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RTA:
1. ENVOLTURA NUCLEAR: No es una barrera pasiva o estática. Tanto su capa externa como interna
están separadas por un espacio entre 10 y 50 nm. Sirven como una barrera que protege los iones,
los solutos y las macromoléculas que pasan entre el núcleo y el citoplasma. Las dos membranas se
fusionan en sitios que forman poros circulares que contienen proteína s organizadas en complejos.
1.1 MEMBRANA EXTERNA: También conocida como lamina nuclear externa, conecta con el citoplasma,
constituida por proteínas. Tapizada por ribosomas,
1.2 MEMBRANA INTERNA: Separa el núcleoplasma con el espacio nuclear. Tiene contacto con el material
nuclear.
5. CROMOSOMA: son estructuras con apariencia de hilo ubicadas dentro del núcleo de las células .
Cada cromosoma está compuesto de proteínas combinadas con una sola molécula de ácido
desoxirribonucleico (ADN). La estructura única de los cromosomas mantiene al ADN enrollado
apretadamente alrededor de proteínas con apariencia de carretes, de hilo llamadas histonas. Sin
dichos carretes, las moléculas de ADN serían demasiado largas para caber dentro de las células.
COMPLEJO: Estructura: El nucleoporo es una estructura enorme y muy compleja. Tiene ocho filamentos
proteicos (de unos 100 nm) situados en el anillo citoplasmático en dirección al citoplasma que ayudan
a reclutar a las moléculas que serán transportadas. Cuenta también con dos anillos radiale s entre
ambas membranas que anclan el poro a ellas y un anillo nuclear, en el lumen nuclear. Además, también
cuenta con un conjunto de filamentos nucleares que salen desde el anillo nuclear, que acaban en un
anillo distal que junto con los filamentos forma una especie de jaula. Las nucleoporinas se asocian
formando ocho complejos o bloques para formar los anillos
El que una molécula sea transportada o no, no sólo dependen de que tenga las secuencias
correspondientes sino de que puedan ser accesibles para el reconocimiento por las importinas o por
las exportinas. Estas secuencias se pueden ocultar por cambios en la estructura de la proteína o por
modificaciones químicas, de modo que la célula tiene un nivel más de regulación sobre el tr áfico entre
el núcleo y el citoplasma.
Además de proteínas, las moléculas de ARN deben también atravesar los poros nucleares. Los
mecanismos que usan los distintos tipos de ARN para ser transportados difieren entre sí, pero todos
están mediados por un mecanismo de asociación con proteínas. Los ARNm no se exportan desnudos,
sino que una vez transcritos se unen a numerosas proteínas en el nucleoplasma formando un
complejo ribonucleoproteico de tamaño enorme. Antes de su transporte al citoplasma tiene que haber
un control de calidad previo en el que se comprueba que el ARN se ha procesado correctamente. Si
hay defectos el ARNm se degrada. Si es correcto se trasfiere a la cesta del poro y se une al complejo
proteico Nxf1-Nxt1, que permite su transporte a través del poro. El transporte de ribonucleoproteínas
no usa el sistema Ran-GTP, sino otro que necesita la hidrólisis de ATP en vez de GDP. El ATP se gasta
cuando todo el complejo ribonucleoproteico-Nxf1-Nxt1 está en la cara citoplasmática del poro, donde
se elimina Nxf1-Nxt1 y entonces el complejo ribonucleoproteico ya no puede ser transportado de
vuelta al nucleoplasma. Sin embargo, hay una pequeña cantidad de moléculas de ARNm que parece
usar la proteína CRM1, siendo en este caso un transporte dependiente del gradiente creado por las
proteínas Ran.
El exporte de ARNt sigue un mecanismo en el que es reconocido por una exportina específica denominada
exportina-t, que también se une a una Ran-GTP. Los ARN pequeños nucleares, otro tipo de ARN,
emplean la molécula CRM1 y el gradiente Rand-GTP. El mecanismo de exportación de las subunidades
ribosómicas, ensambladas en el nucléolo, supone un desafío para los poros nucleares puesto que son
complejos moleculares enormes, y tienen que translocarlos al citoplasma por un mecanismo del que
hoy en día se desconocen sus detalles. Por último, se han encontrado algunas proteínas que pueden
cruzar los poros uniéndose directamente a las proteínas del complejo del poro.
