Historia de la Microbiología

Milton Wainwright
Universidad de Sheffield
Joshua Lederbergl
La Universidad Rockefeller
I. Observaciones sin aplicación
II. La controversia de generación espontánea
III. Herramientas del Comercio
IV. Microorganismos como agentes causales de
Enfermedad
V. Quimioterapia y antibiosis
VI. Metabolismo microbiano y aplicado
Microbiología
VII. Nutrición, bioquímica comparada y
Otros aspectos del metabolismo
VIII. Genética microbiana
IX. Virus y lisogenia: el plásmido
Concepto
X. Virología
XI. Micología y Protozoología,
Cenicientas de microbiología
XII. Período moderno
nismo de la naturaleza y etiología de la enfermedad, con la
resultado que la mayoría de las enfermedades mortales tradicionales
ahora han sido conquistados Avances similares
se han hecho en el uso de microorganismos en
industria. y más recientemente se están haciendo intentos
aplicar nuestros conocimientos de ecología microbiana y
fisiología para ayudar a resolver problemas ambientales. UN
dramático desarrollo y ampliación del tema
de la microbiología ha tenido lugar desde la Segunda Guerra Mundial.
Genética microbiana, biología molecular y biotecnología
en particular, han florecido. Es ser
esperaba que estos desarrollos fueran suficientemente oportunos
para permitirnos conquistar el último espectro de
enfermedad que enfrentamos, a saber, el SIDA. Cualquier cuenta de
la historia de una disciplina es. por su propia naturaleza, un personal
vista: con suerte, lo que sigue incluye todo el
principales aspectos destacados en el desarrollo de nuestra ciencia.
Glosario
Antibióticos Agentes antimicrobianos producidos b)
organismos vivos
Genética bacteriana Estudio de elementos genéticos y
hereditario en bacterias
Quimioterapia Uso sistémico de agentes químicos
para tratar infecciones microbianas
Biología molecular Ciencia relacionada con el ADN
y la síntesis de proteínas de organismos vivos
Anticuerpos monoclonales Anticuerpos específicos producidos
por clones in vitro de células B hibridizadas
con células cancerosas
AUNQUE LOS MICROORGANISMOS se observaron por primera vez
utilizando microscopios primitivos ya en el
finales de los años 1600, la ciencia de la microbiología es apenas 150
años. En este momento, los principales desarrollos han
hecho en nuestra comprensión de fisiología microbiana).
ecología y sistemática. Este conocimiento
se ha aplicado con éxito para ampliar nuestro conocimiento
El período que se aproxima a 1930-1950 fue un 'vicennium'
de una transformación extraordinaria de la microbiología,
justo antes de la publicación histórica en
la estructura del ADN por Watson y Crick en 1953.
Tenemos hitos importantes para el vicennium:
Jordan y Falk (1928) y "Sistema de Bacteriología"
(1930) en su inicio son revisiones magistrales de
conocimiento y pensamiento previo. Dubos (1945) y
Burner (1945) anticipa la era moderna. y Werkman
y Wilson (1951) y Gunsalus y Stanier
(1962) documentan su progreso temprano y continuo en
detalle monográfico. La AnnunI Review of Micrubiology,
comenzando en 1947 (y varias otras
Reseñas) y Bacteriological Reviews. comenzando en
1937, ofrecen instantáneas invaluables de lo contemporáneo
lo último. Estos trabajos pueden ser consultados
para muchas de las citas bibliográficas pertinentes,
y se repetirán explícitamente aquí solo cuando
importante para el argumento
Esta cuenta se centrará en la biología fundamental
de microbios y prestar escasa atención a continuar
avances en el aislamiento de agentes etiológicos de
enfermedad y de vacunas y procedimientos de inmunodiagnóstico.
La mayoría de los agentes de bacterias comunes
las infecciones se han caracterizado por "1930", pero
IFor el período de 1930.
Enciclopedia de Microbiología, Volumen 2
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cualquier forma se almacenan
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el vicennio se distinguió b! trabajo importante
sobre la clasificación de bacterias entéricas (diarrea)
y sobre todo. por el aislamiento y nev, 'stud! de
virus y rickettsia con métodos como el cultivo
virus en el pollo), o (Kilbourne, 1987).
I. Observaciones sin
Solicitud
Manifestaciones macroscópicas de microbial gro \\ th
tales como bacterias y algas 4limes ha \ .e sido recagnized
desde la antigüedad Sin embargo. es \\ como el holandés
microscopista van Leeuljenhoek (Fig. I) \ + ho proporcionado
las primeras observaciones de bacterias en el microscopio
nivel. van Leeuisenhoek. un pañero en Delft.
Holanda. muele su propio lente y haz microscopios
\ + zith lentes de longitud focal corta gi \, aumentos de ing.
de betw.een x.30 y x266. Dr \ carte \ tenía
anteriormente describió una forma de microscopio cruda similar.
pero la calidad de su lenbe \ no permitió \\
para aumentos suficientes para las bacterias de la abeja. \'un
Leeuwenhoek. a diferencia de. usó sus microscopios caseros
(Fig. 2) para examinar los microorganismos en
agua de lluvia. bien agua y agua de mar, así como agua
infundido con granos de pimienta. Sus observaciones 1% er e
remitido a la Royal Society en Londres en octubre
1676 y fueron publicados posteriormente en la Sociedad
Philosopi ~ icr ~ l T ~~rr ~ strc ~ riouIsn. 1683. van Leeuwenhoek
contribuyó una segunda carta a la Sociedad describiendo
sus diversas investigaciones microscópicas. incluso
observaciones novedosas sobre bacterias presentes en la caspa de los dientes. Publicado
en 1683. Estas observaciones incluyen los primeros dibujos de bacterias que han
aparecido. Estos dibujos son válidos hasta el momento y muestran claramente que
Leeuwenhoek observó bacilos. estreptococos.y hombre \; otras formas características de
bacteria. Lee Lee, los meticulosos dibujos de enhoek también ella, protozoos como Vo ~
ric, c ~ lr /, VO / UO. \ -, y C '// gl ~) /~tr.Acerca de A la vez, Huygens también informó
observaciones sobre varios protozoos de vida libre. incluyendo especies de P ~ i /, rr / llc,
c, i, l / rl. Van Leeuwcnhoekalso gana crédito por describir el primer protozoo parasitario.
cuando en 1681 observó sus heces fecales durante un episodio de diarrea y describió
grandes poblaciones de lo que más tarde se conocería, aunque también se observaron
las células de levadura en la cerveza, las primeras ilustraciones de microscopía
filamentosa microscópica. hongos fueron proporcionados por Robert Hooke, nuevamente
en una carta a la Royal Society. esta vez en 1667 Sin embargo. los primeros moldes de
trabajo tempranos aparecieron en el siglo siguiente cuando el botánico de Tucán. Pietro
Antonio hlicheli describe unas 900 especies. incluyendo géneros importantes como Asper-
gillrrs y Marco, -. También vale la pena señalar que los moldes han sido utilizados desde
la antigüedad para tratar las infecciones, un enfoque llamado terapia de molde, que se
basó en la medicina popular y no en un fundamento científico. Porque la conexión entre
los microorganismos y la fermentación o enfermedad nunca se hizo durante este período.
las observaciones hechas por los primeros microscopistas tuvieron sorprendentemente
poco impacto en los asuntos humanos. A pesar de esto. Cicerón y el erudito renacentista
Fracastorio habían sugerido anteriormente que la fiebre podría ser causada por animales
diminutos. describieron colectivamente como conragium vivum, pero pasarían muchos
siglos antes de que se reconociera el papel de los microorganismos en la enfermedad, y
eventualmente reemplazarían la visión de que la enfermedad era el resultado de olores u
otros "miasmas" invisibles. II. La controversia sobre la generación espontánea La opinión
de que la vida surge de los objetos inanimados se vinculó ampliamente con las épocas
antiguas hasta tiempos muy recientes: Van Helmont incluso les proporciona una receta
para la producción de ratones. La tenacidad con que se prolonga la generación
espontánea se destaca por el hecho de H. CharltonBastian. uno de los principales
defensores del concepto, fallecido en 1915, estaba totalmente convencido de su mérito. Al
parecer, los fundamentos científicos fueron proporcionados para justificar la generación
espontánea de Needham y Buffalo en 1745. Spallanzani desechó rápidamente estas
ideas al año siguiente. Los desarrollos posteriores tuvieron que esperar el trabajo de
Shwann. quien en 1837 demostró que "el aire que se había calentado y luego se había
enfriado no había cambiado un caldo de carne que se había hervido". Sin embargo, a
mediados del siglo xvn, el concepto de generación espontánea se mantuvo con tenacidad.
Luego, en 1858, Pouchet publicó un artículo titulado "Proto-organismos. . . Nacido
espontáneamente en Artificial Air y OxygenGas. "La Academia Francesa de Ciencias se
conmovió con la obra de Pouchet para ofrecer un premio a cualquiera que pudiera
resolver la controversia de una vez por todas. A pesar del desaliento de sus amigos que
advirtieron contra la controversia, Louis Pasteur ( Fig. 3) se dio cuenta de que si la
microbiología fuera a avanzar como una ciencia racional, la idea de que los
microorganismos surgieran espontáneamente tendría que ser derrotada
experimentalmente. Los estudios de Pasteur fueron publicados en una memoria en 1861 y
tomaron sin esfuerzo el premio ofrecido por la Academia. En primer lugar, demostró que
cuando se filtra el aire a través de algodón, se retiene una gran cantidad de
microorganismos. Pasteur luego repitió con éxito el trabajo de Schwann, pero sus
experimentos más famosos y exitosos incluyeron el uso de frascos de cisne, con los que
demostró que las infusiones esterilizadas con calor podían mantenerse estériles en un
matraz abierto siempre que la parte abierta fuera tortuosa para permitir que cualquier
microorganismo se asentara en el lado de los tubos antes de llegar al líquido. A menudo
se supone que los experimentos de Pasteur llevaron a la derrota de la teoría de la
generación espontánea, pero esto está lejos de ser cierto. Puch. por un lado, se mantuvo
convencido de que los experimentos de Pasteur no derrotaron el concepto. La
controversia continuó durante el siguiente cuarto de década o más. Los defensores de las
opiniones de Pasteur incluyeron científicos británicos como Huxley, William Roberts.
JohnTyndall, y el estadounidense Jeffries Wyman. Los principales contraargumentos
fueron proporcionados por la capa más dedicada de los heterogeneistas importantes, H.
