LA HISTOTECNOLOGÍA

La Histotecnología es la disciplina que estudia los

fundamentos científicos y la aplicación de técnicas
que abarcan desde la obtención de la muestra
biológica, hasta su transformación en un preparado
histológico. Los procedimientos establecidos
permitirán la preparación del material para ser
observado al microscopio (óptico o electrónico) y
analizar sus características topográficas,
estructurales y tintóreas, según corresponda.
FUNDAMENTOS GENERALES PARA EL
PROCESAMIENTO HISTOLÓGICO DE LOS TEJIDOS
Una técnica histológica es un conjunto de
operaciones a las que se somete una muestra
biológica a fin de posibilitar su estudio al
microscopio. El material de estudio debe ser
reducido a láminas muy delgadas y transparentes
mediante una serie de operaciones que se
describirán a continuación.
El proceso abarca desde el momento en que se
toma el material hasta que el preparado puede
observarse.
PASOS:
1.- Toma de material.
2.- Fijación
3.- Deshidratación
4.- Preparación para la inclusión
5.- Inclusión
6.- Modelado del bloque – catalogación
7.- sección con el micrótomo extendido de los
cortes – pegado
8.- Coloraciones: de rutina o especiales
LA CITOTECNOLOGIA
Empieza cuando el doctor José Ignacio Báldo,
médico de la policlínica de caracas y jefe de la
división de tuberculosis del ministerio de sanidad y
Asistencia social, a buscar patólogos puesto que la
situación con la tuberculosis era muy grande en el
país y se requería patólogos para hacer diagnóstico
y poder encarar la enfermedad. Esto se da por la
llegada de un especialista de anatomía y patología
Dr. Rudolf Jaffé (1885 a 1975) de procedencia Berlín
Alemania Llega a Caracas en 1936, contratado por
una clínica privada como técnico en patología.
LA CITOLOGIA
Citología, rama de la biología que estudia la
estructura y función de las células como unidades
individuales, complementando así a la histología
(que estudia a las células como componente de los
tejidos). La citología abarca el estudio de la
estructura y actividad de las diferentes partes de la
célula y membrana celular, el mecanismo de
división celular, el desarrollo de las células sexuales,
la fecundación y la formación del embrión, las
alteraciones de las células, como las que ocurren en
el cáncer, la inmunidad celular y los problemas
relacionados con la herencia.
La citología tiene gran valor en la medicina actual,
ya que ayuda a diagnosticar enfermedades
mediante el análisis de las células extraídas de
diversos fluidos corporales.
LA CELULA
Célula, unidad básica de la vida. La célula es la
estructura más pequeña capaz de realizar por sí
misma las tres funciones vitales: nutrición, relación
y reproducción. Todos los organismos vivos están
formados por células. Algunos organismos
microscópicos, como las bacterias y los protozoos,
son unicelulares, lo que significa que están
formados por una sola célula. Las plantas, los
animales y los hongos son organismos
pluricelulares, es decir, están formados por
numerosas células que actúan de forma coordinada.
La célula representa un diseño extraordinario y
eficaz con independencia de si es la única célula que
forma una bacteria o si es una de los billones de
células que componen el cuerpo humano. La célula
lleva a cabo miles de reacciones bioquímicas cada
minuto y origina células nuevas que perpetúan la
vida.
El tamaño de las células es muy variable. La célula
más pequeña, un tipo de bacteria denominada
micoplasma, mide menos de una micra de diámetro
(10.000 micoplasmas puestos en fila tienen el
mismo diámetro que un cabello humano). Entre las
células de mayor tamaño destacan las células
nerviosas que descienden por el cuello de una
jirafa, que pueden alcanzar más de 3 m de longitud.
Las células humanas presentan también una amplia
variedad de tamaños, desde los pequeños glóbulos
rojos (hematíes) que miden 0,00076 mm hasta las
células hepáticas que pueden alcanzar un tamaño
diez veces mayor. Aproximadamente 10.000 células
humanas de tamaño medio tienen el mismo
tamaño que la cabeza de un alfiler.
