PROTOCOLO DE LABORATORIO 2

Laboratorio No. 2
Manejo del microscopio.

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I. Introducción

El ser humano se ha caracterizado por el intenso interés por descubrir el mundo que lo
rodea, de mediar la búsqueda de implementos y herramientas que le ayuden a conocer y
comprender el lugar en el que se encuentra y las relaciones que existe entre la naturaleza
y el, indagando, formulando hipótesis, desarrollando tácticas y/o métodos para finalmente
obtener información concluyente respecto al objetivo inicial de su exploración. Para llevar a
cabo tal comprensión fue desarrollando herramientas que mediaron la posibilidad de
entender aquello que ante los ojos no es posible ver, y hacer distinción con aquello que es
fácil de caracterizar a simple vista.
Desarrollo del microscopio
Se presume que la fecha tangible para la aparición histórica del microscopio fue en 1590
con los holandeses Hans Janssen y su hijo Zacharias Janssen quienes al parecer
inventaron un microscopio compuesto. Sin embargo, no existen referencias que respalden
esta afirmación. A continuación, en 1609 Galileo Galilei (1564-1642), desarrolla un
microscopio compuesto de una lente cóncava y otra convexa pero solo hasta 1628 publica
su obra a la par que William Harvey (1578-1647) muestra a la sociedad su observación de
lo que el llamaría capilares sanguíneos al microscopio. Anillado a esta descripción, en
1665, Hooke ubica al interior de un corte fino de corcho cavidades profundas a las que
llamó Células (Audesirk, Audesirk y Byers, 2013, Cooper y Hausman, 2011, Sánchez y
Oliva, 2015).
A mediados del siglo XVII el holandés, Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723), describió
por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos con microscopios
de fabricación propia pero solo durante el siglo XVIII el microscopio tuvo diversos
adelantos mecánicos que aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso, aunque no se
desarrollaron por el momento mejoras ópticas. Posteriormente, en el siglo XIX, al
descubrirse que la dispersión y la refracción se podían modificar con combinaciones
adecuadas de dos o más medios ópticos, se lanzan al mercado objetivos acromáticos
excelentes. Sin embargo, las mejoras más importantes de la óptica surgieron en 1877,
cuando el alemán Ernst Abbe (1840-1905) publicó su teoría del microscopio y, por encargo
del también alemán Carl Zeiss (1816-1888), mejoró la microscopía de inmersión
sustituyendo el agua por aceite de cedro, lo que permite obtener aumentos de 2000. A
principios de los años 1930 se había alcanzado el límite teórico para los microscopios
ópticos, no consiguiendo estos aumentos superiores a 500X o 1000X. Sin embargo, existía
un deseo científico de observar los detalles de estructuras celulares (núcleo, mitocondria,
etc.), aunque actualmente, esta premisa es más tangible que en ese tiempo.

En la actualidad existen microscopios que exacerban la imaginación de los ingenieros de

la época en la que el primer microscopio fue visualizado y creado, sin embargo, todos los
aportes realizados por las mentes de tiempos pasados, sirvió de base fundamental para el

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desarrollo y continuo perfeccionamiento de los equipos de laboratorio que se crean por

estos días.

Microscopio Óptico
Es el microscopio más utilizado. Utiliza la luz visible para crear una imagen aumentada del
objeto. El microscopio óptico más simple es la lente convexa doble con una distancia focal
corta y que puede aumentar un objeto hasta 15 veces. En la actualidad, se usan
microscopios que disponen de varias lentes con las que se consiguen lentes con las que
se consiguen aumentos mayores incluso de hasta 2000 veces.
Poderes del microscopio
El microscopio óptico tiene cuatro (4) poderes de resolución, que conceptualmente se
refieren a distintas capacidades que tiene esta herramienta para mejorar la visualización
de la preparación (preparados inorgánicos u orgánicos).
Poder de Aumento: Permite magnificar la imagen. El poder de aumento de cada
objetivo se indica por el número gravado en la manga de la lente: el objetivo 10X aumenta
10 veces –el objetivo 40X, 40 veces; el objetivo 100X se encuentra generalmente marcado
con anillo blanco en su lente objetivo para indicar que se debe utilizar con aceite de
inmersión.

