​Universidad Nacional Autónoma de

México
Facultad de Estudios Superiores -
Cuautitlán
Medicina Veterinaria y Zootecnia

Inmunología

Alteración de los niveles leucocitarios en

ratas sometidos a estrés.
Grupo:2501

Alumnos:Licona Durán David

Rojas Vázquez Alexis Andre

Profesor:Juan Antonio Montaraz Crespo

Resumen.
Se realizará un estudio con 6 ratas cepa wistar (rattus norvegicus), subdivididos en
3 grupos de 2; el control que se mantuvo en condiciones normales y 2
experimentales a los cuales se les sometió a estrés por hambre y por frío para
valorar la afectación de los leucocitos. A los animales se les extraerá sangre al inicio
y al final de cada experimento para realizar los leucogramas y determinar los
cambios en la población de leucocitos. En este proyecto se busca observar el uso
de diferentes estímulos en el sistema inmunológico y ver cual de estos actúa de
forma eficaz en el sistema inmune así determinando sus límites, con la ayuda de
una biometría hemática se medirá la cantidad de leucocitos antes y después de la
administración del estimulador, observando si realmente está haciendo un cambio
significativo en la población leucocitaria,sobre todo en los linfocitos.

Introducción.
El sistema inmunológico es la defensa del cuerpo ante organismos infecciosos y
otros invasores. Mediante una serie de pasos llamados “respuesta inmune”, el
sistema inmunológico ataca a los organismos y las sustancias que invaden los
sistemas del cuerpo y causan las enfermedades.

El sistema inmunológico se compone de una red de células, tejidos y órganos que

trabajan en conjunto para proteger al cuerpo. Las células mencionadas son glóbulos
blancos (leucocitos) de dos tipos básicos, que se combinan para encontrar y destruir
las sustancias u organismos que causan las enfermedades.

Componentes en la sangre.

Los análisis de sangre pueden determinar si tienes niveles normales de las

proteínas que combaten las infecciones (inmunoglobulina) en la sangre y medir los
niveles de glóbulos y células del sistema inmunitario. Los números anómalos de
ciertas células pueden indicar un defecto del sistema inmunitario.
Los análisis de sangre también pueden determinar si el sistema inmunitario está
respondiendo adecuadamente y produciendo proteínas que identifican y matan a
invasores ajenos, como bacterias o virus (anticuerpos).
Efectos del estrés en el sistema inmune.

El término estrés denota el efecto de estímulos aversivos que perturban gravemente

la homeostasis sobre las constantes fisiológicas y la conducta de los seres vivientes.
La respuesta al estrés está controlada por el sistema nervioso central y los tres
sistemas encargados de mantener la homeostasis: nervioso autónomo, endocrino e
inmune.
 De igual forma, en modelos animales el estrés acelera el desarrollo y crecimiento
de tumores, retrasa la producción de anticuerpos y suprime la actividad de las
células asesinas naturales, linfocitos T citotóxicos y macrófagos ante la exposición
del organismo a un agente infeccioso. Los efectos del estrés sobre el
funcionamiento inmune están mediados por los glucocorticoides y las
catecolaminas, adrenalina y noradrenalina.

Estudio en ratones

Okimura y Nigo encontraron también que la inmovilización por 12 horas durante dos
días consecutivos, redujo la producción de anticuerpos contra eritrocitos de oveja y
el número de linfocitos T, formadores de anticuerpo, en el ratón adulto. En ese
estudio, los efectos del estrés sobre el funcionamiento del sistema inmune
estuvieron mediados por activación de los dos sistemas encargados de controlar la
respuesta al estrés, el neuroendocrino y el nervioso simpático; puesto que, la
adrenalectomía o la simpatectomía previas a la inmovilización revirtieron los efectos
inmunosupresores del estrés

Tratamiento para reforzar el sistema inmunitario

Terapia de inmunoglobulina. La inmunoglobulina consiste en las proteínas de los

anticuerpos que se necesitan para que el sistema inmunitario combaten lo las
infecciones.
Terapia con interferón gamma. Los interferones son sustancias que se producen
en forma natural, combaten los virus y estimulan las células del sistema inmunitario.
Factores de crecimiento. Cuando la inmunodeficiencia es provocada por una falta
de ciertos glóbulos blancos, la terapia con factores de crecimiento puede ayudar a
aumentar los niveles de glóbulos blancos que fortalecen el sistema inmunitario.
Marco teórico

En las investigaciones biomédicas se precisa la utilización de animales de

laboratorio como bio-modelos naturales o inducidos para el estudio de procesos
fisiológicos y patológicos tale como elaboración de biológicos (fármacos),evaluar
medicamentos​,​etc.
El sistema nervioso regula todas las funciones de los demás porque actúa desde los
centros superiores por vía directa, a través de la médula espinal, de los ganglios
espinales y de las terminaciones nerviosas que inervan a los órganos linfoides y a la
médula ósea. También sobre los vasos sanguíneos y linfáticos propios de estos y en
los contactos que existen entre axones neuronales y células inmunitarias a ese nivel
y por vía endocrina a través de neurohormonas y neurotransmisores. Dentro del
sistema endocrino las catecolaminas ejercen un efecto inhibitorio sobre la
proliferación de linfocitos T inducida por mitógenos y sobre la proliferación de
células B en respuesta a la cooperación.
El aumento del cortisol se desarrolla junto con neutrofilia, linfopenia, disminución de
los granulocitos, disminución de la aclaración mucociliar nasal, disminución de la
célula natural killer (NK), disminución de la respuesta de hipersensibilidad retardada
(DTH), alteraciones en la producción de citoquinas en respuesta a mitógenos y de la
Ig-A de la saliva y de la mucosa nasal, modificación en la expresión de moléculas
del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC), que mantenido, provoca una
inmunosupresión.
Por otro lado, la disminución del RNAm de la hormona del crecimiento disminuye las
células B y contribuye a una pobre respuesta de anticuerpos (Ac), teniendo en
cuenta que esta hormona también es secretada por las células mononucleares.
También los modelos de inmunosupresión por esteroides indican que el aumento de
cortisol disminuye los precursores de linfocitos B, causando depleción de estas en la
médula ósea e induciendo apoptosis.De toda esta gama se destaca el sistema
neuroinmunoendocrino metabólico, que se encarga de regular las funciones del
sistema inmunológico y endocrino junto con los mediadores químicos de estos, que
por supuesto tienen una función determinada sobre todas las células del organismo.

