V.R.B.

L
Gélose lactosée biliée au cristal violet et au rouge neutre
Usage In Vitro
Conserver entre 2 et 25°C

PRINCIPE des Coliformes, et 44°C pour celui des Coliformes fécaux,

La gélose lactosée biliée au cristal violet et au rouge neutre pendant 24 heures.
(V.R.B.L.) est utilisée pour la recherche et le
dénombrement des bactéries Coliformes (Escherichia coli, RESULTATS
Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter) dans l'eau, les Dénombrer les colonies roses à violacées ayant un diamètre
produits laitiers, et autres denrées alimentaires. Elle est d'au moins 0,5 mm, cernées d'un halo de sels biliaires
également utilisée pour les opérations de purification et précipités.
d'isolement des colonies présumées de Salmonella dans les Le chiffre obtenu sera ramené à la prise d'essai du produit
produits carnés et assimilés. Sa formulation est conforme à testé.
la norme NF ISO 4832.
La présence de cristal violet et de sels biliaires inhibe la
LIMITES ET PRECAUTIONS
Un cycle classique d’autoclavage 15 minutes à 121°C peut
pousse des bactéries à Gram positif et des autres bactéries à
endommager les propriétés du milieu VRBL, néanmoins,
Gram négatif.
pour conserver le milieu prêt à l'emploi quelques jours, un
La dégradation du lactose en acide, caractéristique des
cycle de 20 minutes à 110°C peut être réalisé.
coliformes, est révélée par le virage au rouge de l'indicateur
de pH, le rouge neutre, ainsi que par un précipité d'acides
biliaires formant un halo autour des colonies. BIBLIOGRAPHIE
1. Davis J.G. 1951. Milk Testing. Dairy Industries Ltd., London.
FORMULE 2. F.I.L.-I.D.F. 39. 1966. Méthode de routine normalisée pour le
En grammes par litre d'eau purifiée dénombrement des bactéries coliformes dans le lait cru.
3. F.I.L.-I.D.F. 62. 1971. Crèmes glacées et glaces au lait.
Extrait de levure 3,00 Dénombrement des coliformes.
Peptone pancréatique de caséine 7,00 4. NF ISO 4832. Juillet 2006. Méthode horizontale pour le
Chlorure de sodium 5,00 dénombrement des coliformes. Méthode par comptage des colonies.
5. AFNOR NF V08-060. Mars 1996. Dénombrement des coliformes
Sels biliaires 1,50 thermotolérants par comptage des colonies à 44°C – Méthode de
Lactose 10,00 routine.
Rouge neutre 0,03 6. AFNOR NF V08-050. Février 1999. Microbiologie des aliments.
Dénombrement des coliformes par comptage des colonies obtenues à
Cristal violet 0,002 30°C – Méthode de routine.
Agar 15,00
PRESENTATION
pH final : 7,4 + 0,2 à 25°C Milieu déshydraté
Conserver entre 1 et 30°C
PREPARATION AEB153252 : Flacon de 500 g
Verser 41,5 grammes de poudre dans un litre d'eau purifiée. AEB153253 : Flacon de 5 kg
Porter à ébullition lentement, en agitant jusqu'à complète
dissolution. Milieu prêt à l'emploi
NE PAS AUTOCLAVER. Conserver entre 2 et 25°C à l'obscurité
AEB623256 : Coffret de 6 flacons de 100 ml
MODE OPERATOIRE AEB623257 : Coffret de 6 flacons de 200 ml
Liquéfier le milieu, puis maintenir le milieu en surfusion AEB123259 : Coffret de 100 tubes de 15 ml
dans un bain thermostaté à 44-47 °C.
Placer 1 ml du produit à tester et de ses dilutions décimales Milieu pré-coulé
dans des boîtes de Pétri stériles. Conserver entre 2 et 25°C à l'obscurité
Couler environ 12 ml de milieu refondu stérile. AEB123260C : Coffret de 10 boîtes contact de 65 mm
Bien homogénéiser et laisser solidifier sur une surface AEB523259 : Coffret de 120 boîtes contact de 90 mm
froide horizontale. AEB523260 : Coffret de 20 boîtes de 90 mm
Couler une seconde couche de milieu (son épaisseur sera de
2 mm environ). Fabriqué par
Laisser solidifier à nouveau, puis retourner les boîtes et AES CHEMUNEX - Combourg - France
incuber dans cette position à 30°C pour le dénombrement
153252: 28/05/08 -H
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