Комбинация пробиотика
и метабиотика в комплексной
терапии дисбиозов
Радзинский В.Е., ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», Москва
Ордиянц И.М.,
Абдурахманова М.Б.
Ключевые слова:
влагалищный биотоп, лактобактерии, неспецифический вульвовагинит
Акушерство и гинекология: новости, мнения, обучение. 2018. Т. 6, № 3. С. 127–133.
doi: 10.24411/2303-9698-2018-13015.
Статья поступила в редакцию: 15.05.2018. Принята в печать: 20.07.2018.
Normal microbial flora includes all microorganisms that can survive, co-exist and develop in a particular
physical medium, and do not cause diseases. Complexity and liveliness of species and quantitative composition
of microcenosis provide flexible adaptation of microorganisms to environmental changes. Moreover, vaginal
colonization resistance maintain stability of normal microcenosis, prevent vaginal colonization by truly
pathogenic microorganisms and overgrowth of opportunistic pathogenic microflora.
The aim of this study was to assess recovery rate of the normal vaginal flora (lactobacillus titer) using
probiotic Provag in capsules for ingestion and metabiotic Provag Gel for external application for restoration
of normobiocenosis (as stage II) after treatment of nonspecific vulvovaginitis (NVV).
Combination therapy with probiotic and metabiotic, which may regulate microbial interactions in "bowel–
vagina" ecological niche after stage II of treatment increased the Lactobacillus spp. concentration to
5,5×107 He/ml in all 40 patients (relative Lg (N/TBM) was 80–100%). Only 10% had less than -2 Lg (<1%)
fraction of facultative anaerobic microorganisms and 30% had less than -2 Lg (<1%) fraction of obligate
anaerobic microorganism. Total frequency of facultative obligate anaerobes outflow was minimal [from
-2 Lg to -1 Lg (1–10%)]. Pathogenic microorganisms were not identified in any patient. Inclusion of Provag
Oral Probiotic in capsules and Provag Gel metabiotic for outward application in package of measures after
NVV therapy drive up lactoflora population and lower the degree of colonization up to complete elimination
of opportunistic pathogenic bacterium such as staphylococcus, Candida yeasts, streptococcus, enterobacteria,
Klebsiella.
Keywords:
vaginal biotope, lactobacillus, nonspecific vulvovaginitis
П
опытки воздействовать на кишечный микробиом ности. В работе Е.А. Корниенко и О.К. Нетребенко (2016)
и через него на здоровье человека имеют долгую было показано, что минимально достаточной дозой, спо-
историю, связанную с именем великого русского собной осуществлять значимое действие, может считаться
ученого, лауреата Нобелевской премии И.И. Мечникова, доза не менее 107 КОЕ в сутки [1]. Следует учитывать раз-
который в 1907 г. в книге «Этюды оптимизма» описал рушительное действие желудочного сока на незащищенную
благоприятную роль молочнокислых бактерий в сохра- микрофлору. Доказано, что лишь небольшое число штаммов
нении здоровья человека. С 1930-х гг. стали использо- лакто- и бифидобактерий обладает кислотоустойчивостью,
вать препараты, содержащие лакто- и бифидобактерии. большинство микробов погибает в желудке. Поэтому пред-
Сам термин «пробиотики», буквально означающий «за почтительны пробиотики, заключенные в кислотоустой-
жизнь», возник позднее – в 1960-е гг. – как альтернатива чивую капсулу. По данным A. Bezkorovainy (2001), лишь
термину «антибиотики», означающему «против жизни». 20–40% селективных штаммов выживает в желудке [4].
D.M. Lilly и R.H. Stillwell ввели понятие «пробиотики», Из 108 микробных тел лактобактерий, принятых в кислото-
а в 1974 г. R.B. Parker дал им определение: «Пробиотики – устойчивой капсуле, в кишечнике обнаруживается 107; после
это живые микроорганизмы, которые при применении приема такого же количества в йогурте – 104 микробных тел;
в адекватных количествах вызывают улучшение здоровья после приема той же дозы в виде порошка натощак микробы
организма-хозяина». в кишечнике не обнаруживаются вовсе.
