Вы находитесь на странице: 1из 7

BIOSENSORS БИОСЕНСОРЫ КАК НОВЫЙ ТИП

AS A NOVEL TYPE
OF ANALYTICAL TOOLS АНАЛИТИЧЕСКИХ УСТРОЙСТВ
H. C. BUDNIKOV
É. ä. ÅìÑçàäéÇ
ä‡Á‡ÌÒÍËÈ „ÓÒÛ‰‡ÒÚ‚ÂÌÌ˚È ÛÌË‚ÂÒËÚÂÚ
Biosensors as a novel type
of tools giving response
on individual components ÇÇÖÑÖçàÖ
in analytes have been dis-
Биологические методы позволяют судить о при-
cussed in context of deve- сутствии какого-либо вещества или его количест-
loping modern analytical венном содержании по характеру и величине его
воздействия на определенный организм, взятый
chemistry methods known
как индикаторный. Аналитическим сигналом при
as biological ones. The этом является изменение состояния жизнедеятель-
importance of biosensors ности этого организма, то есть его реакция на раз-
дражитель, которым, например, могут быть токси-
in solution of medical and
канты среды обитания или какие-либо другие
environmental problems биологически активные соединения, вызывающие
has been outlined. нарушение жизненных функций индикаторного
организма или его гибель. К биологическим мето-
дам относят и биохимические методы, в частности
ÅËÓÒÂÌÒÓ˚ Í‡Í ÌÓ‚˚È ферментативные, а также различные методики, на-
ÚËÔ ÛÒÚÓÈÒÚ‚, ‰‡˛˘ËÈ пример индикаторные трубки на основе ферментов
и других биологических материалов. Интересно,
ÓÚÍÎËÍ Ì‡ ÔËÒÛÚÒÚ‚Ë что механизм получения информации о составе ка-
Ë̉˂ˉۇθÌ˚ı ÍÓÏÔÓ- кого-либо объекта с помощью этих методов и уст-
ÌÂÌÚÓ‚ ‚ ‡Ì‡ÎËÁËÛÂÏ˚ı ройств моделирует процесс в живой природе, что
особенно важно при анализе объектов биологичес-
Ó·˙ÂÍÚ‡ı, ‡ÒÒÏÓÚÂÌ˚ кого происхождения.
‚ ÍÓÌÚÂÍÒÚ ‡Á‚ËÚËfl
Известно, что ферменты – это биологические
ÏÂÚÓ‰Ó‚ ‡Ì‡ÎËÚ˘ÂÒÍÓÈ катализаторы, обладающие ярко выраженной спо-
ıËÏËË, ̇Á˚‚‡ÂÏ˚ı ·ËÓ- собностью избирательно катализировать многие
Îӄ˘ÂÒÍËÏË. éÚϘÂ̇ химические превращения как в живой клетке, так и
вне организма. Замечательные свойства ферментов
Óθ ·ËÓÒÂÌÒÓÓ‚ ‚ Â- давно привлекали внимание исследователей, в том
¯ÂÌËË ÔÓ·ÎÂÏ Ï‰ˈË- числе и аналитиков, но практическому применению
Ì˚ Ë Óı‡Ì˚ ÓÍÛʇ˛- ферментов, например для аналитических целей,
препятствовали прежде всего малая доступность
˘ÂÈ Ò‰˚. чистых ферментов, неустойчивость во времени их
растворов, препаратов при хранении и воздействии
на них различных факторов (тепловых, химичес-
ких), невозможность многократного использова-
ния одной порции фермента из-за сложности отде-
ления его от других компонентов раствора, высокая
стоимость очищенных препаратов. Однако выход
из положения вскоре был найден, и появилась воз-
можность использования каталитических свойств
© ÅÛ‰ÌËÍÓ‚ É.ä., 1996

ферментов вне их связи с живым организмом и воз-


можность сохранения этой способности в течение
длительного времени практически без изменения.
Достижения в этой области биохимии и энзимоло-
гии дали начало развитию нового направления
аналитической химии – безреагентных методов
анализа, основанных на использовании различных
биохимических сенсоров.