Charlton Bastian. Cómo esta retraguardia de Bastian y otros casi llevaron el día es
notable. Hasta ahora, los experimentos realizados por el matemático y físico John Tyndall
sobre la existencia de formas estables al calor de ciertas bacterias (cuya eliminación
involucró el proceso de calentamiento y reposo repetido, conocido como
desnaturalización) finalmente convencieron al establecimiento científico del error de los
argumentos de Bastian. Bastian summe d e su visión de la generación espontánea en su
libro Télie EL'OriorrofLifr (publicado hasta 1905). y luego murió en 1915. Todavía es un
creyente confirmado. III. Herramientas del oficio La ciencia de la microbiología necesitaba
dos desarrollos importantes para asegurar su progreso. La primera implicaba mejoras en
microscopios y medios asociados por los cuales los microorganismos podían visualizarse
mejor. La segunda implicaba desarrollar métodos para cultivar microorganismos,
liberando así irónicamente a la ciencia de la total dependencia de la observación basada
en microscopios. Los microscopios compuestos comenzaron a aparecer en Alemania a
fines del siglo XVI. . y durante el siglo siguiente, Robert Hooke desarrolló instrumentos
con aumentos de 3-500x. Aunque Hooke realizó importantes avances en la observación
de microorganismos, también reconoció la estructura celular en una variedad de formas
de vida. Sus microscopios, como los de sus contemporáneos. sufrió de
cromaticaberración (por lo que un anillo de luz de color evita el enfoque preciso en objetos
pequeños como las bacterias). No fue hasta principios del siglo XIX, cuando los lentes
acromáticos fueron presentados por el profesor Amici de la Universidad de Medina. que
se resolvió este problema, lo que permitió que el microscopio de luz se desarrollara en
todo su potencial. El siguiente gran avance fue la introducción de procedimientos de
tinción. que permitió la visualización fina de microorganismos para ocurrir. La tinción de
especímenes histológicos fue llevada a cabo por primera vez por el botánico alemán
Ferdinand Cohn en 1849, su trabajo se basó en tintes vegetales como el carmín y la
hematoxilina. En 1877. Robert Koch (Fig. 4) usaba azul de metileno para teñir las
bacterias. un proceso en el que desarrolló las técnicas estándar de preparación de
películas secas. y con la ayuda de cubreobjetos estaba preparando preparaciones
permanentes. En 1882, Kochhad logró teñir el bacilo de la tuberculosis con el azul de
metilo + ene, empleando calor para estimular la mancha de penetrar en el sobre ceroso.
Dos años después. el patólogo danés Hans Christian Gramin presentó su famosa
mancha. lo que permitió que las bacterias se caracterizasen como gram-positivas si
conservaban el colorante violeta o gram-negativo si no lo hacían. Esta distinción se
correlacionó más tarde con las diferencias en las características bioquímicas y
morfológicas. Al permitir que las bacterias se clasifiquen en las dos agrupaciones amplias
que todavía se usan en la actualidad, pronto se utilizarán técnicas de tinción diferencial. lo
que permitió a Frederick Loeffler en 1890 demostrar la presencia de flagelos bacterianos.
Durante este período, se produjeron desarrollos rápidos en los métodos de identificación.
Figura 4 Robert Koch (l & l & 1YlOJ. ^. _ _ _, _ _ _ _ _ "." L "-." -. -, _. -. .) El microscopio
óptico se desarrolló con el tiempo hasta sus límites teóricos y un mayor progreso en la
microscopía tuvo que esperar la aparición del microscopio ultravioleta en 1919 (que por
primera vez permitió la aparición de ciertos virus elementales). ser visto). Luego, en 1934,
el físico belga Marton construyó el primer microscopio electrónico, que logró aumentos de
2-300,000x, comparado con 1200x y 2500x logrado por los microscopios de luz y
ultravioleta, respectivamente. Otro desarrollo importante en la tecnología del microscopio
llegó en 1965 con la introducción del microscopio electrónico de barrido. El primer medio
semisintético diseñado para cultivar bacterias fue introducido en 1860 por Pasteurand y
consistía en sales de amonio, ceniza de levadura. andcandy azúcar. Antes de esto, los
caldos de carne se habían usado para el medio de crecimiento bacteriano, un enfoque
que persistió hasta bien entrado el siglo en los laboratorios dedicados a la bacteriología
médica. Los micólogos también solían confiar en medios indefinidos como el agar de
papadextrosa, aunque la introducción del medio CzapekDox finalmente proporcionó un
sustrato definido ideal sobre el cual se podían cultivar los mohos. En 1872, Ferdinand
Cohn desarrolló la idea del medio basal, al cual varias adiciones podrían hacer como se
requiera. Estos primeros medios estuvieron siempre basados en líquidos y no fue hasta la
introducción de la gelatina y luego del agar en 1882 que el uso de los medios sólidos se
volvió común. La última introducción de los medios de gel de sílice permitieron que se
hicieran rápidos avances en el estudio de las bacterias quimiolitótrofas tales como los
tiooscicrilos de tiobacilos. En 1887, un desarrollo simple y prosaico revolucionó la
microbiología cuando Petri. uno de los asistentes de Koch, presentó la placa de Petri.
Esta simple invención proporcionó un medio mucho más versátil de cultivo de
microorganismos que el uso de los frascos abultados empleados anteriormente. A partir
de 1898 en adelante, la escuela holandesa de microbiología de Beijerinck desarrolló el
arte de la cultura de enriquecimiento. que condujo al aislamiento de bacterias nitrificantes
y celulolíticas. Los estudios sobre gasgangrene durante la primera guerra alentaron a
McIntoshand Fildes a desarrollar el tarro anaeróbico. Luego se desarrolló una amplia
gama de medios selectivos que implican enmiendas tales como caldo de tetrationato,
telurita. y penicilina cruda. Aleta aliado. la introducción de los medios de comunicación
centrales después de la guerra liberó al microbiólogo y a sus técnicos del theticium de la
preparación interna de los medios. Los miólogos, por ejemplo, ya no tienen que pasar
horas pelando y hervir patatas cuando el agar de dextrosa de patata está disponible listo
para rehidratarse, esterilizarse y usarse. Ninguno de los desarrollos anteriores en la
preparación del medio habría sido útil sin la introducción de un medio eficiente de
esterilización. La colega de Pasteur, Chamberland, desarrolló autoclaves, esencialmente
grandes ollas a presión, en 1884. Más recientemente, los rayos gamma y la
oxiesterilización de etileno han permitido la introducción de plásticos esterilizados en
fábrica, incluidas placas de Petri, otro desarrollo relativamente simple que, sin embargo,
ha tenido un marcado efecto estimulante sobre el progreso reciente de la microbiología.
[Ver la SIRENIZACIÓN.] IV. Microorganismos como agentes causales de la enfermedad
En 1788, estalló una epidemia de viruela en el condado inglés de Gloucestershire. Edward
Jenner, un médico de campo y alumno del famoso anatomista John Hunter, decidió tratar
de evitar que sus pacientes contraigan la enfermedad empleando el método estándar de
inoculación con una dosis leve de la infección. Jenner, que había sufrido bajo las
hemorragias e inoculadores en su juventud, era él mismo inmune a la viruela. Su objetivo
era hacer que el método de la inoculación tradicional fuera lo más racional y confiable
posible. Mientras estaba en sus rondas regulares, se sorprendió al descubrir que los
pacientes que ya habían sufrido la viruela vacuna no reaccionaron de la manera normal a
la inoculación con la viruela. Aunque Jenner estaba al tanto de la vieja historia de las
esposas que sugería que la viruela vacuna protegía contra la enfermedad, no fue hasta
1796 casi un cuarto de siglo después de haber escuchado por primera vez estas
sugerencias. que decidió actuar. Su primera inoculación experimental involucró a un niño
local llamado James Phipps, quien, después de recibir la viruela bovina, se volvió inmune
a la viruela. En junio de 1798, Jenner presentó un documento sobre su trabajo a la Royal
Society, y el efecto fue notable: en unos pocos años, la vacunación era algo común. A
pesar del avance de Jenner, todavía no había una explicación convincente para explicar
la aparición y propagación de infecciones, y por a mediados de la década de 1800 aún era
poco lo que se podía hacer para combatir las enfermedades infecciosas. La fiebre
puerperal o puerperal era una plaga particularmente terrible que afectaba a todos los
hospitales acostados en Europa. Durante un solo424 History of Microbiologymonth en
1856 en un hospital de París. 3 1 madres recientes murieron de la infección. Viena de la
década de 1830 tenía una reputación particularmente mala para esta enfermedad. a pesar
de tener uno de los hospitales más iluminados de Europa. Fue aquí que el médico
húngaro, IgnazSemmelweiss se unió al personal de la clínica de mentira en el Hospital
General de Viena en 1844. En sus primeros pocos meses de práctica, escuchó otra
historia de esposas. esta asociando la alta tasa de mortalidad por fiebre infantil
encontrada en la división de enseñanza del hospital con la alta frecuencia de exámenes
por doctores y sus estudiantes. Semmelweiss comenzó a recopilar estadísticas y pronto
se dio cuenta de que las tasas más altas de infección y mortalidad ocurrían en la clínica
de enseñanza. Esta información lo llevó a suponer que el contagio estaba siendo
transmitido por los médicos y estudiantes de medicina. muchos de los cuales examinaron
los úteros de pacientes sin lavarse las manos. incluso después de venir directamente de
Mortuaryduty. Semmelvveiss sugirió que cualquiera que examine a los pacientes primero
debe lavarse las manos en agua con cloro. Los resultados de este simple remedio
tuvieron un éxito fenomenal. con tasas de mortalidad reducidas de alrededor de 11 a 3%
dentro de 1 año. Semmel-Weiss tardo en escribir un relato de su trabajo, pero en 1857
proporciono un estudio extenso y altamente economico de su trabajo. que fracasó por
completo para causar impresión. Eventualmente. sin embargo. la visión de que la
infección se extendió por alguna partícula orgánica finalmente fue ampliamente aceptada.
aunque la naturaleza exacta de tales partículas era desconocida. El efecto de esta
ignorancia fue devastador: durante la Guerra de Crimea de 1853-1826. por ejemplo, un
regimiento único de la Armada británica perdió 2162 hombres. con 1713 muriendo no de
heridas o los efectos del trauma, sino por enfermedad. Las infames enfermedades
hospitalarias de la erisipela. pyemia.septicemia. y la gangrena hizo barrios quirúrgicos en
las noches de sufrimiento y muerte. Las causas y los mecanismos de transmisión de la
enfermedad permanecieron esencialmente desconocidos. Por 1865. sin embargo. Pasteur
había concluido que la enfermedad debe estar en el aire. una visión que galvanizó al
cirujano inglés Joseph Lister en acción. Lister razonó que podría reducir la mortalidad
debido a la sepsis al cubrir las heridas con vendajes que contienen sustancias químicas
que mataron a estos aeromodelos sin impedir la entrada de aire. Sabía que el ácido
carbólico se había usado recientemente para esterilizar la salobre. y con la ayuda del
químico Andersonhe obtuvo un suministro del líquido oscuro de olor dulce que
comúnmente se llamaba creosota alemana.Lister publicó sus hallazgos en 71re Lctrzcet
en 1867. En contraste con los esfuerzos de Semmelweiss. El trabajo de Lister atrajo la
atención inmediata: la era de la cirugía antiséptica pronto comenzó. Una vez que se dio
cuenta de que los organismos microscópicos presentes en el aire eran responsables de la
transmisión de la enfermedad. el siguiente desarrollo importante fue aislar estos
organismos y luego demostrar de manera concluyente su papel como agentes causales
de cualquier enfermedad. Todavía. algunas autoridades continuaron argumentando que
los microorganismos no son la causa de la enfermedad, sino que simplemente crecieron
en el sitio de infección debilitada. En mayo de 1882. Robert Koch desestimó este punto de
vista cuando anunció el descubrimiento del bacilo tuberculoso, y la búsqueda de otros
microorganismos causantes de enfermedades cobró impulso. La introducción por parte de
Kok de sus famosos postulados estableció finalmente medios para demostrar de manera
concluyente la implicación de un microorganismo como agente causal de una
enfermedad. y el camino abierto a la prevención y cura de la enfermedad. A continuación,
se hicieron importantes desarrollos en nuestra comprensión de la inmunidad. Los
primeros intentos racionales de producir inmunidad activa artificial fueron realizados por
Pasteur en 1880 durante su trabajo sobre el cólera aviar. Por1882. el biólogo ruso
Metchnikoff había hecho las primeras observaciones de la inmunidad celular y refirió el
término fagocito. En 1891, Ehrlich había distinguido entre la inmunidad activa y la pasiva.
