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DEMOSTRACIÓN DE LA PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN

DIFERENTES AMBIENTES

Resumen
La práctica se desarrolla con el fin de que el estudiante desarrolle la capacidad de comprobar
la existencia de microorganismos en diversos ambientes comunes para el ser humano, como
superficies corporales, superficies líquidas y objetos inanimados. Mediante el cultivo de
diferentes muestras en diversos medios (Agar nutritivo, agar inclinado y caldo nutritivo), se
logró observar la formación y caracterización de las morfologías de las colonias obtenidas.
Se tomaron muestras provenientes de llaves de un carro,agua de un termo, vello facial y una
planta herbácea para el cultivo en agar nutritivo en cajas de petri a 37°C por 48 horas. Al
final de la práctica se hace evidente la existencia de cientos de microorganismos adheridos
tanto a productos de uso diario, como subsistentes en nuestra propia carne, esto debido al
contacto con cualquier entorno sin debida asepsia.

Palabras claves: Llaves de carro, agua potable, vello facial, planta herbácea.

I. Introducción
El conocimiento de la composición química de los alimentos es un requisito previo para
conocer su microbiología. Las interacciones mutuas entre los microorganismos por una parte
y las plantas y los animales por otra, son naturales y constantes. En la naturaleza, está
perfectamente comprobado el papel ecológico de los microorganismos y su importancia en
todos los ciclos geoquímicos. Como quiera que los alimentos que consume el hombre
proceden básicamente de las plantas y de los animales o de productos derivados de los
mismos, resulta comprensible que dichos alimentos puedan contener microorganismos que
interaccionan con ellos [1].

En la mayoría de los casos, los microorganismos utilizan nuestros alimentos como fuente de
nutrientes para su propio crecimiento, hecho que, naturalmente, puede ocasionar su
alteración. Los microorganismos pueden echar a perder un alimento porque se multiplican en
é1, porque utilizan nutrientes, porque producen modificaciones enzimáticas, y porque le
comunican sabores desagradables mediante el desdoblamiento de determinadas sustancias o
mediante la síntesis de nuevos compuestos.

El agar nutritivo es un medio de cultivo no selectivo sólido y de composición básica, en el


cual la pluripeptona y el extracto de carne constituyen la fuente de carbono nitrógeno
aportando nutrientes para el desarrollo bacteriano [2].

El objetivo de la práctica es que el estudiante esté en la capacidad de comprobar la existencia


de distintos tipos de microorganismo presentes en nuestro ambiente, superficies corporales,
líquidos y objetos inanimados.

II. Materiales
Para la realización de la práctica los estudiantes hacen uso de:
- Cajas de Petri con agar nutritivo # 4
- Mechero
- Cinta vinipel para sellar cajas
- Caja con bacterias
- Goteros
- Aplicadores # 3
- Tubo de caldo nutritivo por 5 mL
- Tubo de agar inclinado aproximadamente 8 mL

III. Marco Experimental


Una vez identificadas 6 cajas petri, entregadas por el laboratorio, se procedió a marcalas con
el número del grupo en la tapa de la placa, dos de ellas van a estar contenidas con dos
especies de microorganismos (Pseudomonas aeruginosa y ) diseminadas cada una en dos tipos
de líquidos diferentes ( NOMBRES) . Las otras cuatro cajas petri van a contener muestras de
diferentes superficies u objetos, cada muestra se toma con un hisopo estéril transando sobre la
caja varias veces en líneas paralela. Las muestras tomadas fueron:

- Llaves de un carro: con ayuda de un hisopo se tomó muestra de las llaves de un


carro (objeto de uso diario), por cada hendidura.
- Agua potable de un termo: Mediante un gotero se extrajeron pocas gotas de agua de
un termo, para generar un goteo y diseminarse por medio de vaivén.
- Vello facial (barba): Con la ayuda de un hisopo, se tomó muestra del vello facial
(barba), para luego trazar varias líneas sobre el agar.
- Planta herbácea: Con ayuda de un hisopo se tomó muestra de una planta herbácea,
por todas sus hojas, para luego trazar varias líneas sobre el agar.

Después de terminado el muestreo, se tapó la placa y se incubó en posición invertida a 37ºC


durante 48 horas.
Por otra parte, se cultivó en un medio de caldo nutritivo, con un aplicador esterilizado, la
bacteria S. Aureus y, en un agar nutritivo inclinado, la bacteria P. Aeruginosa, para luego de
ambos cultivos llevar a 37°C, igualmente por 48 horas, así posterior a esto, realizar su debido
análisis de crecimiento.