Toda célula es, en sí misma, un modelo de
independencia. Igual que una ciudad amurallada en
miniatura que estuviese permanentemente en hora
punta, la célula debe soportar constantemente el
tráfico, transportando moléculas esenciales de un
lugar a otro con el fin de mantener las funciones
vitales. Sin embargo, a pesar de su individualidad,
las células poseen además una capacidad notable
para unirse, comunicarse y coordinarse con otras
células.
Los componentes de las células son moléculas,
estructuras sin vida propia formadas por la unión de
átomos. Las moléculas de pequeño tamaño sirven
como piezas elementales que se combinan para
formar moléculas de mayor tamaño. Las proteínas,
los ácidos nucleicos, los carbohidratos o hidratos de
carbono y los lípidos (grasas y aceites) son los
cuatro tipos principales de moléculas que forman la
estructura celular y participan en las funciones
celulares.
ORIGEN DE LA CELULA
El mecanismo de evolución de las células sigue
siendo una cuestión de estudio sujeta a una intensa
investigación científica (véase Origen de la vida). Los
estudios sobre la evolución de las células a partir de
la materia inerte que existía en la Tierra primigenia
han sido llevados a cabo por físicos, geólogos,
químicos y biólogos. La Tierra se formó hace
aproximadamente 4.500 millones de años y durante
millones de años las erupciones volcánicas violentas
arrojaron al aire sustancias como dióxido de
carbono, nitrógeno, agua y otras moléculas
pequeñas. Estas moléculas, bombardeadas con la
radiación ultravioleta y la luz de intensas tormentas,
entraron en colisión formando uniones químicas
estables y originando moléculas de mayor tamaño,
como los aminoácidos y los nucleótidos
(componentes básicos de las proteínas y de los
ácidos nucleicos respectivamente). Ciertos
experimentos indican que estas moléculas de
mayor tamaño se forman de manera espontánea en
condiciones de laboratorio que simulan el medio
que probablemente existía en los orígenes de la
Tierra.
Las células eucariotas pudieron haber evolucionado
a partir de células procariotas primitivas hace
aproximadamente 2.000 millones de años. Las
células precursoras de las células eucariotas
perdieron sus paredes celulares, lo que permitió
que la membrana plasmática se expandiera y se
plegara. Finalmente, estos pliegues podrían haber
dado origen a compartimentos separados dentro de
la célula (los precursores de ciertos orgánulos
presentes en las células eucariotas).
DESCUBRIMIENTO Y ESTUDIO DE LAS CELULAS
Las primeras observaciones de las células fueron
realizadas en 1665 por el científico inglés Robert
Hooke, que utilizó un microscopio de su propia
invención para examinar distintos objetos, como
una lámina fina de corcho. Al observar las filas de
las celdas diminutas que forman el tejido muerto de
la madera, Hooke acuñó el término célula porque le
recordaban a las pequeñas celdas ocupadas por los
monjes en los monasterios. Aunque Hooke fue el
primero en observar y describir las células, no llegó
a comprender su relevancia. Unos años más tarde,
el holandés Antoni van Leeuwenhoek, fabricante de
microscopios, construyó uno de los mejores de la
época. Gracias a su invento, Leeuwenhoek fue el
primero en observar, dibujar y describir una amplia
variedad de organismos vivos, como bacterias que
se deslizaban en la saliva, organismos unicelulares
que se movían en el agua de las charcas y
espermatozoides nadando en el semen.
En 1839 presentaron la idea revolucionaria de que
todos los organismos vivos están formados por una
o más células y de que la célula constituye, por
tanto, la unidad estructural de los seres vivos.
Fue otro científico alemán, Rudolf Virchow (1855)
quien propuso que todas las células proceden de
otras células. Así quedó establecida la teoría celular
tal y como la conocemos hoy día:
• La célula es la unidad morfológica de los seres
vivos. Todos los seres vivos están formados por una
o más células.
• La célula es la unidad fisiológica de los seres vivos.
