Santiago de Cali, Tecnólogo en Control Ambiental Ficha 1903829 Junio de 2020

Aplicar microorganismos en procesos de descontaminación ambiental

Biotecnología ambiental
Artículo de proyecto de biotecnología

_________________________________________________
Biorremediación de suelos contaminados con
Furadan por la bacteria Pseudomona sp.
50432 y el uso de la metodología de
Bioventilación, buscando alternativas para
sustituir el uso de este microorganismo en
particular.
Bioremediation of soils contaminated with
Furadan by the bacterium Pseudomona sp
50432 and the use of the Bioventilation
method, looking for alternatives to replace the
use of this particular microorganism.
Betancourth, Hernando1
Buritica, Andrés Julián1
Gaviria, Brian1
Londoño, Juan Carlos1
Moreno, Natalia Jesenia1
1
Aprendices SENA
Tecnólogo en Control Ambiental Ficha 1903829

Instructor
Rios, Juan Felipe

Servicio Nacional de Aprendizaje, Centro de diseño Tecnológico Industrial, Programa de

Tecnología en Control Ambiental.

Junio de 2020

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Santiago de Cali, Tecnólogo en Control Ambiental Ficha 1903829 Junio de 2020

RESUMEN

Como proyecto de biorremediación en nuestro Tecnólogo en Control Ambiental y para la

competencia de aplicar microorganismos en procesos de descontaminación ambiental,
elegimos el Furadan, este compuesto es un carbofurano, de la familia de los N-
metilcarbamatos, es un plaguicida ampliamente utilizado en el sector agrícola para el control
de plagas, este compuesto y producto químico es altamente tóxico, la ineficacia en su
aplicación y la sobreutilización causan gran deterioro en los suelos agrícolas, así como
graves impactos negativos en los ecosistemas y en la salud humana. Esto crea un
xenobiótico que es una sustancia química que no se produce naturalmente en los
ecosistemas y que no debería estar presente en el medio ambiente. En este artículo
científico investigamos sobre la biorremediación, la cual aparece como una alternativa para
biodegradar este plaguicida tóxico en compuestos más simples y poco contaminantes,
usando el potencial metabólico de los microorganismos. Por lo antes mencionado, el
objetivo de este proyecto de biotecnología fue descubrir los microorganismos, como lo son
las bacterias que están presentes en la biorremediación de los carbofuranos (Furadan)
usados en suelos cultivables por medio de una revisión sistemática de la literatura científica
de fuentes de información confiable y los aportes del señor instructor Juan Felipe Rios,
biólogo del SENA con la guía de aprendizaje de biotecnología y el enlace proporcionado de
la Universidad de Minnesota sobre la base de datos de las vías de degradación metabólica
de los diferentes contaminantes del medio ambiente a nivel mundial y los procesos físico-
químicos alternativos como por ejemplo la bioventilación y sus subprocesos consiguientes
como lo son la bioaumentación y la bioestimulación, cuando no se cuenta con una bacteria
en particular debido a circunstancias que están fuera de nuestro control. La bacteria que
identificamos para la biorremediación del Furadan en suelos agrícolas contaminados fue la
Pseudomona sp. 50432. Concluimos que el éxito de esta biorremediación depende en su
totalidad de la capacidad competitiva de la bacteria Pseudomona sp. 50432, de la
biodisponibilidad de los microorganismos nativos del suelo contaminado a biorremediar y la
concentración del plaguicida Furadan, del pH, la temperatura, la humedad, el tiempo
requerido para la bioaumentación y la bioestimulación y el tipo de suelo, también el
suficiente oxigeno disponible, los nutrientes y la concentración del inóculo, ósea, el
microorganismo que se transfiere al suelo contaminado por medio de la inoculación.

PALABRAS CLAVE: Furadan, suelo, xenobióticos, biorremediación, Pseudomona sp.

50432, bioventilación.

