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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

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Contenido
1. TEMA........................................................................................................................................2
2. OBJETIVOS..............................................................................................................................2
a. Objetivo general.....................................................................................................................2
b. Objetivos específicos..............................................................................................................2
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3. MARCO TEÓRICO...................................................................................................................2
Cromatografía................................................................................................................................2
¿En qué consiste la cromatografía?................................................................................................3
¿Por qué se separan los componentes?...........................................................................................3
¿Para qué se utiliza la Cromatografía?...........................................................................................4
Fases de la cromatografía...............................................................................................................4
Tipos de Cromatografía..................................................................................................................5
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Técnicas de separación...................................................................................................................6
Mecanismos de Separación:...........................................................................................................6
Cromatografía en placa fina...........................................................................................................7
Revelado de las placas....................................................................................................................7
Cromatografía en papel..................................................................................................................8
Cromatografía en columna.............................................................................................................8
Cromatografía de gases..................................................................................................................8
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Aplicaciones de la Cromatologia....................................................................................................9
4. PROCEDIMIENTO...................................................................................................................9
5. RESULTADOS..........................................................................................................................9
6. CONCLUSIONES.....................................................................................................................9
7. DISCUCIÓN..............................................................................................................................9
8. BIBLIOGRAFIA........................................................................................................................9
9. ANEXOS.................................................................................................................................10
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1. TEMA
Cromatografía
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2. OBJETIVOS

a. Objetivo general

b. Objetivos específicos

3. MARCO TEÓRICO

Cromatografía
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La cromatografía es un método de separación en el que los componentes a desglosar se


distribuyen entre dos fases, una de las cuales constituye un lecho estacionario de gran
desarrollo superficial y la otra es un fluido que pasa a través o a lo largo del lecho
estacionario. En resumen, es un proceso físico que permite separar diferentes
componentes de una disolución. Existen diferentes tipos de cromatografías y se
clasifican de diferentes maneras. Una de estas es la cromatografía de
adsorción, esta depende de la interacción de las sustancias que se separan con la fase
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estacionaria. La de columna, papel y capa fina depende del sistema que se utilice como
soporte. [ CITATION Gar06 \l 12298 ]

La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que no se excluyen mutuamente:

Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que puedan ser
usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
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Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso,


las cantidades de material empleadas son pequeñas.

¿En qué consiste la cromatografía?

La cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen como finalidad la


separación de mezclas basándose en la diferente capacidad de interacción de cada
componente en otra sustancia. De forma general, consiste en pasar una fase móvil (una
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muestra constituida por una mezcla que contiene el compuesto deseado en el


disolvente) a través de una fase estacionaria fija sólida. La fase estacionaria retrasa el
paso de los componentes de la muestra, de forma que los componentes la atraviesan a
diferentes velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno de los componentes de la
mezcla presenta un tiempo característico de paso por el sistema, denominado tiempo de
retención. Cuando el tiempo de retención del compuesto deseado difiere del de los otros
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componentes de la mezcla, éste se puede separar mediante la separación


cromatográfica.[ CITATION Uni17 \l 12298 ]

La separación de los diferentes componentes de una mezcla que se encuentran en un


líquido o gas es el resultado de las diferentes interacciones de los solutos a medida que
se desplazan alrededor o sobre una sustancia líquida o sólida (la fase estacionaria). Las
diversas técnicas para la separación de mezclas complejas se fundamentan en la
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diversidad de afinidades de las substancias por un medio móvil gas o líquido y un


medio absorbente estacionario (papel, gelatina, alúmina o sílice) a través del cual
circulan.

¿Por qué se separan los componentes?

Dejamos que se mueva la mezcla por un soporte y los componentes se separan por que
se mueven a diferentes velocidades, debido a las diferentes fuerzas de adsorción que
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ejerce el soporte sobre cada elemento, así de fácil. Si no nos hemos equivocado es
adsorción, que puede confundirse con absorción pero no es lo mismo. Vamos a
explicarlo. La absorción es cuando una sustancia se introduce en la estructura de otra.
Ejemplo: una esponja absorbe agua, entonces si cortamos la esponja en pedazos vamos
a encontrar agua en todas partes de la estructura de la esponja.
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La adsorción es un fenómeno superficial, la sustancia adsorbida no se introduce en el


volumen del cuerpo, sino solo se adhiere a la superficie.

La cromatografía es una separación física de los componentes de una mezcla basado en


la adsorción selectiva de los componentes de la mezcla al moverse por un soporte.

