Funciones de los LTCD4 (Perfil

Linfocitos Th) – (clase 3)

Los Linfocitos T CD4 como células vírgenes, es decir, maduras pero aun no activadas
se van a encontrar en los órganos linfoides secundarios tales como nódulos linfáticos,
bazo, en las mucosas, etc. Cuando a uno de estos sitios (OLS) llega una célula
dendrítica activada que trae un péptido que está unido con molécula del MHC, esto va
a inducir la activación del LT que esta mediada por coestimuladores como B7 y CD28,
generándose una señalización intracelular en la que está implicada muchas
moléculas. Las moléculas de la señalización intracelular tienen la finalidad de activar
tres factores de transcripción los cuales van a inducir la activación y la transcripción de
ciertos genes, eso va a inducir en el LTCD4 que entre en la fase de activación.

Lo primero que se da en la activación es un evento proliferativo donde de una célula se

van a originar miles de más células pero todas manteniendo la misma especificidad
para reaccionar frente al mismo antígeno. Después viene una fase de diferenciación
donde se generan las células de memoria y los LT efectores, pero en algunos casos (no
siempre) las células efectoras sufren un proceso de especialización. ¿Cuál es la
función efectora general de los LTCD4? Producir y secretar citoquinas para inducir un
estimulo en otra célula. Los LTCD4 se pueden especializar o subdividir en varias
subpoblaciones, siendo unas muy bien conocidas y otras menos conocidas. ¿Qué
significa especializarse? No significa cambiarle la función, sino que va a cumplir una
función mucho mas coordinada.

Perfil Th1
La especialización a la subpoblación Th1 significa que los LT efectores ya no van a
secretar cualquier citoquina sino que van a empezar a producir un determinado tipo de
citoquinas. ¿Que citoquinas son secretadas por los LTCD4 Th1? Las Citoquinas
secretadas por los LTCD4 Th1 son: El Interferon  (IFN ), TNF , TNF  y a veces se
incluye a la IL-2, aunque la IL-2 es producida por todos ya que es muy importante para
la proliferación, IL-2 induce proliferación. Estas subpoblaciones de LTCD4 son
excluyentes ¿Qué significa excluyente? Significa que se diferencia en Th1 o Th2 o Th17
o Treg o Th9, pero no va a haber una subpoblación mezclada (es decir no perfil Th1 y
Th2 en un LT por ejemplo).

¿Qué factores determinan la diferenciación hacia cada subpoblación? Hay dos

estímulos que determinan la diferenciación hacia cada subpoblación. Un primer factor
determinante de la especialización son citoquinas y el otro factor es el origen del
antígeno que está siendo presentado. ¿Quién induce esa especialización? La célula
presentadora de antígeno. Entonces de acuerdo al origen del antígeno mas a las
citoquinas que le secreta la Célula presentadora de Antigeno (APC), el LTCD4 se va a
especializar en alguna subpoblación.

¿Cuál es el origen de los antígenos que generan una especialización en la

subpoblación Th1? Antigenos de origen intracelular, principalmente virus y tumores (no
únicamente porque en algunas bacterias como las micobacterias son importantes).

¿Cuáles son las citoquinas que inducen la especialización o la diferenciación? La IL-12

y también el Interferon  (IFN ). ¿De dónde salen estas citoquinas? Estas citoquinas
salen de la respuesta inmune innata. Desde la respuesta inmune innata se induce la
especialización. Estas citoquinas (IL-12 y IFN ) van a inducir efectos biológicos sobre
células importantes para combatir el estimulo desencadenante, hay que recordar que
las citoquinas siempre tienen ese objetivo de inducir un efecto biológico, para
potenciar en algunos casos la respuesta inmune. ¿Qué células son importantes para
combatir las infecciones virales? Para las infecciones virales son importantes las
células NK, LTCD8 y LB. ¿Cuándo las células están infectadas a quien hay que
destruir? Se tiene que destruir es a la célula, pero también hay virus por fuera de la
célula. Por lo que se necesita es activar células que puedan destruir esas células
infectadas y también se necesita células que puedan reconocer y destruir los
microorganismos que están por fuera de la célula. ¿Qué células tienen la capacidad de
inducir apoptosis? NK y LTCD8, y esto lo hace el Interferon  (IFN) el cual potencia su
acción citotóxica, es decir, por esta vía se induce la eliminación de las células
infectadas o tumorales. Contra los virus que están por fuera de la célula son
importantes.

