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Bio-Tecnología 297 (2020) 122486

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residuos agroindustriales como un recurso para grasos volátiles ácidos producción a través de la fermentación

anaeróbica

Silvia Greses • , Elia Tomás-Pejo, Cristina González-Fernández


Los procesos biotecnológicos Unidad, IMDEA Energía, Madrid, España

INFORMACIÓN DEL ARTÍCULO RESUMEN

palabras clave: Este estudio evaluó la viabilidad de la digestión anaerobia como una estrategia de valorización sostenible para grasos volátiles ácidos
Agroindustrial perder ácidos producción de residuos agroindustriales (pepino, tomate y lechuga). Alta bioconversión correo ffi-
grasos volátiles de la deficiencias se alcanzaron por el funcionamiento de los reactores a 25 ° C, 3 g VS · d - 1 · L - 1 con ajuste de pH. fermentación pepino alcanzó la
comunidad anaeróbica
bioconversión más alta (52,6%), mientras que el tomate degradación era el menos e FFI bioproceso ciente (40,1%) debido a que el pH bajo (5,6) que
digestión microbiana
inhibió parcialmente las actividades hidrolíticas y acidogénicas. En todos los casos, pro ácido carboxílico fi les se compone principalmente de ácidos
grasos volátiles con número de carbono incluso. La comunidad microbiana desarrollado exhibió altos actividades hidrolíticas y acidogénicas asociados a
la degradación de carbohidratos. Esta población microbiana estaba dominado por Firmicutes phylum y mostró una falta de bacterias acetogénicas
relacionados con CH 4 producción, resultando en una notablemente alta acumulación de AGV.

1. Introducción microorganismos en el proceso de AD y ligera variación en los digestores pueden causar


insuficiencia proceso ( Madigan et al., 2009 ). Como alternativa, AD también se podría utilizar para
Hoy en día, la agricultura es uno de los sectores industriales que generan la mayor cantidad de producir ácidos grasos volátiles (AGV), que son ácidos carboxílicos generados durante la etapa
residuos. 1,3 mil millones de toneladas de alimentos se desperdician cada año durante su media de la bioproceso. Los ácidos carboxílicos se consideran bloques valiosos de construcción para
producción, manipulación, almacenamiento, procesamiento, distribución o consumo ( Dahiya et al., la industria química, ya que son un bajo costo precursores sostenible de sustancias químicas
2018 ). Los métodos más habituales de evacuación para la gestión de estos residuos son tierras fi llenando, reducidas (alcoholes, aldehídos o cetonas) ( Dahiya et al., 2015 ). De hecho, estos compuestos han
el compostaje o la incineración. Sin embargo, los costes de gestión elevados y el impacto ambiental sido tradicionalmente obtenido por medio petroquímicas, mientras que la búsqueda de fuentes
negativo debido a la emisión de gases de efecto invernadero son las principales preocupaciones renovables, junto con las preocupaciones ambientales está impulsando la necesidad de desarrollar
asociadas a estos métodos tradicionales ( Gil et al., 2015 ). Por lo tanto, con el fin de eludir los nuevos modelos de producción.
inconvenientes y contribuir a la economía circular, el científico fi c comunidad está centrando correo ff Orts
en la reducción de la eliminación de residuos agroindustriales a través de su valorización como la
bioenergía y bioproductos. En esta perspectiva, los procesos biológicos están atrayendo mucho Aunque los residuos agrícolas se han empleado generalmente para la producción de metano, la
interés desde una amplia gama de compuestos orgánicos podría ser utilizado como materia prima el investigación se centró en la utilización de estos sustratos para la producción de AGV es aún limitada
apoyo a una más sostenible y costo-e ff enfoque reflexivo para manejar los desechos agrícolas ( Strazzera en ambos niveles biológicos y microbiológicos. En los últimos años, algunos residuos orgánicos han
et al, 2018.; Wang et al., 2013 ). La digestión anaeróbica (AD) es uno de los bioprocesos más sido estudiados por los AGV en lugar de la producción de biogás a través de un proceso de
explotados ya que ayuda a tratar a los residuos, mientras que la producción de biogás como una fermentación anaerobia (que implican etapas acidogenic y acetogénicos), tales como los residuos de
forma de energía. Durante AD, la materia orgánica se degrada por consorcios microbianos sinérgico alimentos cantina heterogénea o biomasa de microalgas ( Dahiya y Mohan, 2019; Magdalena et al.,
en cuatro etapas (hidrólisis, acidogénesis, acetogénesis y metanogénesis). Los hidratos de carbono, 2019 ). Sin embargo, estos autores encontraron que la composición de los desechos utiliza como un
proteínas y lípidos en la materia prima se transforman posteriormente en moléculas más pequeñas material de alimentación junto con las condiciones de funcionamiento definidos en los reactores
(tales como ácido acético, H 2 y compañía 2) que son fi finalmente transformado en biogás por archaea (temperatura, pH o velocidad de carga orgánica) encarecidamente una ff ected el proceso de correo FFI ciencia,
metanogénicas. Sin embargo, los metanógenos son los más sensibles poniendo de relieve la importancia de superar la actividad metanogénicas. Por consiguiente, el objetivo
del presente estudio fue evaluar el potencial de los desechos agrícolas como materias primas para la
producción de AGV a través anaeróbica

• Autor correspondiente.

Correos electrónicos: silvia.greses@imdea.org (S. Greses), elia.tomas@imdea.org (E. Tomás-PeJo), cristina.gonzalez@imdea.org (C. González-Fernández).

https://doi.org/10.1016/j.biortech.2019.122486
Recibido el 30 de septiembre de 2019; Recibido en la forma 20 de noviembre de 2 019 revisado; Aceptado 21 de noviembre 2019

Disponible en Internet el 26 de noviembre de 2019

0960-8524 / © 2019 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.