IV. Resultados
4.1 Llaves de carro
En este cultivo se presentaron tres cultivos dispersos diferentes. El primero de ellos
presentaba un tono de color bruno opaco, su elevación observada es nula y su borde presenta
lobulación como se observa a continuación en la Fig. 1
Fig. 1. Cultivo bacteriano procedente de las llaves, Fuente: Propia

Otro de los cultivos encontrados, puede describirse como el más pequeño de los tres, su tono
es blanco habano, su contorno ondulado y su elevación totalmente plana, como se muestra a
continuación.

Fig. 2. Cultivo bacteriano procedente de las llaves, Fuente: Propia

Por último se encuentra el cultivo más grande en diámetro, con un tono opaco, rojizo/claro,
con una elevación umbilicada y un borde ondulado, como se observa a continuación.

Fig. 3. Cultivo bacteriano procedente de las llaves, Fuente: Propia

4.2 Agua potable de un termo


Para el cultivo del agua, fue inexistente la propagación de algún microorganismo, como se
logra observa en la Fig.4.

Fig. 4. Cultivo bacteriano procedente del agua, Fuente: Propia


4.3Vello facial (barba)
Para el cultivo microbiológico, respecto al vello facial, encontramos cientos de cápsulas
bacterianas dispersas por todo el recipiente (Fig. 5), cada una de ellas aislada de la otra. A
simple vista, fue posible la identificación de tres cultivos diferentes, uno de ellos con
tonalidad amarilla/verdosa clara, superficie escamosa, borde ondulado y una sutil elevación
como es posible intuir en la Fig. 6.

Fig. 5. Cultivo bacteriano procedente de vello facial, Fuente: propia

Fig. 6. Cultivo bacteriano procedente de vello facial, Fuente: Propia

Otra colonia distinguible y de igual manera la más abundante en toda la muestra, conformada
por un pequeño diámetro, tono bruno, mínima elevación y forma circular, se ve repetida en
múltiples ocasiones por toda la muestra, como es posible identificar, tanto en la Fig. 7, como
en la Fig. 8, donde de igual manera se observa otra colonia de aspecto rojizo, borde redondo,
sin elevación.

Fig. 7. Cultivo bacteriano procedente de vello facial, Fuente: Propia


Fig.8. Cultivo bacteriano procedente de vello facial, Fuente: Propia

4.4 Planta herbácea


Para el cultivo microbiológico respecto a la planta herbácea (Fig. 9), se distinguen dos
cultivos bacterianos diferentes: en el primero encontramos un cultivo bacteriano con forma
regular, borde redondo, tono amarillento y una elevación sutil como se muestra en la Fig.10.

Fig. 9. Cultivo bacteriano procedente de una planta herbácea, Fuente: propia

Fig. 10. cultivo bacteriano procedente de una planta herbácea, Fuente: propia

Por último, se observa un cultivo en forma de roseta, con un borde tipo dentado, una baja
elevación y una textura rugosa, como se observa en la Fig.11, presentada a continuación:

Fig. 11. cultivo bacteriano procedente de una planta herbácea, Fuente: propia

4.5 Cultivo de S. aureus en caldo nutritivo


En este cultivo se hizo evidente el crecimiento microbiano entorno a todo el volumen del
caldo nutritivo. Se observa que pasa de una solución traslúcida y fluida, a ser una solución
densa y turbia, con un botón en la parte inferior del tubo como se logra observar en las Fig.12
y 13.
Fig. 12. Cultivo de S. aureus en caldo nutritivo, a 37°C por 48 h, Fuente: propia

Fig. 13. Cultivo de S. aureus en caldo nutritivo, a 37°C por 48 h, Fuente: propia

4.6 Cultivo de P. Aeruginosa en agar inclinado


En la Fig. 14, es posible observar un cultivo de P. Aeruginosa sobre un agar inclinado. Se
distingue que el crecimiento del cultivo es superficial en su totalidad, se observa una capa
delgada sobrepuesta en el agar, extendida sobre toda la superficie.

