los enzimas pueden ser afectadas en su

actividad por factores de tipo físico,

temperatura, pH, fuerza iónica, factores
químicos e inhibidores.
MATERIALES Y EQUIPOS
Mechero
Palillos
Guantes
Cajas petri.
Lancetas
Toallas de papel
Informe # 9 Algodón estéril
Laboratorio de Biología I Pipetas
Biología Celular Goteros
Cuchilla nueva
Lanis bolaño Pinzas para tubo de ensayo
Jhojan carrillo Tubos de ensayo
Baño de maría
Laura cañas Gradilla
Vidrio de reloj
Milena mora Bisturí
Termómetro
Probetas
Temas: Enzimas Cinta de enmascarar
Pitillos
Objetivo general: Conocer lo
Jeringas de 1, 5, 10 ml
relacionado con la catálisis enzimática en Balanzas
los medios biológicos Mortero
Cucharas desechables
Objetivos específicos : REACTIVOS
* Reconocer en la catálisis enzimática la Alcohol
enzimas y el sustrato . Agua destilada
* Determinar el efecto del pH, la Agua en bolsa
temperatura y la concentración en la Lugol
actividad enzimática Peróxido de hidrogeno al 6%
* Identificar la importancia de la catálisis Hielo
enzimática en los medios biológicos Cloruro férrico (cristales)
Introducción Ácido acético
Las enzimas son proteínas que Hidróxido de sodio o amoniaco
disminuyen la cantidad de energía que se Anticoagulante (citrato de sodio)
requiere para realizar una reacción, la
actividad catalítica es especifica. Para
realizar su función se unen a las
moléculas por catalizar, llamadas sustrato
(S) en el sitio activo para establecer un
complejo llamado enzima- sustrato (ES),
el cual se puede disociar en sus moléculas
originales enzima y sustrato o bien
generar producto(P) y la enzima libre.
Las enzimas se clasifican de acuerdo a la
reacción que cataliz en oxidoreductasas,
transferasas, hidrolasas, isomerasas,
ligasas, liasas. Algunas enzimas necesitan
para su funcionamiento una o más
moléculas de carácter no proteico, que
participan de manera directa en la
reacción química durante la catálisis. Se
le denomina grupos prostéticos y se
clasifican en coenzimas y cofactor. Las
coenzimas son sustancias orgánicas y los
cofactores generalmente son iones
inorgánicos como el calcio, magnesio y
zinc. Debido a su naturaleza proteínica
PROCEDIMIENTOS

Parte 1- Efecto de la cantidad de enzima

 Tome 4 tubos de ensayo y rotúlelos tubos de la siguiente manera

Numero de tubo Cantidad en ml de Peróxido de hidrogeno

extracto de hígado

1 0 2 ml

2 1.0 ml 2 ml

3 2.0 ml 2 ml

4 4.0 ml 2 ml

 Una vez realizado, agite cada uno de los tubos y posteriormente añada al mismo
tiempo 2ml de peróxido de hidrógeno en cada uno de los tubos.
Describa lo observado y justifique

Al llevar a cabo los diferentes procesos anteriormente estipulados, se pudo observar el

aumento de la tasa de la reacción catalizada y la actividad tanto de la enzima y de su
concentración.

a) El tubo 1 se mantuvo congruente, solo se percibió que muy lentamente el

peróxido de hidrogeno desprendía pocas burbujas de oxígeno.
b) El tubo 2 desprendió con más abundancia y rapidez burbujas o espuma,
estas se subieron hasta el bordo y se tornó un poquito caliente. Pudiéndose
notar una cantidad de peróxido de hidrogeno.
c) El tubo 3 desprendió con bastante rapidez y muchísimas más burbujas o
espuma, las cuales subieron y se derramaron por este, se sintió más caliente.
En este sobro un poquito de peróxido de hidrogeno combinado con extracto
de hígado.
d) El tubo 4, no se alcanzó a terminar de agregar el extracto de hígado cuando
la espuma ya había salpicado, derramado por todo el tubo y se tornaba más
caliente que el anterior. En este sobro un poco de extracto de hígado.

 ¿Cómo puede la cantidad de enzima afectar la actividad enzimática?

Las enzimas son biomoléculas especializadas en la catálisis de las reacciones
químicas permitiendo que estas reacciones trascurran en los seres vivos a un ritmo
adecuado, la carencia de estas, llevarían a las reacciones a presentar un ritmo más
lento.