S. Greses, et al. Bio-Tecnología 297 (2020) 122486

tabla 1 con 1 L de la mezcla de los lodos antes mencionado. Los reactores se magnéticamente agitó y
Pepino, tomate y residuos de lechuga composición como la media ± desviación estándar. condiciones de funcionamiento incluyeron 25 ° C temperatura de digestión y una carga orgánica Rate
(OLR) de 3 g VS · d - 1 · L - 1.

Pepino Tomate Lechuga La temperatura se mantuvo con una camisa de agua conectada a un baño de agua de temperatura
controlada. CSTR fueron purgados y alimentados una vez al día a través de un puerto de muestreo
TCOD (g / L) 55,2 ± 7,2 68,6 ± 6,8 55,2 ± 10,2
mediante el uso de una jeringa. CSTR correo ffl uents se analizaron tres veces por semana para
SCOD (g / L) 30,7 ± 1,1 45,0 ± 4,5 35,7 ± 5,8
controlar los procesos biológicos. De alta presión en los reactores se evitó mediante la conexión de
TS (g / L) 30,4 ± 3,0 41,5 ± 2,7 39,6 ± 0,5
VS (g / L) 27,2 ± 3,0 34,3 ± 0,9 34,8 ± 0,2 una tubería de gas del espacio de cabeza del reactor para un sello de agua, que también garantiza la
VS (%) 89,6 ± 2,3 82,6 ± 8,5 88,0 ± 6,4 ausencia de contacto entre la biomasa anaeróbica y el aire atmosférico. Los tiempos de retención
TN (g / L) 1,04 ± 0,11 1,08 ± 0,95 1.50 ± 0.97 hidráulica (TRH) establecidas en los reactores estaban directamente relacionados con la OLR, que
SN (g / L) 0,21 ± 0,02 0,13 ± 0,02 0,24 ± 0,03
dependía del contenido de sólidos volátiles (VS) en los residuos agroindustriales. Por lo tanto, TRH
NUEVA HAMPSHIRE 4 + - N (g / L) 0,03 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,03 ± 0,02
establecidos en los CSTR alimentados con pepino (CSTR-C), tomate (CSTR-T) y la lechuga (CSTR-L)
TCH (g / L) 19,9 ± 0,9 21,9 ± 4,0 25,1 ± 0,2
TProteins (g / L) 6,5 ± 0,7 6,8 ± 0,4 9,4 ± 0,6 eran
pH 5,2 ± 0,2 3,9 ± 0,1 5,5 ± 0,2
% CH (w / w) 65,5 ± 9,1 52,7 ± 12,5 63,4 ± 4,8 9,3 ± 1,0, 12,5 ± 1,0 y 10,2 ± 1,0 días, respectivamente. De acuerdo a Garcia-Peña et al. (2011) , AD
% De proteínas (w / w) 22,7 ± 4,2 18,6 ± 8,5 23,7 ± 0,3
de desechos agrícolas podría conducir a una significante fi caída del pH no puede (hasta 4) en el
% de lípidos (w / w) 1,4 ± 0,2 11,3 ± 2,0 1,4 ± 0,9
% Ash (w / w) 10,4 ± 2,3 17,4 ± 9,2 12,9 ± 0,4
sistema que inhibe el bioproceso de la degradación de la materia orgánica. Con el fin de evitar una
potencial inhibición acidogénica, los pH fueron diaria monitoreados y ajustados manualmente entre
5,5 y 6,0 mediante la adición de NaOH al material de alimentación. Este intervalo de pH se informó a
fermentación en reactores continuos y discontinuos. análisis de la comunidad microbiana se realizó ser la óptima para evitar que la metanogénesis y aumentar la producción de AGV ( Bolzonella et al.,
con el fin de establecer una correlación entre la población microbiana y el rendimiento del proceso que 2018 ).
permitiría la identificación de microorganismos clave involucrados en la producción de AGV a partir de
residuos agroindustriales. De esta manera, la novedad de esta investigación se basa en la evaluación
de residuos agroindustriales como un recurso para la producción de AGV y la identificación de la 2.1.3. Los métodos analíticos y rendimiento de los procesos
población microbiana clave que asegura altos rendimientos de conversión. reactores discontinuos se monitorizaron mediante la medición de contenido de AGVs semanal (2 - 3
veces por semana) hasta que la concentración estable se alcanzó a lo largo del período de tiempo. Para ese
propósito, 0,5 ml de la muestra se extrajo de cada ensayo de lote a través del septo reactor mediante el uso
de una jeringa.
Para los CSTR, las muestras se analizaron en términos de total y soluble Demanda Química de
2. Materiales y métodos
Oxígeno (TCOD y SCOD), amonio (NH 4 + - N) concentración, así como sólidos totales y volátiles (TS y
VS) de acuerdo con métodos estándar ( APHA, 2012 ). En ambos reactores continuos y discontinuos,
2.1. proceso de fermentación anaeróbica
AGVs se midieron usando un cromatógrafo de líquidos (1260 HPLC, Agilent) equipado con un
detector de índice de refracción, una pre-columna (de cationes H Re fi columna ll Cartucho
2.1.1. Los desechos agrícolas utilizados como materias primas
Microguard, Biorad) y una columna de exclusión iónica (Aminex HPX-87H 300x 7,8 mm ID, Biorad).
Pepino, tomate y lechuga fueron seleccionados como materias primas para la bioconversión
La fracción de metano en el biogás se midió tres veces a la semana usando un cromatógrafo de
anaeróbica en AGVs ya que estos están formando parte de los mayores residuos agrícolas excedentes.
gases fi TTED con un detector de conductividad térmica (Clarus 580 GC, PerkinElmer) y equipado con
Los materiales de alimentación fueron aplastadas utilizando un mezclador y luego caracterizados antes
dos columnas de relleno acoplado (HSN6-60 / 80 Sul fi nert P 7 ' x 1/8 '' OD y MS13X4-09SF2 40 / 60P
de alimentar a los reactores.
9 ' x 1/8 '' OD, PerkinElmer).
tabla 1 muestra la composición de los tres residuos agrícolas en términos de total y soluble Demanda
Química de Oxígeno (TCOD y SCOD), sólidos totales y volátiles (TS y VS), total y nitrógeno soluble
(TN y SN), amonio (NH 4 + - N), hidratos de carbono totales (TCH), proteínas totales (TProteins), lípidos
y pH.
Una vez que el proceso biológico alcanzó el estado estacionario (3 × HRT), que se caracterizó,
además, por la composición estable de la EF-
Florida uents (COD, NH 4 + - N, TS, VS, CH 4), proceso e FFI eficiencia se evaluó en términos de
2.1.2. Descripción anaeróbico reactores y operación bioconversión y porcentajes COD solubilizados. Estos parámetros se calcularon como:
Los residuos agroindustriales seleccionados se fermentaron inicialmente en 120 ml reactores
discontinuos anaerobio con 70 ml de volumen de trabajo. Todos los reactores por lotes se inocularon
influente
con una mezcla de lodos (50% v / v de cada uno) que venía de: (i) un digestor anaeróbico % Bioconversión AGVs= · 100
TCOD efluente (1)
convencional situado en una planta de tratamiento de aguas residuales (Valladolid, España) y (ii) un
lodo recogido de un digestor psychrophilic especí fi camente utilizado para la producción de AGV. La AGV efluente de