Aumento total= Aumento del objetivo x Aumento ocular

Poder de resolución: Se refiere a la capacidad de un sistema óptico de presentar dos

puntos próximos separados, o la distancia mínima en que se logran visualizar estos dos
puntos. Dentro del poder de resolución se deben tener en cuenta otras dos características
físicas: la Longitud de onda (λ) que se define como la distancia que recorre una onda
electromagnética (Son aquellas ondas que no necesitan un medio material para
propagarse por ejemplo, la luz visible y las ondas de radio, televisión y telefonía) en un
tiempo igual a un período y de la Apertura Numérica (A.N.) que se refiere a la capacidad
que tiene una fibra de vidrio por aceptar cierta cantidad de luz. La A.N de un lente es
directamente proporcional a su poder de resolución y está influenciado por la refracción de
la luz. La luz se refracta cuando viaja en ángulo hacia una sustancia con una densidad
óptica diferente. Cambia de dirección porque cambia de velocidad. Por ejemplo, cuando
pasa del aire al agua. Entonces la refracción tiene que ver con dos cosas: la velocidad y el
ángulo de incidencia. Cuanto más abierto sea el ángulo mayor el cambio de dirección y la
refracción, pero si la luz entra en una sustancia con un índice refractivo mayor, irá más
lento, como del aire al vidrio. Si el índice es menor irá más rápido, como del agua al aire.
La lentitud implica mayor refracción.

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El poder de resolución es entonces: λ/(2xN.A)

Donde λ: Longitud de onda y NA: Apertura numérica.
Poder de definición: Permite formar imágenes claras con contornos definidos.
Poder de profundidad: Posibilita la observación de varios planos de la misma
preparación sin variar la posición del enfoque.

II. Competencias de la práctica

1. Conocer el microscopio óptico, sus partes ópticas y mecánicas y la función de cada una
de ellas.
2. Acercar a los alumnos al mundo microscópico a través de la utilización del microscopio
interactivo.
3. Aprender a interpretar las imágenes que se observan en él microscopio
4. Diferenciar las imágenes obtenidas con distintos tipos de microscopio: óptico,
electrónico de barrido, electrónico de transmisión, de fuerza atómica y saber para qué
se emplea cada uno de ellos

III. Metodología

Materiales:
Microscopio óptico binocular
Muestras (Papel periódico, corte de raíz de cebolla, frotis epitelio bucal)
Láminas portaobjetos y laminillas cubreobjetos
Dispositivo electrónico
Actividad 1.
- Ingresar al siguiente enlace:
http://ntic.educacion.es/w3/recursos/bachillerato/bioygeo/ventana_hook/index.html, en este enlace
encontrara un proyecto educativo llamado “La ventana de Hooke”. La Ventana de Hooke es
una aplicación interactiva que pretende facilitar el descubrimiento y la exploración del mundo
microscópico de una manera sencilla e interactiva. Está dirigida a todos aquellos que sientan
curiosidad por conocer el mundo microscópico.
Está aplicación permite realizar un recorrido virtual por el mundo microscópico, desde la
historia del microscopio, sus diferentes tipos y usos, entre otras actividades virtuales que no
serán contempladas en este laboratorio.

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Luego de ver la introducción hacer clic en la casilla seguir (al lado derecho de la pantalla),
luego encontraran el menú donde deben dar clic sobre la opción el microscopio, una vez en la
zona del microscopio encontraran la introducción (pueden activar sonido en la parte superior
derecha de la pantalla ). En la introducción leer y realizar el ejercicio sobre aumentos.

Responde las siguientes preguntas:

a. ¿Por qué el ojo humano está imposibilitado para observar estructuras o seres
microscópicos?
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
b. La imagen encerrada en el círculo rojo corresponde a: __________________________
c. La estructura encerrada en el circulo verde corresponde a (subraye la respuesta
correcta):
 Grano de polen
 Pata de insecto
 Cristal de sal
 Ninguna de las anteriores
d. Cuál fue el aumento que permitió la observación anterior: _____________

En la parte de abajo en el lado de la pantalla se encuentran las flechas que permiten avanzar,
leer la sección 2 de la introducción y responder las siguientes preguntas:
e. La resolución del ojo humano es igual a ________, la resolución del microscopio óptico
es _________ y la resolución del microscopio electrónico es _______.
f. Según la lectura ¿qué es el poder de resolución?
_________________________________________________________________________________
g. ¿Qué partes del microscopio permiten aumentar la imagen de las muestras?
_______________________________________________________________________
h. En la parte 3 de la introducción activar el audio, luego posicionarse sobre cada uno de
los objetivos y completar:
En el objetivo de 10X la imagen de la muestra se aumenta ______
En el objetivo de 40X la imagen de la muestra se aumenta ______

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En el objetivo de 10X la imagen de la muestra se aumenta ______

i. ¿Los aumentos obtenidos son el resultante de qué operación, explique?

____________________________________________________________________
j. Leer o escuchar la parte 5 y responder ¿Cuál es la unidad de medida que se emplea
en microscopía, qué células se observan en los ejemplos, de estos ejemplos cuál fue el
que le pareció más interesante y por qué?
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
Leer o escuchar la parte 6, posicionarse sobre cada imagen y responder:
k. ¿Por qué algunas estructuras celulares como los ribosomas o agentes infecciosos
como los virus no se pueden observar con el microscopio óptico?
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
l. En frente de cada tipo de microscopio escribir la unidad de medida y su equivalencia.
 Microscopio óptico: ____________ Equivalencia: ___________
 Microscopio electrónico: ____________ Equivalencia: ___________
 Microscopio atómico: ____________ Equivalencia ___________

Resultado 1

1. Tomar pantallazo de la estructura identificada en el círculo verde en la parte 1 de la

introducción, ubicarlo en el siguiente campo óptico y completar

Aumento: ______

Forma: _______________________________
Color: ____________________________________
¿Qué subestructuras se logran visualizar?