Y 6 años más tarde, Kraus publicó el primer informe de reacciones de precipitación
cuando se añadieron los sueros inmunes a filtrados libres de células de cultivos
bacterianos homólogos. Casi 250 millones de personas se vacunaron contra la
tuberculosis con el bacilo Calmette-Guerin ( Vacuna BCG. sin embargo, es su creador,
Charles Calmette. sigue siendo una figura en gran parte desconocida. Calmette, discípulo
de Pasteur, fue el primer director del Instituto Pasteur de Lille. Francia, y más tarde se
convirtió en Asistente del Director del Instituto Pasteur en Paris. Con Guerin. se dispuso a
preparar una vacuna protectora contra la tuberculosis. Pasó 13 años desarrollando un
virus atenuado. que al no recuperar su virulencia perdida se mantuvo estable y seguro.
Esta vacuna BCG. se usó por primera vez en 1921. pero debido a la considerable
resistencia a su uso no fue ampliamente aceptado hasta después de la muerte de
Calmette en 1933. Los desarrollos modernos en inmunología incluyen el trabajo de F. Ma
& t-lane Burnet. quien en 1957 publicó su hipótesis de selección clonal. Historia de la
Microbiología. Quimioterapia y antibiosis El origen y el desarrollo temprano del concepto
de quimioterapia es algo inusual, ya que puede acreditarse para el trabajo de un hombre,
el químico alemán Paul Ehrlich. Ehrlich tuvo la visión de aplicar su conocimiento de la
tinción específica de bacterias para buscar compuestos químicos que inhibirían el
crecimiento de bacterias patógenas en la orina. En 1891, se demostró que el azul de
metileno era útil para el tratamiento de la malaria, pero debido a que este colorante no
mostraba ninguna ventaja sobre la quinina, no se utilizó ampliamente. Por 1902. Ehrlich
estaba concentrando su atención en los compuestos orgánicos de arsénico. que esperaba
vencer la tripanosomiasis experimental en ratones. En este punto, él y su asistente de
bacteriología japonés Shiga descubrieron que el atoxil (arsanilato de sodio) era ineficaz
contra la tripanosomiasis de ratón. Resultó ser un error algo inexplicable cuando el
bacteriólogo británico Thomas demostró pronto que el atoxilo era de hecho
extremadamente eficaz contra la parasomiasis en ratones. Un segundo error igualmente
inexplicable se produjo cuando Schaudinn y Hoffman llegaron a la conclusión de que
Treponemn Palididurn era un protozoario. Irónicamente, este error resultó productivo
porque apuntaba a la probabilidad de que el agente antiprotozoal atoxyl. o un compuesto
similar. podría curar la sífilis. En 1906. Robert Koch usó atoxyl para tratar la
tripanosomiasis en humanos. Este fue el año en el que Ehrlich se convirtió en director del
recientemente inaugurado Instituto George Speyer, que se dedicó a la investigación de la
quimioterapia. Fue aquí donde se desarrolló el primer salvarsan quimioterapéutico
importante. Salvarsan fue descubierto por primera vez en 1907 y se descubrió
inicialmente que era activo contra el sistema experimental de tripanosomiasissy del ratón.
Luego, en 1909. un joven científico japonés. Hata. se unió al laboratorio de Ehrlich.
trayendo consigo un sistema que había desarrollado para la transmisión artificial de 7.
prrl / ic / irrnr en conejos. Para su evidente sorpresa. Hata descubrió que salvarsan era
realmente eficaz contra la sífilis en ratones: en 1909. La droga estaba demostrando ser
espectacularmente exitosa en el tratamiento de la enfermedad en humanos. Tras la
muerte de Ehrlich en 1915, la investigación continuó en la quimioterapia. pero se progresó
poco, con la excepción de que en 1932 Atebrin quedó disponible como la primera droga
sintética para uso profiláctico contra la malaria. La primera quimioterapia avanzada no
llegó en 1935, cuando Domag descubrió el efecto antibacteriano del dyeprontosil rojo.
Este compuesto tuvo un efecto dramático sobre la neumonía barbular en humanos,
reduciendo las tasas de mortalidad en dos tercios. En el mismo año de su descubrimiento,
el científico francés Trefouel demostró que el ingrediente activo del prontosil no era el
cromóforo, sino el sulfonamida moedad tsulfanilamida). Las sulfonamidas se usaron
ampliamente con éxito para tratar infecciones bacterianas desde mediados de la década
de 1930 hasta mediados de la década siguiente. El concepto de quimioterapia alcanzó su
apogeo con las sulfonamidas. pero tales compuestos weresoon eclipsados por la llegada
del primer penicilina andthen una gama de otros antibiotics.Antibiotics (cf. Waksman.
MacFarlane. Wilson) tuvo un comienzo espectacular con el famoso penicilina discoveryof
por Fleming en 1928, un molde sporehaving accidentalmente presentada en placas de
agar estafilococos sin semillas La historia del descubrimiento de la penicilina por
Alexander Fleming es probablemente la más conocida en la historia de la medicina,
aunque mucho de lo que se ha escrito sobre el tema está en el mundo de los cuentos de
hadas. El punto importante acerca de la observación inicial de Fleming, hecho a fines del
verano de 1928, era que representaba un fenómeno extremadamente raro, no
simplemente un ejemplo de antagonismo microbiano. pero una de las lisis bacteriana
provocada por el moho contaminante. Probablemente, al principio pensó que había
descubierto una variante fúngica de lisozima. una sustancia lítica que había encontrado
previamente en varios fluidos corporales. Fue este fenómeno lítico el que distinguió las
observaciones de Flaming de las numerosas observaciones del antagonismo microbiano
que se habían reportado desde la época de Pastuer. Es probable que haya observado
antagonismo microbiano. en lugar de lisis, Fleming habría ignorado sus observaciones.
considerándolos como un ejemplo de fenómenos comunes que tienen poco interés. sin
embargo. entendió el significado de lo que él observó. Pronto demostró que el
contaminante producía la sustancia antibacteriana en Culturebroth. que llamó penicilina.
Entonces. con la ayuda de varios colegas cirujanos. Fleming utilizó filtrados ricos en
penicilina para tratar las infecciones bacterianas superficiales. Desafortunadamente, sin
mucho éxito. Las primeras curas documentadas con penicilina se lograron (usando caldos
crudos) por un antiguo estudiante de Fleming, Cecil George Paine, que trabajó en la
Universidad de Sheffield. En su primer trabajo famoso sobre la penicilina, Fleming
describió sus propiedades y su espectro antibacteriano. lo sugirió. o una sustancia similar.
might426 History of Microbiology encontrar un uso en medicina. Desafortunadamente, ni
él ni sus colegas pudieron purificar la penicilina, un primer paso obvio necesario para su
introducción exitosa en la medicina. Vale la pena señalar, sin embargo, que Fleming no
fue el único en ser incapaz de alcanzar este paso esencial de purificación: otros intentos
como los realizados por el famoso bioquímico Harold Raistrick fracasaron. Los cuadernos
de Flaming muestran que a pesar de no poder purificar la penicilina. continuó trabajando
en penicilina cruda a lo largo de la década de 1930. durante ese tiempo también intentó
aislar otros microorganismos capaces de producir productos antibacterianos.
Desafortunadamente, este trabajo no fue publicado y el potencial médico de la antibioisis
permaneció subdesarrollado hasta el descubrimiento de la gramicidina en 1939. Esta
sustancia, que fue descubierta por René Dubos, fue desafortunadamente demasiado
tóxica para uso intravenoso: por lo tanto. estaba limitado a su uso en varias infecciones
superficiales. Aproximadamente en la época en que se estaba desarrollando por primera
vez la gramicidina, Florey, Chain y Heatley lograron mejorar la penicilina y demostrar sus
notables efectos antibacterianos cuando se usan sistemáticamente. El aislamiento del
antibiótico de los cultivos crudos fue una tarea química formidable, pero Floreyand Chain
lo llevó a cabo exitosamente a fines de la década de 1930 en Inglaterra. La producción
industrial de penicilina fue seguida como un proyecto conjunto de guerra entre los Estados
Unidos y Gran Bretaña. Para que esto sea factible se requiere un esfuerzo sustancial en
la mejora de la deformación. que fue conducido. Sin embargo. a lo largo de líneas
genéticas empíricas en lugar de racionales (Wilson 1976). Sin embargo, este fue el
precursor de la moderna industria de fermentación y biotecnología: sus antecedentes
habían sido la producción de butanol y acetona como disolventes de municiones durante
la Primera Guerra Mundial y la producción de ácido cítrico en tiempos de paz mediante
una fermentación de moho. La introducción de la penicilina en la medicina como el primer
antibiótico exitoso estimuló la búsqueda de compuestos similares. Un programa de
cribado de antibióticos particularmente exitoso, dedicado a los actinomicetos del suelo,
fue llevado a cabo por Selman Waksman y sus estudiantes en Rutgers. El primer gran
producto de esta investigación. actinomytin.was. como la gramicidina. demasiado tóxico
para ser de uso médico como un antibiótico. aunque luego se usó como agente
anticancerígeno. Waksman y R. J. Dubos habían estado estudiando las interrelaciones
bioquímicas y ecológicas de las microbiotas del suelo. El papel de los antibióticos
secretados en la competencia ecológica proporcionó una base racional para buscar estas
sustancias. Tyorhricin (Dubos, 1939; véase Crease, 1989) fue el primer antibiótico
clínicamente aplicable, pero su toxicidad sistémica limitó su aplicación al tratamiento
tópico. En manos de Waksman, el mismo paradigma condujo al descubrimiento de la
estreptomicina (1944), que cuando se usa junto con el ácido periódico-Schiff e isoniazida
ayudaron a vencer la tuberculosis. A partir de entonces, una corriente continua de nuevos
antibióticos con un beneficio humano incalculable. Pasaría algún tiempo antes de que se
empezara a entender el modo de acción de los antibióticos (véase Gottlieb y Shaw, 1967)
y de permitir que los principios racionales ayuden en su mejora. Aunque Waksman recibió
el Premio Nobel de Estreptomicina, su triunfo se vio empañado por su tratamiento tardío.