26 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹12, 1996


óíé íÄäéÖ ÅàéëÖçëéê Существует большое разнообразие физических
трансдьюсеров: электрохимические, спектроскопи-
Под термином “биосенсор” следует понимать ческие, термические, пьезоэлектрические, транс-
устройство, в котором чувствительный слой, содер- дьюсеры на поверхностных акустических волнах и
жащий биологический материал: ферменты, ткани, т.п. На схеме 1 приведен перечень преобразователей,
бактерии, дрожжи, антигены/антитела, липосомы, используемых в биосенсорах. В настоящее время
органеллы, рецепторы, ДНК, непосредственно реа- наибольшее распространение получили электрохи-
гирующий на присутствие определяемого компонен- мические преобразователи. Одни из них генерируют
та, генерирует сигнал, функционально связанный с потенциал на специальном электроде, на поверх-
концентрацией этого компонента. Конструктивно ность которого нанесен слой биоматериала (рис. 1),
биосенсор представляет собой комбинированное другие генерируют электрический ток реакции про-
устройство, состоящее из двух преобразователей, дукта превращения определяемого вещества на по-
или трансдьюсеров, – биохимического и физичес- верхности электрода, вызванного биоматериалом.
кого, находящихся в тесном контакте друг с другом. Другими словами, существуют потенцио- и амперо-
На рис. 1 приведена общая схема такого устройства. метрические биосенсоры. Если физический преоб-
Биохимический преобразователь, или биотрансдью- разователь использует изменение светопоглощения
сер, выполняет функцию биологического элемента в области биослоя, то такой биосенсор называется,
распознавания, преобразуя определяемый компо- например, оптоволоконным, поскольку измеряемый
нент, а точнее, информацию о химических связях в сигнал будет передаваться измерительному прибору
физическое или химическое свойство или сигнал, а по оптическому волокну. Соответствующий фи-
физический преобразователь это свойство фиксирует зический преобразователь по аналогии с электро-
с помощью специальной аппаратуры. В данном слу- дом называют оптродом. По названию преобразо-
чае реализуется принципиально новый способ полу- вателя (схема 1) можно сделать вывод о характере
чения информации о химическом составе раствора.
Наличие в устройстве биоматериала с уникальными
свойствами позволяет с высокой селективностью оп- Целые организмы
ределять нужные соединения в сложной по составу
смеси, не прибегая ни к каким дополнительным опе- Живые ткани
рациям, связанным с использованием других реаген- Клетки
тов, концентрированием и т. д. (отсюда и название – Органеллы
безреагентные методы анализа). Биослой Мембраны клеток
(биологический
элемент Ферменты (индивидуальные)
распознавания) Препараты ферментов
(неочищенные)
6 7
Рецепторы
Схема ферментативной реакции Антитела
E+S ES E+P
Нуклеиновые кислоты
E – фермент, S – субстрат, ES – проме-
жуточный комплекс, P – продукт (фиксиру-
ется физическим преобразователем)
Потенциомет-
2 рические
Амперометри-
ческие
Электроды
5 Кондуктометри-
1
4 ческие
3 Физический Импедансомет-
преобразователь рические
Определяемое Оптические
вещество S
(оптроды)
Акустические
Рис. 1. Принципиальная схема биохимического Тепловые
сенсора: 1 – исследуемый раствор, 2 – корпус
биосенсора, 3 – полупроницаемая мембрана (для Механические
механического удержания биослоя), 4 – слой био-
материала, 5 – физический преобразователь
(электрод, пьезокристалл, оптоволоконный мате- Схема 1. Типы чувствительных элементов рас-
риал и т.д.), 6 – усилитель сигнала, 7 – самописец познавания (биослой) и физических преобразо-
(дисплей, цифровой или световой указатель). вателей в сенсорах.

