Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
доктора биологических наук
Москва – 2010
Работа выполнена в лаборатории паразитологии кафедры анатомии и
физиологии животных ФГОУ ВПО «Костромская государственная
сельскохозяйственная академия»
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
В главе представлены данные по видовому разнообразию,
распространению и патогенному влиянию паразитов рыб. На основании
результатов исследований отечественных и зарубежных ученых
проанализированы экологические факторы, способствующие эвтрофикации
водоемов и изменению видовой структуры.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. МАТЕРИАЛЫ, МЕТОДЫ И ОБЪЕМ ИССЛЕДОВАНИЙ
Работа выполнена в лаборатории паразитологии ФГОУ ВПО Костромская
ГСХА, в АО «Костромской рыбозавод», районной ветеринарной лаборатории
Галичского района, станции по борьбе с болезнями животных Чухломского
района, на рыбопромысловых судах костромского участка Горьковского
водохранилища.
В период с сентября 1999 г. по июль 2005 г. проводили исследования рыбы
в русловой части костромского участка Горьковского водохранилища,
Костромском разливе, Галичском и Чухломском озерах.
Измеряли длину рыбы, проводили взвешивание при помощи электрических
весов «ВЛР-10». Возраст рыбы до трех лет устанавливали по количеству
циркулярно-расположенных сегментов на чешуе, взятой по 3-5 от каждого
экземпляра выше боковой линии тела на уровне второго луча спинного плавника.
Возраст рыбы старше трех лет определяли по количеству колец на срезе первого
луча спинного плавника. Перед микроскопическим исследованием при помощи
МБС-2 чешую смачивали водой, а срезы лучей (толщиной 0,5-1 мм) – 10 %
раствором аммиака.
В условиях лаборатории проводили наружный осмотр и исследование при
помощи МБС-2 слизи с поверхности тела, жабр на наличие паразитических
простейших, моногеней, аннелид, ракообразных. Хрусталики глаз, стекловидное
тело и плавники исследовали, используя МБС-2, на наличие метацеркариев
трематод. Личиночные стадии трематод, цестод и нематод в мышцах и
внутренних органах выявляли с использованием компрессориума. Проводили
микроскопическое исследование нативных препаратов, приготовленных из
пораженных жабр, на наличие цист и спор миксоспоридий, моногеней и
ракообразных. Желудочно-кишечный тракт обследовали при помощи МБС-2,
просматривая сначала его серозные покровы, затем после продольного разреза –
слизистую оболочку и содержимое. Изготавливали музейные препараты; по
особенностям морфологии и локализации определяли виды, экстенсивность и
интенсивность инвазии – «ЭИ», «ИИ». Леща, пораженного L. intestinalis с
9
высокой интенсивностью инвазии (3 и более плероцеркоидов), а также
экземпляры-аналоги такого же возраста замораживали для последующего
биохимического исследования.
Биохимические исследования проводили, используя общепринятые
методики. Определение энергетической ценности рыбной продукции проводили
на основании учета содержания белков, жиров, углеводов в 100 г мышечной ткани
рыбы.
Объем исследований: за период с сентября 1999 г. по июль 2005 г.
исследовано 7355 экземпляров рыбы, из них леща – 5683, густеры – 478, плотвы
– 118, синца – 519, чехони – 29, судака – 42, щуки – 301, жереха – 22, окуня – 31,
язя – 39, гибрида золотого карася – 45, линя – 36, верховки – 12.
Проведено: 7355 промеров рыбы; 7355 паразитологических исследований
(2257 – полное гельминтологическое исследование по К.И. Скрябину (1928), 5098
– неполное); определение возраста у 5650 экземпляров рыб, из них по лучам –
1470; 32 траления донным тралом; 178 тралений пелагическим тралом, в том
числе с использованием ЭЛУ-6 (близнецовый способ) – 93; сетепостановок на
Костромском разливе 130, на Галичском озере – 121, Чухломском – 15; лов
плавными сетями на Галичском озере – 68; биохимические исследования – 30
экз.
Выполнены компрессорные исследования промежуточных хозяев
трематод: 176 экз. моллюсков Lymnaea stagnalis, 152 экз. L. ovata, 143 экз.
Planorbis planorbis, собранных в прибрежной зоне Горьковского водохранилища
(вблизи н.п. Козловы горы).
Проведено микроскопическое исследование 246 экз. Cyclops strenuus с
целью обнаружения процеркоидов Ligula intestinalis.
