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1998
Shree P. Singh2
RESUMEN ABSTRACT
Uso de marcadores y selección de gametos para el Use of molecular markers and gamete selection for
mejoramiento simultáneo de caracteres múltiples de frijol simultaneous improvement of multiple characters in the
(Phaseolus vulgaris L.) para Mesoamérica y el Caribe. El common bean (Phaseolus vulgaris L.) for middle America
objetivo fue describir requerimientos básicos y métodos alter- and the Caribbean. The objective is to describe the basic
nativos de selección para el mejoramiento simultáneo en fri- requirements and alternative selection methods for
jol común, en el tiempo más corto posible y considerando el simultaneous improvement of maximum number of
máximo número de caracteres agronómicos. Esta estrategia agronomic characters in the shortest time possible. This
incluye: (1) obtener claridad sobre la importancia y proble- strategy includes: (1) deterrnination of the importance and
mática del cultivo de frijol para la zona, (2) fijar objetivos y priorities of bean production problems in the region, (2)
prioridades del mejoramiento genético, (3) identificar y usar definition of objectives and priorities of breeding, (3)
únicamente padres que con absoluta confianza pueden consi- identification and use of reliable parental sources considered
derarse donantes de genes necesarios, (4) utilizar cruzamien- to be donors of necessary genes, (4) development of multiple-
tos múltiples con un número adecuado de polinizaciones pa- parent crosses with large number of pollinations to produce
ra producir suficiente semilla de cada cruza, (5) realizar sufficient seed of each cross, (5) evaluation and selection for
evaluación y selección para marcadores actualmente disponi- currently available markers (e.g., for zabrotes, bean common
bles (e.g., para gorgojo, mosaico común, mosaico dorado, an- mosaic, bean golden mosaic, rust, anthracnose, apion,
tracnosis, picudo, bacteriosis común y roya, entre otros) des- common bacterial blight, etc.) from hybridization, (6)
de la etapa de hibridación, (6) métodos alternativos de alternative selection methods such as gamete selection and
selección; como selección de gametos y descendiente de se- single seed descendants (GS-SSD), gamete and pedigree
milla única (SG-DSU), selección de gametos y pedigrí usan- selection using markers (GS-PUM), gamete selection and
do marcadores (SG-PUM), selección de gametos y evalua- agronomic evaluation and selection of families in early
ción y selección agronómica de familias en generaciones generations (GS-AEF), or a combination and integration of
tempranas (SG-EAF), o una combinación e integración de los the GS-PUM and GS-AEF methods; and (7) seeking genuine
métodos SG-PUM y SG-EAF; y (7) conseguir una estrecha y and direct collaboration and integration in all activities of
genuina colaboración e integración de actividades de mejora- researchers from different disciplines, institutions, countries
miento entre diferentes investigadores a nivel de institucio- and the entire region at key sites foro reliable evaluation of
nes, países y la región entera, en localidades claves, para bean nurseries in order to carry out simultaneous selection for
efectuar evaluaciones confiables de viveros de frijol a efectos a maximum number of agronomic traits.
de realizar selección simultánea para el máximo número de
caracteres agronómicos.
Teniendo en cuenta la urgencia de obtener lo más Mejoramiento per se y desarrollo de líneas avanza-
pronto posible cultivares con caracteres múltiples de- das
seables, la escasez de los recursos necesarios y la redu-
cida capacidad de realizar mejoramiento genético por Para tener claridad y asegurar el éxito del mejora-
separado para cada país, el objetivo es discutir los re- miento genético y desarrollo de líneas avanzadas por
querimientos básicos y proponer métodos alternativos uso de marcadores y selección por gametos se debe
de mejoramiento simultáneo de caracteres múltiples en considerar lo siguiente:
el tiempo más corto posible.
1. Objetivos y prioridades del mejoramiento.
Requerimientos básicos para mejoramiento de frijol 2. Búsqueda e identificación de padres donantes de
para Mesoamérica y el Caribe genes necesarios - VIPADOGEN.
