Identificación bioquímica de Escherichia coli mediante pruebas (IMViC).

Producción de Indol (I)

• Inocular un tubo en caldo Triptona e incubarlo a 35°C por 24 ± 2 h.

• Adicionar entre 0.2 y 0.3 mL de reactivo de Kovacs.

• La presencia de una coloración roja en la superficie del tubo se considera una

Prueba positiva.

Producción de ácidos mixtos (Rojo de metilo, RM)

• Inocular un tubo adicional con caldo RM-VP e incubar a 35°C por 48 ± 2 h.

• Adicionar 5 gotas de solución de rojo de metilo.

• Se considera una prueba positiva cuando se desarrolla un color rojo. Un color amarillo es una
prueba negativa.

Producción de metabolitos neutros (Voges-Proskauer VP)

• Inocular un tubo con caldo RM-VP e incubar a 35°C por 48 ± 2 h.

• Adicionar 0.6 mL de solución VP1 y 0.2 mL de solución VP2 y agitar.

• Dejar reposar durante 10 minutos sin agitar el tubo; se considera una prueba positiva cuando se
desarrolla un color rosa en la superficie.

Utilización del citrato (C)

• Inocular un tubo con caldo citrato de Koser o Simmons un inóculo ligero para evitar turbiedad en
el tubo (opcional: puede utilizarse citrato de Simmons)

• Incubar a 35°C por 96 h.

• El desarrollo del cultivo que se observa con la turbiedad del medio, se considera una prueba
positiva.

http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/TecnicBasicas-Colif-tot-fecales-Ecoli-
NMP_6529.pdfhttp://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/TecnicBasicas-Colif-tot-fecales-Ecoli-
NMP_6529.pdf

Indol.

Mediante esta prueba se detecta la liberación de Indol en un cultivo bacteriano. Dicha liberación
se debe a la degradación del aminoácido triptófano mediante el enzima triptofanasa

Rojo de metilo.

El rojo de metilo es un indicador de pH. Actúa entre pH 4,2 y 6,3 variando desde rojo (pH 4,2) a
amarillo (pH 6,3). Mediante esta prueba se comprueba la capacidad de un microorganismo de
producir y mantener estables los productos terminales ácidos de la fermentación de la glucosa por
la vía de la fermentación acido mixta. Se utiliza como parte de la identificación a nivel de especie
de los bacilos entéricos gramnegativos.

Voges-Proskauer.

Permite observar si el microorganismo fermenta la glucosa por la vía butanodiolica. Si es asÌ, se

forma un producto intermedio (acetona) que forma un complejo de color rojizo con el α-naftol. Se
usa en la identificación a nivel de especie de bacilos entéricos gramnegativos, Aeromonas spp., y
Vibrio spp.

https://seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-
procedimientomicrobiologia37.pdf