На наличие половозрелых цестод Ligula intestinalis провели неполное
гельминтологическое вскрытие 18 экземпляров сизых чаек (Larus canus).
Методом последовательных промываний исследованы фекалии от 10 собак как
дефинитивных хозяев Diphyllobothrium latum.
Структуру уловов определяли на основании данных, предоставленных
администрациями АО «Костромской рыбозавод» и колхоза «Рыбак» (г. Галич).
Сбор и обработку материала по моногенеям проводили, используя
методики, рекомендованные А.В. Гусевым (1983). Для определения видов
паразитических организмов использовали «Определитель паразитов
пресноводных рыб фауны СССР». – Л.: Наука. 1984. – Т. 1-3.
Математическая обработка результатов исследований (цифрового
материала) выполнена в соответствии с методикой, представленной в пособии по
биологической статистике П.Ф. Рокицкого (1973), с использованием программы
«Microsoft Excel». Уровень достоверности результатов – Р ≤ 0,05.
1 2 3 4
15. Paracoenogonimus ovatus мышцы, R. rutilus, L. idis, Al.
(Katsurada, 1914) плавники alburnus, В. bjoerkna, A.
brama, A. ballerus, Pel.
cultratus
16. Rhipidocotyle campanula жабры E. lucius, Luc. lucioperca, Р.
(Dujardin, 1845) fluviatilis, Aс. cernua, Lota
lota, R. rutilus, L. idis, Al.
alburnus, В. bjoerkna, A.
brama, A. ballerus
17. Ichthyocotylurus pileatus почки, стенка Luc. lucioperca, Р. fluviatilis,
(Rudolphi, 1802) плавательног Aс. cernua, E. lucius, Lota
о пузыря lota, R. rutilus, L. idis, Al.
alburnus, A. brama
18. Ichthyocotylurus platycephalus сердце, E. lucius, R. rutilus, L. idis,
(Creplin, 1825) печень и Al. alburnus, В. bjoerkna, A.
другие brama, A. ballerus, Р.
органы fluviatilis, Aс. cernua
19. Ichthyocotylurus variegatus стенка A. brama, Luc. lucioperca, Р.
(Creplin, 1825) плавательног fluviatilis, Aс. cernua, C.
о пузыря, carassius
почки и
другие
органы
20. Tylodelphys clavata (Nordmann, стекловидное E. lucius, R. rutilus, L. idis,
1832) тело Al. alburnus, В. bjoerkna, A.
brama, A. ballerus, Lota lota,
Luc. lucioperca, Р. fluviatilis,
Aс. cernua
21. Diplostomum spathaceum хрусталик E. lucius, R. rutilus, L. idis,
(Rudolphi, 1819) глаза Al. alburnus, В. bjoerkna, A.
brama, A. ballerus, Lota lota,
Luc. lucioperca, Р. fluviatilis,
Aс. cernua
22. Posthodiplostomum brevicaudatum стекловидное R. rutilus, L. idis, A. brama,
(Nordmann, 1832) тело и E. lucius, Р. fluviatilis, Aс.
пигментный cernua
слой глаза
23. Posthodiplostomum cuticola кожа, R. rutilus, A. brama
(Nordmann, 1832) подкожная
клетчатка
24. Aspidogaster limacoides (Diesing, кишечник R. rutilus, В. bjoerkna, L. idis,
1835) A. brama
25. Caryophyllaeus laticeps (Pallas, кишечник R. rutilus, L. idis, В. bjoerkna,
1781) A. brama, A. ballerus
26. Diphyllobothrium latum (Linnaeus, мышцы и E. lucius, Lota lota, Р.
1758) внутренние fluviatilis, Aс. cernua
органы
16
1 2 3 4
27. Triaenophorus nodulosus (Pallas, кишечник Esox lucius, L. idis, Lota lota,
1781) щуки Luc. lucioperca, Р. fluviatilis,
(окончательн Aс. cernua
ый хозяин),
печень и
полость тела
налима, окуня
и др.