3. Selección de padres y planificación de cruzamientos.
Debido a problemas en recuperar caracteres agro- 4. Marcadores disponibles y selección por gametos
nómicos esenciales (calidad de semilla, madurez, rendi- durante la hibridación.
miento), la necesidad de incorporar resistencias perti- 5. Derivación de familias F2 de plantas F1 selecciona-
nentes para cada situación, los diferentes estados de das.
mejoramiento en el que se encuentran distintos tipos de 6. Métodos alternativos de manejo o de evaluación y
frijol, las diferencias entre países involucrados y las zo- selección de familias seleccionadas y derivadas de
nas donde se cultivan frijoles, es necesario perseguir un F1 para desarrollar líneas avanzadas.
mejoramiento separado para cada tipo de frijoles im-
portantes. Además, por ser el proceso de mejoramiento Objetivos y prioridades del mejoramiento
costoso y de largo plazo, deben participar únicamente
países con programas de mejoramiento establecidos e Inicialmente se enfatizó el mejoramiento para re-
investigadores honestos, serios y dedicados. La com- sistencia a MC y MD en los frijoles de semilla peque-
SINGH: MEJORAMIENTO SIMULTÁNEO DE CARACTERES MÚLTIPLES EN FRIJOL 3
ña, seguido por resistencia a BC, MH y picudo a través se distribuyeron desde CIAT dos viveros de este tipo a
de proyectos separados para cada uno. Con base en los algunos países de Mesoamérica y el Caribe. Para facto-
logros ya alcanzados, existe una necesidad de desarro- res como antracnosis, MA y roya, además de las evalua-
llar cultivares con resistencias múltiples en el futuro. ciones realizadas en campo se deben verificar las resis-
Por ejemplo, en el futuro inmediato para frijoles de se- tencias en invernaderos y laboratorios.
milla pequeña rojo y negro se deben combinar resisten- Desdichadamente para Mesoamérica y el Caribe toda-
cias a MC, MD, BC, picudo, MA y gorgojo. Para frijo- vía no se ha generado la información necesaria para es-
les de semilla grande la combinación de resistencias a coger padres para cruzamientos con cierto grado de
MC, MD, roya, BC y gorgojo debe ser prioritaria para confianza para la mayoría de los factores limitantes. En
este ciclo de mejoramiento. el Cuadro 2 se incluye algunas fuentes de genes nece-
sarios.
Búsqueda e identificación de padres donantes de ge-
nes necesarios - VIPADOGEN
Selección de padres y planificación de cruzamientos
La identificación de padres con alta resistencia,
probada a través de evaluaciones repetidas en diferen- Una vez que se tiene la información necesaria sobre
tes localidades y años contrastantes para problemas rendimiento, adaptación, días a madurez, reacción a es-
principales como MD, MA, picudo, BC, antracnosis y trés hídrico y baja fertilidad del suelo, además de las
roya, es sumamente esencial para asegurar el éxito en el reacciones a enfermedades y plagas de los cultivares a
mejoramiento genético. Estos padres pueden ser identi- mejorar, líneas elites y otros padres donantes, se deben
ficados de viveros específicos (e.g., de roya, picudo, seleccionar y agrupar padres en las combinaciones que
antracnosis) y/o de un vivero especial agrupando algu- se van a cruzar. En otras palabras, se debe planificar las
nos padres para cada factor escogido de la información cruzas finales y las cruzas anteriores necesarias para la
previamente disponible. Por ejemplo entre 1993 y 1996 formación de estas cruzas finales. Para realizar este tra-
4 AGRONOMÍA MESOAMERICANA
bajo se debe tener en cuenta la distancia genética entre 1994; Haley et al., 1993 y 1994; Johnson et al., 1995;
los padres involucrados en cada cruza, sus relaciones y Jung et al., 1996; Kelly y Miklas, 1997; Miklas et al.,
origen evolucionario como acervo y razas de frijol, tipo 1993 y 1996; Nodari et al., 1993; Urrea et al., 1996) los
de semilla, hábito de crecimiento, madurez, etc., además marcadores para MC, MD, picudo, antracnosis, roya y
de los genes útiles de resistencia que van a aportar. BC entre otros (Cuadro 3). Para todos los caracteres do-
Ejemplos para frijoles negros y rojos para Mesoamérica minantes como hábito de crecimiento, resistencia a an-
