcohol
• Fósforos**
• Azul de metileno
• Pinza para sujetar el portaobjetos
• Soporte de tinciones
• Pipeta
• Agua de charco**
• Portaobjetos
• cubreobjetos
PROCEDIMIENTO:
Tomando en cuenta el esquema de la siguiente página, ¿Cuál de los siguientes microorganismos encontró
en la muestra del agua de lago o de charco? Dibújelos.
- Raspar suavemente la cara interna de la mejilla con un palillo o bajalenguas, y depositar el contenido
en un portaobjetos extendiéndolo con cuidado.
- Fijar la muestra a la llama para estabilizar las estructuras y adherirla al porta. Para ello, se pasa la cara
inferior del porta por encima de la llama brevemente, con cuidado de no quemar las células.
- Añadir 1-2 gotas de azul de metileno sobre las células fijadas y dejar teñir durante 3 minutos.
- Lavar suavemente la preparación para eliminar el exceso de colorante. Para ello, colocar el porta en
pendiente bajo el grifo y dejar caer lentamente un chorro fino de agua.
- Secar la parte inferior del portaobjeto y colocar un cubreobjetos.
- Observar la preparación. Empleando aumentos débiles localizar el área de la preparación más
idónea, deben desestimarse las zonas poco o muy teñidas, los apelotonamientos de células unas
encimas de otras, etc.
- Enfocar las células aisladas con mayor aumento.
- Dibujar y describir lo que observa (núcleo, membrana celular, citoplasma).
Dibujo de la Muestra Tipo de organismo Descripción de las
biológica características observadas.
PRACTICA 4
LA CÉLULA (PARTE 2)
OBJETIVOS:
Pre- práctica:
1. Enumerar los organelos que son exclusivas de las células vegetales y cuáles son sólo de las
células animales y las funciones que realizan.
2. Hacer un dibujo de una célula animal y una célula vegetal, identificando los diferentes organelos
que poseen.
MATERIAL Y EQUIPO:
PROCEDIMIENTO:
IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES
Objetivos:
Pre- Práctica:
Materiales:
Azúcar, leche líquida, maicena, cerveza y glucosa (LLEVARLO UN DÍA ANTES AL SALÓN DE
CLASES) ***
Muestras de azúcares en dilución al 1% de cada azúcar: Preparar 100 ml de cada solución y
colocar en frascos ámbar.
12 tubos de ensayo de 10 ml
Gradilla para tubos de ensayo,
Mechero.
Reactivo de Fehling A y Fehling B
100 ml Lugol
100 ml de HCl diluido 1 Molar
100 ml Bicarbonato de sodio 1 Molar
5 pipetas descartables
Lentes*
PROCEDIMIENTO:
1. Reacción de azúcares reductores
o Tomar 3mL de cada muestra a analizar
o Añadir 1 ml de Fehling A y 1 ml de Fehling B. El líquido del tubo de ensayo adquirirá un fuerte
color azul.
o Calentar el tubo al baño María o directamente en un mechero de Laboratorio.
o La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.
o La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso
Fundamento: Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y de la mayoría de los disacáridos
(excepto la sacarosa). Si el azúcar que se investiga es reductor, se oxidará dando lugar a la reducción del
sulfato de cobre (II), de color azul, a óxido de cobre (I), de color rojo-anaranjado.
Estos resultados nos indican que los azúcares: glucosa, maltosa y lactosa tienen
carácter reductor.
Figura 1 Figura 2 Figura 3
Técnica:
3. Reacción del Lugol: Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en
contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico)
toma un color azul-violeta característico.
Fundamento: La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las
espiras de la molécula de almidón. No es por tanto, una verdadera reacción química,
sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula,
apareciendo la coloración azul violeta. El polisacárido almidón se colorea de azul-violeta en presencia
de yodo, debido no a una reacción química, sino a la fijación del yodo en la superficie de la molécula del
almidón, fijación que sólo tiene lugar en frío.