Imaginemos el rotulador anterior, si pintamos sobre una tira de papel de filtro o secante
con el rotulador un poco más arriba de la base de la tira de papel (el papel será el
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soporte) y ahora lo metemos en un recipiente con alcohol en la base del recipiente, el


alcohol moja la base de la tira de papel, asciende por las tiras de papel y al llegar a la
tinta del rotulador que pintamos, disuelve la tinta y sigue subiendo hasta provocar la
separación de los pigmentos. Esto se produce por las distintas velocidades a las que se
mueven los pigmentos por el papel cuando se mojan con el alcohol y se mueven. Abajo
hay un video con ejemplo ya realizados para que los puedas ver. [ CITATION Cie18 \l
12298 ]
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¿Para qué se utiliza la Cromatografía?

La cromatografía se utiliza para lograr la separación de los componentes de una mezcla


como para medir la proporción de cada elemento en la mezcla.

Fases de la cromatografía
Las cromatografías se hacen en dos fases. Una estática y otra móvil.
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En la fase estática o estacionaria, la mezcla se coloca sobre un soporte fijo, por ejemplo
papel. En esta fase tenemos ya la mezcla sobre un soporte, en nuestro ejemplo un papel.

En la fase móvil se hace mover otra sustancia sobre la mezcla que ya está sobre el
soporte de la fase estática, por ejemplo un líquido que se mueve por el papel con la
mezcla. En la fase móvil empezará el proceso de separación de los componentes de la
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mezcla al moverse a distintas velocidades por el líquido los distintos componentes de la


mezcla sobre el papel.[ CITATION Mig16 \l 12298 ]
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Tipos de Cromatografía

Todas se basan en el mismo fenómeno: permitir que las sustancias que forman una
mezcla entren en contacto con dos fases (un líquido y un gas, un sólido y un líquido,
etc.). Una de las fases es estática (no se mueve) y tenderá a retener las sustancias en
mayor o menor grado; la otra, fase móvil, tenderá a arrastrarlas. Cada sustancia química
tiene distinta tendencia a ser retenida y a ser arrastrada.[ CITATION Áng11 \l 12298 ]
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Dependiendo de la naturaleza de la fase estática y de la fase móvil se pueden distinguir


distintos tipos de cromatografía

a. Cromatografía sólido-líquido. La fase estática o estacionaria es un sólido y la


móvil un líquido.
b. Cromatografía líquido-líquido. La fase estática o estacionaria es un líquido
anclado a un soporte sólido.
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c. Cromatografía líquido-gas. La fase estática o estacionaria es un líquido no


volátil impregnado en un sólido y la fase móvil es un gas.
d. Cromatografía sólido-gas. La fase estacionaria es un sólido y la móvil un gas.

Según el tipo de interacción que se establece entre los componentes de la mezcla y la


fase móvil y estacionaria podemos distinguir entre.
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a. Cromatografía de adsorción. La fase estacionaria es un sólido polar capaz de


adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo polar.
b. Cromatografía de partición. La separación se basa en las diferencias de
solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y móvil,
que son ambas líquidas.
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c. Cromatografía de intercambio iónico. La fase estacionaria es un sólido que


lleva anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar
por aquellos iones presentes en la fase móvil.
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Técnicas de separación

La cromatografía y métodos de separación clásicos se basan en la separación de


componentes de una muestra. Estas técnicas no son de caracterización propiamente
dicha; las propiedades de los materiales dependen de los componentes y de la proporción
existente entre ellos.
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Estas técnicas no dan información de la naturaleza de los componentes, para eso se


necesitan otros métodos de análisis.

Mecanismos de Separación:

a. Separación por adsorción (cromatografía de adsorción):


Diferente afinidad de los componentes de la muestra sobre la superficie de un sólido
activo (componentes con polaridad baja o media).
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b. Separación por reparto (cromatografía de reparto):


Diferente solubilidad en fases estacionaria y móvil (Componentes con polaridad media
o alta).

c. Separación por tamaño molecular (Cromatografía de permeación de gel, de


tamiz molecular o de exclusión por tamaños):
Parámetros de columna
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 Intervalo de trabajo: intervalo de M que pueden ser separados


 Límite de exclusión: M mínimo a partir del cual las macromoléculas no
experimentan retención.
d. Separación por Intercambio iónico:
La separación se basa principalmente en la diferente afinidad para el intercambio de
iones de los componentes de la muestra.
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Cromatografía en placa fina


La cromatografía en capa fina es una técnica analítica rápida y sencilla, muy utilizada
en un laboratorio de Química Orgánica. Entre otras cosas permite:

 Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar así, por


ejemplo, la efectividad de una etapa de purificación.
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 Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrían ser idénticas. Si,
por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
 Realizar el seguimiento de una reacción. Es posible estudiar cómo desaparecen los
reactivos y cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cuándo
la reacción ha acabado. La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de
una lámina de plástico o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina
capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la lámina se coloca en una cubeta
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cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclados (fase móvil). A medida
que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente, se
produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre el
disolvente y el adsorbente.
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Revelado de las placas

La mayor parte de las placas de cromatografía llevan un indicador fluorescente que


permite la visualización de los compuestos activos a la luz ultravioleta (254 nm). El
indicador absorbe la luz UV y emite luz visible. La presencia de un compuesto activo
en el UV evita que el indicador absorba la luz en la zona en la que se encuentra el
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producto, y el resultado es la visualización de una mancha en la placa que indica la


presencia de un compuesto.