puesta en marcha de los ensayos por lotes se realizaron a pH 7 mediante la adición de NaOH (6 M) y %BACALAOSol = · 100
SCOD aguas residuales (2)
al sustrato relación de inóculo de 3 g DQO g VS a - 1. Esta relación se había informado anteriormente a
obstaculizar la actividad metanogénicas, promover la acumulación de AGV ( González-Fernández y donde AGV mi ffl uente es la concentración del ácido acético (HAc), ácido propiónico (HPR), ácido

García-Encina, 2009 ), Mientras que se recomienda un pH neutro para asegurar un rendimiento del isobutírico (iso-HBU), ácido butírico (HBU), ácido isovalérico (iso-Hval), ácido valérico (Hval) y ácido

proceso adecuado ( Zhou et al., 2018 ). experimentos por lotes se realizaron a 25 ° C junto con las caproico (HCA) en la e ffl uente medida como DQO g · L - 1, TCOD en Florida uente es el contenido total de

pruebas en blanco. ensayos en blanco se llevaron a cabo en las mismas condiciones, pero se utilizó DQO en el di ff Erent agroindustrial desechos utilizado como materia prima (g DQO · L - 1) y SCOD mi ffl uente

agua en lugar de sustrato para tener en cuenta la producción de AGV endógenos del inóculo. Por lo es la fracción DQO soluble del correo ffl uente (g DQO · L - 1).

tanto, 3 ensayos por lotes se realizaron con sus correspondientes piezas en bruto y todos los
ensayos por lotes se realizaron por duplicado. Todos ellos están dirigidos por 30 días hasta que se
alcanzó la producción de AGV estables.
2.2. análisis de la comunidad microbiana

El inóculo y las comunidades microbianas recuperadas del di ff CSTR Erent se analizaron cuando
Después de los experimentos por lotes, pepino, tomate y desechos de lechuga fueron digeridos los bioprocesos alcanzaron el estado estacionario. Para ello, se tomaron 2 ml de las muestras y se
anaeróbicamente en los reactores de tres a escala de laboratorio continuo de tanque agitado (CSTR) con congelaron inmediatamente en - 20 ° C para la extracción de DNA posterior. De acuerdo a
1 L de volumen de trabajo. CSTR se inocularon

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fabricante ' s protocolo, el ADN extraído se obtiene a partir de 1 ml de muestra usando un kit FastDNA
SPIN para Suelo (MP Biomedicals, LCC). Calidad y concentración de ADN se midieron con el
espectrofotómetro NanoDrop (SPECTROstar Omega - BMG Labtech, DE). Los cebadores 341F y
805R (F - CCTACGGGNGGCWGCAG y R - GACTACHVGGGTATCTAATCC) se utilizaron para la
ampli fi cación de las regiones V3 hipervariable y V4 del gen 16S rRNA para ambas bacterias y
arqueas. Los amplicones se secuenciaron en un secuenciador de MiSeq (Illumina) por FISABIO
(Valencia, España) y computacionalmente procesan de la siguiente; fi rstly, el programa PEAR ( Zhang
et al., 2014 ) Se utilizó para fusionar el extremo emparejado lee de cada muestra y a partir de
entonces, PRINSEQ ( Schmieder y Edwards, 2011 ) estaba acostumbrado a fi filtro de las secuencias
con una puntuación media de calidad de 30 seguido de la eliminación de las secuencias de los
cebadores utilizando Mothur ( Schloss et al., 2009 ). Posteriormente, secuencias quiméricas fueron
retirados y las secuencias resultantes se agrupan en unidades operativas taxonómicos (Otus) en
97% de identidad de secuencia (OTU0.97) con USEARCH ( Edgar, 2010; Edgar et al., 2011 ), Que
utiliza Greengenes gg_13_8 base de datos ( McDonald et al., 2012 ) E incorporado en el cuantitativas
penetraciones en Ecología Microbiana (QIIME)

Figura 2. media y la desviación estándar de los AGVs medidos durante el estado estacionario del reactor
alimentado con pepino (CSTR-C), tomate (CSTR-T) y la lechuga (CSTR-L) y sus correspondientes
bioconversión e FFI deficiencias.