• Toda célula procede de otra célula por división de
esta.
Otra área muy activa de la biología celular es la
relacionada con la muerte celular programada o
apoptosis (modalidad específica de muerte celular,
implicada en el control del desarrollo y el
crecimiento).En el cuerpo humano cada segundo,
millones de células se suicidan como parte esencial
del ciclo normal de recambio celular. También
parece ser un mecanismo de seguridad frente a la
enfermedad: cuando aparecen mutaciones dentro
de una célula, esta, por lo general, se autodestruye.
Si no ocurre así, la célula puede dividirse y dar lugar
a células hijas mutadas que continúan dividiéndose
y propagándose, formando de manera gradual lo
que denominamos tumor. Este crecimiento celular
descontrolado puede ser benigno, sin riesgo, o
canceroso y puede amenazar la salud del tejido. La
apoptosis es objeto de estudio por parte de los
científicos cuya intención es conocer la
transformación cancerosa de las células.
ESTRUCTURA CELULAR
Las células pertenecen a una de estas dos
categorías: procariota o eucariota. En las células
procariotas, propias de bacterias y arquebacterias,
todos los componentes, incluyendo el ADN, se
disponen libremente en el interior de la célula, en
un compartimento único. Las células eucariotas que
forman las plantas, los animales, los hongos y las
restantes formas de vida, contienen numerosos
compartimentos, u orgánulos, en su interior. El ADN
de las células eucariotas está contenido dentro de
un orgánulo especial denominado núcleo, que
funciona como centro de mando de la célula y
biblioteca donde se almacena la información. El
término procariota procede de palabras griegas que
significan ‘antes del núcleo’ o ‘prenúcleo’, mientras
que eucariota significa ‘núcleo verdadero’.
CELULA PROCARIOTA
Las células procariotas están entre las de menor
tamaño de todas las células; por lo general miden
entre 1 y 10 µ, aunque algunas solo alcanzan menos
de una micra de diámetro. Alrededor de 100 células
procariotas típicas alineadas en fila tienen el mismo
grosor que la página de un libro. Estas células, que
pueden tener forma de bastón, esfera o espiral,
están rodeadas por una pared celular protectora.
Igual que la mayoría de las células, las células
procariotas viven en un medio acuoso. La presencia
de poros diminutos en la pared celular permite que
el agua y las sustancias disueltas en ella, como el
oxígeno, entren en la célula. Esos poros permiten
también la salida de los desechos.
CELULA EUCARIOTA ANIMAL
Las células eucariotas tienen, por lo general, un
tamaño diez veces mayor que las procariotas. No
tienen pared celular y la membrana plasmática
forma, en las células animales, el límite externo de
la célula. Con un diseño similar al de la membrana
plasmática de las células procariotas, esta
membrana separa la célula de su ambiente exterior
y regula el paso de sustancias a través de ella.
CELULA EUCARIOTA VEGETAL
Las células vegetales tienen todos los orgánulos
presentes en las células animales y poseen además
algunos adicionales, como los cloroplastos, una
vacuola central y una pared celular. Los cloroplastos
tienen forma alargada y su estructura es aún más
compleja que la mitocondrial: además de las dos
membranas de la envoltura, que no se repliegan
formando crestas, los cloroplastos tienen
numerosos sacos internos aplanados en forma de
disco (denominados tilacoides), interconectados
entre sí, que están formados por una membrana
que encierra el pigmento verde llamado clorofila.
En los cloroplastos tiene lugar la fotosíntesis, un
proceso que utiliza la energía solar para producir
moléculas ricas en energía (ATP) y moléculas
reductoras (NADPH) que se utilizan para sintetizar
hidratos de carbono a partir de dióxido de carbono,
liberando oxígeno. La fotosíntesis es un proceso
vital ya que constituye una fuente importante del
oxígeno fotosintético que necesitan la mayor parte
de los organismos, incluidas las plantas, para vivir.
