ANALISIS E INTERPRETACIÓN DE LAS ALARMAS,

DISPERSOGRAMAS E HISTOGRAMAS
Analizador Hematológico BC-5800

Lic. TM Javier Quiroz Castillo

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Dpto./de
Marketing
Ingeniería Medica
 Familia de
Productos Mindray
 Oficinas
Shenzhen, P.R.
China
 Ingresos:
547.5 Mill.
USD (2008)
 Empleados:
5580
 Posicionamiento
de Mercado:
Mayor compañía
China en2 Desarrollo
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Familia de Analizadores
Hematológicos

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Imagen del BC-5800
5 diferenciales, 29 parametros

Hasta 90 muestras por hora

Laser scatter + Chemical dye +
Flow cytometry technology

Canal independiente y método optico

para la medición de Basófilos

Powerful capability to flag abnormal cells

Optional autoloader, barcode scanner
Large TFT touch screen
Large storage capacity: up to 40,000 samples
Recommended or customizable decision rules

for re-exam abnormal samples

Support uni- or bi-directional LIS

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 Estudio de Células Sanguíneas
Neutro

Eos RBC

Mono

PLT
Baso
Lymph

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 Tecnología 3 diff?

Secuencia normal de
Tamaño
Después de los Lisantes

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 Tecnología 5 diff?

Cinco grupos Leucocitarios

Lymphocyte 25 ~ 30%
Monocyte 3 ～8 %

Neutrophil 50 ~70%
Basophil 0 ～1 %
Eosinophil 0.5 ～3%

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 Similitudes y diferencias

Gránulos
pequeños, núcleo
multilobular

Gránulos grandes y
Gran núcleo que ocupa oscuros; núcleo
casi toda la célula lobulado

Gránulos grandes
rojo/naranja; núcleo
púrpura bilobulado
Más citoplasma que el linfocito

Estructura simple y diferente tamaño Estructura compleja y tamaño medio

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 Diferenciación de Leucocitos
5 Diff.
Existen 5 diferentes tipos de Leucocitos ( WBC)

Lymphocyte Monocyte Neutrophil Eosinophil Basophil

Tamaño pequeño, gran Grande, citoplasma sin Gránulos en citoplasma Gránulos de color Menos común de
núcleo con relación a gránulos, interviene en la de color rosado, marcador naranja, gruesos , todos, gránulos de color
citoplasma, el mayor ingestión de partículas de etapa aguda de la relacionados con azul oscuro, relacionados
constituyente del extrañas, como bacterias o inflamación. infecciones parasitarias. con infecciones micóticas.
sistema inmune. parásitos.

Granulocitos

LYM MON NEU EOS BAS

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WBC: White Blood Cell
Combinación de Tamaño y Complejidad

Tamaño
A C
B

D E

Complejidad, gránularidad (vacuolas, artefactos)

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 ¿Cómo Diferenciar los Diferentes
Tipos de Leucocitos?
Utilizando sus diferentes características, TAMAÑO Y
COMPLEJIDAD CELULAR

Para eso utilizaremos cuatro tecnologías combinadas:

Citometría de Flujo
Dispersión de Laser
Tinción Citoquímica
Impedancia Eléctrica

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Dpto./de
Marketing
Ingeniería Medica
Tecnología Avanzada
WBC 5-diff technology

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 WBC Tecnología
Citometría de Flujo
Celulas inyectadas en una
cámara de flujo que esta
localizado en el paso óptico de
una fuente de luz, usualmente un
laser.
La cámara de flujo contiene un
líquido que fluye rapidamente : el
fluido envolvente que lleva la
muestra a alta velocidad por el
paso de luz.
Las células mantienen su
orientación y posición en el fluido
debido a que obedecen las
característricas del flujo laminar y
atraviesan en fila de uno el paso
óptico.

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WBC Tecnología
La dispersión de Luz ocurre
Dispersión de Luz Laser
cuando la partícula reflacta la
luz que incide sobre ella, esto
depende de las características
físicas de la partícula.