1.9.1 paquete de software ( Caporaso et al., 2010 ).


la fermentación anaeróbica de los lodos de aguas residuales, que aumentó a 45% cuando se aplica un
tratamiento térmico previo. valores aún más bajos (25%) fueron reportados por Y Bolaji Dionisi (2017) durante
la fermentación anaeróbica de una mezcla de residuos vegetales y ensalada. Por lo tanto, dados los
3. Resultados y discusión
resultados prometedores obtenidos en modo por lotes, los residuos se ensayaron adicionalmente en los
reactores alimentados continuamente.
3.1. La fermentación anaeróbica de residuos agroindustriales en los reactores por lotes para la producción de AGV

En primer lugar, la valorización de los residuos agroindustriales se evaluó mediante pepino 3.2. La fermentación anaeróbica de residuos agroindustriales en reactores continuos de producción de
anaeróbicamente degradantes, tomate y lechuga con el fin de bioconvert su contenido de materia AGV
orgánica en AGVs valiosos en modo por lotes. Como se puede ver en Figura 1 a, ensayos de lotes
duró 30 días hasta que se alcanzó estable concentración AGV. Esta concentración representó 10,2, 3.2.1. bioconversión correo FFI deficiencias

9,9 y 9,0 g DQO · L - 1 con un fi pHs NAL de 5,8, 5,5 y 5,6 en los reactores por lotes alimentados con Una vez demostrado que el pepino, tomate y lechuga exhibió un alto potencial para la
pepino, tomate y lechuga residuos, respectivamente ( Figura 1 si). Estas concentraciones de DQO producción de AGV, la fermentación anaeróbica se realizó en el modo de fermentación continua para
correspondían a bioconversión e FFI deficiencias de 58,0, 49,5 y 55,2%. Además, similar AGVs pro fi Le evaluar la viabilidad del bioproceso. Como se puede ver en Figura 2 , AGVs alcanzó concentraciones
fue alcanzado independientemente de los residuos empleadas y hbu y HAc fueron los AGV más de 25,3, 29,8 y 25,0 g DQO · L - 1 para CSTR-C, CSTR-T y CSTR-L, respectivamente, dando lugar a
abundantes en todos los casos. bioconversión e FFI deficiencias de 52,5%,

40,3% y 48,8% ( Figura 2 , Tabla 2 ). Estas bioconversiones correspondían a los rendimientos de VFA de
distribución AGVs estaba de acuerdo con los recuperados de la fermentación anaeróbica de la 1,24 g DQO · g VS en Florida uente - 1 ( 1,11 g DQO · g TS en Florida uente - 1),
fracción orgánica de los residuos urbanos ( Crognale et al., 2019 ) O verdura y ensalada de residuos ( Bolaji 1,27 g DQO · g VS en Florida uente - 1 ( 1,05 g DQO · g TS en Florida uente - 1) y 1,28 g DQO · g VS en Florida uente - 1 ( 1,13 g
y Dionisi, 2017 ), Donde butírico y acético fueron los AGVs más abundantes. Lo más probable es esta DQO · g TS en Florida uente - 1). Estos resultados muestran el gran potencial de residuos agroindustriales para la
similitud se debió al hidratos de carbono y proteínas comparables contenido de las materias primas. producción de AGV ya que esos valores eran mucho más altos que los reportados en estudios previos
Sin embargo, los resultados obtenidos en el presente documento representan considerables para diferentes flujos de residuos. Los valores presentados en el presente documento eran casi 2 veces
bioconversiones más altos en comparación con los estudios anteriores relacionados con la mayor que los valores previamente reportados por Moretto et al. (2019) de la fermentación alcalina de
producción AGVs de di ff residuos Erent arroyos en reactores discontinuos. Como ejemplo, Iglesias-Iglesias residuos de alimentos. Estos autores alcanzaron un rendimiento máximo VFA de 0,77 g DQO · g VS en Florida
et al. (2019) uente - 1 después de un pretratamiento térmico de los residuos de comida. Valentino et al. (2018) encontrado
que fracción orgánica de
informó de que sólo el 36% de bioconversión se puede llegar desde una

Figura 1. ( a) la evolución Experimental AGVs y (b) AGVs pro fi Le bioconversión y correo FFI deficiencias obtuvieron a partir de la fermentación anaeróbica de pepino, tomate y lechuga en la fase de estado estacionario de reactores
discontinuos.

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Tabla 2 durante el bioproceso, dando lugar a un pH bajo en la fermentación anaeróbica licor mixto del
media y la desviación estándar de los parámetros del proceso medidos durante el período de estado CSTR-T. Como se puede ver en Tabla 2 , CSTR-T exhibió el pH del proceso más baja (5,6), así como
estacionario (N = 4) para los tres CSTR junto con el correo FFI porcentajes carenciales. la más alta acumulación TCOD, TS, VS en el reactor a pesar de que los tres reactores se
alimentaron con el mismo OLR. Estos resultados indican una limitación tasa hidrolítica debido a la