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_________________________________________

Al terminar la introducción en el lado izquierdo de la aplicación, posicionarse sobre la palabra

microscopio y dirigirse a la sección del microscopio óptico en el menú. Situarse sobre cada
parte del microscopio y completar la siguiente tabla.
Parte del microscopio Nombre y sistema al que Función
pertenece

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¿Qué partes del microscopio faltan en el cuadro?

___________________________________________________________________________
¿Cuáles son sus funciones?
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________

Actividad 2.-
Ingresar al siguiente enlace: http://www1.udel.edu/biology/ketcham/microscope/scope.html, en este
enlace encontraran un microscopio interactivo, es decir pueden movilizar sus partes y enfocar
muestras, lo primero que deben hacer es iniciar el recorrido en el simulador dando clic en la caja al
lado derecho de la pantalla en “star tour”, el tour explica los pasos que se deben realizar para enfocar
una muestra. Los pasos son:

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1. Controlar la luz, dar clic en la caja al lado derecho de la pantalla en “control lighting, el
simulador les señala que partes del microscopio deben manipular para graduar la luz.

2. Seleccionar la muestra, hacer clic sobre “pick a slide”, seleccionar la muestra de papel
periódico y ubicarla sobre la platina.

3. Seleccionar el objetivo, dar clic en “swicth objetives”, rotar el revolver para ubicar el objetivo de
4X en la posición correcta.

4. Ubicar la muestra correctamente, hacer clic en “reposition slide holder”, movilizar la platina de
manera que la muestra quede justo encima del condensador.

5. Ajustar el enfoque; dar clic en “adjust focus”, movilizar el tornillo macrométrico hasta subir la
platina a su punto máximo, luego hacer clic en “more”, para continuar se debe ir al lado
izquierdo de la pantalla ir dar clic en “swicth views”, esto permitirá ver la imagen de la muestra a
través de los oculares.

6. Ajustar los oculares, hacer clic en “adjust oculars”, los oculares se deben mover hasta que los
dos círculos se vean como uno solo, movilizar lentamente el tornillo macrométrico hacia abajo
hasta observar la muestra, luego ubicar la muestra en el centro del campo óptico (la
circunferencia en donde se observa la muestra).

7. Afinar el enfoque, dar clic en “fine tuning”, mover lentamente el tornillo micrométrico para
mejorar el enfoque de la muestra, ajustar el diafragma.

8. Cambiar de objetivo, hacer clic en “swicth objetives”, cambiar al objetivo de 10X, mover la
platina de manera que el círculo rojo se mantenga en el centro del campo óptico.

Resultado 2

1. Tomar pantallazo de la muestra de papel

periódico en el objetivo de 10X y 40x y ubicarlos en
los siguientes campos ópticos.
Aumento: _______
Descripción:
Letra observada ___________
Posición de imagen la letra __________

Aumento: _______
Descripción:
¿Qué diferencia noto en la muestra al cambiar de
objetivo?

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________________________________________________

Ahora observe la muestra de raíz de cebolla “onion root” y enfoque siguiendo los pasos
anteriores, tomar pantallazos a 10X 40X

Aumento: _______
Descripción:
¿Cómo diferencia una célula de otra?
_________________________________________ _
¿De qué color son las células?

________________________________________________

Aumento: _______
Descripción:
¿Cuál es la forma de las células?
_______________________________________
¿Qué estructuras de las células se observan?
_______________________________________

Ahora observe la muestra de frotis de epitelio bucal “cheek smear” y enfoque siguiendo los
pasos anteriores, tomar pantallazos a 10X 40X

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Descripción:
¿Cómo diferencia una célula de otra?
_________________________________________ _
¿De qué color son las células?

________________________________________________

Aumento: _______
Descripción:
¿Cuál es la forma de las células?
_______________________________________
¿Qué estructuras de las células se observan?
_______________________________________

IV. Autoevaluación.

1. ¿Qué aumentos se pueden conseguir al combinar la lente ocular de 10X con el lente
objetivo de 100X?
a. 100
b. 10
c. 1000
d. 200

2. De las siguientes estructuras ¿cuál sería la de menor tamaño?

a. Mitocondria
b. Espermatozoides
c. Eritrocitos
d. Bacterias

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3. Diferenciar individualmente dos objetos microscópicos muy próximos depende del

poder de:
a. Aumento
b. Resolución
c. Profundidad
d. Definición

V. Bibliografía y Webgrafía.

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