RTA: a) Cuando solutos de bajo peso molecular se inyectan en el citoplasma de una célula, penetran con
rapidez los poros nucleares por difusión simple. Tales solutos pueden difundirse a través de las
ranuras entre las columnas que conectan los anillos citoplásmicos y nucleares del complejo de poro
nuclear. Por otro lado, se cree que las proteínas y los RNA pasan a través del canal central del
complejo de poro nuclear. El paso de las macromoléculas hacia adentro y hacia afuera del núcleo
requiere la ayuda de sistemas de transporte especial.
Los poros nucleares contienen un pasaje acuoso interno de unos 80 a 90 nm de diámetro, pero el espacio
útil para el trasiego de las moléculas que se transportan es de unos 45 a 50 nm de diámetro cuando
está en reposo, y se puede expandir cuando realizan transporte activo. Normalmente, este canal
permite el paso libre de pequeñas moléculas (menores de 60 kDa) como sales, nucleótidos, pequeñas
moléculas y pequeños polipéptidos. Pero restringe el movimiento de proteínas de mayor tamaño.
Incluso algunas moléculas menores de 20-30 kDa tales como las histonas, los ARNt o algunos ARNm
son transportadas de forma selectiva, es decir, tienen que ser reconocidas y transportadas por las
proteínas del poro. Este transporte selectivo es pasivo facilitado, es decir, no necesita energía. El poro
por sí mismo no determina la direccionalidad del movimiento, sino que el transporte hacia afuera o
hacia adentro del núcleo está determinado por un gradiente de unas moléculas denominadas Ran y
para crear este gradiente sí se necesita energía.
El trasiego a través del poro es elevado, con más de 1000 translocaciones por segundo. Este transporte
está orquestado por las proteínas Ran. Las moléculas Ran son trascendentales tanto para la
importación como para la exportación de moléculas. Son las responsables de crear un gradiente que
dirige el transporte, y crear este gradiente es la única parte del transporte a través de los poros
nucleares que gasta energía. Las moléculas Ran pueden estar en tres estados: Ra n-GTP, Ran-GDP y
Ran. El paso de un estado a otro está mediado por otras enzimas. En el nucleoplasma hay una mayor
concentración de Ran-GTP, mientras que en el citoplasma abunda la Ran-GDP.
b) Hay una familia de proteínas denominada conjuntamente como car ioferinas que pueden ser
importinas o exportinas y que son responsables de seleccionar qué moléculas han de cruzar a través
del poro nuclear. Las proteínas que tienen que ser importadas al nucleoplasma poseen una secuencia
de aminoácidos denominada secuencia de localización nuclear y las que tienen que ser exportadas
una secuencia de exportación nuclear. Estas secuencias de aminoácidos no son idénticas para todas
las proteínas que viajan a través de los poros nucleares, pero serán reconocidas o bien por las
importinas (reconocen secuencias de entrada) o bien por las exportinas (reconocen secuencias de
salida). Hay distintos tipos de importinas y exportinas que tienen más o menos afinidad por las
diferentes secuencias. Las proteínas de los poros nucleares, la s nucleoporinas, generalmente no
interaccionan directamente con las proteínas transportadas, las cargas, sino con las importinas y las
exportinas.
Los complejos importina-carga o exportina-carga utilizan el gradiente Ran-GTP para crear
direccionalidad en el transporte. Así, los complejos importina-carga se forman espontáneamente en
el citoplasma, pero son disgregados (importina + carga) por las Ran-GTP que abunda en el
nucleoplasma. Por otro lado, el complejo exportina-carga necesita a la Ran-GTP para formarse, pero
una vez en el citoplasma, al hidrolizarse la Ran-GTP a ran-GDP, exportina, carga y Ran-GDP quedan
libres en el citosol.
c) exportación:
Las moléculas de ARN deben también atravesar los poros nucleares. Los mecanismos que usan los
distintos tipos de ARN para ser transportados difieren entre sí, pero todos están mediados por un
mecanismo de asociación con proteínas. Los ARNm no se exportan desnudos, sino que una vez
transcritos se unen a numerosas proteínas en el nucleoplasma formando un complejo
ribonucleoproteico de tamaño enorme. Antes de su transporte al citoplasma tiene que haber un
control de calidad previo en el que se comprueba que el ARN se ha procesado correctamente. Si hay
defectos el ARNm se degrada. Si es correcto se trasfiere a la cesta del poro y se une al complejo
proteico Nxf1-Nxt1, que permite su transporte a través del poro. El transporte de ribonucleoproteínas
no usa el sistema Ran-GTP, sino otro que necesita la hidrólisis de ATP en vez de GDP. El ATP se gasta
cuando todo el complejo ribonucleoproteico-Nxf1-Nxt1 está en la cara citoplasmática del poro, donde
se elimina Nxf1-Nxt1 y entonces el complejo ribonucleoproteico ya no puede ser transportado de
vuelta al nucleoplasma. Sin embargo, hay una pequeña cantidad de moléculas de AR Nm que parece
usar la proteína CRM1, siendo en este caso un transporte dependiente del gradiente creado por las
proteínas Ran.