Figura 6 Figura 7
Técnica:
Colocar 3 mL de cada muestra en tubos de ensayo. Figura 6
Añadir 5 gotas de Lugol en cada uno de los tubos de ensayo.
Observar los resultados. Figura 7.
Con este método puede identificarse el almidón.
Resultados:
Glucosa Maltosa Lactosa Sacarosa Almidón
Reacción + o - color + o - color + o - color + o - color + o - color
de Fehling
IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
Introducción
Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas
soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los
70 grados centígrados o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcoholes, etc. La coagulación de
las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que
al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria.
La reacción de Biuret la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe
a la presencia del enlace peptídico que se destruye al liberar los aminoácidos. Cuando una proteína se
pone en contacto con un álcali concentrado, se forma una sustancia llamada biuret, que, en contacto con
una solución de sulfato cúprico diluida, da una coloración violeta característica.
Objetivos
1. Identificar la diferencia entre un aminoácido, un péptido y una proteína.
2. Identificar la importancia de la temperatura en las soluciones coloidales.
3. Identificar los aminoácidos azufrados.
Pre práctica:
1. Enliste el nombre de los 20 aminácidos
2. ¿Qué nombre tiene la proteína de la clara de huevo?
3. ¿Cuáles son aminoácidos azufrados?
4. ¿Cuál es la fórmula química del biuret?
Material y equipo
3 tubos de ensayo
1 clara de huevo**
Hielo**
Lentes**
5 gotas de Ácido acético
6 mL de Hidróxido sódico al 20%
5 gotas de sulfato cúprico diluido al 1%
10 gotas de acetato de plomo al 5%
1 beaker de 250 mL
Mechero de bunsen
Procedimiento
1. Coagulación (precipitación) de proteínas
a. Llenar a 1/3 un tubo de ensayo con clara de huevo
b. Añadir 5 gotas de ácido acético
c. Calentar el tubo de ensayo en la llama del mechero.
2. Reacciones de biuret.
a. Colocar en un tubo de ensayo 3 mL de clara de huevo
b. Añadir 2 mL de hidróxido sódico al 20%
c. Luego añadir 5 gotas de sulfato cúprico
d. Debe aparecer una coloración violeta-rosácea característica.
LÍPIDOS
OBJETIVO
Poner de manifiesto ciertas propiedades de los lípidos, algunas de las cuales pueden servirnos para su
identificación.
Pre-práctica
MATERIALES:
Mechero.
Gradillas con 8 tubos de ensayo
Vaso de precipitado
3 tipos de aceite **(cocina, manteca y oliva)
Agua destilada
4 pizetas
Solución de Sudán III en frasco cuentagotas
Tinta roja de marcador (o negra)**
100 ml Solución de Hidróxido sódico al 20%.
100 ml Éter o cloroformo.
Parafilm
Guantes de latex
lentes**
1. REACCIÓN DE SAPONIFICACIÓN
Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos
elementos que la forman: glicerina y los ácidos grasos. Estos se combinan con los iones sodio o potasio
del hidróxido para dar jabones, que son en definitiva las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos.
La reacción es la siguiente:
PROCEDIMIENTO:
1. Colocar en 3 tubos de ensayo 15 ml de los 3 tipos de aceite y 2ml de una solución de hidróxido sódico
al 20%. Tapar con parafilm, usar guantes.
2. Agitar enérgicamente luego destapar y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos.
3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior clara, que contiene la
solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada; la superior amarilla de aceite no utilizado, y
la intermedia, de aspecto grumoso, que es el jabón formado.
2. TINCIÓN DE LIPIDOS
Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado Sudan III.
PRODEDIMIENTO:
1. Disponer en una gradilla dos tubos de ensayo, colocando en ambos 2cc de aceite.
2. Añadir a uno, 4 o 5 gotas de solución alcohólica de Sudán III. Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta
roja. Agitar ambos tubos y dejar reposar.