-Forward scatter (FS): Tamaño

-Side scatter (SS): Complejidad

1 - 5°
6 - 20°

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 Dispersión de Laser de Ángulo Múltiple

Dispersión de ángulo
mayor (MAS)8~20
5
Granularidad (Complex)

3 4
Dispersión de ángulo
Menor (LAS)2~5
Volumen
1 Muestra
2 Laser
3 Lentes

1
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 Teoría de Mie
• En células diferentes de diferente tamaño (Monoc. y Linf.)
• El ángulo bajo las diferencia por tamaño

Laser

LAS

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 Teoría de Mie

• En células diferentes pero del mismo tamaño (granulocitos)

• Ángulo mayor refleja la complejidad celular

Laser

MAS

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WBC Tecnología
Tinción Química

EOS

Otros
WBC

RBC

Cámara de diferencial

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WBC technology
Chemical dye

BASO

other
WBC

RBC

BASO Channel

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BASO scattergram
WBC/Baso

WBC BAS%

BAS# can be calculated according to BAS%

WBC total result is counted in BASO channel

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5 part result
Finally…

NEU% LYM% MON% EOS% BAS%

* WBC = BAS#

*
NEU# LYM# MON# EOS#

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 DISPERSOGRAMA / SCATTERGRAMA

DEFINICIÓN
Gráfico estadístico que
representa la distribución de
dos variables en una
muestra. Una variable se
representa gráficamente en
el eje vertical; la otra en el
horizontal. Un
dispersograma demuestra
el grado o tendencia de
presentación de las
variables en relación mutua.

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Dpto./de
Marketing
Ingeniería Medica
 INTERPRETACIÓN DEL
DISPERSOGRAMA

Neu

Mon

Lymph

Ghost

FS : Frontal Scatter / Dispersión Frontal / Información

sobre el Tamaño celular
SS : Side Scatter / Dispersión Lateral / Información sobre
Complejidad Celular

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Dpto./de
Marketing
Ingeniería Medica
 Entendiendo el Dispersograma Normal

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 Dispersograma de una muestra NORMAL

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 Dispersograma de una muestra normal

Neu

Mono

Eos
Lymph Baso

RBC Ghost 4 Parts

Dispersograma BASO
1. The 4 parts except BASO should be close to the lower left corner.
2. The profile of lower part should be smooth, not cut by a straight line.

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 DIFF

Grande

Neutro es complejo y
grande

Mono es más grande que

el Linfo

Estructura interna del

Linfo es mas simple que la
del EOS.

Pequeño

Estructura simple Estructura compleja

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 BASO

Grande

Baso mantiene su
mismo tamaño

Lymph
Neutro
Eos
Mono
Disminuyen
grandemente
Pequeño

Estructura simple Estructura compleja

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 Dispersograma Anormal y Su Significado

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 Muestras Anormales:
Banderas
Left Shift
LIC

Mon

ALY

Lym ALY

NRbc
Ghost

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 Dispersograma de una muestra ANORMAL

Leucopoenia Eosinophilia

Lymphocytosis Neutrophilia Monocytosis

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 Dispersograma de una muestra ANORMAL

ATL LIC

Left shift Lyse resistant

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 Dispersograma Anormal

Mov Izq.

LIC

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 Dispersograma Anormal

ALY

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 Ganancia inadecuada

Ganancia baja Ganancia alta

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 Celda de flujo sucia o con coágulos

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 DEFINICIÓN
ALARMA
Señal por medio
de la cual se
informa sobre la
presencia real o
inminente de
una
amenaza, aviso
de la
probabilidad de
que ocurra un
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Dpto./de
Marketing
Ingeniería Medica
 SISTEMA DE ALARMAS
2.
Banderas

1.
Límite
Excedido

3.
Se Requiere
Confirmación
Microscópica

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¿Por qué se requiere
confirmación microscópica?
En estado patológico las RUO

células alteran sus Atypical

Lymphocytes
(#,%)

características celulares Large Immature

Cell (#,%)

normales
Tamaño : células
activadas son mas grandes
Complejidad : Células
activadas desarrollan
estructuras que
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Dpto. de Ingeniería Medica
 Superposición de poblaciones

Como
consecuencia de
esto las células no
se encontraran en 35
65

las zonas donde

normalmente se
ubicaban. Y es
posible que las
poblaciones se
superpongan no
permitiendo asi una
identificación
definitiva.
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ocasiones, mi
lámina no
concuerda con • Diferencia de método,
el resultado recordar que el analizador
del cuenta miles de células y
analizador? el observador 100.
• Extensión de la muestra,
de la aguja, o del tubo?
Recordar que en • Fragilidad de los
raras ocasiones la eosinófilos
lectura microscópica
hecha por dos • Técnica de lectura (incluyo
operadores los extremos?)
diferentes coincide • Alteraciones debido a la
completamente preparación del colorante.
• Densidad de la muestra.
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 HISTOGRAMAS, EL
PRINCIPIO DE
COULTER
Luego de producida la acción del
lisante las células son medidas y
contadas por el método de
impedancia (recordar que por el
principio de Coulter el número de
pulsos producidos por el paso de una
partícula con carga de una solución a
otra conectas y unidas mediante un
registrador de voltaje equivale al
número de partículas que se
desplazan de una solución a otra, y la
duración del pulso es directamente
proporcional al volumen de la
partícula.)