ABSTRACT

As a bioremediation project in our Environmental Control Technologist and for the

competence of applying microorganisms in environmental decontamination processes, we
chose Furadan, this compound is a carbofuran, from the family of N-methylcarbamates, it is
a pesticide widely used in the sector agricultural for pest control, this compound and
chemical is highly toxic, ineffective in its application and overuse cause great deterioration
in agricultural soils, as well as serious negative impacts on ecosystems and human health.
This creates a xenobiotic that is a chemical that does not occur naturally in ecosystems and
should not be present in the environment. In this scientific article, we investigate
bioremediation, which appears as an alternative to biodegrade this toxic pesticide into

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simpler and less polluting compounds, using the metabolic potential of microorganisms. For
the aforementioned, the objective of this biotechnology project was to discover
microorganisms, such as bacteria that are present in the bioremediation of carbofurans
(Furadan) used in cultivable soils by means of a systematic review of the scientific literature
on sources of reliable information and the contributions of the instructor Juan Felipe Rios,
biologist from SENA with the biotechnology learning guide and the link provided by the
University of Minnesota on the basis of data on the pathways of metabolic degradation of
the different environmental pollutants worldwide and alternative physical-chemical
processes such as bioventilation and its consequent threads such as bioaugmentation and
biostimulation, when there is no particular bacterium due to circumstances that are beyond
our control. The bacterium that we identified for the bioremediation of Furadan in
contaminated agricultural soils was Pseudomona sp. 50432. We conclude that the success
of this bioremediation depends entirely on the competitive capacity of the bacterium
Pseudomona sp. 50432, on the bioavailability of the native microorganisms in the
contaminated soil to bioremedy and the concentration of the pesticide Furadan, on the pH,
temperature, humidity, the time required for bioaugmentation and biostimulation and the
type of soil, also sufficient available oxygen , the nutrients and the concentration of the
inoculum, bone, the microorganism that is transferred to the contaminated soil through
inoculation.

KEY WORDS: Furadan, soil, xenobiotics, bioremediation, Pseudomona sp. 50432,

bioventilation.

INTRODUCCIÒN

Los problemas ambientales no se pueden Trataremos la biotecnología ambiental

analizar ni entender si no se tiene en
cuenta una perspectiva global, ya que
surgen como consecuencia de múltiples
factores que interactúan entre sí. Nuestro
actual modelo de vida supone un gasto de
recursos naturales y energéticos cada vez
más creciente e insostenible, así mismo el
continuo uso de contaminantes que
producen compuestos llamados
xenobióticos que impactan negativamente
el medio ambiente como por ejemplo
plaguicidas, insecticidas, nematicidas,
fungicidas y herbicidas de todo tipo. Las
formas y técnicas agrícolas de
producción y consumo masivos de
alimentos que lo hacen posible están
generando de manera progresiva la
destrucción del planeta, la contaminación
es uno de los problemas ambientales que
más impactan y afectan a nuestro mundo.
(Frers, 2010)1.
que está relacionada con la gestión del
medio ambiente, con el aprovechamiento
de los recursos naturales y la mejora en
los procesos de biodegradación para
compuestos contaminantes.
Para eliminar estos xenobióticos
presentes en el medio ambiente se
realizan acciones con el objetivo de
prevenir, mitigar o eliminar estos
compuestos tóxicos de los sistemas
biológicos.
En este artículo científico describiremos el
problema en detalle, identificaremos las
causas y las consecuencias del problema,
hablaremos sobre los antecedentes
biotecnológicos del problema de la
contaminación con este plaguicida,
repasaremos la metodología de
biorremediación ambiental y
subrayaremos los objetivos y la
justificación del proyecto.

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Primero identificamos un problema de acabando con la biodiversidad. Otros