y rojo moteado para el Caribe son los siguientes: tracnosis, roya, MC, presencia de arcelina en semilla y
marcadores moleculares dominantes y codominantes,
DOR 390 x [(RAZ 44 x J 117) x (A 429 x G 18484)] se debe empezar la selección durante la hibridación
Rojo de Seda x [(IVT 7214 x XAN 309) x (DOR 482 x De (Singh, 1994). Por ejemplo, las semillas F1 de la cruza
Celaya)] doble [(RAZ 44 x J 117) x (A 429 x G 18484)] utiliza-
PC 50 x [(WILK 2 x PVA 8OGA) x (DOR 482 x PVA 773)] da para cruzar con DOR 390 pueden ser seleccionadas
para arcelina. Por ser un carácter dominante, únicamen-
Para asegurar un muestreo adecuado de los genes te el 50% de las semillas poseerán arcelina y ellas de-
necesarios o alelo favorables aportados por cada padre ben ser evaluadas posteriormente para los marcadores
involucrado en cruzamientos se debe hacer poliniza- disponibles para MD, BC y picudo. Así entonces única-
ción planta - a - planta en pares entre las hembras y ma- mente 1/16 de todas las semillas F1 de cruza doble va a
chos. Además, se debe producir suficiente semilla hí- portar los genes necesarios para resistencias a cuatro
brida F1 de cada cruzamiento. En nuestro programa factores. Aunque es una labor muy dirigida y costosa,
generalmente producimos unas 50 semillas F1 por cada inicialmente esto asegura incorporación de cuatro ca-
cruza simple y mas de 200 semillas por las cruzas tri- racteres a la vez en DOR 390 y además reduciría el ta-
ple, doble y múltiples. El total de número de cruza- maño de población en F2 a un 1/256 de lo que estaría
mientos finales planificados debe ser proporcional a las obligado a llevar si no se hubiera hecho evaluación y
necesidades y recursos disponibles para evaluaciones y selección de F1 de la cruza doble y de la final, antes y
selecciones posteriores. después de haber cruzado con DOR 390.
Marcadores disponibles y selección por gametos du- Derivación de familias F2 de plantas F1 selecciona-
rante la hibridación das
En el caso del cultivo de frijol, los marcadores do- Las plantas F1 de cruzamientos finales ya seleccio-
minantes para caracteres agronómicos son de diversa nadas por marcadores dominantes y codominantes de-
naturaleza: morfológicos, como hábito de crecimiento; ben ser cosechadas separadamente. Así el total de fa-
reacción a enfermedades, como antracnosis, roya y milias F2 proveniente de cada cruzamiento debe ser
MC; tipo de proteína en semilla, como arcelina para re- igual a las plantas F1 seleccionada. Estas familias deri-
sistencia a gorgojo; y moleculares de base DNA, como vadas de F1 posteriormente pueden ser sometidas a eva-
RFLP, RAPD, SCAR y ASAP. Del último grupo ya es- luación y selección usando diferentes métodos de me-
tán disponibles (Adam-Blandon et al., 1994; Gu et al., joramiento para desarrollar líneas avanzadas.
SINGH: MEJORAMIENTO SIMULTÁNEO DE CARACTERES MÚLTIPLES EN FRIJOL 5
Métodos alternativos de mejoramiento para desa- mercial. Se siembra de 10-15 semillas de plantas selec-
rrollar líneas avanzadas cionadas en F4 (F1.2.3.4.5). Se cosecha una planta de ca-
da surco o maseta con tipo de semilla comercial. Se
Se describen los siguientes tres métodos alternati- siembran todas las semillas de las plantas seleccionadas
vos para desarrollar líneas avanzadas de familias (F1.2) (F1.2.3.4.5.6). Se verifica para uniformidad de color de
derivadas de plantas F1 seleccionadas. Aún no se sabe flor, hábito de crecimiento, madurez y tipo de semilla
cuál de los tres métodos es el más eficiente, económico comercial. Se cosechan masalmente todas las plantas
y apto para cada situación. Además, la escogencia de- dentro de cada uno de los surcos uniformes
pendería, entre otras cosas, del número de cruzamientos (F1.2.3.4.5.6.7). Se evalúan las líneas (F7) para marcado-
y familias dentro de cada cruzamiento que se tienen que res, caracteres agronómicos y aumentar semillas para
evaluar y seleccionar, de la sincronización entre evalua- evaluaciones posteriores en viveros de adaptación, en-
ción para marcadores y caracteres cuantitativos para los sayos de rendimiento, etc., para identificación de nue-
cuales no se puede utilizar marcadores al momento, y vos cultivares.
de la disponibilidad de recursos.
