Вы находитесь на странице: 1из 16

CITOMETRÍA DE FLUJO

Tema 1: Fenotipo: Ideas Generales de Análisis

En esta práctica hay 10 ejercicios de análisis. Cada pregunta tiene un número que le relaciona con la
hoja de resultados sobre la cual tienen que trabajar para responder a las preguntas. Las hojas de análisis
se encuentran detrás del grupo de preguntas, y tienen en su margen inferior izquierda números para
saber a qué preguntas pertenecen. Primero leer la pregunta y el número, después localizar la hoja de
análisis y estudiar sobre ella lo que se les pida.

Ideas generales que hay que conocer para realizar la práctica:

- Dot plots e Histogramas

- Cuadrantes de los dots plots

- Gates o puertas lógicas

- Estadísticas: %, números, y MFI.

1.- Indicar el porcentaje de las células leucocitarias que aparecen en el siguiente dot plot de tamaño
(FSC) y granularidad (SSC) sabiendo que:

a. Los linfocitos son más pequeños que los monocitos que a su vez tienen un tamaño menor o igual que
los granulocitos.
b. Los monocitos tienen un retículo endoplasmático más desarrollado que los linfocitos pero presentan
menos gránulos que los neutrófilos.

1
NOTA: Una vez identificadas las poblaciones, recalcular los porcentajes como sí la población de
leucocitos fueran el 100 % de la población.

2. Si el hemograma de una persona nos indica que tiene 10000 leucocitos por microlitro, ¿Qué número
de células por microlitro tendrá de cada tipo leucocitario?.

3.-Relacionar los siguientes histogramas de tamaño y granularidad con el dot plot anterior. Identificar las
poblaciones leucocitarias. Indicar sus porcentajes sabiendo que pertenecen al dot plot anterior (es decir:
son las mismas células usadas en el dibujo anterior pero vistas en histogramas en vez de dot plots).

4. Como demostrarías que cada nube de células identificadas en el dot plot anterior de tamaño (FSC) y
complejidad celular (SSC) son realmente linfocitos, monocitos y granulocitos. ¿Qué técnica experimental
usarías para identificar estos tipos linfocitarios?. Pensar que los podría estar engañando.

2
5.-

Caracterizar según mareaje de superficie las


principales poblaciones leucocitarias.

3
6.- Indicar los porcentajes y MFI (Intensidad Media de Fluorescencia) de las principales
subpoblaciones celulares en que se dividen los linfocitos de sangre periférica que aparecen en los
siguientes dot plots.

7. Relacionar los siguientes histogramas de fluorescencia con sus dot plots. Comprobar los
porcentajes y MFI

4
8. Se presentan dos casos distintos para estudiar las diferencias entre ellos. Comparar el caso estudiado
en el punto anterior (6) con el nuevo caso. Una vez identificadas las poblaciones, indicar las diferencias
encontradas entre ellos (en porcentage y MFI).
Pensar que: Los porcentajes normales de los linfocitos en sangre son: 60-70% del infocitos T, 5-15 % de
linfocitos B, 10-15 % de células NK. Una vez encontradas las diferencias comparar el caso estudiando si
el número de linfocitos por microlitro es:
En el caso 6 : 2000 linfocitos por microlitro
En el caso 8 :
A. 10000 linfocitos por microlitro
B. 2000 linfocitos por microlitro

5
6
7
8
9. Leucemia Linfática Crónica: Diagnóstico diferencial mediante la expresión de células CD5+
Estudio comparativo de dos muestras: Indicar solo el % de células B (CD19+) que expresan CD5+ sobre
el 100% de las B (y no sobre el total de linfocitos, que es lo que hemos hecho en el ejercicio anterior) y el % de
células B (CD19+) que expresan CD20+ sobre el 100% de las B.
¿Cuál de los dos ejemplos sugeriríais que tiene una leucemia linfática?

9
10
11
12
10. Sida (HIV): Cuantificación de subpoblaciones linfocitarias para el diagnóstico y seguimiento de
enfermos con HIV mediante el cálculo del ratio CD4/CD8. Estudio comparativo de dos muestras:

Indicar el porcentaje de T (CD3+) que expresan CD4+, CD8+ y dobles positivas. Calcular el ratio CD4/CD8
y sacar el número de cifras absolutas en función de los posibles hemogramas que el profesor de prácticas
proponga. Caso 1: 2000 linfocitos/ul. Caso 2: 800 linfocitos/iU ¿Cuál de los dos ejemplos sospecharías una
infección con un HIV? Nota: El manejo clínico de estos pacientes en la actualidad se hace con el número
absoluto de CD4+ y con la cuantificación de la carga viral (PCR).

13
14
15
16