contaminación del suelo, con el uso, a nombres comerciales del Furadan son:
veces ineficaz y sobreutilizado del Bay 70143, Carbodan, Carbosip,
Furadan. Chinofur, Curaterr, D 1221, ENT 27164,
El Furadan es un pesticida agrícola Furacarb, Kenafuran, Pillarfuron,
común que pertenece a la familia del N- Rampart, Nex y Yaltox. La
metilcarbamatos. Se utiliza para controlar sobreutilización del Furadan puede
los insectos que viven en el suelo y se causar un gran deterioro en el suelo
alimentan de las hojas. Tiene una alta donde se hace su aplicación,
toxicidad en los mamíferos debido a la desafortunadamente los beneficios
inhibición de la acetilcolinesterasa, es un aportados por estos compuestos han
plaguicida neurotóxico. Se ha informado ido acompañado de graves daños,
que el valor oral de LD50 del carbofurano algunos de ellos tan graves que ahora
en ratones y otros animales varía de 2 a 9 representan una amenaza para la
mg / kg de peso corporal. supervivencia de importantes
Es comercializado por FMC Corporation y ecosistemas a largo plazo.
Curater, entre otras empresas. Está Existen tecnologías utilizadas para
prohibido en varios países como Canadá, recuperar suelos contaminados entre los
U.S.A., la Unión Europea, Brasil, Ecuador, cuales se encuentra la biorremediación
Argentina, Kenia y otros países de África. como una alternativa, esta aprovecha el
Es usado en gran variedad de cultivos potencial metabólico de los
como por ejemplo la caña de azúcar, microorganismos para transformar
maíz, sorgo, café, cereales, arroz, frutas y contaminantes orgánicos en compuestos
hortalizas y otros. más simples.
Este producto se comercializa desde los
años 60`s en U.S.A. y en los años 80’s se 1
www.ecoportal.net
expandió su uso a otros países.
Se vende en forma granular y liquida Figura 1. Estructura química del
siendo la forma granular prohibida Furadan (Carbofurano).
totalmente en varios países por ser
peligroso para las aves y la cadena trófica,
la versión granular tiene en la etiqueta la
palabra “PELIGRO” y la versión liquida la
palabra “PRECAUCIÓN”. Dado que es
soluble en agua y móvil en los ambientes
del suelo, es muy probable que contamine
los lagos y el agua subterránea, por lo que
una exposición peligrosa es beber agua
contaminada. Debido a esto, es
importante encontrar formas de
biodegradarlo.
El Furadan es usado para el control de
plagas de insectos en abundante
variedad de cultivos. Son sustancias
https://www.google.com/imgres?imgurl=https
químicas altamente toxicas, liposolubles y %3A%2F%2Fc8.alamy.com%2Fcompes%2Fd65
volátiles, características que facilitan su 32y%2Fel-carbofurano-molecula
absorción y causan graves daños para la
salud humana y el medio ambiente Formula C12H15NO3

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Santiago de Cali, Tecnólogo en Control Ambiental
MATERIALES Y MÈTODOS
En este proyecto de biotecnología, bajo
una revisión sistemática, se fundamentó
entre otras un tipo de bacteria que realiza
la degradación del Furadan en suelos
contaminados, identificando la especie de
bacteria que participa en la
biorremediación del plaguicida en el
suelo. De acuerdo a la información
recopilada en la ruta degradadora del
compuesto, extraída del enlace de la
Universidad de Minnesota suministrada
por el instructor líder Felipe Rios con la
base de datos de las vías de degradación
metabólica, se analizó una bacteria
usada para la degradación del
Furadan, la pseudomona sp. 50432 es
capaz de hacer la biorremediación del
Furadan (carbofurano) a la posición
4-hidroxicarbofurano y nos muestra como
transforma el xenobiótico mediante un
mecanismo que involucra procesos
oxidativos e hidrolíticos y biodegrada
el compuesto contaminante usando la
enzima hidroxilasa, la cual es una enzima
oxidorreductasa y a partir de aquí degrada
el 4-hidroxicarbofurano en dióxido de
carbono (CO2), usando una enzima que
aún no ha sido identificada incluso por la
biotecnología.
En la revisión sistemática descubrimos
que se usa también la técnica de la
bioventilación y sus procesos
subsecuentes, que son la bioestimulación
y la bioaumentación, donde se adiciona
oxígeno y nutrientes al suelo con la
modalidad in situ mediante bombeo a
presión en la zona vadosa (no saturada) y
bajo las condiciones idóneas de pH,
temperatura, humedad, poblaciones
microbianas nativas aptas y tiempo
requerido para la bioestimulación y la
bioaumentación, se toma muestras de
suelo y se analiza e identifica los
microorganismos que comienzan un
proceso de biodegradación del
compuesto contaminante presente, en
este caso de estudio, el Furadan y
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buscando microorganismos alternativos
que usen la enzima hidroxilasa u otra
enzima, incluso si esta enzima no puede
ser identificada, en el caso que la bacteria
pseudomona sp. 50432 no esté disponible
para ser usada en el momento de la
biorremediación in situ, incluso dado que
se administra un organismo que puede
iniciar la vía, pero otros organismos
también pueden llevar a cabo pasos
posteriores. (Junfeng Gao et al, 2008)2.
_________________________________
2
http://eawagbbd.ethz.ch/cbf/cbfmap.ht
ETOLOGÍA DEL MICROORGANISMO
PSEUDOMONA SP. 50432
La Pseudomona sp. 50432, es una
bacteria genéticamente alterada en
laboratorio, pertenece a un género de
bacilos rectos o ligeramente curvados,
Gram negativos, oxidasa positivos,
aeróbicos estrictos, vemos la presencia
de plásmidos y no forman esporas.
Taxonomía
 Dominio: Bacteria
 Filo: Proteobacteria
 Clase: Gammaproteobacteria
 Orden: Pseudomonadales
 Familia: Pseudomonadaceae
 Género: Pseudomonas
RESULTADOS Y DISCUSIÒN
A los efectos negativos del Furadan como
por ejemplo los impactos que genera en
los ecosistemas biológicos, las aguas
superficiales y subterráneas, el suelo y la
biodiversidad, también debemos tener en
cuenta los efectos negativos en la salud
humana. Sabemos que están expuestos a
intoxicación personas que laboran en la
fabricación y venta, agricultores que
manipulan y aplican Furadan y
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consumidores de vegetales tratados con