Lo que busca los microorganismos intracelulares es infectar una célula y para esto hay
anticuerpos que evitan esa infección, y a estos anticuerpos se les conoce como
anticuerpos neutralizantes, un anticuerpo neutralizante se le va a unir al
microorganismo para que este no pueda infectar a la célula. En el caso de las viremias,
los anticuerpos neutralizantes son los IgG, y el Interferon  (IFN ) hace que los LB
produzcan anticuerpos IgG. Otra célula que es importante para eliminar a los
microorganismos que están por fuera de la célula son los fagocitos. El Interferon  (IFN
) y el TNF  potencia la acción fagocitica del macrófago, volviéndose un ciclo ya que la
respuesta inmune innata activa y especializa a la respuesta inmune adaptativa para
que desde la respuesta inmune adaptativa se potencien las acciones efectoras de la
respuesta inmune innata (acción conjunta), pero esto también es una acción
coordinada ya que no se activa todo sino la células y los mecanismos más adecuados.
Por ejemplo no se ha mencionado ni los mastocitos, ni los eosinofilos, ni los basofilos
porque no son importantes ni para eliminar células infectadas ni para eliminar virus y
por esto no se activa, esto es lo que se conoce como especialización.
Perfil Th2
En la población Th2 se maneja el mismo principio: Una célula dendrítica presentando
péptidos a LTCD4, si en los péptidos provienen de parasitos como los helmintos que
son gusanos o anélidos pero sobre todo helmintos va a inducir un perfil Th2, la
citoquina que genera la diferenciación es la IL-4 y esta IL-4 es producida por las
células de la respuesta inmune innata como pueden ser los mastocitos pero tambien
las Células linfoides innatas tipo 2. Peptidos que provengan de parasitos extracelulas
mas un ambiente de citoquinas de IL-4 hace que el LTCD4 se vaya al perfil Th2, y este
linfocito Th2 ahora va a producir IL-4, IL-5, IL-10, IL-13. Estas citoquinas liberadas por
el LT con perfil Th2, van a estar implicadas en la activación de mecanismo efectores
en contra el parasito, por lo que hay que pensar donde está el parasito en donde
generalemnte se encuentra en el intestino. Estos parasitos no infectan a la célula,
están en la luz intestinal. Las células importantes para eliminar estos parasitos son
los: eosinofilos, basofilos y mastocitos. Los eosinofilos son muy importantes porque
producen y secretan proteína básica y proteína cationica mayor que son proteínas que
pueden dañar al parasito, estos eosinofilos son activados por la IL-5.