del codescubridor del antibiótico, AlbertSchatz. Schatz, uno de los estudiantes graduados
de Waksman. demandó exitosamente a Waksman y Rutgers por una parte de las regalías
por estreptomicina. Sin embargo, Hislater intenta ganar una parte del Premio Nobel por su
trabajo (fue autor principal de los primeros fondos de estreptomicina y coasidente con
Waksman de las patentes de estreptomicina). sin éxito. La estromomicina pronto fue
seguida por antibióticos como el cloranfenicol, la neomicina, la tetraciclina y el primer
antibiótico antifúngico eficaz, la nistatina (descubierta por Elizabeth Hazen y Rachel
Brown). Surgieron penicilinas resistentes a la penicilinasa como la meticilina, seguidas de
penicilinas semisintéticas y, finalmente, ampicilina de compuestos de amplio espectro.VI.
Metabolismo microbiano y Microbiología AplicadaDesde el principio, fueron los desarrollos
en el estudio del metabolismo microbiano. estrechamente asociado con los intentos de
utilizar microorganismos con fines industriales, una tendencia que continúa en la
biotecnología moderna. No es sorprendente encontrar que el primer documento científico
dedicado al metabolismo microbiano (que aparece en 18.57c) también se menciona como
la primera cita en microbiología aplicada o biotecnología. De nuevo, Pasteur fue el
responsable de este desarrollo, y el artículo se dedicó a una explicación de las causas de
los repetidos fracasos de las concesiones industriales de alcohol. Este fue un documento
importante para dos razones: primero, porque sentó las bases de la visión, que luego fue
ampliamente validada. ese microbiano. ".,. . ^ __ .. ".,,. _. La actividad fue responsable de
muchas fermentaciones de importancia industrial, y. segundo. porque introdujo un
tratamiento cuantitativo de los datos sobre crecimiento microbiano y metabolismo. El
aficionado también abordó los problemas asociados con la microbiología de la elaboración
del vino. Entre las sugerencias que hizo fue un método para mejorar las cualidades de
mantenimiento del vino, calentándolo a 68 ° C durante 10 min. seguido de un enfriamiento
rápido, un proceso posteriormente denominado pasteurización. En 1872, el trabajo de
Pasteur se había desarrollado hasta el punto en que Ferdinand Cohn podía sugerir que
los microorganismos juegan un papel importante en la biología, el apego a los elementos
responsables de la fertilidad del suelo y el funcionamiento adecuado de los ecosistemas
naturales. Los primeros frutos de la teoría de John llegaron en 1888 cuando el
microbiólogo holandés Beijerinck aisló la bacteria simbiótica N-fijadora Rlli: obi /, rn de los
nódulos de la raíz de las legumbres. Durante estos estudios. Beijerinck también desarrolló
la técnica de enriquecimiento para el aislamiento de microorganismos, un enfoque que
posteriormente fue refinado y desarrollado por la escuela holandesa de microbiólogos.
Muchos de los siguientes avances en metabolismo microbiano se asociaron con estudios
sobre microbiología del suelo y su asociación con la fertilidad del suelo. En 1889,
Winogradsky describió las bacterias autótrofas de hierro y azufre. y en el año siguiente, el
Azorobrrcter que fija la N de vida libre y la nitritooxidación de la bacteria Nitrobrlcro.
Aunque muchas de las supuestas culturas puras de Wingradsky parecen haberse
contaminado, su trabajo fue sin embargo importante porque fue el primero en apreciar el
concepto de quimioautotrofia y relacionar esta estrategia de crecimiento con los
principales ciclos naturales. Era una falta de apreciación de este concepto lo que había
obstaculizado el trabajo de otros interesados en procesos como la nitrificación. A pesar de
esto. sin embargo, el químico del suelo hizo un trabajo importante sobre los factores que
influyen en este proceso en los suelos agrícolas. Waksman y Joffe aislaron y describieron
T.tllioosidrltz.5 en 1922. y durante el siguiente cuarto de siglo, las principales
contribuciones a la ciencia de la microbiología llegaron de, entre otros , Wieland, quien en
1900 demostró la importancia de las oxidaciones biológicas usando microorganismos.
Otro trabajo destacado fue de Marjorie Stephenson yJ. H. Quastel en enzimas. En 1914,
A. J. Kluyver publicó un importante artículo titulado "Unidad y diversidad en el
metabolismo de microorganismos", que demostró la unidad fundamental subyacente a la
aparente diversidad del metabolismo microbiano. Para 1930, Karstrom había establecido
el concepto de enzimas constitutivas y adaptativas. Para entonces, la microbiología había
comenzado a ser una piedra angular de la bioquímica y los límites entre los sujetos pronto
se desdibujaron. En 1941, Lipmann avanzó el concepto del enlace de alta energía y
surgieron importantes desarrollos en teorías sobre el funcionamiento de enzimas del
laboratorio de Monod. Mientras que la mayoría de los desarrollos iniciales en metabolismo
microbiano se centraron en el metabolismo bacteriano y fúngico, debido a su importancia
para muchas fermentaciones industriales ( por ejemplo, cítrico producción de ácido), no
fue descuidado. El trabajo seminal en esta región se produjo en 1940, cuando Jackson
Foster publicó su "Actividades químicas de los hongos". Obviamente, los estudios sobre el
metabolismo fúngico cobraron impulso después de la introducción, mientras que el
aislamiento de antibióticos como la estreptomicina también impulsó el estudio de un grupo
descuidado de organismos. los actinomicetos. Fue Selman Waksman quien inició el
trabajo en estos organismos durante la primera parte de este siglo. un período cuando los
actinomicetos fueron considerados como hongos en lugar de bacterias.
VII. Nutrición, bioquímica comparada y otros aspectos del metabolismo
Microbes. primera levadura y luego bacterias, jugó una parte importante en el
descubrimiento de las vitaminas y otros factores de crecimiento. El crecimiento podría
medirse en probetas mucho más expedita y económicamente que en ratones. ratas. o
humanos, Por el contrario, la constatación de que los microbios compartían prácticamente
todos los requisitos complejos de crecimiento de los animales fue un importante obstáculo
para la "bioquímica comparada", la opinión de que tenían una evolución común y una
arquitectura subyacente similar. Uno de los aminoácidos esenciales, la metionina, fue
descubierto por primera vez por Müller (1922) como un factor de crecimiento requerido
por el diphtheriabacilli. Mueller se unió a una escuela fundada por Twort (1911),
incluyendo Lwoff, Fildes, Knight y Tum, que hizo de la nutrición una rama de la bioquímica
general. Percibieron que el requisito de factor de crecimiento ocultaba una pérdida o
deficiencia de poder sintético: carente de síntesis interna. el organismo tenía que buscar
en el ambiente de nutrientes el suministro de sustancia. Esto también implicaba que los
organismos con una nutrición simple tenían que ser empoderados con una capacidad
biosintética compleja, dejándonos humili-. _. . .- _. . .
428
Historia de la microbiologia por la inferioridad de nuestra especie a Escller.ichirr co / i,
pero que a su vez es menos capaz que la planta verde. Además de la utilidad práctica de
estos cultivos. se basan en un respeto bien fundado por la complejidad de las células
microbianas. En "1930", se había demostrado que varios factores de crecimiento eran
importantes en la nutrición bacteriana. incluyendo los factores V y X, que posteriormente
se convertirán en difosfopiridina-nucleótido y hemo. respectivamente. para las bacterias
hemofílicas: MycoDacre / .il //, ~ pIl / c> i factor. se sabe que es vitamina K. para M.
pserrdotrthe, -c, rrlosis, y triptofano para Sal /? ~ o ~ ella rxphi (Fildes, 1936).
Comenzando con el trabajo de W. H. Peterson. H. Wood.E. Snell. y E. L. Tatum en la
Universidad de Wisconsinand B.C.J.G. Knight y P. Fildes en Inglaterra. Se identificaron
varios factores de crecimiento de bacteria1 con vitaminas B (ampliamente catalogadas por
Johnson y Johnson, 1945). En "1950", la mayoría de los factores de crecimiento traza
conocidos habían sido identificados y asociados con los requisitos nutricionales de
determinadas bacterias, como también lo habían sido la mayoría de los aminoácidos y
una gran cantidad de otros metabolitos (Snell.1951). Durante el vicennium. la mayoría de
las vitaminas también se identificaron como coenzimas. desempeñando un papel en la
función de enzimas metabólicas específicas [por ejemplo, tiamina para decarboxilasas
cetoácidas, niacina para deshidrogenasas, piridoxal para transaminasas.pantotenato en el
ciclo del ácido cítrico (Schlenk.1951)]. Los 20 aminoácidos canónicos fueron escuchados
y se pudo demostrar que se incorporaron a la proteína bacteriana. También se
desglosaron una serie de otras rutas bioquímicas con la ayuda de nuevas metodologías
de radioisótopos y cromatografía. De especial significación en el metabolismo bacteriano
fue la demostración de la asimilación heterotrófica de CO. Esta visión del CO- como
anabolito era contraria a su imagen habitual como producto de desecho. Los requisitos
específicos para el CO2 como nutriente ayudaron a aclarar las dificultades en el cultivo de
bacterias exigentes y eventualmente de células de tejidos. En 1941, la microbiología y la
genética se superpusieron cuando G. W. Beadle. Tatum. y compañeros de trabajo en
StanfordUniversity comenzaron a utilizar el molde de pan rojoNe ~ rrosporrr ~ YNSSCI, un
enfoque en el que se emplearon mutantes para ayudar a elucidar los mecanismos
genéticos, lo que permite una serie de vías microbianas para ser elaborados por primera
vez.En su momento, especialmente después de Beadle y Tatum (1941). el poder de la
síntesis llegó a ser inferior a la capacidad de genes específicos individuales. Esto a su vez
condujo a conceptos y experimentos sobre los fundamentos genéticos del metabolismo.