ÅìÑçàäéÇ É.ä. ÅàéëÖçëéêõ äÄä çéÇõâ íàè ÄçÄãàíàóÖëäàï ìëíêéâëíÇ 27


физического свойства, которое измеряется аппа- пленку пористого полимера, либо ковалентно, то
ратно, причем, как правило, при таком измерении есть с помощью химических связей, “пришивают”
используется микропроцессорная техника (рис. 1), к какой-либо подложке. При этом фермент закреп-
позволяющая сделать устройство достаточно ком- ляется, перестает быть подвижным, не вымывается
пактным. из биослоя, а его каталитическое действие сохраня-
ется. На рис. 2 дано схематическое изображение ме-
Первое упоминание об аналитических устройст-
тодов иммобилизации ферментов в биосенсорах.
вах на основе ферментов или ферментсодержащих
Как видно на рис. 2, при иммобилизации ферментов
материалов появилось сравнительно недавно, в 60-х
годах нашего столетия. Затем в обиход вошло поня- используют разнообразные способы их закрепле-
тие “биосенсор” или “биочип”. Это важное собы- ния, в том числе и комбинированные. Биосенсоры
тие в науке. Здесь отражаются глубокие причины, могут быть сконструированы и по так называемой
связанные с так называемыми интеграционно-син- объемной технологии, при которой индивидуаль-
тетическими процессами в науке, приводящими к ные компоненты, перечисленные на схеме (рис. 1),
появлению новых знаний. Функционально, таким составляют как бы единый физический ансамбль.
образом, биосенсоры сопоставлены с датчиками Хотя такие биосенсоры в настоящее время и приме-
живого организма – биорецепторами, способными няются на практике, они имеют недостатки, есть
преобразовывать все типы сигналов, поступающих трудности и при их изготовлении. В самом деле,
из окружающей среды, в электрические. послойное покрытие электрода или какого-либо
твердого преобразователя мембраной должно быть
воспроизводимо. Соответствующая технология фор-
äÄä êÄÅéíÄÖí ÅàéëÖçëéê мирования поверхности должна допускать возмож-
ность изготовления достаточно миниатюрного элек-
Принцип работы биосенсора достаточно прост.
трода. Кроме того, биосенсоры со сравнительно
Определяемое вещество диффундирует через полу-
толстыми мембранами дают в итоге большее время
проницаемую мембрану в тонкий слой биокатали-
затора, в котором и протекает ферментативная ре- отклика, имеются сложности и при их градуировке.
акция по схеме, указанной на рис. 1. Поскольку в Успехи в области развития средств микроэлектро-
данном случае продукт ферментативной реакции ники подтолкнули разработчиков конструкций био-
определяется с помощью электрода, на поверхнос- сенсоров к новым решениям. Оказалось перспек-
ти которого закреплен фермент, то такое устройство тивным использовать так называемую планарную
еще называют ферментным электродом. Таким об- технологию (фотолитографию, полупроводнико-
разом, определения “биосенсор” и “ферментный вую технику покрытий и т. д.), по которой можно
электрод” в данном случае синонимы. изготовить так называемый биочип, объединяющий

Следует отметить, что характер ферментатив-


ной реакции зависит от природы фермента, типа
его каталитического действия. Среди ферментов E E
можно выделить оксидоредуктазы, осуществляющие E E
реакции окисления и восстановления, гидролазы,
E E
катализирующие гидролиз, трансферазы, вызываю- E
щие перенос ацильных, гликозидных и т.п. остатков E E
и т.д. Многие ферменты сейчас доступны, их чистые E
препараты включены в каталоги ряда фирм-произ-
а б в
водителей. О том, как “работает” фермент и каким
закономерностям подчиняется ферментативный ка-
E
тализ, рассказано в статьях В.И. Иванова “Как ра-
ботают ферменты” (Соросовский Образовательный E E E E
Журнал. 1996. № 9), Н.Н. Чернова “Ферменты в E
клетке и пробирке” (Там же. № 5) и Т.Т. Березова E E E
“Применение ферментов в медицине” (Там же. № 3).
E
Важно отметить, что при конструировании биосен-
сора увеличение продолжительности действия фер- г д
мента становится основной задачей. Дело в том, что
нативный фермент сохраняет свои свойства лишь в
течение относительно короткого времени. Поэтому Рис. 2. Схематическое изображение способов
была разработана операция так называемой иммо- иммобилизации ферментов в биосенсорах: а –
билизации фермента. В ходе иммобилизации с по- ковалентное связывание с поверхностью элект-
рода, б – сшивание, в – адсорбция на носителе
мощью специальных реагентов фермент “закрепля- (электроде), г – ковалентное связывание и при-
ют” либо на поверхности адсорбентов, например шивание к подложке (электроду), д – захват носи-
силикагеля, угля или целлюлозы, либо вводят в телем (в пленке полимера).