CSTR-C CSTR-T CSTR-L acumulación de materia orgánica en lugar de bioconversión en AGV. Por otra parte, la actividad
hidrolítica limitado podría estar asociada con el contenido de lípidos superior en tomate residuos en
pH 5,8 ± 0,1 5,6 ± 0,1 6,0 ± 0,1
comparación con pepino y lechuga, porque los lípidos muestran bioconversiones inferiores e ffi-
TCOD (g / L) 39,2 ± 0,6 55,2 ± 0,2 49,8 ± 0,4
SCOD (g / L) 27,8 ± 0,9 43,0 ± 0,2 25,3 ± 0,3
TS (g / L) 22,7 ± 0,2 28,1 ± 0,2 24,8 ± 0,3
VS (g / L) 14,6 ± 0,3 18,4 ± 0,3 15,7 ± 0,3 deficiencias que los carbohidratos y proteínas ( Alibardi y Cossu, 2016 ). Esta limitación puede ser con fi
NUEVA HAMPSHIRE 4+ - N (g / L) 0,31 ± 0,01 0,24 ± 0,01 0,59 ± 0,01 rma también por el contenido de amonio en CSTR-T. Mientras que la caracterización química de
HAc (gDQO / L) 3,9 ± 0,8 5,4 ± 0,6 5,5 ± 0,7
tomate presenta un contenido similar de nitrógeno total de pepino ( tabla 1 ), El amonio liberado
HPro (gDQO / L) 1,0 ± 0,2 0,9 ± 0,4 1,9 ± 0,3
Iso-HBU (gDQO / L) 0,6 ± 0,4 5,4 ± 0,3 0,7 ± 0,4
durante la degradación anaeróbica de tomate era 1,3 veces menor que en CSTR-C. Además, el bajo
HBU (gDQO / L) 11,8 ± 1,0 8,0 ± 0,8 10,6 ± 1,0 pH puede una ff ect no sólo la etapa hidrolítica sino también el acidogénico. De acuerdo a Jiang et al.
Iso-Hval (gDQO / L) 0,0 ± 0,0 0,0 ± 0,0 0,5 ± 0,1 (2013) , Valores de pH cercanos a 5 provocan una limitación considerable en la conversión de la DQO
Hval (gDQO / L) 2,4 ± 0,3 0,9 ± 0,2 3,0 ± 0,2
soluble en AGVs, resultando en una DQO-VFA / COD inferior Sol proporción. En este estudio, la
HCa (gDQO / L) 5,7 ± 1,3 9,7 ± 1,9 3,3 ± 0,7
inhibición acidogénica también se evidenció por la DQO-VFA / COD Sol proporción. 68,2% de la DQO
HAc (% v / v) ** 24,7 ± 4,5 28,4 ± 2,7 32,2 ± 2,7
HPro (% v / v) ** 4,2 ± 0,9 3.3 ± 1.4 8,0 ± 0,9 solubilizado fue manera biológica en AGV en el caso de CSTR-T en comparación con 87,5% y 98,9%
Iso-HBU (% v / v) ** 2,1 ± 1,3 16,6 ± 1,3 2,5 ± 1,6 de conversión para CSTR-C y CSTR-L, respectivamente. Sin embargo, a pesar de tomate
HBU (% v / v) ** 43,5 ± 3,9 24,5 ± 2,1 36,8 ± 4,0 bioconversión fue ligeramente inferior en comparación con los otros dos residuos, las conversiones
Iso-Hval (% v / v) ** <LD * <LD * 1,4 ± 0,1
de DQO soluble en AGVs fueron más altos que los encontrados por otros estudios de la fracción
Hval (% v / v) ** 8,0 ± 0,9 2,4 ± 0,5 9,3 ± 0,6
HCa (% v / v) ** 17,5 ± 4,2 24,8 ± 5,4 9,4 ± 1,8
orgánica de los residuos sólidos municipales y residuos de alimentos ( Cheah et al., 2019 ), Donde el
CH 4 (%) 7,6 ± 4,7 6,1 ± 2,7 11,8 ± 4,3 23% de la DQO-VFA / COD Sol Se informó de ratio. Por lo tanto, estos resultados indican una alta
Bioconversión (%) 52,6 ± 0,8 40,1 ± 0,9 49,4 ± 1,4 actividad acidogénica en todos los CSTR promovidas por la población microbiana robusto interviene
BACALAO sol (%) 87,5 ± 1,1 68,2 ± 2,2 98,9 ± 2,9
en la fase acidogénica. Por otra parte, el contenido de amoniaco fue insignificante en el CSTR y la
BACALAO eliminación (%) 29,5 ± 2,1 23,2 ± 4,8 5,2 ± 1,4
producción de metano fue considerable baja ( Tabla 2 ) En comparación con los procesos anaeróbicos
AGV / TS (gcod / GTs en Florida uente) 1,11 ± 0,02 1,05 ± 0,04 1,13 ± 0,09
AGVs / VS (gDQO / GVS en Florida uente) 1,24 ± 0,05 1,27 ± 0,13 1,28 ± 0,08 especialmente dedicadas a la producción de metano. Sin embargo, los porcentajes de eliminación de
DQO representaron el 29,5, 23,2 y 5,2% en CSTR-C, CSTR-T y CSTR-L, respectivamente ( Tabla 2 ).
* LD: Más bajo que el límite de detección. Aunque el metano fue considerable baja durante el proceso biológico (en torno al 6 - 12% de CH 4 en
* * Estos porcentajes se calcularon como gVFA / gVFA total · 100. biogás), eliminación de la DQO se produjo no sólo debido a metano, pero también a través de la
producción de hidrógeno. El hidrógeno se produce por bacterias syntrophic de etilo-oxidante, donde
residuos sólidos municipales solamente alcanzaron un bioconversión 31%, mientras se consumió parte de AGVs para generar H 2 y compañía 2. Este fenómeno se produjo sobre todo en
Iglesias-Iglesias et al. (2019) logrado una bioconversión del 22% en un fermentador continuo de lodos CSTR-C y CSTR-T, donde el porcentaje de hidrógeno dentro del gas alcanzó 25,4% y 24,3% y
de aguas residuales. Por lo tanto, los resultados presentados evidenciaron pepino, tomate y desechos eliminación de la DQO logra los porcentajes más altos. En este punto, cabe destacar que no más
de lechuga como prometiendo materias primas para la producción de AGV. análisis de la fase gaseosa se realizó ya que el objetivo de esta investigación fue la conversión de la
materia orgánica en AGV. En este contexto, CSTR-C logra la bioconversión más alta (52,6%)
Similar bioconversión correo FFI deficiencias se alcanzaron en los dos, por lotes ( Figura 1 ) Y probablemente debido a la alta biodegradabilidad de estos residuos agroindustrial ( Lowe et al., 2019 ).
continua ( Figura 2 ) modos de funcionamiento. CSTR-T representó la mayor di ff rencia entre los Sin embargo, solubilizado bacalao no fue completamente convertida en AGVs (87,5%) que revela
modos operativos (9 puntos porcentuales), probablemente debido a la dirección ff ect del pH en el que el proceso biológico podría ser ligeramente mejorada por optimización de las condiciones de
proceso biológico. De hecho, los materiales de alimentación compuestas por tomate desechos funcionamiento, tales como el pH, el cual fue menor que 6, o la promoción de bacterias acidogénicas
exhibieron un pH más bajo sustancialmente de otros residuos agrícolas ( Gil et al., 2015 ), Por lo que través de la variación HRT ( Magdalena et al., 2019 ).
di FFI culto del ajuste del pH y una negativa ff ejando el proceso biológico. Por el contrario, otros
estudios detectaron una signi fi disminución bioconversión no puede, cuando la fermentación
anaeróbica se realizó en un CSTR en comparación con el modo de fermentación por lotes. Por
ejemplo, Y Bolaji Dionisi (2017) informaron que la fermentación anaeróbica de una mezcla de
residuos vegetales y ensalada llevado a una disminución de bioconversión del 21% al 7% cuando
reactores se hicieron funcionar en modo continuo por lotes y, respectivamente. Frente a eso, en la
presente investigación, la operación del reactor en modo continuo apenas una ff ected los
rendimientos de conversión alcanzado en el modo por lotes.