Como estamos en una infección intestinal hay unos mecanismos físicos que van a
promover la eliminación del parasito como el peristaltismo que es promovido por la IL-
4 y la IL-13, ósea que estas citoquinas pueden actuar sobre células musculares
promoviendo la contracción del musculo liso para que se dé una expulsión. Hay otro
mecanismo importante que es la producción de moco, normalmente el epitelio
intestinal hay moco pero en respuesta al parasito se promueve la síntesis del moco
que evita que se siga adheriendo al epitelio (hay que recordar que el moco es
constantemente recambiable) y es por esto la importancia de saber cómo es la
deposición en un cuadro diarreico (Si hay presencia de moco es por parasito y si hay
presencia de sangre es por bacterias) y esto es lo que se hace sobre todo en el
coproscopico que es mirarle las condiciones a la deposición. Heces fecales es
redundante (Materia fecal o heces).} La IL-4 y la IL-13 aumentan la síntesis de moco a
nivel intestinal, lo que va a promover la expulsión del parasito. Pero frente a los
gusanos hay un mecanismo de la respuesta inmune adaptativa bien importante, hay
un marcador molécular que al médico le indica infección parasitaria y es la producción
de Acs IgE, si una persona presenta mucha IgE implica infección parasitar o alergia,
esta IgE es producida por los LB. La IgE es importante porque se puede pegar a los
parásitos y promueve la degranulación de eosinofilos y de mastocitos, degranular es
liberar las moléculas que tiene en el citoplasma, el mastocito cuando se degranula
libera histamina, heparina que promueve la contracción del musculo liso y aumenta la
producción de moco, cuando se degranula el eosinofilo se libera la proteína básica
mayor y la proteína cationica mayor.
Perfil Th17
Este perfil Th17 es importante en respuesta inmune de mucosas pero a diferencia del
Th2 es frente a un tipo de patógenos distintos. Los patógenos destruidos a partir del
perfil Th17 son los hongos y las bacterias extracelulares, entonces se presenta este
perfil cuando el estimulo proviene de hongos y bacterias extracelulares (Las
intracelulares no porque estas son combatidas por el perfil Th1). Aquí hay un cambio
de tamaño a diferencia del perfil Th2 porque el parasito puede medir metros y las
bacterias en cambio miden micras. El mecanismo efector importante cuando los
microorganismos son pequeños y están extracelularmente, es la fagocitosis. Las
citoquinas que promueven la diferenciación a este perfil son las TGF mas IL-1 o IL-6
(una de las dos + TGF). Cuando las citoquinas actúan de manera conjunta para
inducir un mismo efecto biológico, se le llama una acción sinérgica. Las citoquinas mas
el estimulo induce que el linfoctio TCD4 se especialice en secretar un tipo de
citoquinas particulares como IL-17A, IL-17F, IL-21 y la IL-22, estas citoquinas deben
actuar sobre células que induzcan la eliminación de este tipo de microorganismos.

Estos microorganismos (hongos y bacterias extracelulares) si están causando

infección, y aquí aparece un mecanismo de fagocitosis importante mediado sobre todo
por Neutrofilos. Las Interleucinas 17 (IL-17) son buenas activadoras de neutrofilos, es
decir que les potencia la acción fagocitica, el neutrofilo activado secretara más
citoquinas que son proinflamatorias y que van a ayudar a promover la eliminación.

Hay otro mecanismo importante asociados a los epitelios, las barreras epiteliales son
supremamente importantes. Hay un mecanismo epitelial importante en contra de
bacterias y hongos, y el mecanismo es la producción de un grupo de moléculas que se
llaman Defensinas las cuales comúnmente se les conoce como los Antibioticos
Naturales. Las defensinas se pegan a las bacterias y los hongos induciendoles su
destrucción ó las defensinas ingresan a los hongos y a las bacterias y frenan su
maquinaria de replicación, por esto se dice que las defensinas tienen acción
bacterioestatica/fungioestatica (no lo mata pero no lo deja replicar) o acción
bactericida/fungicida (mata bacterias/hongos). Las Defensinas son producidas por las
células epiteliales, quien le dice a la célula epitelial que produzca defensinas es la
IL-22. IL-22 induce la síntesis de Defensinas.

Es por esto que a los LTCD4 de manera general se les llama Helper, Ayudadores, o
Cooperadores, ya que estos LTCD4 a través de la liberación de citoquinas promueve o
estimula distintos mecanismos de otros leucocitos y no solo leucocitos como las
células epiteliales que no son leucocitos.

Las personas con SIDA se mueren por infecciones por virus, hongos, bacterias y
parasitos ya que el VIH destruye a los LTCD4 por lo que se pierde la capacidad de
reaccionar frente a todos los otros tipos de microorganismos.
Una vez controlado el estimulo la célula que haya adquirido un perfil queda como
célula de memoria Th1 o Th2 o Th17, por esto ante la preexposición al mismo antígeno
la respuesta es más rápida y especializada. En pocas palabras el linfocito que haya
adquirido un perfil específico no se va a regresar y perder su especialización.