28. Ligula intestinalis (Linnaeus, 1758) полость тела R. rutilus, Al. alburnus, A.
brama, A. ballerus,
Leucaspius delineatus
29. Digramma interrupta (Rudolphi, полость тела A. brama, R. rutilus, В.
1810) bjoerkna
30. Proteocephalus percae (Mueller, кишечник E. lucius, Lota lota, Luc.
1780) lucioperca, Р. fluviatilis
31. Raphidascaris acus (Bloch, 1779) кишечник Esox lucius, R. rutilus, L. idis,
Al. alburnus, В. bjoerkna, A.
brama, A. ballerus, Lota lota,
Luc. lucioperca, Р. fluviatilis,
Aс. cernua
32. Philometra ovata (Zeder, 1803) кишечник R. rutilus, L. idis, A. brama
33. Philometra abdominalis (Skrjabin, жаберная R. rutilus, L. idis, Al.
1917) полость, под alburnus, A. brama
кожей головы
34. Neoechinorhynchus rutili (Mueller, кишечник R. rutilus, A. brama, В.
1780) bjoerkna
35. Acanthocephalus lucii (Mueller, кишечник E. lucius, R. rutilus, L. idis, A.
1776) brama, Lota lota, Luc.
lucioperca, Р. fluviatilis, Aс.
cernua
36. Piscicola geometra (Linnaeus, жабры R. rutilus, A. brama, E. lucius,
1761) Lota lota, Luc. lucioperca, Р.
fluviatilis, Aс. cernua
37. Caspiobdella fadejewi (Selensky, жабры A. brama, В. bjoerkna, R.
1915) rutilus, A. ballerus, L. idis,
Aс. cernua
38. Ergasilus sieboldi (Nordmann, жабры E. lucius, R. rutilus, Al.
1832) alburnus, L. idis, В. bjoerkna,
A. brama, Pel. cultratus, L.
lota, Luc. lucioperca, Р.
fluviatilis, Aс. cernua
39. Paraergasilus rylovi (Markevich, обонятельные A. brama, В. bjoerkna
1932) полости
40. Argulus coregoni (Thorell, 1864) поверхность Luc. lucioperca, Р. fluviatilis,
тела Aс. cernua
41. Tracheliastes maculatus (Kollar, поверхность A. brama
1836) тела
17
Среди Protozoa доминируют слизистые споровики рода Myxobolus (8
видов), паразитирующие в жабрах леща, плотвы, густеры, синца, язя, уклеи.
Из класса Monogenea у карповых и хищных рыб установлено четыре вида:
представители родов Dactylogyrus, Gyrodactylus, Diplozoon и Paradiplozoon.
Зарегистрировано 10 видов класса Trematoda: Rhipidocotyle campanula – на
жабрах различных видов рыб; Phyllodistomum elongatum – в выделительной
системе; три вида из рода Ichthyocotylurus – во внутренних органах;
Paracoenogonimus ovatus – в мышцах и плавниках; Tylodelphys clavata,
Posthodiplostomum brevicaudatum, Diplostomum spathaceum – в тканях глаз;
Posthodiplostomum cuticola – в коже и под кожей карповых.
В кишечнике карповых рыб обнаружен представитель класса
Aspidogastraea Aspidogaster limacoides, облигатным хозяином которого является
двустворчатый моллюск Dreissena polymorpha.
Одними из широко распространенных и наиболее патогенных для рыб
гельминтов являются лентецы Ligula intestinalis и Digramma interrupta. Выявлены
другие представители класса Cestoda: Caryophyllaeus laticeps в кишечнике
карповых рыб; Triaenophorus nodulosus – в кишечнике щуки (дефинитивный
хозяин), печени и полости тела окуня (промежуточный хозяин); Proteocephalus
percae в кишечнике и Diphyllobothrium latum в мышцах и внутренних органах
щуки.
Класс Nematoda представлен тремя видами: два паразитирует в кишечнике
– Raphidascaris acus у щуки, Philometra ovata у карповых; Philometra abdominalis –
в полости тела карповых.
В кишечнике карповых и хищных рыб выявлены гельминты из класса
Acanthocephala: Neoechinorhynchus rutili (плотва, лещ, густера) и Acanthocephalus
lucii (щука, плотва, язь, лещ, налим, судак, окунь, ерш).
Эктопаразиты представлены двумя видами из класса Hirudinea (Piscicola
geometra, Caspiobdella fadejewi) и четырьмя видами Crustacea (Ergasilus sieboldi,
Paraergasilus rylovi, Tracheliastes maculatus, Argulus coregoni).
Из представленных в таблице 1 паразитов рыб прямой цикл развития
имеют представители классов Myxosporidia, Monogenea, Crustacea, Hirudinea.