Estas biomoléculas presentan factores lo cuales son aquellos agentes o condiciones

que pueden modificar el normativo funcionamiento de las enzimas. Uno de estos
influyentes, podría ser la cantidad de enzimas, la cual a medida que aumenta la
concentración de enzimas, la velocidad de la reacción aumenta de manera
proporcional. Sin embargo, esto es así solo hasta cierta concentración, pues en un
momento determinado la velocidad se hace constante.
 Parte 2. Efecto de la cantidad de sustrato

•Tome 5 tubos de ensayo y rotúlelos tubos de la siguiente manera

Numero de tubo Cantidad en ml de Peróxido de hidrogeno

extracto de hígado
1 1.0 ml 0 ml
2 1.0 ml 1 ml
3 1.0 ml 2 ml

4 1.0 ml 4 ml

5 1.0 ml 6 ml

•Una vez realizado, agite cada uno de los tubos y posteriormente añada al mismo instante las
siguientes cantidades de peróxido de hidrógeno: tubo 1; 0ml; tubo 2: 1ml; tubo 3: 2ml; tubo 4: 4ml;
tubo 5: 6ml. Describa lo observado y justifique

Al realizar el procedimiento, se puede observar que al poseer mayores

concentraciones del sustrato (Peróxido de hidrogeno), aumenta la probabilidad que
una molécula de enzima pueda colisionar con el sustrato de una manera más rápida.

Se puede notar como a diferentes concentraciones del sustrato peróxido de

hidrógeno puede afectar la velocidad de la actividad enzimática.

Menor cantidad de sustrato Menor la velocidad de la actividad

enzimática.

Mayor cantidad de sustrato Mayor será la velocidad de la actividad

enzimática.

¿Cómo puede la cantidad de sustrato afectar la actividad enzimática?

La velocidad de la reacción o catálisis varía de acuerdo a la concentración del

sustrato; si esta cantidad aumenta, la actividad enzimática también lo hace, hasta
alcanzar la velocidad máxima, esto se debe a que más moléculas de sustrato
colisionarán con las moléculas de enzima punto donde la enzima se satura, debido a
que las enzimas tienen todos sus sitios activos ocupados.

Parte 3- Efecto de la temperatura

•Tome 3 tubos de ensayo y rotúlelos tubos de la siguiente manera.

Nota : Espere que el material que este dentro de los tubos tenga la misma
temperatura que la de los respectivos baños
Numero de tubo Cantidad en ml de Temperatura Peróxido de
extracto de hígado hidrogeno

1 2 Ambiental 2ml

2 2 Agua hirviendo 2ml

3 2 Baños con hielo 2ml

Una vez realizado, agite cada uno de los tubos y posteriormente añada al mismo
instante 2ml peróxido de hidrógeno en cada uno de los tubos. Describa lo
observado y justifique

Pudimos observar como la temperatura influye como un factor cambiante en la

reacción de la actividad enzimática

 En temperatura ambiente observamos una velocidad constante y

no tan apresurada

 En el proceso de agua hirviendo pudimos ver una reacción más

paulatina, nuestras sustancias subieron de una manera mucho más
lenta

 En el baño de hielo pudimos apreciar una aceleración al

momento momento de la reacción, las sustancias subieron
mucho mas rápido

¿Cómo puede la temperatura afectar la velocidad de la actividad enzimática?

Afecta debido a que las altas temperaturas desnaturalizan a las enzimas

haciendo que estas dejen de funcionar de manera óptima, razón por la cual la
reacción se dió de manera tardía
Parte 4- efecto del pH

Al haber realizado los procedimientos

dirigidos en la guía, observamos que cada
una de las muestras tuvo como resultado
presencia de espuma.

Cada una de las muestras reaccionaron,

ocasionando demasiada espuma. Además,
las tres muestras se encontraban con una
temperatura alta; al tocar se lograba sentir
lo caliente que estaban los líquidos.

1 2 3

Sin embargo, los restos de las muestras variaron; en la primera muestra la espuma
permaneció más en el tubo de ensayo y el extracto de hígado con el peróxido de hidrogeno
no presentó una coloración notable. Por otra parte, la muestra 2 logró expulsar gran
cantidad tanto de la espuma como de la mezcla del extracto de hígado con el peróxido de
hidrogeno y tampoco se notó una coloración. En cambio, la muestra 3 presentó una
coloración más fuerte y la espuma quedó dentro del tubo; a diferencia de las demás
muestras, esta se sentía mucho más caliente que las demás.
¿Cómo puede el pH afectar en la velocidad de la actividad enzimática?