28 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹12, 1996


сенсорную систему, трансдьюсер, аналого-цифро- ным трансдьюсером (рис. 3). Ток восстановления
вой преобразователь и микропроцессор для измере- кислорода на платиновом катоде прямо пропор-
ния аналитического сигнала и расчета результатов ционален концентрации кислорода. В присутствии
анализа. Хотя такие биочипы могут тиражировать- субстрата (например, глюкозы в крови, взятой для
ся, основной проблемой в данном случае будет яв- анализа) ферментативная реакция понижает кон-
ляться воспроизводимость состояния, то есть мик- центрацию O2 . Таким образом, ток восстановления
роструктуры поверхности с нанесенным слоем кислорода уменьшается пропорционально концент-
биологически активного фермента. Трудной задачей рации субстрата
представляется в данном случае и оптимизация та-
Глюкозоксидаза
кой структуры в отличие от объемной технологии, Глюкоза + O2
реализованной присутствием в конструкции сен- Глюкозоксидаза
сорной части нескольких молекулярных слоев. Тем Глюконовая кислота + H2O2
не менее “молекулярный дизайн” при конструиро- Преимущество данного типа биосенсора, осно-
вании биосенсоров будущего может составить ре- ванного на кислородном электроде Кларка, состоит
альную конкуренцию объемному их варианту. прежде всего в его высокой селективности. Избира-
тельность подобных биосенсоров определяется вы-
сокой специфичностью глюкозоксидазы и природой
ÉÑÖ èêàåÖçüûí ÅàéëÖçëéêõ
электрохимической реакции, в которой участвуют
компоненты ферментативного процесса. В целом
По-видимому, самым распространенным в на- класс ферментов – оксидаз является высокоспеци-
стоящее время является амперометрический био- фичным по отношению к определяемым субстра-
сенсор на основе иммобилизованной глюкозокси- там. Системы же на основе небиологического пре-
дазы для определения сахара в крови. Исторически образователя, напротив, не столь селективны, как
этот биосенсор является самым “древним”. В каче- этого бы хотелось, что обусловлено рядом причин.
стве физического трансдьюсера в нем использован Тем не менее имеются ограничения и по примене-
так называемый электрод Кларка. В настоящее вре- нию данной конструкции биосенсора, обусловлен-
мя для определения глюкозы создано наибольшее ные влиянием кислорода и других посторонних ве-
число различных биосенсоров, что связано с необ- ществ, способных проникать через биослой (точнее,
ходимостью контроля за содержанием сахара в био- через мембрану), а потому задача совершенствова-
логических жидкостях, например в крови, при диа- ния конструкций биосенсоров на глюкозу пред-
гностировании и лечении некоторых заболеваний, ставляется весьма актуальной.
прежде всего диабета. Схема функционирования
биосенсора на глюкозу в принципе типична и для Один из возможных путей такого усовершенст-
других амперометрических биосенсоров с аналогич- вования заключается в следующем. Если изменить

7 8

Схема ферментативной реакции


На катоде (физический трансдьюсер):
I тип O2 + 4e + 2H2O 4OH–
био- Ферментативная реакция
сенсора (биологический трансдьюсер):
2
Глюкозоксидаза
S(red) + O2 + H2O S(ox) + H2O2
(Глюкоза) (Глюконовая
II тип кислота)
6 био-
сенсора На аноде: H2O2 O2 + 2H+ + 2e
1 5
4
3

Субстрат S
(сахар)

Рис. 3. Схема работы глюкозного биосенсора: 1 – исследуемый раствор, 2 – корпус биосенсора, 3 – внешняя
мембрана, 4 – слой глюкозоксидазы, 5 – внутренняя газопроницаемая мембрана, 6 – платиновый электрод (про-
волока) для восстановления кислорода, 7 – усилитель сигнала, 8 – самописец (дисплей, цифровой или световой
указатель и т.д.).

