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PRÁCTICA 3

BACTERIAS ENDOFÍTICAS FIJADORAS DE NITRÓGENO

I.-Introducción:

Los microorganismos endófitos desarrollan parte de su ciclo de vida en el interior de la

planta sin causar síntomas de daño en ella, colonizando los alrededores de las células de
la epidermis y la exodermis, y las células del córtex. Se ha postulado que las bacterias
endófitas pueden tener un impacto importante en la productividad de los cultivos de
interés agronómico porque estimulan el crecimiento de la planta por mecanismos como
la producción de, el antagonismo de patógenos o la fijación de nitrógeno atmosférico

Las bacterias fijadoras de nitrógeno (diazótrofas) han sido un grupo bacteriano muy
estudiado dentro de las disciplinas microbiológicas asociadas a la agricultura y ecología.
Esto es debido a su capacidad de convertir el nitrógeno de la atmósfera en una forma
asimilable por la planta como es el amonio. El amonio se incorpora al tejido vegetal
uniéndose a esqueletos carbonados para dar aminoácidos. La asociación planta-bacteria
aumenta la velocidad de crecimiento y el rendimiento de la planta en peso fresco,
contenido de materia seca y peso de grano.

Y aunque la asociación de las leguminosas con bacterias diazótrofas es la mejor

conocida, se ha encontrado que diversas bacterias fijadoras de nitrógeno están asociadas
a raíces de muchas gramíneas.

II.-Objetivo

 Diferenciar fenotípicamente bacterias endófitas fijadoras de nitrógeno de un

cultivo agrícola
III.- Procedimiento y Metodología

LAVAR LAS RAICES Y

SELECCIONAR

MEDIR CADA RAIZ DE

5 cm
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PESAR 5 g DE LA
MUESTRA

COLOCAR LAS RAICES

EN 50 ml DE AGUA
DESTILADA +
DETERGENTE Y
AGITAR DURANTE UN
MINUTO

ENJUAGAR 4 VECES
CON AGUA DESTILADA
ESTERILIZADA 1
MINUTO Y AGITAR

50 ml DE SOLUCION
TAMPON

50 ml DE ALCOHOL 70°
POR 1 MINUTO
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50 ml DE NaCl POR 5
MINUTOS

PASAR A UN FRASCO
ESTERIL

NUEVAMENTE
ALCOHOL 70°POR 1
MINUTO

50 ml DE TAMPON

ENJUAGAR 4 VECES
CON AGUA DESTILADA
CON 50 ml POR 1
MINUTO
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DEL ULTIMO
ENJUAGUE SEMBRAR
UNA ALICUOTA EN
AGAR NUTRITIVO
PARA COMPROBAR SI
ESTA ESTERIL

SECAR EN PAPEL
TOALLA ESTERIL

PASAR A LA BOLSA
HERMETICA

MACERAR LA
MUESTRA
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EXPRIMIR EL JUGO

DESINFECTAR CON
ALCOHOL Y ALGODÓN
LA PARTE EXTERNA
DE LA BOLSA Y
EXTRAER 1ml DEL
JUGO

COLOCAR UNA GOTA

A CADA TUBO Y
SEMBRAR EN
PUNTURA EN LOS
MEDIOS DE CULTIVO
SEMISOLIDOS SIN
NITROGENO

INCUBAR A 30° POR 7

DIAS
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IV.-Resultados

V.-Análisis de los resultados

 El crecimiento en los medios, evidenciados por la aparición de película indican

la presencia de bacterias fijadoras de nitrógeno.
 No se aisló bacteria alguna

VI.-Bibliografía

De la Cruz, E. y Mestanza, A. (2014). Caracterización de bacterias endófitas

diazotróficasaisladas de raíces de Oryza sativa L., arroz, en Lambayeque, 2014
(tesis de pregrado). Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Perú.

Soberón, K. y Suyón, L. (2017). Bacterias endófitas y rizosféricas fijadoras de

nitrógeno aisladas de Asparagus officinalis L. en Virú, región La Libertad y su
potencial como promotoras de crecimiento en plantas (tesis de pregrado).
Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Perú.