este producto.
El Furadan (carbofurano) actúa sobre el
sistema enzimático colinesterasa, dando
lugar a alteraciones en la transmisión de
los impulsos nerviosos en casos de
ingestión y exposición prolongada.
En el caso de Colombia, los plaguicidas
Oxidorreductasa
inhibidores de colinesterasa (carbamatos)
son el grupo de insecticidas más
utilizados en el control de plagas. En el
2005 se notificaron en Colombia 4.234
casos de intoxicación causados por
plaguicidas, la gran mayoría de los cuales
ocurrió por los inhibidores de
colinesterasa (Vásquez 2010).
Para el primer objetivo, se buscó la
información que diera cuenta de las
características químicas, el mecanismo
de acción y la vida media del Furadan.
Esta información se encontró en fuentes
de información confiable, como lo es el
enlace con la Universidad de Minnesota,
donde está la base de datos con las vías
de degradación metabólica para
diferentes sustancias químicas
contaminantes y sus respectivos
microorganismos biorremediadores y se
complementó con otra literatura científica. Oxidorreductasa
Posteriormente, con base en los
resultados de las búsquedas
bibliográficas y el microorganismo
identificado en estas, se describió el
proceso de biorremediación del Furadan
con la bacteria Pseudomona sp. 50432
(ver figuras 2, 3 y 4).

Figura 2. Mapa de ruta de

biodegradación del Furadan por la
Pseudomona sp. 50432 usando la
enzima hidroxilasa (oxidorreductasa).

Figura 3. Biodegradación del Furadan a

la posición 4-hidroxicarbofurano.