ÅìÑçàäéÇ É.ä. ÅàéëÖçëéêõ äÄä çéÇõâ íàè ÄçÄãàíàóÖëäàï ìëíêéâëíÇ 29


полярность включения электрода-трансдьюсера в ÅàéëÖçëéêõ çÄ éëçéÇÖ ÑêìÉàï
глюкозном биосенсоре на противоположную, то ÅàéåÄíÖêàÄãéÇ
есть платиновый катод Кларка сделать анодом, то
при потенциале +0,6 В он становится совершенно Многие ферменты дороги и быстро теряют свою
нечувствительным к кислороду, но зато дает отклик активность, использование выполненных на их ос-
нове биосенсоров не может быть экономически це-
на пероксид водорода, который при данном значе-
лесообразным. Поэтому применение бактерий, мик-
нии потенциала окисляется до воды. Чувствитель-
роорганизмов и биологических тканей различного
ность такого электрода к пероксиду водорода оказа- происхождения более предпочтительно, поскольку
лась привлекательной, а поскольку H2O2 образуется в данном случае отпадает необходимость в предва-
как продукт ферментативной реакции, по его со- рительном получении и очистке ферментов. К суще-
держанию можно сделать вывод о концентрации, ственным недостаткам таких биосенсоров можно
например глюкозы в различных объектах. Другой отнести низкую селективность определения вслед-
способ улучшения селективности биосенсоров и ус- ствие того, что клетки живых организмов фактиче-
транения помех от посторонних примесей состоит в ски являются источником самых разнообразных
использовании различных мембран – пленок, пре- ферментов. Помимо этого время отклика биосенсо-
дотвращающих их попадание непосредственно на ров на основе тканей и микроорганизмов может
электрод-преобразователь. При этом внутренняя быть достаточно большим, что также уменьшает их
мембрана выполняет функцию защиты от примесей, практическую ценность. Тем не менее в последнее
а внешняя мембрана пропускает субстрат в биослой. время наблюдается повышенный интерес к разра-
Имеются и другие способы повышения избиратель- ботке конструкций электродов, содержащих не са-
ности физических преобразователей, в данном слу- ми ферменты в очищенном виде, а их первозданные
чае электродов. Детальное рассмотрение всех воз- источники – биологические материалы. Так, было
можных путей решения этой задачи недоступно в установлено, что тканевые срезы в биосенсорах мо-
небольшой статье. Однако необходимо отметить, гут выполнять функцию источников каталитичес-
что с помощью специальных приемов, называемых кой активности. Например, создан биосенсор на ас-
химической модификацией, можно до такой степе- корбиновую кислоту, состоящий из упомянутого
электрода Кларка и пластины кожуры огурца или
ни изменить свойства поверхности электрода, что
тыквы, служащей источником аскорбиноксидазы.
он будет “глухим” к большинству примесей и, на- Активность фермента в такой природной матрице
против, чувствительным к компонентам фермента- достаточна для проведения 50-80 определений ас-
тивной реакции. корбиновой кислоты в различных объектах. Уста-
новлено, что пластины биоматериала могут хра-
Биосенсоры, основанные на кислородном элек- ниться без потери активности в течение года в 50%-
троде как физическом трансдьюсере, позволяют ном глицерине.
определять разнообразные субстраты ферментов:
кроме глюкозы – лактаты, L-аминокислоты, сали- Аналогичный подход использовали при созда-
цилаты, оксалаты, пируваты, то есть анионы соот- нии конструкции биосенсора на допамин – важ-
ветствующих карбоновых кислот. В литературе опи- нейший биогенный амин, участвующий в регуля-
саны другие биосенсоры подобного типа, ряд ции деятельности мозга. В данном биосенсоре
которых применяется на практике. ткань плода банана была иммобилизована на по-
верхности кислородного электрода. В рассмотрен-
С помощью биосенсоров можно решить и об- ных случаях биоматериалы создают “естественное
ратную задачу: при некоторой определенной кон- окружение” для ферментов, способствующее ста-
центрации субстрата оценивать активность собст- билизации их активности. Тканевые материалы до-
венно фермента по величине измеряемого сигнала статочно долго сохраняют высокую специфич-
(потенциала, тока и т. д.). Из описания работы фер- ность, что очень важно для биосенсора, тогда как
выделенные ферменты в тех же условиях быстро
мента следует, что измеряемый сигнал зависит не
разрушаются. Известны биосенсоры, в которых ис-
только от концентрации субстрата, но и от катали-
пользован цельный фрагмент ткани печени быка,
тической активности биологического преобразова- являющийся носителем фермента каталазы и им-
теля, то есть фермента. Такое использование био- мобилизованный на кислородном электроде. Фер-
сенсоров позволяет измерить активность большого ментативное действие каталазы, проявляющееся в
числа ферментов, например в крови. Оценка актив- катализе реакции разложения пероксида водорода,
ности ферментов, связанных с сердечной деятель- используют в этом случае для создания соответству-
ностью, таких, как аспартамаминотрансфераза, ющего электрода. Разработан биосенсор на основе
креатинкиназа, позволяет в клинических условиях кожуры кабачка или огурца и кислородного элект-
оценивать глубину инфаркта миокарда. Измерения рода для определения L-аскорбиновой кислоты во
активности фермента амилазы используются в пе- фруктовых соках, функционирующий подобно ана-
диатрии. логичному типу электрода, уже рассмотренного