El nacimiento de la biología molecular siguió el trabajo de Watson y Crick en 1853 cuando
la microbiología entró en una nueva fase. permitiendo que se superponga con muchas
otras ciencias, dando lugar a la aparición de numerosos desarrollos interesantes. El
principal tema conceptual del cambio en la microbiología durante el vicennio fue la
convergencia de la disciplina con la biología general. Como señaló Dubos (1945), Para el
biólogo del siglo XIX, las bacterias aparecían como la expresión más primitiva de la
organización celular, el límite mismo de la vida. Hablando de lo que él consideraba "la
más pequeña, y al mismo tiempo la más simple y más pequeña de todas las formas de
vida", Ferdinand Cohnasserted: "Forman la línea fronteriza de la vida: más allá de ellos. la
vida no existe, hasta ahora al menos como nuestros recursos microscópicos alcanzan: y
estos no son pequeños ". Muchos consideraron que las diminutas dimensiones de las
bacterias eran incompatibles con cualquier diferenciación morfológica significativa; alentó
al fisicoquímico a tratar la célula bacteriana como un sistema simplecolélico y al
bioquímico considerarla una "bolsa de enzimas". Aún dominada por la importancia médica
de los microbios, las opiniones de los microbiólogos en "1930" no habían evolucionado
mucho más, aunque " System "(1930) tiene un breve capítulo sobre citología bacteriana y
alusión a la controversia en curso sobre la existencia de estructuras nucleares. Muchas
más attentionis dadas a la tinción de Gram! Aunque algunas diferencias en el detalle de
intermediarymetabolism y biosintéticas opciones havebeen descubiertos (por ejemplo,
para la lisina), sigue siendo vías truethat convenientemente señaladas en las bacterias
haveusually estado indicadores fiables de los mismos pasos inhigher plantas y animales .
Hoy es posible relacionar este conservadurismo funcional con la afinidad evolutiva con las
herramientas actualmente disponibles de secuenciación de ADN. Formación enzimática
inducida, o "adaptación enzimática" Uno de los fenómenos más intrigantes de la fisiología
bacteriana es la plasticidad de la expresión enzimática dependiente del entorno químico.
Por ejemplo. E. & i cultivado en un medio de glucosa exhibe niveles muy bajos de p-
galactosidasa (lactasa). Cuando la glucosa es reemplazada por lactosa. hay una demora
en el crecimiento seguida por la abundante producción de lactasa. Ya se conocen miles
de ejemplos comparables. La búsqueda del mecanismo de este fenómeno ha sido de
gran importancia en el desarrollo de la genética molecular. Los informes anecdóticos de la
adaptación enzimática se remontan a Wortmann (1882, citado en Karstrom, 1930): se
recopilaron junto con nuevas observaciones experimentales. por Henning Karstrom para
su disertación doctoral en el laboratorio de Virtanen en Helsinki. En esta revisión de punto
de inflexión [Karstrom. 1930. seguido por el moreaccessible Karstrom. 1937; Dubos 1940
(1945)], las enzimas bacterianas se clasifican como constitutivas oradaptivas según su
independencia. o de lo contrario, del entorno cultural. Excepto por el metabolismo de la
glucosa. la mayoría de las enzimas desintegradoras de azúcares son desintoxicantes, lo
que da como resultado una sustancial economía de biosíntesis para una bacteria o
levadura que puede encontrarse solo, digamos. maltosa ahora, o lactose nextweek.
Durante el vicennium. el trabajo de Stephenson y Yudkin (1963) y Gale (1943)
proporciona ejemplos claros adicionales de la respuesta adaptativa, y Dubos (1945)
ofrece una evaluación crítica de los problemas biológicos fundamentales. Varias teorías
permitieron la estabilización de la preformadenzima por un sustrato, o un principio similar
a Le Chatelier de acción de masas. para alentar la síntesis enzimática. Compartieron la
presunción de que la enzima enzimática en sí misma era el receptor del sustrato inductor.
Otras hipótesis prestaron al sustrato un papel instructivo en la formación de la
especificidad de la enzima. Un progreso adicional dependería de la postulación de un
sistema formador de enzimas distinto del enzima, y esto surgiría bajo el impulso de los
estudios genéticos que se describirán más adelante. Al final del vicennio. Lederberg et al.
(I95 I) describieron un sustrato no inductor de lactqse, el análogo altrosa-P-D-galactósido.
que apunta a una separación de esas especificidades. Este sustrato también permitió la
selección de formadores de lactasa constitutivos. mostrando que la lactosa no es
necesaria para la conformación de la enzima. pero el último podría derivarse directamente
de la constitución genética. El debate continuó hasta mediados de la década de 1950 (ver
Lederberg, 1956, p. 51, Monod, 1956): fue movido por el espectacular progreso del grupo
Pasteurlnstitute al demostrar que la inducción enzimática era la neutralización de una
represión endógena que inhibía la expresión del gen de la lactasa en ausencia de un
inductor (Jacob, 1965). La inducción simultánea de varios pasos en la vía ametabólica.
usualmente por un sustrato temprano, fue explotado para delinear los pasos posteriores.
notablemente en la oxidación de compuestos aromáticos por pseudomonas. Entre las
innovaciones técnicas, una de las más ingeniosas fue el quimiostato (Novick y Szilard,
1950). Esto permitió que las poblaciones microbianas se mantuvieran por primera vez en
un estado estacionario bien definido; aunque bajo la limitación de un nutriente específico.
VIII. Genética microbiana
Durante las últimas dos décadas del siglo XIX, se descubrió que las especies bacterianas
no eran estables como se había pensado. Las culturas de líneas puras que se habían
mantenido durante muchas generaciones repentinamente sufrieron cambios dramáticos
en la morfología, propiedades metabólicas. y patogenicidad. A medida que se obtuvieron
más culturas de pures, esta variabilidad. o la disociación, como se llamaba, se hizo aún
más evidente. Luego, en 1925, R. M. Mellon publicó un documento que describe un
primitivo de la sexualidad en colideofobacterias. Este trabajo tuvo poco impacto
contemporáneo en la visión contemporánea de que las bacterias eran organismos
anucleados que se reproducían sin sexualidad por fisis binaria.
La genética bacteriana prácticamente no existía en 1930. Todavía en 1942, el eminente
biólogo británico Julian Huxley sugirió bacterias que "todo el organismo parece funcionar
tanto como soma como germoplasma y la evolución debe ser una cuestión de alteración
en el sistema de reacción como un todo". (Huxley, 1942. Tales ideas no alentaron
demasiado los esfuerzos para diseccionar genes individuales a lo largo de las líneas
mendelianas que habían sido tan exitosos con DI-osoyhil y otros animales y plantas.
Algunos trabajos con hongos habían tenido un comienzo prometedor a principios de siglo
(Blakeselee). Las observaciones auténticas pero esporádicas de la mutación bacteriana
(Beijerinck, 1901) fueron superadas en número por la especulación lanosa que abarcaba
variaciones de la forma de la colonia como manifestaciones de los ciclos de vida celular
entre las bacterias (véase Dubos, 1935; Lederberg, 1992). de la especulación
probablemente desalientan más clones y células mutantes, que se cuentan cuando se
experimentan ideas racionales ion. se coloca una población con el fago seleccionado. Ya
se mencionó el impacto del trabajo de Beadle y Tatum sobre los mutantes en Nelr ~~
sporc ~ en nuestra comprensión de la fisiología microbiana. Sin embargo. al iniciar el
campo de la genética bioquímica, estos estudios tuvieron un impacto aún mayor en la
ciencia de la genética. Antes de 1941, la investigación genética estaba dominada por el
trabajo en la mosca de la fruta. Drosopl ~ il ~~ l, lelanogrrsre, -. Mucho se aprendió del
estudio de las mutaciones morfológicas en este organismo, pero los esfuerzos por
desenmarañar la base bioquímica de estas características solo dieron como resultado la
frustración. Beadle y su colega bioquímico microbiano Tatum volvieron su atención al
estudio del molde de pan rojoN. o-rrssn y pronto obtuvieron mutantes con defectos
nutricionales como bloques en la biosíntesis de vitaminas como piridoxina y tiamina. Esto
permite realizar mejoras rápidas en el análisis genético. Un enfoque que luego fue
extendido por otros trabajadores que usaban bacterias. Los primeros frutos de su
aplicación vinieron en 1943 cuando Luria y Delbrick mostraron mediante su "prueba de
fluctuación" que las mutaciones espontáneas ocurrían en bacterias, para resistir la
resistencia a la misma y a la estreptomicina a frecuencias similares, como se había
observado en otros organismos.Luria (1984) en su encantador libro "Una máquina
tragamonedas. Un tubo de ensayo roto", relata cómo su observación de un premio gordo
en una sala de juego inspiró su premonición de las estadísticas sesgadas que
gobernarían el número de mutantes. El ajuste de los números experimentales a esas
estadísticas está sujeto a una gran incertidumbre teórica, pero fueron una corroboración
del modelo clonal. Uno de los primeros artículos sobre bacterias publicado en Generics, el
artículo atrajo rápidamente una gran atención y fue ampliamente considerado como
"demostrado que las bacterias tienen genes". La idea principal de la demostración fue que
las mutaciones a la fagresistencia concuerdan con una distribución clonal y, por lo tanto,
rinden más probablemente su ocurrencia "preadaptativa", es decir, dentro del crecimiento
de la población en lugar de en el momento del desafío con el agente selectivo. Por lo
tanto, se parece más a Darwin que a Mendel: sin embargo, fue un punto de inflexión en la
apreciación de las bacterias por parte de los genetistas. Los métodos estadísticos, que
son útiles en la estimación cuantitativa de la tasa de mutación, se han mejorado (Sarkan,
1991). El estudio de la genética bacteriana se mejoró drásticamente durante la década de
1940 tras el reconocimiento de la resistencia a los antibióticos en bacterias patógenas.
Aquí fue un problema práctico. la solución a la cual dio un impulso obvio a los estudios
destinados a determinar su causa. [Ver RESISTENCIA ANTIBIÓTICA.] Las bacterias, por
supuesto, padecían la seria limitación metodológica de la aparente falta de cualquier
mecanismo recombinatorio (sexual o cruzado) que analice y reconstituya las
combinaciones de genes. Sin embargo, demostrarían ser un material maravilloso para los
estudios de mutación (cf. .Ames. 1975) una vez que se aclararon los conceptos, para lo
cual un importante punto de inflexión fue el trabajo de Luriaand Delbriick (1943). De una
manera que recuerda a Gregor Mendel, estudiaron la mutación bacteriana por conteos
cuantitativos. Utilizaron la resistencia a (bacteriojphage como el Al igual que la resistencia
a los antibióticos o el crecimiento en un medio nutricionalmente privado, el fago es un
agente ambiental que facilita el recuento de células excepcionales contra un fondo
determinado que puede ser eliminado selectivamente. Lo más importante es que
distinguieron entre eventos mutacionales, que engendran resistencia. la mutación entre
microbios tuvo falsos comienzos ocasionales, con observaciones de st variabilidad de la
lluvia y el "entrenamiento" de las bacterias exigentes para prescindir de los factores de
crecimiento (Knight, 1936). Sin embargo, al carecer de un marco conceptual de "genes en
bacterias", estos tenían poco fruto antes del trabajo de Beadle y Tatum (1941) en
Neurospora. Beadle había comenzado su programa de investigación con Ephrussion los
genes para el color de los ojos en Drosophilrt (Burian, 1989) . Tatum se comprometió a
hacer el trabajo bioquímico, pero encontró la Casi imposible de tratar: cuando se acercó al
éxito, fue convencido por Bratnandt de la identificación de cinurenina como precursor del
apareamiento. Tampoco estaba claro qué tan cerca del producto genético primario esta
química les proporcionaría. El siguiente relato es tomado de las memorias de J. Lederberg
sobre EL Tatum, quien fue su maestro de 1946 a 1947 (Lederberg, 1990).