El pH puede llegar a afectar la velocidad de la actividad enzimática, debido a que afectan

directamente la parte iónica de los grupos carboxilo y amino, el pH puede provocar la
desnaturalización de la proteína, cambiando así sus propiedades estructurales, químicas y
físicas, y así altera las propiedades cataliticas de dichas enzimas. Los valores de pH que no
sean óptimos, presentarán un cambio drástico en la velocidad de la actividad, gracias a la
disminución de radicales ácidos o básicos ionizados.

Por ejemplo, esta investigación realizada por estudiantes del Departamento de Biotecnología.
Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa, demuestra que mientras el pH se vea
transformado, el tiempo de reacción de la actividad enzimática se verá alterado de igual manera.

.
 cada una de las sustancias introducimos
2ml peróxido de hidrógeno; asimismo se
Parte 5- Actividad enzimática.
notó las alteraciones de la temperatura y
la alteración de la velocidad de la
actividad enzimática.

Al Introducir 2ml de peróxido de

hidrógeno en cada una de las muestras,
observamos diferentes cambios que

lograron mostrar la variabilidad de la

temperatura. Es decir, donde introducimos
el peróxido de hidrógeno en 5 ml de agua,
presentó una temperatura constante de 23
grados; en la muestra 2, con 1 gr de
FeCl3+ 5ml de agua más el peróxido de
hidrógeno presentó en primer lugar una
temperatura de 31 grados y posteriormente
aumentó su temperatura por 8 grados. Por
otra parte, la muestra número 3, que
contenía 1ml de extracto de hígado más
peróxido de hidrógeno presentó una
temperatura de 22 grados centígrados. Sin
embargo, su temperatura iba descendiendo
hasta bajar 2 grados centígrados, es decir,
20.

 Temperatura fría: En esta

temperatura, la velocidad
de la reacción enzimática
acelera.
 Temperatura normal: En
esta temperatura, la
velocidad de reacción se
mantuvo constante.
 Temperatura caliente: En
esta temperatura, la
velocidad se ve alterada al
generar un cambio
retardante.

En primer lugar, realizamos los Preguntas complementarias

procedimientos requeridos en la guía. En
1)
Moléculas reguladoras

Las enzimas pueden ser reguladas por otras moléculas que aumentan o bien disminuyen su
actividad. Las moléculas que aumentan la actividad de una enzima se conocen como
activadores, mientras que aquellas que disminuyen la actividad de una enzima se llaman
inhibidores.

Las enzimas pueden ser reguladas por otras moléculas que aumentan o bien disminuyen su
actividad. Las moléculas que aumentan la actividad de una enzima se conocen como
activadores, mientras que aquellas que disminuyen la actividad de una enzima se llaman
inhibidores.

 Un inhibidor puede unirse a una enzima y bloquear la unión del sustrato, por
ejemplo, al pegarse al sitio activo. Esto se conoce como inhibición competitiva
porque el inhibidor "compite" con el sustrato por la enzima.
 En la inhibición no competitiva, el inhibidor no bloquea la unión del sustrato con el
sitio activo, sino que se pega a otro sitio y evita que la enzima haga su función.

Regulación alostérica
es solo cualquier forma de regulación donde la molécula reguladora (un activador o
un inhibidor) se une a una enzima en algunos lugares diferente al sitio activo.
usualmente tienen varios sitios activos localizados en diferentes subunidades
proteicas. Cuando un inhibidor alostérico se une a una enzima, cambian ligeramente
todos los sitios activos en las subunidades proteícas, de manera que funcionan
menos eficientemente
también hay activadores alostéricos. Algunos de ellos se unen a una enzima en
lugares que no son el sitio activo, y causan un aumento en la función de este.
Además, en un proceso conocido como cooperatividad, el sustrato mismo puede
servir como un activador alostérico: al unirse a un sitio activo, aumenta la actividad
de otro sitio activo.
Cofactores y coenzimas

Muchas enzimas no funcionan de manera óptima, o incluso no funcionan en absoluto, a

menos que estén unidas a otras moléculas auxiliares no proteicas conocidas como
cofactores. Estos pueden unirse temporalmente a la enzima a través de enlaces iónicos o de
hidrógeno, o permanentemente mediante enlaces covalentes más fuertes.