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HISTOGRAMAS
En estadística, es la
representación gráfica de
una variable, en forma de
barras, donde la altura de
cada barra es proporcional
a la frecuencia de los
valores representados.
En el eje vertical se
presentan las frecuencias.
En el eje horizontal se
presentan los valores de las
variables

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HISTOGRAMAS
El histograma es un grafico
construido mediante la
representación de dos variables:

a.- Volumen de la partícula, en el eje

X (Horizontal), en femtolitros
b.- Número de partículas, eje Y
(Vertical)

El analizador presenta 3 histogramas

WBC, Baso
Glóbulos Rojos
Plaquetas

El analizador separa los pulsos en

umbrales y canales.

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HISTOGRAMAS

Traducción de los pulsos en un Histograma

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HISTOGRAMAS

Curva de datos primarios

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HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Observe que la distribución de la
población no es simétrica, esto es
normal debido a que las plaquetas
son restos celulares de forma y
tamaño variable, una plaqueta joven
es de mayor tamaño que una
senescente, si bien el límite
aceptado para una plaqueta normal
son 12 fl. Eso quiere decir que el
promedio de la población (el pico)
debería encontrarse siempre al lado
izquierdo de la flecha, como se
observa en el gráfico.

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PLT series
Histogram

PLT * MPV
PCT =
10000
MPV PDW

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 HISTOGRAMA DE PLAQUETAS

Un gráfico que siga la línea roja debe

interpretarse como posible
agregación plaquetaria (el origen
intra o extravascular de la misma no
puede determinarse) o con un
aumento en el número de plaquetas
grandes, fragmentos celulares
(membranas de glóbulos rojos)
Un gráfico que siga la línea verde
debe interpretarse como interferencia
producida por microcitosis
marcada, glóbulos rojos de menos de
30 fl.(recordar que tanto plaquetas
como glóbulos rojos se miden por
impedancia en una misma cámara y
de manera simultánea.)
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HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS

Una agregación plaquetaria lleva

consigo una disminución en el
número de plaquetas (2 o más
plaquetas agregadas son contadas
como una de mayor tamaño).
Por lo tanto cada vez que se
encuentre una alteración en la
forma del histograma de
plaquetas, debe investigarse
microscópicamente la muestra en
busca de agregación plaquetaria.

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PLT series
P-LCC/P-LCR

S2 representa el número de plaquetas grandes, y S1+S2 representa el recuento total

de plaquetas

P-LCC = PLT * P-LCR

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P-LCC y P-LCR estan relacionados.
P-LCC Platelets-Large Cells Count
P-LCR Platelets-Large Cells Ratio

P-LCC = PLT * P-LCR

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PLT: Platelet
Clinical application

PLT P-LCR Clinical Cases

Normal (100-300*109/L) Normal (11-45%) ~

Increased platelet destruction

Reactive thrombocytosis

~ Thalassanemia

~ Platelet dysplasia

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 HISTOGRAMA DE
GLOBULOS ROJOS

El Histograma de Glóbulos Rojos se aprecia

como una distribución cercana a la normal.
Observe la distribución casi simétrica de la
población con el pico de la población
cercana a los 87 fl. Observe además que
existen hematíes debajo de los 50 fl. Y
encima de los 100 fl.
El ancho de base de la campana representa
el nivel de variabilidad de la
población, (Anisocitosis/poiquilocitosis)
La posición de la campana sobre el eje
horizontal representa la tendencia
Micro, Normo o Macrocítica de la
población.

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 Case Presentation

Normal people, the RBC Dimorphologic RBC histogram,

histogram shape is in perfect indicating anisocytosis. From a
Gaussian distribution. rectal cancer patient

Microcytosis, the RBC Dimorphologic RBC histogram.

dominant peak moves to From a recovery of Iron-
left. From a 34-year old deficiency anemia treatment
outpatient. patient.

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Ver: 1.0 27 Abril 2011 Dpto. de Ingeniería Medica
4 channels for BC-5800
5 reagents in 4 channel
LYM
MON

Flow Cytometry
NEU

Laser Scatter
DIFF Channel EOS

Scattergram
Sample BAS
Rotatory
Valve WBC
BASO Channel

Colorimetry
LH Lyse
HGB
HGB
HGB Channel

Impedance RBC
RBC
Aperture PLTPLT
RBC Channel

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