Fig. 14 .Cultivo de P. Aeruginosa en agar inclinado, a 37°C por 48 h, Fuente: propia

V. Discusión

5.1 Llaves de carro


La llave de un automóvil es un objeto que, al estar constantemente en contacto con la mano
humana, se encuentra en contaminación constante. En las figuras 1, 2, 3, se evidenciaron y
reconocieron las diferentes formas bacterianas. También se pudo observar que algunas
bacterias crecieron en mayor proporción que otras, esto debió ser gracias a la presencia o
ausencia de oxígeno, la temperatura, o la esterilidad del medio que cada cápsula bacteriana
maneje.[4]

5.2 Agua potable de un termo

La presencia de microorganismos en agua es un indicador de calidad, ya que muchos de los


organismos encontrados en ella representan un interés sanitario, pues afectan la salud humana
y la de otros organismos que utilizan el recurso hídrico. Para el expendio de agua potable,
brindado por nuestro servicio de recursos hídricos, son necesarios distintos métodos de
purificación al agua para su debido consumo. La desinfección de esta asegura los parámetros
para el consumo humano.

5.3 Vello facial (barba)

El vello facial puede presenciar microorganismos que llegan a acumularse en ella debido a las
condiciones favorables presentadas por las cavidades entre los vellos. La existencia de
bacterias en su superficie se explica por el contacto directo que tiene con el entorno.
Adicionalmente, una persona decide dejar crecer su barba únicamente por su aspecto estético,
dejando atrás la asepsia, derivando así, el crecimiento bacteriano, por las condiciones aptas de
humedad, temperatura y nutrición que genera este vello facial. [5]

5.4 Planta herbácea

En este cultivo se identificó la mayor diversidad de colonias microbianas, esto se dio por la
facilidad de contacto con el entorno que puede tener una planta diariamente y, de igual
manera la facilidad de contaminación se incrementa debido al nivel del suelo en que se
encuentran las plantas.

4.5 Cultivo de S. aureus en caldo nutritivo


Para el debido crecimiento de este cultivo, se debe incubar durante 18-24 horas, formando
colonias de 0.5-1.5 mm de diámetro. Las colonias de S. aureus se observan lisas, elevadas,
brillantes y de bordes enteros, presentan consistencia cremosa y pigmentación que va del
amarillo a dorado debido a la producción de carotenoides, la mayoría de las cepas producen
β-hemólisis o hemólisis total alrededor de las colonias cuando se cultivan en agar sangre. S.
aureus se diferencia de las demás especies por producir coagulasa que se manifiesta por su
capacidad para coagular el plasma, es resistente al calor, a la desecación y puede crecer en
medios con grandes cantidades de NaCl (7.5%). [6]
En la Fig.13, logramos observar un botón que se acumula en la parte inferior del cultivo, esto
es debido al peso molecular que logra alcanzar el staphylococcus, generando precipitación en
el medio líquido, demostrando de igual manera su capacidad como bacteria anaerobia.

4.6 Cultivo de P. Aeruginosa en agar inclinado

En el cultivo de Pseudomonas aeruginosa, se apreció una intensificación del color en el lugar


donde se realizó el cultivo, en el medio del agar inclinado la bacteria conservó la forma en la
cual fue cultivada y se expandió por todo el agar, creando una delgada capa en toda la
superficie del agar.

VI. Conclusiones
Se determina la importancia del aislamiento de microorganismos en diferentes ambientes, con
el fin de tener una población de microorganismos que habitan en dichos medios, pero que son
imposibles de observar e identificar, obteniendo un cultivo que nos permita identificarlo.
Se obtuvó un cultivo de forma mixta, por lo que se dio la proliferación de microorganismos
de todo lo que se encontraba en los ambientes estudiados. A partir de allí, los
microorganismos se encontraban en condiciones viables de caracterización (forma, borde,
elevación y superficie), observación e identificación.

Se hace evidente la facultad y facilidad que puede alcanzar cualquier objeto, en un entorno
cotidiano, de albergar microorganismos patógenos, si no se realiza una debida y constante
asepsia.

Se pudo observar que las colonias bacterianas presentan una morfología diversa según el tipo
de bacteria que conforme la colonia.

VII. Referencias bibliográficas

[1] W.C.Frazier, y Westhoff, D. (1993). MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS. Zaragosa,


España: Acribia, S.A.

[2] Los medios de cultivo en microbiología, disponible en


http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm recuperado el 22 de Agosto
de 2017

[3] Madigan M, Martinko J, Parker J. Brock, BIOLOGÍA DE LOS MICROORGANISMOS.


10ª edición. 10 España: Prentice Hall Iberia; 2003. p. 1089.

[4] Luis A. Merino, 2009, Fisiología Bacteriana, Universidad Nacional del Nordeste:
Facultad de Medicina.