Esta experiencia discordante, al tener un trabajo tan minucioso alcanzado de una manera
tan fácil, impulsó a Beadle y Tatum a buscar otro organismo más tratable que D ~ osop /?
i / ~ para los estudios bioquímicos de la acción genética. En Winter Quarter 1941, Tatum
ofreció un nuevo curso de postgrado en bioquímica comparativa de la historia de la
microbiología. En él, hizo un llamamiento a su experiencia postdoctoral con Kogl en
Utrecht, en 1937, y contaba la nutrición de levaduras y hongos, algunos de los cuales
exhibían bloques bien definidos de biosíntesis de in vitro. Beadle, asistiendo a algunas de
estas conferencias, recordó el elegante trabajo sobre la segregación de los factores
mutantes morfológicos en Neur-ospouc que había escuchado de B. 0. Dodge en 1932. La
conjunción fue que Nelrosporcr tenía un ciclo de vida ideal para el análisis genético con la
manifestación inmediata de los genes de segregación en la cadena de ascosporas. El
nerrrospor-n también demostró ser cultivado fácilmente en un medio bien definido,
requiriendo solo biotinas como suplemento. En febrero de 1941, el equipo realizaba rayos
X de Nellrospora y buscaba mutantes con defectos biosintéticos específicos, a saber,
requisitos nutricionales para factores de crecimiento exógenos. La extracción de mutantes
nutricionales en microorganismos en esos días consistía en minuciosa labor manual:
significaba examinar cultivos de una sola espora aislados de padres irradiados, uno por
uno. sus propiedades nutricionales. Nadie podría haber predicho cuántos miles de
culturas tendrían que ser probadas para descubrir el primer mutante: el aislado # 299 de
hecho requería piridoxina. Además, el rasgo segregaba incursiones de acuerdo con los
simples principios mendelianos, que predijeron que podría asignarse a un mapa
específico. cromosoma del hongo Con esto, Nellrospo, se trasladó al centro del escenario
como objeto de experimentación genética. En su primer artículo, señalaron "que deben
existir órdenes de control directo del gen que van desde relaciones uno a uno a relaciones
de gran complejidad". Las características de las mutaciones que afectan al metabolismo
los pasos se dirigieron a un rol directo y simple de los genes en el control de las enzimas.
Por lo tanto, estos fueron hipotetizados como los productos primarios de los genes. De
hecho, en algunos casos, los genes podrían ser enzimas. Esta fue una afirmación de lo
que llegó a llamarse la teoría de un solo gen: una sola enzima, que se ha convertido en la
base canónica de la genética molecular moderna. aunque con una corrección sustancial y
elaboración de detalles. especialmente con respecto al papel intermediario del ARN
mensajero. No se podía pensar en él en 1941. Sería un error concentrarse demasiado en
la aserción numérica 1: 1; más importante era la suposición general de simplicidad, y que
los detalles de la expresión génica podían aprenderse como resultado de dichos estudios,
como de hecho lo fueron (véase también Horowitz, 1990). El reclutamiento de Nerrrospora
para lo que se han convertido en estudios genéticos clásicos ofreció un estímulo adicional
para que las bacterias aunque algo más primitivo, podría manejarse de manera similar. En
1944, Gray y Tatum habían producido mutantes nutricionales en las bacterias. incluyendo
algunos en una cepa que ha dominado la genética bacteriana desde entonces, a saber,
E.co/i cepa K-12. Estos mutantes pronto se pondrán a un uso más llamativo. En 1944, O.
T. Avery y sus colegas concluyeron que el principio de transformación implicado en la
transformación en neumococos era ADN. Este fue un avance importante, porque hasta
entonces se pensaba que la parte significativa de la nucleoproteína de la molécula
cromosómica era la proteína, el ácido nucleico que actúa como un tipo de agente
aglutinante. El papel del ADN inicialmente desconcertante, porque era difícil ver cómo un
polímero que contenía solo cuatro bases podía codificar el fenotipo complejo de los
organismos más simples. Mientras tanto, los enfoques genéticos clásicos estaban
generando una gran cantidad de nuevos descubrimientos. En 1945, Tatum demostró que
el mutantrado de bacterias se podía aumentar usando rayos X, mientras que 2 años
después, Tatum y Lederberg demostraron la recombinación genética entre dos cepas
nutricionalmente defectivas de E. cdi KIZ. Apareció el primer mapa genético de E. coli
K12, y además en los años siguientes, se avanzó en la explicación de los fenómenos de
conjugación, transducción y transformación. William Hayes, trabajando en la escuela de
medicina de posgrado en Hammers, anunció en 1952 su descubrimiento de que en
conjugación recombinación se produjo debido a la transferencia unidireccional de material
genético, y durante el mismo año Lederbergand Cavalli acuñó los términos fertilidad más
(F ') para células del donante y fertilidad menos ( F-1 para células receptoras. El
reconocimiento de estos tipos de apareamiento hizo que la conjugación fuera una forma
primitiva de sexualidad, siendo la célula F receptora el cigoto. Se produjeron más avances
cuando Lederberg, Cavalli y Lederberg descubrieron mutantes recombinantes de alta
frecuencia del tipo Ff de E. co / i K12. que fue posteriormente confirmado por Hayes.
Estas cepas mutantes (Hfr) diferían de las cepas wildtypeF '. primero en transferir varios
genetic432 History of Microbiologymarkers a un índice cientos de veces mayor que
theoriginal cepas y. segundo. en no producir una analítica en el tipo de apareamiento de
la célula receptora. Sin embargo. aunque la frecuencia de transferencia de los diferentes
marcadores fue diferente. fue lo mismo para cualquier cepa dada de Hfr.Entre 1955 y
1958. Jacob y Wollman utilizaron su famoso "experimento de apareamiento interrumpido"
para determinar el mecanismo de transferencia de genes en E. coliK12. Jacob y Wollman
acuñaron el término episoma, y en 1963 Cairns confirmó la naturaleza circular del
cromosoma bacteriano utilizando autorradiografía. La genética bacteriana progresó aún
más después de su publicación en 1961 por Watanabe explicando la resistencia
farmacológica infecciosa. La transformación del neumococo. Lo que podría considerarse
como el primer gran avance en la genética microbiana llegó en 1928 cuando Griffith
publicó sobre detallar la "transformación" en neumococos, un estudio que sentó las bases
para un trabajo posterior de Avery y sus colegas. Un desarrollo adicional en nuestra
comprensión de la transformación ocurrió en 1933, cuando Alloway demostró que las
células de tipo 1 rugosas podían cambiarse a células de tipo II lisas genéticamente
estables, cultivándolas en presencia de un extracto libre de células de un caldo de células
lisas tipo II sin caldo muerto. Este trabajo demostró la existencia de un "agente
transformante" soluble. [Ver TRANSFORMACIÓN GENÉTICA, MECANISMOS.] Además
de los sucesos cataclísmicos en la guerra mundial.1944 también será recordado por la
publicación de "Estudios sobre la naturaleza química de la sustanciaInducir la
transformación del neumococo" Tipos. "Por Avery. MacLeod. y McCarty. "FredGriffith
tropezó con la información sobre el neumococcustrado en Londres. en 1918. en el curso
de sus estudios sobre la serosistemática de la neumonía. Los extractos de un serotipo
evidentemente podrían transformar las células de otro en el tipo del primero. En
retrospectiva, es difícil imaginar cualquier interpretación que no sea la transmisión de un
gen de una bacteria. Es un virus que tiene tal transferencia indescriptible como una
transferencia. \ fenómeno pecilico. Hutuhen es como primero descubierto y nombrado.
there \\ a \, no \ rarrant tofive it !: connotación narrouer. .4 \, er-y tenía el poder de nc \
rcoinage pero \ apenas tiene la probabilidad de pervertirse.cell a otro, pero esta
interpretación fue inevitablemente limitada por la pobre comprensión general de la
genética bacteriana en ese momento. Esta vaguedad se complicó por dos notables
interpretaciones: (1) que el agente transmisible era el polisacárido mismo y (2) que el
agente era un "mutágeno específico". Con respecto al primero, a veces se pasa por alto
que Griffith entendió la distinción lo suficientemente bien. Mejor que muchos de sus
seguidores, tenía al menos el germen de una genética: "Por sustancia S me refiero a la
estructura proteica específica del neumococo virulento que le permite fabricar un hidrato
de carbono soluble específico". Con respecto a la segunda interpretación errónea,
Dobzhansky escribió que " . . . estamos tratando casos auténticos de inducción de
mutaciones específicas por tratamientos específicos, una hazaña que los genetistas han
intentado lograr en organismos superiores ". Esta atribución formalmente correcta, de un
origen muy influyente, ofusca la idea de que el agente es la información genética. Muller
tenía una claridad mucho mayor: en su Conferencia de Pilgrim Trust de 1946 a la Royal
Society, comentó: . . en el PII (~ IIII ~ OCO (.CIcIaSse el "agente transformante" extraído
puede realmente haber tenido sus proteínas genéticas todavía fuertemente unidas al
ácido nucleico polimerizado; es decir, en efecto, todavía hay "cromosomas" bacterianos
viables o partes de cromosomas flotantes). liberando el medio utilizado. Estos podrían, en
mi opinión, haber penetrado en las bacterias sin cápsulas y en parte arraigado allí, por lo
menos después de haber pasado por una especie de cruzamiento con los cromosomas
del huésped. En vista de la transferencia de solo una parte de la genética Por lo tanto, a
diferencia de lo que hasta ahora ha sido posible en organismos superiores, los
cromosomas viables deben ser probados para que se pueda analizar la constitución
genética de estas formas. también podría obtenerse de estas formas inferiores para la
observación in vitro. análisis químico y determinación de los efectos genéticos del
tratamiento. Otros genetistas "clásicos" tenían virt No hay nada que decir sobre el trabajo
de Griffith y se habría juzgado incompetente para evaluar su validez experimental.