3.2.2. AGV Pro fi Le distribución


Los altos rendimientos obtenidos en el presente estudio pueden ser correlacionadas con el alto En cuanto a la distribución de AGV en los reactores, HAc, hbu HCA fueron los AGV más
contenido de hidratos de carbono de los residuos agroindustriales ( tabla 1 ). Asimismo, el ajuste del abundantes en todos los CSTR ( Figura 2 , Tabla 2 ). CSTR-T también presenta un alto contenido de
pH en la materia prima, probablemente, también mediada este mayor bioconversión ya que las iso-HBU (16,6%) mientras que se determinó una alta presencia de Hval en CSTR-C y CSTR-L (8,0%
condiciones ácidas favorece la acumulación AGV en un grado mayor que las condiciones alcalinas ( Bolzonella
y 9,3%, respectivamente). Como se informó anteriormente, la distribución de AGVs es dependiente
et al., 2018 ). En este punto, cabe destacar que el ajuste del pH se requiere la alimentación anterior, de la composición de materia prima y las condiciones de funcionamiento establecidas en los CSTR ( Battista
ya que el uso directo de los desechos puré conducido a una fermentación demasiado ácido, lo que et al, 2019.; Strazzera et al., 2018 ). La presencia de un alto porcentaje HBU es principalmente
dificulta la actividad de los productores de ácido (datos no mostrados). valores de pH de los consecuencia de su alto contenido de hidratos de carbono ( Strazzera et al., 2018 ). Un alto porcentaje
materiales de alimentación antes del ajuste varió 4 - 5 ( tabla 1 ). Aunque CSTR-T logra la más alta de HAc se asocia no sólo a los hidratos de carbono, pero también se puede producir a partir de
concentración de AGV, su bioconversión e FFI ciencia contra el tomate residual alimentada fue menor residuos ricos en proteínas ( Magdalena et al., 2019 ). Por otra parte, el alto contenido de HAc se
que los alcanzados en CSTR-C y CSTR-L. Como se ha mencionado, el control de pH del residuo de consideró como un indicador clave de un gran rendimiento de los procesos, ya que reveló una baja
tomate utilizado como materia prima fue particularmente desafiante. El bajo pH de este residuo ( tabla actividad de la metanogénesis en el bioprocesos. La alta presencia de HAc significaba que la vía
1 ) Hecha di FFI el ajuste de culto acetoclástica