[5] XIMENA LUZMILA BORJA CELI, 2016, ANÁLISIS COMPARATIVO DEL EFECTO
ANTIMICROBIANO Y ANTISÉPTICO PREQUIRÚRGICO DE PIEL CON BARBA Y
PIEL SIN BARBA ENTRE YODOPOVIDONA, CLORHEXIDINA/ALCOHOL Y
CLORHEXIDINA/CETRIMIDA EN LOS ESTUDIANTES DE LA FACULTAD DE
ODONTOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD DE LAS AMÈRICAS, UNIVERSIDAD
CENTRAL DEL ECUADOR: Facultad de odontología.

[6] Estrella Cervantes-García, Rafael García-González, Paz María Salazar-Schettino, 2014,


Características generales del Staphylococcus aureus.

VIII. Anexos

1. Existen microorganismos beneficiosos y perjudiciales en diferentes ambientes,


nombre dos beneficiosos y dos perjudiciales y ejemplifique.
R/= Los dos tipos de microorganismos beneficios tenemos: Lactobacillus reuteri y
Streptococcus thermophilus, estos dos se encuentran presentes en algunos productos lácteos.
En los microorganismo perjudiciales tenemos los virus y parásitos.

2. ¿Podría usted observar colonias bacterianas en un medio líquido? Justifique.

R/= No se puede presentar el crecimiento de colonias bacterianas en un medio líquido, el


cultivo se hace en un medio sólido para impedir el posible movimiento de los individuos de la
colonia y favorecer su agrupamiento.

3. Investigue qué tipo de microorganismos son encontrados con mayor frecuencia en los
ambientes escogidos en la práctica y que beneficios/problemas pueden acarrear para
nuestra salud.

El agua de la red contiene cantidades pequeñas de microorganismos, habitualmente menos de


300 ml-1 , por ejemplo, en el agua, zonas húmedas y, a veces, en productos estériles o
desinfectantes (Pseudomonas, Acinetobacter, Mycobacterium). Estudios ya han certificado
que los hombres con vello en la cara son más propensos a padecer infecciones de la piel y a
transmitirlas a otros. La llave es un objeto se utilizan una y otra vez a lo largo del día, y
suelen ser los grandes olvidados cuando se hace la limpieza general del hogar. Por ello, son
lugares propicios para que los gérmenes se acumulen. Es más, los expertos los consideran
claves en la transmisión del virus de la gripe y de otros que provocan enfermedades
respiratorias.
Adicionalmente a esto, gracias a cientos de estudios, se puede inquirir que los
microorganismos más comunes en nuestra vida cotidiana son: E. coli, Salmonella, bacillus
cereus, listeria monocytogenes, clostridium perfringens, nocardia, streptomyces ,
leuconostoc, entre muchos otros, los cuales pueden causar síntomas como la diarrea, vómito,
cansancio , fiebre, dolor abdominal, deshidratación, entre otros tantos que dependeran del
microorganismo hospedado.

4. ¿Cómo evitaría que los trabajos del laboratorio se contaminen?

R/= Teniendo en cuenta las normas del laboratorio, tendría que ser acatadas para evitar
posibles contaminaciones, las cuales probablemente sean por nuestro propio cuerpo como
cabello, las manos, saliva entre otro. Usando los implementos de seguridad como tapabocas,
bata y cofia, así mismo evitar tocar las muestras, en el caso de las cajas de Petri, sellarlas
adecuadamente con papel film. Después de realizar el cultivo y en el caso de tubos, flamear la
boca del tubo antes y después de realizar el cultivo y cerrarlo inmediatamente. De este modo
se podrá mantener segura la práctica durante el procedimiento que se debe realizar

5. ¿Al incrementar el tiempo de incubación se presenta un aumento indefinido en el


tamaño de las colonias? Justifique.
R/= No se presenta aumento indefinido en el tamaño de las colonias, aunque el tiempo de
generación dependa de diferentes factores, y también depende del tipo de microorganismo
que sea. El crecimiento bacteriano este definido en 4 etapas principales: la fase de latencia, la
fase estacionaria donde disminuye el crecimiento de las bacterias, la fase de crecimiento
exponencial donde las bacterias crecen aceleradamente hasta que llegan a la fase estacionaria,
y la fase de muerte, donde se agotan las reservas de energía (nutrientes) y las condiciones se
vuelven desfavorables así que las bacterias mueren.

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