Kromosom Kelenjar Ludah Chironomus

Hasil Pengamatan :

No Nama Anggota Kromosom Kelenjar Ludah,

. pembesaran :100x
1 Hasbi Yusuf

2 Indah Oktaviani

3 Nurul Alfiah

4 Nurul Fauziah

5 Tri Ekawati Heryanto

6 Ririn Rinzani H.

Kelenjar ludah yang belum

diwarnai
 Tahapan-tahapan isolasi DNA

No
.
1

Sampel buah Stawberry, pilih

yang segar

Larutan ________________,
___________________,
______________

3
Sampel buah ditumbuk
hingga halus agar sarinya
dapat keluar

4
Tambahkan larutan
________, kemudian kocok
dengan menggunakan vektor
5

Setelah tercampur, isolate

dimasukkan ke dalam air
dalam suhu

Tambahkan larutan
________, kemudian kocok
dengan menggunakan vektor

10
Setelah di sentrifuge dengan
kecepatan 14.000 rpm
selama 10 menit

Warna larutan pink pudar

Terbentuk endapan
11

12

13

Setelah di sentrifuge dengan

kecepatan 14.000 rpm
selama 10 menit

14

Larutan Bening

DNA

15
Sampel dimasukkan ke dalam sumur
yang terdapat dalam gel, alat siap
dipasang dan disambungkan ke
sumber listrik ( elektroforesis pada
daya 100 volt selama 30 menit )
16

Langkah Kerja

1. Mengambil daging buah yang sudah matang atau sayuran sebanyak 50

gram.
2. Kemudian daging buah atau sayuran tersebut dihancurkan dengan
menggunakan blender atau sendok atau batang kecil dengan cara ditekan-
tekan.
3. Daging buah atau sayuran yang telah dihaluskan ditampung.
4. Kemudian memasukkannya ke dalam tabung 1,5 ml sebanyak 0,1 ml atau
100 µl.
5. Selanjutnya menambahkan buffer ekstraksi sebanyak 4x voleme total
sampel.
6. Lalu, menambahkan SDS 20% sebanyak 20 µl.
7. Menghomogenkan dengan alat vorteks selama 5 detik.
8. Menginkubasi dalam penangas air pada suhu 65 o C selama 5 detik.
9. Menambahkan Potasium asetat sebanyak 100 µl 5 M.
10. Menghomogenkan dengan cara membolak-balik tabung sebanyak 50x.
11. Menyimpan dalam wadah berisi es selama 10 menit.
12. Sampel disentrifuga pada kecepatan 14.000 rpm selama 10 menit.
13. Memindahkan fasa atas ke dalam tabung 1,5 ml yang baru, endapan jangan
sampai terbawa.
1
14. Menambahkan kloroform: Isoamil alcohol (24:1) sebanyak x volume
2
total sampel.
 15. Selanjutnya, sampel dihomogenkan dengan cara membolak-balik tabung
sebanyak 50x.
16. Sampel disentrifuga pada kecepatan 14.000 rpm selama 10 menit.
17. Fasa atas dipindahkan ke dalam tabung baru.
18. Kemudian menambahkan alcohol 100% (-20oC) sebanyak minimal 2x
volume total sampel.
19. Sampel disentrifuga lagi pada kecepatan 14.000 rpm selama 10 menit.
20. Kemudian, membuang alcohol dengan hati-hati agar endapan DNA tidak
terbuang.
21. Selanjutnya, mencuci dengan alcohol 70% 1x, lalu sampel dikeringkan
pada oven dengan suhu 50oC selama 10 menit, atau hingga endapan
mongering.
22. Endapan DNA dilarutkan dengan TE sebanyak 30 µl.
23. Menyimpan sampel pada suhu 4oC, biarkan minimal selama 24 jam agar
DNA dapat terlarut dengan se\mpurna.
24. DNA yang diperoleh akan di elektroforesis dan juga di amplifikasi dengan
alat PCR.

Alat dan Bahan

Alat
Mikropipet berbagai ukuran
Pipet berukuran