LT Reguladores
Hay otras poblaciones como las LT reguladoras, estas células T reguladoras su
diferenciación es distinta, es en el timo, es decir que su diferenciación se da en el
proceso de maduración. En el timo se originan o se forman estas células T reguladoras
que no son importantes para combatir microorganismos, son importantes para evitar
las enfermedades autoinmunes como también para inducir estados es homeostasis.
Las células T reguladoras son inducidas por la citoquina que se llama TGF. ¿En donde
se forman las células T reguladoras? Se originan en el Timo ¿En qué momento? En la
maduración. Una célula T reguladora no deja de ser LTCD4 por lo tanto su función es
producir y secretar citoquinas. La célula T reguladora secreta las citoquinas: TGF,
IL-10, IL-4. La importancia de las células T reguladoras es evitar el desarrollo de
enfermedades autoinmunes, por lo tanto si se carece de células T reguladoras se
generan enfermedades autoinmunes como también se va a evitar volver a un estado
de homeostasis. Estas células T reguladoras se caracterizan por activar y expresar el
factor de transcripción FOXP3 y por expresar la molécula que se llama CD25 y ya se
debe saber que son LTCD4. Entonces la célula T reguladora es un LTCD4 que expresa
factor de transcripción FOXP3 y produce la molécula CD25. FOXP3 promueve la
sintesis de las citoquinas TGF, IL-10, IL-4. El CD25 es la cadena alfa del receptor de
IL-2 las convierte en unas consumidoras de IL-2 para que células autoreeactivas no
proliferen y de esta manera evitar autoinmunidad (En pocas palabras la CD25 es la
cadena alfa del receptor de la IL-2, es decir, es el receptor de IL-2).

Hay otros perfiles menos descritos, uno de ellos es el Th9. Las citoquinas que las
puede polarizar (diferneciar) es la IL-4, es decir, la IL-4 es la que induce la polarización
hacia Th9. La Th9 es importante en la respuesta inmune a Melanoma (cáncer más
común – de piel) y en tumores a nivel pulmonar. Lo que hacen los Th9 es secretar la
IL-9, la IL-9 actua sobre las células epiteliales (en este caso epiteliales epidérmicas o
epiteliales pulmonares) e induce a las células epiteliales a la secreción de una
quimoquina que es la CCL20 (Las quimoquinas son para generar un gradiente químico
de atracción). ¿Qué células son atraídas por la CCL20? Las células que expresen el
receptor CCR6 ¿Quién tiene CCR6? Lo tienen los LTCD8, y los LTCD8 van a inducir
apoptosis de células tumorales. Además la misma IL-9 induce la degranulación de
mastocitos, y los mastocidos que degranulan inducen inflamación y la inflamación
promueve la llegada de mas linfocitos dentro de los que tiene que llegar LTCD8.
¿Qué se necesita para que una citoquina pueda funcionar? Se necesita un receptor,
cuando decimos que la IL-9 actúa sobre células epiteliales quiere decir la célula
epitelial tiene receptor para IL-9.

Inumunoensayos
Tecnicas de laboratorio basados o usados por conceptos inmunológicos.

El principio básico de las técnicas de laboratorio esta dado en la reacción molecular

entre un anticuerpo y un antígeno.

Los anticuerpos son moléculas producidas por los LB osea que por células
plasmáticas. Una persona solamente produce anticuerpos para los antígenos que se
haya expuesto, siendo este el principio importante, si una persona nunca se ha
expuesto a un determinado antígeno no va a tener anticuerpos para ese antígeno.
¿Habra manera de tener anticuerpos específicos para un antígeno sin haberse
expuesto? Si, por medio de la inmunización pasiva. En el caso de los niños que nacen
de madres VIH + si se le hace la prueba muy probablemente le va a dar positivo si el
niño está infectado.

Los anticuerpos son específicos, significa que solamente se unen a un epitope de un

antígeno. El antígeno puede ser grande y dentro del antígeno hay varios epitopes. Cada
anticuerpos es especifico para un epitope de un antígeno. Si se quiere detectar la
presencia de anticuerpos se debe utilizar como reactivo un antígeno (reactivo es la
sustancia del laboratorio que me permite identificar una molecula) si se desea
identificar anticuerpos el reactivo va a ser un antígeno, pero si se desea identificar
antigenos el reactivo va a ser un anticuerpo.

Muchos de los inmunoensayor son rápidos, algunos son económicos, son de fácil
estandarización (es decir que distintos laboratorios pueden adquirir la tecnología y
determinar una buena realización), alta reproducibilidad (fácilmente repetidos).