30 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹12, 1996


выше. Тем не менее, несмотря на успехи в развитии èêéÅãÖåõ à èÖêëèÖäíàÇõ êÄáÇàíàü
биосенсоров на основе биологических материалов,
надежность их функционирования все еще остается Концепция распознавания определяемого ве-
спорной. Еще один пример конструкции биосен- щества с помощью иммобилизованного биоматери-
сорного устройства относится к ферментному элек- ала оказалась плодотворной. В итоге исследователи
троду на основе микроорганизмов – дрожжей, по- приобрели новое средство, позволяющее быстро
мещаемых между двумя пористыми мембранами. получить достоверную информацию о состоянии
Конструкция электрода в данном случае в основ- окружающей среды и здоровья человека. Некото-
ном идентична показанной на рис. 1. Биосенсор на рые биосенсоры уже получают распространение для
основе иммобилизованных дрожжей и кислородно- индивидуального использования в домашних ап-
го электрода позволяет определять этанол и мета- течках (чаще всего для определения сахара в кро-
нол, например в промышленных стоках. ви). Интерес к биосенсорам непрерывно растет.
В 1996 году состоялись четыре крупные междуна-
Интерес представляют биосенсоры на основе родные конференции по биосенсорам.
иммобилизованных на мембране микроорганизмов,
служащих элементом так называемого микробного Если иметь в виду все разнообразие ферментов,
сенсора. В качестве примера таких устройств можно присутствующих и действующих в живом организме
упомянуть амперометрический сенсор на аммиак и являющихся потенциальными биологическими
(в сточных водах) на основе иммобилизованных преобразователями, то следует отметить, что суще-
нитрифицирующих бактерий и кислородного элек- ствующее сегодня число конструкций биосенсоров
трода Кларка. Такой биосенсор полезен при ре- может быть увеличено в десятки и даже сотни раз.
шении вопросов охраны окружающей среды, и в Биосенсоры получают распространение в биотех-
частности при контроле степени очистки промыш- нологии. Хотя здесь и встречаются трудности, свя-
ленных стоков. занные с невысокой термической устойчивостью
предложенных устройств, приводящей к дезактива-
Можно отметить также использование биосен- ции биослоя, есть основания полагать, что данный
соров на основе гидролаз – ферментов, являющих- недостаток будет в скором времени преодолен. Так,
ся катализаторами гидролитического расщепления полагают, что для увеличения срока службы биосен-
субстратов. Эти биосенсоры предназначаются, как соров в обозначенных выше условиях можно исполь-
правило, для эколого-аналитического контроля ос- зовать ферменты, выделенные из термофильных
таточных количеств пестицидов класса фосфорор- бактерий и одноклеточных водорослей – микроорга-
ганических соединений, а также для определения низмов, устойчивых к действию высоких темпера-
тур. Определенные трудности представляют собой
некоторых ОВ. Действие таких биосенсоров может
также проблемы градуировки биосенсоров и надеж-
быть основано на следующих реакциях. Если при
ности их показаний. Для улучшения последнего по-
гидролизе какого-либо субстрата ферментом класса
казателя, в частности, предлагается использовать
гидролаз образуется электрохимически активное
мультисенсорную систему, состоящую из ряда био-
соединение, то, контролируя содержание последне-
чипов. Для получения определенной “емкости” на-
го, можно контролировать ферментативную реак- дежных данных производится расчет необходимого
цию так же, как в предыдущих случаях. Однако в числа таких датчиков. Однако в целом так называе-
присутствии веществ, являющихся ингибиторами, мые метрологические характеристики биосенсоров
активность фермента уменьшается, что и обнару- вполне приемлемы. Относительное стандартное
живается по сигналу, регистрируемому электродом. отклонение определяемой концентрации не хуже
Интересно отметить высокую чувствительность та- 10–12 %, притом что нижняя граница определяемых
кого определения: эффект изменения активности содержаний достигает 10−10–10−15 моль/л. Некоторые
фермента доступен для измерения уже при действии биосенсоры работают по принципу да–нет, что
ультраследовых количеств ингибитора – на уровне вполне приемлемо, когда решается вопрос о при-
пико- и фемтограмм, то есть 10−12–10−15 моль/л. На сутствии ультрамалых количеств высокотоксичных
кафедре аналитической химии Казанского госу- веществ в объектах окружающей среды. Если опре-
дарственного университета в течение почти 15 лет деляемые компоненты находятся в сложной смеси
проводятся исследования в области создания био- или матрице или же близки по своим свойствам, то
сенсора на основе иммобилизованной холинэсте- при анализе используют хроматографические ме-
разы – одного из представителей класса гидролаз и тоды разделения. Контроль за разделением осуще-
стационарного ртутного электрода как физическо- ствляют с помощью системы детекторов на основе
го трансдьюсера для определения некоторых пес- биосенсоров. И здесь получены поразительные ре-
тицидов и других органических токсикантов в объ- зультаты: разделяют и количественно определяют
ектах окружающей среды и пищевых продуктах. оптические активные изомеры, различные сахара
Достигнута поразительно высокая чувствитель- (лактозу, фруктозу, глюкозу и т.д.), сложные по
ность определения. структуре биологически активные соединения и т.п.