En el caso de compuestos que no absorben luz UV, la visualización (o revelado) del


cronograma requiere utilizar un agente revelador. Este tiene que reaccionar con los
productos adsorbidos proporcionando compuestos coloreados.
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Cromatografía en papel

La cromatografía en papel pertenece a la categoría "Cromatografía de líquidos". La


fase estacionaria se compone de una cinta de papel introducida verticalmente en un
recipiente de cristal y la fase móvil de un líquido. El movimiento de la fase móvil se
produce debido a la fuerza capilar. Un campo de uso de la cromatografía en papel es
el análisis de mezclas.[ CITATION PCE16 \l 12298 ]
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Cromatografía en columna

La cromatografía en columna pertenece a la categoría "Cromatografía de líquidos".


En la cromatografía en columna la fase estacionaria se compone normalmente de un
gel de sílice o alúmina pulverizado que se introduce en un tubo de vidrio y este se
rellena con un disolvente (fase móvil). Con este procedimiento se dirige la prueba
junto con la fase móvil a través del tubo de vidrio, lo que produce que se separe la
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mezcla y los componentes vayan saliendo sucesivamente. Campos de aplicaciones


de la cromatografía en columna son por ejemplo la limpieza de preparados.
[ CITATION PCE16 \l 12298 ]

Cromatografía de gases

En la cromatografía de gases se usan dos diferentes procedimientos.


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1. La cromatografía de gas líquido


2. La cromatografía de gas sólido

El procedimiento más usado es la cromatografía de gas líquido. En este caso se


introduce el material portador (por ejemplo, aceite de silicona) en un tubo espiral
con un diámetro de 0,1 a 5 mm y una longitud de hasta 5 metros. El gas a analizar
fluye junto al al gas portador (nitrógeno, helio, argón) a través de la espiral. En un
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extremo de la espiral un detector de conductividad térmica mide las oscilaciones de


temperatura. Según las oscilaciones de temperatura es posible determinar los
componentes de la mezcla.[ CITATION PCE16 \l 12298 ]
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Aplicaciones de la Cromatologia

 Medioambientales: análisis de sustancias contaminantes en el aire, pesticidas,


análisis de la calidad del agua, análisis de isótopos radioactivos y en general
cualquier tipo de control ambiental...
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 Alimentación: controles de sanidad sobre alimentos para detectar sustancias


tóxicas, análisis de componentes en fragancias o saborizantes, análisis de
triglicéridos, identificación de aminoácidos en muestras de proteínas
 Salud: análisis de sangre y orina, fármacos, análisis de sustancias tóxicas, análisis
forense, determinación de alcohol en sangre...
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 Química orgánica: gas natural, gasóleos, glicoles, aminas, cetonas, identificación


de isómeros cis-trans (los isómeros trans suelen moverse con mayor rapidez que los
cis) [ CITATION Anó15 \l 12298 ]
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4. PROCEDIMIENTO

5. RESULTADOS

6. CONCLUSIONES

7. DISCUCIÓN
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8. BIBLIOGRAFIA

Anónimo. (2015). Ejemplos de Cromatografía. Obtenido de Quimicas:


https://www.quimicas.net/2015/07/ejemplos-de-cromatografia.html

Castillo, M. (2016). Cromatografía. Obtenido de studocu.com/en/document/universidad-catolica-


de-salta/quimica/essays/informe-de-cromatografia/3112064/view
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Ciencias Naturales . (2018). Cromatografia. Obtenido de


https://www.areaciencias.com/quimica/cromatografia.html

Garcia, M. (2006). Laboratorio de Bioquímica. Obtenido de Eduforma

Méndez, Á. (2011). Cromatografía. Obtenido de


https://quimica.laguia2000.com/general/cromatografia

PCE. (2016). Cromatografía. Obtenido de https://www.pce-iberica.es/instrumentos-de-


medida/instrumentos-laboratorios/cromatografia.htm
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Universidad de Alicante. (2017). CROMATOGRAFÍA: ESCRITURA EN COLOR. Obtenido de


https://ciencias.ua.es/es/extension-universitaria/documentos/extension-
universitaria/ven-a-hacer-practicas/2017/quimica-analitica-cromatografia-escritura-en-
color.pdf
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9. ANEXOS

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