En el caso de los Anticuerpos utilizados en los inmunoensayos aparecen nuevos

términos que son Anticuerpos o sueros monoclonales y anticuerpos o sueros
policlonales.

¿Qué será un anticuerpo o un suero monoclonal? Es un suero que contiene

anticuerpos que proviene de un solo o de un mismo clon de linfocitos B, mientras que
un suero policlonal o anticuerpos policlonales son anticuerpos que provienen de
distintos clones de LB. La diferencia es la especificidad, nos monoclonales tienen
anticuerpos con especificidad para el mismo epitope mientras que el policlonal tiene
anticuerpos con diferentes especificidades.
Muchos de los sueros que se utilizan en el laboratorio provienen de los murinos como
es el raton o se puede producir en caballos, ovejas, cabras y algunos en humanos. Por
ejemplo la mioglobina tiene distintos epitopes, suero monoclonal es anticuerpos
específicos para el mismo epitope mientras que el suero policlonal tiene anticuerpos
para reconocer y unirse a diferentes epitopes.

Las pruebas de laboratorio, los inmunoensayos, tienen una gran utilidad diagnostica,
se puede utilizar para el diagnostico de diferentes infecciones (virales, bacteriana,
parasitarias, fungicas), todos los tipos de microorganismos pueden ser diagnosticados
o también son utilizados para el diagnostico de enfermedades autoinmunes como
anemia, lupus, artritis.

¿Qué tipos de muestras se pueden utilizar en el laboratorio? Todo tipo de muestra,

todo tipo de fluidos. Se puede utilizar suero, hay que recordar que le suero es la parte
liquida de la sangre y se utiliza cuando se desea determinar sobre todo anticuerpos ya
que el suero es donde están los anticuerpos en circulación o también antígenos que
estén solubles. Se pueden utilizar células obtenidas de sangre completa, se puede
utilizar distintos fluidos corporales donde se puedan encontrar los antígenos y los
anticuerpos como la saliva, LCR, liquido sinovial o se puede utilizar también tejidos
provenientes de biopsias o autopsias (uno proviene de un individuo vivo y el otro de un
individuo muerto). La determinación de la muestra depende de lo que se quiera
diagnosticar, de lo que se conoce del microorganismo (como por ejemplo donde se
aloja).

Hay un tipo de ensayos que utilizan antígenos o anticuerpos no marcados y otros que
utilizan antígenos o anticuerpos marcados. Las pruebas que utilizan antígenos o
anticuerpos marcados son pruebas en las que se mira la luminosidad, cambios en la
coloración, mientras que las pruebas con antígenos o anticuerpos no marcados son
pruebas que se realizan mas por reacciones de aglutinación ¿Qué es aglutinar? Es una
reacción física donde un anticuerpo se une con un antígeno y forma “grumos”, lo que
marca la positividad de la prueba es la evidencia de esos grumos, pero no se le dice
grumos sino que se le dice la evidencia de aglutinación. Cuando se aglutina en medio
liquido o solido, se empieza a hablar de floculación o precipitación. Pero en si la
definición es la interacción física antígeno anticuerpo con aglutinación.

Las pruebas de aglutinación se van a dar entre un anticuerpo y un antígeno no soluble,

el antígeno no soluble será entonces un antígeno que está unido a la célula de la cual
proviene y las células que expresan o que tienen los antígenos pueden ser células
propias como en el caso de los eritrocitos (la hemoclasificación es un reacción de
aglutinación), o pueden estar unidos a los microorganismos. Esta es una reacción en la
que se puede evidenciar la formación de complejos inmunes (unión de un antígeno y
anticuerpo). Se describen dos tipos de aglutinaciones que son: Directas o Indirectas.
La diferencia entre una aglutinación directa y una indirecta es la particula aglutinante,
si quien va a inducir la aglutinación es un eritrocito es una aglutinación directa y se le
conoce como Hemoaglutinación, si la aglutinación la induce perlas ya se habla de una
aglutinación Indirecta.

En la hemaglutinación o Hemoclasificación se quiere identificar los grupos sanguíneos

y tambien se utiliza en la prueba de coombs.

Los grupos sanguíneos son: A, B, AB, O.