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Santiago de Cali, Tecnólogo en Control Ambiental
Figura 4. Biodegradación del Furadan
de la posición 4-hidroxicarbofurano a
CO2.
X elaborado a base de carbamato y es
CO2
http://eawag-bbd.ethz.ch/cbf/cbf_map.html
Nota: una "X" junto a una flecha de
reacción significa que la enzima que
cataliza la reacción aún no se ha
identificada por la biotecnología.
También tuvimos en cuenta los procesos
alternativos cuando no se cuenta con esta
bacteria en particular, como lo es la
bioventilación en suelos contaminados y
sus subprocesos consiguientes, la
bioestimulación y la bioaumentación (ver
figura 5).
Figura 5. Biorremediacion de suelos
con el proceso de bioventilación.
Ficha 1903829 Junio de 2020
CONCLUSIONES
En la agricultura a nivel mundial, los
plaguicidas más contaminantes como por
ejemplo los organoclorados (de lenta
degradabilidad y gran bioacumulación)
dieron paso al uso de los carbofuranos
que son altamente tóxicos, de poca
estabilidad química y nula acumulación en
tejidos (Yufra 2013).
El carbofurano más usado es el Furadan,
conocido como un insecticida sistémico y
de contacto, y es catalogado como uno de
los controladores de plagas más tóxicos
que tenemos en la actualidad (RCN radio,
2018).
El Furadan por ser muy usado en el sector
agrícola también ha sido de los pesticidas
más investigados en cuanto a su
degradación por microorganismos.
Encontramos que la biotecnología está
limitada en la biorremediación del
Furadan por unos parámetros y factores
físico-químicos que afectan a los
microorganismos y la disponibilidad de
carbofuranos (Furadan) como tal.
Estos parámetros y factores físico-
químicos son por ejemplo, el pH, la
temperatura, la humedad, la
concentración del plaguicida, el tipo de
suelo, la presencia o ausencia de
suplementos y nutrientes y la
concentración del inoculo.
La mejor temperatura para degradar el
Furadan se encuentra entre 25 °C y 37 °C,
y la óptima es de 30 °C. El tamaño del
inóculo es un factor determinante, debido
a que los microorganismos exógenos
cuando se añaden al suelo, corren el
riesgo de quedar fuera de competencia
por las comunidades microbianas
autóctonas, en especial por protozoos. La
aplicación del inóculo en cantidades
óptimas no solo aumenta las posibilidades
de éxito de la biorremediación, sino que
también disminuye el costo del proceso
(Hong et al. 2007). Las investigaciones
revelaron que, en el caso de
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Santiago de Cali, Tecnólogo en Control Ambiental
suplementación con nutrientes, se
presenta una degradación más rápida en
comparación con tratamientos sin adición.
Esto podría deberse al hecho de que los
carbofuranos sujetos a la acción
microbiana no generan un crecimiento
sustancial de las poblaciones
responsables. Por tanto, es probable que
los microorganismos estén consumiendo
el sustrato fácilmente biodegradable
(nutrientes adicionados), mientras
degradan el Furadan (Betancur 2013), lo
que explica la rápida degradación con
adición de nutrientes. En cuanto al pH, las
bacterias tienen la capacidad de degradar
los carbofuranos en un rango de 5 a 8, con
un pH óptimo de 7. El Furadan es
degradado en mayor porcentaje en pH
ácido.
Así mismo, cuando usamos la
bioventilacion, también debemos tener en
cuenta estos parámetros y los factores
físico-químicos que puedan alterar los
resultados.
Se encontró que la Pseudomona sp.
50432 es una de las bacterias más
propicias para biodegradar el Furadan,
más aun sabiendo que es una bacteria
modificada genéticamente en laboratorio.
Además se analizó que estos
microorganismos hacen una mejor
biodegradación en consorcios que
individualmente.
La capacidad degradadora de un
consorcio microbiano es equiparable con
la sumatoria de la capacidad degradadora
de los microorganismos que lo
conforman. Un consorcio puede
desempeñar funciones complejas que
poblaciones individuales no podrían.
Se concluye según la revisión sistemática
que en laboratorio solo se pueden aislar
del 1% al 10% de todos los
microorganismos que crecen en el suelo,
razón por la cual algunos
microorganismos que interfieren en los
procesos de degradación en ambientes
naturales no se pueden obtener a escala
de laboratorio. Por lo tanto, quedan sin
Ficha 1903829 Junio de 2020
identificar algunas de las bacterias,
hongos y consorcios microbianos que
pudieron haber estado implicados en la
restauración de los ambientes
contaminados cuando se utiliza la
bioventilación y los subprocesos
siguientes, que son la bioaumentación y la
bioestimulación.
Como ya lo dijimos el éxito o el fracaso de
la biorremediación depende de varios
factores, tales como la capacidad
competitiva de los microorganismos, la
biodisponibilidad, la concentración del
compuesto a biodegradar, en este caso
de estudio es el Furadan, la humedad, el
pH, la temperatura del suelo, el tipo de
suelo a biorremediar, la presencia o
ausencia de suplementos nutricionales y
la concentración del inóculo.
La biotecnología con la biodegradación
por microorganismos de los plaguicidas
carbofuranos sigue, una ruta principal que
es la biodegradación por medio de la
enzima hidroxilasa que es una
oxidorreductasa.
Como ya lo dijimos los consorcios
microbianos biorremedian mejor a los
suelos contaminados con Furadan que
una población individual, puesto que un
consorcio actúa con la suma de sus
partes. Las relaciones fisiológicas y
biodegradadoras entre los
microorganismos permiten que estos
coexistan y desarrollen funciones
complejas que garantizan la
biodegradación de sustratos difíciles de
asimilar en mayores porcentajes para
poblaciones individuales.
Se recomienda investigar con mayor
profundidad la ruta de degradación del
Furadan y los procesos enzimáticos
llevados a cabo durante la ruta
degradadora con la Pseudomona sp.
50432 y por otros microorganismos al
utilizar la bioventilación.
Dentro de los consorcios microbianos se
recomienda investigar más a fondo cuáles
microorganismos llevan a cabo los
procesos oxidativos e hidróliticos en la
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biorremediación del Furadan y cuales la Gina María Hernández Ruiz et al. 2016.
biodegradación completa hasta Biorremediación de organofosforados por
transformarlo en CO2. hongos y bacterias en suelos agrícolas:
revisión sistemática. Recuperado de
http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=
AGRADECIMIENTOS S012287062017000100009&script=sciab
stract&tlng=pt. Consultada junio 3 de
Al SENA CDTI Pondaje, al instructor Juan 2020.
Felipe Rios, instructor líder de la ficha
1903829 del programa Tecnólogo en Cristian Frers. 2010. El tema ambiental es
Control Ambiental por sus aportes al un problema serio… si no se lo encauza.
desarrollo de este proyecto de https://www.ecoportal.net/temasespeciale
biotecnología. A todos los instructores de s/contaminacion/eltemaambientalesunpro
la ficha, Geovanny Adolfo Lugo, Lola blemaseriosinoseloencauza/. Consultada
Viviana Montilla, Julián Naranjo y demás mayo 25 de 2020.
instructores del SENA, porque de cada
uno aprendimos habilidades diferentes de RCN Radio. 2018. El ICA advierte que el
acuerdo a su instrucción y competencia. A compuesto Carbofurano debe ser vendido
todo el personal administrativo y logístico bajo supervisión de expertos. Agosto/
del SENA. 2014.
https://www.rcnradio.com/colombia/el-
ica-advierte-que-compuesto-carbofuran-
REFERENCIAS debe-ser-vendido-bajo-supervision-de-
expertos. Consultada junio 1 de 2020.
Junfeng Gao et al. 2008. Mapa de la ruta
del carbofurano.
http://eawag-
bbd.ethz.ch/cbf/cbf_map.html.
Consultada mayo 26 de 2020.

