MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO

Un medio de enriquecimiento se utiliza para aumentar el crecimiento de ciertas especies

bacterianas mientras se inhibe el desarrollo de microorganismos no deseados (Winn,
2008).
Los medios de enriquecimiento funcionan sobre la base del principio de que E. coli y
otros microorganismos gramnegativos, los cuales constituyen la flora fecal normal, se
mantienen en una fase de retraso prolongada por las sustancias físicas inhibidoras en el
caldo (Winn, 2008).
Bacillus cereus:
Caldo triptona soja polimixina (TSPB):
COMPOSICIÓN:
Digesto enzimático de caseína 17.0 g
Digesto enzimático de soja 3.0 g
Cloruro de sodio (NaCl) 5.0 g
Glucosa 2.5 g
Fosfato ácido disódico (Na2HPO4) 1.0 g
Agua destilada 1000 ml
pH: 7.3 ± 0.2
Fuente: (Rosario, 2002).
Brucella spp:
La Brucelosis es una zoonosis que puede ser transmitida por contacto directo con
animales infectados, o a través de carnes o productos lácteos.
En el medio de cultivo, la tripteina, la peptona de carne y el extracto de levadura,
constituyen la fuente de nitrógeno, carbono, aminoácidos, vitaminas, minerales y
cofactores necesarios para el crecimiento de microorganismos. La glucosa es el hidrato
de carbono fermentable, y el bisulfito de sodio favorece el desarrollo microbiano. El
cloruro de sodio mantiene el balance osmótico del medio y el agar es el agente
solidificante. Puede ser utilizado como medio base para ser suplementado con sangre o
con antimicrobianos, lográndose wei8 un medo más enriquecido o selectivo de acuerdo
al aditivo
COMPOSICIÓN:
Tripteina 10.0 g
Reptona de carne 10.0 g
Glucosa 1.0 g
Extracto de levadura 2.0 g
Cloruro de sodio 5.0 g
Agar 15.0 g
Bisulfito de sodio 0.1 g
pH final: 7.0
Fuente:(Fading 1985).
Campylobacter:
La investigación de campylobacter en alimentos, precisa de medios de enriquecimiento
para conseguir su rehabilitación y asegurar su detección. Para ello se utiliza un caldo
base al que se incorporan antibióticos y suplementos que inhiben el crecimiento de los
microorganismos contaminantes que puedan acompañar al alimento. Los caldos de
enriquecimiento se deben incubar siempre en una atmósfera microaeróbica (5% de
oxígeno, 10% de CO2 y 85% de nitrógeno) a 42oC, durante 48 horas (Forbes, 2009).
Caldo tioglicolato para Campylobacter:
COMPOSICIÓN:
Digerido pancreático de caseína 17.0 g
Digerido papaico de harina de soja 3.0 g
Dextrosa 6.0 g
Cloruro sódico 2.5 g
Tioglicolato sódico 0.5 g
Agar 1.6 g
L-cistina 0.25 g
Sulfito sódico 0.1 g
Anfotericina B 2.0 mg
Cefalotina 15.0 mg
Trimetoprima 5.0 mg
Vancomicina 10.0 mg
Polimixina B 2500.0
unidades
Fuente: (Murray, 2003).
Clostridium perfringens:
Medio fluido de tioglicolato, enriquecido:
¿Porque se usa el medio fluido de tioglicolato en la recuperación de Clostridium
perfringens?
La caseína, las peptonas de soja y la L-cistina proporcionan aminoácidos y otras
sustancias nitrogenadas para favorecer el crecimiento bacteriano. El extracto de
levadura aporta vitaminas del complejo B. El cloruro sódico aporta iones esenciales. La
dextrosa es una fuente de energía (Vera, 1944).
El medio de tioglicolato fluido enriquecido se suplementa con hemina y vitamina K1
para favorecer el crecimiento de determinadas bacterias anaerobias. El carbonato de
calcio facilita el mantenimiento de los cultivos de referencia, al neutralizar los ácidos
producidos durante el crecimiento (Vera, 1944).
La acción reductora del tioglicolato sódico y el sulfito sódico liga el oxígeno molecular,
que se extrae del medio y mantiene un Eh bajo. Se añade una pequeña cantidad de agar
para retardar la absorción del oxígeno, al reducir las corrientes de convección en el