В этом определении заложены основные требования, В тонкой кишке пробиотики подвергаются воздействию
предъявляемые к препаратам и продуктам, которые пре- желчных кислот и панкреатических ферментов. Вслед-
тендуют на то, чтобы быть отнесенными к пробиотикам: ствие этого многие микробы, например, L. fermentum KLD,
сохранность живых микробов, их достаточное количество L. Lactis MG1363 почти полностью погибают. Е.А. Корниенко
и доказанная эффективность. Однако ряд исследований по- и О.К. Нетребенко это объясняют усилением проницае-
следних лет продемонстрировали эффективность не только мости клеточной мембраны, которая развивается в ответ
живых микробов [2], но и определенных компонентов бак- на воздействие желчных кислот [1]. В то же время L. rhamno-
терий, в частности их ДНК [8], поэтому в дальнейшем опре- sus GG, L. reuteri, S. boulardii оказались резистентными к воз-
деление пробиотиков может быть пересмотрено. Тем не действию желудочного сока, а также желчи [1]. Выживание
менее, в совместных рекомендациях FAO/WHO утверждается, большинства бактерий зависит от того, каким образом они
что в качестве пробиотиков не применяют неживые и ге- принимаются: в защитной капсуле, в виде йогурта, с мо-
нетически модифицированные микроорганизмы, при этом локом или без всякой защиты [3]. Эти данные ставят под
микробы должны сохранять жизнеспособность при про- сомнение эффективность незащищенных и не обладающих
хождении по пищеварительному тракту вплоть до толстой кислотоустойчивостью пробиотиков, а также обосновы-
кишки [4]. вают целесообразность приема незащищенных препаратов
Второй вопрос, который возникает при назначении во время еды.
пробиотика, – оптимальная доза. Она может существенно Цель исследования – оценить степень восстановления
варьировать и устанавливается по клинической эффектив- нормальной флоры влагалища (титра лактобактерий) при
применении пробиотика Проваг в 2 формах для восстанов- базе данных, позиции по которым шифровали традици-
ления нормобиоценоза (как II этапа) после лечения неспе- онным способом (0, 1, 2, 3…). Количественные признаки
цифического вульвовагинита (НВВ). заносили в базу данных без изменений. За достоверную
принимали разность средних при р<0,05 (Т>2). При про-
Материал и методы ведении корреляционного анализа связь оценивалась как
сильная при абсолютном значении коэффициента корре-
55 пациенток с НВВ, которые после завершения I этапа ляции r>0,7, как имеющая среднюю силу при r=0,69–0,3
антибактериальной терапии, на II этапе лечения с целью и как слабая – при r<0,29.
восстановления нормальной флоры влагалища получали
препарат Проваг (капсулы и гель) или не получали про- Результаты
биотик и метабиотик (контрольная группа).
Главным критерием оценки эффективности лечения Средний возраст пациенток с НВВ составил 28,4±
пробиотиком Проваг (капсулы) и метабиотиком Проваг 0,5 года. Продолжительность заболевания колебалась от 6 мес
(гель) являются результаты восстановления лактобактерий до 2 лет. Самой часто встречаемой жалобой были выделения
на II этапе после коррекции дисбиоза. Особенность насто- с запахом – 48 (87,3%). 33 (60%) пациентки жаловались
ящего исследования – рандомизированное исследование на зуд и жжение и 44 (80%) – на дискомфорт. По количе-
2 форм препарата слепым методом. ству чаще встречались обильные выделения [26 (47,3%)
Клинический мониторинг пациенток осуществлялся пациенток], нежели умеренные [23 (41,8%)] и скудные
через 20 дней от начала наблюдения. Все лабораторные ис- [6 (10,9%)]; по характеру – творожистые [40 (72,7%)] и сли-
следования проводили перед началом введения пробиотика зистые [15 (27,3%)].