Es conocido que el estrés disminuye la capacidad de proliferación de los linfocitos

en general, pero en específico la función de los linfocitos T se ve muy afectada
porque habitualmente sobre su superficie se expresan más de 100 nuevas proteínas
y ello pudiera estar implicado en las diferentes señales que tienen que ver con las
vías de síntesis de proteínas y de sustancias con actividad inmune o incluso como
consecuencia de los cambios en la composición de la población de las células
T.(​Castellanos​)

Durante la exposición al estrés, en las primeras 6 a 9 h aumenta la migración de los

linfocitos T en la médula ósea, lo cual puede participar en la activación de la
granulopoyesis.Actualmente una de las causas más frecuentes de
inmunodeficiencia en el mundo es la desnutrición,los fenómenos relacionados con la
inmunidad y el estrés, los cuales pueden alterar la salud animal o causar
enfermedades que dependen del buen funcionamiento del sistema
neuroinmunoendocrino metabólico.
Por ello en este trabajo decidimos estudiar el comportamiento de los linfocitos
después de la provocación de estrés por hambre y por frío en animales de
experimentación aplicando un leucograma el cual nos ayuda con el estudio
sanguíneo el cual se divide en tres bloques con base en los tipos de células
sanguíneas analizadas: los leucocitos, los eritrocitos y las plaquetas. La
interpretación correcta del leucograma orienta al médico para el diagnóstico
oportuno de infecciones, anemias, leucemias, parasitosis,policitemias,
enfermedades del sistema inmunitario, patologías de la hemostasia,etc.El estudio de
un leucograma completo incluye el análisis morfológico (tamaño, forma y volumen
celular) y cuantitativo de las células sanguíneas mencionadas.El intervalo de
referencia para muchas pruebas de laboratorio se define por los valores umbral
entre los cuales caen los resultados de un porcentaje determinado de individuos
aparentemente sanos.En inmunología, así como en otras áreas de la salud, es
importante establecer los límites de referencia en los animales que se analizará de
manera rutinaria.La variabilidad en los valores de referencia depende de muchos
factores como: el género, la edad, las características fenotípicas y genotípicas de la
población, la dieta,la ubicación geográfica (como la altitud) y el método utilizado,
entre otros.

La recolección de la sangre es un requisito común para varios estudios de

investigación que involucran a ratones y ratas. La elección del método para el retiro
de la sangre en estos animales depende de muchos factores como el volumen de
sangre necesitada, frecuencia del muestreo, estado de salud del animal que debe
purgarse y el nivel de habilidad del técnico. Aquí,vamos a revisar estas
consideraciones y procedimientos en la recolección sangre.

Objetivo
El objetivo de este trabajo es la determinación de los límites de respuesta
inmunológica cuando un animal se somete a diferentes tipos de estrés referente
para la biometría hemática en la población de ratas (rattus norvegicus)que acude a
realizar sus estudio.

Hipótesis
● Este estudio está diseñado para evaluar S​ i se somete una cantidad de estrés
entonces bajará la cantidad de la respuesta inmunológico.
Material y métodos
​ ​Material biológico
6 Ratas cepa wistar (Rattus norvegicus)
Material
6 agujas calibre 27 o 28

Metodología:

Se trabajara con 6 ratas (Rattus norvegicus) jóvenes, con peso promedio de 200 g,
de los dos sexos, provenientes de la Facultad de Estudios Superiore Cuautitlán, los
cuales se dividirá en 3 grupos:
● 2 se utilizaron como controles normales (grupo 1)
● 2 para producir estrés por frío (grupo 2)
● 2 se utilizaron para producir estrés por hambre (grupo 3).

Se manipularon de acuerdo con lo establecido en la norma oficial mexicana

NOM-062-ZOO-1999.
Flujo de trabajo.

Grupo 1:Las ratas se mantendrán en condiciones normales dentro del medio en el

cual habitualmente viven los animales de experimentación durante los días que dure
el experimento.

Grupo 2:Los animales seran anestesiados superficialmente con éter para

inmovilizarlos después con contenedores apropiados en refrigeración, a temperatura
de - 20 grados durante 30 min.

Grupo 3: a los animales solamente se les dará agua, la viruta se retirara de la jaula
por 2 días.
Al inicio y al final de los experimentos se realizará a todos los grupos un leucograma
mediante la técnica que se describe a continuación:

Manejo: A​ poyando la palma de la mano sobre el lomo del animal, coloque los dedos
índice y medio a ambos lados de la mandíbula, de forma que la cabeza de la rata
quede entre dichos dedos impidiendo su movimiento. ​Vías para extracción
sanguínea:
Bibliografía:
1.-Castellanos Eldelis,”​Alteración de los niveles leucocitarios en ratones BALB/C
​ 006.
sometidos a estrés”,2
2.-SOEM,”El estímulo del sistema inmunológico será capaz de destruir los
tumores”,2016.
3.-Gómez González B, Escobar A, “Estrés y sistema inmune”, 2006