FUNCIONES CELULARES
Para mantenerse vivas, las células tienen que ser
capaces de realizar distintas funciones. Algunas
células necesitan moverse y la mayoría deben de
ser capaces también de dividirse. Todas las células
deben mantener una concentración adecuada de
sustancias químicas en su citoplasma, deben ingerir
alimento y utilizarlo para fabricar energía, reciclar
moléculas, eliminar desechos y construir proteínas.
Las células también deben tener capacidad para
responder a los cambios que suceden en el medio
externo.
01.-Movimiento:
Muchos organismos unicelulares nadan, se deslizan
o reptan en busca de alimento o para escapar de
sus enemigos. Los organismos acuáticos se
desplazan a menudo mediante un flagelo, una
prolongación delgada formada por microtúbulos y
proteínas accesorias. Por ejemplo, numerosas
bacterias tienen uno, dos o varios flagelos que rotan
como hélices propulsoras para desplazar al
organismo. Algunos organismos eucariotas
unicelulares, como la euglena, tienen también un
flagelo, pero más largo y grueso que el flagelo
procariota. El flagelo eucariota funciona mediante
ondulaciones como un látigo. En animales
superiores, el espermatozoide utiliza un flagelo para
alcanzar el óvulo femenino y fecundarlo.
02.-Nutricion:
La nutrición es una de las funciones vitales que
permite a las células obtener la materia y energía
que necesitan. Sin embargo, unas células son
capaces de fabricar su propia materia orgánica
mientras que otras necesitan incorporar materia
orgánica ya elaborada. Por eso, según la forma de
nutrición las células se pueden clasificar en dos
grandes grupos: autótrofas y heterótrofas.
Las células autótrofas fabrican la materia orgánica
que necesitan a partir de nutrientes inorgánicos
utilizando una fuente de energía externa. Las
células autótrofas pueden ser fotosintéticas
(realizan la fotosíntesis y utilizan como fuente de
energía la luz solar), o quimiosintéticas o
quimiolitótrofas (obtienen la energía que necesitan
para fabricar sus compuestos orgánicos de la
oxidación de moléculas inorgánicas).
Las células heterótrofas obtienen la energía que
necesitan de la oxidación de moléculas orgánicas
que incorporan. Todos los animales, hongos,
protozoos y algunas bacterias están formados por
células heterótrofas.
03.-Energia:
Las células necesitan energía para realizar distintas
funciones como moverse, fabricar y destruir
moléculas, y transportar sustancias a través de la
membrana celular. Independientemente de cómo
las células hayan conseguido la materia orgánica,
una parte de esa materia se utiliza para conseguir
energía en forma de moléculas de ATP, el
combustible celular; la oxidación de la materia
orgánica libera energía que se utiliza para sintetizar
ATP. La respiración celular es un conjunto de
reacciones que permiten a las células obtener
energía de las moléculas orgánicas al combinar sus
átomos de carbono e hidrógeno con el oxígeno para
producir dióxido de carbono y agua.
04.-Sintesis de Proteínas:
Una célula típica contiene alrededor de 30.000
proteínas. Muchas de estas proteínas son enzimas
necesarias para construir las moléculas principales
utilizadas por las células (carbohidratos, lípidos,
proteínas y ácidos nucleicos) o para ayudar a la
degradación de esas moléculas una vez que han
sido utilizadas. Otras proteínas forman parte de la
estructura de la célula, por ejemplo, de la
membrana plasmática y de los ribosomas. En los
animales, las proteínas actúan también como
hormonas y anticuerpos, y funcionan como
sistemas de transporte para llevar otras moléculas
por todo el cuerpo. Por ejemplo, la hemoglobina es
una proteína que transporta oxígeno en los glóbulos
rojos sanguíneos. La demanda celular de proteínas
es continua.