Comenzaron a prestar más atención a la historia de la microbiología después de 1944.
pero nuevamente tenían poco entrenamiento en química bacteriana para permitirles
formar juicios críticos sobre los reclamos que se les presentaban. En el mundo de Avery,
sin embargo, Griffi era una figura central y sus observaciones no podían ser ignoradas.
Sus observaciones básicas fueron confirmadas en el laboratorio de Avery (véase Dubos,
1986), y en su momento Averyfelt obligó a buscar la extracción química y la identificación
de la sustancia responsable de la transformación. Dieciséis años después de Griffith, esto
se logró, y el ADN se introdujo en la conciencia científica como la sustancia del gen. En
retrospectiva, es difícil dar el crédito adecuado a la validez lógica de una amplia gama de
interpretaciones alternativas y reconstruir la confusión sobre lo que se entiende por
Recordemos que hasta 1951 el único marcador observado intransformacional era el
polisacárido capsular, cuya biosíntesis estaba sujeta a muchas con- jeturas [por ejemplo,
sobre el papel de los fragmentos iniciales en el autoensamblaje (discutido por Lederberg,
1956)]. .Avery sin duda un tanto intimidado por la autoridad de Dobzhansky. era reacio a
poner sus especulaciones sobre la importancia genética de la transformación en la
imprenta; su famosa carta a su hermano Roy salió a la superficie solo unos años después.
Ahí. pero no en el periódico, él comenta que el. . . [substancia transformante] a partir de
entonces reduplicada en las células hijas y después de innumerables transferencias [it]
puede recuperarse mucho más de la cantidad utilizada originalmente. . . . Suena como un
virus, puede ser un gen. Pero con los mecanismos, ahora no me concierne, un paso a la
vez, y el primero sí. ¿Cuál es la naturaleza química del principio transformador? Alguien
más puede resolver el resto (citado en Dubos, 1976). Hasta el año 194S, un genetista tan
distinguido como G. W.Beadle aún se refería al fenómeno como un "primer éxito en la
transmutación de genes en caminos predeterminados" (nota transmutación, ¡no
transmisión!). Esta obstrucción de la transformación del neumococo se volvió menos
problemática con el desarrollo general de la genética bacteriana. La fecha llegó a una
cuestión tan importante como la identidad química del gen como ADN puro (frente a una
nucleoproteína compleja). El mismo Avery tuvo que preocuparse. Hubo mucha resistencia
a sus pruebas anteriores de que los polisacáridos neumocócicos, libres de proteínas, eran
inmunogénicos. La primera afirmación de Wendell Stanley de que el virus del mosaico del
tabaco cristalino era la proteína pura tuvo que someterse a corrección humillante cuando
también se encontró ácido ribonucleico allí. Podríamos recordar que cuando la mayoría de
los biólogos de esa época usaban términos como proteína, ácido nucleico o
nucleoproteína, difícilmente puede suponerse que tenían las connotaciones crujientes
actuales de una estructura química definida. Estos problemas solo podían ser
solucionados por los expertos que habían trabajado con estos materiales
experimentalmente, y fue una tarea desalentadora probar que había muy pocas moléculas
de cualquier proteína contaminante en el "ADN" como para explicar su especificidad
genética. El meticuloso trabajo de Maclyn McCarty continuó proporcionando evidencia
cada vez más persuasiva de que era ADN, y los estudios contemporáneos de Chat-gaff
demostraron que el ADN era mucho más completo de lo que Levene había imaginado y,
por lo tanto, capaz de la sutileza exigida de un "gen". sobre "ADN solo" no se proporcionó
antes de la producción de ADN genéticamente activo tres décadas más tarde. En 1952,
Hershey y Chase dieron evidencia de un cuartel independiente de que el ADN solo
penetraba la célula infectada con el fago. En el año siguiente. los modelos estructurales
del ADN como una doble hélice (Watson y Crick, 1953) otorgaron la plausibilidad final al
"ADN solo". Este episodio a veces se describe como una resistencia irracional a una
nueva idea (Stent, 1972). Esta es apenas una evaluación justa de una controversia que se
resolvió dentro de 9 años y que requirió la aparición de una nueva clase de trabajadores y
la conversión de algunos de los antiguos. para tratar con nuevas técnicas y materiales
experimentales. Esa controversia continúa siendo apropiada para el espíritu de
escepticismo científico; más de qué preocuparse cuando desafían a las nuevas ideas
simplemente se ignoran. De hecho. la controversia enfureció con el químico Todos estos
descubrimientos. tomados en conjunto, dieron una subclamación de que la sustancia era
ADN (¡y nada de la visión de Luria del virus como genético!). [Esta historia está detallada
por Judson (1979) y en un elemento que está coordinado con el genoma de la memoria
personal de McCarty (1987).] Alfred Hlirsky. anfitrión. pero con la consecuencia
patogénica que tiene el colega de Avery en el Instituto Rockefeller. fue desarrollado para
satisfacer las necesidades del parásito. El crítico de hostvocal de la identificación química
del también puede coevolucionar para alcanzar un agente de transformación compatible
con el equilibrio. Algunos creen que fue bastante permeable con la supervivencia de
ambos socios, un generalizado que este fue un caso de transferencia de genes. pero el
principio en la evolución de la patogenicidad (Th.the más reacios a conceder que la
evidencia a Smith. 1934) .434 Historia de MicrobiologyProspects de herencia citoplásmica
fascinó a muchos trabajadores, incluso durante la elaboración de thenuclear (Mendelian)
base de biología microbiana, quizás un remanente de la idea de Huxley del
persistentsoma. En el curso de la discusión. Hubo respuestas enojadas sobre si una
entidad dada era realmente un plasmageno. o tal vez un virus, o tal vez asymbiont. El
término y el concepto "plásmido" se introdujeron (en 1952) para acentuar el vacío
operacional de esas distinciones. Una partícula podría ser al mismo tiempo un virus (si
uno se enfoca en la patología), o un simbolo. O un plasmageno (si uno se enfoca en la
función genética). Como un profeta. incluso puede estar integrado en el cromosoma. w,
con una posible reaparición más tarde. Y sería imposible decir si avirus había
evolucionado su patogenicidad, habiendo sido alguna vez un orgánulo benigno. o
viceversa, o ambas épocas evolutivas diferentes. Incluso se podría revivir la antigua
imagen de Antalt de las mitocondrias como bacterias simbióticamente simbióticas. una
alusión fundada en las limitaciones del análisis citológico. El vicennio produjo una
transformación, la "biologización" del microbio. Fue un tiempo extraordinariamente
excitante y fértil. con nuevos fenómenos que se encuentran en cada plato de cultura. Uno
podría incluso aprender a atesorar las contaminaciones de uno. Virus y lisogenia:
ThePlasmid ConceptA. Biología del virus El descubrimiento cardinal para la virología fue
el aislamiento y la cristalización del virus del mosaico del tabaco (Stanley, 1935). que
agudizó muchas preguntas sobre este límite de la existencia viva (Pirie, 1937). Sin
embargo, un sistema más conveniente para la biología del virus demostró ser el virus que
ataca a los bacterianos, los fagos (bacterio), especialmente en las manos de la escuela
Delbrtick (Adams, 19.59). Su ciclo de vida fue elaborado con cierto detalle, culminando en
dos experimentos cardinales: Hershey y Chase (1951): el ADN de la partícula del fago
atacante es suficiente para iniciar la infección. El ADN (no el fago completo) se replica en
la bacteria huésped y luego genera la cápside y se ensambla en partículas de fago
infecciosas y naturales. Hershey (1946): diferentes genomas de fagos pueden someterse
a recombinación genética, permitiendo la construcción de mapas de ligamiento. Estas
finalmente se construirían en el último detalle, haciendo coincidir la secuencia de ADN de
los nucleótidos. Los virus fueron definidos por Luria (1953, p.) Como "entidades
submicroscópicas". capaz de introducirse en células vivas específicas y de reproducir solo
las células internas. "Señaló que este es un criterio metodológico más que taxonómico; tal
definición podría abarcar una amplia gama de diversidades. En 1950, insistió en que el
fago prohibía el "parasitismo en el nivel genético", asumiendo la dirección metabólica de
la célula huésped y expandiendo un amplio repertorio de sus capacidades genéticas. Ya
fuera que otros virus, en células vegetales y vegetales, compartieran estos atributos
permanecían. visto (Luria, 1953, Adams, 1959, Hayes, 1964, Galpern, 1988, Burner,
1945) .B. Lysogeny Poco después del descubrimiento de los bacteriófagos Twort-d'Herelle
(1915-1917), se descubrieron cultivos bacterianos que parecían haber establecido una
biosis duradera con un fago residente. La escuela Delbru tendía a descartar estos como
contaminantes, a pesar de los persuasivos argumentos de Burnet y Lush (1936). Lwoff y
Gutmann (1950) volvieron a entrar en la controversia y demostraron que el lisogénico
Bclcilli carrieda "prophage", una capacidad genética para producir el fago. Al mismo
tiempo, Lederberg y Lederberg (1951, 1953) descubrieron que E. co / i K-12 era
lisogénico, para un fago que llamaron "lambda", como un paralelo (o eso creían) para las
partículas kappa en Pcrru ~ zeci ~~ rr. Las cruzas de lisogénico con cepas sensibles, sin
embargo, mostraron que la capacidad de producir ligaduras segregadas en estrecha
vinculación con un marcador cromosómico (gal): por lo tanto, invocaron el concepto y la
terminología de profagia. Sin embargo, la elaboración de esa historia y de los fenómenos
de fago- mediate la transducción, pertenece a la próxima era.X. Virología El término virus
originalmente fue un término inespecífico que Pasteur significaba cualquier organismo
vivo que causaba enfermedades. Esta terminología se usó bien en ^ .__... - I ..._ y_, _ -., ^
__ "" __ ".- I" _.-.-, .._ ^. Historia de la Microbiología en la década de 1930 ; por lo tanto, la
palabra antivirus fue utilizada por Bresredka para referirse a filtrados bacterianos que
podrían curar las infecciones de forma aparente. La comprensión de que la enfermedad
podía transmitirse por inoculación de lesiones libres de células de plantas e infecciones
dio lugar a la introducción del concepto de "virus filtrable". Descubrimiento de Iwanowski
en 1892 de la enfermedad del mosaico del tabaco en las plantas suele acreditarse como
la primera demostración de que un virus filtrable podría causar una enfermedad. Luego,
en 1898. Loefflerand Frosch demostró que un virus filtrable aparentemente era la causa
de la fiebre aftosa. En el mismo año, SM Chapman introdujo el uso de huevos de gallinas
fértiles como un medio para cultivar virus. Este enfoque fue luego utilizado por Pyton Rous
en su trabajo sobre el sarcoma de aves que lleva su nombre. En 1915, una nueva clase
de virus que afectaba a las bacterias pero ni las plantas ni los animales. fue descubierto
por F. W.Twort. Sus observaciones fueron ampliadas en 1917 porD. Herrelle, quien
durante los siguientes 13 años publicó una serie de artículos sobre lo que inicialmente se
llamó el fenómeno Twot-Herelle, pero que más tarde se conocería como bacteriófago. El
desarrollo primero del microscopio ultravioleta y luego de las técnicas de cultivo de tejidos
en la década de 1920 impulsó la investigación sobre la estructura y el cultivo del virus. El
trabajo de Maitland en 1928 fue una gran mejora en las técnicas de cultivo de tejidos, pero
debido a la naturaleza tediosa y la falta de antibióticos para controlar los contaminantes
bacterianos no se adoptaron ampliamente. A 193 1, el potencial del huevo fértil para
cultivar virus finalmente se apreció en el trabajo primero de Goodpasture y luego del
Australian Macfarlane Burnet. Burnet utilizó este enfoque para cultivar el virus de la gripe.
