CROMOGRAFIA EN COLUMNA.
Roger A. Gómez Jaramillo*. Jeile Berrio Olivero*.
Introducción.
La bases de la técnica cromatograficas que se utilizó
(cromatografía de columna) para la separación de los
diferentes analitos implicados en la matriz determinada, es
un poco más compleja si la comparamos con otra técnicas,
como la cromatografía en capa fina.
Pues este procedimiento se fundamenta, en la interacción de
dos fases (sólida y liquida). La fase solida se denomina, fase
estacionaria la cual se encuentra alojada en un tubo estrecho
y la fase liquida se llama fase móvil, la fase estacionaria
experimenta una serie de procesos (adsorción de los
componentes, solubilizacion en cada fase, arrastre por fase
móvil, entre interacciones de carácter cinético molecular con
la sustancia en cuestión). La fase móvil pasa a través de la
columna bien sea por gravedad o por aplicación de presión.
Se recurre a la cromatografía en columna cuando se
requiere la separación de mezclas o purificación de
sustancias a escala preparativa, en este proceso de
separación, es de vital importancia la elección del disolvente
más apropiado para realizarla La separación de los
componentes de la muestra fin de cuentas se realiza por la
diferencias en la afinidad que exista entre los distintos
compuestos de la muestra con la fase estacionaria.
Materiales y reactivos.
2 Pipetas de 5, 10 mL.
2 Beacker de 100 mL.
Pera de succion
Frasco lavador.
Bureta de 50 Ml
Dicromato de potasio 0.2 M
Permanganato de potasio 0.2 M
Ácido sulfúrico o.5 M
Silica gel
2 matraz aforados de 50, 100 m
Procedimiento.
Inicialmente procedemos a preparar la columna, es decir
introducimos la silica en la bureta de 50 mL pero antes
interponemos un capa de algodón entre el orificio de la bureta
con fase estacionaria, posteriormente procedemos a verter la
silica gel en la bureta luego le adicionamos agua con el fin de
compactar la silica y eliminar posibles burbujas de aire
presente en la columna una vez compactada y
*Estudiantes de Pregrado Programa de Química. Universidad de Córdoba (Montería - Cordoba).
Jorge A. Cordero Cabrales.* Favio A. Petro Buelvas*.
Ivan Dario Alvarez Petro *
homogeneizada la columna se vierte la fase móvil inicial para
nuestro caso ácido sulfúrico luego vertimos la solución
problema (mezcla dicromato de potasio – permanganato de
potasio) sin permitir que esta tenga contacto directo con la
fase estacionaria pues esto puede afectar su uniformidad, sin
para el suministro de acido sulfúrico, una vez separado el
primer componente de la muestra se procede a suministrar el
segundo eluyente, acido nítrico para arrastrar el componente
que quedo adsorbido en la fase estacionaria la recolección de
la meustra separada se realisa en fracciones de 2 ml
aproximadamente
Análisis de resultado
De acuerdo a los resultados obtenidos en la experiencia de
laboratorio, se pudo observar la efectividad, cuidados que hay
que tener, ventajas y desventajas de trabajar con columnas
empacadas.
Un factor determinante, en el resultado obtenido en un
procedimiento cromatografico donde se utilice columna
empacada es la composición o disposición de la fase
estacionaria en la columna. Por ejemplo un gran problema
que se nos presentó al momento de trabajar con columna
empacada fue el alojamiento de burbujas de aire en el
interior de la columna lo cual pudo ser producto de una mala
técnica de preparación de de la columna, a pesar de que se
tratar de evitar desde el momento en el cual empezamos a
aplicar la fase estacionaria, a pesar de estas difilcultades se
observó que hubo una posible separación de los
componentes de la muestra pues se observó o se recolectaron
fracciones con tonalidades diferentes, a un que esto no nos
asegura que se allan separado por completo los componentes
de la muestra, para estar seguro de esto debemos realizar un
análisis cuantitativo.
Conclusión.
Mediante el análisis de resultados podemos concluir que la
prueba en cromatografía en columna para la separación de
componentes de una mezcla de permanganato de potasio
con dicromato de potasio fue en parte satisfactoria, por que
se obtuvieron buenos resultados en cuanto a los productos
contenidos en los tubos de ensayo, aunque no todos nos
garantizaban que todos los compuestos contenidos en ellos
Lab Analítica III
Pá gina 1
eran iguales, pero mediante la identificación de un eluyente
adecuado (acido sulfúrico-acido nitrico) para esta separación
pudimos identificar dos componentes diferentes de esos
tubos de ensaye. Solo que al romperse la columna no se
pudo terminar de eluir toda la muestra.

Universidad de Córdoba (Montería - Colombia). Laboratorio Inorgánica I. Pá gina 2