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se vio obstaculizado por la producción de metano. Las bacterias que pertenecen a Firmicutes filo están implicadas comúnmente en las etapas
Por otra parte, el alto contenido de Hval y HCa fueron consistentes con estudios llevados a cabo a hidrolíticas y acidogénicas del proceso de fermentación anaerobia y por lo tanto, son capaces de
alta OLR (en combinación con una terapia de reemplazo hormonal baja), donde la presencia de estos degradar los compuestos orgánicos de residuos agroindustriales, tales como hidratos de carbono ( García-Peña
AGVs se correlacionó con una sobrecarga del sistema y, en consecuencia, con una actividad et al., 2011 ). En el presente estudio, Firmicutes estaba compuesto principalmente de los géneros La
metanogénicas inhibición ( Han et al., 2005; Strazzera et al., 2018 ). Además, el pH y la temperatura cepa de R., Acidamnicoccus, Lactobacillus, Bulleidia y de los que pertenecen a la orden Clostridiales.
también una ff refleja la acumulación de CHA. De acuerdo a Cheah et al. (2019) , La producción de HCA La cepa de R., que era altamente presente en CSTR-C y CSTR-T, es un género asociados a los
es promovida cuando reactores se hacen funcionar a pH 6 usando los residuos de alimentos como polisacáridos hidrólisis que libera HAc y H 2 como productos principales, mientras que las bacterias
sustrato, mientras Magdalena et al. (2019) declararon que las condiciones psicrófilas (25 ° C) que pertenecen al orden Clostridiales son bien conocidos por su capacidad de fermentar hidratos de
obstaculizados la degradación de HCa en AGVs más cortos. Por lo tanto, la acumulación de HCa carbono para producir HAc y HBU ( £ ukajtis et al., 2018 ). De hecho, su predominio se había
mediada un bajo contenido de AGVs más cortos y H 2 producción, lo que limita los procesos de informado anteriormente durante la fermentación de los residuos de cocina de la fruta ( Gómez-Romero
metanogénesis y el apoyo a la alta e FFI deficiencias alcanzados en el presente trabajo. et al., 2014 ). Por lo tanto, la presencia de estas bacterias fue probablemente relacionado con el alto
contenido de hidratos de carbono en los residuos agroindustriales ( tabla 1 ) Y, en consecuencia, su
degradación llevado a un elevado contenido de HBU y HAc mide en los reactores e ffl (uents Tabla 2 , Figura
Cabe destacar el alto contenido de AGV de cadena larga, así como la prevalencia de los de 2 ). El alto contenido de HBU y HAc también fue apoyada por la presencia de género Acidaminacoccus,
carbono de número par, que representan el 86,0, que se ha informado como productor de HAc y HBU durante la degradación de proteínas ( Chang et
94,3 y 80,9% para CSTR-C, CSTR-T y CSTR-L, respectivamente. Estos AGVs se consideran al., 2010 ). Con respecto a Bulleidia, este género se señaló como una bacteria de fermentación de una
precursores para la síntesis de hidroxibutirato (HB), que está implicado en la producción de variedad de azúcares y proteínas que dan lugar a un HAc y HCa ( Gulhane et al., 2017 ). Este género
biopolímeros biodegradables tales como poli-3-hidroxibutirato (PHB) ( Valentino et al., 2018 ). Por lo fue probablemente responsable de la degradación de los hidratos de carbono y proteínas presentes
tanto, la producción biológica de AGV a partir de corrientes de desecho podría reducir en un 50% el en los desechos y también responsables de HAc y producción HCa en los CSTR. De hecho, aunque Bulleidia
coste económico de ciertos biopolímeros ( Iglesias-Iglesias et al., 2019 ). Adicionalmente, Zhou et al. fue identificado fi ed en todos los CSTR, se detectó la mayor abundancia de este género en el
(2018) discuten que AGVs de cadena larga son productos atractivos para la industria, ya que se CSTR-T, donde también se detectó el mayor contenido de CHA.
puede utilizar en varias aplicaciones tales como la síntesis de polímeros complejos o la producción
de biodiesel. Sorprendentemente, estos AGVs de cadena larga son normalmente más di FFI culto de
obtener que de cadena más corta AGV y, por tanto, el precio de AGVs aumenta concomitantemente
con su número de carbonos. En general, este estudio demostró que bioconversión alta e FFI deficiencias
pudieron ser contactados de la degradación anaerobia de residuos agroindustriales, dando lugar al
correo ffl uents con una notable cantidad alta de AGV totales y con un distribuciones estables que los
hacen como productos químicos plataforma adecuada para usos posteriores. Lactobacillus Se ha identificado fi ed como un inhibidor de la producción de hidrógeno ya que
podrían liberar algunos productos metabólicos que son tóxicos para hidrógeno-productores ( £ ukajtis
et al., 2018 ). Por otra parte, los géneros que pertenecen a Lachnospiraceae son conocidos como
homoacetogens, y por lo tanto participa en la absorción de hidrógeno para producir HAc ( Hung et al.,
2011 ). Ambas bacterias estaban relacionados con una producción de metano hidrogenotrófica
limitado ya que había un H reducida 2 producción y fue consumido parcialmente por bacterias
3.3. análisis de la comunidad microbiana determinada en la fermentación anaeróbica a homoacetogénica. Aunque arqueas hidrogenotrófica tales como Methanosphaera y Methanobrevibacter
cabo en modo de funcionamiento continuo ( Fig. 3 ) Dominó la comunidad metanogénicas, el bajo porcentaje de metano ( Tabla 2 ) con fi rma la
actividad limitada través de la vía hidrogenotrófica. Asimismo, el alto contenido de HAc junto con la
Una vez que los procesos biológicos alcanzaron el estado estacionario, las composiciones de la ausencia de metanógenos acetoclástica también apoyó la producción de metano reduce a través de
comunidad microbiana del CSTR se caracterizaron junto con la población microbiana presente en el la vía acetoclástica. De esta manera, se podría concluir que las condiciones impuestas eran
inóculo con el fin de identificar los microorganismos implicados en la producción de AGV a partir de apropiadas para disminuir la competencia comunidad metanogénicas para AGV.
residuos agroindustriales. Como se puede ver en Fig. 3 , Distribución comunidad microbiana cambió
considerablemente desde el inóculo para la población detectada dentro de los CSTR. La razón para
este cambio podría atribuirse a la respuesta de la microbiota anaerobia a la di ff condiciones
operativas Erent establecidos en los CSTR y el tipo de residuos utilizados como materias primas, ya
que ambos factores se consideran clave en Florida uencers sobre el microbioma ( Li et al., 2015 ). El Las bacterias del phyla Bacteroidetes y Actinobacteria también juegan un papel importante en la
análisis de la comunidad microbiana reveló que inóculo fue constituida de una variedad de phyla degradación de celulosa mediante la producción de propionato de metilo y de etilo como productos
comúnmente involucrados en los sistemas anaerobios para la producción de biogás y relacionado de fermentación ( Hatamoto et al, 2014.; Kampmann et al, 2012.; Rivière et al., 2009 ). De acuerdo con
con la degradación de proteínas ( Greses et al, 2017.; Magdalena et al, 2019.; Sundberg et al., 2013 ). la identi población bacteriana fi ed en el presente documento, se podría inferir que gran parte de esta
Los phyla incluido Firmicutes (67,0%), Proteobacteria (5,9%), cloro Florida EXI (3,5%), Bacteroidetes comunidad estaba estrechamente relacionada con pasos hidrolíticas y acidogénicas mientras que la
(7,0%) y Actinobacteria (7,3%) ( Fig. 3 ). En cuanto a los identi microorganismos fi ed en los CSTR, población relacionado con la actividad acetogénica era limitado. De acuerdo a Bolzonella et al. (2018) ,
Firmicutes fue el phylum más abundante (> 80% de abundancia relativa), seguida de Actinobacteria y La actividad acetogénica está estrechamente vinculado a la etapa metanogénica ya que la
Bacteroidetes ( Fig. 3 a), que constituyen una distribución de bacterias phyla común en fermentadores degradación syntrophically de compuestos intermedios en los precursores de metano normalmente
anaerobios ( GomezRomero et al., 2014 ). Cabe señalar que la desaparición de las proteobacterias y está teniendo lugar. En consecuencia, la ausencia de microorganismos acetogénicas tales como los
cloro Florida EXI en CSTR, en comparación con el inóculo, fue una característica común observado que pertenecen a Sytrophaceae familia o Syntrophomonadaceae corroboró la baja capacidad de los
previamente en otros estudios que se ocupan de la producción de AGV usando lodo recogido de los procesos biológicos a metano productos.
sistemas dedicados a la producción de biogás ( Magdalena et al., 2019 ). Además, la notable alta
abundancia relativa de Firmicutes en los CSTR fue probablemente asociado al alto contenido de
hidratos de carbono en los materiales de alimentación ya que los estudios anteriores reportaron
porcentajes similares cuando materias primas carbonrich fueron digeridos anaeróbicamente ( García-Peña En general, las comunidades hidrolíticas y acidogenic determinó como un correo FFI ciente
et al., 2011 ). microbioma degradante cuando se utilizan residuos agroindustriales. La comparación de la población
de la comunidad identi fi ed en el inóculo y en los CSTR, se podría concluir que las condiciones
operativas seleccionadas (temperatura de 25 ° C, ajuste de pH y OLR de 3 g VS · d - 1 · L - 1)

junto con la composición de materia prima en forma de la microbioma anaeróbica desarrollado en los
CSTR. Estas condiciones permitieron el predominio de un filo en particular (Firmicutes) y dieron lugar a
una especialización comunidad microbiana en la degradación de los hidratos de carbono para la
producción de AGV.