3. Se observará en el tubo al que se le añadió Sudán, que todo el aceite aparece teñido. En cambio, en
el frasco al que se añadió tinta roja, la tinta se habrá ido al fondo y el aceite aparecerá sin teñir.
3. SOLUBILIDAD
Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas
gotitas formando una "emulsión" de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo, por
reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sitúa sobre la de agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol,
cloroformo, etc.
PROCEDIMIENTO:
1. Tomar dos tubos de ensayo y poner en cada uno de ellos 2-3 ml de agua y en el otro 2-3 ml de éter u
otro disolvente orgánico.
2. Añadir a cada tubo 1 ml de aceite y agitar fuertemente.
3. Observar la formación de gotitas o micelas y dejar en reposo. Se verá como el aceite se ha disuelto
en el éter y en cambio no lo hace en el agua, y el aceite subirá debido a su menor densidad.
Práctica 8
Cada sub-grupo realizará dos maquetas (el material y diseño queda a creatividad de los alumnos) y luego
pasará a exponerle al catedrático:
a. Una maqueta de la célula animal con todas las partes identificadas.
b. Una maqueta de la membrana plasmática con todas las partes identificadas.
Para esta práctica no hay evaluación corta y no se entrega pre laboratorio, cuaderno, ni post laboratorio.
Práctica 9.
OBJETIVO
Que el estudiante compruebe las propiedades de las membranas biológicas, como lo es permeabilidad
selectiva y conozca la importancia del entorno para mantener la integridad de las mismas, así como el
efecto osmótico.
FUNDAMENTO TEÓRICO:
La vida como la conocemos hoy no existiría si no existieran las membranas. Estás estructuras definen el límite
entre lo que se considera una célula y su entorno. En el caso de las células eucariotas, las membranas
también definen las organelas internas. Las membranas tienen una función más compleja que ser simples
barreras delimitantes, son estructuras sumamente activas en donde ocurren procesos metabólicos complejos
como trasporte de moléculas, transducción de señales, respiración celular y generación de potenciales
eléctricos entre otros. Es por esto que las membranas están constituidas no solo de lípidos sino de proteínas
y carbohidratos.
Las membranas son impermeables a la mayoría de los solutos polares y permeables a los solutos no polares.
Para el intercambio de la mayoría de los solutos polares Existen mecanismos controlados que pueden
implicar inversión de energía. La existencia de este tipo de membranas permite evidenciar una propiedad
del solvente universal, el agua, que se conoce como presión osmótica.
Las moléculas de agua tienden a moverse desde una región de alta concentración de agua hacia una
de menor concentración. Cuando dos soluciones acuosas están separadas por una membrana
semipermeable que permite el paso del agua pero no del soluto, el movimiento de las moléculas de agua
desde una región más concentrada de agua hacia una menor concentración de agua genera una presión
conocida como presión osmótica. Si la célula se encuentra en una solución isotónica, puede sobrevivir. No
así en condiciones hipertónicas, donde prácticamente se deshidrata o en condiciones hipotónicas, en
donde la presión osmótica causa su lisis.
En uno de los experimentos a realizar hoy veremos la lisis causada por el efecto osmótico. En otro
experimento, observaremos la lisis causada por diferentes agentes químicos que pueden destruir la
membrana celular. Los glóbulos rojos, por ser células muy sensibles a la lisis y por contener en su interior una
proteína coloreada, la hemoglobina, permiten observar fácilmente el efecto osmótico.
En condiciones normales, los glóbulos rojos están en equilibrio osmótico con el plasma. Sin embargo
si la osmolaridad del plasma disminuye, el agua entra a la célula y aumenta el volumen de la misma
pudiendo llegar a la lisis del eritrocito; si la osmolaridad del plasma es mayor que la del medio intracelular,
sale agua de la célula y se reduce el tamaño de la misma (crenación).
Pre-práctica
MATERIALES:
PROCEDIMIENTO:
A. PUNCIÓN VENOSA
La punción venosa permite extraer una mayor cantidad de sangre para las pruebas necesarias en el
laboratorio. Las venas de elección suelen ser las de la cara anterior del antebrazo (vena cubital, vena
cefálica y la vena basílica) porque resulta fácil acceder a ellas.