и метабиотика Проваг и после завершения наблюдений. I этап лечения – коррекция НВВ антибактериальными
Таким образом, первое исследование служило базовым средствами. При динамическом контроле отмечено из-
значением, а результат второго исследования характери- менение клинической картины и субъективных ощущений
зовал клиническую эффективность применявшегося пре- (изменение характера белей, уменьшение и исчезновение
парата. раздражения, зуда, жжения). Через 24 ч после начала ле-
Критерии включения: репродуктивный возраст (18– чения улучшение в виде исчезновения боли, зуда и жжения
40 лет); подтвержденный дисбиоз влагалища после завер- отмечали 15 (27,3%) пациенток, через 48 ч – 23 (41,8%),
шения терапии; желание и возможность участвовать в ис- через 72 ч – 17 (30,9%). Таким образом, в течение первых
следовании. 3 сут у большинства пациенток отмечено клиническое
Критерии исключения: период лактации; женщины, улучшение. Конечная оценка эффективности лечения про-
страдающие острыми и хроническими (в стадии обострения) ведена на 6-е сутки от его начала – ни одна пациентка не
заболеваниями малого таза, требующие назначения си- предъявляла жалоб на зуд и жжение. Творожистые выде-
стемной антибиотикотерапии; больные с инфекциями, пере- ления после терапии приобрели характер слизистых у всех
даваемыми половым путем, – сифилисом, гонореей, трихо- пролеченных.
мониазом, хламидиозом, уреаплазмозом и микоплазмозом По критериям Амселя до лечения показатель pН составил
[диагностика на основании полимеразной цепной реакции 5–5,5 у 10 (18,2%) пациенток; pН 6–6,5 – у 34 (61,8%);
(ПЦР)]; генитальным герпесом в стадии обострения; инди- pН 7 и выше – у 11 (20%) пациенток.
видуальная непереносимость компонентов препарата. Концентрация секреторного компонента IgA (sIgA)
Эффективность терапии оценивали по следующим па- в цервикальной слизи у женщин с НВВ по сравнению
раметрам: динамика общего состояния и самочувствия па- с референсными значениями у здоровых женщин досто-
циенток, расширенная кольпоскопия, рН-метрия, оценка верно снижалась (0,32±0,02 и 0,56±0,05 г/л соответственно,
биоценоза влагалища путем определения основных групп р<0,05).
условно-патогенных микроорганизмов методом количе- Результаты развернутого исследования микрофлоры
ственной ПЦР в реальном времени с помощью набора урогенитального тракта методом ПЦР в реальном времени,
реагентов Фемофлор, который включал смесь для ПЦР- позволяющим определить количество ДНК искомого микро-
амплификации, специфичную для всех бактерий [общая организма в образце, представлены следующим образом.
бактериальная масса (ОБМ)], смесь, специфичную для лак- При изучении ОБМ установлено, что у всех обследованных
тобактерий (Lactobacillus spp.), и смеси, специфичные для пациенток выявлено нормальное значение. Нормофлора при
условно-патогенных микроорганизмов. доле лактобактерий от -0,7 до -0,1 Lg (20–80%) у 17 (30,9%)
Для создания базы данных и математической обработки пациенток подтвердила умеренный, а у 38 (69,1%) ниже
статистического материала в качестве основного програм- -0,7 Lg (менее 20%) – выраженный дисбиоз. Суммарная
много обеспечения выбран пакет модулей для статисти- частота выделений облигатно-анаэробных микроорга-
ческой обработки данных Statistica® for Windows, Release низмов от -2 Lg до -1 Lg (1–10%) и от 10 до 40% выявлена
8.0 компании StatSoft® Inc., США (2009). При сравнении у каждой третьей, а более 40% – у каждой четвертой. До-
переменных с нормальным распределением использовали минирующими морфотипами облигатно-анаэробных микро-
критерии Стьюдента (для 2 независимых групп) и ANOVA организмов были Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia +
(для нескольких независимых групп). Каждому параметру Porphyromonas spp. у 23 (41,8%); Enterobacterium spp. была
выкопировки отводилась одна переменная в созданной представлена у 11 (20%) пациенток, Streptococcus spp. –
у 7 (12,7%) и Staphylococcus spp. – у 6 (10,9%). Микоплазмы Через 20 дней при изучении аналогичных показателей
диагностированы у 33 (60%) пациенток, Candida spp. – в группах пациенток, получавших и не получавших Проваг,
23 (42,8%). Патогенные микроорганизмы не определены выявлено следующее: бели диагностированы у 1 (5%),
ни у одной пациентки. 0% и 3 (20%) пациенток соответственно; pH >4,5 у 3 (15%),
II этап лечения – восстановление нормальной флоры 0% и 8 (53,3%) пациенток соответственно; ключевые
влагалища. Все обследованные женщины с НВВ в зависи- клетки – у 1 (5%), 0%, 2 (13,3%) пациенток соответственно.