05.-Division Celular:
La mayoría de las células se dividen en algún
momento de su ciclo vital y otras lo hacen docenas
de veces antes de morir. Los organismos dependen
de la división celular para la reproducción,
crecimiento, reparación y sustitución de las células
dañadas o envejecidas. Hay tres tipos de división
celular: fisión binaria, mitosis y meiosis. La fisión
binaria, el método utilizado por las células
procariotas, da lugar a dos células hijas idénticas a
la célula original. El proceso de mitosis es más
complicado, aunque también da lugar a dos células
genéticamente idénticas a la original y es el
empleado por muchos organismos eucariotas
unicelulares para reproducirse. Los organismos
pluricelulares utilizan la mitosis para crecer, reparar
y sustituir las células dañadas. Por ejemplo, se
calcula que en el cuerpo humano se producen 25
millones de divisiones celulares mitóticas cada
segundo para reemplazar a las células que han
completado sus ciclos vitales normales. Las células
del hígado, intestino y piel, por ejemplo, pueden ser
sustituidas cada pocos días.
El tipo de división celular necesaria para llevar a
cabo la reproducción sexual es la meiosis. Los
organismos con reproducción sexual son las algas
marinas, los hongos, las plantas y los animales
(incluyendo, por supuesto, al ser humano). La
meiosis difiere de la mitosis en que la división
celular comienza con una célula que tiene una
dotación completa de cromosomas y termina con la
formación de células gameto, como
espermatozoides y óvulos, que solo tienen la mitad
de la dotación cromosómica. Cuando el
espermatozoide y el óvulo se unen durante la
fecundación, la célula resultante de esta unión,
denominada cigoto, contiene la dotación completa
de cromosomas.
CONSTITUCION DE LA CELULA
El estudio elemental de la célula hace ver que esta
unidad es diferente en los animales y vegetales.
Ambas tienen en común la presencia de membrana
celular, citoplasma, núcleo y otras estructuras
llamadas orgánulos. Sin embargo, los orgánulos que
cada una posee son diferentes. En las células
animales se presentan mitocondrias, ribosomas,
retículo endoplasmático, aparato de Golgi y
centriolos, mientras que las células vegetales
contienen cloroplastos, vacuola permanente y
pared celular.
a).-Mitocondrias: diminuta estructura celular de
doble membrana responsable de la conversión de
nutrientes en el compuesto rico en energía
trifosfato de adenosina (ATP), que actúa como
combustible celular. Por esta función que
desempeñan, llamada respiración, se dice que las
mitocondrias son el motor de la célula.
b).-Ribosomas: corpúsculo celular que utiliza las
instrucciones genéticas contenidas en el ácido
ribonucleico (ARN) para enlazar secuencias
específicas de aminoácidos y formar así proteínas.
c).-Retículo Endoplasmatico: sistema de
membranas que fabrica y transporta materiales
dentro de las células con núcleo (células
eucariotas). El RE está formado por túbulos
ramificados limitados por membrana y sacos
aplanados que se extienden por todo el citoplasma
(contenido celular externo al núcleo) y se conectan
con la doble membrana que envuelve al núcleo.
d).-Aparato de Golgi: parte diferenciada del sistema
de membranas en el interior celular, que se
encuentra tanto en las células animales como en las
vegetales. La principal función del aparato de Golgi
es la secreción de las proteínas producidas en los
polisomas del RE rugoso, las cuales se incorporan
por la cara ‘cis’ procedentes de las vesículas de
transición.
e).-Cloroplastos: orgánulo citoplasmático, que se
encuentra en las células vegetales y en las de las
algas, donde se lleva a cabo la fotosíntesis (proceso
que permite la transformación de energía luminosa
en energía química).
f).-Vacuola: cavidad rodeada por una membrana
que se encuentra en el citoplasma de las células,
principalmente de las vegetales.
g).-Pared Celular: es una estructura formada por
varios compuestos químicos; el más importante de
ellos es la celulosa (un polímero formado por
moléculas del azúcar glucosa). Las moléculas de
celulosa se unen en fibrillas, que constituyen el
bastidor estructural de la pared.