¿Qué son el A o el B? Son antígenos de tipo carbohidratos. El antígeno A es un

carbohidrato, el antígeno B es otro carbohidrato, el antígeno O seria un carbohidrato
más pequeño que se considera como ausente.

Todos tienen una estructura base pero de acuerdo a azucares terminales tiene
antigeno A o B. Estos antígenos se consideran antígenos propios, ósea que son
autoantigenos ¿Es bueno o malo producir anticuerpos contra los autoantigenos? Si se
produce anticuerpo es porque el antígeno activo a la célula, entonces es malo.

Si una persona es del grupo A es porque sus eritrocitos tienen el antígeno A por lo
tanto no tiene anticuerpos contra el antígeno A.
Anticuerpos anti, anti es la especificidad del anticuerpo ¿Qué será un anticuerpo Anti
A? será una anticuerpo que se une al antígeno A. Siempre que se hable de anticuerpos
anti es porque se está dando la especificidad del anticuerpo.

Si una persona es del grupo sanguíneo A, no tiene anticuerpos anti A pero si tiene
anticuerpos anti B. Si una persona es grupo de sangre B produce anticuerpos anti A.

En el caso del grupo sanguíneo una persona produce anticuerpos contra los antígenos
que no tiene.

Si el grupo sanguíneo es O se tiene anticuerpos anti A y anti B. Si el grupo sanguíneo

es AB no hay anticuerpos ni anti A ni anti B.

Una persona siempre va a producir anticuerpos contra los antígenos que no tiene. Ahí
se está contradiciendo con lo anterior que es que se produce anticuerpos contra los
antígenos que se exponen. La respuesta es que hay otras células que si tienen esos
antígenos y son las bacterias intestinales, estos mismos antígenos se pueden
encontrar en bacterias del intestino y por eso se promueve la tolerancia a los
antígenos propios y la reacción a los antígenos extraños. Esto explica el porqué no
tener el antígeno si se produce anticuerpos.

El + o el – es otro antígeno. El eritrocito tiene sobre su membrana muchas moléculas,

entre estas los carbohidratos A o B que determinan el grupo sanguíneo pero hay otro
antígeno que se llama el antígeno Rh, este antígeno Rh es una proteína quienes la
tienen son + y quienes no tiene la proteína Rh son -. El eritrocito tiene más antígenos
pero los mencionados anteriormente son los antígenos inmunodominantes, esto
quiere decir que son los que inducen más reacciones inmunes. El antígeno Rh fue
inicialmente descubierto en los monos de la especie Rhesus Macacus de donde deriva
su nombre.

¿Cuál es el principio de la hemoclasificación?

 Si mi grupo sanguíneo es A es porque mis eritrocitos tienen el carbohidrato A y

yo produzco anticuerpos contra el antígeno B.
 Si mi grupo sanguíneo es B, mis eritrocitos tienen el antígeno B y tolero B,
reacciono contra A y por esto anticuerpos contra B.
 Si mi grupo sanguíneo es B se tiene el antígeno A y el antígeno B por lo que no
se produce anticuerpos
 Si mi grupo sanguíneo es O es porque no tengo ni antígeno A ni antígeno B, por
lo tanto se va a reaccionar a los dos antígenos y se produce anticuerpos contra
estos.

Aquí aparece el concepto de transfusiones, a quien le puedo donar sangre y a quién

no.
  Si una persona es de tipo de sangre A se le puede dar sangre con grupo
sanguíneo A y O, no de B ni de AB porque la persona tiene anticuerpos contra el
antígeno B.
 Si una persona es de tipo de sangre B se le puede transfundir sangre con grupo
sanguíneo B y O, no de A ni AB porque la persona tiene anticuerpos contra el
antígeno A.
 Si una persona es de tipo AB se le puede transfundir sangre con grupo
sanguíneo A, B, O y AB. Receptor Universal.
 Si una persona es de tipo O se le puede transfundir sangre con grupo
sanguíneo O. No se le puede poner sangre ni A, ni B, ni AB porque la persona
presenta anticuerpos contra antígenos A, B y AB.

La sangre O no presenta antígeno al que se pueda unir los anticuerpos anti A y anti B,
por lo que es el donante universal.