мости от лечения на II этапе были распределены на 3 группы: Таким образом, 3 критерия Амселя диагностированы у паци-
1-я группа – 20 пациенток, которые получали пробиотик енток, не получавших на II этапе препарат Проваг, в то время
Проваг по 1 капсуле в сутки per os в течение 20 дней; как наилучшими эти показатели были в группе с комбини-
2-я группа – 20 пациенток, которые получали про- рованным лечением пробиотиком Проваг в капсулах для
биотик Проваг по 1 капсуле в сутки per os в течение приема внутрь и метабиотиком Проваг гель.
20 дней и метабиотик Проваг гель на область наруж- Результаты развернутого исследования микрофлоры
ных гениталий в течение 20 дней; урогенитального тракта методом ПЦР в реальном времени
3-я группа – 15 пациенток, которые не получали пре- представлены в геном-эквивалентах (ГЭ), где количество ГЭ
парат Проваг (группа сравнения). пропорционально количеству клеток микроорганизма. Нор-
Через 20 дней от начала II этапа все пролеченные пре- мофлора представлена в табл. 1.
паратом Проваг пациентки отмечали исчезновение жалоб В 1-й группе доля лактобактерий выше -0,1 Lg
и указывали на значительное улучшение самочувствия. (>80%) подтвердила восстановление нормобиоценоза
Ни у одной не отмечалось непереносимости препарата либо у 16 (80%) пациенток и от -0,7 до -0,1 Lg (20–80%) –
побочных явлений в виде беспокойства, метеоризма, рвоты, у 4 (20%), в то время как у всех пациенток 2-й группы
кишечных колик, ухудшения стула, появления аллергических доля лактобактерий была выше -0,1 Lg (>80%).
высыпаний на коже. В 3-й группе у 12 (80%) пациенток выявлен умеренный
Результаты восстановления микроэкологии гениталий дисбиоз, а у 3 (20%) – выраженный дисбиоз (доля лакто-
оценивали по критериям Амселя, показателям Фемофлор 16, бактерий ниже -0,1 Lg, <20%). Таким образом, после II
а также sIgA. этапа лечения медиана концентраций Lactobacillus spp.
При изучении критериев Амселя во всех группах паци- увеличилась до 5,5×107 ГЭ/мл у всех 40 пациенток [отно-
енток выявлено: бели диагностированы у 3 (15%) пациенток сительный Lg (N/ОБМ) составил 80–100%], получавших
в 1-й группе, у 2 (10%) – во 2-й группе и у 3 (20%) – в 3-й Проваг в капсулах или комбинацию Провага в капсулах
группе; pH >4,5 у 10 (50%), 7 (35%) и 9 (60%) пациенток и в форме геля.
соответственно, а ключевые клетки – у 1 (5%), 1 (5%) и 2 Частота встречаемости факультативно-анаэробных ми-
(13,3%) пациенток соответственно. кроорганизмов представлена в табл. 2.
Таблица 1. Нормофлора
Группа n Нормоценоз: Умеренный дисбиоз: Выраженный дисбиоз:
доля лактобактерий выше -0,1 Lg доля лактобактерий от -0,7 до -0,1 доля лактобактерий ниже -0,7 Lg
(более 80%) Lg (20–80%) (менее 20%)
1-я 20 16 (80%) 4 (20%)* –
2-я 20 20 (100%) – –
3-я 15 – 12 (80%) 3 (20%)**
Примечание. Здесь и в табл. 2, 3: * – р<0,05 – достоверно значимые различия в 1-й группе по сравнению с 3-й;
** – р<0,05 – достоверно значимые различия во 2-й группе по сравнению с 3-й.
В 1-й группе доля факультативно-анаэробных микроор- микроорганизмов были Enterobacterium spp. Микоплазмы
ганизмов менее -2 Lg (<1%) выявлена у 29 пациенток, менее диагностированы у 2 (10%). Патогенные микроорганизмы не
-2 Lg до -1 Lg (1–10%) – у 17, т.е. 2:1. При сравнении ана- определены ни у одной пациентки.