Остальные виды выявленных паразитов характеризуются
дифференцированным циклом развития. С участием представителей
зоопланктона (ракообразных из отряда Copepoda) развиваются Ligula intestinalis,
Digramma interrupta, Triaenophorus nodulosus, Proteocephalus percae,
Diphyllobothrium latum, Philometra ovata, Philometra abdominalis. Представители
зообентоса являются промежуточными хозяевами Rhipidocotyle campanula,
Phyllodistomum elongatum, Ichthyocotylurus spp., Paracoenogonimus ovatus,
Tylodelphys clavata, Posthodiplostomum brevicaudatum, Diplostomum spathaceum,
Posthodiplostomum cuticola, Aspidogaster limacoides (различные виды моллюсков);
Raphidascaris acus (личинки насекомых и олигохеты); Neoechinorhynchus rutili,
Acanthocephalus lucii (ракушковые рачки, олигохеты, личинки насекомых).
Зараженность представителей ихтиофауны теми или иными видами
паразитов обусловлена экологическими условиями водоемов, а также характером
питания рыб разного возраста.
18
2.2.3. Распространение миксоспоридий в популяциях различных видов
рыб в водоемах северной части Верхневолжского региона
Миксоспоридии рода Myxobolus широко распространены у лещей в
русловой части костромского участка Горьковского водохранилища – 23,6±0,39
%. Наиболее высокие показатели зараженности отмечены на следующих
участках промысла: устье реки Костромы – вверх по Волге 6 км (44,6±4,22 %),
ЛЭП – граница Ярославской области (34,4±6,08 %), Сеземские острова – Селище
(37,4±3,27 %), Плес – Кинешма (30,6±0,97 %), Костромская ГРЭС – устье реки
Кубань (29,1± 2,26 %). Минимальные показатели экстенсивности инвазии на
участке ЛЭП – Чернопенский (7,8±0,82 %).
В Костромском разливе цисты Myxobolus sp. выявили у 17,2±0,58 % лещей,
Галичском озере – 14,8±1,14 %. Густера инвазирована в среднем на 5,8±0,31 %,
ИИ = 7-100: русловая часть костромского участка Горьковского водохранилища –
7,1±0,49 %, Костромской разлив – 3,6±0,31 %. У синца миксоспоридии
паразитируют достаточно редко: в русловой части Горьковского водохранилища
– 5,3±0,85 %, Костромском разливе – 0,5±0,02 %. Myxobolus sp.
зарегистрированы у плотвы (7,5±1,19 %, ИИ = 2-3), Henneguya creplini у судака
(14,8±2,85 %, ИИ = до 45 цист). В Чухломском озере Myxobolus carassii
инвазировано около 10 % золотых карасей при интенсивности 2-5 цист.
Зараженность леща Myxobolus sp. отличается по сезонам. В Горьковском
водохранилище в холодный период (с ноября по март) экстенсивность инвазии
максимальна (50-55 %), с апреля по октябрь – относительно невысокая (18-45 %).
Напротив, интенсивность инвазии с июля по ноябрь (в среднем 31-57 цист)
гораздо выше, чем с января по март (4-9). В летний период преобладают мелкие
цисты.
В Галичском озере максимальная экстенсивность инвазии
миксоспоридиями отмечается в октябре - ноябре – 17-22 %. В августе - сентябре
зараженность леща находится в пределах 10 %. Интенсивность инвазии
невысокая в течение всего года – 1-3 цисты миксоспоридий длиной 1-6 мм.
С возрастом рыбы экстенсивность и интенсивность инвазии
увеличиваются: сеголетки не заражены, годовики – 5,0±1,12 %, двухлетки –
26,7±6,89 %, 3+ – 22,8±0,48 %, 4+ – 39,2±2,85 %, 5+ – 66,7±9,12 %.
Интенсивность инвазии к трем годам составляет в среднем 7-12 цист, в
поколениях 6-7 лет – 45-50.
Взаимосвязь между упитанностью рыбы и интенсивностью инвазии не
установлена, хотя патологические процессы (кровоизлияния, некроз) в жабрах
выражены преимущественно при высокой интенсивности (20-30 цист). У
зараженного Henneguya creplini судака отмечены обширные поражения жабр,
очаги воспаления и дегенерации диаметром 1-1,5 см, площадь интактной ткани
жабр не превышает 1/3-1/4 от общей поверхности, остальные участки
респираторных тканей с наличием воспалительно-дегенеративных изменений
вокруг цист миксоспоридий в дыхании, видимо, участия не принимают.
300
200
100
ВОЗРАСТ
0
4 года 5 лет 6 лет 7 лет
Устье р.Стежеры –
с. Красное-на -Волге граница Ивановской обл.