La sangre AB es la que puede recibir sangre de todos los tipos, por lo que se le conoce
como receptor universal.

Si a una persona de tipo de sangre A se le pone sangre de tipo B, el anticuerpo anti B

se va a unir contra el antígeno B de la sangre transfundida y esto va a inducir
hemolisis, por lo tanto anemia.

Pero fuera del grupo sanguíneo también hay que tener encuentra el antígeno Rh. ¿Si
una persona tiene el antígeno Rh produce anticuerpos contra Rh? No va a presentar
anticuerpos. Si una persona es Rh negativa si va a presentar anticuerpos contra Rh
pero si se expone a ese antígeno ya que este Rh si es un antígeno exclusivo solo de
nosotros (humanos), no se presenta en las bacterias. Por lo tanto una persona Rh- no
tiene anticuerpos contra Rh a menos de que se exponga a ese antígeno y este es el
principio de la eritroblastosis fetal.

Si se está en la clínica y no hay banco de sangre o no hay unidades de sangre y

necesita transfundirle por ejemplo a una persona de sangre B y en el banco de sangre
solo posee AB o el paciente esta inconsciente y se desconoce su grupo sanguíneo. La
solución es colocarle la sangre que se posea y se inmunosuprima al paciente.

Si el paciente es A- y es transfundido con sangre A+, en la primera transfusión con el

antígeno Rh no va haber hemolisis, el riesgo es que el paciente va a quedar
sensibilizado. Sensibilizado significa que va a producir anticuerpos anti Rh, si en la
segunda transfusión se le coloca sangre positiva (+) ahí sí se puede inducir la
hemolisis.

El eritrocito dura entre 80 y 120 días, ósea que alrededor de 3 meses va a

desaparecer y se va a producir el propio tipo.
En el laboratorio se tiene placas con posos, se le agrega gotas de sangre en cada poso
y se le agrego en cada poso un anticuerpo especifico, en el poso A se le agrega
anticuerpo contra antígeno A, en el poso B se le agrega anticuerpo contra antígeno B y
en poso D (Rh) se le agrega anticuerpo contra antígeno D (Rh). En donde haya
aglutinación es donde se va a encontrar el antígeno.

Técnica de Coombs
Otro uso que se le da a la aglutinación es en la Técnica de Coombs, coombs viene del
nombre del investigador.

El suero de Coombs es un suero que tiene anticuerpos anti-anticuerpos, por lo que

estos anticuerpos detectan anticuerpos (ya que los anticuerpos son proteínas y los
anticuerpos detectan proteínas). Es decir que el suero de Coombs tiene anticuerpos
específicos para reconocer anticuerpos.

El test para la prueba de Coombs tiene varias utilidades, una de las que más se
reconocen es en el diagnostico de la eritroblastosis fetal. La Eritroblastosis Fetal es
una condición clínica que afecta o que puede afectar únicamente a mujeres que sean
Rh - , el problema de las mujeres Rh – es que tengan hijos con hombres Rh+. Si una
madre Rh- se embaraza y su hijo es Rh+, el problema va a ser cuando el sistema
inmune de la madre reconozca esta proteína (Rh). ¿En qué momento se entra en
contacto circulación fetal con circulación materna? Al momento del parto se entra en
contacto la circulación fetal con la materna.

Una mujer Rh- que se embarace de un feto Rh+ en el primer embarazo no hay ningún
problema, el riesgo es en los siguientes embarazos porque en el primer embarazo va a
ser sensibilizada en el momento del parto.

¿Qué pasa en la eritroblastosis fetal que también es conocida como la enfermedad de

la incompatibilidad del Rh? El problema es que los anticuerpos de la mamá atraviesen
la placenta. ¿Qué anticuerpos pueden atravesar placenta? Los anticuerpos IgG. El
problema es que los anticuerpos de la madre anti Rh atraviesen la placenta. ¿A quién
se va a unir esos anticuerpos? A los eritrocitos que tengan el antígeno Rh, y quien
tiene los eritrocitos con el antígeno Rh es el niño, lo que va inducir una hemolisis en el
niño.

Hay dos tipos de test de Coombs: un Directo y un Indirecto.