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Fig. 3. La abundancia relativa de bacterias y Arqueales UOT en niveles (A) phylum y (b) del género. grupos taxonómicos con abundancia relativa inferior al 1% fueron excluidos de la leyenda.

4. Conclusiones Apéndice A. datos suplementario

La alta bioconversión correo FFI ciencia (aprox. 50%) determinado en el presente documento Los datos complementarios a este artículo se pueden encontrar en línea en https: //
demostrado pepino, tomate y desechos de lechuga a ser recursos valiosos para la producción de doi.org/10.1016/j.biortech.2019.122486 .
AGV. Esta bioconversión correo FFI deficiencia era consecuencia de las condiciones de
funcionamiento definidos en los reactores y la composición de materia prima, que promovió una referencias
comunidad bacteriana clave especializada en la degradación de los hidratos de carbono y
responsable de la estable VFA pro fi distribución le (principalmente HAc, HBU y HCA). Esta población Alibardi, L., Cossu, R., 2016. E ff ECTS de carbohidratos, proteínas y lípidos de orgánico
perder en productos de producción de hidrógeno y la fermentación. Manag perder. 47, 69 - 77 .
microbiana estaba dominado por Firmicutes phylum (caracteriza por una alta actividad hidrolítica y
APHA, AWWA, WEF, 2012. Métodos estándar para el examen de agua y
acidogénica) que, junto con la falta de bacterias acetogénicas relacionados con CH 4 producción,
Las aguas residuales, 22a ed. Métodos estándar. Asociación Americana de Salud Pública, Washintong .
resultó en alta acumulación AGVs en los sistemas.
Battista, F., Frison, N., Pavan, P., Cavinato, C., Gottardo, M., Fatone, F., Eusebi, AL,
Majone, M., Zeppilli, M., Valentino, F., Fino, D., Tommasi, T., Bolzonella, D., 2019. Food desechos y lodos de
depuradora como materia prima para un BioRe urbano fi Nery producción de biocombustibles y bioproductos de valor
añadido. J. Chem. Technol. Biotechnol .
Bolaji, IO, Dionisi, D., 2017. acidogénicas fermentación de residuos vegetales y ensalada para
la producción de productos químicos: E ff ect de bu pH ff er y el tiempo de retención. J. Environ. Chem. Ing.
Declaración de interés en competencia
5, 5933 - 5943 .
Bolzonella, D., Battista, F., Cavinato, C., Gottardo, M., Micolucci, F., Lyberatos, G., Pavan,
Los autores declaran que no han sabido competir fi intereses financieros o relaciones personales P., 2018. La evolución reciente de la producción biohythane de desechos de alimentos para el hogar: Una
revisión. Bioresour. Technol. 257, 311 - 319 .
que podrían haber aparecido en el Florida influencia del trabajo descrito en este documento.
Caporaso, JG, Kuczynski, J., Stombaugh, J., Bittinger, K., Bushman, FD, Costello, EK,
Fierer, N., Peña, AG, Goodrich, JK, Gordon, JI, Huttley, GA, Kelley, ST, caballeros, D., Koenig, JE, Ley, RE,
Lozupone, CA, McDonald, D., Muegge, BD , Pirrung, M., Reeder, J., Sevinsky, JR, Turnbaugh, PJ, Walters, WA,
Widmann, J., Yatsunenko, T., Zaneveld, J., Knight, R., 2010. QIIME permite el análisis de highthroughput los
datos de secuenciación comunidad. Nat. Métodos 7, 335 - 336 .
Agradecimientos
Chang, YJ, Pukall, R., Saunders, E., Lapidus, A., Copeland, A., Nolan, M., del Rio, TG,
Lucas, S., Chen, F., Tice, H., Cheng, JF, Han, C., Detter, JC, Bruce, D., Goodwin, L., Pitluck, S., Mikhailova, N.,
Esta investigación ha sido financiada por el Ministerio de Economía y Competitividad español a
Liolios, K., Pati, A., Ivanova, N., Mavromatis, K., Chen, A., Palaniappan, K., Land, M., Hauser, L., Je ff Ries, CD,
través de la subvención RYC-2014-16823 y el proyecto ACMIBIO-DA (ENE2017-86864-C2-2-R), y el fi
Brettin, T., Rohde, M., Göker, M., Bristow, J., Eisen, JA, Markowitz, V., Hugenholtz, P., Kyrpides, NC, Klenk, HP,
el apoyo financiero de la Comunidad de Madrid proporciona a través de proyectos ALGATEC-CM
(P2018 / BAA-4532), co fi financiado por el Fondo Social Europeo y el Fondo Europeo de Desarrollo 2010. secuencia completa del genoma de acidaminococcus fermentans cepa de tipo (VR4
T). Estar. Genomic Sci. 3, 1 - 14 .
Regional. Los autores también desean agradecer la EDAR de Valladolid (España) para suministrar
Cheah, YK, Vidal-Antich, C., Dosta, J., Mata-Álvarez, J., 2019. grasos volátiles pro- ácido
amablemente el lodo anaeróbico. ducción de la fermentación mesófila acidogénica de la fracción orgánica de los residuos residuos y alimento
sólido municipal bajo pH ácido y alcalino. Reinar. Sci. Pollut. Res .
Crognale, S., Tonanzi, B., Valentino, F., Majone, M., Rossetti, S., 2019. Microbioma DY-
Namics y genes phaC sintasa seleccionadas en un planta piloto de producción de

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