Las coenzimas son un subconjunto de cofactores que son moléculas orgánicas (basadas en
el carbono). la vitamina C es una coenzima de varias enzimas que participan en la
construcción de la proteína llamada colágena, una parte clave del tejido conectivo.

Inhibición de vías metabólicas por retroalimentación

el producto final de una vía metabólica actúa sobre la enzima clave que regula el ingreso a
esa vía para evitar sobreproducción del producto final.
esta es una forma astuta en que la célula hace la cantidad justa del producto. Cuando hay
poca cantidad del producto, la enzima no se inhibirá y la vía correrá a todo vapor para
regenerar sus provisiones. Cuando hay demasiado producto acumulado, la enzima se
bloqueará para impedir la producción de producto nuevo hasta que se haya utilizado el
existente.

2)

la enzimase une a uno de los reactivos (sustratos) en el sitio activopor medio de

interacciones no covalentes para formar uncomplejo, el cual permite a la vez la
formación del estado detransición que luego se transformará en el producto. El
sitioactivo es una porción de la molécula de proteína (hendidura)en donde las
cadenas laterales de losaminoácidos que lo conforman sonindispensables para la
interacción ounión con el sustrato, esto permiteque la acción catalítica sea alta-
mente específica. Una vez formadala unión entre enzima y sustrato seforma el
estado de transición queimplica el reacomodo de los enlaces,rompiendo unos y
formando otros,para generar finalmente el produc-to el cual se separa del sitio
activo yla molécula de proteína queda librepara catalizar la reacción de otrosustrato.
El sustrato actua como una llave que permite continuar le proceso, sin este. El
candado que seria la enzima. No estaría completo su complejo.

3)
En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada
10ºC de incremento, la velocidad de reacción se duplica. Las reacciones catalizadas
por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser proteínas, a partir de cierta
temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor. La temperatura a la cual la
actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima Por encima de esta
temperatura, el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es
contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización
térmica, y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.
4)
Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -
SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos. Según el pH del medio,
estos grupos pueden tener carga eléctrica positiva, negativa o neutra. Como la
conformación de

las proteínas depende, en parte, de sus cargas eléctricas, habrá un pH en el cual la

conformación será la más adecuada para la actividad catalítica.

Este es el llamado pH óptimo.

La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de

pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente
su actividad. Así, la pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2, la ureasa lo tiene a
pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10, Como ligeros cambios del pH pueden provocar
la desnaturalización de la proteína, los seres vivos han desarrollado sistemas más o
menos complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores
fisiológicos.

5)……
Durante los procesos metabólicos, las células de nuestro organismo producen
desechos, entre ellos el peróxido de hidrógeno. Dado su carácter oxidante y, para
evitar que las células sean dañadas, es necesario que se deshagan rápidamente de él.
Esto lo logran gracias a una enzima llamada catalasa que cataliza su
descomposición en oxígeno y agua. Cuando nos lastimamos y echamos agua
oxigenada en la herida, la catalasa no identifica el origen del peróxido y,
obviamente, se pone en acción. ¡Así aparecen las burbujas y la espuma blanca!
Simplemente es el oxígeno gaseoso escapando.
Muchas de las bacterias que nos enferman son anaerobias (no pueden vivir en
presencia de oxígeno) y mueren en la espuma blanca pero lo más relevante es que el
peróxido de hidrógeno es capaz de oxidar los componentes celulares de las bacterias
y, así, destruirlas. El problema es que es incapaz de hacerlo selectivamente y, por lo
tanto, en el proceso también destruye células de nuestro cuerpo.
Webgrafía:

 http://avalon.utadeo.edu.co/servicios/ebooks/biologia_conceptos/files/assets/basic-
html/page97.html

 https://chequeado.com/mitos-y-enganos/las-heridas-y-el-agua-oxigenada-si-veo-
burbujas-estoy-curado/
 http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz22.htm#ph
 http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz22.htm#t
 https://es.khanacademy.org/science/biology/energy-and-enzymes/enzyme-
regulation/a/enzyme-regulation
 http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1665-27382016000100057
 http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/enzimas/index.html
 http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz22.htm#ph