El test de Coombs Directo es útil para detectar anticuerpos sensibilizados. La prueba

de Coombs Directo es una prueba que se le hace a la sangre del niño, no se le hace a
la sangre materna porque la madre no tiene el antígeno. Esta prueba se le hace al niño
para saber si a sus eritrocitos se le han unido anticuerpos. El procedimiento consiste
en tomarle sangre al niño y a esa sangre se le agrega el suero de Coombs el cual
contiene anticuerpos específicos para anticuerpos, si en esos eritrocitos hay
anticuerpos unidos esos anticuerpos van a inducir la reacción de aglutinación. Si hay
aglutinación se dice que la prueba es positiva por lo que los eritrocitos si tienen
anticuerpos unidos.

La prueba de Coombs no es solamente útil para la eritroblastosis fetal, tiene otros

usos ya que se puede usar también para el diagnostico de anemias hemolíticas
autoinmunes (se evalúa en ese paciente si presenta anticuerpos unidos a sus propios
eritrocitos, pero estos anticuerpos no van a estar unidos al antígeno Rh sino a otro tipo
de antígeno). También es útil esta prueba para el diagnostico de anemias hemolíticas
inducidas por fármacos sobre todo algunos antibióticos suelen unirse a la membrana
de los eritrocitos y la persona produce anticuerpos contra el antibiótico. Reacciones
hemolíticas Post-transfusionales tardías también se diagnostican con prueba de
Coombs.

La prueba de Coombs Directa va a ser utilizada para:

 Anemias Hemolíticas Autoinmunes.

 Anemias Hemolíticas Inducidas por Fármacos.
 Reacciones Hemolíticas Transfusionales tardías.
 Enfermedad Hemolítica de Recién Nacido.

La otra prueba de Coombs, es el Coombs Indirecto el cual se usa para determinar la

presencia de anticuerpos, anticuerpos que se unen a algunos antígenos de los
eritrocitos. La prueba de Coombs indirecta es útil para determinar si una madre o una
mujer Rh- esta sensibilizada.

El protocolo es muy similar a la Directa y consiste en tomarle sangre a la madre o del

paciente en sospecha, esa sangre se centrifuga y se toman los anticuerpos, y estos
anticuerpos de la madre o del paciente se ponen a reaccionar con eritrocitos que se
saben que son Rh+ (esta sangre con lo eritrocitos viene del laboratorio). Si en el suero
del paciente hay anticuerpos Anti Rh se van a unir a los eritrocitos y después de esto
se le agrega el reactivo de Coombs para ver si hay aglutinación. El Coombs indirecto es
útil para determinar la presencia de anticuerpos anti Rh.

Esta prueba de Coombs Indirecta se utiliza cuando una madre Rh- da luz (se espera al
menos uno o dos meses después para hacerse la prueba porque la respuesta inmune
adaptativa demora hasta 15 días en activarse, los anticuerpos que inicialmente se
producen son anticuerpos IgM por lo que se necesita el cambio de isotipo a IgG lo cual
demora alrededor de 25 días).

La prueba de Coombs Indirecta se utiliza para:

 Detección de Anticuerpos en el suero de mujeres Rh-.

  Detección de Anticuerpos en el suero de pacientes politransfundidos (son
pacientes que se van a exponer a un gran grupo de antígenos y que va a
generar una reacción contra estos)

En el manejo de mujer gestante lo primero que se debe hacer es hemoclasificarla (no

pedir grupo sanguíneo ni confiarse en cedula). Si se está frente a una mujer Rh – y se
embaraza de un hombre Rh+ se le administra el medicamento RHOGAM el cual es un
medicamento que tiene anticuerpos específicos contra el Rh pero de la clase IgM osea
que no atraviesan placenta. A una mujer Rh- a la semana 20 de gestación se le
administra una dosis de RHOGAM, estos anticuerpos van a quedar en la circulación
materna no pasan a la circulación fetal, estos es para que si en el caso un eritrocito
del niño pasa a la circulación materna antes del parto como por ejemplo por un
trauma. Este medicamento se aplica antes del parto y después del parto para evitar
que la madre sea sensibilizada (Semana 20, 37 y después del parto). Niño puede
nacer con ictericia si la madre presento anticuerpos frente a Rh del niño.