NORMAS DE BIOSEGURIDAD GENERALES CON
ENFOQUE AL LABORATORIO DE ANATOMIA
PATOLOGICA
Medidas de Bioseguridad:
“Conjunto de medidas preventivas que tienen como
objetivo proteger la salud y la seguridad del
personal, de los usuarios y de la comunidad, frente
a diferentes riesgos producidos por agentes
biológicos, físicos, químicos y mecánicos”. La
bioseguridad es un componente de la calidad de
atención. Es un deber brindar los servicios de salud
con garantía y seguridad. Es responsabilidad de
todo el cumplimiento de las normas.
Riesgos de Contaminación:
El gran riesgo se debe a que se trabaja con
enfermos o infectados; puede haber contaminación
con sangre, otros fluidos o material contaminado;
se usan equipos y sustancias potencialmente
dañinas; se producen residuos y desechos
peligrosos.
a).-Riesgos Biológicos: Los microorganismos: virus,
bacterias, hongos y otros, que se encuentran en los
tejidos y fluidos de la persona infectada. También
pueden encontrarse en todo lo que nos rodea y
tanto los microorganismos externos como los que
forman parte de la flora normal, pueden causar
enfermedades al romperse el equilibrio dinámico
establecido. Por tanto para evitar el contagio de
enfermedades, se debe interrumpir el proceso de
transmisión de los microorganismos.
b).-Riesgos Químicos.
c).-Riesgos Físicos.
d).-Riesgos Mecánicos.
Residuos Biocontaminados:
Aquellos contaminados con agentes infecciosos, o
que pueden contener altas concentraciones de
microorganismos con potencial riesgo para la
persona que entre en contacto con ellos. Eje: Restos
biológicos, sangre y hemoderivados, otros fluidos
corporales, restos quirúrgicos anatomo-patológicos,
cadáveres de animales contaminados y todo
material potencialmente contaminado con los
mismos.
Manejo de los Residuos:
a).- Se usará diferentes recipientes y utilizando el
código de colores, para residuos contaminados y
especiales se empleará la técnica del doble
embolsado, además se deben rotular utilizando
símbolos de acuerdo a la naturaleza del residuo.
b).-Los residuos compuestos por tejidos, órganos,
fetos, piezas anatómicas deberán ser embalados
con todas las medidas de precaución, para ser
llevados a una fosa común, al cementerio o a su
incineración.
c).- Las personas que manipulen residuos y
desechos debe ser previamente capacitada y recibir
controles médicos periódicos.
Normas Generales:
.- Las áreas donde hay peligro de contaminación o
riesgo de contaminar deben estar restringidas para
personas que no laboran en las mismas y el tránsito
debe reducirse al mínimo indispensable.
.- El personal de salud debe tener una ropa de
trabajo (uniforme) que sólo será usado dentro del
establecimiento y de ninguna manera fuera de él.
Deben guardarse en roperos distintos.
.-Lavado de manos: Es una actividad obligatoria de
comprobada eficacia en la prevención de
transmisión de infecciones. Debe realizarse según la
técnica específica para cada actividad y con la
frecuencia que se requiera.
.- Es obligatorio el uso de guantes estériles para
toda actividad que involucre potencial contacto con
fluidos de pacientes, material contaminado o
material que podrían causar daño.
.- Usar obligatoriamente ropa y equipos de
protección adecuados para cada actividad. Tales
como: Máscaras, mascarillas, gorros, cascos,
anteojos, viseras protectoras, delantal
impermeable, mandilones, botas de tela o de
material impermeable, protectores para radiación y
otros.
.- Para el manejo, manipulación, transporte y
almacenamiento de sustancias, equipos y
materiales potencialmente dañinos, el personal
debe ser previamente adiestrado y durante su
trabajo debe utilizar obligatoriamente la protección
adecuada.
. - Nunca doblar, romper o encasquetar agujas
descartables. Colocarlas y tratarlas hasta su
disposición final, en un recipiente especial y nunca
mezclarlas con los desechos comunes.
.- Los instrumentos afilados reutilizables, colocarlos
en recipientes de metal.
.- Protegerse con guantes gruesos en el
procesamiento previo a la esterilización.
BIBLIOGRAFIA:
Enciclopedia ENCARTA PREMIUM 2009.
www.HistoScientifics.com