ÅìÑçàäéÇ É.ä. ÅàéëÖçëéêõ äÄä çéÇõâ íàè ÄçÄãàíàóÖëäàï ìëíêéâëíÇ 31


Вот один из недавних примеров разработки био- ãàíÖêÄíìêÄ
сенсоров, основанных на использовании природ-
1. Биосенсоры: основы и приложения / Под ред. Э. Тер-
ного хеморецептора. Хеморецептор, извлеченный нера и др. М.: Мир, 1992. 614 с.
из чувствительных антенн (органелл) голубого мор- 2. Будников Г.К., Майстренко В.Н., Муринов Ю.И.
ского краба, был прикреплен к ультрамикроэлект- Вольтамперометрия с модифицированными и ультра-
роду, измеряющему потенциал. В результате был микроэлектродами. М.: Наука, 1994. 239 с.
изготовлен новый тип потенциометрического де- 3. Будников Г.К., Медянцева Э.П., Бабкина С.С. // Успе-
тектора, чрезвычайно быстро реагирующего на ни- хи химии. 1991. Т. 60. С. 881.
чтожные изменения состава среды, в которую он
погружен. Сам голубой краб очень чувствителен к * * *
следам тяжелых металлов и живет только в чистей-
Герман Константинович Будников, доктор хими-
шей морской воде. ческих наук, профессор кафедры аналитической
химии Казанского государственного университета,
На очереди создание биосенсоров, заменяющих член-корреспондент Академии естественных наук
рецепторы живых организмов, что позволит создать РФ, академик Международной академии высшей
“искусственные органы” обоняния и вкуса, а также школы. Область научных интересов: электроана-
применить указанные разработки для возможно бо- литическая химия, химически модифицированные
лее точной и информативной диагностики ряда за- электроды, амперометрические биосенсоры для
эколого-аналитического контроля. Автор более
болеваний. Несомненно, что в ближайшем буду- 550 публикаций, из которых 11 книг по проблемам
щем в этой смежной области биологии и химии электроаналитики и преподаванию аналитической
следует ожидать новых открытий. химии.

32 ëéêéëéÇëäàâ éÅêÄáéÇÄíÖãúçõâ ÜìêçÄã, ‹12, 1996