ANEXOS

Anexo 1

En estos enlaces de internet pueden encontrar la hoja de seguridad del Furadan en algunas
de sus diferentes versiones donde encontraremos su nivel de toxicidad y las medidas de
bioseguridad para su correcto manejo:

http://innovacionagricola.com/wp-content/uploads/2016/10/Furadan-350-L-FICHA-
TECNICA.pdf

http://www.farmagro.com.pe/media_farmagro/uploads/hoja_seguridad/furadan_5g.p
df

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Anexo 2

Imágenes diversas sobre el Furadan y aspectos relacionados con este compuesto y su

biorremediacion usando la biotecnología:

Figura 6 y 7. Furadan en su versión liquida y granulada.

http://www.farmagro.com.pe/p/furadan-4f-pf/ https://spanish.alibaba.com/product-detail/nematode-
pesticide

Figura 8 y 9. Aplicación de plaguicidas y problemática de contaminación.

imgurl=http%3A%2F%2Fwww.capitanplaneta.com%2Fwp
https://www.salyroca.es/media/salyroca/images/2018/03/22//

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Figura 10. Pseudomonas sp. 50432

https://www.google.com/imgres?imgurl=https%3A%2F%2Fupload.wikimedia.org%

Figura 11 y 12. Bioventilación de suelos contaminados, bioestimulación y

bioaumentación.

https://es.slideshare.net/MariaAlejandraMejiaM/biorremediacin
google.com/imgres?imgurl=https%3A%2F%2F

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