El exporte de ARNt sigue un mecanismo en el que es reconocido por una exportina específica denominada
exportina-t, que también se une a una Ran-GTP. Los ARN pequeños nucleares, otro tipo de ARN,
emplean la molécula CRM1 y el gradiente Rand-GTP. El mecanismo de exportación de las subunidades
ribosómicas, ensambladas en el nucléolo, supone un desafío para los poros n ucleares puesto que son
complejos moleculares enormes, y tienen que translocarlos al citoplasma por un mecanismo del que
hoy en día se desconocen sus detalles.
◼ Por último, se han encontrado algunas proteínas que pueden cruzar los poros uniéndose
directamente a las proteínas del complejo del poro.
C2) Importación:
NLS Importina β (nuclear-localization 1 En el citoplasma la proteína con señal de importación se asocia a
la importina, un signal) Importina α heterodímero de subunidades β y α. La importia α reconoce el NLS
de las proteínas para la importación nuclear. La importina β se liga a α. 2 La subunidad β conduce al
complejo importina α y a la proteína a importar a través del poro nuclear facilitando la translocac ión
hacia el núcleo. Complejo 3 La interacción de la importina β con las FG- importina Ran-GDP nucleoporinas
lleva a cabo el transporte a través del poro en un proceso que no requiere directamente la 2 aplicación de
energía mediante hidrólisis de ATP.
En el nucleoplasma el complejo Ran-GDP de poro FG-nucleoporinas P interactúa con RCC1 un Citosol
nuclear Ran-GAP intercambiador de nucleótidos de guanina (GEF), causando que Ran libere GDP y se una
a GTP que se encuentra en elevadaMembrana nuclear concentración. En el núcleo Ran-GTP Importina 5
Ran en su forma GTP se une al complejo de Unión Ran-GTP importación, especificamente a la importina
β. Importina β causando una disminución de afuinidad del complejo hacia el NLS. El complejo imp ortina-
Ran-GTP libera el cargo la GEF RCC1 proteína dentro del núcleo. Intercambiador GDP-GTP Proteína para
continuar con el ciclo el complejo importina-Ran-GTP es secuencia de devuelto al citoplasma a través del
poro mediante difusión localización siguiendo los gradientes de concentración nuclear Cromatina .En el
lado citoplasmático Ran-GAP convierte Ran-GTP a Ran-GDP disociando el complejo y liberando la
importina. El ciclo se repite.
4) ¿Cómo está formada la lámina nuclear? ¿Qué mecanismos explican que el núcleo
desaparezca durante la mitosis y reaparezca al final de la
misma?
RTA: LAMINA NUCLEAR:
Red delgada de filamentos. Los filamentos de la lámina nuclear miden alrededor de 10
nm de diámetro y se componen de polipéptidos, denominados láminas. Son miembros de la misma
superfamilia de polipéptidos que se ensamblan en fi lamentos intermedios de 10 nm del citoplasma.
Como en el citoplasma, la integridad de los filamentos intermedios que forman la lámina nuclear se
regula por fosforilación y desfosforilación.
La lamina nuclear brinda el apoyo mecánico a la envoltura nuclear y sirve como sitio de unión para
las fibras de cromatina de la periferia nuclear; asimismo, participa (de una manera que aún no se
comprende bien) en la duplicación y transcripción del DNA (ácido desoxirribonu cleico).
CENTRO FIBRILAR Y FIBRILAR DENSO: Esta región contiene el ADN con las numerosas copias del
gen para el pre-ARNr-45S (este es el transcrito primario a partir del cual se obtendrán 3 de los 4
ARNr que forman los ribosomas), pero también hay factores asociados entre los que se encuentran
numerosas proteínas. Se supone que la transcripción de estos genes ocurre en la interfaz entre el
centro fibrilar y el componente denso fibrilar. En esta última región es donde se produce el
procesamiento inicial del transcrito primario pre-ARNr-45S (el corte del transcrito primario en
trozos más pequeños).