Antes de comenzar con la punción se debe de contar con todas las medidas de barrera necesarias
(bata, guantes, etc.) y los materiales adecuados.
- Durante la toma de muestra deben guardarse las más estrictas normas de higiene. Practique las
precauciones universales mínimas con todo paciente a ser atendido. Toda muestra debe ser
considerada potencialmente infecciosa y se deben tomar las precauciones que garanticen la seguridad
del flebotomista y de los pacientes.
- El material descartable a usar se abrirá sólo al momento de su utilización y, una vez manipulado, no podrá
guardarse nuevamente aun cuando se le considere nuevo.
o Tome precauciones al manipular agujas y/o lancetas.
o No deje agujas y/o lancetas usadas en la mesa de trabajo.
o No coloque el protector a la aguja.
o Evite que los niños toquen o jueguen con los equipos de flebotomía.
- Una vez realizada la toma de muestra, descartar inmediatamente los materiales usados en recipientes
para ese fin.
- Los recipientes que contienen algodón y los de desecho deben estar perfectamente cerrados todo el
tiempo y se abrirán solamente al momento de usar.
- Al momento de hacer la extracción colocarse los guantes desechables, los cuales se mantendrán
puestos durante todo el procedimiento.
- Si ocurre un pinchazo accidental, informar inmediatamente. Mantenga la calma, y lávese inmediatamente
con agua, jabón y alcohol. Favorezca la salida de sangre por presión continua.
Objetivo:
Pre- Práctica:
Material:
PROCEDIMIENTO:
Técnica de tinción:
1. Depositar el portaobjetos con la extensión de sangre encima del soporte de tinciones y éste
sobre la cubeta.
2. Dejar caer sobre la extensión unas gotas de metanol y esperar que el alcohol se evapore,
con lo que se consigue el fijado. (2 o 3 minutos)
3. Depositar cubriendo toda la extensión, unas gotas de colorante Giemsa, evitar la
desecación y dejar actuar el colorante unos 5 minutos.
4. Lavar la preparación, hasta que arrastre todo el colorante, escurrir en posición vertical.
5. Tomando el porta por los cantos secar aireando el porta, o bien al calor muy lento de la
llama del mechero.
Observación al Microscopio:
1. Con débil aumento explorar la preparación para localizar la zona en la que el frotis es más
perfecto. Los lugares más aptos son aquellos en los que la extensión de los glóbulos se ha
conseguido en una sola capa, están bien teñidos y no se han producido precipitados de los
colorantes. Cuando se observe una zona apta, pasar a aumentos más fuertes.
2. En el campo del microscopio, se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos, hematíes
o eritrocitos, teñidos en color rojo. No tienen núcleo y son más delgados por el centro que por los
bordes. Los glóbulos blancos o leucocitos de identifican fácilmente por la presencia de núcleo.
Hay varias clases de glóbulos blancos:
o los linfocitos algo mayores que los glóbulos rojos, con un núcleo muy voluminoso que
ocupa casi todo el glóbulo, aparece fuertemente teñido en color violeta oscuro.
o los monocitos son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, hay que
desplazarse por la preparación para encontrar alguno. Tienen un núcleo muy grande y
redondeado que aparece teñido en color violeta. (Es bueno que recuerdes su función
que es la de fagocitosis).
o los polinucleares presentan el núcleo como fragmentado o con aspecto arrosariado.
o los eosinófilos, con granulaciones abundantes de color rojizo y el núcleo teñido de color
azul marino. Estos glóbulos aumentan su número en caso de parasitosis o procesos
alérgicos.
o los basófilos presentan un núcleo teñido de rojo y las granulaciones del citoplasma de
color muy oscuro.
o Las plaquetas aparecen como pequeños fragmentos teñidas de color violeta. Estas
células intervienen en el proceso de coagulación sanguínea.
Resultados:
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