Procedimiento:

Se necesita hacer la colección de saliva por lo cual el donante de saliva no debe haber ingerido
alimentos durante un mínimo de dos horas, los pasos a seguir son:

1.- Se hace un enjuague de la cavidad oral con agua.

2.- Manteniendo la boca cerrada se esperará de 5 a 7 minutos.

3.- Se hace la colección de la saliva, pero se debe dejar caer por gravedad, para evitar la
formación de espuma, y se hará en un recipiente de boca ancha.

Luego de tener la muestra de saliva se procederá a continuar con el experimento

1.-Se agregan en 3 tubos (enumerados del 1 al 3), un mililitro de almidón al 1%.

Al tubo N° 1 se le agrega además:

2.- 0.5 mililitros de una solución de buffer fosfato a pH 6.8 y a una concentración 0.1 M.

3.- 1.2 mililitros de Cloruro de sodio (NaCl) a 0.9 g%.

Al tubo N°2 se le agrega además:

2.- 0.5 mililitros de una solución de buffer fosfato a pH 6.8 y a una concentración 0.1 M.

3.- 1.2 mililitros de agua destilada.

Al tubo N°3 se le agrega además:

2.- 1.2 mililitros de Ácido clorhídrico (HCl) 0.5N.

3.- 0.5 mililitros de agua destilada.

4.- A los 3 tubos se los lleva al baño María de 37°C por 5 minutos.

5.-Agregar a los tres tubitos 0.5 mililitros de la saliva que previamente habíamos colectado.

6.-Incubar en baño María de 37°C durante 10 minutos y cada 3 minutos agitar los tubos
removiendo el almidón que tiende a sedimentar.

7.- Retirar del baño María y agitando previamente los tubos de la digestión.

Se preparará en 3 tubos denominados (1L, 2L y 3L) lo siguiente:

1.- De los tres tubos que ya se prepararon (1, 2 y 3) añadir 0.5 mililitros a los tubos 1L, 2L y 3L
respectivamente.

2.- Agregar a cada tubo 0.5 mililitros de lugol.

3.- Mezclar y observar los resultados a temperatura ambiente.

Se preparará en 3 tubos denominados (1B, 2B y 3B) lo siguiente:

1.- De los tres tubos que ya se prepararon (1, 2 y 3) añadir 0.5 mililitros a los tubos 1B, 2B y 3B
respectivamente.

2.- Agregar a cada tubo 0.5 mililitros de reactivo de Benedict.

3.- Colocar en baño de agua hirviente (100°C) por 5 minutos.

4.- Observe los resultados, deje reposar y compare los precipitados.

Objetivos:

- Observar la digestión enzimática del almidón por la amilasa que se encuentra en la saliva.

-Reconocer la acción de la amilasa salival en distintos medio (medio fisiológico con el NaCl 0.9g
%, medio ácido HCl 0.5N y sin ningún medio con el agua destilada).

Recomendaciones:

-Se debe hacer bien la colección de saliva, seguir los requisitos pedidos.

-Cuando se hace la práctica con el reactivo de benedict y te dice colocar en baño de agua
hirviendo (100°C), se debe prender la cocina eléctrica con el recipiente con agua y recién
cuando alcance la temperatura de 100°C o se note que ya está hirviendo recién se debe poner
los tubos.

Conclusiones:

-Se concluyó que la enzima amilasa salival tiene mayor afinidad por su sustrato estando en un
medio fisiológico que estando en el ambiente exterior.