Myxobolus spp. - 16,9%
Ligula intestinalis - 17,7%
Diphyllobothrium latum - 100%
Tracheliastes maculatus - 29,6%
Красное - вниз по Волге
Myxobolus spp. - 11,6%
Ligula intestinalis - 6,9%
Tracheliastes maculatus - 62,7%
о. Трубинский
Костромской разлив
Myxobolus spp. -35,7%
Diplozoon paradoxum – 27,1%
Diplostomum spp. - 83,3%
Трематоды сем. Strigeidae - 100%
Ligula intestinalis – 5,3%
Diphyllobothrium latum - 11,9%
Piscicola geometra - 50,9%
Ergasilus sieboldi - 48,7%
Tracheliastes maculatus - 7,9%
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Принимая во внимание динамику зараженности дефинитивных и
промежуточных хозяев Ligula intestinalis, требуется осуществлять регулярный
мониторинг – ежегодные посезонные паразитологические исследования.
В соответствии с «Методическими рекомендациями «Диагностика и
профилактика лигулеза рыб» (одобрены секцией «Инвазионные болезни животных»
РАСХН, 2007) при увеличении инвазированности рыбы Ligula intestinalis (6-8 % и
42
более) с целью уменьшения непроизводительного расхода энергии в экосистеме
за счет уменьшения размерно-весовых показателей и смертности, а также для
повышения темпов роста и продуктивности популяции леща рекомендуется
осуществлять профилактический вылов в основных природных очагах. Рыбный
промысел следует проводить, руководствуясь результатами паразитологического
картографирования и квотами санитарного изъятия.
Общий возможный улов при осуществлении оздоровительных
мероприятий должен соответствовать уровню зараженности. Невыполнение
рекомендуемых на основании паразитологических исследований объемов
обусловливает повышение инвазированности промежуточных и дефинитивных
хозяев L. intestinalis. Необходимость увеличения объемов вылова рыбы
определяется путем прогнозирования зараженности Ligula intestinalis.
2. Использование уловов необходимо осуществлять после санитарной
оценки рыбной продукции. Основными критериями являются: упитанность,
питательная ценность, показатели экстенсивности и интенсивности зараженности
Ligula intestinalis, Myxobolus bramae, Diplozoon paradoxum, Diplostomum
spathaceum, Ichthyocotylurus platycephalus, Ichthyocotylurus variegatus,
Paracoenogonimus ovatus, Ergasilus sieboldi, Tracheliastes maculatus.
При определении эпидемического и эпизоотического значения
метацеркариев трематод, паразитирующих в тканях рыб, следует
руководствоваться особенностями морфологии и географического
распространения («Методические рекомендации по изучению распространения и
дифференциации метацеркариев различных видов трематод рыб», одобрены
секцией «Инвазионные болезни животных» РАСХН, 2010).
3. Следует ежегодно по согласованию с Министерством природных
ресурсов и экологии субъектов Федерации Верхневолжского региона, а также
областными администрациями проводить регламентированный отстрел птиц
семейства Laridae в основных природных очагах лигулеза. Это мероприятие
способствует изменению ареала птиц (перелеты на водоемы, не имеющие
рыбопромыслового значения) и снижению инвазированности рыбы Ligula
intestinalis.
4. Учитывая высокий уровень зараженности щук плероцеркоидами
Diphyllobothrium latum (ЭИ = 50-60 %) и потенциальное эпидемическое
неблагополучие Верхневолжского региона по дифиллоботриозу, следует хищную
рыбу (щуку, налима, окуня, ерша) направлять в торговые предприятия для
свободной реализации только после обезвреживания замораживанием при -12 оС в
течение 72 часов. С целью снижения уровня зараженности людей и домашних
плотоядных Diphyllobothrium latum Центрам Госсанэпиднадзора и Управлениям
ветеринарии субъектов Федерации Верхневолжского региона необходимо
обеспечить контроль соблюдения санитарно-эпидемиологических и ветеринарно-
санитарных правил («Методические рекомендации по диагностике и
профилактике дифиллоботриоза плотоядных животных и человека в Волжском
бассейне», одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» РАСХН, 2010).
5. 6. Регулярный мониторинг зараженности рыб паразитическими
организмами - биоиндикаторами позволяет выявить изменение трофического
статуса водоема. Биоиндикаторное значение для определения уровня
43
эвтрофикации водоемов имеют моногенеи Diplozoon sp. и Dactylogyrus sp.,
трематоды Diplostomum sp., Posthodiplostomum sp., Tylodelphys sp.,
Ichthyocotylurus sp., цестоды Ligula intestinalis.