Pedrigrí usando marcadores (SG-PUM)
Descendiente de semilla única (SG-DSU)
En el método de Pedigrí usando marcadores (SG-
Se utilizó el método de mejoramiento de Brim PUM) (Cuadro 5) las progenies de todas las familias
(1966); donde se deben sembrar todas las semillas ob- F1.2 provenientes de plantas F1 seleccionadas por mar-
tenidas de cada una de las familias F2 derivadas de cadores de cruzamientos finales, serán otra vez evalua-
plantas F1 (F1.2) seleccionadas por marcadores de cru- das por los marcadores. Unicamente las progenies se-
zamientos finales, en surcos separados, en un ambiente leccionadas por marcadores serán avanzadas a la
sin estrés (Cuadro 4). Se numera y cosecha cada planta siguiente generación hasta llegar a homocigocidad para
individualmente dentro de cada familia F1.2 Luego se todos los marcadores. Una vez logrado esto, se debe se-
siembra de 10-15 semillas de cada planta en F3 (F1.2.3) leccionar el tipo de semilla comercial dentro de fami-
en un surco de un metro de largo en campo de cuatro a lias. La semilla seleccionada debe sembrarse espaciada-
cinco semillas en una maseta en invernadero. Cosechar mente. Las plantas así seleccionadas deben cosecharse
una planta de cada surco o maseta y volver a sembrar individualmente para prueba de progenies. Las líneas
en un surco de un metro de largo en campo o en una uniformes por color de flor, hábito de crecimiento, ma-
maseta en F4 (F1.2.3.4). Se cosecha una planta de cada durez y tipo de semilla, deben cosecharse masalmente.
surco ó maseta. Se selecciona por tipo de semilla co- Cada línea avanzada así desarrollada, será sometida a
6 AGRONOMÍA MESOAMERICANA
F2 • Sembrar espaciadamente toda la semilla de cada familia F1.2 en parcela separada en ambiente favorable
• Numerar y cosechar todas las plantas de cada F1.2 individualmente
F2 • Sembrar espaciadamente toda la semilla de cada familia F1.2 en parcela separada en ambiente favorable
• Numerar todas las plantas. Evaluar, seleccionar y cosechar individualmente plantas poseedoras de marcadores
F3 • Sembrar espaciadamente todas las semillas de cada planta (F1.2.3) en parcela separada
• Numerar todas las plantas. Evaluar, seleccionar y cosechar individualmente plantas poseedoras de marcadores
F6 • Sembrar toda la semilla de cada planta, cosechar masalmente las parcelas uniformes para los marcadores,
color de flor, hábito de crecimiento, madurez y tipo de semilla comercial -línea avanzada
evaluación en viveros de adaptación, complementarios, para los cuales fue evaluada. Someter las líneas así de-
ensayos de rendimiento, etc. para evaluación por sepa- sarrolladas a evaluaciones en viveros de adaptación, en-
rado para cada uno de los factores bióticos y abióticos sayos de rendimiento, etc., para identificación de nue-
a efectos de identificar nuevos cultivares. vos cultivares.
F2 • Sembrar toda la semilla de cada familia (F1.2) en parcela separada bajo presión de estrés biótico (e.g., antracnosis,
mosaico dorado, roya)
• Cosechar masalmente plantas seleccionadas dentro de cada familia seleccionada
F3 • Ensayo replicado de rendimiento (F1.3) y/o viveros complementarios para estreses bióticos y abióticos
• Cosechar masalmente plantas seleccionadas dentro de cada familia seleccionada
F4 • Ensayo replicado de rendimiento (F1.4) y/o viveros complementarios para estreses bióticos y abióticos
• Cosechar masalmente plantas seleccionadas dentro de cada familia seleccionada
• Seleccionar por tipo de semilla comercial
F6 • Sembrar toda la semilla de cada planta (F1.5.6) en parcela separada bajo presión de estrés biótico
• Cosechar masalmente parcelas uniformes para reacción a estrés biótico, color de flor, hábito de crecimiento,
madurez y tipo de semilla comercial - línea avanzada
Cuadro 7. Evaluación de líneas avanzadas, pruebas con productores e identificación de nuevos cultivares.
sin estrés hídrico, con y sin estrés para baja fertilidad BRIM, C.A. 1966. A modified pedigree method of selection
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son necesarios para poder identificar cultivares nuevos GU, W.K.; WEEDEN, N.E; ZHU, J.Q.; WALLACE, D.H.
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Quiero expresar mis más sinceros agradecimientos HALEY, S.D.; MIKLAS, P.N.; STAVELY, JR; BYRUM, J.;
a Isabel Cristina Giraldo por su ayuda tipográfica y a KELLY, J.D. 1993. Identification of RAPD markers
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