логичных показателей с 3-й группой доля микроорганизмов При определении sIgA содержание его в динамике
менее -2 Lg (<1%) выявлена у 12, а доля микроорганизмов возрастало в 2 раза и более, т.е. показатели местного им-
менее -2 Lg до -1 Lg (1%-10%) – у 24, т.е. 1:2. Наилучшие мунитета претерпевали изменения в динамике лечения
показатели получены во 2-й группе, в которой только у женщин, получавших препарат Проваг, особенно при ком-
у 2 (10%) пациенток выявлена доля микроорганизмов менее бинированной терапии: 1-я группа – 0,67±0,05, 2-я группа –
-2 Lg (<1%). 0,71±0,02, 3-я группа – 0,32±0,01 г/л.
Частота облигатно-анаэробных микроорганизмов пред-
ставлена в табл. 3. В 1-й группе доля микроорганизмов Заключение
менее -2 Lg (<1%) выявлена у 18 пациенток, а доля микро-
организмов менее -2 Lg до -1 Lg (1–10%) – у 9. При срав- Терапия пробиотиками, способными регулировать мик-
нении аналогичных показателей с 3-й группой доля микро- робные взаимоотношения в эконише «кишечник–влага-
организмов менее -2 Lg (<1%) и менее -2 Lg до -1 Lg (1–10%) лище», наиболее целесообразна для восстановления нор-
выявлена у всех 15 пациенток. Наилучшие показатели полу- мальной флоры гениталий при дисбиозах, так как известен
чены во 2-й группе, в которой только у 6 (30%) пациенток антагонизм лактофлоры с различной условно-патогенной
выявлена доля микроорганизмов менее -2 Lg (<1%). микрофлорой.
Количество грибов ниже порога чувствительности Включение пробиотика Проваг в капсулах и особенно
метода (103 ГЭ/образец) выявлено у 2 (10%) пациенток комбинации пробиотика Проваг для приема внутрь и мета-
1-й группы, что в 2,5 раза реже, чем в 3-й группе и ни у одной биотика Проваг для наружного применения в форме геля
пациентки 2-й группы. в комплекс мероприятий после терапии неспецифических
Суммарная частота выделений факультативно-об- вагинитов способствует увеличению популяции лакто-
лигатно-анаэробных микроорганизмов от -2 Lg до -1 Lg флоры, уменьшению степени колонизации вплоть до полной
(1–10%) была минимальной у пациенток, получавших Проваг элиминации условно-патогенных бактерий, таких как стафи-
на II этапе лечения, особенно комбинацию пробиотика лококки, грибы рода Candida, стрептококки, представители
Проваг в капсулах для приема внутрь и метабиотика Проваг рода энтеробактерий, клебсиелл. Отчетливо выраженная
гель. Доминирующими морфотипами облигатно-анаэробных клиническая эффективность, удобное дозирование и ис-
пользование, а также отсутствие побочных эффектов свиде- шает вероятность развития инфекционно-воспалительных
тельствуют о том, что Проваг пробиотик и метабиотик могут заболеваний. Причина данного парадокса заключается
стать эффективными препаратами для восстановления на- в том, что назначаемые антибактериальные препараты усу-
рушенной микроэкологии кишечника и гениталий после ле- губляют нарушения биоценоза влагалища. Поэтому про-
чения дисбиозов. филактика инфекционно-воспалительных заболеваний
Инфекционно-воспалительные заболевания, несо- должна состоять не в отказе от антибактериальных пре-
мненно, являются фактором риска нарушений репродук- паратов, а в восстановлении эубиоза влагалища после за-
тивного здоровья. Тем не менее, назначение одной лишь вершения курса коррекции НВВ. Дальнейшие исследо-
антисептической терапии не только не приводит к снижению вания будут способствовать обоснованию новых методов
частоты дисбиотических нарушений, но и, наоборот, повы- лечения [5].