En el nuclélolo hay multitud de proteínas que no están confinadas en esta región, sino que pueden
difundir por el resto del nucleoplasma, sólo que en el núcleolo están más tiempo. De estas
proteínas, no todas están relacionadas con la síntesis de riboso mas. Por ello se cree que el nucléolo
desarrolla funciones adicionales. Por ejemplo, hay proteínas implicadas en el procesamiento de
otros ARN no ribosómicos como los pequeños ARN nucleares y otras participan en parte del
procesamiento del ARNt. También hay quinasas, reparadoras del DNA.
-ESTRUCTURA: Parecido a un collar de perlas, siendo cada perla un nucleosoma. Los nucleosomas
están compuestos por ocho proteínas denominadas histonas, con aproximadamente 145 pares de
bases de ADN enrolladas a cada una; en la eucromatina este empaquetamiento es menor para
poder acceder con mayor facilidad al ADN. Cada histona posee una estructura variante que se cree
que interviene en la ordenación de la cromatina. En concreto, se cree que la lisina metilada 4 en
las histonas actúa como un marcador genérico para la eucromatina.
- ASPECTO: Generalmente se observa como bandas de color claro cuando es teñido con colorante
Giemsa y se observa a través del microscopio óptico.
- FUNCIÓN: Participa en la transcripción del ADN a ARNm. La estructura menos compacta permite
a las proteínas reguladoras de genes y a los complejos de ARN polimerasa unirse fácilmente a la
secuencia de ADN, permitiendo así el principio de la transcripción.
NOTA:
EL NUCLEOSOMA: están compuestos por ocho proteínas denominadas histonas, con
aproximadamente 145 pares de bases de ADN enrolladas a cada una; en la eucromatina este
empaquetamiento es menor para poder acceder con mayor facilidad al ADN)
-Constitutivas: Contiene un tipo particular de ADN denominado ADN satélite, formado por gran
número de secuencias cortas repetidas en tándem. Los tipos principales de este ADN son el ADN
satélite alfa, y los ADN satélite I, II y III. Estas secuencias de ADN satélite son capaces de plegarse
sobre sí mismas y pueden tener un papel importante en la formación de la estructura altamente
compacta de la heterocromatina constitutiva.
Es estable y conserva sus propiedades heterocromáticas durante todas las etapas del desarrollo y
en todos los tejidos.
Es altamente polimórfica, probablemente debido a la inestabilidad del ADN satélite. Este
polimorfismo puede afectar, no solamente a su tamaño sino también a la localización de la
heterocromatina, y aparentemente no tiene un efecto fenotípico.
Se encuentra fuertemente teñida en la técnica de bandas C, lo que es el resultado de una
renaturalización muy rápida del ADN satélite tras la desnaturalización.
PROPIEDADES:
1. Está condensada. Esta elevada condensación la hace fuertemente cromofílica e inaccesible a
la DNAsa I y, en general, a otras enzimas de restricción.
2. El ADN de la heterocromatina se replica más tarde. La incorporación de varios análogos de
nucleótidos muestra que el ADN de ambos tipos de heterocromatina se replica tarde. Esto es
el resultado, por un lado, de su elevado grado de condensación, que evita que la maquinaria
replicativa accede fácilmente al ADN y, por otro lado, de su localización en un dominio nuclear
periférico pobre en elementos activos.
3. En la heterocromatina las histonas se encuentran hipoacetiladas. Las histonas pueden
sufrir una serie de modificaciones post-traduccionales en sus extremos N-terminales que
pueden afectar a la propia actividad genética de la cromatina.
-La hipoacetilación de las colas N-terminales de las histonas, principalmente en las lisinas, están
asociadas con la cromatina inactiva. Por el contrario, las histonas hiperacetiladas son
características de la cromatina activa.
- La acetilación/desacetilación de histonas es un mecanismo absolutamente esencial para el
control de la expresión génica. Existen numerosos factores de transcripción que presentan una
actividad acetiltransferasa de histonas (HAT, Histone Acetyl Transferase) o desacetilasa de histonas
(HDAc o Histone De-Acetylase).
4. La heterocromatina no participa en la recombinación genética.
-De modo general se acepta que la heterocromatina constitutiva no participa en la recombinación
genética. La no existencia de un emparejamiento preliminar de las regiones heterocromatínicas
homólogas se podría deber al polimorfismo característico de estas regiones que lo dificultarían,
aunque no lo harían imposible. La heterocromatina constitutiva también actúa reprimiendo la
recombinación en las regiones de eucromatina adyacentes.
-Por lo que respecta a la heterocromatina facultativa, tampoco participa en la recombinación meiótica
cuando se encuentra en su forma inactiva.