que previamente tuvo que ser criado en hurones. John Enders hizo mucho para
desarrollar el arte de cultivar virus. que finalmente permitió el desarrollo de una gama de
vacunas. La destacada contribución de Enders al estudio de virus comenzó con su trabajo
en los mómbitos cuando demostró que un virus podía crecer en embriones de pollo y.
después de generaciones sucesivas. Perdería su capacidad de causar la enfermedad
mientras conserva la capacidad de inmunizar contra ella. De esta manera, el virus
modificado podría usarse para preparar vacunas para controlar la enfermedad. Antes de
1949, por ejemplo. el virus de la poliomielitis solo se puede propagar en monos. Enders
demostró que el virus se puede cultivar en cultivo de tejidos no nerviosos, y mediante el
uso de esta técnica Salk desarrolló su famosa vacuna. que esencialmente derrotó la
parálisis infantil. La aplicación del cultivo de tejidos de Enders se dirigió al aislamiento de
muchos otros virus: en 1954, el año en que recibió el Premio Nobel, el mismo Enders, por
ejemplo, logró aislar el virus del sarampión. La introducción del electrón microscopio en
1934 demostró ser un gran activo para la investigación de virus. En 1956, Watson y Crick
propusieron en campos teóricos que las partículas de virus debían estar compuestas por
un núcleo de ácido nucleico y un caparazón circundante compuesto por subunidades
proteicas, una estructura que posteriormente fue observada en 1959 por Horne y
Nagington bajo el microscopio electrónico.Los antibióticos ayudaron a la investigación de
virus, permitiendo la contaminación estudios libres, de modo que en 1949, poliomielitis
podría crecer en tejidos no neurales tales como riñón de mono. En 1952, el nombre de la
paciente Helen Lane se inmortalizó crípticamente cuando Gay y sus colegas establecieron
la famosa celina continua de células HeLa, derivada de un carcinoma de el cuello uterino
del paciente hospitalizado Entonces. al año siguiente, Scherer logró aumentar el virus de
la poliomielitis en estas células. En 1954, Younger publicó su técnica para cultivar células
tripsinizadas en monocapas sobre vidrio. Esto permitió reconocer la infección viral de las
células al detectar el efecto citopático, lo que permitió la detección rutinaria del presencia
de virus.XI. Micología y protozoología, cenicientas de microbiología Se observaron
hongos filamentosos y protozoos (es decir, mohos y anádromas) poco después de que se
desarrollaran los microscopios más antiguos. Los estudios de estos organismos
continuaron en gran parte desapercibidos a medida que se desarrollaba la bacteriología.
El hecho de que ninguno de estos grupos de microorganismos provoque enfermedades
importantes en el mundo desarrollado tendió a obstaculizar el rápido desarrollo tanto de la
micología como de la protozoología. La principal motivación para el estudio de los hongos
proviene de su capacidad para infectar plantas de cultivo importantes. Esto resultó en una
asociación entre micología y botánica, con el desafortunado resultado de que muchos
microbiólogos en el pasado, como hoy, consideran a los hongos fuera de la órbita de su
sujeto. Ya en 1767. Torgioni-Tozetti adelantó la opinión de que las enfermedades de óxido
de los cereales son causadas por microscopicfungi, pero la prueba experimental del
papel436 La historia de la microbiología de los hongos como fitopatógenos tuvo que
esperar la monografía de Prevost, quien en 1807 describió infecciones experimentales e
infecciones. Prevost también mostró que las infecciones por hongos podrían evitarse
remojando las semillas en una solución de sulfato de cobre y así. él, inadvertidamente, se
convirtió en el creador de la industria de los plaguicidas. Fue Anton de Bary. sin embargo.
quien hizo más para desarrollar la ciencia de la patología de las plantas. Durante la
primera parte de este siglo, la atención también se enfocó en el papel que desempeñan
los hongos en la fertilidad del suelo. Pronto se hizo evidente que los hongos no son
metabólicamente tan diversos como las bacterias del suelo. sin embargo, desempeñan un
papel importante, principalmente como agentes de la descomposición de las formas
orgánicas de carbono y nitrógeno, en la degradación de la hojarasca y el
humus.Waksman y sus colegas se mostraron particularmente activos en demostrar el
papel que juegan los hongos en los suelos.Waksman también fue uno de los primeros
microbiologiststo apreciar la importancia industrial de los moldes, y su grupo investiga la
producción de alcohol butírico y butílico a partir de materiales ricos en almidón, y luego,
en 1930. examinó la producción de ácido láctico por especies de Rhixprrs. La base para el
desarrollo de estudios sobre el metabolismo del molde fue presentada por Raistrick y sus
numerosos colaboradores que trabajaban en la Escuela de Higiene y Medicina Tropical de
Londres durante la década de 1920 La primera enfermedad humana en ser causada por
hongos: descrita en 1839 por Schoenlein. pronto fue seguido por el reconocimiento por el
sueco F. T. Berg de que Ctrlldidrr rrlbictrus era el agente causal de la candidiasis. Sin
embargo, la micología médica tardó en desarrollarse y no fue hasta 1910 cuando
Sabouraud introdujo un medio adecuado para el aislamiento y crecimiento de hongos
patógenos. Las micosis sistémicas se descubrieron a finales de este siglo, mientras que
en 1934, antes de que Monbreun demostrara de manera concluyente que la
histoplasmosis es causada por Histoplrrsrrl crrpsrrl ~~~ rrnM ~ e. La micología dical se ha
retrasado en otros aspectos de la microbiología médica. Sin embargo, la importancia de
las infecciones fúngicas como la neumonía por pneumocistis y la candidiasis en el
síndrome del SIDA probablemente acelere el desarrollo en esta área del sujeto. El
desarrollo de la protozoología como ciencia se dedica casi exclusivamente al papel de
protozoos agentes de la enfermedad. Aunque inicialmente se lo conocía como animaco,
en 1764 Wrisberg había introducido theterm infusoria, mientras que el primer nombre
genérico para aprotozoo, Prrromecium, fue introducido por Hill en 1752. El término
protozoos fue utilizado por primera vez por el alemán Goldfuss en 1817. En 1836, Alfred
Donne, que trabajaba en París, había demostrado que un flagelado era responsable del
flujo vaginal en las mujeres. Fue, sin embargo, la expansión colonial de las potencias
europeas la que proporcionó el estímulo a los estudios de protozoología médica. Las
primeras observaciones de parásitos en la sangre de enfermos de malaria fueron hechas
en 1880 por Alphonse Laveran. Se demostró que una larga lista de enfermedades era
causada por protozoos, incluida la fiebre bovina de Texas en 1893. Fiebre de Malta en
189.5, malaria en 1898, enfermedad del sueño en 1902. Los protozoos aún no se han
utilizado ampliamente en microbiología industrial y biotecnología. y su papel en el medio
ambiente ha estado sujeto solo a un estudio limitado; por lo tanto, la historia del desarrollo
de la protocología en estas áreas tendrá que esperar futuros desarrollos.XII. El período
moderno ¿Qué pasa entonces con los hitos de la historia reciente de la ciencia? Sin duda.
el desarrollo más obvio en nuestra ciencia que ha tenido lugar desde la última guerra ha
sido el aumento en el estado de un solo organismo, la bacteria del colon E. coli. Utilizando
este único organismo, científicos como Niremberg.Holley, Jacob y Monod han
revolucionado el estudio de la biología. Un resultado práctico de este trabajo fue el
desarrollo de una cepa E. co / i por W. Gilbert y otros en 1978 que produce insulina
humana. Una lectura detenida de la lista de premios para el Premio Nobel de
investigación en microbiología en el sentido más amplio muestra que desde 1958 se ha
dado un reconocimiento particular al trabajo en genética, virología e inmunología. El
conocimiento derivado de tales estudios ha tenido un profundo efecto en nuestra
comprensión del proceso de vida, y los recientes desarrollos en biotecnología han
proporcionado beneficios reales en nuestras vidas. [Ver INDUSTRIA DE LA
BIOTECNOLOGÍA: UNA PERSPECTIVA.] La técnica clave que ha posibilitado la
ingeniería genética fue ideada por Herbert Boyer y Stanley Cohen. Boyer, que trabaja en
la Universidad de California, colaboró con Cohen de la Universidad de Stanford para
desarrollar un método de unión de genes desde adonor a una bacteria receptora. En
1973, tomaron un gen del plásmido de un organismo y lo cortaron en un plásmido de otro
para producir ADN recombinante. Cuando se insertaron en una bacteria receptora, los
genes extraños no solo sobrevivieron, sino que también la historia de la microbiología
afectó al huésped en la forma en que había afectado al donante, y también se copió a
medida que la célula se divide. Boyerlater utilizó este enfoque para insertar genes de
proteínas humanas en bacterias, y, por lo tanto, anunció una revolución biotecnológica.
Una revolución similar fue iniciada por la producción de anticuerpos monoclonales por
Kohler y Milstein (Curiosamente, lo que podría denominarse "anticuerpos monoclonales
naturales" había sido observado unos años antes por Joseph Sinkovicks.) Un
microbiólogo que abandonó la ciencia incluso a mediados de la década de 1970 para
seguir a otros las búsquedas ahora apenas reconocerían su tema anterior. Los estudios
sobre la genética y la biología molecular de microorganismos han progresado
particularmente rápido en los años intermedios. También hemos visto mejoras
importantes en la forma en que aplicamos microorganismos en biotecnología y. más
recientemente. para abordar los problemas ambientales. La aparición del sidace del SIDA
y para todos hizo añicos nuestra creencia de que hemos logrado conquistar las
enfermedades infecciosas. Sin duda, el VIH no será el último agente infeccioso nuevo que
nos enfrentará en el futuro: si no es por ninguna otra razón más que para combatir tales
infecciones. nuestra ciencia deberá continuar desarrollándose a la tasa rápida observada
en las últimas décadas.
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