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Радзинский Виктор Евсеевич – заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент РАН, доктор медицинских наук, про-
фессор, заведующий кафедрой акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Медицинского института ФГАОУ ВО «Россий-
ский университет дружбы народов», Москва
Е-mail: radzinsky@mail.ru
Ордиянц Ирина Михайловна – доктор медицинских наук, профессор кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинато-
логии Медицинского института ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», Москва
E-mail: ordiyantc@mail.ru
Абдурахманова Мадина Бабамурадовна – ординатор кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Медицин-
ского института ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», Москва
E-mail: madinajan_94@mail.ru
ЛИТЕРАТУРА
1. Корниенко Е.А., Нетребенко О.К. Пробиотики: механизмы дей- 5. Ewald D.R., Sumner S.C.J. Human microbiota, blood group antigens,
ствия и показания в соответствии с международными рекомендациями and disease // Wiley Interdiscip. Rev. Syst. Biol. Med. 2018. Vol. 10, N 3.
в педиатрии // Педиатрия. 2016. Т. 95, № 1. С. 108–121. Article ID e1413. doi: 10.1002/wsbm.1413.
2. Радзинский В.Е., Ордиянц И.М., Зыков Е.В., Буянова Н.В. Пер- 6. FAO/WHO. Working Group on Drafting Guidelines for the Evaluation
спективы применения комбинации пребиотика и молочной кислоты для of Probiotics in Food. Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food.
коррекции влагалищного биотопа // Акуш. и гин. 2017. № 4. С. 132– 2002. URL: ftp://ftp.fao.org/es/esn/food/ wgreport2.pdf.
136. 7. Lilly D.M., Stillwell R.H. Probiotics: growth-promoting factors
3. Радзинский В.Е., Ордиянц И.М., Побединская О.С. Профилак- produced by microorganisms // Science. 1965. Vol. 147. P. 747–748.
тика дисбиоза вагинального биотопа после рассечения промежности 8. Madsen K., Jijon H., Jeung H. et al. DNA from probiotic bacteria
в родах // Рос. вестн. акуш.-гин. 2015. Т. 15, № 6. С. 100–103. exerts anti-inflammatory action on epithelial cells by inhibition of NF-kB //
4. Bezkorovainy A. Probiotics: determinants of survival and Gastroenterology. 2002. Vol. 122. P. A-64.
growth in the gut // Am. J. Clin. Nutr. 2001. Vol. 73, supрl. 2. P. 399s– 9. Parker R.B. Probiotics, the other half of the antibiotic story //
405s. Anim. Nutr. Health. 1974. Vol. 29. P. 4–8.
REFERENCES
1. Kornienko E.A., Netrebenko O.K. Probiotics: mechanisms of action 5. Ewald D.R., Sumner S.C.J. Human microbiota, blood group antigens,
and indications in accordance with international recommendations and disease. Wiley Interdiscip Rev Syst Biol Med. 2018; 10 (3): e1413.
in pediatrics. Pediatriya [Pediatrics]. 2016; 95 (1): 108–21. (in Russian) doi: 10.1002/wsbm.1413.
2. Radzinsky V.E., Ordiyants I.M., Zykov E.V., Buyanova N.V. Prospects 6. FAO/WHO. Working Group on Drafting Guidelines for the Evaluation
for using a combination of a prebiotic and lactic acid to correct a vaginal of Probiotics in Food. Guidelines for the Evaluation of Probiotics in Food.
biotope. Akusherstvo i ginekologiya [Obstetrics and Gynecology]. 2017; 2002. URL: ftp://ftp.fao.org/es/esn/food/ wgreport2.pdf.
(4): 132–6. (in Russian) 7. Lilly D.M., Stillwell R.H. Probiotics: growth-promoting factors
3. Radzinsky V.E., Ordiyants I.M., Pobedinskaya O.S. Prevention produced by microorganisms. Science. 1965; 147: 747–8.
of dysbiosis of vaginal biotope after perineal incision in labor. Rossiyskiy 8. Madsen K., Jijon H., Jeung H., et al. DNA from probiotic bacteria
vestnik akushera-ginecologa [Russian Bulletin of Obstetritian- exerts anti-inflammatory action on epithelial cells by inhibition of NF-kB.
Gynecologist]. 2015; 15 (6): 100–3. (in Russian) Gastroenterology. 2002; 122: A-64.
4. Bezkorovainy A. Probiotics: determinants of survival and growth 9. Parker R.B. Probiotics, the other half of the antibiotic story. Anim
in the gut. Am J Clin Nutr. 2001; 73 (2): 399s–405s. Nutr Health. 1974; 29: 4–8.