medio. La resazurina es un indicador utilizado para detectar los cambios en Eh. Un
aumento en la oxidación eleva el Eh, lo que cambia la resazurina a color rosa. El
indicador permanece incoloro si el Eh permanece bajo (Vera, 1944).
COMPOSICIÓN:
Digerido pancreático de caseína 15.0 g
L-cistina 0.5 g
Dextrosa 5.0 g
Extracto de levadura 5.0 g
Cloruro sódico 2.5 g
Tioglicolato sódico 0.5 g
Resazurina 0.001 g
Agar 0.75 g
Hemina 0.1 g
Vitamina K1 2.0 mg
Fuente: (Brewer, 1940).
Escherichia coli:
El Medio EC permite la detección de bacterias del grupo de coliformes y de E. coli. Este
medio consiste de un caldo tamponado de lactosa con la adición de un 0,15% de una
Mezcla de Sales Biliares. El crecimiento de las bacterias formadoras de esporas y
estreptococos fecales es inhibido por las sales biliares, mientras que el crecimiento de E.
coli es intensificado por su presencia. Este medio puede ser utilizado a 37°C para la
detección de organismos coliformes o a una temperatura de 44,5°C o 45,5°C para el
aislamiento de E. coli. La triptosa es una mezcla de digerido enzimático de proteína,
suministra nitrógeno, vitaminas y aminoácidos al Medio EC. La lactosa es la fuente de
carbono. La Mezcla de Sales Biliares es el agente selectivo contra las bacterias Gram-
positivas, particularmente bacilos y estreptococos fecales. El Fosfato Dipotásico y el
Fosfato Monopotásico son los agentes de tamponado. El Cloruro de Sodio mantiene el
balance osmótico del medio.
COMPOSICIÓN:
Triptosa 20.0 g
Lactosa 5.0 g
Mezcla de sales biliares 1.5 g
Fosfato Di potásico 4.0 g
Fosfato Mono potásico 1.5 g
Cloruro de sodio 5.0 g
pH final: 6.9
Fuente: (Prats, 2005)
Listeria monocytogenes:
Caldo de enriquecimiento para Listeria:
¿Porque se usa el caldo de enriquecimiento para Listeria en la recuperación de
Listeria monocytogenes?
La peptona de caseína, peptona de harina de soja y el extracto de levadura suministran
nitrógeno, vitaminas y minerales en el caldo de enriquecimiento para Listeria. La
Dextrosa es una fuente de carbohidratos. El cloruro de sodio mantiene el balance
osmótico del medio de cultivo. El fosfato dipotásico es el agente de tamponado. El
ácido nalidíxico inhibe el crecimiento de organismos Gram-negativos. La acriflavina
inhibe las bacterias Gram-positivas. La ciclohexamida es usada para inhibir el
crecimiento de hongos saprofitos (Lovette, 1987).
COMPOSICIÓN:
Peptona de caseína 17.0 g
Peptona de harina de soja 3.0 g
Dextrosa 2.5 g
Cloruro de sodio 5.0 g
Fosfato dipotásico 2.5 g
Extracto de levadura 6.0 g
Acriflavina 0.010 g
Ciclohexamida 0.05 g
Ácido nalidíxico 0.04 g
pH final: 7.3
Fuente: (Merck, 2000).
Pseudomonas aeruginosa:
Es un organismo en el medio ambiente y un importante patógeno nosocomial. BD
Pseudosel Agar se basa en la fórmula de agar Tech, diseñado por King et al para la
producción mayor de piocianina de Pseudomonas aeruginosa, pero se ha modificado
con la adición de cetrimida para la inhibición selectiva de organismos diferentes de P.
aeruginosa. El medio se utiliza para el aislamiento de P. aeruginosa en los campos tanto
clínicos como farmacéuticos, y se menciona en la farmacopea de Estados Unidos y la
farmacopea europea para uso en pruebas de límite microbiano.
En BD Pseudosel Agar, la peptona sirve como fuente de nitrógeno, y el glicerol se
utiliza como fuente de carbono y energía. La producción de piocianina se estimula
mediante el cloruro de magnesio y el sulfato potásico en el medio. La cetrimida
(bromuro de cetil trimetil amonio) es un compuesto de amonio cuaternario que inhibe
una amplia variedad de otros organismos, incluidos otras determinadas especies de
Pseudomonas y organismos relacionados.
COMPOSICIÓN:

BD Pseudosel Agar:

Digerido pancreático de 20,0 g

gelatina
Cloruro de magnesio 1,4
Sulfato de potasio 10,0
Glicerol 10,0 ml
Cetrimida 0,3 g
Agar 13,6
pH Final: 7.0
Fuente: (Rosario, 2002).
Salmonella spp. y Shigella spp.
Los dos medios de enriquecimiento más utilizados son caldo selenito y caldo para
gramnegativos. El caldo selenito es más inhibidor del crecimiento de E. coli y otros
bacilos gramnegativos entéricos que el caldo para gramnegativos; por consiguiente, se
adapta mejor a la recuperación de especies de Salmonella o Shigella de muestras muy
contaminadas, como heces o productos residuales (Winn, 2008).
¿Porque se usa el caldo selenito para la recuperación de Salmonella y Shigella?
El selenito presente en el medio inhibe el crecimiento de los coliformes y los
enterococos en las 12 primeras horas de incubación; por el contrario, las salmonelas y
los proteus son poco inhibidos. Se incuba a 35-37 oC durante 8 a 12 horas. Puede
resembrarse en Hektoen, XLD o SS agar (Prats, 2005).
En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado
desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el selenito de
sodio inhibe la flora Gram positiva (Merck, 2000).
COMPOSICIÓN:
Caldo selenita:
Peptona 5.0 g
Lactosa 4.0 g
Selenito de sodio 4.0 g
Fosfato de sodio 10.0 g
Agua destilada 1.0 L
pH final: 7.0
Fuente: (Winn, 2008).
Caldo para gramnegativos:
Peptona de polipeptona 20.0 g
Glucosa 1.0 g
D-manitol 2.0 g
Citrato de sodio 5.0 g
Desoxicolato de sodio 0.5 g
Fosfato dipotásico 4.0 g
Fosfato monopotásico 1.5 g
Cloruro de sodio 5.0 g
Agua destilada 1.0 L
pH final: 7.0
Fuente: (Winn, 2008).
Staphylococcus aureus:
¿Por qué se usa el caldo de enriquecimiento Giolitti Cantoni?
La triptona, el extracto de carne y el extracto de levadura, constituyen la base nutritiva
para el desarrollo de S. aureus. El piruvato de sodio y el manitol son estimulantes del
desarrollo de estafilococos y ayudan a la detección de estos microorganismos presentes
en la muestra, aun en pequeñas cantidades (Merck, 2000).
El cloruro de litio inhibe el crecimiento de bacilos Gram negativos fermentadores de
lactosa, mientras que otras bacterias Gram positivas son inhibidas por el telurito de
potasio y la glicina (Merck, 2000).
El agregado de telurito de potasio favorece la selectividad del medio de cultivo y
además le otorga la propiedad de ser diferencial ya que los microorganismos que
reducen el telurito a teluro, forman en el medio un compuesto de color negro (Merck,
2000).
Caldo de enriquecimiento Giolitti Cantoni:
COMPOSICIÓN:
Triptona 10.0 g
Extracto de carne 5.0 g
Extracto de levadura 5.0 g
Cloruro de litio 5.0 g
Manitol 20.0 g
Cloruro de sodio 5.0 g
Glicina 1.20 g
Piruvato de sodio 3.0 g
Agua destilada 1000 ml
pH final: 6.9
Fuente: (Rosario, 2002).
Yersinia spp:
Un caldo usual, incubado a 4oC de 15 a 21 días permite el enriquecimiento de yersinia.
Puede resembrarse en el medio de CIN. Esta técnica puede utilizarse para la
recuperación de listeria, resembrando en agar sangre con ácido nalidíxico y colistina
(Prats, 2005).
Caldo para yersinia:
COMPOSICIÓN:
Peptona de caseína 10.0 g
Peptona de carne 10.0 g
Extracto de levadura 2.0 g
D-manitol 20.0 g
Piruvato sódico 2.0 g
Cloruro sódico 1.0 g
Sulfato de magnesio 0.01 g
Mezcla de sales biliares 1.0 g
Rojo neutro 0.03 g
Violeta cristal 0.001 g
Agar 12.5 g
pH final: 7.4
Fuente: (SCHIEMANN, 1979).

BIBLIOGRAFÍA:
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